perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id HUBUNGAN ANTARA

perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
HUBUNGAN ANTARA HASIL SEROLOGI IgG ANTRAKS
DENGAN MANIFESTASI KLINIS YANG TIMBUL PADA
KEJADIAN LUAR BIASA ANTRAKS DI BOYOLALI
SKRIPSI
Untuk Memenuhi Persyaratan
Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran
MEDIKA PUTRI PERWITA SARI
G.0009132
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
Surakarta
2012
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
HALAMAN PERSETUJUAN VALIDASI
Skripsi dengan judul: Hubungan antara Hasil Serologi IgG Antraks
dengan Manifestasi Klinis yang Timbul pada Kejadian Luar Biasa
Antraks di Boyolali.
Medika Putri Perwita Sari, NIM: G.0009132, Tahun: 2012
Telah disetujui untuk dipertahankan di hadapan Tim Ujian Skripsi Fakultas
Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta
Pada Hari ............, Tanggal ................... 2012
Pembimbing Utama
Penguji Utama
Dhani Redhono H., dr., SpPD-FINASIM.
Dr. Sugiarto, dr., SpPD-FINASIM
NIP. 19750827 200604 1 002
NIP. 19620522 198901 1 001
Pembimbing Pendamping
Penguji Pendamping
Paramasari Dirgahayu, dr., Ph.D.
NIP. 19660421 199702 2 001
Ruben Dharmawan, dr., Ir., Sp.ParK., Ph.D.
NIP. 19511120 198601 1 001
Tim Skripsi
Anang Giri Moelyo, dr., Sp.A., M.Kes.
NIP. 19730410 200501 1 001
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
PERNYATAAN
Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah
diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan
sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah
ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam
naskah dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta,
Desember 2012
Medika Putri Perwita Sari
NIM. G0009132
iii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
PRAKATA
Segala puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yesus Kristus atas
segala kasih dan hikmat-Nya dalam menyelesaikan skripsi dengan judul
“Hubungan antara Hasil Serologi IgG Antraks dengan Manifestasi Klinis yang
Timbul pada Kejadian Luar Biasa Antraks di Boyolali.”
Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat kelulusan tingkat sarjana di
Fakultas Kedo kteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. Penulis menyadari
bahwa skripsi ini tidak lepas dari kerjasama dan bantuan dari berbagai pihak.
Untuk itu, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., Sp.PD-KR-FINASIM, selaku Dekan
Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.
2. Muthmainah, dr., M.Kes, selaku Ketua Tim Skripsi Fakultas Kedokteran
Universitas Sebelas Maret Surakarta.
3. Dhani Redhono H., dr., Sp.PD-FINASIM, sebagai pembimbing utama penulis
yang telah berkenan meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan, saran,
dan motivasi kepada penulis.
4. Paramasari Dirgahayu, dr., Ph.D, yang telah sangat membantu penulis dan
juga selalu bersedia meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan bagi
penulis dalam menyelesaikan skripsi.
5. Dr. Sugiarto, dr., Sp.PD-FINASIM, selaku penguji utama yang telah
berkenan menguji serta memberikan saran dan masukan dalam penulisan
skripsi ini.
6. Ruben Dharmawan, dr., Ir., Sp.ParK., Ph.D, selaku anggota penguji yang
telah memberikan saran dan nasihat dalam perbaikan penulisan skripsi ini.
7. Papa, Mama, Eyang, Victoria, Oktaviana serta seluruh keluarga besar penulis
yang turut memberikan doa, memfasilitasi dan memotivasi saat penulisan
skripsi ini.
8. Dewi, Ardelia, Caesaria, Prisca, Dympna, Irene, Vasa, David dan temanteman asisten Laboratorium Biomedik FK UNS yang telah memberikan
bantuan dan motivasi dalam penulisan skripsi ini.
9. Bu Wiwid selaku Staf Laboratorium Biomedik FK UNS.
10. Bu Sri Enny Narbietty, S.H., M.H. dan Pak Sunardi selaku tim Skripsi,
Perpustakaan FK UNS yang banyak membantu dalam penyelesaian skripsi
dan sebagai salah satu tempat mencari referensi.
11. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu-persatu, yang turut membantu
penyelesaian skripsi ini.
Penulis menyadari m asih banyak kekurangan dalam penelitian dan
penyusunan skripsi ini. Kritik dan saran yang membangun sangat penulis
harapkan demi perbaikan selanjutnya. Akhir kata, penulis berharap skripsi ini
dapat bermanfaat bagi seluruh pembaca.
Surakarta, 2 Juli 2012
Medika Putri P.S
vi
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR ISI
PRAKATA…………….................................................................................................. vi
DAFTAR ISI ...................................................................................................................vii
DAFTAR TABEL ............................................................................................................. x
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................................... xi
DAFTAR LAMPIRAN................................................................................................... xii
BAB I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah.................................................................................. 1
B. Perumusan Masalah ......................................................................................... 4
C. Tujuan Penelitian ........................................................................ ................ 4
D. Manfaat Penelitian ...................................................................... ................ 5
BAB II. LANDASAN TEORI
A. Tinjauan Pustaka ......................................................................................... 6
1. Antraks ....................................................................................................... 6
a. Morfologi dan Siklus Hidup B. anthracis .......................................... 6
b. Epidemiologi Penyakit Antraks ........................................................ 11
c. Patogenesis Penyakit Antraks ........................................................... 13
d. Manifestasi Klinis Penyakit Antraks................................................. 17
vii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
1). Antraks kutaneus ......................................................................... 18
2). Antraks Gastrointestinal............................................................... 19
3). Antraks Inhalasi............................................................................ 20
2. Respon Imun terhadap Bacillus anthracis ............................................. 21
a. Imunitas Non Spesifik ....................................................................... 23
b. Respon Imun Adaptif ........................................................................ 25
3. Pemeriksaan Serologi ELISA ................................................................. 28
B. Kerangka Pemikiran .................................................................................. 31
C. Hipotesis ..................................................................................................... 32
BAB III. METODE PENELITIAN
A. Rancangan Penelitian ................................................................................33
B. Lokasi Penelitian ...................................................................................... 33
C. Subjek Penelitian ....................................................................................... 33
D. Besar Sampel .............................................................................. ............... 34
E. Identifikasi Variabel Penelitian .................................................................. 34
F. Definisi Operasional Variabel Penelitian.................................................... 35
G. Sumber Data .................................................................................................. 38
H. Instrumental Penelitian ............................................................................... 38
I. Jalannya Penelitian......................................................................... ............. 40
viii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
J. Teknik Analisis Data Statistik ....................................................................... 40
BAB IV. HASIL PENELITIAN
A. Karakteristik Lokasi....................................................................................... 41
B. Karakteristik Subyek Penelitian .................................................................... 42
C. Hasil Penelitian .......................................................................................... 44
BAB V. PEMBAHASAN ......................................................................................... 50
BAB VI. SIMPULAN DAN SARAN
A. Simpulan ......................................................................................... .......... 54
B. Saran .......................................................................................................... 54
DAFTAR PUSTAKA................................................................................................. 55
LAMPIRAN .............................................................................................................. 62
ix
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1.
Jenis kelamin
Tabel 4.2.
Usia
Tabel 4.3.
Pendidikan
Tabel 4.4.
Pekerjaan
Tabel 4.5.
Hasil serologi IgG antraks
Tabel 4.6.
Hasil serologi IgG antraks dihubungkan dengan riwayat kontak
Tabel 4.7.
Manifestasi klinis di kulit berupa eschar
Tabel 4.8.
Hasil serologi IgG antraks dihubungkan dengan manifestasi klinis kulit
berupa eschar
Tabel 4.9.
Hubungan antara riwayat kotak dengan manifestasi klinis di kulit berupa
eschar
x
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1. Pewarnaan gram pada Bacillus anthracis
Gambar 2.2. Siklus hidup Bacillus anthracis
Gambar 2.3. Mekanisme aksi antigen protektif
Gambar 2.4. Mekanisme toksin Bacillus anthracis
Gambar 2.5. Manifestasi klinis antraks kutaneus
Gambar 2.6. Sistem interaksi dan supresi respon imun innate
Gambar 2.7. Mekanisme kerja ELISA
Gambar 2.8. Kerangka pemikiran
Gambar 3.1. Skema alur penelitian
xi
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Inform Consent
Lampiran 2. Lembar data
Lampiran 3. Hasil penelitian
Lampiran 4. Dokumentasi
Lampiran 5. Index IgG output ELISA reader
xii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah
Antraks merupakan penyakit yang disebabkan oleh infeksi bakteri
Bacillus anthracis (B. antrachis) yang ditularkan dari hewan ke manusia
(zoonosis). Penularan ini dapat terjadi melalui kontak dengan bakteri dan
spora dalam darah serta produk-produk hewan ternak seperti daging, kulit,
dan bulu. Sapi, kambing, domba, unta dan kuda merupakan hewan ternak
yang berpotensi menularkan antraks (David et al., 2010; WHO, 2002;
Liu et al., 2009).
Penyakit antraks dimulai dengan masuknya bakteri melalui
mikrolesi di kulit, melalui jalan makanan atau udara yang dihirup saat
bernafas. Berdasarkan cara masuknya bakteri tersebut, antraks dibagi menjadi
tiga bentuk penyakit yaitu antraks kutaneus, antraks gastrointestinal dan
antraks inhalasi (Pohan, 2005).
Antraks dapat ditemukan di seluruh benua tetapi kasus antraks
biasanya terjadi dalam skala geografi yang terbatas, seperti di Benua Afrika,
Asia, dan negara bagian Timur Tengah. Kasus antraks sebagai bioterorisme
pertama kali dilaporkan pada tahun 1979 d i Sverdlovsk (bekas Uni Soviet).
Pada September 2001 tercatat 12 kasus antraks di Amerika Serikat.
Kemudian pada Oktober sampai November 2001, 10 kasus antraks inhalasi
1
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
2
dan 12 kasus suspek antraks kutaneus telah terjadi di Amerika Serikat. Hal
tersebut disebabkan spora antraks yang disebarkan secara sengaja yaitu
pengiriman spora B. anthracis melalui surat atau paket (Dixon et al., 1999;
Jernigan et al., 2001; Purcell et al., 2007).
Di Indonesia tercatat sejak tahun 1991 – 2001 terdapat 599 kasus
antraks dan sampai sekarang menjadi Kejadian Luar Biasa (KLB) pada 11
provinsi di Indonesia termasuk Jawa Tengah. Di Boyolali kasus antraks
terakhir terjadi pada tahun 1992 dengan 25 orang tercatat positif antraks dan
18 meninggal. Hal in i dapat menyebabkan menurunnya harga daging
sehingga terjadi kerugian jutaan rupiah dan jatuhnya korban meninggal
karena antraks seperti pada kasus KLB Boyolali di tahun 1992
(Muchus, 2011; Redhono et al., 2011). Pada awal bulan Februari 2011 di
Boyolali ditemukan sapi yang mati karena antraks dan menimbulkan
penularan ke manusia sehingga Boyolali saat itu dinyatakan KLB (Kejadian
Luar Biasa). Pada bulan Mei 2011, hal serupa terjadi di Sragen
(Gambiro, 2006).
Deteksi yang terlambat dan penanganan yang tidak tepat
memungkinkan
bakteri dapat menyebar baik secara limfogen maupun
hematogen. Hal ini mengakibatkan septikemia dan selanjutnya pasien dapat
mengalami syok dan kematian (Todar, 2008; Dixon et al., 1999). Sampai saat
ini diagnosis antraks d i Indonesia terutama masih berdasarkan uji
konvensional seperti uji kultur, uji biologis yang menggunakan marmot atau
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
3
mencit dan uji Ascoli (Natalia et al., 2007). Akan tetapi, uji konvensional
tersebut membutuhkan waktu yang cukup lama (Beyer et al., 2001).
Oleh karena itu, diperlukan pemeriksaan yang mudah dan cepat
dengan spesifitas dan sensitifitas tinggi seperti pemeriksaan berbasis serologi
Enzyme
Linked
Immunoassays
(ELISA)
(Playfair
et
al.,
2001;
Johnson, 2001). ELISA adalah pemeriksaan untuk mengukur titer antibodi
IgM dan IgG (Baratawidjaja, 2006). Efektivitas ELISA dalam mendeteksi
titer antibodi spesifik terhadap toksin antraks telah dibuktikan oleh
Redhono et al. (2011). Pemeriksaan ini dilakukan terhadap IgG antraks
berdasarkan onset pengambilan sampel darah sesuai dengan waktu kenaikan
titer IgG (Brenneman et al., 2011).
Peneliti menemukan adanya berbagai macam riwayat kontak
penduduk dengan sapi terinfeksi pada KLB antraks di Boyolali. Riwayat
kontak tersebut, antara lain: menyembelih, menguliti, mencuci daging
mentah, memotong, memasak dan memakan. Beragamnya bentuk kontak
penduduk dengan sapi memungkinkan pada KLB antraks ini terjadi tiga
manifestasi klinis antraks, yaitu antraks kutaneus, antraks gastrointestinal dan
antraks inhalasi. Belum ada penelitian mengenai hubungan hasil serologi IgG
Antraks dengan manifestasi klin is yang timbul.
Berdasarkan latar belakang d i atas, peneliti tertarik untuk
melakukan penelitian mengenai hubungan antara hasil serologi IgG antraks
dengan manifestasi klinis yang timbul pada kejadian luar biasa antraks di
Boyolali yang sejauh in i belum diketahui.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
4
B. Perumusan Masalah
1.
Bagaimana hasil serologi IgG antraks pada kejadian luar biasa antraks di
Boyolali?
2.
Apakah terdapat hubungan antara hasil serologi IgG antraks dengan
manifestasi klinis yang timbul pada kejadian luar biasa antraks di
Boyolali?
3.
Bagaimana pengaruh peningkatan titer serologi IgG antraks pada
kemungkinan timbulnya manifestasi klinis antraks?
C. Tujuan Penelitian
1.
Mengetahui hasil serologi IgG antraks pada kejadian luar biasa antraks
di Boyolali.
2.
Mengetahui hubungan antara hasil serologi IgG antraks dengan
manifestasi klinis yang timbul pada kejadian luar biasa antraks di
Boyolali.
3.
Mengetahui pengaruh peningkatan titer serologi IgG antraks pada
kemungkinan timbulnya manifestasi klinis antraks.
D. Manfaat Penelitian
1. Manfaat Teoritik:
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah
mengenai hubungan antara hasil serologi IgG antraks dengan manifestasi
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
5
klin is yang timbul dan pengaruh peningkatan titer serologi IgG antraks
pada kemungkinan timbulnya manifestasi klinis antraks.
2. Manfaat Aplikatif:
Mengetahui hasil serologi IgG antraks pada orang yang terpapar
antraks
di Boyolali dan menentukan prognosis penyakit antraks
berdasarkan hasil pemeriksaan serologi IgG antraks.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
BAB II
LANDASAN TEORI
A. Tinjauan Pustaka
1. Antraks
Antraks merupakan penyakit yang disebabkan oleh infeksi bakteri
Bacillus anthracis (B. antrachis) yang ditularkan dari hewan ke manusia
(zoonosis). Penularan ini dapat terjadi melalui kontak dengan bakteri dan
spora dalam darah serta produk-produk hewan ternak seperti daging, kulit,
dan bulu. Sapi, kambing, domba, kuda merupakan hewan ternak yang
berpotensi menularkan antraks (David et al., 2010; Fishbein et al., 2009;
Liu et al., 2009; WHO, 2002).
B. anthracis termasuk dalam kerajaan Bacteria, filum Firmicutes,
kelas Bacilli, ordo Bacilliales, famili Bacilliaceae, genus Bacillus, dan
spesies Bacillus anthracis (Pohan, 2005).
a. Morfologi dan Siklus Hidup B. antrachis
Bakteri aerob gram positif ini mempunyai ukuran 1 x 3-4 µm,
bersifat nonmotil dan membentuk spora sentral (Jawetz et al., 1991).
Sumber lain menjelaskan bahwa bakteri ini berukuran 1-1.5 µm hingga
3-10 µm, bersifat non hemolitik pada agar darah domba, tumbuh pada
suhu 37ºC dengan gambaran seluler joint bamboo-rod dan membentuk
gambaran koloni curled hair yang unik (Dixon et al., 1999;
6
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
7
Inglesby et al., 2002). Bakteri ini berbentuk batang lurus dengan
susunan dua-dua atau seperti rantai. Dinding sel dari bakteri ini
merupakan polisakarida somatik yang terdiri dari N-asetilglukosamin
dan D-galaktosa (Jawetz et al., 1991).
Gambar 1. Pewarnaan Gram pada Bacillus anthracis (CDC, 2006)
Bakteri pada penyakit antraks dapat ditemukan dalam 2 fase yaitu
fase vegetatif dan fase spora. Pada fase vegetatif, bakteri ini hidup dan
memperbanyak diri di dalam tubuh host, serta menghasilkan toksin
yang menimbulkan gejala-gejala penyakit. Setelah beberapa hari, fase
vegetatif ini menghilang selama proses dekomposisi pada bangkai
hewan yang tertutup. Apabila fase vegetatif ini terekspos oleh oksigen,
maka terjadilah proses sporulasi (CDFA, 2011).
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
8
Gambar 2. Siklus Hidup Bacillus anthracis Mock et al., 2001
Diketahui bahwa dalam mempertahankan siklus hidupnya, B.
anthracis membentuk dua sistem pertahanan yaitu spora dan kapsul.
Dua bentuk inilah, terutama spora yang menyebabkan B. anthracis
dapat bertahan hidup hingga puluhan tahun lamanya. B. anthracis juga
membentuk spora sebagai bentuk resting cells. Pembentukan spora
akan terjadi apabila nutrisi esensial yang diperlukan tidak memenuhi
kebutuhan untuk pertumbuhan (sporulasi) (Dixon et al., 1999).
Spora yang berbentuk elips atau oval ini, terletak di sentral dan
diameternya tidak lebih dari diameter bakteri itu sendiri. Spora B.
anthracis ini tidak terbentuk pada jaringan atau darah binatang yang
hidup, spora tersebut tumbuh dengan baik di tanah maupun pada
eksudat atau jaringan hewan yang mati karena antraks (Pohan, 2005).
Spora-spora ini dapat terus bertahan hidup selama puluhan tahun
dikarenakan sulit dirusak atau mati oleh pemanasan atau bahan kimia
tertentu. Hal ini membuat bakteri tersebut bersifat dorman (hidup
tetapi tidak berkembang biak). Spora antraks tahan terhadap cuaca
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
9
panas dan dingin serta akan aktif setelah masuk ke dalam tubuh hewan.
Pada tanah kering, spora akan bertahan selama puluhan tahun
(Mock et al., 2001).
Spora antraks akan mengalami germinasi menjadi bentuk vegetatif
kembali bila masuk ke dalam lingkungan yang kaya nukleotida, asam
amino dan glukosa seperti yang ditemukan dalam darah dan jaringan
binantang atau manusia (Inglesby et al., 2002).
Sedangkan
kapsul
merupakan
suatu
lapisan
tipis
yang
menyelubungi dinding luar dari bakteri. Kapsul ini terdiri atas
polipeptida berbobot molekul tinggi yang mengandung asam Dglutamat dan merupakan suatu hapten. Badan kuman mengandung
protein dan suatu polisakharida somatik, keduanya bersifat antigenik
(Mock et al., 2001).
Gambar 3. Mekanisme Aksi Antigen Protektif (Prince, 2003)
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
10
Menurut Prince (2003), virulensi B. anthracis bergantung
pada kapsul antifagosit dan 3 komponen toksin berbeda yang saling
membantu yaitu Faktor Letal (FL), Faktor Edema (FE) dan Antigen
Protektif (AP). Untuk dapat berfungsi, FL dan FE perlu masuk sel.
Tugas ini dibantu oleh AP. Pada tahap awal intoksikasi sel host, AP ini
dibutuhkan untuk mengawali masuknya FL dan FE sebagai enzim
yang berperan dalam memediasi kerusakan sel host. AP awalnya
adalah protein yang terdiri dari satu subunit (monomer) yang bila
berikatan dengan reseptor khusus dalam sel yang akan diserang,
menjadi terpotong dua bagian oleh aktivitas protease furin. Berikutnya,
bagian AP yang masih berikatan dengan reseptor tadi membentuk
heptamer (tujuh subunit) dan memungkinkan FL dan FE berikatan
yang selanjutnya bisa masuk ke dalam sel (Paccani et al., 2011).
Kombinasi dari AP dan FL menghasilkan toksin letal (LeTx),
sedangkan kombinasi dari AP dan FE menghasilkan edema toksin.
Toksin-toksin tersebut membantu bakteri menghindar dari sistem imun
host dan menyebabkan septikemia yang berakhir kematian pada host
(Abboud et al., 2008; Glomski et al., 2007; Paccani et al., 2011).
FL adalah komponen sentral racun yang bekerja sebagai protease
(enzim pemotong protein) dimana aktivitasnya bergantung pada logam
seng (zinc). Enzim serupa ditemukan pada beberapa bakteri patogen
berbahaya seperti C. tetani, C. botulinum, dan Vibrio cholerae. Barubaru ini diketahui target FL dalam sel adalah protein MEK1/2 yang
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
11
bertugas mengantarkan sinyal kimiawi dari luar ke dalam sel. FE
adalah enzim adenylate cyclase (adenilat siklase) yang bekerja
mensintesis molekul cAMP sehingga peningkatan kadarnya secara tak
terkontrol bisa menyebabkan hilangnya cairan tubuh (Liu et al., 2009;
Pohan, 2005).
b. Epidemiologi Penyakit Antraks
Penyakit antraks paling sering terjadi pada binatang herbivora
akibat tertelannya spora antraks dari tanah. Kejadian Luar Biasa
epizoonotik pada herbivora pernah terjadi pada tahun 1945 di Iran
yang mengakibatkan satu juta domba mati. Program vaksinasi pada
binatang dapat menurunkan mortalitas pada binatang peliharaan secara
dramatis. Meskipun demikian, spora antraks tetap ada dalam tanah
pada beberapa belahan dunia (Kohout et al., 1964).
Di Amerika Serikat, dilaporkan 18 kasus antraks inhalasi dari
tahun 1900-1976. Hampir semua kasus terjadi pada pekerja yang
mempunyai risiko tertular antraks, seperti tempat pemintalan bulu
kambing, wool dan penyamakan kulit. Akan tetapi, sejak tahun 1976
tidak ada kasus antraks inhalasi di AS (Inglesby et al., 2002).
Secara alamiah, antraks kulit merupakan bentuk yang paling sering
terjadi dan diperkirakan terdapat 2000 kasus per tahunnya di seluruh
dunia. Pada umumnya penyakit timbul setelah seseorang terpajan
dengan hewan yang terinfeksi antraks. Di AS dilaporkan 224 kasus
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
12
antraks ku lit dari tahun 1944-1994. Centers for Diseases Control and
Prevention (CDC) melaporkan kejadian antraks kutaneus dari tahun
1984-1993 hanya tiga orang dan satu kasus dilaporkan terjadi pada
tahun 2000. Kejadian Luar Biasa terjadi di Zimbabwe pada tahun
1978-1980 yang mengakibatkan 10.000 orang terjangkit antraks kulit
terutama pada pekerja perkebunan (Davies, 1985).
Kasus antraks sebagai bioterorisme dilaporkan pada tahun 1979 di
Sverdlovsk (bekas Uni Soviet). Saat itu terjadi kecelakaan pada
fasilitas mikrobiologi militer yang menyebabkan keluarnya aerosol
spora antraks yang mengakibatkan 79 kasus antraks dan 66 orang
meninggal. Aerosol antraks tidak berbau, tidak terlihat, dan berpotensi
menyebar sampai beberapa kilometer (Dixon et al., 1999).
Pada
tahun
1970,
World
Health
Organization
(WHO)
memperkirakan apabila 50 kg antraks dijatuhkan pada penduduk urban
yang berjumlah lima juta orang akan mengakibatkan 250.000 orang
terjangkit antraks dan 100.000 orang meninggal. Pada tahun 1993, AS
memperkirakan 130.000 - 3 juta orang akan meninggal akibat aerosol
spora antraks seberat 100 kg yang terbawa angin di Washington DC
dan hal itu setara dengan daya bunuh bom hidrogen. Dari model
ekonomi diperkirakan biaya yang harus dikeluarkan sebesar 26,2
milyar dolar tiap 100.000 orang tertular (Inglesby et al., 2002).
Sejak September 2001, tercatat 12 kasus antraks di AS, dua kasus
inhalasi (satu kasus fatal) terjadi pada pekerja penerbit tabloid di Boca
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
13
Raton, Florida dan empat kasus antraks inhalasi (dua kasus fatal)
terjadi pada pekerja pengirim surat di Washington DC, Trenton, New
Jersey. Sedangkan, enam kasus lainnya adalah antraks kutaneus. Dari
surat kabar dilaporkan 28 orang di kantor senat terpapar antraks pada
swab nasal (Swartz, 2001).
Di Indonesia, kasus antraks sampai sekarang menjadi Kejadian
Luar Biasa (KLB) pada beberapa daerah dan ada kecenderungan
meluas ke beberapa provinsi termasuk Jawa Tengah. Di Provinsi Jawa
Tengah sendiri, kasus antraks dilaporkan pada tahun 1957 di Tegal,
Pekalongan, Surakarta, dan Banyumas dan akhirnya menjadi penyakit
endemis pada beberapa kabupaten yang eksistensi peternakan seperti
Kabupaten Boyolali, Semarang dan cenderung menyebabkan Kejadian
Luar Biasa (Gambiro, 2006).
Pada awal bulan Februari 2011 di Boyolali ditemukan sapi yang
mati karena antraks dan menimbulkan penularan ke manusia sehingga
Boyolali saat itu dinyatakan KLB (Kejadian Luar Biasa). Pada bulan
Mei
2011,
hal
serupa
terjadi
di
Sragen
(Gambiro,
2006;
Redhono et al., 2011).
c. Patogenesis Penyakit Antraks
Antraks disebut juga Malignant Pustule, Malignant Carbuncle,
Malignant Oedema, Maladi Charbon, Ragpicker disease, Cumberland
disease,
Woolsorter
disease,
Splenic
Fever
dan
Milzbrand
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
14
(Dorland, 2002; Purcell et al., 2007). Penularan antraks pada manusia
biasanya melalui cara-cara berikut: 1. kontak dengan kulit manusia
yang lesi, lecet, atau abrasi; 2. konsumsi daging yang terkontaminasi
kuman vegetatif atau spora melalui tangan; 3. spora yang terhirup di
tempat kerja yang berkaitan dengan produk hewan; 4. gigitan serangga
yang baru saja mengigit hewan infektif, tetapi hal ini jarang terjadi
(Abboud et al., 2008; Fasanella et al., 2009).
Ketika spora antraks masuk ke dalam tubuh dan kemudian tersebar
melalui peredaran darah, tubuh akan membentuk suatu mekanisme
pertahanan dari leukosit yang sifatnya hanya sementara. Setelah spora
dari pembuluh darah terakumulasi dalam sistem limfe, maka infeksi
akan mulai terjadi. Racun dari toksin yang dihasilkan oleh sel vegetatif
tersebut akan mengakibatkan pendarahan internal (internal bleeding)
sehingga mengakibatkan kerusakan pada beberapa jaringan bahkan
organ utama. Jika racun dari toksin tersebut telah tersebar, maka
antibiotik apapun tidak akan berguna lagi (Chu et al., 2002).
Endospora B. anthracis patogen mencapai tempat kejadian utama
di lapisan subkutan, mukosa gastrointestinal, atau ruang alveolar.
Untuk antraks kulit dan gastrointestinal, pembiakan tingkat rendah
terjadi pada tempat kejadian utama yang menyebabkan nekrosis dan
edema setempat. Bakteri menyebar melalui peredaran darah dan limfe
serta meningkat dalam jumlah yang tinggi. Proses ini menyebabkan
septikemia berat. Endospora difagosit oleh makrofag dan berkembang
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
15
biak. Makrofag yang mengandung basil bermigrasi dan melepaskannya
ke kelenjar getah bening regional. Basil antraks vegetatif tumbuh di
kelenjar limfe dan membentuk limfadenitis hemoragik regional
(Todar, 2008).
Dalam sejumlah kecil kasus, antraks sistemik dapat menyebar
melalui limfe dan penyebaran hematogen. Dalam kasus antraks
inhalasi, limfadenitis hemoragik peribronkial menghambat sirkulasi
limfatik paru-paru, menyebabkan edema paru. Kematian yang
merupakan akibat dari septikemia, toksemia atau komplikasi pada
paru-paru juga dapat terjadi 1-7 hari setelah terpapar (Prince, 2003).
Gambar 4. Mekanisme Toksin B. anthracis (Dixon et al., 1999)
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
16
Faktor virulensi utama dari B. anthracis dikodekan pada dua
plasmid virulen yaitu pXO1 dan pXO2. Plasmid yang mengandung
toksin pXO1 berukuran 184,5 kilobase pairs (kbp) dan menyandikan
gen-gen yang mensekresikan eksotoksin. Kompleks gen toksin ini
tersusun oleh Antigen Protektif (AP), Faktor Letal (FL), dan Faktor
Edema (FE). Sedangkan plasmid yang lebih kecil yaitu pXO2,
berukuran 95.3 kbp dan menyandikan tiga gen (capB, capC, dan capA)
yang terlibat dalam sintesis kapsul polyglutamyl. Kapsul ini akan
melindungi B. anthracis vegetatif dari proses fagositosis). Kapsul dari
B. anthracis terdiri dari poly D-glumatic acid yang tidak berbahaya
(non toksik) bagi dirinya sendiri. Kapsul in i dihasilkan oleh plasmid
pX02 dan berfungsi untuk melindungi sel dari fagositosis dan lisis
(Dixon et al., 1999).
Toksin yang dihasilkan oleh B. anthracis yang berasal dari plasmid
pXO1 memiliki AB model (activating dan binding). Eksotoksin ini
terdiri dari protein B (binding) yang diperlukan untuk masuk ke dalam
sel inang dan protein A (enzymatically active). Komponen B dikenal
sebagai antigen pelindung. Komponen protein A yang pertama adalah
edema toxin, merupakan calmodulin-dependent adenylate cyclase yang
bertanggung jawab pada terjadinya edema yang menonjol di lokasi
infeksi, penghambatan fungsi neutrofil dan penghambat produksi TNF
dan IL-6 oleh monosit (Friedlander, 2000).
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
17
Edema toxin adalah calmodulin-dependent adenylate cyclase yang
meningkatkan kadar siklik AMP (cAMP) intraselular pada tempat
masuknya dalam berbagai jenis sel. Edema toxin diyakini mengubah
homeostatis
air,
yang
mengakibatkan
edema
masif
(Dixon et al., 1999).
Komponen protein A yang kedua adalah lethal toxin yaitu zinc
metalloprotease
menyebabkan
yang
menginaktifkan
penghambatan
sinyal
merangsang pelepasan interleukin-
MAPKK
intraseluler.
(IL-
sehingga
Lethal
toxin
yang menyebabkan
kondisi hiperinflamatori pada makrofag, mengaktifkan jalur oksidatif
yang merusak dan pelepasan reactive oxygen intermediates, serta
produksi sitokin pro-inflamasi, seperti Tumor Necrosis Factor(TNF-
dan yang bertanggung jawab untuk terjadinya syok dan
kematian. Hal ini diakibatkan efek toksik yang terjadi pada hewan
dengan bakteremia kadar tinggi (mencapai 107 -108 basil per mililiter
darah, terlihat pada pewarnaan gram) dan tingginya kadar lethal toxin
(Chamber, 2003; Dixon et al., 1999; Friedlander, 2000).
Ketiga toksin ini tidak bersifat racun secara individual. Namun,
dapat bersifat toksin bahkan letal jika ada dua atau lebih
(Chamber, 2003).
d. Manifestasi klinis penyakit antraks
Secara umum, manifestasi klinis yang terjadi pada infeksi bakteri
antraks sesuai dengan mekanisme kerja toksin bakteri tersebut. Yaitu
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
18
demam, edema dan pembesaran kelenjar limfe regional. Namun, hal
ini juga dapat disertai dengan manifestasi klinis yang khas sesuai
dengan jalan masuknya bakteri ke dalam tubuh.
1). Antraks Kutaneus
Hampir pada 95% kasus antraks yang terjadi di AS
merupakan antraks kutaneus. Penderita biasanya memiliki riwayat
kontak dengan
binatang atau
produknya.
Beberapa kasus
dilaporkan terjangkit an traks kulit akibat gigitan serangga yang
diduga terinfeksi akibat memakan bangkai yang mengandung
antraks. Daerah yang terkena terutama muka, ekstremitas, atau
leher. Endospora masuk melalui kulit yang lecet atau luka
(Pohan, 2005).
Gambar 5. Manifestasi Klinis Antraks Kutaneus
(Brenneman et al., 2011)
Satu hingga tujuh hari setelah endospora masuk, terbentuk
lesi kulit primer yang tidak nyeri dan papula yang gatal. Dua puluh
empat sampai tiga puluh enam jam kemudian lesi membentuk
vesikel yang berisi cairan jernih atau serosanguineus dan
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
19
mengandung banyak kuman gram positif. Vesikel kemudian
mengalami nekrosis sentral, mengering, dan menimbulkan eschar
(ulkus nekrotik) kehitaman yang khas dikelilingi edema dan
vesikel keunguan. Edema biasanya terjadi lebih hebat pada kepala
atau leher dibandingkan badan atau tungkai. Limfangitis dan
limfadenopati yang nyeri dapat ditemukan mengikuti gejala
sistemik yang terjadi. Meskipun antraks kulit dapat sembuh sendiri,
antibiotik tetap perlu diberikan karena dapat mengurangi gejala
sistemik yang terjadi (David et al., 2010).
Pada 80-90% kasus lesi sembuh secara sempurna tanpa
komplikasi atau jaringan parut. Edema maligna jarang terjadi.
Edema maligna ini ditandai dengan edema hebat, indurasi, bula
multipel dan syok. Edema maligna dapat terjadi pada leher dan
daerah dada yang menyebabkan kesulitan bernapas sehingga
diperlukan kortikosteroid atau intubasi (David et al., 2010;
Spencer, 2003).
2). Antraks Gastrointestinal
Antraks gastrointestinal, walaupun dapat berakibat fatal,
belum pernah dilaporkan di AS. Gejala biasanya timbul 2-5 hari
setelah memakan daging mentah atau kurang matang yang
terkontaminasi kuman. Beberapa kasus dapat terjadi di dalam satu
rumah.
Pada
pemeriksaan
patologi
dengan
menggunakan
mikroskop dapat ditemukan basil dalam mukosa dan submukosa
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
20
jaringan limfe dan limfadenitis mesenterika. Pada kasus ini,
ulserasi hampir selalu ditemukan. Pada jaringan di sekitar tempat
infeksi ditemukan edema masif dan nekrosis. Sejumlah besar
kuman gram positif dapat ditemukan pada cairan peritoneal.
Pelebaran mediastinum dapat juga terjadi (Dixon et al, 1999).
Gejala klinis berupa demam, nyeri abdomen difus,
konstipasi, atau diare. Karena terjadi ulserasi, maka buang air besar
atau muntah menjadi kehitaman atau kemerahan. Dapat terjadi
asites yang jernih sampai purulen (bila dilakukan kultur sering
ditemukan
koloni B.
perdarahan,
gangguan
Anthracis).
Kematian
keseimbangan
cairan
terjadi akibat
dan
elektro lit,
perforasi, syok, atau toksemia. Bila penderita dapat bertahan hidup
maka sebagian besar gejala akan hilang dalam 10-14 hari.
Pengendapan dan germinasi spora di orofaring dapat menimbulkan
antraks orofaring. Gejala klinis berupa sakit teggorokan yang
hebat, demam, disfagia dan terkadang karena limfadenitis dan
edema masif dapat terjadi respiratory distress (Bell et al., 2002).
3). Antraks inhalasi
Antraks inhalasi dimulai dengan masuknya spora ke dalam
rongga alveolar, kemudian makrofag akan memfagosit spora dan
sebagian dari spora akan lisis dan rusak. Spora yang tetap hidup
akan menyebar ke kelenjar limfe dan kelenjar mediastinal. Proses
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
21
perubahan bentuk vegetatif terjadi kurang lebih 60 hari kemudian.
Lambatnya proses perubahan bentuk tidak diketahui dengan pasti,
akan tetapi terdokumentasi dengan baik di Sverdlovsk bahwa kasus
antraks inhalasi terjadi antara hari ke-2 hingga hari ke-43 setelah
terpajan. Sekali proses germinasi terjadi, penyakit akan timbul
secara cepat dan replikasi bakteri menyebabkan perdarahan, edema
dan nekrosis. Pada monyet percobaan keadaan fatal terjadi pada
hari ke-58 hingga ke-98 setelah terpajan (Dixon et al.,1999;
Inglesby et al., 2002).
Secara klasik, gejala klin is antraks inhalasi bersifat bifasik.
Pada fase awal, 1-6 hari setelah masa inkubasi timbul gejala yang
tidak khas berupa demam ringan, malaise, batuk nonproduktif,
nyeri dada atau perut dan biasanya tanpa disertai kelainan fisik.
Kemudian, penyakit akan masuk ke dalam fase kedua. Pada fase
tersebut secara mendadak timbul demam, sesak napas akut,
diaforesis dan sianosis. Adanya pembesaran kelenjar limfe,
pelebaran mediastinum, dan edema subkutan di dada dan leher. Hal
ini dapat menimbulkan obstruksi trakea yang dapat menyebabkan
terjadinya stridor (Shafazand, 1999; Schneemann et al., 2009).).
2. Respon Imun terhadap Bacillus anthracis
Manifestasi penyakit infeksi bukan hanya merupakan akibat
langsung ulah patogen mikrobial. Namun, juga akibat interaksi patogen
tersebut dengan sistem imun pejamu. Macam respons imun dan penyebab
perpustakaan.uns.ac.id
infeksi
digilib.uns.ac.id
22
akan
menentukan
apakah
penyakit
menjadi
akut
atau
berkepanjangan (Goldman, 2000).
Secara umum, bakteri dapat masuk dan tetap hidup di dalam sel
eukariositik sehingga terlindung dari antibodi humoral dan hanya dapat
dieliminasi oleh respons imun seluler. Bakteri ini harus memiliki
mekanisme khusus untuk memproteksi dirinya dari dampak enzim-enzim
lisosomal dalam sel. Terdapat 3 kelompok bakteri dipandang dari sisi
kemampuan invasi ke dalam sel eukariositik yaitu bakteri intraseluler
fakultatif,
bakteri
intraseluler
obligat,
dan
bakteri
ekstraseluler
(Peterson, 2004).
Bacillus anthracis termasuk bakteri ekstraseluler saat pertama kali
infeksi terjadi. Namun, sesaat setelahnya, bakteri in i menginvasi ke dalam
sel seperti halnya yang dilakukan bakteri intraselular. Jadi, B. anthracis
pada dasarnya bersifat intraseluler tetapi dapat berada di lingkungan
ekstraselular untuk jangka waktu yang singkat, bahkan dalam bentuk
dewasa dari bakteri (Peterson, 2004; Tournier et al., 2007).
Respons imun terhadap patogen ekstraselular dan intraselu ler
berbeda. Sistem imun pada patogen ekstraselular d itujukan untuk
menghancurkan patogen serta menetralisir produknya, sedangkan pada
patogen intraseluler sel T dapat menghancurkan sel yang terinfeksi,
dalam kata lain sitotoksik, atau dapat mengaktivasi sel untuk menghadapi
patogen (Male et al., 1993).
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
23
Berikut ini akan dijelaskan terlebih dahulu mengenai respon imun
secara umum. Pertahanan tubuh terhadap infeksi oleh mikroorganisme
patogen terjadi dengan berbagai cara. Pertama, pertahanan non-spesifik
(innate) dengan mengeluarkan agen infeksi atau membunuhnya pada
kontak pertama. Bilamana patogen menimbulkan infeksi, berbagai
respons non-adaptif dini penting untuk mengendalikan infeksi dan
mempertahankan pengawasan terhadapnya. Respons non-adaptif dini ini
terjadi sampai terbentuk respons imun adaptif. Respons imun adaptif
memerlukan waktu beberapa hari, mengingat limfosit T dan B harus
menemukan
antigen
spesifik untuk mengadakan proliferasi
dan
berdiferensiasi menjadi sel efektor. Respons sel B yang tergantung pada
sel T (T-cell dependent B-cell responses) tidak akan dapat dimulai
sebelum sel mempunyai kesempatan untuk mengadakan proliferasi dan
diferensiasi (Gray et al., 1994).
a. Imunitas Non-Spesifik (Innate Immune Response)
Respons ini terjadi segera tanpa memerlukan kontak dengan
mikroba sebelumnya dan merupakan pertahanan pertama bagi tubuh.
Respons innate tidak spesifik dan berlaku bagi setiap patogen. Respons
terhadap bakteri yang mengadakan invasi disertai proses inflamasi pada
tempat infeksi di mana cairan, sel, bahan-bahan yang terlarut merembes
keluar dari darah menuju jaringan. Kejadian ini disertai kemerahan
setempat,
pembengkakan,
serta
demam.
Inflamasi
bertujuan
memusatkan agen pertahanan tubuh ke lokasi yang membutuhkan.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
24
Selama inflamasi, sel-sel fagosit seperti neutrofil dan makrofag
meninggalkan aliran darah dan bermigrasi menuju tempat infeksi
sebagai respons terhadap kemikal (chemoattractants) yang dilepaskan
di tempat tersebut (Male et al., 1993).
Sesampainya pada tempat tersebut, sel-sel fagosit mengenali,
menelan, serta menghancurkan patogen. Darah juga mengandung
rangkaian protein terlarut yang dinamakan komplemen, yang dapat
melubangi membran plasma sel bakteri, dengan akibat lisis dan
kematian sel. Respons imun innate terutama efektif terhadap bakteri
tertentu, yang pada dinding selnya terdapat polisakarida unik sehingga
segera dikenali sel pejamu sebagai benda asing (Arocho et al., 2009).
Gambar 6. Skema Interaksi dan Supresi Respon Imun Innate
(Fukao, 2004)
Namun, ahli biologi dari University of California, San Diego telah
menemukan bagaimana toksin yang dihasilkan oleh bakteri antraks
memblokade respons normal kekebalan tubuh seseorang. Sel-sel
kekebalan tubuh manusia gagal untuk merespon secara normal
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
25
terhadap lipopolisakarida, sebuah komponen dari dinding sel Bacillus
anthracis. Hal ini dikarenakan perlindungan dari toksin antraks. Invasi
bakteri, atau adanya lipopolisakarida, biasanya menyebabkan sel imun
yang dikenal sebagai sitokin makrofag memproduksi bahan kimia yang
mengirimkan sinyal ke sel-sel lain tentang kehadiran benda asing.
Pelepasan sitokin menyebabkan sejumlah besar sel kekebalan bergerak
menuju
tempat
infeksi
dan
menghancurkan
bakteri.
Dengan
menghalangi respon kekebalan host, bakteri antraks dapat berkembang
biak tidak terkendali. Makrofag memiliki reseptor khusus pada
permukaannya
yang
mengikat
lipopolisakarida.
Pengikatan
lipopolisakarida untuk reseptor ini mengawali urutan kejadian di dalam
makrofag, dimana serangkaian protein mengaktifkan satu sama lain
secara bergantian. Kaskade protein ini mengaktifkan satu sama lain
dan akhirnya menjadi gen sitokin yang menyebabkan makrofag
memproduksi sitokin dalam jumlah besar (David et al., 2010;
Liu et al., 2010).
b. Respons Imun Adaptif
Respons
imun
adaptif
memerlukan
waktu
agar
dapat
mempersiapkan sistem imun untuk menghadapi agen asing. Respons
ini sangat spesifik dan hanya ditujukan untuk molekul-molekul yang
spesifik pada bahan-bahan asing. Sebagai contoh, darah seseorang
yang baru sembuh dari sakit antraks mengandung antibodi yang
mengadakan reaksi dengan bakteri antraks. Berbeda dengan imunitas
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
26
innate terhadap mikroba dan parasit yang dimiliki oleh semua
binatang, hanya vertebrata yang dapat membentuk imunitas adaptif
(Baratawidjaja, 2006).
Respons imun adaptif atau didapat dibagi dalam 2 kategori yaitu
imunitas humoral dan imunitas dimediasi sel. Kedua tipe imunitas
didapat ini dimediasi oleh limfosit yaitu leukosit berinti yang beredar
di antara darah dan organ limfoid (Oberholzer et al., 2000;
Kwok et al., 2008).
Imunitas humoral dilaksanakan oleh antibodi yaitu protein dalam
darah yang tergolong dalam superfamili imunoglobulin. Imunitas
humoral ini dimediasi oleh sel-B (limfosit-B) yang setelah diaktivasi
akan mensekresikan antibodi. Antibodi ditujukan terutama pada bahan
asing di luar sel pejamu. Termasuk di sini komponen protein dan
polisakarida dinding sel bakteri sebagai toksin bakteri. Dalam
beberapa kasus, antibodi dapat terikat pada toksin bakteri sekaligus
mencegahnya untuk masuk ke dalam sel pejamu. Selain itu, antibodi
dapat berfungsi sebagai molecu lar tags yang terikat pada patogen yang
masuk dan menandainya untuk dimusnahkan. Sel bakteri yang dilapisi
molekul antibodi cepat dicerna oleh makrofag yang berkeliling atau
dihancurkan molekul komplemen yang diangkut dalam
darah
(Arocho et al., 2009). Cote et al. (2005) melaporkan bahwa antibodi
anti PA dapat meningkatkan fagositosis dan proses penghancuran
spora.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
27
Respon imun humoral bermanfaat dalam pengujian diagnostik.
Sistem imun manusia mampu memproduksi baik antibodi IgM atau
IgG dalam hampir semua patogen. Pada kebanyakan kasus, IgM
diproduksi oleh pasien hanya setelah interaksi pertama dengan patogen
dan
tidak
lagi
terdeteksi
setelahnya
dalam
waktu
singkat.
(Baratawidjaja, 2006).
IgG merupakan antibodi yang lebih spesifik terhadap antigen,
walaupun IgG hanya memiliki dua antigen binding site. Jenis antibodi
ini dapat pula terikat pada komplemen. Ketika IgG terikat pada
antigen, dasar molekul akan melekat dan terikat pada membran sel
fagosit, meningkatkan kemampuan menelan dan penghancuran
patogen oleh sel host. Pertemuan kedua dengan antigen yang sama
biasanya
hanya
menimbulkan
respon
IgG
(Bellanti,
1993;
Little et al., 2004). Dalam penelitiannya Biagini et al. menyatakan
bahwa IgG anti Protektif Antigen terbukti dapat memberikan
perlindungan terhadap infeksi Bacillus anthracis (2006).
Imunitas dimediasi sel atau imunitas seluler merupakan imunitas
yang dilaksanakan oleh sel. Imunitas dimediasi sel dilaksanakan oleh
limfosit T (sel-T), yang bila teraktivasi dapat secara spesifik mengenal
serta membunuh sel terinfeksi (Arocho et al., 2009).
Selanjutnya, sel T efektor dibagi menjadi sel T sitotoksik (CD8+)
atau sel T helper (CD4+). Sel CD8+ melakukan killing terhadap sel
sasaran (target) yang terinfeksi dengan cara melepas lytic granula
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
28
(perforin, granzymes) atau dengan cara induksi produksi (FasL) atau
TNF-
lui ikatan dengan reseptornya memulai suatu
kaskade bunuh diri sel menuju apoptosis sel sasaran. Sel-sel CD4+
dapat berdiferensiasi menjadi 2 tipe sel efektor yaitu Th1 dan Th2,
tergantung pada pola pelepasan sitokin. Sel Th2 mengsekresi IL-4, IL5, dan IL-10 yang kesemuanya dapat mengaktivasi proliferasi sel B
serta memacu respons imun humoral. Di sisi lain, sel Th1 mensekresi
IFN-
yang
merupakan
sitokin
macrophage-activating
primer
(Oberholzer et al., 2000; Kwok et al., 2008).
3. Pemeriksaan Serologi ELISA sebagai Metode Identifikasi Titer IgG
Antibodi Anti Antraks
Pada infeksi Bacillus anthracis, tubuh manusia akan memproduksi
IgM dan IgG anti antraks pada sistem imun humoral. Hal inilah yang
dimanfaatkan dalam pemeriksaan serologis (Brenneman et al., 2011).
Pemahaman umum dari konsep serologi adalah terjadinya peningkatan
titer. Titer antibodi sebanding dengan pengenceran tertinggi serum pasien
dimana antibodi masih dapat terdeteksi. Pasien dikatakan memiliki jumlah
antibodi yang tinggi karena antibodi masih dapat terdeteksi pada
pengenceran tertinggi (Biagini et al., 2004; Playfair, 2001; Johnson, 2001).
Enzyme Linked I mmunoassays (ELISA) adalah metode determinasi
konsentrasi protein berdasarkan spesifitas reaksi imunologis antara antigen
dan antibodi yang dirangkai dengan reaksi enzimatis. Alat ini digunakan
untuk pengukuran konsentrasi antibodi terhadap suatu antigen, biasanya
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
29
digunakan antibodi monoklonal. Konsentrasi protein akan berbanding
lurus dengan konsentrasi produk reaksi enzimatis ditentukan berdasarkan
nilai serapan {Optical Density (OD) atau rapat optik} yang terbaca pada
layar alat ELISA reader
dianjurkan (Dirgahayu, 2011). Dalam penelitiannya, Biagini et al.
menjelaskan bahwa ELISA merupakan metode pemeriksaan serologi
standar laboratorium untuk identifikasi antraks (2006).
Waktu pengambilan sampel darah merupakan hal yang perlu
diperhatikan berdasarkan onset kenaikan dan penurunan titer IgM dan IgG
anti antraks. IgM anti antraks akan meningkat pada hari ke-5 pasca infeksi
dan bertahan sampai pada minggu ke-3 kemudian akan terjadi penurunan
titer yang signifikan. Sedangkan IgG anti antraks akan terdeteksi mulai
hari ke-13 dan meningkat dua sampai tiga kali pada minggu ke-2 pasca
infeksi (Brenneman et al., 2011). Dalam sumber lain, Quinn et al. (2004)
menyatakan bahwa 11 hari setelah onset akan terjadi peningkatan anti
Protektif Antigen (PA) IgG pada 16 dari 17 pasien klinis antraks. Anti PA
IgG akan terus meningkat 8 sampai 16 bulan setelah onset pada 6 pasien
antraks inhalasi dan 7 dari 11 pasien antraks kutaneus.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
30
Gambar 7. Mekanisme Kerja ELISA (Biagin i et al., 2004)
Pada prinsipnya, cara kerja ELISA antara lain:
-
Spesimen yang akan diperiksa dimasukkan ke dalam sumuran yang
disebut microplate. Di dalamnya terdapat molekul antibodi yang
akan berikatan dengan antigen yang dilekatkan dalam fase padat.
-
Anti-human antibodi yang diberi label ditambahkan
pada
campuran. Antibodi berlabel akan terikat pada ikatan molekul
antigen-antibodi yang pertama sehingga terjadi ikatan sandwich
antibodi-antigen-antibodi berlabel.
-
Setelah
proses
pencucian
molekul
yang
tidak
berikatan,
standar
prosedur,
ditambahkan substrat.
-
Setelah
beberapa
waktu
sesuai
dengan
ditambahkan reagen untuk menghentikan reaksi (penambahan
NaOH
1N).
Intensitas
warna
yang
terbentuk
proporsional/sebanding dengan konsentrasi antigen yang terikat
(Biagini et al., 2004; Cunha et al., 2008).
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
31
B. Kerangka Pemikiran
Paparan/kontak dengan
Bacillus anthracis
Antigen masuk
ke dalam tubuh
Melalui
mikrolesi
di kulit
Masuk ke
dalam
saluran
pencernaan
Terjadi respon imun
Respon imun
innate oleh
Terhirup
bersama
udara
pernafasan
Terjadi germinasi di lokasi
Edema lokal dan nekrosis
Respon imun
adaptif
Manifestasi klinis
Limfosit B
(humoral)
Akut :
IgM anti
antraks
Limfosit T
(seluler)
Antraks
kutaneus
Kronis :
IgG anti antraks
Deteksi IgG spesifik
dengan ELISA
Antraks
inhalasi
Antraks
gastrointestinal
Terjadi
kenaikan titer
Gambar 8. Kerangka Pemikiran
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
32
C. Hipotesis
Terdapat hubungan antara hasil serologi IgG antraks dengan
manifestasi klinis yang timbul pada kejadian luar biasa antraks di Boyolali.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian observasional analitik dengan
pendekatan cross sectional. Peneliti mengobservasi kasus yang terjadi di
lapangan,
kemudian
menganalisis
data
yang
sudah
didapat
(Sastroasmoro, 2011).
B. Lokasi Penelitian
Penelitian dilakukan di Dukuh Tangkisan Desa Karangmojo,
Kecamatan Klego, Kabupaten Boyolali dan sampel darah diperiksa di
Laboratorium Biomedik Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret.
C. Subjek Penelitian
1. Populasi
Populasi adalah setiap orang yang mempunyai riwayat kontak
dengan sapi antraks dan bertempat tinggal di wilayah KLB antraks di
Indonesia.
33
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
34
2. Sampel
Penduduk yang terpapar antraks di Dukuh Tangkisan Desa
Karangmojo, Kecamatan Klego, Kabupaten Boyolali, yang memenuhi
kriteria sebagai berikut :
a. Inklusi
: Penduduk yang tinggal di lokasi KLB antraks & memiliki
riwayat kontak dengan hewan terinfeksi antraks.
b. Eksklusi
: 1). Tidak
menderita
penyakit
immunocompremise,
misalnya AIDS dan TBC.
2). Tidak sedang menderita penyakit berat, misalnya
sepsis. Data ini didapatkan dari hasil wawancara dan
pemeriksaan.
D. Besar Sampel
Peneliti tidak melakukan sampling pada penelitian ini karena
sampel diambil dari keseluruhan data yang didapat atau dalam referensi lain
disebut sebagai total sampling (Murti, 2010).
E. Identifikasi Variabel Penelitian
1. Variabel bebas
: hasil serologi IgG antraks.
2. Variabel terikat
: manifestasi klinis antraks.
3. Variabel luar :
Variabel luar dari penelitian ini adalah sebagai berikut:
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
35
a. Variabel luar yang dapat dikendalikan: lokasi tempat tinggal dan
riwayat kontak dengan sapi antraks.
b. Variabel luar yang tidak dapat dikendalikan: Jenis kelamin, umur,
pendidikan dan pekerjaan.
F. Definisi Operasional Variabel Penelitian
1. Variabel bebas: hasil serologi IgG Antraks pada serum darah pasien.
Hasil serologi IgG Antraks didapatkan dari perhitungan titer atau
rapat optik ini menunjukkan ikatan yang terjadi antara antigen B. anthracis
dengan antibodi berupa imunoglobulin yang telah diproduksi oleh tubuh.
Hasil serologi IgG dipilih karena IgG merupakan antibodi yang lebih
spesifik terhadap antigen. Interpretasi index antibodi:
< 0.9
:
negatif atau tidak terdeteksi IgG Antraks
0.9 - 1.1 :
borderline sehingga diperlukan tes follow up lebih lanjut,
> 1.1
positif, kemungkinan setelah atau baru saja melakukan
:
vaksinasi, atau terjadi infeksi antraks.
2. Variabel terikat: manifestasi klinis antraks.
Secara umum manifestasi klinis yang terjadi pada infeksi
B. antrachis adalah demam, pembesaran kelenjar limfe regional dan
edema. Manifestasi klinis ini dapat disertai gejala khas dari masing-masing
jenis antraks, antara lain:
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
36
a. Antraks Kutaneus
Lesi kutaneus yaitu papula pada tempat inokulasi Bacillus
anthracis yang disertai rasa gatal dan tanpa disertai rasa sakit. Dalam
kurun waktu 2-3 hari, papula akan membesar menjadi vesikel yang
berisi cairan kemerahan, kemudian hemoragik dan menjadi jaringan
nekrotik berbentuk ulcera. Ulserasi ini akan ditutupi kerak berwarna
hitam kering disebut eschar yang patognomonik.
b. Antraks Gastrointestinal
Gejala klinis berupa demam, nyeri abdomen difus, konstipasi, dan
diare. Oleh karena ulserasi yang terjadi, maka buang air besar atau
muntah menjadi kehitaman atau kemerahan. Dan pada kasus ini dapat
pula terjadi asites.
c. Antraks inhalasi
Pada fase awal, 1-6 hari setelah masa inkubasi timbul gejala yang
tidak khas berupa demam ringan, malaise, batuk nonproduktif, nyeri
dada atau perut dan biasanya tanpa disertai kelainan fisik. Kemudian,
penyakit akan masuk ke dalam fase kedua. Pada fase tersebut secara
mendadak timbul demam, sesak napas akut, diaforesis, dan sianosis.
Adanya pembesaran kelenjar getah bening, pelebaran mediastinum,
dan edema subkutan di dada dan leher dapat menimbulkan obstruksi
trakea yang dapat menyebabkan terjadinya stridor.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
37
3. Variabel luar terkontrol
a. Lokasi tempat tinggal
Lokasi tempat tinggal yang berada dalam wilayah kejadian luar biasa
antraks di Boyolali mempengaruhi kesamaan faktor risiko tertular
antraks.
b. Adanya riwayat kontak dengan sapi yang terinfeksi antraks
Subjek penelitian ini adalah orang dengan riwayat kontak dengan sapi
terinfeksi antraks. Hal ini mempengaruhi kesamaan faktor risiko tertular
antraks.
4. Variabel Luar Tidak Terkontrol
a. Jenis kelamin
Jenis kelamin dapat mempengaruhi perbedaan higienitas dan respon
imun tubuh terhadap bakteri.
b. Umur
Umur dapat mempengaruhi perbedaan tingkat respon imun tubuh
terhadap bakteri.
c. Pendidikan
Pendidikan dapat mempengaruhi tingkat pengetahuan dalam mengelola
daging mentah dan tingkat higienitas seseorang.
d. Pekerjaan
Pekerjaan dapat mempengaruhi sikap dalam mengelola daging mentah
dan tingkat higienitasnya.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
38
G. Sumber Data
Data yang diambil adalah data primer dari pemeriksaan dan
wawancara serta pengambilan sampel darah di Dukuh Tangkisan Desa
Karangmojo, Kecamatan Klego, Kabupaten Boyolali pada tanggal 2 Maret
2011 dan data primer dari pemeriksaan langsung sampel darah dengan
metode ELISA di Laboratorium Biomedik Fakultas Kedokteran UNS pada
tanggal 9 April 2011.
H. Instrumental Penelitian
1. Alat
Alat yang akan digunakan adalah sebagai berikut :
a.
Spuit 5 cc
b.
Kapas steril
c.
Karet pengikat
d.
Tabung EDTA
e.
Ice box
f.
Label nama
g.
Cek list pemeriksaan
h.
ELISA reader
i.
Gelas ukur
j.
Mikropipet
k.
Mikrotip
l.
Sarung tangan pelindung
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
39
m.
Baker glass
n.
Log book
o.
Alat tulis dan marker
p.
Masker pelindung
q.
Kacamata pelindung
2. Bahan
Bahan yang akan digunakan adalah sebagai berikut :
a.
Kit ELISA yang digunakan Calbiotech Anthrax Protective Antigen
IgG ELISA dengan sensitifitas 98% dan spesifitas 97%.
b.
Akuabides steril.
c.
Kertas serap.
d.
Sampel yang digunakan berupa : serum darah penderita.
Sesuai keterangan dari Dinas Kesehatan Jawa Tengah
(2007), cara pengambilan spesimen adalah dengan mengambil 5 ml
darah vena. Kemudian serum darah dipisahkan untuk pemeriksaan
serologi.
perpustakaan.uns.ac.id
I.
digilib.uns.ac.id
40
Jalannya Penelitian
Berikut merupakan jalannya penelitian:
Ditemukan sapi terinfeksi B. anthracis di Dukuh Tangkisan
Desa Karangmojo, Kecamatan Klego, Kabupaten Boyolali.
Penduduk yang memiliki riwayat
kontak dengan sapi & produk sapi
terinfeksi dan tinggal di lokasi
KLB antraks
Dilakukan pemeriksaan fisik
manifestasi klinis antraks
Dilakukan pengambilan
spesimen darah
Pemeriksaan serologi IgG antraks
Ada
Tidak ada
Positif
Borderline
Negatif
Analisis data
Simpulan
Gambar 6. Alur Penelitian
J.
Teknik Analisis Data Statistik
Data dalam penelitian ini akan diolah dengan teknik analisis statistik
yaitu
Uji
Chi
Square,
(Sastroasmoro et al., 2011).
Uji
Spearman
dan
Uji
Regresi
Logistik
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
41
BAB IV
HASIL PENELITIAN
A.
Karakteristik Lokasi
Kabupaten
Boyolali
memiliki
luas
101.510.0965 ha atau kurang dari 4,5% luas
wilayah
kurang
Provinsi Jawa Tengah.
Wilayah Boyolali terletak antara 110
7
lebih
- 110
-7
1.500 meter dari permukaan laut.
Kabupaten Boyolali terdiri atas 19 kecamatan, yang dibagi lagi atas
260 desa dan 7 kelurahan. Kabupaten Boyolali terkenal dengan usaha
pengembangan sapi perah dan penggemukan sapi. Secara geografi,
kabupaten ini terdiri dari sebelah timur dan selatan yang merupakan
daerah rendah dan sebelah utara dan barat yang merupakan daerah
pegunungan. Sebelah utara berbatasan dengan wilayah Kabupaten
Semarang dan Kabupaten Grobogan. Sebelah timur berbatasan dengan
wilayah Kabupaten Sragen, Kabupaten Karanganyar, Kota Surakarta dan
Kabupaten Sukoharjo. Sebelah selatan berbatasan dengan wilayah
Kabupaten Klaten dan DIY. Sebelah barat berbatasan dengan wilayah
Kabupaten Magelang dan Kabupaten Semarang. Jarak bentang Kabupaten
Boyolali adalah barat ke timur sebesar 48 km dan dari utara ke selatan
sebesar 54 km. Kejadian luar biasa antraks yang dibahas dalam penelitian
ini terjadi di Kecamatan Klego, Kabupaten Boyolali.
perpustakaan.uns.ac.id
B.
digilib.uns.ac.id
42
Karakteristik Subyek Penelitian
Pada penelitian ini didapatkan 92 sampel di Kabupaten Boyolali,
dengan riwayat kontak dengan hewan yang mati karena antraks.
Karakteristik sampel dengan usia paling muda adalah 6 tahun dengan
presentase 1% dan yang tertua adalah 80 tahun dengan presentase 1%.
Sebaran usia tertinggi adalah pada 21 sampai 40 tahun sebanyak 37 % dan
jenis kelamin terbanyak adalah perempuan, yaitu 62%. Tingkat pendidikan
sampel pada penelitian ini paling banyak adalah lulus SD sebanyak 73,9%.
Mata percaharian yang mendominasi adalah sebagai ibu rumah tangga
yaitu sebanyak 47,8%. Karakteristik subyek penelitian dapat dilihat pada
tabel - tabel di bawah in i.
Tabel 1. Jenis Kelamin (n = 92)
Jenis Kelamin
N
%
1. Laki – laki
35
38
2. Perempuan
57
62
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
43
Tabel 2. Usia (n = 92)
Usia
N
%
1. 0 – 20 tahun
2
2,2
2. 21 – 40 tahun
37
40,2
3. 41 – 60 tahun
31
33,7
4. 61 – 80 tahun
22
23,9
N
%
1. Lulus SD
68
73,9
2. Lulus SMP
13
14,1
3. Lulus SMA
5
5,4
4. Sarjana
5
5,4
5. Diploma
1
1,1
Tabel 3. Pendidikan (n = 92)
Pendidikan
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
44
Tabel 4. Pekerjaan (n = 92)
C.
Pekerjaan
N
%
1. Tidak bekerja
2
2,2
2. Petani
16
17,4
3. Buruh
4
4,3
4. Ibu Rumah Tangga
44
47,8
5. PNS
5
5,4
6. Guru
3
3,3
7. Pedagang
14
15,2
8. Swasta
2
2,2
9. Supir
2
2,2
Hasil Penelitian
Dari keseluruhan sampel, didapatkan hasil serologi IgG Antraks
menunjukkan 53,3% negatif, 16,3% borderline dan 30,4% positif. Hasil
serologi IgG Antraks in i dapat dilihat pada Tabel 5.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
45
Tabel 5. Hasil Serologi IgG Antraks
N
%
1. Positif
28
30,4
2. Borderline
15
16,3
3. Negatif
49
53,3
Variabel
Pada hasil analisis tabel silang antara faktor risiko berupa riwayat
kontak dengan hasil serologi IgG Antraks didapatkan sampel yang
memasak sekaligus memakan memiliki risiko paling tinggi pada hasil
serologi yang positif 11,6 %. Hasil serologi IgG Antraks dihubungkan
dengan bentuk riwayat kontak dapat dilihat pada Tabel 6.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
46
Tabel 6. Hasil Serologi IgG Antraks Dihubungkan dengan Riwayat
Kontak
Hasil Sero logi Elisa
Riwayat Kontak
1. Mencuci
Positif
Borderline
Negatif
0
1
5 (5,4%)
16 (17,4%)
1
0
6 (6,5%)
19 (20,7%)
2
9
0
2
1
2
15
49
0
2. Makan
8 (8,7%)
3. Mencuci dan memasak
3
4. Memasak dan memakan
11
5. Menyembelih dan memakan
(11,6%)
6. Berada d i sekitar kandang
5 (5,4%)
7. Mencuci dan memakan
0
1
Jumlah
28
Dari keseluruhan sampel, terdapat 7,6 % sampel menunjukkan
manifestasi klinis di ku lit yaitu munculnya vesikel, disertai demam dan
ulkus yang berakhir dengan terbentuknya eschar, serta pembesaran
kelenjar limfe regional. Manifestasi klin is di kulit tersebut dapat dilihat
pada Tabel 7.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
47
Tabel 7. Manifestasi Klinis di Kulit Berupa Eschar
N
%
1. Ada
7
7,6
2. Tidak ada
85
92,4
Manifestasi Kulit
Sebanyak 6,5% sampel dengan hasil serologi IgG Antraks positif
menunjukkan adanya manifestasi klinis kulit berupa timbulnya eschar,
sedangkan hanya 1,1% sampel dengan hasil serologi borderline yang
menunjukkan manifestasi kulit. Sebanyak 23,9% sampel dengan hasil
serologi IgG Antraks positif, tidak menderita manifestasi klinis di kulit
berupa eschar maupun manifestasi klinis yang lain seperti demam,
myalgia, batuk, sesak napas, mual dan muntah. Hasil serologi IgG Antraks
dihubungkan dengan manifestasi klinis di kulit dapat dilihat pada Tabel 8.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
48
Tabel 8. Hasil Serologi IgG Antraks Dihubungkan dengan Manifestasi
Klinis Kulit berupa Eschar
Hasil Sero logi ELISA
Eschar
1. Ada
2. Tidak
Jumlah
Positif
Negatif
Borderline
6 (6,5%)
0
1 (1,1%)
22 (23,9%)
14 (15,2%)
49 (53,3%)
28
15
49
Faktor risiko kontak terhadap munculnya manifestasi klinis di
kulit, terutama pada sampel yang menyembelih sekaligus memakan daging
sapi antraks tersebut (4,3%), kemudian diikuti dengan yang mencuci dan
memasak daging, yaitu 2,2 %. Sedangkan yang memasak dan memakan
adalah 1,1%. Uji korelasi antara riwayat kontak dengan manifestasi klin is
di ku lit berupa eschar didapatkan hasil dengan p < 0,05 yang artinya
terdapat hubungan yang bermakna anta riwayat kontak dengan manifestasi
klinis. Hal ini dapat dilihat di Tabel 9.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
49
Tabel 9. Hubungan antara Riwayat Kontak dengan Manifestasi Klinis di
Kulit Berupa Eschar
Eschar
Riwayat Kontak
Ada
Tidak ada
1. Mencuci
0
1 (1,1%)
2. Memakan
0
29 (31,5%)
3. Mencuci dan memasak
2 (2,2%)
2 (2,2%)
4. Memasak dan memakan
1 (1,1%)
35 (38%)
5. Menyembelih dan memakan
4 (4,3%)
12 (13%)
6. Berada d i sekitar kandang
0
2 (2,2%)
7. Mencuci dan memakan
0
4 (4,3%)
7
85
Jumlah
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
41
BAB V
PEMBAHASAN
Pada kejadian luar biasa antraks yang terjadi di Kabupaten Boyolali ini,
peneliti mendapati 7 orang (7,6%)
penduduk mengalami manifestasi klinis
antraks kutaneus dari total 92 penduduk yang menjadi sampel dalam penelitian.
Manifestasi klinis ini berupa ulserasi yang tertutup eschar kehitaman dengan
pembesaran kelenjar limfe di dekat lesi dan demam.
Kemudian sampel darah dari 92 penduduk dilakukan pemeriksaan serologi
IgG Antraks dengan metode ELISA. Dasar dari metode pemeriksaan dengan
ELISA ini adalah identifikasi ikatan antigen dan antibodi spesifik, dalam hal ini
antigen Bacillus antrachis. Hasil pemeriksaan yang dilakukan di Laboratorium
Biomedik Fakultas Kedokteran UNS menunjukkan bahwa 53,3% sampel darah
negatif mengandung imunoglobulin G Antraks, 16,3 % borderline dan 30,4 %
positif.
Penelitian terdahulu menunjukkan bahwa ELISA merupakan metode
standar untuk mengukur anti Protektif Antigen IgG pada serum darah manusia.
Setelah kasus penyerangan bioterorisme yang terjadi tahun 2001 di Amerika
Serikat, ELISA menjadi pemeriksaan yang penting dalam mendiagnosis kasus
antraks kutaneus karena merupakan satu-satunya pemeriksaan laboratorium yang
dapat menunjukkan hasil positif (Biagini et al., 2006).
Penelitian lain mengenai antraks yang pernah dilakukan pada daerah
kejadian luar biasa (outbreak) adalah dengan menggunakan Direct Fluorescent
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
42
Antibody Assay (DFA) dengan dua komponen yaitu kapsul dan dinding sel yang
spesifik untuk konfirmasi Bacillus anthracis yang berkapsul (Natalia et al., 2007).
Enam dari tujuh penduduk yang mengalami manifestasi klinis antraks
kutaneus juga menunjukkan hasil sampel darah yang positif mengandung IgG
spesifik antraks. Sisanya yaitu 1 orang penduduk menunjukkan hasil serologi
terhadap IgG spesifik antraks borderline yang artinya perlu dilakukan
pemeriksaan lebih lanjut untuk mengkonfirmasi hasil pemeriksaan serologi ini.
Penelitian mengenai meningkatnya titer antibodi anti Protektif Antigen pada
infeksi klinis o leh Bacillus anhtracis dan vaksinasi antraks telah dilakukan oleh
Biagini et al. (2004). Pada penelitian ini dilakukan pemeriksaan terhadap IgG
anti antraks karena mempertimbangkan waktu pengambilan sampel darah yaitu 3
bulan setelah terjadinya infeksi antraks. Hal in i sesuai dengan onset kenaikan IgG
anti antraks.
Pada hasil uji dengan analisis Chi Square, didapatkan hubungan yang
bermakna antara hasil serologi IgG Antraks dengan manifestasi klinis (dalam hal
ini pada antraks kutaneus) dengan nilai p yaitu 0,003 (p < 0,05). Sebagai
pembanding, peneliti melakukan Uji Spearman dan mendapatkan hasil bahwa
terdapat hubungan antara Hasil Serologi IgG Antraks yang dinyatakan dalam
satuan titer IgG dengan Manifestasi Klinis yang timbul. Hasil ini bermakna secara
statistik dengan nilai p sebesar 0,000. Hal ini sesuai dengan penelitian Quinn et al.
(2004), bahwa 11 hari setelah onset akan terjadi peningkatan anti Protektif
Antigen (PA) IgG pada 16 dari 17 pasien klinis antraks. Anti PA IgG akan terus
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
43
meningkat 8 sampai 16 bulan setelah onset pada 6 pasien antraks inhalasi dan 7
dari 11 pasien antraks kutaneus.
Karena peneliti menduga terdapat hubungan langsung antara Titer IgG
dengan Manifestasi Klinis sehingga dilakukan Uji Regresi Logistik untuk
mengetahui Odds Ratio dan R Square. Uji Regresi Logistik dengan persamaan
Log (y) = a + expb (x) menunjukkan bahwa dengan tanpa memperhitungkan
pengaruh faktor luar, nilai Odds Ratio yang didapatkan adalah 0,086. Prediksi ini
signifikan secara statistik dengan nilai signifikansi 0,002. Ukuran pengaruh
variabel bebas terhadap variabel terikat ditunjukkan dengan menggunakan Odds
Ratio (OR) = exp ( ) dan Confidence Interval 95%. Dengan interpretasi:
OR = 1, artinya tidak ada pengaruh (tidak ada perubahan risiko)
OR > 1, artinya ada pengaruh positif (meningkatkan risiko)
OR < 1, artinya ada pengaruh negatif (menurunkan risiko).
Bila OR makin menjauhi nilai nol, maka secara statistik pengaruh tersebut makin
bermakna (Murti, 2010). Sehingga dapat dipahami bahwa dengan kenaikan satu
unit titer IgG berperan menurunkan kemungkinan munculnya manifestasi klinis
sebesar 0,082 kali. Dalam arti lain, kenaikan titer IgG berperan protektif dalam
infeksi antraks. Hasil uji ini diharapkan dapat menjelaskan mengapa dua puluh
dua sampel dengan hasil serologi IgG antraks positif tidak menimbulkan
manifestasi klinis. Namun daya tahan tubuh per individu, faktor virulensi bakteri
dan jumlah paparan yang terjadi dapat juga mempengaruhi variasi hasil di
lapangan.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
44
Hasil uji di atas juga disertai dengan Nagelkerke S Square sebesar 43,3%
yang menunjukkan bahwa terjadinya kenaikan satu unit titer IgG dapat
menurunkan kemungkinan munculnya manifestasi klinis sebesar 0.086 kali di
lapangan hanya terjadi pada 43% kasus. Pada 56,7% sisanya terjadi variasi kasus
sehingga timbulnya manifestasi klinis ini tidak d ipengaruhi Titer IgG. Hal ini
signifikan secara statistik dengan nilai signifikansi 0.000.
Risiko berupa riwayat kontak langsung yaitu memasak dan memakan
daging hewan yang terinfeksi antraks, pada 11,6% sampel menunjukkan hasil IgG
Antraks yang positif, tetapi hanya 1,1% sampel mengalami manifestasi klinis
dengan munculnya eschar. Hal ini mungkin disebabkan oleh daya tahan tubuh
perorangan, cara memasak yang benar sehingga bakteri dapat mati ketika dimasak
dalam suhu tinggi dan faktor virulensi Bacillus anthracis yang menginfeksi tubuh.
Risiko berupa riwayat kontak lan gsung yaitu memakan saja daging hewan yang
terinfeksi antraks, pada 8,7% responden menunjukkan hasil positif, tetapi tidak
menimbulkan manifestasi klinis berupa eschar (0%). Sedangkan faktor risiko
menyembelih dan memakan 4,3% bermanifestasi klinis pada kulit berupa eschar.
Hal ini sesuai dengan hasil penelitian Basri et al. (2010), yang menyatakan dengan
menyentuh hewan ternak yang terinfeksi antraks meningkatkan risiko 6 kali untuk
terkena antraks kulit dibandingkan dengan yang tidak menyentuh dan menangani
hewan yaitu 5 kali berisiko terkena antraks kulit.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
BAB VI
SIMPULAN DAN SARAN
A. Simpulan
Dari hasil penelitian mengenai hubungan antara hasil serologi IgG
antraks dengan manifestasi klinis yang timbul pada kejadian luar biasa
antraks di Boyolali, dapat disimpulkan sebagai berikut:
1. Hasil serologi IgG antraks pada kejadian luar biasa antraks di Boyolali
adalah 53,3% negatif, 30,4% positif dan 16,3% borderline.
2. Terdapat hubungan antara hasil serologi IgG antraks dengan manifestasi
klin is yang timbul pada kejadian luar biasa antraks di Boyolali.
3. Peningkatan setiap 1 satuan unit titer serologi IgG antraks berpengaruh
menurunkan kemungkinan munculnya manifestasi klinis antraks kutaneus
(protektif).
B. Saran
1. Titer antibodi dapat dijadikan acuan dalam pemeriksaan penyakit antraks
dalam hubungannya dengan manifestasi klinis yang timbul.
2. Diperlukan
penelitian
lebih
lanjut
mengenai
mempengaruhi hasil serologi IgG antraks.
54
faktor-faktor
yang