IMUNOGENISITAS Aeromonas hydrophila STRAIN GK
advertisement
IMUNOGENISITAS Aeromonas hydrophila STRAIN GK – 01 DAN GB – 01 TERHADAP LELE DUMBO (Clarias gariepinus) SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana (S1) Oleh: SITI NURFAIDAH 1101070011 PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2015 i ii Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 iii Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 iv Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 IMUNOGENISITAS Aeromonas hydrophila STRAIN GK-01 DAN GB-01 TERHADAP LELE DUMBO (Clarias gariepinus) Siti Nurfaidah 1101070011 Bakteri Aeromonas hydrophila adalah bakteri yang menyebabkan penyakit Motile Aeromonas Septicemia (MAS). Bakteri A. hydrophila dapat menyerang berbagai jenis ikan air tawar seperti gurami, patin, nila, tidak terkecuali ikan lele, baik lokal maupun lele dumbo. Pencegahan penyakit pada ikan dapat dilakukan dengan menggunakan obat – obatan dan antibiotik. Namun, penggunaan obat obatan dan antibiotik secara berkelanjutan berdampak negatif terhadap lingkungan, kesehatan konsumen, dan timbulnya mikroorganisme resisten. Untuk mengurangi dampak penggunaaan antibiotik tersebut diperlukan pencegahan penyakit dengan cara vaksinasi. Bakteri A. hydrophila memiliki banyak strain atau tipe apabila dibuat vaksin dan memiliki kemampuan dalam menghasilkan kekebalan atau imunitas (imunogenisitas) yang berbeda – beda. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengkaji imunogenisitas bakteri A. hydrophila strain GK -01 dan GB-01 terhadap lele dumbo dan mengkaji imunogenisitas bakteri A. hydrophila yang terbaik terhadap lele dumbo. Penelitian ini dilaksanakan bulan November 2014 sampai Maret 2015, di Laboratorium Mikrobiologi dan Zoologi, UMP. Ikan uji yang digunakan yaitu lele dumbo yang berumur ± 2 bulan dengan panjang 1013 cm dan berat 10,4-12,9 gram. Metode yang digunakan adalah eksperimental menggunakan Rancangan Acak lengkap (RAL) dengan 3 perlakuan, 5 kali ulangan. Perlakuan yang diberikan yaitu P1 (vaksin GK-01), P2 (vaksin GB-01) dan P3 (non vaksin). Parameter yang diamati yaitu titer antibodi dan uji reaksi silang serta parameter pendukung yaitu kualitas air (pH, DO (Dissolved Oxygen) dan suhu). Data dianalisis menggunakan Analysis of Variance (ANOVA) dengan tingkat kepercayaan 95%, apabila menunjukkan perbedaan yang nyata dilakukan uji lanjut pada Duncan Multiple Range Test (DMRT) dengan tingkat kepercayaan 95% untuk melihat pengaruh antar perlakuan. Data uji reaksi silang dan kualitas air dianalisis secara deskriptif. Hasil pengukuran titer antibodi menunjukkan bahwa penggunaan strain GK -01 dan GB-01 dapat meningkatkan sistem imun ikan lele dumbo. Perlakuan yang terbaik yaitu strain GB-01, hasil uji reaksi silang menunjukkan kedua strain tersebut bereaksi positif sehingga kedua strain tersebut dapat dijadikan vaksin. Kualitas air selama penelitian pada kisaran optimal yaitu, suhu air 27-29,40 C, pH air 7,7-8,0, dan oksigen terlarut 5,3-6,8 mg/L. Kata kunci : Aeromonas hydrophila, GK-01, GB-01, imunogenisitas, lele dumbo, vaksin v Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 MOTTO Kebenaran itu adalah dari Tuhanmu, sebab itu jangan sekali-kali kamu termasuk orang-orang yang ragu. (Q.S.Al- Baqarah 2: 147) Dan di antara manusia ada orang yang mengorbankan dirinya karena mencari keridhaan Allah; dan Allah Maha Penyantun kepada hamba-hamba-Nya. (Q.S.Al- Baqarah 2: 207) Siapa yang menanam pasti akan mengetam, jadilah guru yang sekaligus murid ( KH. Achmad Dahlan) Jika keras terhadap diri sendiri, dunia akan lunak padamu. Bila lunak terhadap diri sendiri, dunia akan keras terhadapmu. (Andrie Wongso) Hadapilah setiap tantangan yang menghadang dengan lapang dada, seakan anda telah tersentuh gairah kemenangan (George S Patton) vi Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 HALAMAN PERSEMBAHAN Alhamdulilahirobil’ alamin puji syukur kepada Allah SWT yang telah memberikan segala macam kemudahan, kelancaran, serta memberi petunjuk dalam setiap langkah bagi penulis, sebab hanya dengan ridho –Mu penulis dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik. Skripsi ini penulis persembahkan untuk : 1. Kedua orang tuaku Bapak Susanto dan ibu Romilah tercinta yang selalu mencurahkan kasih sayang, memberikan semangat, motivasi dan doa yang tiada henti. Terima kasih atas semua yang sudah kalian berikan sampai saat ini. 2. Kakak dan adikku (Tohir Muzaki dan Nurul Khikmah) terimakasih atas motivasi dan do’a yang diberikan dalam penyelesaian skripsiku. 3. Budeku (Alm. Ibu Solikhah) yang semasa hidupnya selalu memberikan motivasi, nasehat, dan semangat semoga mendapatkan tempat yang terbaik disisi-Nya 4. Seluruh Keluarga besar yang selalu memberikan dukungan dan doa kepadaku. vii Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 UCAPAN TERIMA KASIH Alhamdulilahirobbil’alamin, puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, yang telah melimpahkan rahmat, karunia, taufik, serta hidayahnya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “IMUNOGENISITAS Aeromonas hydrophila STRAIN GK – 01 DAN GB – 01 TERHADAP LELE DUMBO (Clarias gariepinus)” . Penulis menyadari bahwa keberhasilan terselesainya penyusunan skripsi ini tak lepas dari peran dan dukungan dari berbagai pihak yang telah membantu penyususnan skripsi baik secara langsung maupun tidak langsung. Banyak kesulitan dan hambatan yang penulis hadapi dalam penyusunan skripsi ini, akan tetapi berkat do’a dan dorongan dari berbagai pihak maka skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik. Oleh sebab itu, dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada ibu Dini Siswani Mulia, S.Pi., M.Si dan bapak Drs. Heri Maryanto, M.Si., selaku Dosen Pembimbing yang telah berkenan membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Penulisan skripsi ini terwujud atas dukungan dan bantuan dari berbagai pihak, oleh karena itu ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada: 1. Drs. Ahmad, M.Pd. selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto 2. Drs. H. Arief Husin, M. Si, selaku ketua program Studi Pendidikan Biologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto viii Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 3. Dewan penguji skripsi Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto 4. Kedua orang tuaku Bapak Susanto dan ibu Romilah. Terima kasih untuk kasih sayang, do’a, dukungan, dan semangat yang kalian berikan 5. Kakakku Tohir Muzaki serta adikku Nurul Khikmah, terimakasih atas segala dukunganya. 6. Sahabat sepenelitian mba Mika Prawesjeki, terimakasih untuk kebersamaan kita selama ini. 7. Seluruh teman mahasiswa program studi pendidikan biologi angkatan 2011, terimakasih atas kerjasama dan motivasinya 8. Semua pihak yang telah membantu hingga skripsi ini terselesaikan. 9. Penulis berharap dan berdo’a semoga semua amal kebaikan yang telah diberikan oleh kalian semua mendapatkan balasan yang setimpal dari Allah SWT. Amin. Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi jauh dari sempurna, baik dari segi materi maupun penyusunannya. Mudah – mudahan skripsi ini dapat berguna bagi pembaca dan adanya kritik serta saran yang membangun dari pembaca sangat penulis harapkan. Purwokerto, 01 Agustus 2015 Penulis Siti nurfaidah ix Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 DAFTAR ISI Halaman UCAPAN TERIMA KASIH ......................................................................... ix DAFTAR ISI ................................................................................................... x DAFTAR TABEL .......................................................................................... xiv DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... xv DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xvi BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ........................................................................................ 1.2 Perumusan Masalah ................................................................................ 1.3 Tujuan Penelitan ..................................................................................... 1.4 Manfaat Penelitian .................................................................................. 1 5 5 5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Lele Dumbo............................................................................................. 2.2 Bakteri Aeromonas hydrophila ............................................................... 2.3 Karakteristik Isolat GK -01 & GB-01 ..................................................... 2.4 Vaksin .................................................................................................... 2.5 Imunogenisitas ........................................................................................ 2.6 Kualitas Air ............................................................................................. 7 9 11 13 15 17 BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ................................................................ 3.2 Alat dan Bahan Penelitian ...................................................................... 3.2.1 Alat.......... .................................................................................... 3.2.2 Bahan ........................................................................................... 3.3 Rancangan Penelitian ............................................................................. 3.4 Prosedur Penelitian ................................................................................. 3.4.1. Pembuatan Media Kultur Aeromonas hydrophila ..................... 3.4.2. Pembuatan Antigen Aeromonas hydrophila dari Isolat ............. 3.4.3. Persiapan Wadah ........................................................................ 3.4.4. Adaptasi Hewan Uji .................................................................. 3.4.5 Uji Imunogenesitas Pada Lele dumbo ........................................ 3.5 Parameter Yang Diamati ....................................................................... 3.5.1. Parameter Utama ....................................................................... 3.5.1.1. Titer Antibodi ......................................................................... 20 20 20 21 21 22 22 23 24 24 25 25 25 25 x Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 3.5.1.2. Uji Reaksi Silang .................................................................... 3.5.2. Parameter Pendukung ................................................................. 3.5.2.1. Suhu ........................................................................................ 3.5.2.2. Oksigen Terlarut atau DO (Dissolved Oxygen)....................... 3.5.2.3. pH ............................................................................................ Analisis Data .......................................................................................... 27 27 27 27 28 28 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Titer Antibodi .......................................................................................... 4.2 Uji Reaksi Silang ................................................................................... 4.3 Kualitas Air ............................................................................................. 4.3.1 Suhu ............................................................................................. 4.3.2 Oksigen terlarut atau DO (Dissolved Oxygen) ............................ 4.3.3 pH ................................................................................................ 29 34 35 36 37 37 BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan .................................................................................................. 5.2 Saran..... .................................................................................................... 38 38 DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... LAMPIRAN .................................................................................................... 39 43 3.6 xi Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 DAFTAR TABEL Nomor Judul Halaman Tabel 2.3. Karakterisitik Isolat GK-01 & GB-01 ............................................. 11 Tabel 4.1. Titer Antibodi sebelum ikan divaksin (minggu ke – 0) .................. 29 Tabel 4.2. Titer Antibodi pada saat akan dibooster (minggu ke – 1) ............. 30 Tabel 4.3. Titer Antibodi satu minggu setelah booster (minggu ke - 2) ......... 30 Tabel 4.4. Titer antibodi dua minggu setelah booster (minggu ke - 3) .......... 31 Tabel 4.5. Titer antibodi tiga minggu setelah booster (minggu ke - 4) .......... 31 Tabel 4.6. Data uji reaksi silang .................................................................... 34 Tabel 4.7. Data pengamatan kualitas air .......................................................... 35 xii Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 DAFTAR GAMBAR Nomor Judul Halaman Gambar 3.1. Tata letak ember pemeliharan pada masing – masing perlakuan 21 Gambar 4.1. Data pengukuran titer antibodi .................................................... 33 xiii Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015 DAFTAR LAMPIRAN Nomor Judul Halaman Lampiran 1. Data titer antibodi pada masing – masing perlakuan .................. 44 Lampiran 2. Data titer antibodi transformasi logaritma 2 .............................. 45 Lampiran 3. Analisis varians dan uji DMRT titer antibodi minggu I ............. 46 Lampiran 4. Analisis varians dan uji DMRT titer antibodi minggu II .......... 48 Lampiran 5. Analisis varians dan uji DMRT titer antibodi minggu III .......... 50 Lampiran 6. Analisis varians dan uji DMRT titer antibodi minggu IV .......... 52 Lampiran 7. Foto selama penelitian ................................................................ 54 xiv Imunogenisitas Aeromonas hydrophila..., Siti Nurfaidah, FKIP UMP, 2015
