efek pemberian ekstrak nigella sativa terhadap kadar glukosa darah

EFEK PEMBERIAN EKSTRAK NIGELLA SATIVA
TERHADAP KADAR GLUKOSA DARAH DAN
KOLESTEROL PADA TIKUS DIABETES MELLITUS
YANG DIINDUKSI DENGAN STREPTOZOTOCIN
Laporan Penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
SARJANA KEDOKTERAN
OLEH :
Fahrizal Haris Harahap
1111103000027
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH
JAKARTA
1435 H/ 2014 M
ii
iii
iv
KATA PENGANTAR
Assalamualaikum wr.wb.
Puji serta syukur saya panjatkan kehadirat Allah SWT, karena atas segala
rahmat dan karunia-Nya saya dapat menyelesaikan penelitian ini. Shalawat serta
salam semoga tetap tercurah limpahkan pada Nabi besar Muhammad SAW,
beserta keluarganya, sahabatnya, serta umatnya.
Alhamdulillah penelitian penelitian ini dapat diselesaikan dengan baik.
Banyak sekali bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak dalam menyelesaikan
penelitian ini. Oleh karena itu, saya mengucapkan banyak terima kasih kepada:
1. Prof. DR. (hc) dr. M.K. Tadjudin, Sp. And selaku Dekan FKIK UIN Syarif
Hidayatullah Jakarta.
2. dr. Witri Ardini, M.Gizi, SpGK selaku Ketua Program Studi Program
Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta, serta
seluruh dosen Program Studi Pendidikan Dokter yang selalu membimbing
serta memberikan ilmu kepada saya selama menjalani masa pendidikan di
Program Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
3. dr. Djauhari Widjajakusumah, AIF, PFK dan Nurlaely Mida R, M.
Biomed, DMS selaku dosen pembimbing penelitian saya, yang selalu
membimbing, mendidik dan mengarahkan saya dalam menyelesaikan
penelitian ini dengan baik.
4. Kedua orang tua saya yang tercinta, H.Syaparuddin Harahap,SP dan Hj.
Laila Suaidah Nasution SKM. yang selalu memberikan kasih sayang dan
cinta tulus, memberikan doa, nasihat, serta semangat dalam hidup saya.
5. Kakak saya, Muhammad Syadli Harahap, adik saya Anugerah majid
Harahap, Mahmul Fadhillah Harahap, dan Aldi Irfansyah Harahap yang
menjadi penyemangat hidup saya dan banyak membantu saya dan
memberikan masukan dalam penelitian ini
v
6. Drg. Laifa Annisa Hendarmin, Ph.D selaku penanggungjawab (PJ)
laboratorium Riset. Ibu Nurlaely Mida R, M. Biomed, DMS selaku PJ
Animal house, Ibu Endah Wulandari, M.Biomed selaku PJ laboratorium
Biokimia dan Ibu Ayu selaku ketua laboratorium yang telah memberikan
izin atas penggunaan lab pada penelitian ini.
7. Untuk teman seperjuangan penelitian, Fadel Askary, Pathurrahman
Nasution dan Annisa Mardhiyah.
8. Seluruh mahasiswa PSPD 2011 FKIK UIN dan semua teman serta sahabat
saya
9. Laboran yang terlibat Ibu Ai, Ibu Lilis, Mas Rachmadi. Juga pada Mas
Haris, Mas Panji yang sangat membantu berlangsungnya penelitian ini
Saya sangat mengharapkan kritik dan saran dalam penelitian ini agar dapat
terus dilanjutkan kepada adik-adik di angkatan selanjutnya. Karena penelitian
ini masih jauh dari kesempurnaan.
Demikian laporan penelitian ini saya tulis, semoga dapat memberikan manfaat
bagi penulis khususnya dan para pembaca pada umumnya.
Jakarta, 15 September 2014
Penulis
vi
ABSTRAK
Fahrizal Haris Harahap. Program Studi Pendidikan Dokter. Efek Pemberian
Ekstrak Kayu Nigella sativa terhadap Glukosa Darah Dan Kolesterol Tikus
Diabetes Mellitus yang Diinduksi Streptozotocin. 2014.
Diabetes Mellitus (DM) adalah suatu penyakit metabolik kronis dimana kadar
glukosa di dalam darah tinggi karena tubuh tidak dapat melepaskan atau
menggunakan insulin secara adekuat yang dapat disebabkan gangguan sekresi
insulin oleh sel beta pankreas atau resistensi insulin pada jaringan yang memiliki
reseptor insulin. DM juga ditandai dengan gangguan metabolime protein, dan
lemak. Penelitian oleh Kocygit (2009) diketahui bahwa ekstrak Nigella sativa
dapat menurunkan kadar glukosa darah dan kolesterol. Penelitian ini
menggunakan metode eksperimental dengan memberikan ekstrak Nigella sativa
dengan dosis 300 mg/kgbb/hari pada tikus DM strain Sprague dowley yang
diinduksi Streptozotocin selama 21 hari. Tikus dibagi ke dalam 3 kelompok.
Kelompok I sebagai kelompok kontrol negatif. Kelompok II sebagai kontrol
positif dan Kelompok III sebagai kelompok perlakuan yang diberikan ekstrak
Nigella sativa. Hasil penelitian didapatkan kadar glukosa darah menurun 28,6%
pada kelompok perlakuan dan hasil yang bermakna secara statistik. Hasil data
kolesterol pada penelitian ini menunjukkan perbedaan yang signifikan secara
statistik pada setiap kelompok. Dapat disimpulkan bahwa ekstrak Nigella sativa
dapat mempengaruhi kadar glukosa darah dan kolesterol terhadap tikus diabetes
mellitus strain Sprague dawley yang diinduksi Streptozotocin.
Kata kunci: DM, glukosa darah, kolesterol, Nigella sativa. Sprague dawley.
ABSTRACT
Fahrizal Haris Harahap. Medical Education Study Programme. Effect of
Nigella sativa Administration to Blood Glucose and Cholesterol Level of
Streptozotocin-Induced Diabetic Sprague dawley mice. 2014
Diabetes mellitus (DM) is a chronic metabolic disease mainly characterized by
high level of blood glucose due to lack of insulin secretion from the beta cells of
pancreas and/or resintency on insulin regulatable tissues. Ultimately, protein and
fat metabolisms are also affected by the disease. Study by Kocygit (2009)
approved Nigella sativa extract ability in lowering glucose and cholesterol blood
concentration. This study had purposed to find out the significance of
aforementioned properties using experimental method. Extract of Nigella sativa
seed with a dose of 300 mg/kg was administrated once per day to Sprague Dawley
mice. Prior to the administration, the mice were given STZ for 21 days to induce
diabetes mellitus. The mice were split to 3 groups: Group I as negative control.
Group II as positive control with DM and group III as experimental group with
Nigella sativa seed extract. Blood glucose level decrement as much as 28.6% was
found on the experimental and statistically significant. Cholesterol level changes
on every group and statistically significant. In conclusion, the administration of
vii
Nigella sativa seed extract could affect blood glucose and cholesterol level of
Streptozotocin induced diabetic Sprague dawley mice.
Key words: DM, blood glucose, cholesterol, Nigella sativa, Sprague dawley.
viii
DAFTAR ISI
LEMBAR PERNYATAAN ............................................................................
LEMBAR PERSETUJUAN ...........................................................................
LEMBAR PENGESAHAN .............................................................................
KATA PENGANTAR .....................................................................................
ABSTRAK ........................................................................................................
DAFTAR ISI ....................................................................................................
DAFTAR TABEL ............................................................................................
DAFTAR GRAFIK ........................................................................................
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................
DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................
Ii
iii
iv
v
vii
ix
xi
xii
xiii
xiv
BAB 1 PENDAHULUAN
1.1 Latar belakang ..................................................................................
1.2 Rumusan masalah .............................................................................
1.3 Hipotesis ...........................................................................................
1.4 Tujuan penelitian ..............................................................................
1.4.1 Tujuan umum ..........................................................................
1.4.2 Tujuan khusus .........................................................................
1.5 Manfaat penelitian ............................................................................
1.5.1 Bagi institusi ............................................................................
1.5.2 Bagi peneliti ...........................................................................
1.5.3 Bagi masyarakat ......................................................................
1
3
3
3
3
3
3
3
4
4
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Landasan teori ...................................................................................
2.1.1 Diabetes Mellitus (DM) ...........................................................
2.1.2 Klasifikasi DM .......................................................................
2.1.3 Epidimiologi DM.....................................................................
2.1.4 Fisiologi Insulin ......................................................................
2.1.5 Sintesis Kolesterol....................................................................
2.1.6 Patofisiologi DM ....................................................................
2.1.7 Kolesterol pada DM.................................................................
2.1.8 Diagnosis DM..........................................................................
2.1.10 Komplikasi DM ...................................................................
2.1.11 Tatalaksana DM ....................................................................
2.1.12 Streptozotocin ….................................................................
2.1.13 Habbatusauda (Nigella sativa) ………………………..............
2.2 Kerangka Teori .................................................................................
2.3 Defenisi Operasional..........................................................................
2.4 Kerangka konsep ...............................................................................
5
5
5
5
7
9
10
14
14
15
16
17
18
22
23
24
ix
BAB 3 METODE PENELITIAN
1.1 Disain Penelitian ...............................................................................
1.2 Waktu dan Tempat Penelitian ...........................................................
1.2.1 Waktu Penelitian .................................................................
1.2.2 Tempat Penelitian ...............................................................
1.3 Populasi dan Sampel Penelitian .......................................................
1.3.1 Kriteria Inklusi....................................................................
1.3.2 Kriteria eksklusi..................................................................
1.4 Cara Kerja Penelitian .......................................................................
1.4.1 Alat Penelitian .........................................................................
1.4.2 Bahan Penelitian ......................................................................
1.4.3 Adaptasi Hewan Sampel .........................................................
1.4.4 Induksi Tikus dengan Streptozotocin ......................................
1.4.5 Pemberian Ekstrak Nigella sativa ...........................................
1.4.6 Pengukuran Sampel .................................................................
3.4.6.1 Glukosa Darah .............................................................
3.4.6.2 Kolesterol ..................................................................
1.5 Pengolahan dan Analisis Data .........................................................
1.6 Alur Penelitian …………….............................................................
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Glukosa Darah .................................................................................
4.2 Kolesterol ........................................................................................
4.3 Keterbatasan Penelitian .....................................................................
BAB 5 SIMPULAN DAN SARAN
5.1 Simpulan ...........................................................................................
5.2 Saran ..................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................
LAMPIRAN .....................................................................................................
x
25
25
25
26
26
26
26
26
27
27
27
27
27
28
28
29
30
32
35
36
36
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Kriteria Diagnosis DM …….............................................................
Tabel 2.2 Taksonomi Nigella sativa ……………………………...................
Tabel 2.3 Kandungan Asam Lemak pada Biji Nigella sativa ..........................
Tabel 4.1 Rerata Glukosa darah tikus pada tiap kelompok..........................
Tabel 4.2 Hasil Analisa Data Glukosa darah setiap Kelompok Penelitian ......
Tabel 4.3 Hasil Analisa Kolesterol Tikus Setiap Kelompok Penelitian...........
Tabel 4.4 Hasil Statistik One Way Anova Kolesterol Kelompok Penelitian....
xi
14
19
19
30
31
32
33
DAFTAR GRAFIK
Grafik 4.1 Rata-rata Glukosa Darah Tikus Setiap Kelompok Penelitian........... 31
Grafik 4.2 Rerata Kolesterol Tikus Setiap Kelompok Penelitian....................... 33
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Pulau Langerhans .........................................................................
Gambar 2.2 Pengaruh Glukosa darah terhadap sekresi insulin.........................
Gambar 2.3 Transpor kolestrol di jaringan tubuh manusia..................... .........
Gambar 2.4 Metabolisme Lipoprotein pada resistensi insulin..........................
Gambar 2.5 Struktur kimia STZ ......................................................................
Gambar 6.1 Surat keterangan tikus sehat .........................................................
Gambar 6.2 Surat hasil determinasi tanaman ...................................................
Gambar 6.3 Surat hasil pengujian ekstrak ........................................................
Gambar 6.4 Sampel ..........................................................................................
Gambar 6.5 Pengukuran BB .............................................................................
Gambar 6.6 Induksi STZ pada sampel .............................................................
Gambar 6.7 Pemberian ekstrak Nigella sativa .................................................
Gambar 6.8 Pengambilan glukosa darah sampel .............................................
Gambar 6.9 Proses sacrificed dan pengambilan darah sampel ........................
Gambar 6.10 Proses pengambilan serum dari darah ........................................
Gambar 6.11 Proses sentrifugasi .....................................................................
Gambar 6.12 Alat centrifuge ............................................................................
Gambar 6.13 Freezer ......................................................................................
Gambar 6.14 Streptozotocin ............................................................................
Gambar 6.15 Hasil Uji ELISA ........................................................................
xiii
7
8
10
13
17
41
42
43
50
50
50
50
50
50
51
51
51
51
51
51
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Surat Keterangan Tikus Sehat ......................................................
Lampiran 2 Hasil Determinasi Tanaman .........................................................
Lampiran 3 Surat Hasil Pengujian Ekstrak .....................................................
Lampiran 4 Data Awal Kelompok Penelitian .................................................
Lampiran 5 Data Hasil Uji Statistik .................................................................
Lampiran 6 Gambar Proses Penelitan ..............................................................
Lampiran 7 Cara Perhitungan ..........................................................................
Lampiran 8 Data kolesterol...............................................................................
Lampiran 9 Riwayat Penulis ............................................................................
xiv
41
42
43
44
46
50
52
54
55
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Diabetes mellitus (DM) merupakan kelompok penyakit metabolik dengan
karakteristik hiperglikemia yang muncul karena gangguan sekresi insulin, kerja
insulin atau kedua-duanya. Diagnosis DM ditegakkan bila ada keluhan khas DM
berupa poliuria, polidipsia, polifagia, dan penurunan berat badan yang tidak dapat
dijelaskan penyebabnya.1,2
Penderita DM di seluruh dunia dari tahun ke tahun mengalami
peningkatan. Menurut Federasi Diabetes Internasional (IDF), penduduk dunia
yang menderita DM sudah mencapai 197 juta jiwa, dengan angka kematian sekitar
3,2 juta orang. DM merupakan salah satu penyakit gaya hidup yang paling umum.
DM tipe 2 memiliki prevalensi global 2,8% pada tahun 2000 dan diproyeksikan
menjadi 4,4% pada tahun 2030.3
Menurut penelitian epidemiologi yang sampai saat ini dilaksanakan di
Indonesia, prevalensi diabetes di Indonesia pada tahun 2010 yaitu 8,4 juta dari
230 juta jiwa, dan jumlahnya melebihi 21,3 juta jiwa pada tahun 2030 mendatang.
Jumlah tersebut menjadikan angka diabetes di Indonesia sebagai angka peringkat
keempat penderita diabetes terbesar setelah China, India, dan Amerika.4
DM dapat menimbulkan berbagai komplikasi yang mempengaruhi kualitas
hidup penyandangnya sehingga perlu mendapatkan perhatian serius dari semua
pihak, mengingat penyakit metabolik ini dapat mengenai laki-laki maupun
perempuan dari semua umur baik pada anak, remaja, dewasa maupun usia lanjut.
Gejala-gejala akut DM disebabkan oleh efek insulin yang tidak adekuat. Karena
insulin adalah satu-satunya hormon yang dapat menurunkan kadar glukosa darah,
salah satu gambaran DM yang paling menonjol adalah peningkatan kadar glukosa
darah atau hiperglikemia.5,6
Pengobatan dengan tanaman di Indonesia sering menjadi terapi alternatif
yang diyakini mampu menyembuhkan berbagai gangguan kesehatan, sehingga
sangat penting diketahui seberapa besar tanaman dapat dimanfaatkan sebagai
1
2
obat. Untuk pengelolaan DM banyak dipilih banyak dipilih pemanfaatan tanaman
herbal. Salah satu tanaman herbal yang diyakini masyarakat adalah Nigella sativa
(NS) karena diyakini sangat berkhasiat dan mempunyai banyak efek farmakologis
bila diberikan pada dosis yang tepat.7
Nigella sativa atau yang lebih dikenal di Indonesia dengan nama jintan
hitam merupakan tumbuhan obat dari family Ranunculaceae. Banyak memiliki
efek farmakologi yaitu anti diabetes, analgesik, anti inflamasi, anti mikroba, dan
anti kanker. Ekstrak NS dapat menurunkan kadar glukosa darah mendekati normal
pada tikus diabetes. Di Indonesia NS sulit tumbuh optimal karena butuh dataran
700 meter di atas permukaan laut. Namun untuk mendapatkannya sangatlah
mudah karena telah diperjual-belikan secara luas dan telah dibudidayakan oleh
petani secara terbatas di beberapa perkebunan di Indonesia.8
A. M. Mohamed et al (2009) melakukan uji bubuk biji Nigella sativa pada
mencit yang diinduksi STZ memberikan efek menurunkan glukosa darah dan
fruktosamin serta kadar hemoglobin dan albumin, sehingga berpotensi sebagai
antidiabetik maupun antiglikosilasi.
Pada pasien DM terjadi gangguan metabolisme lipid, yang menyebabkan
munculnya gejala dislipidemia dikarenakan gangguan pada proses lipogenesis dan
lipolisis. Salah satu tanda dislipidemia yang terjadi pada pasien DM adalah
terjadinya peningkatan kadar kolesterol di dalam darah.9 Dari berbagai penelitian
mengenai pengaruh NS disebutkan bahwa NS memiliki efek penurunan kadar
kolesterol dan efek antioksidan dengan menghambat kerja enzim HMG KoA
reduktase.9,10
Di Indonesia oleh beberapa kelompok masyarakat NS masih dipercaya
sebagai alternatif terapi dalam penanganan DM. Penelitian mengenai efek ekstrak
NS terhadap kadar glukosa darah dan kolesterol total belum banyak dilakukan di
Indonesia, sehingga peneliti tertarik untuk mempelajari lebih dalam mengenai
efek NS dalam mempengaruhi kadar glukosa darah dan kolesterol.
3
1.2. Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang dapat dirumuskan masalah pada penelitian ini
adalah:
Bagaimana efek pemberian ekstrak Nigella sativa terhadap kadar glukosa
darah dan kolesterol tikus diabetes mellitus strain Sprague dawley yang
diinduksi STZ?
1.3. Hipotesis
Ekstrak Nigella sativa
dapat mempengaruhi kadar glukosa darah dan
kolesterol tikus Sprague dawley DM yang diinduksi dengan STZ.
1.4.
Tujuan
1.4.1. Tujuan Umum
Mengetahui efek ekstrak Nigella sativa terhadap kadar glukosa darah dan
kolesterol pada tikus Sprague dawley DM yang diinduksi STZ.
1.4.2
Tujuan Khusus
Mengetahui efek pemberian ekstrak Nigella sativa dosis 300 mg/kgbb/hari
dalam waktu 21 hari secara oral terhadap kadar glukosa darah dan
kolesterol pada tikus Sprague dawley DM yang diinduksi STZ.
1.5 Manfaat Penelitian
1.5.1
1.
Bagi Institusi
Hasil penelitian ini diharapkan dapat membuktikan efek hipoglikemik
ekstrak Nigella sativa sehingga dapat digunakan sebagai referensi untuk
penelitian lebih lanjut bagi mahasiswa Fakultas Kedokteran dan Ilmu
Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.
2.
Menambah referensi penelitian di Fakultas Kedokteran dan Ilmu
Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.
4
3.
Dapat digunakan sebagai bahan referensi untuk penelitian lebih lanjut
bagi peneliti lain.
1.5.2
Bagi Peneliti
1. Sebagai salah satu syarat mendapatkan gelar Sarjana Kedokteran di
Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif
Hidayatullah Jakarta.
2. Mendapatkan pengalaman dalam melakukan penelitian terutama dengan
metode eksperimental.
3. Mendapatkan kesempatan untuk mengembangkan ilmu yang telah didapat
selama masa
pembelajaran dan mendapat pengalaman melakukan
penelitian terutama di bidang kesehatan.
4. Memotivasi peneliti untuk lebih peduli terhadap pengobatan herbal yang
beredar di masyarakat.
1.5.3
Bagi Masyarakat
1. Menjadi sumber informasi bagi masyarakat tentang efek ekstrak Nigella
sativa dapat mempengaruhi kadar glukosa darah dan kolesterol.
2. Membantu masyarakat untuk lebih peduli terhadap pencegahan dan
pengobatan DM .
3. Menurunkan persentase angka kejadian DM yang terjadi di masyarakat.
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Landasan Teori
2.1.1
Diabetes mellitus
Diabetes Mellitus (DM) merupakan salah satu kelompok penyakit
metabolik yang ditandai oleh hiperglikemia karena gangguan sekresi insulin,
kerja insulin, atau keduanya. Keadaan hiperglikemia kronis dari diabetes
berhubungan dengan kerusakan jangka panjang, gangguan fungsi dan
kegagalan berbagai organ, terutama mata, ginjal, saraf, jantung, dan pembuluh
darah.2
Menurut WHO, DM merupakan penyakit kronik yang muncul akibat
insufisiensi sekresi insulin oleh pankreas atau tidak efektifnya tubuh dalam
menggunakan insulin, yang menyebabkan meningkatnya kadar glukosa darah
(hiperglikemia).1
2.1.2
Epidemiologi
WHO menyatakan, penderita DM di Indonesia diperkirakan akan
mengalami kenaikan 8,4 juta jiwa pada tahun 2000, menjadi 21,3 juta jiwa
pada tahun 2030. Tingginya angka kematian tersebut menjadikan Indonesia
menduduki ranking ke-4 dunia setelah Amerika Serikat, India dan Cina.12
2.1.3
Klasifikasi
DM pada awalnya diklasifikasikan ke dalam dua kategori utama yaitu
primer dan sekunder, DM kategori primer merupakan yang paling sering terjadi
dan muncul karena gangguan pada produksi dan/atau kerja insulin; dan
sekunder, timbul akibat banyak penyakit yang menyebabkan kerusakan luas
pada pulau pankreas, seperti pankreatitis, tumor, kelebihan zat besi
(hemokromatosis), obat tertentu, pengangkatan substansi pankreas secara
bedah, atau endokrinopati didapat berupa antagonisasi kerja insulin.13
5
6
Dalam dunia medis DM diklasifikasikan ke dalam 2 tipe utama yaitu DM
tipe 1 dan DM tipe 2. DM tipe 1 (tergantung-insulin, insulin-dependent atau
juvenile-onset), yang mencakup sekitar 10-20% dari semua kasus DM ditandai
oleh tidak adanya sekresi insulin disebabkan kurangnya insulin secara absolut
akibat proses autoimun dan juga idiopatik yaitu tanpa gejala adanya autoimun
dan tidak diketahui sumbernya.14,15
Sedangkan DM tipe 2 (tidak tergantung-insulin, non-insulin-dependent
atau maturity-onset), kemungkinan proses sekresi insulin tetap normal atau
bahkan meningkat, tetapi gangguan yang terjadi adalah pada sel-sel sasaran
insulin yang kurang peka terhadap hormon ini dibandingkan dengan normal.16
DM tipe 2 merupakan kasus terbanyak (90-95% dari seluruh kasus diabetes)
yang umumnya mempunyai latar belakang kelainan diawali dengan resistensi
insulin. Gejala pada DM tipe 2 berlangsung lambat dan progresif, sehingga
tidak terdeteksi karena gejala yang dialami pasien sering bersifat ringan seperti
kelelahan, iritabilitas, poliuria, polidipsi dan luka yang lama sembuh, Obesitas
sering dikaitkan dengan penyakit ini.14,15
DM tipe lainnya yang sering terjadi yaitu diabetes gestasional (GDM)
yang dikenali selama kehamilan dan mempengaruhi 4% dari semua kehamilan.
Faktor risiko terjadinya GDM adalah usia tua, etnik, obesitas, multiparitas,
riwayat keluarga, dan riwayat GDM terdahulu.14 Terdapat juga DM yang
disebabkan oleh penyakit-penyakit, stimulasi kimia dan obat-obatan yang dapat
menyebabkan kerusakan pada pankreas.16
7
2.1.4. Fisiologi Sekresi Insulin
Pankreas merupakan organ yang secara anatomi berada di rongga
abdomen retroperitonial tepat berada di kurvaktura duodenum. Fungsi endokrin
pada pakreas terdapat pada pulau langerhans (islet of Langerhans) yang
mempunyai 4 tipe endokrin. Sel alfa (17% pulau langerhans) mensekresikan
glukagon. Sel beta (70% pulau langerhans) mensekresikan Insulin. Sel delta
mensekresikan somatostatin dan sel F yang mensekresikan pancreatic
polipeptide.13,15,17
Gambar 2.1 Pulau Langerhans
Sumber : Tortora, 2009
Insulin merupakan hormon yang dihasilkan sel beta kelenjar pankreas.
Proses sintesis insulin oleh sel beta pankreas dalam keadaan normal akan dimulai
apabila ada rangsangan pada sel beta, Pada awalnya insulin disintesis sebagai
suatu preprohormon yang kemudian masuk
ke dalam sisterna retikulum
endoplasma dan kemudian dikeluarkan, dan akan menghasilkan proinsulin karena
pemecahan oleh enzim microsom. molekul proinsulin menjalani serangkaian
pemecahan peptida sehingga terbentuk insulin yang matang dan peptida C dalam
jumlah ekuimolar dan disekresikan dari granul sekretorik pada sel beta pankreas.18
Setelah insulin disintesis kemudian disekresikan ke dalam darah sesuai
kebutuhan tubuh untuk keperluan regulasi glukosa darah.18
8
Glukosa merupakan kunci regulator sekresi insulin, Glukosa merangsang
sekresi insulin dengan masuk ke dalam sel beta melalui transporter glukosa GLUT
2.18 Selanjutnya di dalam sel, glukosa mengalami proses fosforilasi oleh enzim
glukokinase dan glikolisis yang akan membebaskan molekul ATP, terbebasnya
molekul ATP maka K channel yang terdapat pada membran sel akan tertutup dan
akan memicu terjadinya depolarisasi dan kemudian ion Ca akan masuk sehingga
terjadi peningkatan kadar ion Ca intrasel sehingga terjadi proses sekresi insulin,
keadaan lain yang menyebabkan aktivasi penutupan K channel yaitu obat-obatan
(yang tergolong obat diabetes) yang bekerja pada reseptor berbeda yaitu
sulphonilurea receptor (SUR), yang juga terdapat pada membran sel beta.14
Gambar 2.2 Pengaruh Glukosa Darah Terhadap Sekeresi Insulin43
Sumber : Berne, RM. Physiology 5th ed
Insulin memiliki reseptor yang terdiri dari dua molekul heterodimer yang
terdiri atas dua subunit yang diberi simbol α dan β. Subunit α terletak pada
ekstrasel dan merupakan sisi yang berikatan dengan insulin. Subunit β merupakan
protein transmembran yang melaksanakan fungsi, Kerja insulin dimulai ketika
hormon tersebut terikat dengan sebuah reseptor glikoprotein yang spesifik pada
permukaan sel target.
Insulin memiliki efek penting pada berbagai metabolisme seperti
metabolisme karbohidrat, lemak, dan protein. Hormon ini berfungsi menurunkan
9
kadar glukosa, asam lemak, dan asam amino dalam darah serta mendorong
penyimpanannya. Insulin menjalankan efeknya yang beragam dengan mengubah
transportasi nutrien spesifik dari darah ke dalam sel atau dengan mengubah
aktivitas enzim-enzim yang terlibat dalam jalur metabolik tertentu.14
2.1.5. Sintesis kolesterol
Kolesterol berperan menstabilkan lapis ganda (bilayer) fosfolipid pada
membran. Kolesterol berfungsi sebagai prekursor garam-garam empedu, mirip
senyawa deterjen yang berfungsi dalam proses pencernaan dan penyerapan lemak.
Kolesterol juga berfungsi sebagai prekursor hormon steroid yang memiliki banyak
fungsi, termasuk mengatur metabolisme, pertumbuhan, dan reproduksi. Kolesterol
merupakan senyawa lemak kompleks, yang 80% dihasilkan dari dalam tubuh
(organ hati) dan 20% sisanya dari luar tubuh (zat makanan) untuk bermacammacam fungsi di dalam tubuh, antara lain membentuk dinding sel. 19
Pada fase awal pembentukan kolesterol, dua molekul asetil KoA sitosol
berkondensasi membentuk asetoasetil KoA. Molekul asetil KoA lainnya berikatan
dengan asetoasetil KoA membentuk HMG-KoA. Pada biosintesis kolesterol
berikutnya dikatalisis oleh HMG KoA reduktase. Enzim ini mengubah HMG KoA
menjadi mevolonat, dengan menggunakan ekivalen pereduksi yang disediakan
oleh NADPH dan terletak di retikulum endoplasma dengan tempat aktifnya
menonjol di sitosol. Mevolonat mengalami fosforilasi oleh ATP dan selanjutnya
mengalami dekarboksilasi untuk membentuk isopentil pirofosfat. Unit-unit
isopren ini dapat berkondesasi membentuk kolesterol.19
10
Gambar 2.3: Transport kolesterol di jaringan tubuh manusia
Sumber: Murray dalam buku harper (2009)1
7
Pembentukan kolesterol dipengaruhi oleh beberapa hal. Yang pertama
banyaknya simpanan kolesterol di hati dapat menurunkan aktivitas HMG KoA
reduktase. Simpanan kolesterol pada hati juga dipengaruhi oleh aktivitas high
density lipoprotein (HDL), low-density lipoprotein (LDL) dan very low density
lipoprotein (VLDL).
HDL berperan dalam membawa kolesterol dari darah
menuju hati, sehingga simpanan kolesterol di hati akan meningkat. LDL akan
membawa kolesterol dari hati menuju aliran darah, sehingga simpanan kolesterol
di hati akan berkurang. Peningkatan kadar LDL berbanding lurus dengan
peningkatan kadar VLDL. Kedua, kerja dari insulin yang dapat meningkatkan
produksi kolesterol.17
2.1.6 Patofisiologi DM
A. Resistensi insulin
Penurunan kemampuan insulin untuk beraksi pada jaringan target perifer
(terutama otot dan hati) merupakan ciri yang menonjol pada DM tipe 2 dan
merupakan kombinasi dari kerentanan genetik dan obesitas. Resistensi insulin
mengganggu penggunaan glukosa oleh jaringan yang sensitif insulin dan
11
meningkatkan
hiperglikemia.
pengeluaran
glukosa
hepatik,
keduanya
menyebabkan
16
Pada prinsipnya resistensi insulin dapat terjadi di tingkat reseptor insulin
atau di salah satu jalur sinyal pascareseptor. Patogenesis resistensi insulin saat ini
berfokus pada defek sinyal PI-3-kinase, yang menurunkan translokasi GLUT 4
pada membran plasma, diantara kelainan lainnya.
Asam lemak bebas juga memberikan kontribusi pada patogenesis DM tipe
2. Asam lemak bebas menurunkan ambilan glukosa pada adiposit dan otot serta
meningkatkan pengeluaran glukosa hepatik yang terkait dengan resistensi
insulin.14
B. Gangguan Sekresi Insulin
Defek pada sekresi insulin bersifat samar dan secara kuantitatif kurang
berarti jika dibandingkan dengan yang terjadi pada DM tipe 1. Pada awal
perjalanan penyakit DM tipe 2, sekresi insulin tampaknya normal dan kadar
insulin plasma tidak berkurang. Namun pola sekresi insulin yang berdenyut dan
osilatif lenyap, dan fase pertama sekresi insulin (yang cepat) yang dipicu oleh
glukosa menurun. Secara kolektif hal ini dan pengamatan lain mengisyaratkan
adanya gangguan sekresi insulin yang tipe 2 dan bukan defisiensi sintesa insulin.14
Namun pada perjalanan penyakit berikutnya, terjadi defisiensi absolut
yang ringan sampai sedang yang lebih ringan dibanding DM tipe 1. Penyebab
defisiensi insulin pada DM tipe 2 masih belum sepenuhnya jelas. Berdasarkan
data mengenai hewan percobaan dengan DM tipe 2, diperkirakan mula-mula
resistensi insulin menyebabkan peningkatan kompensatorik massa sel beta dan
produksi insulinnya.13
Pada orang DM regulasi insulin terhadap glukosa darah megalami
gangguan, akibat tidak tersekresinya insulin oleh sel β pankreas seperti yang
terjadi pada DM tipe 1 ataupun terjadi ketidakpekaan sel-sel target insulin
(resistensi insulin) terhadap keberadaan insulin seperti yang terjadi pada DM tipe
2. Hal ini menyebabkan keadaan hiperglikemia dan menyebabkan banyak efek
merugikan pada tubuh.14
12
Selain
pada
karbohidrat,
insulin
sangat
membantu
berjalannya
metabolisme lemak secara fisiologis. Berdasarkan pengaruhnya terhadap lipid,
jika terjadi defisiensi atau resistensi insulin maka keseimbangan metabolisme
lipid akan terganggu, dan berakhir dengan keadaan hiperlipidemia pada pasien
DM.14
Secara keseluruhan dapat disimpulkan bahwa insulin mengatur jalur-jalur
biosintetik yang menyebabkan peningkatan pemasukan glukosa, peningkatan
penyimpanan glukosa dan lemak, dan meningkatkan sintesis protein. Karena itu,
hormon ini akan menurunkan kadar glukosa, asam lemak, dan asam amino dalam
darah. Jika sekresi insulin rendah, yang terjadi adalah efek yang berlawanan.1
2.1.6 Kolesterol pada DM
Pada keadaan defisiensi insulin terdapat penurunan masuknya asam lemak
dari darah ke dalam sel jaringan adiposa, sehingga kadar trigliserida di darah
dapat meningkat. Pada keadaan resistensi insulin, hormone sensitive lipase di
jaringan adiposa akan menjadi aktif sehingga lipolisis trigliserida di jaringan
adiposa semakin meningkat. Keadaan ini akan menghasilkan asam lemak bebas
(free fatty acid, FFA) yang berlebihan. Asam lemak bebas akan memasuki aliran
darah, sebagian akan digunakan sebagai sumber energi dan sebagian akan dibawa
ke hati sebagai bahan baku pembentuk trigliserida.5,14
Di hati, FFA akan dibentuk kembali menjadi trigliserida dan menjadi
bagian dari VLDL. Oleh karena itu VLDL yang dihasilkan pada keadaan
resistensi insulin akan sangat kaya akan trigliserida, disebut VLDL kaya
trigliserida atau VLDL besar (large VLDL).5
Dalam sirkulasi, trigliserida yang banyak di VLDL akan bertukar dengan
kolesterol ester dari kolesterol-LDL, yang akan menghasilkan LDL yang kaya
akan trigliserida tetapi kurang kolestrol ester (cholesterol depleted LDL).
Trigliserida yang dikandung oleh LDL akan dihidrolisis oleh enzim hepatic lipase
(yang biasanya meningkat pada resistensi insulin) sehingga menghasilkan LDL
yang kecil tetapi padat, dikenal dengan small dense LDL. Partikel LDL kecil
padat ini sifatnya mudah teroksidasi, oleh karena itu sangat aterogenik.
13
Trigliserida VLDL besar juga dipertukarkan dengan kolesterol ester dari HDL dan
menghasilkan HDL miskin kolesterol ester tetapi kaya trigliserid. Kolesterol HDL
bentuk demikian lebih mudah dikatabolisme oleh ginjal sehingga jumlah HDL
plasma menurun.5
Gambar 2.4 Metabolisme Lipoprotein pada Resistensi Insulin
Sumber: Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam, 2009
Terjadinya sekresi HDL miskin kolesterol melalui ginjal yang terusmenerus pada kasus DM tipe 2 yang digunakan untuk membentuk VLDL, IDL
dan small dense LDL akan menyebabkan kegagalan
proses pengangkutan
kolesterol dari lipoprotein lain dan membran sel menuju ke hati sehingga akan
terjadi peningkatan kadar kolesterol di dalam darah.19
14
2.1.7 Diagnosis DM
Diagnosis DM ditegakkan atas dasar pemeriksaan kadar glukosa darah,
bukan atas dasar terdapatnya glukosuria. Pemeriksaan darah yang dianjurkan
adalah menggunakan darah plasma vena dan dicek secara enzimatik. Sedangkan
untuk tujuan pemantauan hasil pengobatan dapat dilakukan dengan menggunakan
pemeriksaan glukosa darah kapiler dengan glukometer.
Berbagai keluhan dapat ditemukan pada penyandang diabetes. Kecurigaan
adanya DM perlu dipikirkan apabila terdapat keluhan klasik DM seperti di bawah
ini:

Keluhan klasik DM berupa: poliuria, polidipsia, polifagia, dan penurunan
berat badan yang tidak dapat dijelaskan sebabnya.

Keluhan lain dapat berupa: lemah badan, kesemutan, gatal, mata kabur,
dan disfungsi ereksi pada pria, serta pruritus vulvae pada wanita.
Diagnosis DM dapat ditegakkan melalui tiga cara, seperti yang tercantum pada
tabel berikut:
Tabel 2.1 Kriteria Diagnosis DM
1. Gejala klasik DM + glukosa plasma sewaktu ≥200 mg/dL (11,1 mmol/L) Glukosa plasma
sewaktu merupakan hasil pemeriksaan sesaat pada suatu hari tanpa memperhatikan waktu makan
terakhir
Atau
2.
Gejala klasik DM
+
Kadar glukosa plasma puasa ≥126 mg/dL (7,0 mmol/L)
Puasa diartikan pasien tak mendapat kalori tambahan sedikitnya 8 jam
Atau
3. Kadar glukosaplasma 2 jam pada TTGO ≥200 mg/dL (11,1 mmol/L)
TTGO yang dilakukan dengan standar WHO, menggunakan beban glukosa yang setara dengan 75
gr glukosa anhidrus yang dilarutkan ke dalam air.
*Pemeriksaan HbA1c (≥6,5%) oleh ADA 2011 sudah dimasukkan menjadi salah satu
kriteria diagnosis DM,
jika dilakukan pada sarana laboratorium yang telah terhidrasi dengan baik
Sumber: PERKENI, 2006
15
2.1.8 Komplikasi DM
Komplikasi DM dibagi menjadi dua kategori mayor, yakni: komplikasi
metabolik akut dan komplikasi vaskular jangka panjang. Komplikasi metabolik
DM disebabkan oleh perubahan yang relatif akut dari konsentrasi glukosa plasma.
Kompliksi metabolik yang paling serius pada DM tipe 2 adalah ketosidosis
diabetik. Apabila kadar insulin sangat menurun, pasien mengalami hiperglikemia
dan glukosuria berat, penurunan lipogenesis, peningkatan lipolisis, dan
peningkatan oksidasi asam lemak bebas disertai pembentukan benda keton yang
merupakan awal dari DKA.14,15
Komplikasi Metabolik Akut
Komplikasi akut DM terjadi akibat kekurangan insulin pada
metabolisme karbohidrat, lemak, dan protein. Apabila kadar insulin sangat
menurun, pasien DM akan mengalami hiperglikemia dan glukosuria berat,
penurunan lipogenesis, peningkatan lipolisis dan peningkatan oksidasi asam
lemak bebas disertai pembentukan benda keton (asetoasetat, hidroksibutirat,
aseton). Peningkatan keton dalam plasma akan mengakibatkan ketosis yang
selanjutnya akan meningkatkan beban ion hidrogen dan asidosis metabolik.14,15
Komplikasi metabolik tersering pada pasien dengan DM tipe 1 adalah
ketoasidosis diabetik (DKA). Namun kematian akibat DKA ini jarang terjadi saat
ini, karena pasien maupun tenaga kesehatan telah menyadari potensi bahaya dan
pengobatan DKA dapat dilakukan sedini mungkin.14
Untuk DM tipe 2 salah satu komplikasi yang sering terjadi adalah
hiperglikemia, hiperosmolar, koma nonketotik (HHNK). Terjadi hiperglikemia
berat dengan kadar glukosa plasma lebih dari 600 mg/dl. Keadaan inilah yang
menyebabkan timbulnya hiperosmolalitas, diuresis osmotik, dan dehidrasi berat.
Pasien dapat menjadi tidak sadar dan meninggal bila tidak segera ditangani.
Angka mortalitas cukup tinggi hingga 50%.14
16
Komplikasi Kronik Jangka Panjang
Komplikasi vaskular jangka panjang dari DM melibatkan pembuluhpembuluh kecil (mikroangiopati) dan pembuluh-pembuluh sedang dan besar
(makroangiopati).14
Mikroangiopati merupakan lesi spesifik diabetes yang menyerang
kapiler dan arteriola retina (retinopati diabetik), glomerulus ginjal (nefropati
diabetik), dan saraf-saraf perifer (neuropati diabetik), otot-otot serta kulit.14
Makroangiopati diabetik mempunyai gambaran histopatolois berupa
aterosklerosis. Makroangopati diabetik ini akan mengakibatkan penyumbatan
vaskular dan jika mengenai arteri-arteri perifer akan timbul insufisiensi vaskular
perifer yang disertai klaudikasio intermiten dan gangren pada ekstremitas serta
insufisiensi serebral dan stroke. Jika yang terkena adalah arteri koronaria dan
aorta, maka dapat mengakibatkan angina dan infark miokardium.14
2.1.9 Tatalaksana DM
Penatalaksanaan diabetes mellitus yang utama ada 6 hal, yaitu :
a. Terapi gizi medis (perencanaan diet)
b. Peningkatan aktivitas jasmani, bertujuan untuk meningkatkan aliran darah
sehingga reseptor insulin tersedia lebih banyak dan glukosa dapat masuk ke
dalam sel.
c. Terapi farmakologis (agen agen hipoglikemik oral
d. Terapi Insulin
e. Pengawasan kadar glukosa darah di rumah
f. Edukasi masalah yang berkaitan dengan DM termasuk perawatan diri
pasien.14
Pendekatan secara non farmakologis seperti perencanaan makanan,
aktivitas fisik, dan penurunan berat badan bila terdapat obesitas, merupakan
langkah pertama dalam pengelolaan DM. Bila langkah pertama pengelolaan
belum tercapai, maka langkah selanjutnya
adalah pengelolaan dengan
menggunakan obat atau intervensi secara farmakologis.20
Pada pasien DM tipe 1 karena diakibatkan defisiensi insulin, maka selalu
membutuhkan terapi insulin. Sedangkan pada DM tipe 2 dapat ditangani tanpa
17
insulin karena dasar penyakit adalah resistensi insulin dan defisiensi insulin yang
relatif.14
2.1.11 Streptozotocin
Streptozotocin (STZ) merupakan derivat N-nitrosurea dari D-glukosamine
yang diisolasi dari Streptomyces acrhromogens. STZ sering digunakan sebagai
antibiotik dan juga sebagai
pengobatan beberapa jenis kanker. Namun STZ
mempunyai efek samping yang bersifat toksik, salah satunya diabetogenik. 21
Gambar 2.6. Struktur kimia Streptozotocin
Sumber: Lenzen S.2008
STZ masuk ke dalam sel β pankreas melalui GLUT 2 menuju membran
plasma.23 Proses kerusakan sel β berawal dari penurunan ATP dengan cara
meginhibisi siklus krebs dan menginduksi NO sehingga akan terbentuk ROS
menyebabkan kerusakan DNA.18 Selain itu gugus alkil yang terdapat pada STZ
menyebabkan terjadinya alkilasi pada DNA.24 Alkilasi tersebut akan mengaktivasi
poli ( ADP-ribosilasion) yang membuat penurunan NAD dan ATP yang akan
menyebabkan nekrosis dan kerusakan pada sel β pankreas.
Terdapat 3 fase setelah penyuntikan STZ intraperitonial pada hewan coba
sampai dengan terjadinya hiperglikemi. Fase pertama dimulai dengan terjadinya
peningkatan glukosa darah satu jam setelah penyuntikan. Fase ini menunjukkan
penurunan konsentrasi insulin pada pembuluh darah.23,24 Fase ini berlangsung
selama 2 sampai 4 jam. Fase kedua terjadi hipoglikemi yang berlangsung 4
18
sampai dengan 8 jam setelah penyuntikan. Pemberian konsentrat glukosa sangat
diperlukan untuk mencegah terjadinya kematian akibat hipoglikemi. Hipoglikemi
terjadi, karena pecahnya sel β yang mengandung insulin. Pecahnya sel dipicu oleh
toksisitas STZ.24 Insulin akan beredar ke pembuluh darah dan berikatan dengan
reseptor di sel lemak dan otot, menyebabkan penurunan glukosa darah dengan
cepat. Pada fase ketiga terjadi hiperglikemi yang permanen. Pada pemeriksaan
secara morfologi ditemukan kerusakan yang besar pada hampir seluruh sel β pada
waktu 12-24 jam setelah penyuntikan STZ.25
Pada Tikus Sprague dawley (SD) telah dilaporkan bahwa injeksi STZ
secara intraperitonial dengan dosis tunggal 48-60 mg/kgbb mengarah pada
degenerasi sel beta pankreas, Secara klinis gejala DM muncul jelas pada saat 2-4
jam pasca injeksi, Glukosa darah pada SD secara signifikan lebih meningkat
pasca injeksi, dan tidak memerlukan injeksi STZ yang kedua kali.11
2.1.12 Jinten Hitam (Nigella sativa)
Nigella sativa atau yang lebih dikenal sebagai jinten hitam dan
habbatussauda merupakan tanaman herbal dari Famili Ranunculaceae. Biji Nigella
sativa (NS) telah banyak digunakan di Asia selatan, Timur tengah dan Asia timur
sebagai pengobatan terhadap berbagai penyakit seperti: asma, hipertensi, diabetes,
hiperkolesterolemia, inflamasi, arthritis, tumor,dan gangguan pada saluran
pencernaan.26,27,28
Jinten hitam tumbuh di ketinggian kurang dari 700 meter diatas
permukaan laut. Tanaman ini membutuhkan suhu udara 9-45˚C, kelembaban
sedang (70-90%), dan penyinaran matahari penuh. Tanaman ini bisa tumbuh
dengan baik di tanah inseptisol atau tanah lempung berpasir. Di negara empat
musim, tanaman ini akan berproduksi optimal pada musim semi.29
19
A. Taksonomi Nigella sativa
Tabel 2.2 Taksonomi Nigella sativa
Kingdom
Plantae
Subkingdom
Tracheobionta
Divisio
Spermatophyta
Subdivisi
Magnoliophyta
Kelas
Magnoliopsida dicotyledon
Subkelas
Magnoliidae
Ordo
Ranunculales
Famili
Ranunculaceae
Genus
Nigella L
Spesies
Nigella sativa
Sumber: Deptan ( 2013) 31
B. Kandungan kimia Nigella sativa
NS banyak mengandung asam lemak yang sangat bermanfaat bagi
tubuh dalam jumlah tertentu, Kandungan asam lemak dalam jintan hitam, antara
lain:
Tabel 2.3 Kandungan asam lemak pada biji Nigella sativa
Asam Lemak
Presentase
Asam laurat
0,6
Asam Misirat
0,5
Asam palmitat
12,5
Asam stearat
3,4
Asam oleat
23,4
Asam linoleat
55,6
20
Asam linolenat
0,4
Asam eicosainoat
3,1
Total
99,5
Sumber : Nickavar et al (2003).32
NS lebih banyak mengandung asam lemak tidak jenuh (82,5%). Asam
lemak tidak jenuh yang paling penting manfaatnya, asam linoleat (PUFA)
dibutuhkan untuk pertumbuhan dan fungsi normal semua jaringan, sedangkan
asam oleat yang termasuk asam lemak tidak jenuh dengan satu ikatan
rangkap/tunggal (monounsaturated fatty acid=MUFA). Asam oleat dapat dapat
diperoleh dari sebagian besar lemak dan minyak zaitun. MUFA dapat menurunkan
resiko terjadinya penyakit kardiovaskuler dengan cara menurunkan kadar
trigliserida, kolesterol total, VLDL, dan meningkatkan HDL. Kandungan lain dari
NS adalah Volatil oil yang mengadung beberapa zat seperti trans-anethole,
carvone, cymene, tymohydroquinone dan tymoquinone, nigelllin dan nigellon.32
Thymoquinone adalah komponen terbanyak (30-48%) dari essentials oil
yang paling aktif pada NS .33 Thymoquinone memiliki banyak manfaat bagi tubuh
seperti anti oksidan, anti inflamasi, anti tumor, analgesic dan menurunkan kadar
glukosa.27,28,29 Thymoquinone dapat menurunkan kadar glukosa darah melalui 2
mekanisme. Pertama, mencegah glukoneogenesis hati dengan menekan enzim
glokosa-6-fosfatase dan fruktosa-1,6-bifosfatase. Kedua, dengan menekan
inflamasi yang disebabkan oleh nitrit oksida dan radikal bebas.33
Efek anti diabetik Jintan hitam muncul melalui beberapa jalur, jalur
pertama adalah dengan memperkuat pengeluaran insulin dari pankreas yang
disebabkan karena jinten hitam mempunyai efek protektif terhadap kerusakan sel
beta pankreas akibat streptozotocin dan menjaga integritas sel pankreas dan jintan
hitam juga bekerja dengan cara meningkatkan proliferasi dan regenerasi sel beta
pankreas yang telah rusak.35
Komposisi gizi dari NS yaitu protein: 21%, karbohidrat 35% dan lemak
35-38%, sisanya berupa vitamin, mineral dan zat lain seperti tannin, lipase,
saponin, seng (ZN) dan phytosterol. Seng mempunyai efek yang sama dengan
21
thymoquinone yaitu sebagai antioksidan kuat sehingga dapat melawan efek
oksidatif STZ. Sedangkan phytosterol mempunyai struktur mirip kolesterol
sehingga dapat menurunkan kadar kolesterol darah melalui kompetisi absorbsi di
usus.36
22
2.2 Kerangka Teori
Streptozotocin
Gugus Alkil
N-nitrosuria
Alkilasi sel B
NO
RO
S
Merusak DNA sel
beta pankreas
Destruksi sel β
pankreas
Defisiensi
atau
resistensi
insulin
Diabetes
mellitus
Mempengaruhi
berbagai
metabolisme
Lipid
Karbohidrat
Mengurangi
efek kerja
hormon
lipoprotein
lipase
Gangguan
uptake glukosa
ke intrasel
Lipolisis
kilomikron
dan VLDL
sedikit
Hiperglikemia
Penurunan
kadar glukosa
darah
Pertumbuhan
dan fungsi
normal
jaringan
Mencegah
glukoneogenesis
di hati
Asam linoleat
(PUFA)
Kadar large VLDL
tinggi
Menekan
inflamasi oleh
NO dan ROS
Thymoquinone
2.3 Definisi Operasional
Nigella sativa
LDL meningkat
Simpanan
kolesterol di
hati menurun
Sintesis kolestero
meningkat
Menghambat
enzim HMGCoA
reduktase
Phytosterol
HDL menurun
Kadar kolestrol
darah meningkat
Absorbsi
kolestrol
Mempengaruhi
kadar kolesterol
23
No
Variabel
Definisi operasional
Alat Ukur
Cara Pengukuran
1
Gula Darah
Sewaktu
(GDS)
Hasil
pemeriksaan
glukosa darah sampel
tanpa dipuasakan.
Strip
dan
alat
glukometer (merek
NESCO)
Glukosa darah diukur
menggunakan
glukometer,
darah
diambil melalui ekor
sampel.
Interpretasi
angka yang muncul
pada alat.
2
Kolesterol
Lipid utama pada
kilomikron,
VLDL
dan LDL
Kit kolesterol dan
ELISA Reader
Plasma
sampel
dicampur
dengan
reagen
kolesterol
selanjutnya
dinilai
dengan alat ELISA
reader.
Skala
Pengukuran
Numerik
Numerik
24
2.4 Kerangka Konsep
Tikus Strain
Sprague dowley
Diinduksi STZ
Destruksi sel β
pankreas
Sekresi
insulin
menurun
Glukosa darah
Hiperglikemia
Karbohidrat
Melindungi sel
Beta pankreas
Antioksidan
Glukoneogenesis
Diabetes
mellitus
Thymoquinone
Menghambat
enzim HMGKoA reduktase
Nigella sativa
Phytosterol
Kolesterol
di darah
Absorbsi
menurun
kolesterol
Lipid
Keterangan :
= Dilakukan penelitian
Mengurangi
efek kerja
hormon
lipoprotein
lipase
HMG KoA
reduktase
Kolesterol
di darah
meningkat
BAB 3
METODE PENELITIAN
3.1 Desain Penelitian
Desain yang digunakan pada penelitian ini adalah desain eksperimental.
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian
3.2.1
Waktu Penelitian
Penelitian dilaksanakan pada bulan Februari – Juni 2014
3.2.2
Tempat Penelitian
Penelitian dilakukan di Animal House, laboratorium Biologi dan
laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, jl.
Kertamukti No. 05, Pisangan, Ciputat 15419, Tangerang Selatan.
3.3 Populasi dan Sampel Penelitian
Hewan percobaan yang digunakan adalah tikus jantan strain
Sprague dawley berumur 90 hari, dengan berat badan rata-rata 180-200
gram. Sampel diperoleh dari Departemen Patologi Institut Pertanian Bogor
(IPB). (Lampiran 1)
Terdapat tiga kelompok pada penelitian ini, kelompok I adalah
kontrol negatif atau kelompok tanpa perlakuan Kelompok II adalah kontrol
positif atau kelompok tikus DM yang diinduksi dengan Streptozotocin 4860 mg/kgbb. Kelompok III adalah tikus DM yang telah diinduksi dengan
streptozotocin dan diberikan terapi ekstrak Habbatusauda dengan dosis 300
mg/kgbb/hari.
Untuk menentukan jumlah sampel pada setiap kelompok
penelitian, digunakan rumus Federer sebagai berikut :
(n-1) (t-1) ≥15, dengan t = jumlah kelompok, n = jumlah sampel
 (n-1) (3-1) ≥15
 (n-1)(2)
≥15
 (n-1)
≥15/2
 n
≥15/2 + 2/2
 n
≥8,5 (bulatkan 9)
25
26
Berdasarkan perhitungan tersebut, maka jumlah sampel minimal
yang diperlukan adalah 9 tikus pada setiap kelompok. Untuk menghindari
adanya kejadian yang tidak terduga, maka akan ditambahkan menjadi 10
tikus hingga total menjadi 30 tikus.
3.3.1 Kriteria Inklusi
1. Kelompok kontrol negatif : Tikus jantan strain Sprague dawley dengan
glukosa darah sewaktu < 200 mg/dL .
2. Kelompok kontrol positif dan perlakuan: Tikus jantan strain Sprague
dawley dengan glukosa darah sewaktu >200 mg/dL
3.3.2 Kriteria Eksklusi
1. Tikus betina, tikus dinyatakan sakit dan cacat
3.4. Cara Kerja Penelitian
3.4.1 Alat Penelitian
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah glukometer
beserta strip dan lansetnya, kit trigliserida, vorteks, centrifuge,
spektrofotometer, minor set, tabung EDTA dan tabung mikro, timbangan
untuk mengukur berat badan tikus, sonde, kandang tikus, botol minuman
dan tempat makanan tikus.
3.4.2 Bahan Penelitian
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian adalah ekstak dari
biji Habbatusauda (Nigella sativa) yang diperoleh dari pusat konservasi
Kebun Raya Bogor sebanyak 2 kg .
Bahan-bahan kimia yang digunakan pada proses induksi adalah:
Streptozotocin, dapar sitrat dan aquades. Untuk proses sacrifice
menggunakan dietileter (ether). Sedangkan untuk proses pengukuran kadar
kolesterol digunakan reagen kit kolesterol.
27
3.4.3 Adaptasi Hewan Coba
Hewan coba diadaptasikan di Animal house selama 14 hari. Hewan
coba diadaptasikan baik terhadap tempat tinggal baru maupun adaptasi
terhadap makanan dan minuman dengan tetap memastikan higienitas
kandang dan makanan
3.4.4 Induksi Tikus Dengan Streptozotocin
Hari ke-15 tikus dipuasakan selama 10 jam sebelum diinduksi dengan
streptozotocin 48-60 mg/kgbb secara intraperitoneal. Injeksi STZ mengarah
pada degenerasi dari sel beta pankreas pada pulau langerhans.22 Pengukuran
kadar glukosa darah dilakukan 5 hari setelah induksi (hari ke-21). Tikus
dengan glukosa darah lebih dari 200 mg/dl digunakan untuk kelompok
kontrol positif dan kelompok perlakuan.
3.4.5 Pemberian Ekstrak Habbatusauda Terhadap Tikus
Setelah
tikus
dinyatakan
DM,
dilakukan
pemberian
ekstrak
Habbatusauda setiap hari selama 3 minggu (hari ke-21-41), ekstrak
habbatussauda diberikan secara oral menggunakan alat sonde dengan dosis
300 mg/kgbb/hari.
3.4.6. Pengukuran Sampel
3.4.6.1 Glukosa Darah
Pengambilan darah dilakukan dua kali, yaitu pertama saat sebelum
pemberian ekstrak dan terakhir saat pemberian ekstrak selesai (hari ke 42).
Pengambilan darah dilakukan dengan memotong sedikit ujung ekor tikus.
Sebelum pemotongan ekor terlebih dahulu tikus dibius sampai tidak sadarkan
diri menggunakan larutan eter yang memiliki efek anastesi (secara inhalasi),
proses ini bertujuan untuk mengurangi rasa sakit saat dipotong ujung
ekornya. Darah diteteskan pada strip pengukur glukosa darah dan diukur
dengan glukometer. Pengukuran yang dilakukan adalah untuk mengukur
kadar glukosa darah tikus.
28
3.4.6.2 Kolesterol Darah
Setelah mendapatkan data glukosa darah tikus selama 3 minggu
pemberian ekstrak jintan hitam, maka tikus akan di sacrifice (hari ke-42)
dengan cara dibius terlebih dahulu menggunakan larutan eter sampai mati.
Setelah mati tikus dibedah dan akan dilakukan pengambilan darah tikus
sebanyak 3 cc melalui vena cava inferior. Kemudian darah yang diambil
dimasukan dalam tabung mikro (1,5 ml) untuk selanjutnya dilakukan
sentrifugasi. Sentrifugasi dilakukan selama 15 menit, dengan kecepatan 3000
rpm. Plasma yang diperoleh kemudian dipisahkan dan disimpan kembali ke
tabung mikro dan disimpan dalam kulkas pada suhu -80˚C, untuk pengukuran
kolesterol selanjutnya. Pengukuran kadar kolesterol plasma sampel
menggunakan kit kolesterol dan dibaca dengan menggunakan ELISA reader.
3.5 Pengolahan dan Analisa Data
Data glukosa darah dan kolesterol yang terkumpul dilakukan pengolahan
dan pengujian data secara komputerisasi menggunakan STATA versi 11.0.
Uji statistik yang digunakan adalah One-Way Anova karena variabel yang
diteliti adalah kategorik-numerik lebih dari 2 kelompok dengan data tidak
berpasangan.
29
3.6 Alur Penelitian
Tikus Tiba di Animal House
(hari 1)
Adaptasi selama 2 minggu
Makan, minum dan serbuk
kandang ad libitum
(hari 1-14)
Kontrol (-) n=9
,Gula darah < 200 mg/dl
(hari 15)
Sonde oral aquades 3 ml
Makan, minum dan serbuk
kandang ad libitum
(hari 21-41)
Tikus yang akan diinduksi N= 18
tikus
Gula darah <200 mg/dl
Induksi STZ 60 mg/kgbb
(Hari 15)
Kontrol (+) n=9
Gula darah pada hari ke 21
>200 mg/dl
Makan, minum dan serbuk
kandang ad libitum
(Hari 21)
Sonde oral aquades 3 ml
Makan, minum dan serbuk
kandang ad libitum
(hari 21-41)
Sacrifice
Ukur Gula darah ,
Sacrifice, ether dan pengambilan
darah dari vena cava inferior
sebanyak 3 cc
(Hari 42)
Perlakuan, n=9
Gula darah pada hari ke 21
>200 mg/dl
Makan, minum dan serbuk
kandang ad libitum
(Hari 21))
Sonde oral Ekstrak Nigella
sativa 300 mg/kgbb/hari
dalam aquades 3 ml
Makan, minum dan serbuk
kandang ad libitum
(hari 21-41)
Kadar gula
darah
Analisis
statistik
Sentrifugasi darah 3000 rpm
Hasil plasma disimpan di
refrigerator -80°c
Plasma dicampur dengan kit
kolesterol
Analisis kolesterol
Kadar
kolesterol
darah
BAB 4
HASIL DAN PEMBAHASAN
Jumlah hewan dalam penelitian ini adalah 27 ekor tikus yang merupakan
jumlah minimal hewan coba sesuai dengan rumus Federer. Setelah diberikan
perlakuan ekstrak Nigella sativa selama 3 minggu, jumlah hewan dalam penelitian
yang tersisa 18 ekor tikus. 9 ekor tikus mati setelah proses induksi STZ dan
selama penelitian berlangsung. 18 hewan penelitian yang tersisa masing-masing
adalah: 6 hewan untuk kontrol negatif, 6 hewan untuk kontrol positif dan 6 hewan
untuk kelompok perlakuan. Kematian hewan penelitian diduga antara lain akibat
efek toksisitas pada STZ, banyaknya orang yang sering keluar masuk Animal
house. Hal ini dapat menyebabkan hewan coba rentan terkena infeksi dan stres.
Proses pengelompokan kelompok kontrol positif dan kelompok perlakuan
tidak secara random sampling, tetapi berdasarkan tingginya kadar gula darah
setelah diinduksi STZ, dengan tujuan dapat terlihatnya pengaruh pemberian
ekstrak secara nyata.
4.1.
Glukosa Darah
Data glukosa darah yang diambil adalah jumlah rerata dari glukosa darah
pada saat sebelum diinduksi STZ, 1 minggu setelah diinduksi STZ dan akhir
penelitian (pemberian Nigella sativa selama 3 minggu) masing-masing kelompok.
Data yang didapatkan selama penelitian adalah :
Tabel 4.1 Rerata Glukosa Darah Tikus Setiap Kelompok Penelitian
1 minggu Setelah
Diinduksi
(mg/dl)
122.2 ± 13.92
Setelah Minggu ke-3
Perlakuan
(mg/dl)
133.3 ± 23.62
persentase
(%)
Kontrol (-)
Sebelum
Diinduksi
(mg/dL)
106.7 ± 27.29
Kontrol (+)
150.8 ± 33.97
469.0 ± 87.43
516.7 ± 64.18
10,2 (↑↑)
Perlakuan
141.8 ± 20.48
487.9 ± 86.16
348.5 ± 36.29
28.6 (↓↓)
Kelompok
*Data adalah mean ± Std.Deviasi
30
9 (↑↑)
31
GDS (mg/dl)
600
400
Kontrol (-)
Kontrol (+)
Perlakuan
200
0
Sebelum Diinduksi
1 minggu Setelah
Diinduksi
Setelah Minggu ke-3
Terapi
Grafik 4.1 Rata- rata Glukosa Darah Tikus Setiap Kelompok Penelitian
Dari Tabel 4.1 dan Grafik 4.1 didapatkan hanya kelompok
perlakuan mengalami penurunan kadar glukosa darah, sedangkan kelompok
kontrol positif dan kontrol negatif mengalami kenaikan glukosa darah. Presentase
penurunan pada kelompok perlakuan sebesar 28,6 % walaupun penurunan pada
kelompok perlakuan tidak sampai pada kadar glukosa normal. Sedangkan
kelompok kelompok kontrol negatif dan kontrol positif mengalami kenaikan
kadar glukosa darah masing-masing 9% dan 10.2%.
Selanjutnya dilakukan perhitungan statistik menggunakan One-Way Anova
untuk menguji perbedaan antar kelompok terhadap kadar glukosa darah.
Berdasarkan hasil uji normalitas menggunakan Shapiro wilk test dan homogenitas
didapatkan probabilitas menunjukkan hasil >0,05, sehingga variabel memiliki
distribusi yang normal.
Tabel 4.2 Hasil Analisa Data Glukosa darah setiap Kelompok Penelitian
Kelompok
Kontrol (-)
Glukosa darah (mg/dl)*
133.33 ± 23.62
p-value
Kontrol (+)
516.67 ± 64.18
0.0000
Perlakuan
348.5 ± 36.29
*Data adalah mean ± Std.Deviasi
32
Dari Tabel 4.2 diatas diperoleh nilai (p>0.05) pada One-Way Anova
menunjukkan terdapat perbedaan glukosa darah yang bermakna antara kelompok
penelitian, sehingga dapat disimpulkan pemberian ekstrak Nigella sativa selama
21 hari dengan dosis 300 mg/kgbb/hari berikan efek terhadap penurunan kadar
glukosa darah tikus yang diinduksi dengan STZ.
Penurunan glukosa darah pada tikus DM dengan Nigella sativa sesuai
dengan penelitian sebelumnya, yang menunjukkan bahwa pemberian ekstrak
Nigella sativa dosis 300 mg/kgbb/hari selama 30 hari dapat menurunkan kadar
glukosa darah.37 Nigella sativa memiliki kandungan thymoquinone yang
merupakan antioksidan kuat sehingga dapat melawan efek oksidatif dari STZ
yang
berfungsi
melindungi
sel
akibat
efek stres
oksidatif dan juga
meningkatkatkan produksi dan sekresi Insulin. Sehingga menurunkan stres
oksidatif dan mencegah komplikasi pada DM.38 Selain itu, Nigella sativa
meningkatkan sensitivitas insulin dan uptake glukosa di sel adiposit dan
mencegah aktivitas berlebih dari enzim fruktosa-1,6-bifosfatase dan glukosa-6fosfatase yang merupakan enzim glukoneogenesis. Sehingga dapat menyebabkan
penurunan glukosa darah.
4.2 Kolesterol
Data kolesterol yang diambil adalah jumlah rerata darah yang diambil di
akhir penelitian (3 minggu setelah terapi) masing-masing kelompok. Data yang
didapatkan sebagai berikut :
Tabel 4.3 Rerata Kadar Kolesterol pada Setiap Kelompok Penelitian
Kelompok
Rerata Kadar Kolesterol ± SD
Kontrol Negatif
136,19 ± 32,28
Kontrol Positif
209,32 ± 21,63
Perlakuan
169,58 ± 36,45
33
Rerata kadar kolesterol (mg/dl)
300
200
100
0
Kontrol (-)
Kontrol (+)
Perlakuan
Grafik 4.2 Rerata Kadar Kolesterol pada Setiap Kelompok Penelitian pada H-21
Selanjutnya dilakukan perhitungan secara statistik menggunakan One-Way
Anova. Hasil uji normalitas dengan Shapiro-wilk didapatkan ahwa probabilitas
menunjukkan hasil >0,05, sehingga variabel memiliki distribusi yang normal
sehingga dapat langsung dilakukan penghitungan secara statistik menggunakan
One Way Anova dengan hasil:
Tabel 4.4 Hasil Statistik One Way Anova Kolesterol setiap Kelompok Penelitian
Kelompok
Kolesterol (mg/dl)*
Kontrol (-)
136.19 ± 32.28
Kontrol (+)
209.32 ± 21.63
Perlakuan
169.58 ± 36.45
p-value
0.0034
*Data adalah mean ± Std.Deviasi
Tabel 4.3 menunjukkan rata-rata kadar kolesterol pada kelompok kontrol
negatif masih dalam batasan normal (< 200 mg/dl) sedangkan kelompok kontrol
positif dan perlakuan memiliki rata-rata kadar kolesterol yang melebihi batasan
normal. Namun rata-rata kolestrol pada kelompok perlakuan lebih rendah
dibandingkan dengan kelompok kontrol positif ( 169.58 mg/dl vs 209.32 mg/dl).
Tetapi rata-rata kolestrol pada kelompok perlakuan menunjukkan
penurunan yang hampir mendekati kadar kolestrol pada kelompok kontrol negatif
34
(169.58 mg/dl vs 136.19 mg/dl). Hal ini menunjukkan bahwa pemberian ekstrak
habbatussauda selama 21 hari dengan dosis 300 mg/kgbb/hari mempengaruhi
kadar kolesterol.
Selanjutnya dilakukan perhitungan data secara statistik. Tabel 4.4
merupakan hasil uji One-Way Anova untuk kolesterol, dan didapatkan nilai
(p<0.05) pada One-Way Anova menunjukkan terdapat perbedaan kolesterol yang
bermakna antara kelompok penelitian, sehingga dapat disimpulkan pemberian
ekstrak Nigella sativa selama 21 hari dengan dosis 300 mg/kgbb/hari
mempengaruhi kadar kolesterol tikus diabetes mellitus yang diinduksi dengan
STZ.
Hasil tersebut sesuai dengan penelitian sebelumnya bahwa pemberian
Nigella sativa dengan dosis 400 mg/kgbb/hari selama 28 hari memberikan efek
signifikan (p<0.05) pada penurunan kolesterol.40 Hal ini menunjukkan bahwa
Nigella sativa memiliki efek menurunkan kadar kolesterol bahkan dengan
penurunan dosis (300 mg/kgbb/hari) dan pengurangan jangka waktu pemberian
(21 hari).
Fungsi perlindungan terhadap sel beta pankreas dan peningkatan sekresi
insulin oleh Nigella sativa merupakan penyebab terjadinya penurunan kolesterol
darah pada tikus kelompok terapi melalui peningkatan sensitivitas enzim
lipoprotein lipase (LPL) dan inhibisi hormon sensitif lipase.13,19 Sehingga akan
memberikan efek penurunan kadar kolesterol darah.
Penurunan kadar kolesterol darah setelah pemberian ekstrak Nigella sativa
pada kelompok perlakuan juga dapat terjadi karena efek hambat Nigella sativa
pada aktivitas enzim HMG-CoA reduktase di hepar, meningkatkan sekresi dari
empedu dan mengurangi absorbsi lemak dari usus halus. Sehingga pemberian
ekstrak Nigella sativa secara efektif dapat menurunkan kadar kolesterol darah
pada hewan percobaan juga manusia.41
35
4.3 Keterbatasan Penelitian
Selama penelitian berlangsung, banyak hambatan yang didapat antara lain:
1.
Beberapa hewan coba yang mati, sehingga jumlah akhir hewan coba
berjumlah 24 ekor. Kurangnya higienitas kandang hewan coba dapat
menjadi penyebabnya.
2.
Keterbatasan pengalaman dan kemampuan melakukan induksi secara
intra peritonial dan menggunakan sonde untuk memberikan ekstrak
per oral bisa menjadi penyebab kematian hewan coba pasca induksi
dan saat memberikan terapi.
3.
Meskipun telah ada surat keterangan sehat tikus, masih belum
dipastikan
kesehatannya
sehingga
dapat
menjadi
salah
satu
kemungkinan penyebab kematian hewan coba.
4.
Nigella sativa yang digunakan hanya satu dosis saja (300
mg/kgbb/hari) dengan lama pemberian hanya 21 hari sehingga data
kurang bervariasi.
5.
Proses
ekstraksi
tanaman
tidak
dilakukan
sendiri.
BAB 5
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan uji statistik dan pembahasan pada penelitian ini, dapat
disimpulkan :

Pemberian ekstrak habbatussauda (Nigella sativa) dapat mempengaruhi kadar
glukosa darah tikus Sprague dawley yang diinduksi streptozotocin.
Didapatkan penurunan glukosa darah pada kelompok terapi, meskipun
penurunan glukosa darah tidak sampai kembali ke kadar normal. (p= 0.000).

Pemberian ekstrak habbatussauda (Nigella sativa) mempengaruhi kadar
kolesterol tikus Sprague dawley yang diinduksi streptozotocin. Didapatkan
rata-rata kadar kolesterol kelompok terapi adalah lebih rendah dibandingkan
dengan kelompok DM dan mendekati rata-rata kelompok kontrol normal.
(p=0.0034).
5.2 Saran
Bagi peneliti selanjutnya,
1. Diharapkan dapat selalu memperhatikan kebersihan lingkungan penelitian,
higienitas kandang, makanan dan minuman hewan sampel untuk memperkecil
angka kematian hewan sampel selama penelitian.
2. Diharapkan proses ekstraksi dapat dilakukan sendiri, untuk menjamin ekstrak
yang dipakai sesuai dengan yang diinginkan.
3. Diharapkan dapat melakukan penelitian lebih lanjut mengenai pengaruh
pemberian ekstrak habbatussauda (Nigella sativa) menggunakan dosis yang
beravariasi, jumlah sampel yang lebih besar dan waktu penelitian yang lebih
bervariasi.
36
DAFTAR PUSTAKA
1. Perkumpulan Endokrinologi Indonesia (PERKENI), Diabetes Mellitus,
Konsensus Pengelolaan dan Pencegahan DM tipe 2 di Indonesia, Jakarta,
2006; pp 1-6
2. ADA (American Diabetes Association). Standard of medical care in diabetes,
Diabetes Care 2009. 32 (1) : S13-S61
3. Tandra, Hans. Segala Sesuatu Yang Harus Anda Ketahui Tentang Diabetes
Melitus. Jakarta : PT Gramedia Pustaka Utama. 2008
4. Aditama,
Yoga
Tjandra
,
Prevalensi
DM
tahun
2030.
http://www.depkes.go.id/index.php?vw=2&id=2383. Diunduh 10 Juli 2014
5. Sudoyo, Aru W. Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam Jilid III. Jakarta : Interna
Publishing. 2009
6. Sherwood, Lauralee. Fisiologi Manusia: dari sel ke sistem. Edisi 7. Jakarta:
EGC.2010
7. Rao, M.Upendra, et. Al. Herbal Medicine for Diabetes Mellitus: A Review.
USA: International Journal of PharmTech Research.2010
8. Kaleem M, Kirmani D, Asif M, Ahmed Q, Bano Bilqees. Biochemical Effects
of Nigella sativa L Seeds in Diabetic Rats. Indian Journal of Experimental
Biology vol 44. 2006. pp745-748.
9. Ali BA, Bamosa AO, Al-Hawasawi ZA. Effect of Nigella sativa on blood lipids in
normal rats. Arab Gulf J Sci Res 2003; 21: 102-109.
10. Aggarwal BB, Kunnumakkara AB, Harikumar KB, Tharakan ST. Potential of
spice-derived phytochemicals for cancer prevention. Planta Med 2008; 74:
1560-1569.
11. Akbarzadeh, et al. Inducton of Diabetes By Streptozotocin in Rats. Indian
Jornal of Clinical Biochemistry. 2007. 22 (2) pp60-64.
12. Direktorat Pengendalian penyakit tidak menular. Pedoman Pengendalian
Penyakit Diabetes Mellitus.2008
,http://www.depkes.go.id/index.php?vw=2&id=2383, Diunduh 22 Juni 2014
13. Tortora, J Gerard. Principles of Anatomy and Physiology. 12th edition. USA:
John Wiley and Sons. Inc. 2009
14. Price, Sylivia Anderson. Patofisiologi: Konsep Klinis Proses-proses Penyakit
vol.1, edisi 6. Jakarta:EGC.2005
37
38
15. Sherwood, Lauralee. Fisiologi Manusia: dari sel ke sistem. Edisi 7. Jakarta:
EGC. 2010
16. Longo, Dan L et. al.Harrisons Principles of Intenal Medicine 18 th Edition.
USA: Mc.Graw-Hill. 2012.
17. Murray K, et al. Harpers Illustrated Biochemistry, 28th ed. USA: Mc. GrawHill. 2008.
18. Gardner D, Sholback D. Greenspans Basic and Clinical Endocrinology 8th
Edition. USA:Mc.Graw-Hill. 2007
19. Marks D, Marks A. Marks Basic Medical Biochemistry: A Clinical Approach
2nd Edition. USA: Lippincott Williams and Wilkins. 2005
20. Lukman, Malisa. Efek Ekstrak Kayu Manis (Cinnamomum burmanii) terhadap
Kadar TG, LDL, Kolesterol Tikus Model Diabetes Melitus Tipe 1 yang
Diinduksi Aloksan. Universitas Islam Malang. 2011
21. Raza Hider, John Annie. Streptozotocin-Induced Cytotoxicity, Oxidative
Stress and Mitochondrial Dysfunction in Human Hepatoma HepG2 Cells.
International
Journal
of
Molecular
Sciences.
2012.
57515767;doi:10.3390/ijims13055751
22. Alimohammadi et al. Protective and Antidiabetic Effects of Extract From
Nigella Sativa on Blood Glucose Concentrations Againts Streptozotocin
(STZ)-Induced Diabetic in Rats: an Experimental Study with
Histopathological Evaluation. 2013.
23. Mythilli MD, Vyas R, Akila G, Gunaserkaran S. Effect of Streptozotocin on
the Ultrastucture of Rat Pancreatic Islet. Microscopy Research and Technique.
2004. 63: pp274-281
24. Szkudelski T. The Mechanism of Alloxan and Streptozotocin Action in β
Cells of The Rat Pancreas. Physiol Res. 2001. 50: pp536-546.
25. Jorns A, Klempnauer J, Tiedge M, Lenzen S. Recovery of Pancreatic Beta
Cells in Response to Long-term Normoglycaemia After Pancreas or Islet
Transplantation in Severely Streptozotocin Diabetic Adult Rats. 2001.
26. Ali BH, Blunden G. Pharmacological and toxicological properties of Nigella
sativa. Phytother.2003; Res. 17 (4): 299–305.
39
27. El-Din K, El-Tahir H, Bakeet DM. The black seed (Nigella sativa Linnaeus)a mine for multi cures: A plea for urgent clinical evaluation of its volatile oil,
2006. JTU. Med. Sci. 1: 1-19.
28. Ramadan MF (2007). Nutritional value, functional properties and
nutraceutical applications of black cumin (Nigella sativa L.): an overview. Int.
J. Food. Sci. Tech. 42 (10): 1208–1218.
29. Mornin M, Mornin S, Khurdade S, Moibkhan, Butte K. Nigella sativa:
Blessed Seed. International Journal of Research in Ohytoochemistry &
Pharmacology. 2013. 3(2), pp78-84.
30. Aminollah. Deskripsi Tanaman Nigella sativa. 2013 , http: //www.jintan
hitam. org.id, Diunduh 10 Agustus 2014
31. Anggoro,
nanik.
Anatomi
Jintan
hitam
dan
manfaatnya.
http://cybex.deptan.go.id/penyuluhan/anatomi-jinten-dan-manfaatnya-1.
Diunduh 20 Juli 2014
32. Nickavar et. al. Chemical Composition of Fixed an Volatine Oil of Nigella
sativa L. From Iran. Verlag der Zeitschrift für Naturforschung. 2003. 58c,
pp629-631.
33. Abu khader M, Majed. Thymoquinone: A Promising Antidiabetic Agent.
International Journal Diabetic in Developing Countries. 2012; 32: pp65-68
34. Padhye S, Banerjee S, Ahmad A, Mohammad R, Sarkar FH . From here to
eternity - the secret of Pharaohs: Therapeutic potential of black cumin seeds
and beyond.2008, Cancer. Ther. 6 (b): 495-510.
35. Kanter M, Meral I, Yener Z, Ozbek H, Demir H. 2003a. Partial
regeneration/proliferation of the beta-cells in the islets of Langerhans by
Nigella sativa L. in streptozotocin-induced diabetic rats. Tohoku J Exp Med
201: 213–219.
36. Rolfes. S. R. K. Pinna. E. Whitney. Understanding Normal and Clinical
Nutrition. Belmont. USA: Thompson Wadsworth. 2006. Pp:115: 143: 1745:466:791:798.
37. Stumvoll et al. Type 2 Diabetes: Principles of Pathogenesis and Theraphy.
2005. 365: 1333-46
38. Moustafa. S. A.,Toxic Effect of alloxan in the rat. Mechanism and protection
with zinc. The Egyptian Journal of Hospital Medicine. 10:1-13.
http:www.geocities.com/hospital11002/101.PDF . Diunduh 15 Juli 2014
40
39. Yunir. E. S. Soebardi. Terapi non farmakologis pada diabetes mellitus. Dalam:
A. W. Sudoyo,dkk(eds). Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Jilid 3 Edisi 4.
Jakarta : Pusat Penerbitan Ilmu Penyakit Dalam Fakultas Kedokteran
Universitas Indonesia.2007. Hal : 1864-5
40. Kaleem M, Kirmani D, Asif M, Ahmed Q, Bano Bilqees. Biochemical Effects
of Nigella sativa L Seeds in Diabetic Rats. Indian Journal of Experimental
Biology vol 44. 2006. pp745-748.
41. Kocyigit et al.The Effect of Dietary Supplementation of Nigella sativa L. on
Serum Lipid Profile in Rats. Saudi Med Journal. 2009; vol.30 (7): 893-896.
42. Dahlan, Muhammad Sopiyudin. Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan:
Deskriptif, Bivariat, dan Multivariat, Dilengkapi Aplikasi dengan
Menggunakan SPSS. Jakarta: Salemba Medika. 2009
43. Berne, R M., Matthew N Levy., Bruce M Koeppen., Bruce A. Stanton.
Physiology 5th ed. 2007. Elsivier : Mosby.
LAMPIRAN
Lampiran 1
Surat Keterangan Tikus Sehat
Gambar 6.1 Surat Keterangan Tikus Sehat
41
42
Lampiran 2
Hasil Determinasi / Identifikasi Bahan Uji
Gambar 6.2 Hasil Determinasi Tanaman
43
Lampiran 3
Surat Pengujian Ekstrak
Gambar 6.3 Hasil Pengujian Ekstrak
44
Lampiran 4
Gambar Proses Penelitian
Gambar 6.4 Sampel
penelitian
Gambar 6.6 Induksi STZ pada
sampel
Gambar 6.8 Pengambilan
Glukosa darah sampel
Gambar 6.5 Pengukuran bb (bb- 50)
Gambar 6.7 Pemberian
ekstrak Nigella sativa
Gambar 6.9 Proses sacrificed
dan pengambilan darah sampel
(Lanjutan)
45
Gambar 6.10 Proses
pengambilan serum dari darah
Gambar 6.11 Proses
Sentrifugasi
Gamba 6.12r Alat Sentrifuge
Gambar 6.13 Freezer
Gambar 6.14 Streptozotocin
Gambar 6.15 Hasil uji Kit
kolesterol
46
Lampiran 5
Cara Perhitungan
1. Induksi Streptozotocin

Dosis yang digunakan 60 mg/kgbb

Dosis untuk tikus dengan rata-rata 300 g
= 300g x 60 mg
1000 g
= 18 mg

Untuk 30 tikus dengan rata-rata berat badan 300 g
= 30 x 300g x 60 mg
1000 g
= 540 mg

Jadi untuk penyuntikan 30 ekor tikus membutuhkan 540 mg
Streptozotocin

Konsentrasi obat 6 mg
jadi untuk 1 dosis pada tikus 300 g
0,1 ml
adalah 0,3 ml

Untuk 30 ekor tikus
6
0,1
α
= 540
α
= 0,1 x 540 = 9 ml
6

Jadi untuk 540 mg Streptozotocin dibutuhkan 9 ml akuades
47
(Lanjutan)
2. Dosis Pemberian Ekstrak

Dosis 300 mg/kgbb
 300 mg/1000grbb
 30/100gbb

Konsentrasi obat 30 mg
0,1 ml

Pemberian ekstrak Nigella sativa :
30 mg
x 300 = 30  0,3 ml
100 g

Jadi untuk tikus dengan BB 300 g diberikan ekstrak Nigella
sativa sebanyak 0,3 ml
48
Lampiran 6
Identitas
Nama
: Fahrizal Haris Harahap
Jenis Kelamin
: Laki-laki
Tempat, Tanggal Lahir
: Padang Sidempuan, 22 September 1993
Agama
: Islam
Alamat
: Desa Pasar ujung batu, Kecamatan Sosa ,
Kab.Padang Lawas – Sumatera Utara
e-Mail
: [email protected]
Riwayat Pendidikan

1996-1998
: TK Alqur’an Sosa

1999-2004
: SDN. Inpres Sosa

2004-2005
: SDN. 200117 Teladan Padang Sidempuan

2005-2008
: MTSS Darul Mursyid Simanosor Julu

2008-2011
: MAS Darul Mursyid Simanosor Julu

2011-Sekarang
: UIN Syarif Hidayatullah Jakarta