UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK TUMBUHAN MANGROVE Excoecaria agallocha TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA In-vitro vitro SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana S1 Oleh : BERLIAN BUN’YA RISTA 1201070042 PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2017 i ii Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 iii Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 iv Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 HALAMAN PERSEMBAHAN Puji syukurku atas kehadirat Allah SWT atas semua yang telah diberikan kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Uji Daya Hambat Ekstrak Tumbuhan Mangrove Excoecaria agallocha Terhadap Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophila Secara In-vitro” tanpa halangan suatu apapun, dan penulis ingin mempersembahkan skripsi ini untuk : 1. 2. 3. Bapak Tajudin dan Ibu Nurisgiyati tercinta atas kasih sayang yang tiada batasnya, yang selalu mendukung dan mendoakan penulis, penulis ucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya dan sedalam-dalamnya atas doa yang tiada henti-hentinya untuk penulis dan selalu mendukung penulis untuk selalu bersemangat dalam menyelesaikan skripsi ini. Kakakku Intan Zulfiana Rista yang telah memberikan semangat untuk penulis. Tak lupa juga untuk keluarga besarku yang selalu memberi motivasi dan segala kasih sayang selama ini. Terimakasih untuk segalanya. v Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 “MOTTO” “ Sesungguhnya sesudah kesulitan ada kemudahan, maka apabila kamu telah selesai dari suatu urusan kerjakanlah dengan sungguh-sungguh urusan yang lain dan hanya kepada Tuhan-Mulah kamu berharap” (Q.S. Al-Insyiroh : 6-8) “ Barang siapa yang meniti satu jalan untuk menuntut ilmu, akan Allah mudahkan dengan perbuatannya itu jalan menuju syurga” (HR. Tirmidzi) Jika seseorang percaya sesuatu itu tidak mungkin, pikirannya akan bekerja baginya untuk membuktikan mengapa hal itu tidak mungkin. Tetapi, jika seseorang percaya, benar-benar percaya, sesuatu dapat dilakukan maka pikirannya akan bekerja baginya dan membantunya mencari jalan untuk melaksanakannya. (David J. Schwartz) vi Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK TUMBUHAN MANGROVE Excoecaria agallocha TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA In-vitro ABSTRAK Salah satu penyakit yang sering menyerang ikan adalah penyakit bercak merah (Red-Sore Disease), yang disebabkan oleh bakteri Aeromonas hydrophila. Pengobatan terhadap serangan bakteri umumnya dilakukan dengan pemberian antibiotik. Akan tetapi, penggunaan antibiotik dapat menimbulkan efek samping bagi lingkungan maupun terhadap ikan yang dipelihara. Ekstrak tumbuhan mangrove Excoecaria agallocha mempunyai kandungan alkaloid, tanin, flavonoid, terpenoid, dan saponin yang sudah dikenal sebagai antibiotik. Penelitian bertujuan untuk mengetahui daya hambat ekstrak mangrove E. agallocha terhadap pertumbuhan bakteri A. hydrophila. Metode penelitian adalah eksperimental menggunakan Rancangan Acak Lengkap pola faktorial dengan 3 faktor (jenis organ tumbuhan, strain bakteri, dan konsentrasi ekstrak) dengan 48 kali perlakuan dan 3 kali ulangan. Pelarut yang digunakan yaitu n-heksana (non polar) dan metanol (polar). Organ tumbuhan yang digunakan yaitu daun dan batang. Strain bakteri yang digunakan adalah GPI-04, GL-01, GL-02, GJ-01, GK01, dan GB-01. Konsentrasi ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove yang digunakan yaitu 0%, 10%, 20%, dan 30%. Parameter yang diukur yaitu diameter zona hambat menggunakan kertas cakram (metode Kirby Bauer). Analisis data yang digunakan yaitu Non Parametrik Kruskall-Wallis Test dan deskriptif kualitatif. Hasil uji zona hambat untuk ekstrak metanol daun E. agallocha dengan konsentrasi 10% dan 20% menghasilkan zona hambat sebesar 2,55 mm dan 2,46 pada strain GJ-01. Ekstrak n-heksana batang E. agallocha yang memiliki penghambatan terbaik adalah strain GPl-04 dengan konsentrasi 20% sebesar 1,88 dan strain GB-01 konsentrasi 30% sebesar 1,58 mm. Kata kunci : Aeromonas hydrophila, antibakteri, Excoecaria agallocha, in-vitro, zona hambat vii Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 UCAPAN TERIMAKASIH Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan rahmat, taufik serta hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan Skripsi yang berjudul “Uji Daya Hambat Ekstrak Tumbuhan Mangrove Excoecaria agallocha Terhadap Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophila Secara In-vitro”. Sholawat serta salam senantiasa tercurahkan kepada Nabi Muhammad SAW yang telah membawa kita dari jaman kegelapan ke jaman terang benderang seperti sekarang ini. Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terimakasih kepada Ibu Dini Siswani Mulia, S.Pi, M.Si dan Bapak Drs. Heri Maryanto, M.Si selaku pembimbing skripsi yang dengan ikhlas dan sabar meluangkan waktunya dalam membantu, membimbing, memberikan arahan motivasi, dan semangat selama penulisan skripsi ini. Selain itu penulis juga menyampaikan terimakasih kepada : 1. Drs. Pudiyono, M.Hum selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto. 2. Bapak Drs. Arief Husin, M.Si selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. 3. Kedua orang tuaku Bapak Tajudin dan Ibu Nurisgiyati. Terimakasih untuk doa, kasih sayang, semangat, serta motivasi yang kalian berikan. 4. Kakakku Intan Zulfiana Rista yang telah memberikan semangat untuk penulis. 5. Sahabat penelitian Ana Miftahul Janah, Suci Dwi Rahayu, Yunitasari, Di’ayatul Choeriyah, dan Akbar Arifurrohman terimakasih untuk kerjasama dan kebersamaan kita selama ini. 6. Teman-teman Cost Tea Ibnu, Zaffa, Rendy, dan Zakka. Terimakasih untuk keceriaan dan semangat yang kalian berikan. 7. Seluruh teman mahasiswa Program Studi Pendidikan Biologi, terimakasih atas kerjasama dan motivasinya. 8. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang turut membantu hingga skripsi ini terselesaikan. viii Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 Penulis menyadari bahwa dalam penulisan skripsi jauh dari sempurna, baik dari segi materi maupun penyususnannya. Mudah-mudahan skripsi ini dapat berguna bagi pembaca dan adanya kritik serta saran yang membangun dari pembaca sangat penulis harapkan. Purwokero, 22 Januari 2017 Penulis ix Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 DAFTAR ISI Halaman UCAPAN TERIMA KASIH ................................................................... viii DAFTAR ISI ............................................................................................. x DAFTAR TABEL .................................................................................... xii DAFTAR GAMBAR ................................................................................ xiii DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ xiv BAB I. PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ......................................................................... 1 1.2 Rumusan Masalah .................................................................... 3 1.3 Tujuan Penelitian ...................................................................... 3 1.4 Manfaat Penelitian .................................................................... 3 BAB II. TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Tumbuhan Mangrove Excoecaria agallocha ........................... 4 2.2 Bakteri Aeromonas hydrophila ................................................ 7 2.3 Ekstraksi dan Maserasi ............................................................. 9 BAB III. METODE PENELITIAN 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian .................................................. 10 3.2 Alat dan Bahan Penelitian ........................................................ 10 3.3 Prosedur Kerja .......................................................................... 11 3.4 Rancangan Penelitian ............................................................... 18 3.5 Analisis Data ............................................................................ 18 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Ekstraksi Tumbuhan Mangrove Excoecaria agallocha ........... 19 4.2 Uji Fitokimia ............................................................................ 23 4.3 Purifikasi Bakteri A. hydrophila Strain GPl-04, GB-01, GL01, GL-02, GJ-01, dan GK-01 ................................................ 26 4.4 Penghitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GPl-04, GB-01, GL-01, GL-02, GJ-01, dan GK-01 ............... 28 x Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 4.5 Uji Daya Hambat Ekstrak Tumbuhan Mangrove E. agallocha Terhadap Pertumbuhan Aeromonas hydrophila ..... 30 BAB V. SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan ................................................................................ 35 5.2 Saran ...................................................................................... 35 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 36 LAMPIRAN .............................................................................................. 38 xi Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 DAFTAR TABEL Halaman Tabel 4.1 Bahan Pembuatan Ekstrak Mangrove E. agallocha ................... 19 Tabel 4.2 Bahan Pembuatan Ekstrak Metanol Daun dan Batang E. agallocha ............................................................................... 21 Tabel 4.3 Hasil Ekstraksi Metanol Daun dan Batang E. agallocha ........... 21 Tabel 4.4 Bahan Pembuatan Ekstrak n-Heksana Daun dan Batang E. agallocha ............................................................................... 22 Tabel 4.5 Hasil Ekstraksi n-Heksana Daun dan Batang E. agallocha ....... 22 Tabel 4.6 Hasil Uji KLT Ekstrak Metanol Daun dan Batang .................... 23 Tabel 4.7 Hasil Uji KLT Ekstrak n-Heksana Daun dan Batang ................ 25 Tabel 4.8 Penghitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GPl-04, GB-01, GL-01, GL-02, GJ-01, dan GK-01 .................. 30 Tabel 4.9 Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Metanol Tumbuhan Mangrove E. agallocha Terhadap Pertumbuhan A. hydrophila .................................................................................. 31 Tabel 4.10 Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak n-Heksana Tumbuhan Mangrove E. agallocha Terhadap Pertumbuhan A. hydrophila ............................................................................. 33 xii Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Pohon E. agallocha ................................................................ 5 Gambar 2.2 Daun dan Batang E. agallocha ............................................... 5 Gambar 4.1 Bahan Pembuatan Ekstrak ...................................................... 20 Gambar 4.2 Hasil Uji KLT Ekstrak Metanol ............................................. 24 Gambar 4.3 Hasil Uji KLT Ekstrak n-Heksana ......................................... 26 Gambar 4.4. Hasil Purifikasi Isolat Bakteri A. hydrophila ........................ 27 xiii Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017 DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1 Hasil Perhitungan Randemen Ekstrak Daun Dan Batang Tumbuhan Mangrove E. agallocha ...................................... 39 Lampiran 2 Penghitungan Koloni Bakteri A. hydrophila dengan TPC .... 40 Lampiran 3 Foto Hasil Penghitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GPl-04, GB-01, GL-01, GL-02, GJ-01, dan GK-01 ............................................................................. 43 Lampiran 4 Data Mentah Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Metanol Tumbuhan Mangrove E. agallocha ...................................... 46 Lampiran 5 Hasil Analisis Non Parametrik Uji Daya Hambat Ekstrak Metanol Daun Tumbuhan Mangrove E. agallocha .............. 50 Lampiran 6 Hasil Analisis Non Parametrik Uji Daya Hambat Ekstrak Metanol Batang Tumbuhan Mangrove E. agallocha ............ 56 Lampiran 7 Data Mentah Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak n-Heksana Tumbuhan Mangrove E. agallocha ...................................... 62 Lampiran 8 Hasil Analisis Non Parametrik Uji Daya Hambat Ekstrak n-Heksana Daun Tumbuhan Mangrove E. agallocha .......... 66 Lampiran 9 Hasil Analisis Non Parametrik Uji Daya Hambat Ekstrak n-Heksana Batang Tumbuhan Mangrove E. agallocha ........ 72 Lampiran 10 Foto Uji Zona Hambat Ekstrak Metanol .............................. 78 Lampiran 11 Foto Uji Zona Hambat Ekstrak n-Heksana ........................... 82 Lampiran 12 Dokumentasi Penelitian ........................................................ 86 xiv Uji Daya Hambat..., Berlian Bun'ya Rista, FKIP UMP 2017