pra sidang - Unpad Repository

advertisement
FORMULASI GEL ANTIOKSIDAN KITOSAN DENGAN
MENGGUNAKAN BASIS AQUPEC 505 HV
Nasrul Wathoni, Boesro Soebagio, Ayu Meiza Rachim.
Fakultas Farmasi, Universitas Padjadjaran-Jatinangor
ABSTRAK
Telah dilakukan penelitian yang bertujuan untuk membuat sediaan gel dari kitosan
yang berkhasiat sebagai antioksidan. Aktivitas antioksidan kitosan secara in vitro
menggunakan metode DPPH. Hasil pengujian menunjukan IC50 kitosan sebesar
0,0044 %. Formulasi gel dibuat dengan menggunakan basis aqupec 505 HV 1 %.
Kemudian diamati stabilitas gel yang meliputi perubahan konsistensi, warna, bau, pH
dan viskositas selama 56 hari penyimpanan juga dilakukan penguji keamanan gel.
Hasil penelitian menunjukan bahwa semua gel kitosan stabil dalam aspek konsistensi,
warna dan bau. Gel mengalami penurunan pH namun masih berada dalam rentang
persyaratan pH gel untuk kulit. Viskositas gel formula 1 dan 2 (formula tanpa kitosan
dan formula dengan kitosan 0,01 %) stabil, sedangkan gel formula 3 dan 4 (formula
dengan kitosan 0,02 % dan 0,03 %) mengalami penurunan viskositas. Gel yang
dibuat aman digunakan.
Kata kunci: antioksidan, kitosan, Aqupec 505
ABSTRACT
Research of gel formulation from chitosan that have an antioxidant effect has been
studied. Antioxidant activity of chitosan The result showed that the chitosan have
IC50 0,0044 %. Gels were formulated by using aqupec 505 HV 1 %. Then the
stability of the gel which consist of consistency, colour, odor, pH and viscosity during
56 days was determined. The safety of gels was also determined. The results showed
that the consistency, colour and odor of all gel was stable. All of the gel showed a
slight decrease in pH during the store time but still followed the condition of pH of
skin. The viscosity of gel formula 1 and 2 (formula that contains no chitosan and
0,01% chitosan) were stable, but gel formula 3 and 4 (formula that contains 0,02 %
and 0,03 %) decrease. Gels were safe to used.
Keywords: antioxidant, chitosan, aqupec 505
bebas
PENDAHULUAN
Antioksidan
atau
peredam
baru
yang
jumlahnya
akan
bertambah(Inayah,2006).
radikal bebas adalah suatu senyawa yang
Sasaran utama radikal bebas
biologis
adalah asam – asam lemak jenuh yang
terhadap efek yang merusak dari suatu
merupakan komponen utama membran
proses
dapat
sel dan organel – organel sel. Radikal
berlebih
bebas yang berlebihan menyebabkan
dapat
melindungi
atau
reaksi
menyebabkan
(Krinsky,
merupakan
sistem
yang
oksidasi
1992).
Antioksidan
senyawa
yang
juga
antioksidan
seluler
tidak
dapat
dapat
menetralkanya sehingga berakibat pada
menghambat oksigen reaktif dan radikal
kerusakan sel, dan mendasari timbulnya
bebas dalam tubuh. Senyawa antioksidan
berbagai
macam
ini akan menyerahkan satu atau lebih
kanker,
penyakit
elektron kepada radikal bebas sehingga
rematik,
artitis,
menjadi bentuk molekul yang normal
berperan terhadap proses penuaan dini
kembali dan menghentikan berbagai
(Wijaya, 1996).
kerusakan yang ditimbulkan (Dalimartha
dan Soedibyo,1999).
jantung,
katarak,
seperti
koroner,
dan
ikut
Berdasarkan perolehanya dikenal
dua
Perhatian terhadap radikal bebas
penyakit;
macam
antioksidan
antioksidan,
alami
dan
yaitu
antioksidan
dan antioksidan semakin meningkat serta
buatan (sintetik), salah satu senyawa
penemuan sumber–sumber baru senyawa
sintetik
antioksidan
antioksidan
yang potensial
semakin
yang
berkhasiat
adalah
sebagai
kitosan.
Kitosan
diusahakan. Hal ini disebabkan radikal
adalah turunan kitin yang diisolasi dari
bebas dapat menimbulkan kerusakan –
kulit udang, rajungan, kepiting, dan kulit
kerusakan. Radikal bebas merupakan
serangga lainnya. Kitosan merupakan
molekul yang relatif
stabil, memiliki
kopolimer alam berbentuk lembaran
elektron yang tidak berpasangan di
tipis, tidak berbau, berwarna putih
orbital luarnya sehingga bersifat reaktif
(Rismana,2004).
dalam mencari pasangan elektron. Jika
Sumber
utama
pembuatan
terbentuk dalam tubuh, akan terjadi
serbuk kitosan adalah kitin, nama kitin
reaksi berantai dan menghasilkan radikal
(chitin) berasal dari bahasa Yunani yang
artinya
jubah atau amplop, kitin
diisolasi
dari
eksoskleton
berbagai
bentuk gel jarang
crustacean, terutama kepiting dan udang.
bentuk
Kitin merupakan komponen utama dari
keuntungan diantaranya tidak lengket,
struktur
golongan
tidak mengotori pakaian, gel mempunyai
Annelida,
daya aliran tiksotropik dan pseudoplastik
tubuh
Crustacea,
hewan
Antropoda,
Mollusca dan Nematoda (Neely, 1969).
gel
dijumpai padahal
yaitu
gel
mempunyai
berbentuk
beberapa
padat
apabila
Secara struktur kimia, kitosan
disimpan dan akan segera mencair bila
adalah kitin yang telah mengalami
dikocok, konsentrasi bahan pembentuk
deasetilasi (kehilangan gugus asetil),
gel yang dibutuhkan hanya sedikit untuk
Adanya gugus amina ini menjadikan
membentuk
massa
kitosan bermuatan parsial positif kuat.
viskositas
gel
Hal ini menyebabkan kitosan dapat larut
perubahan
dalam larutan asam sampai netral. Selain
penyimpanan (Lieberman,1989).
itu,
muatan
positif
gel
yang
baik,
tidak
mengalami
yang berarti
pada suhu
tersebut
Gel merupakan sistem semipadat
menyebabkan kitosan dapat menarik
terdiri dari suspensi yang dibuat dari
molekul-molekul yang bermuatan parsial
partikel anorganik yang kecil atau
negatif seperti minyak, lemak, dan
molekul organik yang besar, terpenetrasi
protein. (Ronaldo dkk,2006).
oleh suatu cairan (Dirjen Badan POM
Kitosan dalam perkembangannya telah
RI, 1995).
dimanfaatkan dalam bidang industri,
Formulasi umum pembentuk gel
pangan, farmasi dan pertanian, dan lain-
mempunyai sifat sebagai hidrokoloid
lain, dalam berbagai bentuk dan tujuan,
atau koloid pelindung yang mempunyai
dalam bidang
farmasi, diantaranya
daya hidrasi yang cukup tinggi karena
sebagai obat luka, obat pelangsing
dapat mempertinggi viskositas pembawa
tubuh,
kecuali itu membungkus partikel –
antibakteri,
antikolesterol,
antitumor,
antioksidan,
sebagai
partikel
bahan
yang
terdispersi,
pengemulsi, dan dapat membentuk gel
mengurangi interaksi partikel- partikel
(Toharisman,2007).
tersebut
Bentuk
sediaan
sehingga
mengurangi
antioksidan
kecendrungan untuk menjadi satu atau
topikal yang banyak terdapat dipasaran
mengendap. Gel dapat dibuat dari
yaitu bentuk krim atau lotio, sedangkan
sejumlah bahan termasuk diantaranya
tragakan, sodium alginate, dan bahan –
Dibuat larutan uji dalam berbagai
bahan pembentuk gel yang lainnya
konsentrasi
dalam
pelarut
ethanol
termasuk derivate selulosa dan gelatin
timbang 100 mg kitosan dan larutkan
protein. Namun pada penelitian kali ini
dalam 100 ml ethanol didapat larutan
akan digunakan aqupec 505 HV sebagai
awal untuk pengenceran larutan uji
basis gel. Aqupec memiliki karakteristik
Pembuatan larutan DPPH
sebagai larutan netral yang larut dalam
DPPH (4,0 mg) dilarutkan dalam
alkohol dan air, dapat mengembang
ethanol sampai 100 ml sehingga didapat
dalam air, serta memiliki kemampuan
larutan 0,004% (40,0 bpj). Larutan
untuk meningkatkan viskositas dalam
dijaga pada suhu rendah, terlindung dari
konsentrasi yang kecil. Sifat aqupec
cahaya untuk segera digunakan.
inilah yang dimanfaatkan oleh industri
Penetapan maksimum DPPH
kosmestik untuk membentuk basis gel.
Larutan
ditambahkan
Alat
Alat yang lazim digunakan di
laboratorium
farmasi
fisika
laboratorium
penelitian,
pH
dan
meter
Metrohm 744, Spektrofotometer UVVisible (Specord 200 Analytik Jena ),
DPPH
(4,0
ml),
ethanol
5
ml,
dihomogenkan
dan
diamati
absorbansinya pada 400 – 600 nm
Pengukuran absorbansi % inhibisi
senyawa uji
Larutan
uji
(2
ml)
dalam
dan Viskotester VT – 04 F Rion.,LTD.
berbagai konsentrasi, ditambah larutan
Bahan
DPPH ( 4 ml ), dihomogenkan ,
Kitosan
diperoleh
dari
IPB
didiamkan
30
menit
absorbansinya
Unpad), Aqupec HV 505, Trietanolamin,
didapat dari langkah diatas. Sebagai
Gliserin,
blanko digunakan larutan induk DPPH
Paraben,
Aquades,
Propilenglikol, Ethanol 95%
maksimal
dibaca
Bogor, DPPH (Laboratorium Kimia
Metil
pada
dan
yang
Pengukuran IC50
Harga IC50 dihitung dari kurva
regresi linier antara % inhibisi serapan
METODE PENELITIAN
Penetapan
IC50
menggunakan
spektrofotometer
dari
DPPH
kitosan
dengan berbagai
dengan
(larutan uji)
konsentrasi
kiosan
Pembuatan sediaan gel dari kitosan
Tabel 3.1 Formula gel dari kitosan
Bahan
Formula 1
Aqupec HV 505
1%
TEA
2%
Gliserin
25%
Propilenglikol
5%
Kitosan
Metil paraben
0,2%
Alkohol 70%
20
Aquadest ad
100
Formula 2
1%
2%
25%
5%
0,01%
0,2%
20
100
Cara pembuatan :
Aqupec
aquadest
Formula 3
1%
2%
25%
5%
0,02%
0,2%
20
100
Formula 4
1%
2%
25%
5%
0,03%
0,2%
20
100
paraben yang dilarutkan dengan ethanol
dikembangkan
selama
1
jam,
dalam
kemudian
sedikit demi sedikit hingga tercampur.
Tambahkan basis gel sedikit
demi
digerus sambil ditambah TEA sedikit
sedikit pada kitosan, gerus sampai
demi sedikit sampai terbentuk massa gel.
homogen.
Lalu
ditambah
propilenglikol.
gliserin.
Dan
Tambahkan
metil
Pembuatan sediaan gel dari vitamin C
Tabel 3.2 Formula gel dari vitamin C
Bahan
Formula 1
Aqupec HV 505
1%
TEA
2%
Gliserin
25%
Propilenglikol
5%
Vitamin C
Metil paraben
0,2%
Alkohol 70%
20
Aquadest ad
100
Formula 2
1%
2%
25%
5%
0,01%
0,2%
20
100
Cara pembuatan :
Aqupec
aquadest
Formula 3
1%
2%
25%
5%
0,02%
0,2%
20
100
Formula 4
1%
2%
25%
5%
0,03%
0,2%
20
100
Tambahkan basis gel sedikit
dikembangkan
selama
1
jam,
dalam
kemudian
demi
sedikit pada vitamin C, gerus sampai
homogen.
digerus sambil ditambah TEA sedikit
Pengujian
demi sedikit sampai terbentuk massa gel.
sediaan gel yang mengandung kitosan
Lalu
tambahkan
propilenglikol.
gliserin.
Tambahkan
Dan
metil
efektifitas
antioksidan
Pengujian dilakukan dengan cara
melihat
absorbansi
secara
paraben yang dilarutkan dengan ethanol
spektrofotometri UV – visible pada
sedikit demi sedikit hingga tercampur.
sediaan gel yang baru dibuat. Sediaan
gel dilarutkan dalam air sampai larut
Pengukuran viskositas
kemudian tambahkan ethanol umtuk
Sediaan
pengkodisian lalu
dicampur dengan
dengan
kitosan
dan
sediaan gel standar diukur viskositasnya
larutan DPPH dalam ethanol, kemudian
dengan
absorbansi dibaca dinolkan terhadap
dengan spindle yang cocok ( spindel
blanko
nomor 2 ). Pengukuran dilakukan 3 kali
gel
yang
dilarutkan
dalam
menggunakan
viscometer
campuran air dan ethanol.
untuk masing – masing sediaan gel pada
Pengujian stabilitas
hari ke 1, 3, 7 dan selanjutnya setiap
Pengukuran secara organoletik
minggu sampai hari ke 56 penyimpanan.
Analisis organoleptik dilakukan
dengan
mengamati
perubahan
Uji keamanan
–
Pengujian
keamanan
sediaan
perubahan bentuk, warna, dan bau dari
dilakukan dengan uji iritasi terhadap 10
sediaan dengan kitosan dan sediaan
orang
standar selama waktu penyimpanan,
digunakan adalah uji temple terbuka,
pengamatan perubahan – perubahan
yang
bentuk,
tersebut
mengoleskan formula pada punggung
dilakukan pada hari ke 1, 3, 7 dan
tangan kanan sukarelawan seluas 2,5
selanjutnya setiap minggu sampai hari
cm2 dan punggung tangan kiri diolesi
ke 56 penyimpanan.
dengan
Pengukuran pH
keamanan dilakukan pada tempat yang
warna
dan
bau
sukarelawan.
dilakukan
formulasi
Teknik
dengan
gel
standar.
yang
cara
Uji
dilakukan
sama selama 3 hari berturut – turut
dengan cara mencelupkan pH meter ke
setelah pembuatan dan pada hari terakhir
dalam sediaan gel dengan kitosan dan
penyimpanan untuk masing – masing
sediaan gel standar yang diencerkan
sediaan. Gejala yang timbul diamati,
terlebih dahulu, pH sediaan akan tertera
kemudian hasilnya dibandingkan dengan
pada monitor pengukuran dilakukan
hasil olesan pada punggung tangan kiri.
pada hari ke 1, 3, 7 dan selanjutnya
Iritasi primer : reaksi kulit sesaat setelah
setiap minggu sampai hari ke 56
pelekatan diberi tanda +
penyimpanan.
Iritasi sekunder : reaksi ini timbul
Pengukuran
pH
beberapa jam setelah penyentuhan diberi
tanda ++
Analisis data dari pengujian stabilitas
Bentuk : serbuk
sediaan
Warna : putih
Analisis secara statistik terhadap
hasil pengukuran pH dan viskositas
selama
56
hari
Bau
: khas kitosan
Rasa
: tidak ada rasa
penyimpanan
menggunakan desain blok lengkap acak
subsampling
Sebelum
digunakan,
kitosan
dianalisis untuk memperoleh informasi
karakteristik kitosan yang kemudian
HASIL DAN PEMBAHASAN.
dibandingkan dengan kitosan komersil.
Sifat serbuk kitosan
Hasil perbandingan karakteristik kitosan
Pemeriksaan
serbuk
kitosan
meliputi pemeriksaan
organoleptis
yang digunakan pada penelitian ini dapat
dilihat pada tabel 4.1.
dan
analisis
FTIR
pemeriksaan organoleptis :
Tabel 4.1 Karakteristik Kitosan
Sifat
Parameter
Kadar air (%)
Kadar abu (%)
Total Nitrogen (%)
Derajat Deasetilasi
Viskositas
 Rendah
 Sedang
 Tinggi
 Paling tinggi
Ukuran partikel
Sumber : Protan Laboratories Inc
Kitosan komersil
Kitosan uji
< 10 %
<2%
<5%
> 70 %
13,88 %
2,34 %
5,13 %
69 %
< 200
200 – 799
800 – 2000
> 2000
Butiran - bubuk
210
Hasil Penetapan IC50 dari Kitosan Dengan Metode DPPH
Penetapan λ maksimum DPPH
DPPH adalah senyawa radikal bebas
peredam radikal bebas yang bereaksi
berwarna
dalam jumlah besar, maka DPPH dapat
ungu.
Apabila
DPPH
direaksikan dengan senyawa peredam
berubah
radikal bebas, intensitas warna ungu
Perubahan warna ini dapat diukur pada
akan
spektrofotometri pada λ 520 nm. Dari
berkurang
dan
bila
senyawa
menjadi
warna
kuning.
pengukuran absorbansi DPPH diketahui
DPPH diamati pada ketiga panjang
λ maksimum berada pada 520 nm.
gelombang yaitu 500 nm, 520 nm, 540
Dalam penelitian ini metode analisisnya
nm, demikian pula pada pengamatan
dilakukan dengan cara pengamatan tiga
absorbansi vitamin C yang direaksikan
panjang
dengan DPPH juga diamati pada ketiga
gelombang
dimana
salah
satunya merupakan panjang maksimum
panjang
dari DPPH. Panjang gelombang yang
Perhitungan % inhibisi kitosan
diamati adalah 500 nm, 520 nm, 540 nm.
Dari
Tujuan
spektrofotometer
menggunakan
gelombang
tersebut.
pengukuran
dengan
tiga
panjang
adalah
untuk
kitosan dalam lima variasi konsentrasi.
meminimalisasi kesalahan yang terjadi
Dari data absorbansi yang didapat
sebagai akibat spectrum yang saling
kemudian dihitung % inhibisi kitosan
tumpang
mengganggu
terhadap radikal bebas DPPH. Data
pengamatan serapan DPPH dan panjang
absorban dan % inhibisi dari beberapa
gelombang
konsentrasi
gelombang
ini
tindih
yang
dan
sama.
Absorbansi
kitosan yang telah direaksikan dengan
didapat
kitosan,
absorbansi
yaitu
sebagai
berikut :
Tabel 4.2 Hasil Absorbansi dan % inhibisi dari
beberapa konsentrasi kitosan
Konsentrasi
Ahitung
Lar.uji (%)
DPPH
0,1064
100
0,0258
75
0,0304
50
0,0441
25
0,0699
12,5
0,0723
%inhibisi
75,752
71,428
58,553
34,305
32,048
Keterangan : A500 = absorban pada 500nm
A520 = absorban pada 520nm
A540 = absorban pada 540nm
Dari data pada tabel 4.2 dapat dibuat
% inhibisi sebagai y maka diperoleh
kurva regresi linier antara % inhibisi
persamaan regresinya y = 0,5529x +
dengan konsentrasi kitosan, yaitu dengan
25,389
memasukkan konsentrasi sebagai x dan
90
y = 0.5529x + 25.389
R2 = 0.9401
80
70
% inhibisi
60
50
40
30
20
10
0
0
20
40
60
80
100
120
konsentrasi (ppm)
Gambar 4.2 kurva regresi linier untuk penetapan IC50 kitosan
Pengujian
aktivitas
antioksidan
konsentrasi kitosan sebagai sumbu x
menunjukkan bahwa semakin tinggi
dengan aktivitas penangkapan radikal
konsentrasi kitosan semakin meningkat
bebas sebagai sumbu y, maka didapat
aktivitas antioksidannya
IC50 = 0,0044 % ( 0,0044 kitosan dalam
penetapan IC50
100
ml
etanol)
Dengan menggunakan persamaan regresi
linier
yang
menyatakan
hubungan
4.5 Hasil Penetapan IC50 dari Vitamin C Dengan Metode DPPH
:Tabel 4.3 Hasil Absorbansi dan % Inhibisi dari
Beberapa Konsentrasi Vitamin C
Konsentrasi
Ahitung
Lar.uji (%)
DPPH
0,1064
8 x 10
0,0559
5 x 10
0,0747
3 x 10
0,0859
2 x 10
0,0954
1 x 10
0,1025
Keterangan :
% inhibisi
47,36
29,66
19,11
10,17
3,48
A500 = absorban pada 500nm
A520 = absorban pada 520nm
A540 = absorban pada 540nm
Dari data pada tabel di atas dapat dibuat
x dan % inhibisi sebagai y maka
kurva rehresi linier antara % inhibisi
diperoleh persamaan regresinya y =
denagn konsentrasi vitamin C, yaitu
6,2067x + 1,6294
dengan memasukkan konsentrasi sebagai
60
y = 6.2058x - 1.624
R2 = 0.9945
50
% inhibisi
40
30
20
10
0
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
konsentrasi (ppm)
Gambar 4.3 kurva regresi linier untuk penetapan IC50 vitamin C
Dengan menggunakan persamaan
Perbandingan IC50 kitosan dan IC50
regresi, maka didapat IC50 vitamin C =
vitamin C adalah 1 : 8 x 10-3 ( IC50
8,32 x 10-4 %. Dari hasil perhitungan
kitosan
IC50 kitosan dan IC50 vitamin C dapat
1
kali vitamin C )
10000
iketahui perbandingan potensi keduanya.
4.6 Hasil Pembuatan Sediaan Gel Antioksidan
Tabel 4.4 Hasil Pembuatan Sediaan Gel Antioksidan
Formula
Warna
Bau
1
Bening
Tidak berbau
2
Bening
Tidak berbau
3
Bening keruh
Tidak berbau
4
Bening keruh
Tidak berbau
Keterangan :
Bentuk
Kental
Kental
Kental
Kental
1 : formula tanpa kitosan
2 : formula dengan kitosan 0,01 %
3 : formula dengan kitosan 0,02 %
4 : formula dengan kitosan 0,03 %
Gel tanpa penambahan kitosan
pada gel berwarna putih. Intensitas
berwarna bening sedangkan dengan
warna
penambahan kitosan dihasilkan sediaan
meningkatnya konsentrasi kitosan yang
gel berwarna bening sampai bening
ditambahkan.
keruh karena kitosan yang ditambahkan
gel
bertambah
dengan
Hasil Pengujian Efektifitas Sediaan Gel
Tabel 4.5 Data absorbansi hitung dan inhibisi
dari sediaan gel terhadap DPPH
Formula
A Hitung
(F)
DPPH
F2
F3
F4
F6
F7
F8
Keterangan :
0,0996
0,0343
0,0363
0,0359
0,0340
0,0299
0,0308
65,56
69,86
63,96
65,86
69,93
69,08
F2 : formula dengan kitosan 0,01 %
F3 : formula dengan kitosan 0,02 %
F4 : formula dengan kitosan 0,03 %
F6 : formula dengan vitamin C 0,01 %
F7 : formula dengan vitamin C 0,02 %
F8 : formula dengan vitamin C 0,03 %
Setelah dibuat gel, dilakukan uji
aktivitas
% inhibisi
antiokidan
melihat
sediaan gel walaupun dapat terlihat
apakah kitosan masih memiliki aktiitas
inhibisi pada fomula vitamin C yang
dibandingkan dengan Vitamin C. Dapat
lebih baik daripada formula kitosan
diihat dari data diatas pada tabel
aktivitas vitamin C didalam sediaan gel
diperoleh bahwa formula gel antioksidan
lebih baik dibanding dengan kitosan
dari formulasi gel kitosan ( F1,F2,F3)
dengan konsentrasi yang sama. Dalam
dan formulasi gel vitamin C (F6, F7, F8)
sediaan gel kitosan terjadi penurunan
tidak terlalu memiliki perbedaan persen
inhibisi, hal ini disebabkan adanya faktor
inhibisi
– faktor yang mempengaruhi penurunan
yang
besar
untuk
memiliki aktivitas antioksidan dalam
namun
pada
formulasi gel vitamin C memiliki persen
kerja
inhibisi
formulasi sediaan dan pengaruh dari cara
yang
sedikit
lebih
besar
dibanding dengan formulasi gel kitosan
pada
konsentrasi
Disimpulkan
bahwa
yang
sama.
kitosan
masih
antioksidan
penyimpanan.
kitosan
dalam
Hasil Pengujian Stabilitas Sediaan Gel
Hasil Pengamatan Organoleptis
Tabel 4.6 Hasil Pengamatan Perubahan Bentuk, Warna, dan Bau Sediaan Gel
Pengamatan
Formula
Waktu Penyimpanan (hari)
1
3
7
14
21
28
35
1
Bentuk
2
3
4
1
Warna
2
3
4
1
Bau
2
3
4
Keterangan :
42
-
49
-
56
-
1 : formula tanpa kitosan
2 : formula dengan kitosan 0,01 %
3 : formula dengan kitosan 0,02 %
4 : formula dengan kitosan 0,03 %
Berdasarkan hasil pengamatan, diketahui
perubahan bentuk, warna maupun bau.
bahwa gel antioksidan tanpa ataupun
Artinya bahwa sediaan gel yang dibuat
dengan
stabil
penambahan
kitosan
0,01%
secara
fisik
0,02% dan 0,03% tidak mengalami
Hasil Pengukuran pH
Tabel 4.7 Hasil Pengukuran pH Sediaan Gel Selama Penyimpanan
Formula
Lama Penyimpanan (hari)
1
3
7
14
21
28
35
1
7,50
7,47
7,47
7,46
7,44
7,39
7,36
2
7,40
7,40
7,39
7,37
7,32
7,30
7,28
3
7,39
7,38
7,39
7,36
7,30
7,29
7,25
4
7,38
7,37
7,34
7,30
7,28
7,28
7,22
1 : formula tanpa kitosan
2 : formula dengan kitosan 0,01 %
3 : formula dengan kitosan 0,02 %
4 : formula dengan kitosan 0,03 %
7.55
7.5
7.45
7.4
pH gel
Keterangan :
42
7,31
7,26
7,23
7,22
F1
7.35
F2
7.3
F3
7.25
F4
7.2
7.15
7.1
7.05
1
3
7
14
21
28
35
42
49
56
Lama Penyimpanan (Hari)
Gambar 4.7 Kurva hubungan lama penyimpanan terhadap pH gel.
49
7,30
7,23
7,22
7,20
56
7,20
7,24
7,21
7,20
Dari lampiran 10 dan tabel 4.7 di atas,
selama 2 minggu. Memasuki minggu ke-
setelah dilakukan perhitungan secara
3
statitik dengan desain acak sempurna
signifikan. pH pada minggu ke-3 sampai
dengan model tetap diperoleh dengan
ke-8 tidak berbeda nyata. Pada formula 4
taraf signifikan α = 0,05 Hipotesis nol
tidak terdapat perbedaan pH yang nyata
(Ho) ditolak untuk semua formula gel
selama 3 hari penyimpanan. Tetapi
yang dibuat. Ini berarti bahwa terdapat
kemudian terjadi perubahan pH, pH
perbedaan pengaruh lama penyimpanan
kembali
gel terhadap nilai pH gel.
minggu ke-5 sampai minggu ke-8.
pH
Untuk mengetahui lebih lanjut
menglami
stabil
dengan
setiap
penyimpanan,
perlakuan
maka
pada
yang
penyimpanan
Secara umum pH gel menurun
perbedaan efek yang lebi terinci pada
kelompok
perubahan
bertambahnya
sehingga
waktu
dapat
dilakukan uji rentang Newman Keuls.
disimpulkan bahwa basis gel sendiri
Berdasarkan analisis uji Newman- Keuls
mengalami
diketahui
tidak
menyebabkan penurunan pH. Penurunan
terdapat perbedaan pH yang signifikan
pH tidak drastis, hanya turun sekitar
pada penyimpanan selama 3 minggu,
0,01-0,06/minggu. pH gel selama 56 hari
terjadi perubahan pH saat penyimpanan
penyimpanan adalah antara. pH tersebut
memasuki minggu ke-4. pH antara
masih sesuai dengan persyaratan pH gel
minggu ke-4 sampai minggu ke-8 tidak
untuk kulit yaitu 5,0-10,0.
bahwa
formula
1,
penguraian
yang
mengalami perubahan yang signifikan.
Pada formula 2 dan 3 pH gel stabil
Hasil Pengukuran Viskositas
Tabel 4.8 Hasil Pengukuran Viskositas Sediaan Gel Selama Penyimpanan
Formula
Lama Penyimpanan (hari)
1
3
7
14
21
28
35
1
277
277
277
273
273
273
270
2
277
277
273
273
273
270
270
3
280
280
280
280
280
280
277
4
290
290
280
280
277
277
270
Keterangan :
1 : formula tanpa kitosan
2 : formula dengan kitosan 0,01 %
3 : formula dengan kitosan 0,02 %
4 : formula dengan kitosan 0,03 %
42
270
270
277
270
49
267
270
273
267
56
267
270
270
267
295
Viskositas Gel (cps)
290
285
F1
280
F2
275
F3
270
F4
265
260
255
1
3
7
14
21
28
35
42
49
56
Lama Penyimpanan (Hari)
Gambar 4.8 Kurva hubungan lama penyimpanan terhadap viskositas gel.
Dari lampiran 11 dan tabel 4.8 di atas,
viskositas gel stabil selama penyimpanan
dapat diketahui bahwa viskositas gel
7
blanko dan gel dengan penambahan
perubahan yang nyata pada minggu ke-8.
berbagai konsentrasi kitosan cenderung
pada gel formula 4, viskositas stabil
memiliki nilai yang stabil. Perhitungan
selama 2 minggu. Terjadi perbedaan
statistika dengan desain acak sempurna
viskositas antara minggu ke-2 dan
untuk
gel
minggu ke-3 namun antara minggu ke-3
taraf
sampai minggu ke-6 viskositas kembali
signifikan α = 0,05 hipotesi nol (Ho)
stabil. Viskositas pada minggu ke-7
diterima untuk formula 1 dan 2. Dengan
sama dengan minggu ke-8.
pengukuran
menunjukkan
viskositas
bahwa
dengan
demikian dapat disimpulkan bahwa tidak
terdapat
perbedaan
pengaruh
lama
minggu.
Viskositas
Viskositas
mengalami
gel
mengalami
penurunan dengan bertambahnya waktu
penyimpanan terhadap viskositas gel
penyimpanan.
formula 1 dan 2.
disebsbkan oleh kondisi lingkungan
Pada formula 3 dan 4 Ho ditolak berarti
penyimpanan
terdapat
kelembapan
perbedaan
pengaruh
lama
Penurunan
seperti
udara.
pH
dapat
cahaya
dan
Kemasan
yang
penyimpanan terhadap viskositas gel.
kurang kedap dapat menyebabkan gel
Untuk
menyerap uap air dari luar, sehingga
mengetahui
lebih
lanjut
perbedaan efek yang lebih terinci pada
menambah
setiap
Viskositas
kelompok
perlakuan
maka
volume
air
meningkat
dalam
gel.
dengan
dilakukan uji rentang Newman-Keuls.
meningkatnya konsentrasi kitosan yang
Berdasarkan analisis uji Newman-Keuls
ditambahkan.
diketahui
bahwa
pada
formula
3,
Hasil Pengujian Keamanan gel Antioksidan Kitosan
Tabel 4.9 Hasil Pengujian Keamanan (Patch Test) Gel Antioksidan dari Kitosan Konsentrasi Tertinggi
No
Sukarelawan
Reaksi pada Kulit
1
A
_
2
B
_
3
C
_
4
D
_
5
E
_
6
F
_
7
G
_
8
H
_
9
I
_
10
J
Pada uji keamanan digunakan metode
deasetilasi sebesar 69%, dan
patch test. Pengujian dilakukan terhadap
viskositas sedang sebesar 210.
10 orang sukarelawan. Gel yang diuji
2. Kitosan
memiliki
aktivitas
adalah gel dengan konsentrasi tertinggi.
antioksidan dengan nilai IC50
Karena
konsentrasi
sebesar
0,0044%
sedangkan
tinggi sukarelawan tidak mengalami
vitamin
C
digunakan
iritasi kulit setelah pemakaian gel maka
sebagai standar memiliki nilai
diasumsikan
IC50 sebesar 8,32 x 10-4 %.
apabila
dengan
dengan
memakai
gel
yang
dengan konsentrasi lebih kecil juga akan
3. Perbandingan IC50 kitosan dan
aman atau tidak terjadi reaksi iritasi.
IC50 vitamin C adalah 1 : 8 x 10-
Dari hasil pengujian dapat disimpulkan
bahwa gel antioksidan kitosan aman
3 ( IC50 kitosan
1
kali
10000
vitamin C ).
SIMPULAN
4. Semua formula gel yang dibuat
Dari hasil penelitian yang diperoleh
dapat diambil kesimpulan bahwa :
1. Dari hasil pengujian analisis
kitosan yang telah dilakukan
didapat hasil kadar air kitosan
13,88%,
kadar
abu
kitosan
sebesar 2,34%, total nitrogen
kitosan sebesar 5,13%, derajat
stabil
secara
organoleptis
meliputi konsistensi, warna dan
bau.
pH
gel
mengalami
perubahan selama penyimpanan
tetapi
masih
dalam
rentang
persyaratan pH gel untuk kulit.
Viskositas gel pada formula 1
dan 2 (formula tanpa kitosan dan
formula dengan kitosan 0,01%)
stabil, sedangkan pada formula 3
dan 4 (formula dengan kitosan
0,02 % dan 0,03%)
terjadi
perubahan viskositas.
5. Sediaan gel antioksidan yang
mengandung kitosan merupakan
sediaan yang relatif stabil dan
aman digunakan.
SARAN
Dari penelitian yang telah dilakukan,
dapat
disarankan
penelitian
lebih
agar
dilakukan
lanjut
mengenai
dilakukan formulasi gel kitosan dengan
bentuk
sediaan
dan
khasiat
yang
berbeda. Evaluasi sediaan dilakukan
dengan alat yang lebih memadai. Dicari
konsentrasi dan kombinasi yang lain
untuk pemakaian dengan aqupec 505
HV sebagai basis gel. Perlu dilakukan
uji lebih lanjut mengenai pengujian
stabilitas kimia pada sediaan gel untuk
mengetahui
antioksidan
kestabilan
sediaan
mengandung kitosan.
aktivitas
gel
yang
DAFTAR PUSTAKA
Ansel, H.C. , 1989, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, Edisi IV, Diterjemahkan oleh Farida
Ibrahim, UI – Press, Jakarta.
Austin, RP. 1976. Chitin as an extender and filter for tobacco. US Patent. No.
3.987.802. 26 oktober 1976.
Dalimartha,S dan Soedibyo, M.1999. Awet Muda dengan Tumbuhan Obat dan Diet
Suplement. Trubus Agriwidya. Jakarta.
Lieberman, Rieger, M.M, and Banker .1989. Pharmaceutical Dosage Form : Disperse System
vol 2. Marcel Dekker Inc. New York
Neely, M. 1969. Chitin and Its Derivates in Industrial. Gums Kelco Company :
California.
Richards, A. Glenn. 1951. The Integument of Arthropods – The Chemical Components and
Their Properties, the Anatomy and Development, and the Permeability. University if
Minnesota Press, Minneapolis. Printed at The North Central Publishing Company, St.
Paul.
Rismana, E. 2003. Serat Kitosan Mengikat Lemak. Pusat P2 Teknologi Farmasi : Jakarta.
Romimohtarto, K dab Sri Juwana. 2001. Biologi Laut - Ilmu Pengetahuan tentang Biota Laut.
Penerbit Djambatan. Jakarta
Ronaldo,R dkk. 2006. Bio – Filter Nikotin Asap Rokok Dari Kitin – Kitosan. Laporan
Penelitian. Bogor : FPIK IPB.
Rosita, N. 2005. Efektivitas kitosan dalam menurunkan kandungan timbal (Pb) pada kerang
hijau (Mytilus viridis) dengan sistem resirkulasi sederhana. Fakultas Perikanan dan
Ilmu Kelautan, Bogor: IPB.
Sanford, PA dan Hucthing, GP. 1987. Chitosan and natural cationic biopolymer,
commercial application. Di dalam: Yalpani (ed). Industrial polisaccarides. Procceding
symposium on the applications and modification of industrial polysaccarides. New
York. 5-7 April 1987. New York: Elseiver Sci. Co. Inc.
Shahidi, F, Janak, KVA, You, JJ. 1999. Food Applications of chitin and chitosan. Journal
Food Science and Technology. 10: 37-51.
Suptijah, P, Salamah, E, Sumaryanto, H, Purwaningsih, S, Santoso, J. 1992. Pengaruh
berbagai isolasi khitin kulit udang terhadap mutunya.
Toharisman,A . 2007. Peluang Pemanfaatan Enzim Kitinase Di Industri Gula. Pusat
Penelitian Perkebunan Gula.
Wijaya, A. 1996. Radikal bebas dan Parameter Status Antioksidan. Forum Diagnostikum
Laboratorium Klinik Prodia, Bandung.
Download