EFEKTIVITAS ANTI-INFLAMASI EKSTRAK DAUN
advertisement
EFEKTIVITAS ANTI-INFLAMASI EKSTRAK DAUN NYAMPLUNG (Callophylum Innophylum) TERHADAP TIKUS PUTIH KARYA TULIS ILMIAH OLEH YUSUA INGKIRAMA WIDA NIM 12.050 AKADEMI ANALIS FARMASI DAN MAKANAN PUTRA INDONESIA MALANG JULI 2015 EFEKTIVITAS ANTI-INFLAMASI EKSTRAK DAUN NYAMPLUNG (Callphylum Innophylum) TERHADAP TIKUS PUTIH KARYA TULIS ILMIAH Diajukan kepada Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang Untuk memenuhi salah satu persyaratan Dalam menyelesaikan program D-3 Bidang farmasi OLEH YUSUA INGKIRAMA WIDA NIM 12.050 AKADEMI ANALIS FARMASI DAN MAKANAN PUTRA INDONESIA MALANG JULI 2015 ABSTRAK Wida, Yusua Ingkirama. 2015. Uji Efektivitas antiinflamasi ekstrak daun nyamplung(Callophylum Innophylum)Terhadap Tikus Putih. Karya Tulis Ilmiah Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang. Pembimbing Erna Susanti Kata Kunci : antiinflamasi, ekstrak daun nyamplung, tikus putih. Tanaman nyamplung (Callophylum Innophylum) merupakan salah satu tanaman yang memiliki banyak manfaat dan fungsi, salah satunya adalah sebagai antiinflamasi. Bagian tanaman yang digunakan adalah daun nyamplung. Fungsi dari daun nyamplung ini hanya pembuktian secara empiris. Oleh karena itu dilakukan penelitian ilmiah yang bertujuan untuk mengetahui efektivitas ekstrak daun nyamplung sebagai antiinflamasi. Penelitian ini menggunakan metode volume udem yang dilakukan dengan menggunakan hewan uji. Objek dalam penelitian ini adalah tikus putih. Objek lain dari penelitian ini adalah ekstrak daun nyamplung dengan beberapa dosis yaitu, dosis 0,1mg, 0,15 mg, dan 0,2 mg, yang diekstrak menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol 70%. Rancangan penelitian ini yaitu memberikan udem pada kaki tikus putih dengan menyuntikan karagenin, kemudian diberi ekstrak daun nyamplung secara oral. Pada perlakuan selama 2 jam. i ABSTRACT Nyamplung plants (Callophylum Inophylum) is one of a plant that has many benefits and functions, one of which is as anti-inflammatory. Empirically plant part used is the nyamplung leaf. Therefore scientific research that aims to know the activity of the leaf extract as an antiinflammatory nyamplung. This study uses edema volume. The object of this research are white rat. Another object of this reseach is an extract of the nyamplung leaf with some variants namely dose, 0.1mg first dose, a second dose of 0.15 mg, and the third dose of 0.2 mg, which is extracted using maceration method by ethanol 70%. The plans of this research are give edema to feet rats by injecting karagenin, then given orally nyamplung leaf extract, In the handling for 2 hours. Keywords: anti-inflammatory, nyamplung leaf extract, white rat. ii KATA PENGANTAR Puji syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah yang berjudul “Uji Efektivitas Antiinflamasi Ekstrak Daun Nyamplung(Callophylum Innophylum) Terhadap Kaki Tikus Putih(Rattus norvegicus)” ini tepat pada waktunya. Adapun tujuan Karya Tulis Ilmiah ini adalah sebagai persyaratan untuk menyelesaikan program Diploma III di Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang. Sehubungan dengan selesainya penulisan Karya Tulis Ilmiah ini, penulis mengucapkan terima kasih kepada : 1. Ibu Dra.Wigang Soelandjariselaku Direktur Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang. 2. Ibu Erna Susanti, MBiomed, Apt. selaku Dosen Pembimbing 3. Ibu Endangselaku Dosen Penguji II 4. Ibu Dra. WayuWuryandari, M.Pd. selaku Dosen Penguji III 5. Bapak dan Ibu Dosen Akademi Farmasi serta semua staff 6. Kedua orang tua yang memberikan do’a dan motivasi. 7. Teman-teman mahasiswa, dan semua pihak yang telah memberikan bimbingan, bantuan, serta arahan secara langsung maupun secara tidak langsung. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa Karya Tulis Ilmiah ini masih mempunyai beberapa kekurangan. Oleh karena itu, kritik dan saran akan sangat diharapkan. Semoga Karya Tulis Ilmiah ini dapat berguna dan bermanfaat. Malang, Juli 2015 Penulis ii DAFTAR ISI ABSTRAK ....................................................................................................................... i KATA PENGANTAR .................................................................................................... ii DAFTAR GAMBAR ..................................................................................................... vi DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................................. vii BAB IPENDAHULUAN ................................................................................................. 1 1.1 Latar belakang ............................................................................................................. 1 1.2Rumusan masalah ......................................................................................................... 3 1.3 Tujuan penelitian ......................................................................................................... 3 1.4 Manfaat penelitian ....................................................................................................... 4 1.5 Asumsi penelitian ........................................................................................................ 4 1.6 Ruang Lingkup dan Keterbatasan Penelitian ................................................................ 4 1.7 Definisi Istilah ............................................................................................................. 5 BAB IITINJAUAN PUSTAKA ...................................................................................... 6 2.1 Tinjauan Tentang TanamanNyamplung....................................................................... 6 2.2 Tinjauan Tentang Flavonoid ........................................................................................ 8 2.3 Definisi Inflamasi ...................................................................................................... 12 2.4Tinjauan Tentang Tikus .............................................................................................. 24 2.5 Tinjauan Tentang Metode Penyarian .......................................................................... 24 2.6 Hipotesis Penelitian ................................................................................................... 25 2.7 Kerangka Operasional ................................................................................................ 26 2.8 Kerangka teori ........................................................................................................... 27 BAB IIIMETODE PENELITIAN ................................................................................ 28 3.1 Rancangan Penelitiann ............................................................................................... 28 3.2 Populasi dan Sampel .................................................................................................. 28 3.3 Lokasi dan Waktu Penelitian ...................................................................................... 29 3.4 Definisi Operasional .................................................................................................. 29 3.5 Instrumen Penelitian .................................................................................................. 29 3.6Pengumpulan Data ...................................................................................................... 30 3.7Analisis Data .............................................................................................................. 32 BAB IVHASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN................................................... 33 iii 4.1 Hasil Penelitian .......................................................................................................... 33 4.2 Pembahasan ............................................................................................................... 36 BAB VPENUTUP .......................................................................................................... 37 5.1 Kesimpulan................................................................................................................ 37 5.2 Saran ......................................................................................................................... 37 DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................................... 38 DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................................. 40 iv DAFTAR TABEL Tabel 3.1 Tabel variabel terikat. ................................................................................... 29 Tabel 4.1. Tabel Hasil Pengamatan Organoleptik ....................................................... 33 Tabel 4.2 Hasil Pengukuran Udem kaki belakang Tikus Selama 2 Jam ..................... 34 v DAFTAR GAMBAR Gambar 2.2.struktur senyawa flavonoid. ........................................................................... 9 Gambar.2.3. struktur senyawa quercetin. ........................................................................ 11 Gambar 2.1.tanaman nyamplung....................................................................................... 8 vi DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1.Perhitungan konversi dosis tikus .............................................................. 40 Lampiran 2.Gambar penelitian. ................................................................................... 41 vii BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar belakang Inflamasi atau peradangan adalah suatu respon jaringan yang sering menyertai suatu cedera atau penyakit.Infeksi/kerusakan jaringan tidak akan sembuh tanpa adanya proses inflamasi. Meskipun inflamasi dapat membantu proses penyembuhan kerusakan jaringan, namun reaksi inflamasi dan proses yang terlibat didalamnya dapat membahayakan tubuh karena proses inflamasi dapat menghancurkan dan menghilangkan/membuang mikroba dan jaringan mati, sehingga akan melukai jaringan normal(Wijaya & S.W, 2004). Didalam tubuh terdapat bakteri yang menguntungkan dan merugikan bagi kesehatan. Salah satu contohnya yaitu bakteri staphylococcus aureus, dimana bakteri ini akan menghasilkan beberapa zat yang dibutuhkan oleh tubuh diantaranya enzim koagulase, hyalurodinase, fosfatase, protease dan lipase. Akan tetapi jika terdapat luka pada tubuh, maka bakteri tersebut akan menjadi patogen dan menyebabkan kerugian bagi tubuh. Pada kondisi luka terbuka staphylococcusakan tumbuh subur dan bersifat pathogen sehingga akan menimbulkan rasa nyeri, dan tubuh akan mengalamai inflamasi. Daun nyamplung (calophyllim inophyllum) merupakan tanaman dengan tinggi pohonnya kurang lebih 20 m, pemanfaatan daun nyamplung masih sangat terbatas di dunia 1 2 kesehatan. Karena di masa sekarang ini banyak sekali berbagai macam obat-obatan yang terbuat dari bahan kimia, mengkonsumsi obat-obatan dari bahan kimia tentu tidak baik bagi tubuh, apabila mengkonsumsi terus menerus dapat mwnimbulkan ketergantungan.Berbeda dengan obat herbal atau tradisional, obat herbal atau tradisional tidak merusak tubuh.Karena obat tradisional terbuat dari bahan alam, seperti tumbuh-tumbuhan.Salah satunya adalah daun nyamplung, belum banyak yang menggunakan daun nyamplung padahalah pada daun nyamplung banyak sekali kasiatnya.Karena masyarakat bisanya mengambil daun nyamplung sebagai obat, biasanya mengambil daun nyamplung 5-6 lembar ditumbuk kemudian ditempelkan pada luka.Oleh karena itu diambil daun nyamplung sebagai anti inflamasi, karena di dalam daun nyamplung terdapat senyawa flavonoid yaitu quercetin yangmemiliki fungsi sebagai anti mikroba, anti bakteri dalam mencegah terjadinya inflamasi. Senyawa flavonoid sebenarnya terdapat pada semua bagian tumbuhan termasuk daun, akar, kayu, kulit, tepung sari, bunga, buah, dan biji.Kebanyakan flavonoid ini berada di dalam tumbuh-tumbuhan, kecuali alga.Namun ada juga flavonoid yng terdapat pada hewan, misalnya dalam kelenjar bau berang-berang dan sekresi lebah.Dalam sayap kupu - kupu dengan anggapan bahwa flavonoid berasal dari tumbuh-tumbuhan yang menjadi makanan hewan tersebut dan tidak dibiosintesis di dalam tubuh mereka. Penyebaran jenis flavonoid pada golongan tumbuhan yang tersebar yaitu angiospermae, klorofita, fungi, briofita (Surgrani, Resi Agestia, ANDIS, & P, 2009). Flavonoid termasuk senyawa fenolik alam yang potensial sebagai antioksidan dan mempunyai bioaktifitas sebagai obat.Senyawa-senyawa ini dapat ditemukan pada batang, daun, bunga, dan buah.Manfaat flavonoid antara lain adalah untuk melindungi struktur sel, meningkatkan efektivitas vitamin C, anti-inflamasi, mencegah keropos tulang dan sebagai antibiotik. 3 Quersetin adalah salah satu zat aktif kelas flavanoid yang amat kuat.Flavonoid merupakan sekelompok besar antioksidan bernama polifenol yang terdiri atas antosianidin, biflavon, katekin, flavanon, flavon, dan flavanol.Sedang quersetin termasuk dalam kelompok flavanol. Sehingga quersetin dapat menjadi obat anti-inflamasi yang dapat disebabkan oleh berbagai hal, salah satunya adalah infeksi pada luka terbuka(Surgrani et al., 2009). Luka adalah rusak atau hilangnya jaringan tubuh yang terjadi karena adanya suatu faktor yang mengganggu sistem perlindungan tubuh. Fase penyembuhan luka terdiri dari tiga fase yaitu: hemostasis & inflamasi, proliferasi, dan remodeling. Bentuk dari luka berbeda tergantung penyebabnya, ada yang terbuka dan tertutup.Luka terbuka merupakan insisi dimana terdapat robekan linier pada kulit dan jaringan di bawahnya, sedangkan luka tertutup adalah hematoma dimana pembuluh darah yang pecah menyebabkan berkumpulnya darah di bawah kulit. Setelah melihat dari uraian tersebut diatas, penulis ingin mengetahui efek antiinflamasi ekstrak daun nyamplung (Calophyllum inophyllum).Untuk melihat adanya efek antiinflamasi perlu dilakukan uji.Uji yang dilakukan menggunakan metode volume udem. 1.2 Rumusan masalah Berdasarkan uraian dalam latar belakang masalah diatas, memberikan dasar bagi peneliti untuk merumuskan pertanyaan penelitian sebagai berikut: “Apakah ada pengaruh dari ekstrak etanol daun nyamplung (Calophyllum inophyllum) terhadap aktivitas pada mencit yang mengalami inflamasi ”. 1.3. Tujuan penelitian Untuk mengetahui efek ekstrak etanol daun nyamplung (Calophyllum inophyllum) terhadap aktivitas pada mencit yang mengalami inflamasi. 4 1.4. Manfaat penelitian 1.4.1. Memberikan wawasan, pemahaman dan pengetahuan bagi pembaca KTI ini dan peneliti tentang manfaat daun nyamplung (Calophyllum inophyllum) sebagai antiinflamasi. 1.4.2. Memberikan informasi kepada masyarakat mengenai manfaat daun nyamplung (Calophyllum inophyllum) sebagai anti-inflamasi. 1.4.3. Menambah sumber referensi dan sumber belajar di perpustakaan Putra Indonesia Malang. 1.5. 1. Asumsi penelitian Adanya senyawa kimia dalam daun nyamplung (Calophyllum inophyllum) yaitu quersetin sebagai antioksidan yang mampu memberikan pengaruh terhadap yang mengalami inflamasi. 1.6. Ruang Lingkup dan Keterbatasan Penelitian 1.6.1. Ruang Lingkup penelitian ini adalah sebagai berikut. Ruang lingkup penelitian ini adalah penyarian daun nyamplung (Calophyllum inophyllum) dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol panas dan pengujian ekstrak daun nyamplung (Calophyllum inophyllum)sebagai anti-inflamasi terhadap aktivitas hewan uji mencit putih jantan yang mengalami inflamasi. 1.6.2. Keterbatasan penelitian ini adalah 1. Tidak inophyllum). dilakukannya isolasi quercetin pada daun nyamplung(Calophyllum 5 1.7Definisi Istilah 1. inflamasi adalah dimana kondisi tubuh kita yang normal menjadai tidak normal (up nprmal) dengan penyebab dan gejala yang saling berkaitan. 2. Luka adalah rusak atau hilangnya jaringan tubuh yang terjadi karena adanya suatu faktor yang mengganggu sistem perlindungan tubuh. 3. Infeksi adalah masuk dan berkembangnya agen infeksi ke dalam tubuh seseorang atau hewan. 4. Tanaman nyamplung adalah jenis tanaman yang tingginya mencapai kurang lebih 20 m, dan masuk dalam kelas guttiferales. 5. quersetin adalah salah satu zat aktif kelas flavanoid, quersetin termasuk dalam kelompok flavanol. 6. Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif senyawa simplisia menggunakan pelarut tertentu yang sesuai dengan dengan sifat zat aktif tersebut.. 7. Uji efektifitas adalah pengujian untuk mengetahui pengaruh suatu senyawa terhadap sampel BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Tinjauan Tentang TanamanNyamplung Nyamplung merupakan tanaman yang banyak tumbuh di sepenjang pantai di seluruh Indonesia. Tanaman nyamplung atau nama latinnya Calophylluminophyllum L. merupakan tanaman yang berasal dari Afrika Timur dan Pantai India tetapi banyak tumbuh di daerah tropis khususnya di negara kepulauan sekitar Samudra Hindia dan Samudra Pasifik. Tanaman nyamplung termasuk ke dalam famili mangosteen seperti halnya tanaman manggis. Berikut ini adalah klasifikasi dan morfologi tanaman nyamplung Djuisi : Spermatophyla Sub divisi : Angiospermae Kelas : Dicotyledonae Bangsa : Guttiferales Suku : Guttiferae Marga : Calophyllum Jenis : Calophyllum inophyllum L Nama umum/dagang : Nyamplung Beberapa nama daerah dari tanaman nyamplung adalah Sumatrera : Eyobe (Enggano), Punaga (Minangkabau), Penago (Lampung), Nyamplung (Melayu), Jawa : Nyamplung (Jawa Tengah), Nyamplung (Sunda), Camplong (Madura), Bali : Camplong (Bali), Nusa Tenggara : Mantan )Bima), Camplong (Timor), Sulawesi : Dingkalreng (Sangir), Dongkalan (Mongondow), Dunggala (Gorontalo), Ilambe (Buol), Punaga (Makassar), Pude (Bugis), Maluku : Hatan (Ambon), Fitako (Ternate). Nama di Negara lain adalah Alexandrian laurel, 6 7 Borneo mahagony (Inggris), Palomaria dela Playa, Pamitaogen, bintaog (Philipina), Kathing (Thailand), Mu-u, cong (Vietnam), Penaga (Sabah), Penaga Laut (Malaysia). Mentangor, bakokol (Serawak). Pohon nyamplung adalah tumbuhan berukuran medium dengan tinggi pohon bisa mencapai 8-20 meter bahkan ada yang mencapai 30-35 meter. Tinggi batang bebas cabang mencapai 21 meter dengan diameter mencapai 0.8 meter. Batang pohon berwarna abu-abu hingga putih dengan percabangan mendatar.Akar tunggang, bulat dan coklat. Buah nyamplung berbentuk seperti peluru dengan ujung berbentuk lancip dengan panjang 25-50 mm.Kulit luarbuah berwarnahijau selama masih bergantung di pohon dan berubah menjadi kekuningan atau kecoklatan setelah matang. Daging buah tipis dan lambat laun akan menjadi keriput, rapuh dan mengelupas dimana di dalamnya terdapat sebuah inti berwarna kuning terutama jika sudah dijemur (Heyne, 1987). Biji nyamplung berukuran cukup besar dengan ukuran diameter 2-4 cm. Biji nyamplung dapat diperoleh dengan membersihkan kulit dan sabut dari biji nyamplung. Dalam setiap 1 kg terdapat 100-200 biji nyamplung. Bunga nyamplung biasanya muncul diketiak, umumnya tidak bercabang tetapi kadangkadang bercabang yang terdiri dari 3 bunga pada setiap cabangnya, Bunga nyamplung berwarna putih dengan diameter 2cm, jumlah kelopak empat buah, memiliki benang sari banyak, tangkai putik membengkok, kepala putik bentuk perisai.Daun nyamplung merupakan daun tunggal, berbentuk oval dengan ujung meruncing, tebal dan berwarna hijau tua mengkilap serta tidak berbulu(Friday and Okano, 2006).Secara tradisional air rendaman daun tumbuhan C.inophyllum dapat menyejukkan mata dan mengobati mata yang meradang.Biji buah C.inophyllummerupakan sumber obat-obatan tradisional (obat gatal, koreng, penumbuh rambut)(Iskandari, 2010). 8 Gambar 2.1.tanaman nyamplung Ekstrak daun dan biji dari tumbuhan ini mampu menghambat pertumbuhan dari larva Culex quinquefasciatus, Anopheles stephensi dan Aedesaegypti.Daun nyamplung juga memiliki beberapa kandungan senyawa kimia, diantaranya senyawa turunan xantona, kumarin, benzodipiranon, triterpenoid, steroid dan flavonoid.Senyawa flavonoid yang terdapat dalam daun nyamplung berfungsi sebagai antibakteri, antioksidan dan antiinflamasi.Jadi daun nyamplung dapat digunakan sebagai obat luka terbuka atau luka potong(Iskandari, 2010). 2.2. Tinjauan Tentang Flavonoid Senyawa flavonoid merupakan metabolit sekunder, flavonoid juda masuk dalam kelompok fenol yang terbesar yang ditemukan di alam.Senyawa-senyawa ini merupakan zat warna merah, ungu dan biru dan sebagai zat warna kuning yang ditemukan dalam tumbuhtumbuhan. Flavonoid merupakan pigmen tumbuhan dengan warna kuning, kuning jeruk, dan merah dapat ditemukan pada buah, sayuran, kacang, biji, batang, bunga, herba, rempah- 9 rempah, serta produk pangan dan obat dari tumbuhan seperti minyak zaitun, teh, cokelat, anggur merah, dan obat herbal(Resi Agestia Waji & Srgrani, 2009) Flavonoid juga dikenal sebagai vitamin P dan citrin, dan merupakan pigmen yang diproduksi oleh sejumlah tanaman sebagai warna pada bunga yang dihasilkan.Bagian tanaman yang bertugas untuk memproduksi flavonoid adalah bagian akar yang dibantu oleh rhizobia, bakteri tanah yang bertugas untuk menjaga dan memperbaiki kandungan nitrogen dalam tanah. Flavonoid tersebar luas dalam berbagai bahan makanan dan dalam berbagai konsentrasi.Komponen tersebut pada umumnya terdapat dalam keadaan terikat atauterkonjugasi dengan senyawa gula. Lebih dari 4000 jenis flavonoid telah diidentifikasi dan beberapa di antaranya berperan dalam pewarnaan bunga, buah,dandaun. Gambar 2.2.struktur senyawa flavonoid. Flavonoid secara luas ditemukan pada buah-buahan, sayuran, biji, jamu-jamuan, rempah-rempah, batang bunga, bunga terutama pada teh dan anggur merah.Biasanya pembagian-pembagian ini dikelompokkan berdasarkan Subtituen dalam flavanol (kaemferol quercetin), anthocyanins, flavones, flavonones, dan chalcones.Senyawa-senyawa falvonoid ini mempunyai fungsi yang sangat istimewa dalam aksi-aksi bersifat biokimia dan farmakologi.Antara sebagai anti peradangan, antioksidan, anti alergi, hepatoprotektif, antitrombotik, antivirus dan anti aktivitas karsinogenik(Resi Agestia Waji & Srgrani, 2009). 10 Flavonoid adalah polifenol dan karena itu mempunyai sifat kimia senyawa fenol, yaitu bersifat agak asam sehingga dapat larut dalam basa, tetapi bila dibiarkan dalam larutan basa dan di samping itu terdapat oksigen, banyak yang akan terurai. Karena mempunyai sejumlah gugus hidroksil yang tak tersulih,atau suatu gula, flavonoid merupakan senyawa polar, maka umumnya flavonoidcukup larut dalam pelarut polar seperti etanol, metanol, butanol, aseton, dimetil-sulfoksida, dimetilformamida, air, dan lain-lain.Adanya gula yang terikat pada flavonoid (bentuk umum yang ditemukan) cenderung menyebabkan flavonoid lebih mudah larut dalam air dan dengan demikian campuran pelarut di atas dengan air merupakan pelarut yang baik untuk glikosida. Sebaliknya, aglikon yang kurang polar seperti isoflavon, flavanon, danflavon serta flavonol yang termetoksilasi cenderung lebih mudah larut dalam pelarut seperti eter dan kloroform Dalam senyawa flavonoid juga terdapat beberapa jenis senyawa, yaitu salah satunya adalah quercetin yang perperan penting sebagai antioksidan, anti alergi, anti bakteri, anti peradangan dll. Quercetin berasal dari kelompok pigmen tanaman yang disebut flavonoid yang sangat berpengaruh pada warna pada banyak buah, bunga, dan sayur. Quercetin memiliki banyak manfaat bagi kesehatan. Sebagai antihistamin (bermanfaat untuk mengurangi gejala alergi) dan membantu menurunkan inflamasi yang berhubungan dengan berbagai macam bentuk arthritis. Quercetin juga bekerja sebagai antioksidan, quercetin dapat menetralisir radikal bebas dan mencegah kerusakan sel (Iskandari, 2010). Quercetin merupakan flavonoid yang cukup melimpah, quercetin termasuk famili flavonoid yang mengandung 3 cincin dan 5 gugus hidroksil. Quercetin juga merupakan senyawa pembentuk flavonoid lainnya. Quercetin terdapat dalam makanan dalam bentuk aglikon (melekat pada molekul gula). Hanya sebagian kecil quercetin dari makanan yang diabsorbsi ke darah. 11 Gambar.2.3. struktur senyawa quercetin. Quercetin dalam flavonoid juga sangat penting bagi kesehatan tubuh, karena dapat digunakan sebahgai antioksidan, antibakteri, dan antiinflamasi.Quercetin memiliki afinitas yang kuat untuk sel mast dan basofil, (Sel mast yang melapisi pembuluh darah dan basofil sejenis sel darah putih yang beredar dalam aliran darah, situs penyimpanan utama untuk histamin).Quercetin cenderung untuk menstabilkan membran sel , mencegahnya dari proinflamasi, gejala alergi dan sel mast / basofil menjadi "bocor," sehingga tidak menumpahkan beban ke dalam darah dan jaringan sekitarnya. Quercetin memiliki berbagai kegunaan antara lain: 1.Alergi, asmai Quercetin menhambat produksi dan pelepasan histamin serta substansi inflamasi lainnya. Histamin merupakan substansi yang menimbulkan reaksi alergi seperti rhinorrhea, urtikaria, dan edema. 2.Penyakit jantung Quercetin dapat menurunkan resiko aterosklerosis, dengan berperan sebagai antioksidan quercetin melindungi kerusakan karena LDL dan mencegah kematian karena penyakit jantung. 12 2.3. Definisi Inflamasi Inflamasi atau peradangan adalah suatu respon jaringan yang sering menyertai suatu cedera atau penyakit. Infeksi/kerusakan jaringan tidak akan sembuh tanpa adanya proses inflamasi. Meskipun inflamasi dapat membantu proses penyembuhan kerusakan jaringan, namun reaksi inflamasi dan proses yang terlibat didalamnya dapat membahayakan tubuh karena proses inflamasi dapat menghancurkan dan menghilangkan/membuang mikroba dan jaringan mati, sehingga akan melukai jaringan normal (Inayati, 2010) Inflamasi merupakan respons protektif setempat yang ditimbulkan oleh cedera atau kerusakan jaringan, yang berfungsi menghancurkan, mengurangi, atau mengurung (sekuestrasi) baik agen pencedera maupun jaringan yang cedera itu. Inflamasi ini dapat mengakibatkan menginaktivasi atau merusak organisme yang menyerang, menghilangkan zat iritan, dan mengatur derajat perbaikan jaringan. Jika penyembuhan lengkap, proses peradangan biasanya reda. Namun, kadang–kadang inflamasi tidak bisa dicetuskan oleh suatu zat yang tidak berbahaya seperti tepung sari, atau suatu respon imun, seperti asma dan artritis rematoid Radang adalah suatu rangkaian reaksi pada jaringan yang menyebabkan musnahnya agens yang membahayakan jaringan atau yang mencegah agens ini menyebar lebih luas. Reaksi-reaksi ini kemudian juga menyebabkan jaringan yang cedera diperbaiki atau diganti dengan jaringan baru 2.3.1 Macam-macam Inflamasi 1. Inflamasi akut Inflamasi ini ditandai dengan kemerahan dan panas yang terlihat jelas pada jaringan luar. Hal ini akibat pecahnya sel mast sehingga melepaskan mediator-mediator inflamasi enzim lisosom serta ditandai dengan banyaknya leukosit. Selain dari peristiwa tersebut, terjadi eksudasi cairan plasma ketempat inflamasi yang terus meningkat sehingga terbentuk cairan eksudat yang ditandai dengan edema. Inflamasi akut akan hilang setelah satu atau dua 13 hari karena mempunyai waktu kerja yang pendek. Sebagai contoh inflamasi akut ini adalah inflamasi akibat gigitan serangga, akibat luka dan lainnya (guyton, 1995; Underwood, 1999). Radang akut adalah respon yang cepat dan segera terhadap cedera yang didesain untuk mengirimkan leukosit ke daerah cedera. Leukosit membersihkan berbagai mikroba yang menginvasi dan memulai proses pembongkaran jaringan nekrotik. Terdapat 2 komponen utama dalam proses radang akut, yaitu perubahan penampang dan struktural dari pembuluh darah serta emigrasi dari leukosit. Perubahan penampang pembuluh darah akan mengakibatkan meningkatnya aliran darah dan terjadinya perubahan struktural pada pembuluh darah mikro akan memungkinkan protein plasma dan leukosit meninggalkan sirkulasi darah. Leukosit yang berasal dari mikrosirkulasi akan melakukan emigrasi dan selanjutnya berakumulasi di lokasi cedera. Segera setelah jelas, terjadi dilatasi arteriol lokal yang mungkin didahului oleh vasokonstriksi singkat.Sfingter prakapiler membuka dengan akibat aliran darah dalam kapiler yang telah berfungsi meningkat dan juga dibukanya anyaman kapiler yang sebelumnya inaktif.Akibatnya anyaman venular pasca kapiler melebar dan diisi darah yang mengalir deras.Dengan demikian, mikrovaskular pada lokasi jejas melebar dan berisi darah terbendung. Kecuali pada jejas yang sangat ringan, bertambahnya aliran darah (hiperemia) pada tahap awal akan disusul oleh perlambatan aliran darah, perubahan tekanan intravaskular dan perubahan pada orientasi unsur-unsur berbentuk darah terhadap dinding pembuluhnya. Perubahan pembuluh darah dilihat dari segi waktu, sedikit banyak tergantung dari parahnya jejas.Dilatasi arteriol timbul dalam beberapa menit setelah jejas. Perlambatan dan bendungan tampak setelah 10-30 menit(Fajriani, 2008). Peningkatan permeabilitas vaskuler disertai keluarnya protein plasma dan sel-sel darah putih ke dalam jaringan disebut eksudasi dan merupakan gambaran utama reaksi radang akut.Vaskulatur-mikro pada dasarnya terdiri dari saluran-saluran yang berkesinambungan 14 berlapis endotel yang bercabang-cabang dan mengadakan anastomosis.Sel endotel dilapisi oleh selaput basalis yang berkesinambungan. Pada ujung arteriol kapiler, tekanan hidrostatik yang tinggi mendesak cairan keluar ke dalam ruang jaringan interstisial dengan cara ultrafiltrasi. Hal ini berakibat meningkatnya konsentrasi protein plasma dan menyebabkan tekanan osmotik koloid bertambah besar, dengan menarik kembali cairan pada pangkal kapiler venula. Pertukaran normal tersebut akan menyisakan sedikit cairan dalam jaringan interstisial yang mengalir dari ruang jaringan melalui saluran limfatik. Umumnya, dinding kapiler dapat dilalui air, garam, dan larutan sampai berat jenis 10.000 dalton (Fajriani, 2008). Eksudat adalah cairan radang ekstravaskuler dengan berat jenis tinggi (di atas 1.020) dan seringkali mengandung protein 2-4 mg% serta sel-sel darah putih yang melakukan emigrasi. Cairan ini tertimbun sebagai akibat peningkatan permeabilitas vaskuler (yang memungkinkan protein plasma dengan molekul besar dapat terlepas), bertambahnya tekanan hidrostatik intravaskular sebagai akibat aliran darah lokal yang meningkat pula dan serentetan peristiwa rumit leukosit yang menyebabkan emigrasinya (Robbins and Kumar, 1995) Penimbunan sel-sel darah putih, terutama neutrofil dan monosit pada lokasi jejas, merupakan aspek terpenting reaksi radang. Sel-sel darah putih mampu memfagosit bahan yang bersifat asing, termasuk bakteri dan debris sel-sel nekrosis, dan enzim lisosom yang terdapat di dalamnya membantu pertahanan tubuh dengan beberapa cara. Beberapa produk sel darah putih merupakan penggerak reaksi radang, dan pada hal-hal tertentu menimbulkan kerusakan jaringan yang berarti. Dalam fokus radang, awal bendungan sirkulasi mikro akan menyebabkan sel-sel darah merah menggumpal dan membentuk agregat-agregat yang lebih besar daripada leukosit sendiri. Menurut hukum fisika aliran, massa sel darah merah akan terdapat di bagian tengah dalam aliran aksial, dan sel-sel darah putih pindah ke bagian tepi (marginasi). Mula-mula sel 15 darah putih bergerak dan menggulung pelan-pelan sepanjang permukaan endotel pada aliran yang tersendat tetapi kemudian sel-sel tersebut akan melekat dan melapisi permukaan endotel. Emigrasi adalah proses perpindahan sel darah putih yang bergerak keluar dari pembuluh darah. Tempat utama emigrasi leukosit adalah pertemuan antar-sel endotel.Walaupun pelebaran pertemuan antar-sel memudahkan emigrasi leukosit, tetapi leukosit mampu menyusup sendiri melalui pertemuan antar-sel endotel yang tampak tertutup tanpa perubahan nyata. Setelah meninggalkan pembuluh darah, leukosit bergerak menuju ke arah utama lokasi jejas.Migrasi sel darah putih yang terarah ini disebabkan oleh pengaruh-pengaruh kimia yang dapat berdifusi disebut kemotaksis.Hampir semua jenis sel darah putih dipengaruhi oleh faktor-faktor kemotaksis dalam derajat yang berbeda-beda.Neutrofil dan monosit paling reaktif terhadap rangsang kemotaksis.Sebaliknya limfosit bereaksi lemah.Beberapa faktor kemotaksis dapat mempengaruhi neutrofil maupun monosit, yang lainnya bekerja secara selektif terhadap beberapa jenis sel darah putih.Faktor-faktor kemotaksis dapat endogen berasal dari protein plasma atau eksogen, misalnya produk bakteri. Setelah leukosit sampai di lokasi radang, terjadilah proses fagositosis. Meskipun selsel fagosit dapat melekat pada partikel dan bakteri tanpa didahului oleh suatu proses pengenalan yang khas, tetapi fagositosis akan sangat ditunjang apabila mikroorganisme diliputi oleh opsonin, yang terdapat dalam serum (misalnya IgG, C3). Setelah bakteri yang mengalami opsonisasi melekat pada permukaan, selanjutnya sel fagosit sebagian besar akan meliputi partikel, berdampak pada pembentukan kantung yang dalam. Partikel ini terletak pada vesikel sitoplasma yang masih terikat pada selaput sel, disebut fagosom. Meskipun pada waktu pembentukan fagosom, sebelum menutup lengkap, granula-granula sitoplasma neutrofil menyatu dengan fagosom dan melepaskan isinya ke dalamnya, suatu proses yang 16 disebut degranulasi. Sebagian besar mikroorganisme yang telah mengalami pelahapan mudah dihancurkan oleh fagosit yang berakibat pada kematian mikroorganisme.Walaupun beberapa organisme yang virulen dapat menghancurkan leukosit. 2. Inflamasi Kronik Inflamasi kronik (atau disebut juga radang kronik) merupakan peradangan yang telah berlangsung dalam jangka waktu yang lama (lebih lama jika dibandingkan dengan radang akut). Inflamasi tipe ini ditandai dengan banyaknya eksudat jaringan granulomatosis, monositosis, limfositosis dan pengumpulan plasma sel. Akibatnya jaringan mengalami fibrosis dan timbullah hiperplasia disekitar jaringan. Tetapi hal ini dapat terjadi tergantung dari kedudukan dan kondisi inflamasi kronik. Elemen-elemen jaringan yang diserang akan menghasilkan reaksi imun antara suatu antigen dengan suatu antibodi yang merangsang terjadinya inflamasi. Sebagai contoh inflamasi kronik adalah inflamasi akibat tuberkolosis dan rematroid artritis (guyton, 1995; Underwood, 1999). Radang kronik dapat bersifat primer, tetapi ada kalanya merupakan kelanjutan dari radang akut. Pada radang kronik primer, beberapa keadaan yang dapat menjadi etiologi adalah: 1. Infeksi virus Infeksi intrasel apapun secara khusus memerlukan limfosit dan makrofag untuk mengidentifikasi dan mengeradikasi sel yang terinfeksi. 2. Infeksi mikroba persisten Pajanan mikroba yang patogenisitasnya lemah namun berlangsung dalam jangka waktu lama dapat menimbulkan hipersensitivitas lambat yang berpuncak pada reaksi granulomatosa (salah satu contoh radang kronik).Contohnya pada infeksi Treponema pallidum. 17 3. Pajanan yang lama terhadap agen yang berpotensi toksik Agen-agen asing dapat menyebabkan radang kronik apabila terpajan dalam jangka waktu yang lama. Agen tersebut dapat berupa agen endogen (seperti jaringan adiposa yang nekrotik, kristal asam urat, tulang) dan dapat berupa agen eksogen (seperti materi silika yang terinhalasi atau serabut benang yang tertanam). 4. Penyakit autoimun Respons imun terhadap antigen dan jaringan tubuh sendiri yang berlangsung secara terus menerus dapat menyebabkan radang kronik, contohnya adalah penyakit arthritis rheumatoid atau sklerosis multipel. 5. Penyakit spesifik yang etiologinya tidak diketahui Contohnya kolitis ulseratif (penyakit radang kronik usus) 6. Penyakit granulomatosa primer Seperti penyakit Crohn, sarkoidosis, reaksi terhadap berilium. Sedangkan pada radang kronik yang timbul dari radang akut, progresi (perkembangan) dari radang akut atau kegagalan resolusi (perbaikan) adalah hal yang memicu terjadinya radang kronik.Jenis radang akut yang paling sering berkembang menjadi radang kronik adalah radang akut supuratif. Pus yang membentuk rongga abses serta pembuangannya yang tidak lancar (bisa juga disertai dengan penebalan dinding abses) akan menyebabkan organisasi pus sehingga tumbuh jaringan granulasi yang pada akhirnya digantikan oleh jaringan parut fibrosa. Pembentukan radang kronik dari radang akut bisa juga disebabkan oleh adanya materi-materi asing yang tidak tercerna (resisten) selama radang akut.Contohnya adalah keratin dari kista epidermal yang sobek atau potongan kecil tulang yang terdapat di dalam sekestrasi osteomyelitis. Benda asing ini akan menimbulkan reaksi radang kronik yang 18 spesifik yaitu radang granulomatosa dan menyebabkan terbentuknya sel datia yaitu sel berinti banyak yang terbentuk dari makrofag. 2.3.2 Tanda-tanda Utama Radang (makroskopik) Gejala proses inflamasi yang sudah dikenal ialah: Kemerahan (rubor) Terjadinya warna kemerahan ini karena arteri yang mengedarkan darah ke daerah tersebut berdilatasi sehingga terjadi peningkatan aliran darah ke tempat cedera. Pembengkakan (tumor) Gejala paling nyata pada peradangan adalah pembengkakan yang disebabkan oleh terjadinya peningkatan permeabilitas kapiler, adanya peningkatan aliran darah dan cairan ke jaringan yang mengalami cedera sehingga protein plasma dapat keluar dari pembuluh darah ke ruang interstitium. Rasa panas (kalor) Rasa panas dan warna kemerahan terjadi secara bersamaan. Dimana rasa panas disebabkan karena jumlah darah lebih banyak di tempat radang daripada di daerah lain di sekitar radang. Fenomena panas ini terjadi bila terjadi di permukaan kulit.Sedangkan bila terjadi jauh di dalam tubuh tidak dapat kita lihat dan rasakan. Rasa sakit (dolor) Rasa sakit akibat radang dapat disebabkan beberapa hal: (1) adanya peregangan jaringan akibat adanya edema sehingga terjadi peningkatan tekanan lokal yang dapat menimbulkan rasa nyeri, 19 (2) adanya pengeluaran zat – zat kimia atau mediator nyeri seperti prostaglandin, histamin, bradikinin yang dapat merangsang saraf – saraf perifer di sekitar radang sehingga dirasakan nyeri. 2.3.2 Mekanisme Terjadinya Inflamasi Bila jaringan cedera misalnya karena terbakar, teriris atau karena infeksi oleh kuman, maka pada jaringan ini akan terjadi rangkaian reaksi yang menyebabkan musnahnya agens yang membahayakan jaringan atau yang mencegah agen ini menyebar lebih luas. Reaksireaksi ini kemudian juga menyebabkan jaringan yang cedera diperbaiki atau diganti dengan jaringanbaru.Rangkaian reaksi yang terjadi pada tempat jaringan cedera ini disebut radang.(Fajriani, 2008). 2.3.3Obat Antiinflamasi Obat-obat antiinflamasi adalah obat yang memiliki aktifitas menekan atau mengurangi peradangan. Aktifitas ini dapat dicapai melalui berbagai cara yaitu mengahambat pembentukan mediator radang prostaglandin, menghambat migrasi sel-sel leukosit ke daerah radang, menghambat pelepasan prostaglansin dari sel-sel tempat pembentukannya. Gejala-gejala yang ditimbulkan oleh inflamasi adalah gejala yang lazim ditandai dengan bengkak, panas, kemerahan, nyeri, dan kelainan fungsi. Pada proses ini terjadi pembebasan histamin dan mobilisasi leukosit karena adanya suatu rangsangan. Penggunaan obat haruslah rasional dan tepat guna untuk mendapatkan hasil pengobatan yang optimal serta menekan efek samping sekecil mungkin. Berdasarkan mekanisme kerjannya, obat-obat antiinflamasi terbagi dalam dua golongan yaitu obat antiinflamasi golongan steroid dan nonsteroid.(Fajriani, 2008) 2.3.3.1 Obat Antiinflamasi Golongan Nonsteroid 20 Bekerja dengan menghambat enzim siklooksigenase sehingga konversi asam arakidonat menjadi PGG2 terganggu. Termasuk golongan obat ini adalah: aspirin, ibuprofen, naproksen, fenoprofen, indometasin, sulindak, tolmetin, fenilbutazon, piroksikam, asam mefenamat dan diflunisal. Indikasi obat ini adalah penyakit-penyakit yang disertai radang terutama penyakit rematik yang disertai peradangan. Efek samping yang sering terjadi adalah infeksi tukak lambung atau tukak peptik yang kadang –kadang disertai anemia sekunder akibat perdarahan saluran cernah. AINS (Anti-Inflamasi Non-Steroid) berkhasiat analgetis, antipiretis, serta anti radang (antiflogistis), dan sering sekali digunakan ntuk menghalau gejaa penyakit rema. Obat ini efektif untuk peradangan lain akibat trauma (pukulan, benturan, kecelakaan), juga misalnya setelah pembedahan, atau pada memar akibat olahraga. Oba ini dipakai pula untuk mencegah pembengkakan bila diminum sedini mungkin dalam dosis yang cukup tinggi. Cara kerja NSAIDs untuk sebagian besar berdasarkan hambatan sintesa prostaglandin, dimana kedua jenis cyclo-oxygenase diblokir. NSAIDs ideal hendaknya hanya menghambat COX-2 (peradangan) dan tidak COX-1 (perlindungan mukosa lambung), lagi pula menghambat lipo-oxygenase (pembentukan leukotrien). Walaupun dilakukan daya upaya intensif sejak akhir tahun 1980-an hingga kini obat ideal demikian belum ditemukan. Dewasa ini hanya tersedia tiga obat dengan kerja agak selektif, artinya lebih kuat menghambat COX-2 daripada COX-1, yakni COX-2 inhibitors agak baru nabumeton dan meloxicam. Dari obat baru celecoxib diklaim tidak menghambat COX-1 sama sekali pada dosis bias, tetapi efek klinisnya mengenai iritasi mukosa lambung masih perlu dibuktikan. Banyak riset sedang dilakukan pula untuk mengembangkan antagonis leukotrien yang dapat digunakan sebagai obat anti radang pada rema dan asma. Selain menimbulkan efek terapi yang sama, OAINS juga memiliki efek samping yang serupa. Efek samping yang paling sering terjadi adalah induksi tukak lambung atau 21 tukak peptik yang kadang-kadang disertai anemia sekunder akibat perdarahan saluran cerna.15 Mekanisme kerusakan pada lambung oleh OAINS terjadi melalui berbagai mekanisme.OAINS menimbulkan iritasi yang bersifat lokal yang mengakibatkan terjadinya difusi kembali asam lambung ke dalam mukosa dan menyebabkan kerusakan jaringan.Selain itu OAINS juga menghambat sintesa prostaglandin yang merupakan salah satu aspek pertahanan mukosa lambung disamping mukus, bikarbonat, resistensi mukosa, dan aliran darah mukosa. Dengan terhambatnya pembentukan prostaglandin, maka akan terjadi gangguan barier mukosa lambung, berkurangnya sekresi mukus dan bikarbonat, berkurangnya aliran darah mukosa, dan terhambatnya proses regenerasi epitel mukosa lambung sehingga tukak lambung akan mudah terjadi.Indometasin, sulindak, dan natrium mefenamat mempunyai resirkulasi enterohepatik yang luas, yang menambah pemaparan obatobat ini dan meningkatkan toksisitas gastrointestinalnya. Selain itu, indometasin juga dilaporkan dapat mengakibatkan iritasi setempat langsung yang dapat mengakibatkan perforasi. Penelitian lain menunjukkan bahwa OAINS yang menyebabkan kerusakan mukosa paling minimal adalah sulindak, aspirin enteric coated, diflunisal, dan ibuprofen. Gejala yang diakibatkan oleh OAINS antara lain dispepsia, nyeri epigastrium, indigesti, heart burn, nausea, vomitus, dan diare. Prostaglandin E2 (PGE2) dan I2 (PGI2) yang dibentuk dalam glomerulus mempunyai pengaruh terutama pada aliran darah dan tingkat filtrasi glomerulus.PGI1 yang diproduksi pada arteriol ginjal juga mengatur aliran darah ginjal.Penghambatan biosintesis prostaglandin di ginjal, terutama PGE2, oleh OAINS menyebabkan penurunan aliran darah ginjal. Pada orang normal, dengan hidrasi yang cukup dan ginjal yang normal, gangguan ini tidak banyak mempengaruhi fungsi ginjal karena PGE2 dan PGI2 tidak memegang peranan penting dalam pengendalian fungsi ginjal. Tetapi pada penderita hipovolemia, sirosis hepatis yang disertai asites, dan penderita gagal jantung, PGE2 dan PGI2 menjadi penting untuk 22 mempertahankan fungsi ginjal. Sehingga bila OAINS diberikan, akan terjadi penurunan kecepatan filtrasi glomerulus dan aliran darah ginjal bahkan dapat pula terjadi gagal ginjal. Penghambatan enzim siklooksigenase dapat menyebabkan terjadinya hiperkalemia.Hal ini sering sekali terjadi pada penderita diabetes mellitus, insufisiensi ginjal, dan penderita yang menggunakan β-blocker dan ACE-inhibitor atau diuretika yang menjaga kalium (potassium sparing).Selain itu, penggunaan OAINS dapat menimbulkan reaksi idiosinkrasi yang disertai proteinuria yang masif dan nefritis interstitial yang akut. Efek samping lain adalah gangguan fungsi trombosit dengan akibat perpanjangan waktu perdarahan. Ketika perdarahan, trombosit yang beredar dalam sirkulasi darah mengalami adhesi dan agregasi.Trombosit ini kemudian menyumbat dengan endotel yang rusak dengan cepat sehingga perdarahan terhenti.Agregasi trombosit disebabkan oleh adanya tromboksan A2 (TXA2). TXA2, sama seperti prostaglandin, disintesis dari asam arachidonat dengan bantuan enzim siklooksigenase. OAINS bekerja menghambat enzim siklooksigenase. Aspirin mengasetilasi Cox I (serin 529) dan Cox II (serin 512) sehingga sintesis prostaglandin dan TXA2 terhambat. Dengan terhambatnya TXA2, maka proses trombogenesis terganggu, dan akibatnya agregasi trombosit tidak terjadi. Jadi, efek antikoagulan trombosit yang memanjang pada penggunaan aspirin atau OAINS lainnya disebabkan oleh adanya asetilasi siklooksigenase trombosit yang irreversibel (oleh aspirin) maupun reversibel (oleh OAINS lainnya). Proses ini menetap selama trombosit masih terpapar OAINS dalam konsentrasi yang cukup tinggi.(Fajriani, 2008). 23 2.3.3.2 Obat Antiinflamasi golongan steroid Adapun mekanisme kerja obat dari golongan steroid adalah menghambat enzim fospolifase sehingga menghambat pembentukan prostaglandin maupun leukotrien.Penggunaan obat antiinflamasi steroid dalam jangka waktu lama tidak boleh dihentikan secara tiba-tiba, efek sampingnya cukup banyak dapat menimbulkan tukak lambung, osteoforosis, retensi cairan dan gangguan elektrolit.Contoh obat antiinflamasi steroid diantaranya, hidrokortison, deksametason, metil prednisolon, kortison asetat, betametason, triamsinolon, prednison, fluosinolon asetonid, prednisolon, triamsinolon asetonid dan fluokortolon. Penyakit lain yang dapat diobati dengan anti inflamasi diantaranya, artritis rematoid, demam rematik dan peradangan sendi. Obat ini merupakan antiinflamasi yang sangat kuat.Karena Obat-obat ini menghambat enzim phospholipase A2 sehingga tidak terbentuk asam arakidonat. Asam arakidonat tidak terbentuk berarti prostaglandin juga tidak akan terbantuk. Namun, obat anti inflamasi golongan ini tidak boleh digunakan seenaknya.Karena efek sampingnya besar.Bisa menyebabkan moon face, hipertensi, osteoporosis dll. Senyawa teroid adalah senyawa golongan lipid yang memiliki stuktur kimia tertentu yang memiliki tiga cincin sikloheksana dan satu cincin siklopentana. Suatu molekul steroid yang dihasilkan secara alami oleh korteks adrenal tubuh dikenal dengan nama senyawa kortikosteroid. Kortikosteroid sendiri digolongkan menjadi dua berdasarkan aktifitasnya, yaitu glukokortikoid dan mineralokortikoid.Glukokortikoid memiliki peranan pada metabolisme glukosa, sedangkan mineralokortikosteroid memiliki retensi garam. Kortikosteroid bekerja dengan mempengaruhi kecepatan sintetis protein.Molekul hormon memasuki sel melewati membran plasma secara difusi pasif. Hanya di jaringan target hormon ini bereaksi dengan reseptor protein yang spesifik dalam sitoplasma sel dan membentuk 24 kompleks reseptor-steroid. Kompleks ini mengalami perubahan komformasi, lalu bergerak menuju nukleus dan berikatan dengan kromatin.Ikatan ini menstimulasi transkripsi RNA dan sintetis protein spesifik. Induksi sintetis protein ini yang akan menghasilkan efek fisiologik steroid. Berdasarkan masa kerjanya golongan kortikosteroid dibagi menjadi : 1.Kortikosteroid kerja singkat dengan masa paruh < 12 jam, yang termasuk golongan ini adalah kortisol/hidrokortison, kortison, kortikosteron, fludrokortison 2.Kortikosteroid kerja sedang dengan masa paruh 12 – 36 jam, yaitu metilprednisolon, prednison, prednisolon, dan triamsinolon. 3.Kortikosteroid kerja lama dengan masa paruh >36 jam, adalah parametason, betametason dan deksametason. 2.4 Tinjauan Tentang Tikus Klasifikasi tikus putih menurut depkes sebagai berikut : Kerajaan : Animalia Filum : Chordata Kelas : Mammalia Ordo : Rodentia Sub Ordo : Odontoceti Famili : Muridae Genus : Rattus Spesies : R. Norvegicus 2.5 Tinjauan Tentang Metode Penyarian Metode penyarian saat ini dapat dibedakan menjadi beberapa cara antara lain infudasi, maserasi, perkolasi. 25 2.5.1 Maserasi Jika tidak diberikan petunjuk khusus, maserasi dikerjakan dengan cara menuangi bahan obat menurut derajat kehalusan yang dikehendaki menggunakan cairan penyari sambil berulang-ulang diaduk, kemudian disimpan dalam bejana tertutup selama lima hari. (Ekawati, 2011). 2.5.2 Perkolasi Bila tidak diberikan petunjuk khusus, perkolasi dinyatakan dengan cara mencampur satu bagian obat menurut derajat kehalusan yang dikehendaki dengan seperempat sampai setengah bagian cairan penyari, kemudian maserasi selama tiga jam di dalam sebuah bejana tertutup. Pindahkan masa sedikit demi sedikit ke dalam sebuah percolator sambil tiap kali ditekan hati-hati. Tambahkan cairan penyari secukupnya hingga cairan itu menetes dan diatas bahan obat masih terdapat selapis cairan penyari. Tutup percolator, diamkan selama 24 jam. Biarkan cairan keluar setetes hingga pada penguapan. Selama perkolasi harus selalu terdapat cairan diatas bahan obat(Ekawati, 2011). 2.6 Hipotesis Penelitian Hipotesis dalam penelitian ini adalah untuk mengetahui adanya aktivitas antiinflamasi ekstrak daun nyamplug, dengan adanya perbedaan antara kontrol negatif dan positif dalam beberapa macam dosis. 26 2.7 Kerangka Operasional Daun nyamplung (calophyllum innophyllum L.) Tikus Serbuk daun nyamplung Dilakukan aklimatisasi Ektraksi maserasi dengan etanol 70% Pengelompokan hewan uji berdasarkan perlakuan yang diberikan (kontrol positif, kontrol negatif, dan 3 variasi dosis). Evaporasi Ekstrak kental Uji antiinflamas i Analisa data 27 2.8 Kerangka teori Daun nyamplung merupakan salah satu dari sekian banyak tanaman yang berkhasiat sebagai antiinflamasi. Selain itudalam daun nyamplung terdapat berbagai macam senyawa yang bermanfaat bagi kesehatan, salah satunya adalah senyawa flavonoid yang berfungsi sebagai antibakteri, antibiotik, untuk itu perlu dilakukan uji aktivitas, agar mengetahui bahwa di dalam daun nyamplung memiliki senyawa yang dapat memberikan efek antiinflamasi. Aktivitas antiinflamasi ini dapat diuji menggunakan metode volume udem terhadap salah satu kaki tikus dengan cara dicelupkan kedalam tabung air raksa pada alat pletismometer . Kemudian daun nyamplung di ekstrak menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol 70%. Digunakan pelarut etanol 70% karena sifatnya yang polar dan sesuai dengan senyawa yang akan diisolasi, kemudian dilanjutankan dengan evaporasi yang bertujuan untuk memisahkan pelarut dengan ekstrak. Kemudian hasil ekstrasi diberikan pada kelompok dosis, 0,1gram/ml, 0,15 gram/ml, 0,2gram/ml ekstrak daun nyamplung secaraoral. Kemudian diberikan Na diklorofenak sebagai kontrol positif dan sebagai kontrol negatifnya diberi aquadest. Digunakan kontrol positif dan negatif untuk mengetahui ada tidaknya efek dari ekstrak daun nyamplung sebagai antiinflamasi. Selanjutnya melakukan pengukuran penurunan volume udem pada kaki tikus. Aktivitas ekstrak daun nyamplung sebagai antiinflamasi ditunjukan oleh kemampuannya mengurangi volume udem pada kaki tikus tersebut, karena udem adalah salah satu gejala yang ditimbulkan oleh inflamas BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Rancangan Penelitiann Jenis penelitian ini adalah aktifitas ekstrak daun nyamplung sebagai antiinflamasi diukur berdasarkan penurunan volume udem pada kaki tikus putih. Penelitian ini meliputi tiga tahap, tahap pertama adalah tahap persiapan dimana seluruh alat, bahan, dan sampel disiapkan secara menyeluruh. Tahap kedua adalah tahap pelaksanaan, penelitian dilakukan menggunakan Rancangan acak lengkap dengan 5 perlakuan yaitu perlakuan A untuk kontrol negatif, B untuk kontrol positif, dan C, D, E untuk ekstrak daun nyamplung yang berbeda-beda dosisnya dan diulang replikasi sebanyak tiga kali. Pada tahap akhir dari penelitian ini adalah analisis data dari hasil masing-masing pengamatan. Seluruh data yang diperoleh dikumpulkan dan disusun dalam bentuk tabel sesuai dengan kelompok, kemudian dilanjutkan dengan interpretasi data. Data yang diperoleh adalah volume kaki tikus grup kontrol dan grup uji pada saat awal sebelum mendapatkan perlakuan apapun, setelah diberi penginduksi radang, setelah diberi penginduksi radang dan diberi bahan uji. 3.2 Populasi dan Sampel Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak daun nyamplung, dan Sampel yang digunakan adalah ekstrak daun nyamplung. 28 3.3 Lokasi dan Waktu Penelitian Penelitian dilakukan di Laboratorium Farmakognosi, Laboratorium Mikro Putra Indonesia Malang dan Laboratorium Farmakologi Universitas Muhamadyah Malang Kedokteran. 3.4 Definisi Operasional Pada penelitian ini terdapat dua variable, variable bebas dan variable terikat. Variabel bebas dari penelitian ini adalah dosis ekstrak daun nyamplung dan variabel terikatnya yaitu aktivitas ekstrak daun nyamplung sebagai antiinflamasi. Tabel 3.1 Tabel variabel terikat. Variabel Sub variabel Aktifitas Penentuan antiinflamasi volume udem ekstrak dau nyamplung Definisi operasional variabel Alat ukur Uji volume pletismometer udem adalah uji dengan membandingkan atau menghitung volume udem kaki tikus atau mencit Hasil ukur Pengurangan volume udem kakitikus 3.5 Instrumen Penelitian Pada pengujian efektivitas antiinflamasi diperlukan alat dan bahan sebagai berikut: Alat g: Pletistometer, Spuit, Sonde, Spidol. Bahan:tikus putih, Larutan Karagenin 1%, Aquadest 2,5 ml/20gBB (kontrol negatif), Na dikorofenak 6,27 mg/kgBB (kontrol positif), ekstrak daun nyamplung dosis 0,1gram/ml, ekstrak daun nyamplung dosis 0,15gram/mlekstrak daun nyamplung dosis 0,2 gram/ml. 3.6 Pengumpulan Data 3.6.1 Penentuan Obyek Penelitian Penelitian ini menggunakan 10 ekor tikus putih yang dipelihara dalam kondisi yang sama dalam waktu 2 minggu. Untuk 10 ekor tikus putih diberi 5 perlakuan berbeda dimana masing-masing. 1.Dosis pertama mengunakan20gram. Dilakukan konversi ke dosis tikus sehingga di peroleh dosis 0,1gram/ml 2.Dosis kedua menggunakan30 gram. Dilakukan konversi ke dosis mencit sehingga di peroleh dosis 0,15 gram/ml 3.Dosis ketiga mengunakan 40 gram.Dilakukan konversi ke dosis mencit sehingga di peroleh dosis 0,2 gram/ml 31 3.6.2Prosedur Penelitian 3.6.2.1 Pembuatan simplisia Daun Nyamplung 1. Disiapkan daun nyamplung 2. Daun nyamlung dipotong-potong lalu dicuci, kemudian dikeringkan dengan cara diangin-anginkan. 3. Lalu keringkan dengan cahaya matahari 4. Kemudian daun yang sudah kering diblender untuk dijadikan sediaan serbuk 3.5.2.2 Pembuatan ekstrak etanol 70% daun nyamplung 1.Sebanyak 100 gram serbuk daun nyamplung ditimbang 2. Kemudian dimaserasi dengan 1,5 Letanol 70% pada suhu kamar selama 5 hari. 3. Lalu disaring dan filtrat dikumpulkan, Filtrat dipekatkan dengan rotary evaporatorpada suhu 500C hingga diperoleh ekstrak yang kental 3.6.2.3Pembuatan Na diklofenak 1. Diambil tablet Na diklofenak kemudian digerus sampai halus serbuk ditimbang sebanyak 12,27 mg. 2. Ditimbang PGS sebanyak 1 gram masukkan di dalam mortir tambahkan air sebanyak 7 ml masukkan gerus ad homogen. 3. Masukan di dalam wadah, ditambahkan air ad 50 ml kemudian diambil 5 ml menggunakan spuit 5 ml kemudian diinjeksi per oral ke mencit. 3.6.2.4 Pembuatan larutan karagenin 1% 1. Ditimbang sebanyak 100mg karagenin 2. Dimasukkan dalamlabu takar 10 ml 3. Ditambahkan dengan NaCl 0,9% sampai tanda dan dikocok. 3.6.2.5 Prosedur Pengujian Aktivitas Antiinflamasi 32 1. Mula-mula semua hewan uji dipuasakan 6-7 jam. Pengosongan lambung bermanfaat terhadap proses absorbsi. 2. Salah satu kaki belakang tikus diberi tanda dengan spidol, kemudian diukur volumenya dengan cara mencelupkannya kedalam tabung air raksa pada alat pletismometer sampai batas tanda tersebut. 3. Kemudian semua kelompok diberikan masing-masing bahan uji secara peroral. 4. Selang 10-15 menit, kemudian pada masing-masing tikus diberikan penginduksi udem larutan karagenin 1% sebanyak 0,1 ml secara subkutan pada bagian dorsal kaki yang sama. 5. Volume kaki belakang tikus diukur kembali pada setiap interval 5 menit sampai efek udemnya hilang. 3.7 Analisis Data Data yang diperoleh adalah volume kaki belakang tikus grup kontrol dan grup uji pada saat awal sebelum mendapat perlakuan apapun, setelah diberi penginduksi radang dan diberi bahan uji. Data tersebut selanjutnya ditabulasi dan dihitung rata-ratanya. BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN Penelitian ini diperoleh data organoleptis, dan uji volume udemekstrak daun nyamplung (Callophylum Innophylum)sebagai antiinflamasi. 4.1 Hasil Penelitian 4.1.1Hasil Pengamatan Evaporasi daun nyamplung (Callophylum Innophylum) Hasil pengamatan evaporasi daun nyamplung(Callophylum Innophylum)dapat dilihat pada tabel 4.1 di bawah ini. Tabel 4.1. Tabel Hasil Pengamatan Organoleptik Pengamatan Hasil Bentuk Cairan sedikit kental Warna Kemerahan Berdasarkan tabel 4.1 diatas didapatkan hasil dari pengamatan organoleptik dari evaporasi daun nyamplung (Callophylum Innophylum) yaitu bentuk cairan sedikit kental, warna kemerahan, dan berbau.. 33 34 4.1.2 Hasil Penelitian Uji Antiinflamasi Rata-rata ketebalan awal kaki belakang tikus sebelum diinflamasikan (keadaan normal) dan sesudah diinflamasikan dapat dilihat pada tabel hasil pengukuran volume kaki belakang tikus selama 2 jam. Tabel 4.2 Hasil Pengukuran Udem kaki belakang Tikus Selama 2 Jam Volume kaki tikus grup kontrol Kontrol + Waktu (selama 2 jam) dengan interval 30 menit 30 menit 60 menit 90 menit 120 menit 1 15 12 9 6 2 14 11 8 6 Rata-rata 14,5 11,5 8,5 6 Kontrol - Waktu (selama 2 jam) dengan interval 30 menit 30 menit 60 menit 90 menit 120 menit 1 10 10 9 8 2 12 11 9 8 Rata-rata 11 10,5 9 8 35 Volume kaki tikus grup uji Kelompok Waktu (selama 2 jam) dengan interval 30 menit 1 30 menit 60 menit 90 menit 120 menit 1 12 8 6 6 2 11 9 8 6 Rata-rata 11,5 8,5 7 6 Kelompok Waktu (selama 2 jam) dengan interval 30 menit 2 30 menit 60 menit 90 menit 120 menit 1 12 9 7 7 2 11 8 6 5 Rata-rata 11,5 8,5 6,5 6 Kelompok Waktu (selama 2 jam) dengan interval 30 menit 3 30 menit 60 menit 90 menit 120 menit 1 13 10 7 7 2 13 8 6 5 Rata-rata 13 9 6,5 6 36 4.2 Pembahasan Berdasarkan hasil pengujian ekstrak daun nyamplung dengan metode udem dan dilakukan pengukuran volume kaki tikus (mm) selama 2 jam diketahui bahwa terdapat perbedaan aktivitas antiinflamasi yang nyata antara kelompok kontrol (-), kelompok kalium diklofenak (+), dan ekstrak daun nyamplung dengan dosis 0,1 mg , 0,15 mg, dan 0,2 mg. Hal ini menunjukan bahwa ekstrakdaun nyamplung dengan beberapa varian dosis di atas memiliki efektivitas antiinflamasi. Ekstrak daun nyamplung memiliki efektivitas antiinflamasi karna mengandung zat aktif yaitu flavonoid. Dalam penelitian ini dapat di simpulkan juga bahwa ekstrak bawang putih memiliki mekanisme kerja yang sama dengan obat golongan NSAID, mekanisme NSAID yaitu dengan menghambat enzim cyclo-oxygenase menjadi zat prostaglandin hal ini di tujukan pada presentase penurunan udem pada kaki belakang tikus. Untuk membuat ekstrak daun nyamplung diperlukan serbuk daun nyamplung sebanyak 100 gram, kemudian di maserasi dengan etanol 70% selama 5 hari. Setelah itu hasil dari maserasi di evaporasi untuk mendapatkan hasil ekstrak, baru setelah itu ekstrak di ujikan kepada hewan uji. Hewan uji yang digunakan adalah tikus putih. Untuk pengujian ini hewan uji dibagi dalam 5 kelompok dan masing-masing kelompok mendapat perlakuan yang berbeda seperti pada pengujian di atas. BAB V PENUTUP 5.1 Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian ini dapat ditarik kesimpulan bahwa ekstrak daun nyamplung terbukti memilikii efektivitas antiinflamasi dan ketiga dosis ekstrak daun nyamplung mempunyai efektivitas antiinflamasi yang sama. Untuk dosis ekstrak daun nyamplung, dengan dosis 0,1 gram, 0,15 gram dan 0,2 gram mempunyai efektivitas antiinflamasi yang setara dengan dosis kalium diklofenak 0,45 mg pada tikus putih. 5.2 Saran Salah satu usaha untuk mengembangkan tanaman obat tradisional salah satunya adalah daun nyamlung, karena masyarakat masih belum begitu mengenal daun nyamplung dan manfaatnya. Di harapkan penelitian ini bisa ditindaklanjuti dalam penelitian lanjutan, sehingga ke depan ekstrak bawang putih dapat digunakan oleh masyarakat luas untuk pengobatan antiinflamasi. 37 DAFTAR PUSTAKA Depkes RI.(1995). Farmakope Edisi IV. Direktorat Jendral Pengawas Obat dan Makanan:Jakarta Depkes RI.(1986). Sediaan Galenik. Direktorat Jendral Pengawas Obat dan Makanan:Jakarta E. W, Lucia. (2011). Eksperimen Farmakologik, sandira surabaya : surabaya Ekawati, G. (2011). uji antiinflamasi infus rambut jagung (zea mays L.) ditinjau dari penurunan udem pada telapak kaki tikus putih jantan yang diinduksi karagenin. Depok. Fajriani. (2008). PEMBERIAN OBAT-OBATAN ANTI INFLAMASI NON STEROID ( AINS ) PADA ANAK. Indonesian Journal of Denistry, 15(3), 200–204. Inayati, A. (2010). UJI EFEK ANALGETIK DAN ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL 70% DAUN SIRIH ( Piper betle, Linn) SECARA IN VIVO. Jakarta. Iskandari, A. (2010). Isolasi dan Elusidasi Struktur Quercetin Dari Daun Nyamplung (Calophyllum Inophyllum). Surakarta. Muaddibah, K. (2013). Laporan Teknik Instrumentasi laboratorium Biosistem (Hewan Coba). Malang. Resi Agestia Waji, & Srgrani, A. (2009). Makalah kimia Organik Bahan Alam Favonoid (quercetin). Makasar. Surgrani, Resi Agestia, ANDIS, W., & P. (2009). MAKALAH KIMIA ORGANIK BAHAN ALAM FLAVONOID (Quercetin). Makasar. Wijaya, S., & S.W, M. (2004). UJI EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK HERBA SURUHAN ( Peperomia. Berk. Penel. Hayat, 9, 115–118. Anief, Moh. 1997. Ilmu Meracik Obat. Yogyakarta: Gadjah Mada University press. Anonim. 2002. Petunjuk Praktikum Farmakologi Dasar. Semarang: Fakultas Farmasi Wahid Hasyim Semarang. Himawan. 1973. Patologi. Jakarta: Bagian Patologi Anatomik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Indonesia, Dinas Kesehatan. 2006. Kumpulan Perundang-undangan Dibidang Obat Tradisional. Jatim: Dinas Kesehatan. 38 39 Indonesia, Departemen Kesehatan. 1986. Sediaan Galenika. Jakarta: Departemen Kesehatan. Mycek, Mary J. 1995. Farmakologi Ulasan Bergambar. Edisi II. Jakarta: Widya Medika. DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1.Perhitungan konversi dosis tikus Dosis 1: Dosis 2: Dosis 3: 20 𝑔𝑟𝑎𝑚 1 𝑚𝑙 30 𝑔𝑟𝑎𝑚 1 𝑚𝑙 40 𝑔𝑟𝑎𝑚 1 𝑚𝑙 𝑋 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 = 0,1 𝑔𝑟𝑎𝑚/𝑚𝑙 𝑋 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 = 0,15 𝑔𝑟𝑎𝑚/𝑚𝑙 𝑋 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 = 0,2 𝑔𝑟𝑎𝑚/𝑚𝑙 40 41 Lampiran 2.Gambar penelitian. Hasil evaporasi ekstrak daun nyamplung Penandaan kaki tikus Pengukuran volume kaki tikus penyondean tikus
