2. tinjauan pustaka

2. TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Biologi, Morfologi, dan Habitat Diatom
Diatom merupakan mikroalga uniseluler yang distribusinya sangat
universal di semua tipe perairan. Disebut diatom karena selnya terdiri dari 2
bagian (2 atom), dimana yang satu menutupi yang lain seperti layaknya kaleng
pastiles (Basmi, 1999). Diatom diklasifikasikan kedalam dua order berdasarkan
bentuk selnya yaitu diatom pennate (Pennales) dengan bentuk bilateral simetris
dan diatom centris (Centrales) dengan bentuk radial simetris (lingkaran) apabila
dilihat dari atas (Pandey dan Trivedi, 2005; Basmi, 1999). Pada Centrales hiasan
valvanya berbentuk jari-jari lingkaran, sedangkan pada Pennales secara bilateral.
Pergerakan tidak pernah dijumpai pada jenis-jenis anggota Centrales, namun
hanya pada pennales yang valvanya berbentuk memanjang (Basmi, 1999). Diatom
mempunyai keunikan yang sangat spesifik, karena arsitektur dan anatomi dinding
selnya tersusun dari silika, sehingga dapat tersimpan dalam kurun waktu yang
sangat lama di dalam sedimen (Soeprobowati dan Suwarno, 2009). Diatom
Centrales akan lebih sering kita temui pada air laut dan payau dibandingkan air
tawar (Darley, 1982), sedangkan diatom pennate menempel pada tanaman,
hewan, batuan atau butir pasir dengan sebuah lapisan getah atau tangkai (Darley,
1982).
Contoh dari spesies kelompok diatom diantarannya adalah Chaetoceros
gracilis, Skeletonema costatum, dan Thalassiosira sp. (Edhy et al., 2003). Ketiga
spesies ini merupakan kelompok diatom yang memiliki pola bentuk sentris
(Centrales ) (Panggabean dan Sutomo, 2000).
4
5
2.1.1. Skeletonema costatum
Klasifikasi Skeletonema costatum menurut Bougis (1979) in Tjahjo et al.
(2002) dan Edhy et al. (2003) adalah sebagai berikut :
Divisi
: Chrysophyta
Clasis
: Bacillariophyceae
Ordo
: Centrales
Family
: Skeletonemoidae
Genus
: Skeletonema
Spesies
: Skeletonema costatum
Skeletonema costatum memiliki sel yang dipenuhi oleh sitoplasma,
membentuk untaian rantai yang terdiri dari epiteka pada bagian atas dan hipoteka
pada bagian bawah (Isnansetyo dan Kurniastuty, 1995). Dinding sel Skeletonema
costatum mempunyai frustula yang menghasilkan skeletal external berbentuk
silindris (cembung) dan mempunyai duri-duri yang berfungsi sebagai penghubung
antar frustula sehingga membentuk filamen (Kamat 1976 in Tjahjo et al., 2002).
Bentuk sel Skeletonema costatum dapat dilihat pada Gambar 1.
Skeletonema costatum merupakan diatom yang bersifat eurytermal yaitu
mampu tumbuh pada kisaran suhu 3–30 oC dan temperatur optimal adalah 25-27
o
C (Susetyowati, 1994 in Tjahjo et al., 2002). Daerah penyebarannya meliputi
daerah tropis dan subtropis mulai dari pantai sampai lautan, sebagai meroplankton
dan benthos. Diatom laut, Skeletonema costatum memiliki kandungan
karbohidrat sebesar 4,6%, kandungan protein sebesar 25% dan kandungan lemak
sebesar 10% (Brown, 1997).
6
.
Sumber : planktonnet.awi.de (2010)
Gambar 1. Bentuk sel Skeletonema costatum
2.1.2. Thalassiosira sp.
Klasifikasi Thallassiosira sp. menurut (Edhy et al., 2003) adalah sebagai
berikut :
Divisi : Chrysophyta
Kelas : Bacillariophyceae
Ordo : Centrales
Famili : Coscinodiscineae
Genus : Thalassiosira
Spesies : Thallassiosira sp.
Sel Thalassiosira sp. menempel dalam sebuah massa mukus. Pori-pori
sentral mukus ini disebut dengan single apikulus, benang mukus ini
menghubungkan sel dalam rantai yang longgar (Hendley, 1959 dan Hasle, 1968 in
Somers, 1972). Bentuk sel terlihat mengelilingi persegi dengan sebuah cekungan
dalam pusat valve, sebuah rimoportula besar diantara muka valve dan mantel,
sebuah lingkaran kecil yang diam, dua atau tiga lingkaran kecil fultoportulae dan
susunan areola (Gambar 2) (Becerril et al., 2009).
7
Thalassiosira sp. merupakan diatom yang bersifat eurytermal yaitu mampu
tumbuh pada kisaran suhu 10–30 oC dan temperatur optimal sekitar 21 oC.
Daerah penyebarannya meliputi perairan tawar dan payau habitat pesisir (Kipp,
2007). Diatom laut, Thalasiossira sp. pada kondisi medium N:P:Si= 11:1:6
memberikan biomassa sebesar 0.067 g/mL, dengan kandungan karbohidrat
sebesar 7.7%, kandungan protein sebesar 0.93% dan kandungan lemak sebesar
9.69% (Purba, 2008).
Sumber : Becerril et al. (2009)
Gambar 2. Bentuk sel Thalassiosira delicatula
2.1.3. Chaetoceros gracilis
Klasifikasi Chaetoceros gracilis menurut (Zipcodezoo, 2009 dan Edhy et
al., 2003) adalah sebagai berikut :
Divisi
: Chrysophyta
Classis
: Bacillariophyceae
Ordo
: Centrales
Family
: Chaetocerotaceae
8
Genus
: Chaetoceros
Spesies
: Chaetoceros gracilis
Chaetoceros gracilis memiliki sel yang tidak berantai, dan bercangkang
cembung. Setai muncul pada sudut-sudutnya, membentuk kurva dan kemudian
menjadi parallel bentuknya, spora terdapat di tengah-tengah sel induk dan
bercangkang kasar, panjang apikal axisnya 6-10 µm (Suantika et al., 2009).
Chaetoceros gracilis adalah spesies yang non motil, bercangkang simetris,
sitoplasmanya memiliki sejumlah kecil kromatofora, dan akan berwarna kuning
keemasan hingga coklat pada kultur buatan (Gambar 3) (Isnansetyo dan
Kurniastuty, 1995).
Chaetoceros gracilis dapat hidup pada temperatur 25-30 oC, pada suhu
40oC masih dapat bertahan hidup namun tidak berkembang, sehingga Chaetoceros
gracilis merupakan diatom yang bersifat eurytermal. Daerah penyebarannya
meliputi muara sungai, pantai, dan laut pada daerah tropis dan subtropis
(Isnansetyo dan Kurniastuty, 1995). Bentuk sel Chaetoceros gracilis dapat dilihat
pada Gambar 3. Diatom laut, Chaetoceros gracilis memiliki kandungan
karbohidrat sebesar 4.7%, kandungan protein sebesar 12% dan kandungan lemak
sebesar 7.2% (Lavens dan Sorgeloos, 1996 in Suantika et al., 2009).
9
Sumber : iats.csic.es (2009)
Gambar 3. Bentuk sel Chaetoceros gracilis
2.2. Lipid dan Fatty Acids pada Mikroalga
Lipid adalah senyawa yang tidak larut dalam air tapi larut dalam pelarut
organik seperti kloroform, heksan, toulen, dan aseton. Lipid bisa membentuk
kombinasi dengan senyawa sederhana lainnya, seperti ester lilin, trigliserida, dan
fosfolipid (McSween et al., 2003). Lipid disintesis dari karbohidrat dan protein,
karena dalam metabolisme ketiga zat tersebut bertemu di dalam daur Krebs.
Pertemuan di dalam daur krebs berlangsung melalui pintu gerbang utama siklus
(daur) Krebs, yaitu Asetil Ko-enzim A, akibatnya senyawa lipid, karbihidrat, dan
protein dapat saling mengisi sebagai bahan pembentuk semua zat tersebut. Lipid
dapat dibentuk dari protein dan karbohidrat, karbohidrat dapat dibentuk dari
lemak dan protein dan seterusnya.
Sintesis lipid dari karbohidrat dimulai dari penguraian glukosa menjadi
piruvat sehingga menghasilkan gliserol. Tahap kedua glukosa diubah menjadi
10
gula fosfat kemudian menjadi asetil ko-A sehingga menghasilkan asam lemak.
Gliserol dan asam lemak jika digabungkan akan menghasilkan lipid (Campbell et
al., 2002). Sintesis lipid dari protein diawali dengan perubahan protein menjadi
asam amino dengan bantuan enzim protease, sebelum terbentuk lemak asam
amino mengalami deaminasi terlebih dahulu, setelah itu memasuki daur Krebs.
Banyak jenis asam amino yang langsung ke asam piruvat sehingga menghasilkan
asetil ko-A. Asam amino serin, alanin, valin, leusin, isoleusin dapat terurai
menjadi asam piruvat, selanjutnya asam piruvat menjadi gliserol sehingga
menghasilkan fosfogliseroldehid. Fosfogliseroldehid dengan asam lemak akan
mengalami esterifikasi membentuk lipid (Campbell et al., 2002). Gambar 4
menunjukan proses sintesa lipid dari glukosa dan asam piruvat.
Sumber : pancreaticdiseasecenter.org (2010)
Gambar 4. Diagram proses sintesa lipid
Mikroalga memiliki jumlah minyak dan lemak (lipids) dengan komposisi
yang sama dengan minyak tumbuhan. Kandungan minyak dan lemak pada
mikroalga cenderung memiliki proporsi yang berbanding terbalik pada laju
11
pertumbuhan dan kondisi lingkungan yang bervariasi, sehingga mempengaruhi
proporsi kedua komponen tersebut secara relatif (Borowitzka, 1988). Jumlah
kandungan lipid pada mikroalga berkisar kira-kira 1-70 % dari berat kering
(Borowitzka, 1988).
Lipid dalam mikroalga merupakan komponen yang tersusun dari neutral
lipid dan polar lipid. Neutral lipid terdiri dari trigliserida, waxe ester,
hidrokarbon, free fatty acids, dan sterol, sedangkan polar lipid tersusun atas
komponen seperti phospholipids, glikolipid, dan karotenoids (Wiyarno, 2009).
Gambar struktur molekul dari komponen-komponen lipid dapat dilihat pada Tabel
1.
Bentuk lemak terbesar yang terkandung dalam sel mikroalga adalah
triglycerides (TAGs) yang dapat mencapai 80% dari total keseluruhan lemak.
Lemak ini merupakan yang terpenting dari mikroalga karena merupakan jenis
minyak yang baik untuk memproduksi biodiesel. Lemak mikroalga biasanya
merupakan ester yang terdiri dari gliserol dan asam lemak dengan panjang rantai
C14 sampai C22. Komposisi asam lemak pada mikroalga yaitu berupa
monounsaturated fatty acids (MUFAs) dan polyunsaturated fatty acids (PUFAs),
antara lain asam palmitat (C16:0), asam palmitoelate (C16:1), asam stearat
(C18:0), asam oleat (C18:1), asam linoleat (C18:2), serta beberapa jenis asam
yang lain (Tabel 2) ( Borowitzka, 1988).
12
Tabel 1. Struktul molekul komponen-komponen lipid
Kategori
Struktur Molekul
Trigliserida
Fatty Acids
Sterol
Gliserolphospolipid
Karotenoids
Sumber : (Jakubowski, 2012)
Asam lemak yang terdapat pada triacylglycerides dalam sel mikroalga
dapat berbentuk rantai hidrokarbon yang pendek dan panjang. Rantai asam lemak
yang berukuran lebih pendek cocok untuk memproduksi biodiesel dan yang lebih
panjang dapat digunakan untuk menghasilkan produksi asam lemak lainnya yang
13
bernilai seperti asam lemak omega 3 yaitu asam docosahexanoic (DHA)
(Borowitzka, 1988).
Tabel 2. Jenis asam lemak pada beberapa mikroalga
Asam
Lemak
C.Calcitrans S.Costatum
Nannochloropsis sp. I Galbana
12:0
-
-
14:0
13.0
16.5
6.9
16.8
6.3
5.3
16:0
18.0
16.5
30.9
11.1
22.8
38.7
16:1n7
28.8
11.1
19.6
5.1
10.2
-
-
-
-
-
-
-
18:1n9
0.3
2.2
4.4
9.7
6.9
5.8
18:2n6
0.7
1.1
3.5
7.8
6.9
3.5
18:3n3
0.8
-
0
16.3
14.9
-
18:3n6
0.3
0
0
-
1.6
-
18:4n6
0.2
5.5
0
19.8
21.6
-
20:4n6
2.3
0
4.6
0.6
2.0
16.0
20:5n3
22:6n3
34.0
1.2
40.7
6.6
30.1
-
0.9
12.0
6.2
-
30.7
-
18:0
-
-
T Suecicca P Cruentum
0.7
-
Sumber : (Servel et al. 1993 in Winaryo 2009)
2.3. Mikroalga Untuk Produksi Biodiesel
Biodiesel adalah bahan bakar yang tersusun dari monoalkil ester rantai
panjang fatty acids yang merupakan turunan dari minyak tumbuhan dan lemak
hewani. Biodiesel dapat diperoleh melalui reaksi transesterifikasi trigliserida atau
reaksi esterifikasi asam lemak bebas tergantung dari kualitas minyak nabati yang
digunakan sebagai bahan baku. Transesterifikasi adalah proses yang mereaksikan
trigliserida dalam minyak nabati atau lemak hewani dengan alkohol rantai pendek
seperti methanol menghasilkan metil ester asam lemak (Fatty Acids Methyl
Esters/ FAME) atau biodiesel dan gliserol (Ma et al., 1999).
Berdasarkan kandungan FFA dalam minyak nabati maka proses pembuatan
biodiesel dibedakan menjadi 2 yaitu, transesterifikasi dengan katalis basa
(sebagian besar menggunakan kalium hidroksida) untuk bahan baku refined oil
14
atau minyak nabati dengan kandungan FFA rendah (<5%) dan esterifikasi dengan
katalis asam (umumnya menggunakan asam sulfat) untuk minyak nabati dengan
kandungan FFA tinggi (>5%) (Ma et al., 1999).
Biodiesel dan bioetanol diproduksi dari tanaman pertanian misalnya kelapa
sawit, jarak, kelapa, jagung, ubi kayu, dan tanaman yang menghasilkan minyak
nabati yang tinggi. Akan tetapi tanaman - tanaman tersebut jika diolah menjadi
biodiesel akan berbenturan dengan kebutuhan pangan dan lahan. Oleh karena itu
dibutuhkan penemuan baru bahan baku yang cocok untuk produksi bahan bakar
yang tidak mengurangi ketersediaan minyak nabati.
Mikroalga lebih memiliki potensi untuk dijadikan biodiesel dibandingkan
biofuel (Chisti, 2008). Minyak dari mikroalga mengandung lipid yang cocok
untuk esterifikasi atau transesterifikasi (Umdu et al., 2008). Diantara berbagai
jenis alga, mikroalga tampak menjanjikan sebab :
1. Memiliki laju pertumbuhan yang tinggi
2. Kandungan lipid dapat disesuaikan dengan mengubah komposisi media
untuk tumbuh (Kawaroe et al., 2010)
3. Dapat dipanen lebih dari sekali dalam satu tahun (Kawaroe et al., 2010)
4. Dapat menggunakan air laut atau air limbah (Kawaroe et al., 2010)
5. Karbon dioksida di atmosfer ,merupakan sumber untuk pertumbuhan
mikroalga (Kawaroe et al., 2010)
6. Biodiesel dari lemak alga merupakan non toksik dan bersifat
biodegradable secara cepat
7. Mikroalga yang digunakan untuk biodiesel mampu berproduksi 15-300
kali lebih cepat dibandingkan tanaman daratan (Chisti, 2007).
15
2.4. Kromatografi Gas-Mass Spektrometri (GC-MS)
Kromatografi merupakan suatu istilah yang menggambarkan teknik
pemisahan komponen – komponen dari suatu campuran / sampel berdasarkan
perbedaan kecepatan migrasi komponen – komponen penyusunnya (Mahan et al.,
2008).
Dalam kromatografi, gas (yang biasa disebut carrier gas) digunakan untuk
membawa sampel melewati lapisan (bed) material. Karena gas yang bergerak,
maka disebut mobile phase (fasa bergerak), sebaliknya lapisan material yang diam
disebut stationary phase (fasa diam). Ketika mobile phase membawa sampel
melewati stationary phase, sebagian komponen sampel akan lebih cenderung
menempel pada stationary phase dan bergerak lebih lama dari komponen lainnya,
sehingga masing – masing komponen akan keluar dari stationary phase pada saat
yang berbeda. Dengan cara ini komponen – komponen sampel dipisahkan
(Mahan et al., 2008)
Data yang dihasilkan oleh GC – MS akan ditampilkan dengan
kromatogram (GC) dan spektrum massa (MS) dimana sumbu x menunjukkan
waktu penyimpanan (retention time) dan sumbu y menunjukkan intensitas.
Masing-masing puncak (peak) pada kromatogram menunjukkan satu senyawa.
Spektrum massa memiliki base peak (m/z) dan dapat memberikan informasi
tentang berat molekul dan struktur kimia (Shimadzu, 2002).