Metabolisma didefinisikan sebagai semua reaksi kimia yang terjadi dalam sel. Metabolisma terdiri dari dua proses yang berlawanan yang terja secara : Sintesis protoplasma dan penggunaan energi yang disebut sebagai Anabolisma. Oksidasi subsstrat diiringi dengan terbentuknya energi disebur dengan Katabolisma. Metabolisme digolongkan : Metabolisme karbohidrat Metabolisme protein Metabolisme lemak Transport nutrient Di/Trisakarida Hidrolisa Monosakarida Degradasi tingkat seluler Oligosakarida Polisakarida Enzim Ekstraseluler Mono/Disakarida Transport nutrien Polisakarida Pati Glikogen Selulosa Pektin Lainnya Disakarida Laktosa Sukrosa Maltosa Mold Bacillus sp Clostridium Bakteri lainnya (beberapa) Galaktosa + Glukosa Glukosa + Fruktrosa Glukosa Monosakarida : Glukosa : dapat digunakan oleh semua mikrobia Fruktosa setiap mikrobia Galaktosa berbeda kemampuan Pentosa mendegradasinya tetrosa Fermentasi Definisi : proses pemecahan karbohidrat dan asam amino secara anaerobik Senyawa yang dapat dipecah adalah: karbohidrat, asam amino hanya dapat difermentasi oleh mikroba tertentu Fermentasi glukosa selalu terbentuk asam piruvat Pemecahan glukosa menjadi asam piruvat : Jalur Embden-Meyerhoof-Parnas (EMP) Jalur Etner Doudoroff (ED) Jalur Heksosamonofosfat (HMF) Jalur Fosfoketolase (FK) Pathway Embden Meyerhoff Parnas Heksosa monofosfat Entaer doudroff Fosfoketolase : Pentosa fosfoketolase Heksosa fosfoketolase Pemilihan jalur tergantung : Macam monosakarida Macam mikrobia Redoks potensial Asam piruvat metabolisme lanjut 1. fermentasi 2. Respirasi aerobik anaerobik Asam laktat Heksosa Heksosa Pentosa Etanol : Heksosa FDPA FK FK KDPGA 2 laktat + 2 ATP 1 laktat + 1 asetat + 1 CO2 + 1 ATP 1 laktat + 1 Asetat + 2 ATP 2 etanol + 2 CO2 + 1 ATP FDPA : fruktosa 1,6 difosfat aldolase FK : fosfoketolase KDPGA : 2-keto-3-deoksi-6-fosfoglukonat aldolase Jalur EMP Glukosa Fruktosa-1,6-di-P 2 Piruvat Asam laktat Asetaldehid + CO2 Mikrobia : Yeast Bacillus sp Enterococus faecalis Bakteri asam laktat homofermentatif Lactococcus, streptococus, Pediococcus, lactobacillus grup I dan II Enzim utama yang berperan : Fruktosa difosfat aldolase Fruktosa-1,6 P Gliserida – 3 P Laktat dehidrogenase Asam piruvat Asam laktat Tidak mempunyai enzim fosfoketolase L, D, dan DL – laktat terbentuk tergantung tipe enzim laktat dehidrogenase yang dimiliki Asam laktat dikeluarkan ke medium Ribosa-5P jalurnya bervariasi Xilulosa-5P Asetil-P + Piruvat Asetat/etanol Mikrobia: Escherichia coli Bacillus sp Enterobacter serogenes Bakteri asam laktat asam laktat BAL heterofermentatif Yang termasuk kelompok ini : Leuconostoc Lactobacillus Grup II Mempunyai enzim fosfoketolase: Pada Lactobacillus Grup II Kelompok : Pediococcus pentosaceus Dapat P. acidilactici mendegradasi Lactobacillus lactis pentosa tetapi jalurnya belum diketahui Mikrobia : Bifidobacterium sp Jalur : 2 Glukosa 1 fruktosa 1 Asetil 1 fruktosa 6P 1 Eritrosa 4P 2 Xilulosa-3P 2 Asetil-P 3 Asam asetat 2 Gliseraldehid-3P 2 Asam Laktat Mikrobia : Bifidobacterium sp Jalur : 2 Glukosa 1 fruktosa 1 Asetil 1 fruktosa 6P 1 Eritrosa 4P 2 Xilulosa-3P 2 Asetil-P 3 Asam asetat 2 Gliseraldehid-3P 2 Asam Laktat Mikrobia Pseudomonas sp Enzim yang berperan : 2-oxo-3deoxi-6-fosfoglukonat Jalur asam piruvat + gliserida : Glukosa-6P Fosfoglukonat Piruvat CO2 + Asetaldehid etanol Gliseraldehid 3P Mikrobia : Enterobacteriaceae Jalur : Monosakarida Asam laktat Format H2 + CO2 Asam piruvat Asetil Co-A Asam asetat Suksinat Etanol 1. Mikrobia Propionibacterium : pada keju Swiss Jalur : Glukosa EMP Asam Piruvat Asam asetat + CO2 Metilmaloni Co-A Oksala asetat + Prodinil Co-A Propinil Co-A Propionat 2. Mikrobia Clostridium sp Jalur : Asam laktat Akrilil Co-A Propinil Co-A Propionat Diasetil, Asetoin, Butanadiol Mikroba : Enterobacteriaceae Beberapa Bakteri Asam Laktat Lactobacillus lactis Subsp lactisbiavar diacetilactis dan Leuconostoc sp Jalur : Monosakarida Asam piruvat Asam asetat + asetal dehid + Tiamin Pirofosfat Asetil Co-A Diasetil Reduksi Asetoin 2-3 Butanediol 2 CO2 Diasetil, Asetoin, Butanadiol Mikroba : Enterobacteriaceae Beberapa Bakteri Asam Laktat Lactobacillus lactis Subsp lactisbiavar diacetilactis dan Leuconostoc sp Jalur : Monosakarida Asam piruvat Asam asetat + asetal dehid + Tiamin Pirofosfat Asetil Co-A Diasetil Reduksi Asetoin 2-3 Butanediol 2 CO2 Fermentasi Butirat, Butanol, aseton Mikrobia : Clostridium sp Jalur : Monosakarida Asam piruvat Asam asetat Asetoil Co-A + CO2 + H2 Asam Butirat Etanol Butanol Isopropanol Aseton Fermentasi Butirat, Butanol, aseton Mikrobia : Clostridium sp Jalur : Monosakarida Asam piruvat Asam asetat Asetoil Co-A + CO2 + H2 Asam Butirat Etanol Butanol Isopropanol Aseton Mikrobia Pola fermentasi Produk utama Yeast Alkohol Etanol, CO2 BAL Heterofermentatif Homofermentatif Asam laktat Asam laktat, asam asetat, etanol, CO2, diasetil, aseton Bifidobacteria Bifidus Asam laktat, Asam asetet Propionibacteria Asam propionate Propionat, Asam asetat, CO2 Enterobacteriaceae Mixed acid Asam laktat, As. Asetat, format, CO2, H2, suksinat Diasetil, asetoin, butanediol Butanediol Mikrobia Pola fermentasi Produk utama Bacillus Butanediol Asam laktat, as, asetat, format, 2,3 butanediol, H2, CO2 Asam laktat, as. Asetat, H2 EMP Clostridium Bifidobacteria Asam butirat, butanol, Asam butirat, asam asetat, aseton H2, butanol, etanol, CO2, aseton, isopropanol Asam propionate propionat Asam laktat, Asam asetet Pseudomonas Etner Doudroff HMP Etanol, CO2 Asam laktat, As. Asetat, etanol Metabolisme karbohidrat : Fermentasi karbohidrat diinginkan Bioproses pengolahan makanan Produksi metabolit (as. Laktat, diasetil dll) Kerusakan makanan tidak dikehendaki Kerusakan tekstur buah-buahan (degradasi pektin dsb) Untuk identifikasi dan pembedaan mikroba : Enterobacter sp .vs. E. coli produksi 2,3 butanediol Kemampuan fermentasi karbohidrat identifikasi Metabolisme karbohidrat : Fermentasi karbohidrat diinginkan Bioproses pengolahan makanan Produksi metabolit (as. Laktat, diasetil dll) Kerusakan makanan tidak dikehendaki Kerusakan tekstur buah-buahan (degradasi pektin dsb) Untuk identifikasi dan pembedaan mikroba : Enterobacter sp .vs. E. coli produksi 2,3 butanediol Kemampuan fermentasi karbohidrat identifikasi Metabolisme protein Protein dalam makanan : Protein sederhana : albumin, globulin, zein, keratin, kolagen Protein tidak sederhana : mioglobin, hemoglobin, kaserin Pepetida yang mengandung 2 atau lebih asam amino Komponen Nitrogen non-protein : asam amino, urea, kreatinin, trimetil amin, dll Dalam sel Protein Peptida besar asam amino peptida sederhana 6-8 asam amino Proteinase Asam amino Metabolisme Peptidase Mikrobia : Alakligenes Klebsiella Bacillus Lactococcus Clostridium Micrococcus Enterococcus Pseudomonas Enterobacter Serratia Flavobacterium lanjut RESPIRASI AEROBIK Mikrobia : bakteri aerob atau fakultatif anaerob Asam amino : sumber C, N dan energi Oksidasi : - Deaminasi - Transminasi asam keto Masuk jalur-jalur berbeda Oksidasi : (jalur lain untuk bakteri berbeda) misal : L-treonin asetaldehid dan glisin L-triptopan asam antranilat L-lisin as. Glutrat L-valin keto iso valerat L-leusin keto iso kaproat L-argini citrulin L-hiastidin asam urocanic FERMENTASI Mikrobia : bakteri anaerob dan fakultaif anaerob Asam amino : single Deaminasi C-skeleton + NH3 Asam lemak Asam tidak jenuh Dekarboksilasi Hidrolisa Metabolit Asam amino:pasangan 2 Oksidasi-reduksi amina + CO2 C-skeleton +CO2+NH3+H2 C-skeleton + energi + produk asam lemak +NH4 +CO2 Degradsi asam amino Produk : - Asam keto -NH3 - asam lemak - H2S - H2 - amina dll - CO2 Faktor yang berpengaruh pada macam produk : Jenis mikroba Jenis asam amino Potensial reduksi Produk dari beberapa asam amino : berpengaruh pada makanan kerusakan mutu Kesehatan Misal : Triptophan indol, skatol Lisin putrecine, cadaverin Arginin Histidin histamin Tirosin tiramin Sistein H2S, mercaptan, sulfida Metionin komponen yang mengandung sulfur Sarter mikroba : Hasil degradsi proteinase dan peptidase untuk : Pembentukan flavor Pembentukan tekstur Teronin asetaldehid misal pada pembuatan keju, dll flavor yoghurt yang disukai (mikroba: lactobacillus acidophillus) Uji pembentukan mikrobia dan identifikasi : Produksi indol dari triptophan : E. coli mampu, coliform lainnya tidak Pola metabolisme asam amino : Identifikasi spesies bakteri SINTESA PROTEIN Foodborne patogen : Produksi toksin : Staphilococcus aureus thermostable Clostridium botulinum toxin bakteri yang termasuk foodborne intox Produk-produk hasil sintesa yang diharapkan : Asam amino esensial L-lisin Antibakteri nisin, podiosin Enzim amilase proteinase Metabolisme lipida : Lipida utama dalam makanan : -Mono,di,tri-gliserida -Asam lemak bebas : jenuh dan tidak jenuh -Sterol -Exo Mikroba: Sedikit melakukan metabolisme lipida - Lipida sukar dipecah jika dalam jumlah besar : hidrofobik - Bentuk emulsi dapat dipecah oleh mikroba yaitu pada interfase air-minyak Degradasi lipida menyebabkan kerusakan makanan Asam lemak bisa terakumulasi dalam makanan jika diprodiksi secara cepat Asam lemak tidak jenuh hidroperoksida aldehid + keton Oksidase (utamanya dihasilkan oleh jamur) Hidrolisa Gliserida gliserol + asam lemak Lipase -oksidasi Mikrobia : - Alcaligenes - Staphylococcus - Enterobacter - Serratia - Flavobacterium - Aspergillus -Micrococcus - Geotrichum - Pseudomonas - Penicillium Aseti Co-A metabolisme lanjut dalam sel Degredasi lipida dalam makanan 1. Rancidity : hidrolisa gliserida yang mempunyai asam lemak rantai pendek (asam butirat) 2. Pembentukan flavor : oksidasi asam lemak yang mempunyai rantai rangkap (jamur) Terbentuknya falvor yang diinginkan/tidak diinginkan Degredasi lipida dalam makanan 1. Rancidity : hidrolisa gliserida yang mempunyai asam lemak rantai pendek (asam butirat) 2. Pembentukan flavor : oksidasi asam lemak yang mempunyai rantai rangkap (jamur) Terbentuknya falvor yang diinginkan/tidak diinginkan Sintesa lipida 1.Mikrobia penghasil minyak termasuk kelompok oleagenous mikroba : - Bakteri yang hidup dilaut dalam - Yeast (misal candida) - Jamur (Mucorales) 2.Produksinya : minyak kaya asam lemak tidak jenuh (PUFA) misal : GLA,EPA,AA, DHA Sintesa lipida 1.Mikrobia penghasil minyak termasuk kelompok oleagenous mikroba : - Bakteri yang hidup dilaut dalam - Yeast (misal candida) - Jamur (Mucorales) 2.Produksinya : minyak kaya asam lemak tidak jenuh (PUFA) misal : GLA,EPA,AA, DHA