IDENTIFIKASI DAN UJI RESISTENSI BAKTERI Klebsiella
advertisement
IDENTIFIKASI DAN UJI RESISTENSI BAKTERI Klebsiella pneunomiae , Streptococcus pneumonia,Staphylococcus aureus YANG DIISOLASI DARI SPUTUM PASIEN PENDERITA BRONKHITIS TERHADAP ANTIBIOTIK SEFIKSIM, SIPROFLOKSASIN,AZITROMISIN DI RSUD Prof. Dr. MARGONO SOEKARJO PURWOKERTO SKRIPSI Skripsi diajukan untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) Disusun oleh: MEILINDA PUTRI SULISTIYOWATI 1208010067 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2017 Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 IDENTIFIKASI DAN UJI RESISTENSI BAKTERI Klebsiella pneunomiae , Streptococcus pneumonia,Staphylococcus aureus YANG DIISOLASI DARI SPUTUM PASIEN PENDERITA BRONKHITIS TERHADAP ANTIBIOTIK SEFIKSIM, SIPROFLOKSASIN, AZITROMISIN DI RSUD Prof. Dr. MARGONO SOEKARJO PURWOKERTO SKRIPSI Skripsi diajukan untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) Diajukan Oleh MEILINDA PUTRI SULISTIYOWATI 1208010067 KEPADA FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO PURWOKERTO 2017 i Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 ii Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 iii Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 HALAMAN PERNYATAAN Yang bertanda tangan dibawah ini, saya : Nama : MEILINDA PUTRI SULISTIYOWATI Nim : 1208010067 Program Studi : Farmasi Fakultas : Farmasi Universitas : Universitas Muhammadiyah Purwokerto Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari proses penelitian saya yang telah dilakukan sesuai prosedur penelitian yang benar dengan arahan dari dosen pembimbing dan bukan hasil penjiplakan dari hasil karya orang lain. Sumber informasi yang bersal atau dikutip dari karya yang diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka dibagian akhir skripsi ini. Demikian Pernyataan ini dan apabila kelak dikemudian hari terbukti ada unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggung jawabkan sesuai dengan ketentuan yang berlaku. Purwokerto, 2 Sepetember 2016 Yang menyatakan, Meilinda Putri Sulistiyowati iv Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 ABSTRAK Bronkhitis adalah penyakit yang disebabkan oleh adanya infeksi virus dan bakteri. Pengobatan yang digunakan untuk penyakit bronkhitis adalah antibiotik. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan tingkat resistensi bakteri yang diidentifikasi dan diisolasi dari sputum pasien bronkhitis terhadap antibiotik ciprofloxaxin, cefixime, azitromyzin di RSUD Prof.Dr.Margono Soekkarjo Purwokerto. Penelitian ini termasuk dalam penelitian deskriptif observasional dengan menggunakan rancangan cross sectional dengan pengambilan sampel acidental sampling sebanyak 7 sampel. Hasil penelitian ini menunjukkan bakteri yang teridentifikasi adalah Klebsiella Pneunomia, Streptococcus Pneunomia dan,Staphylococcus aureus. Hasil uji sensitivitas bakteri menggunakan metode kirby dan bauer yang di bandingkan dengan The Clinical and Laboratory Standards institute (CLSI). Kami menggunakan 3 jenis antibiotik yaitu cefixime, ciprofloxacin, axzitromicin. Antibiotik ciprofloxacin memberikan hasil suspectible 71,4% terhadap bakteri Klebsiella Pneunomia ,Streptococcus Pneunomia dan ,Staphylococcus aureus. Memberikan hasil resisten 28,5% Klebsiella Pneunomia ,Streptococcus Pneunomia dan ,Staphylococcus aureus . Antibiotik cefixime memberika hasil resisten 100 % terhadap bakteri Klebsiella Pneunomia, Streptococcus Pneunomia dan, Staphylococcus aureus . Antibiotik azitromicin memberikan hasil intermediet 14,2% terhadap bakteri Klebsiella Pneunomia, Streptococcus Pneunomia dan, Staphylococcus aureus dan hasil resisten 85,7% terhadap bakteri Klebsiella Pneunomia ,Streptococcus Pneunomia dan ,Staphylococcus aureus Antibiotik ciprofloxacin menunjukkan bahwa memiliki efektifitas yang baik untuk mengobati bronchitis Kata kunci : bronkhitis, antibiotik, resistensi v Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 ABSTRACT Bronchitis is a disease caused by viral and bacterial infections treatment used for bronchitis disease is antibiotics. This study aims to determine the level of resistance by bacteria identified and isolated from the sputum of patients with bronchitis against ciprofloxaxin antibiotic, cefixime, azitromyzin in hospitals Prof.Dr.Margono Soekkarjo Purwokerto. This study was included in the descriptive observational with cross sectional by taking accidental sampling as much as 7 samples . The results showed the bacteria identified are Klebsiella Pneunomia ,Streptococcus Pneunomia and ,Staphylococcus aureus. The result of the sensitivity of bacteria using methods kirby and bauer that in comparison with the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). We use three types of antibiotics that cefixime, ciprofloxacin, axzitromicin The antibiotic ciprofloxacin results suspectible 71,4% of the bacteria Klebsiella Pneunomia ,Streptococcus Pneunomia and ,Staphylococcus aureus. Results resistant 28,5% Klebsiella Pneunomia ,Streptococcus Pneunomia and ,Staphylococcus aureus. Antibiotic resistant cefixime results 100 % to the bacteria Klebsiella Pneunomia ,Streptococcus Pneunomia and ,Staphylococcus aureus. Antibiotic azithromycin results intermediates 14.2% of the bacteria Klebsiella pneumonia, Streptococcus pneumonia and, Staphylococcus aureus and results of 85.7% to the bacteria resistant Klebsiella pneumonia, Streptococcus pneumonia and, Staphylococcus aureus. The antibiotic ciprofloxacin showed that effectiveness is good for treating bronchitis. Keywords : bronchitis, antibiotic, resistance vi Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 MOTTO Tidak ada usaha yang sia-sia “Maka sesungguhnya bersama kesulitan ada kemudahan. Sesungguhnya bersama kesulitan ada kemudahan. Maka apabila engkau telah selesai (dari sesuatu urusan), tetaplah bekerja keras (untuk urusan yang lain). Dan hanya kepada Tuhanmulah engkau berharap.” (QS. Al-Insyirah, 6-8) vii Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 HALAMAN PERSEMBAHAN Puji syukur saya panjatkan kepada Allah SWT yang telah memberikan kemudahan dan ridho-Nya serta telah mengabulkan segala do’a yang dipanjatkan sehingga saya bisa menyelesaikan skripsi ini. Shalawat serta salam saya limpahkan kepada Nabi Muhammad SAW yang semoga pada akhir zaman kita mendapatkan syafaatnya. Ibu saya yang selama ini memberikan seluruh doa yang tak ada hentihenti nya , kebaikan dan pengorbanan dalam hidupnya baik moral maupun moril , sehingga saya juga dapat termotivasi dan selalu semnagat untuk menyelesaikan tugas akhir ini dengan baik . Alm. Bapak saya yang ikut mendoakan di atas sana. Pascal Sulistiyo wibowo adik pertama saya yang paling cerewet dalam urusan skripsi saya ,selalu memotivasi saya agar skripsi ini cepat selesai , perhatian dan selalu berdoa untuk kelancaran dan kesuksesan hingga saat ini dapat menyelesaikan tugas akhir dengan baik . Yudis Tira Sulistiyanto adik kedua saya yang paling cuek terhadap apapun terimakasih untuk doa nya ,sehingga dapat menyelesaikan tugas akhir dengan baik Titis Afrliana , Siti Aisah , Ika Afriatin , Dita puspita , Suci Afiati , Freda Andrean , Andina Putri U , Gilang Ikrar D , Maman Sudarman , Bibit Febriani , Muhamad Gana N P , sahabat-sahabat ku terima kasih selalu memberikan semangat , selalu memberikan motivasi , selalu memberikan doa , memberikan perhatian , sehingga tugas akhir ini dapat terselesaikan dengan baik . Nining Hernawati partneur skripsi saya ,yang telah banyak membantu dalam penelitian saya , selalu memberikan doa ,dan memberikan motivasi sehingga tugas akhir ini dapat terselesaikan Abdul Rohman Baisa terimakasih untuk motivasi dan untuk doa nya viii Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 PRAKATA Alhamdulillah, puji syukur kehadirat Allah SWT dan Nabi Muhammad SAW, yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya serta pencerahan yang dibawakan oleh Rosulullah SAW sehingga penulis mampu menyelesaikan skripsi ini yang berjudul “Identifikasi dan uji resistensi bakteri Klebsiella pneunomiae , Streptococcus pneumonia,Staphylococcus aureus pasien penderita bronkhitis terhaap antibiotik yang diisolasi dari sputum cefixime, ciprofloxcacin, Azitromisin di RSUD Prof. Dr. Margono soekarjo Purwokerto”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi persyaratan untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Penulis menyadari bahwa selesainya skripsi ini tidak terlepas dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada: 1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H selaku Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah memimpin dengan arif dan bijaksana serta memberikan fasilitas belajar mengajar di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto sehingga penulis dapat menyelsaikan studi ini. 2. Dr. Agus Siswanto, M.Si.,Apt selaku dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto memberikan semangat dan kemudahan penulis dalam menyelesaikan studi. 3. Dr.Nunuk Aries Nurulita,M.Si.,Apt dan Elza Sundhani Msc.,Apt selaku pembimbing terima kasih atas kebaikkan, kesabarannya dalam membimbing skripsi dan telah meluangkan waktunya umtuk membimbing , sehingga tugas akhir ini dapat di selesaikan dengan baik 4. Retno Wahyuningrum. SFarm., Apt dan Githa Fungie Galistiani. Msc.,Apt selaku dosen pengajar dan penguji di fakultas farmasi peneliti ucapkan banyak-banyak terima kasih 5. Para Perawat di RSUD Prof. Dr. Margono Seokarjo yang telah membantu dalam pengambilan responden 6. Pasien yang telah bersedia menjadi responden dan membantu penulis dalam menyelesaikan skripsi ix Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 7. Semua pihak yang tidak bisa disebutkan satu persatu, yang mendukung penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. 8. Kedua orang tua yang senantiasa mendoakan, memberikan motivasi, nasihat, bimbingan dan kasih sayang dengan ikhlas sepanjang masa Peneliti menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kata sempurna dan memiliki kekurangan.Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi pembaca. Purwokerto, 2 September 2016 Penulis x Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 RIWAYAT HIDUP Nama : Meilinda Putri Sulistiyowati Tempat dan Tanggal Lahir : Indramayu, 30 Mei 1994 Orang tua : Sulistiyono alm & Nurwidayati Alamat : Jl.Simpang Tiga Cukangleu-Leus RT 03/RW 08 Desa Adimulya Kec. Wanareja Kab. Cilacap e-mail : [email protected] Pendidikan Formal : SD N 03 Adimulya SMP N 1 Wanareja SMK Farmasi YPIB Majenang Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah xi Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 DAFTAR ISI HALAMA JUDUL ..................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN .................................................................... ii HALAMAN PENEGSAHAN ..................................................................... iii HALAMAN PERNYATAAN .................................................................... iv ABSTRAK .................................................................................................. v ABSTRACT ................................................................................................ vi MOTTO ...................................................................................................... vii HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................................. viii PRAKATA .................................................................................................. ix RIWAYAT HIDUP ..................................................................................... xi DAFTAR ISI ............................................................................................... xii DAFTAR TABEL ....................................................................................... xiv DAFTAR GAMBAR .................................................................................. xv DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................... xvi BAB I PENDAHULUAN ........................................................................... 1 A. Latar Belakang ................................................................................ 1 B. Rumusan Masalah ........................................................................... 2 C. Tujuan Penelitian ............................................................................ 3 D. Manfaat Penelitian .......................................................................... 3 BAB II TINJAUAM PUSTAKA ................................................................ 4 A. Bronkhitis ........................................................................................ 4 1. Etiologi ...................................................................................... 4 2. Manifestasu Klinis .................................................................... 4 3. Patofisiologi .............................................................................. 5 4. Penatalaksanaan ........................................................................ 5 B. Antibiotik ........................................................................................ 6 1. Azitromisin................................................................................ 7 2. Sefikim ...................................................................................... 7 3. Siprofloksasin............................................................................ 8 xii Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 C. Resistensi ........................................................................................ 8 1. Non Generik .............................................................................. 9 2. Generik ...................................................................................... 9 D. Bakteri ............................................................................................. 10 1. Ukuran Bakteri ......................................................................... 11 2. Bentuk Bakteri ......................................................................... 11 E. Isolasi dan Identifikasi Bakteri ....................................................... 13 1. Pewarnaan sederhana ............................................................... 14 2. Pewarnaan diferensial .............................................................. 15 3. Pewarnaan Khusus ................................................................... 15 BAB III METODE PENELITIAN.............................................................. 16 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ...................................................... 16 B. Definisi Variabel Oprasional........................................................... 16 C. Waktu dan Tempat Penelitian ......................................................... 17 D. Alat dan Bahan ................................................................................ 17 E. Populasi dan Sampel ....................................................................... 17 F. Metode sampling ............................................................................. 18 G. Cara Penelitian ............................................................................... 18 1. Sterilisasi Alat dan Bahan ......................................................... 19 2. Pengambilan sampel.................................................................. 19 3. Isolasi Bakteri............................................................................ 19 4. Pembuatan Stok Kultur ............................................................. 20 5. Identifikasi Bakteri .................................................................... 21 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .................................................... 26 A. Isolasi Bakteri.................................................................................. 26 B. Pengambilan Sampel Penelitian ...................................................... 26 C. Uji Biokimia ................................................................................... 29 1. Uji Oksidase ............................................................................. 29 2. Uji Katalase .............................................................................. 30 3. Uji Fermentasi Karbohidrat ...................................................... 31 4. Uji Methyl red .......................................................................... 32 xiii Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 5. Uji Voges Proskauer ................................................................. 33 6. Uji Simmon’s Citrat ................................................................. 34 7. Uji Hidrolisis Gelatin ................................................................ 35 D. Uji Pewarnaan Gram ...................................................................... 37 E. Uji Resistensi Bakteri...................................................................... 39 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................... 46 A. Kesimpulan ..................................................................................... 46 B. Saran ................................................................................................ 46 DAFTAR PUSTAKA ................................................................................. 47 LAMPIRAN ................................................................................................ 51 xiv Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 DAFTAR TABEL Tabel 1. Diameter zona hambat resistensi bakteri menurut CLSI 2011 (Clinical and Laboratory Standards institute) .................... 24 Table 2. Hasil uji hemolisis agar darah manusia ...................................... 28 Tabel 3. Hasil uji biokimia pada isolate yang diduga Streptococcus aureus , Sthaphylococcus aureus , Klebsiella Pneunomia ........ 36 Tabel 4. Hasil pewarnaan gram isolate bakteri Sthaphylococcus aureus, Streptococcus pneunomia, Klebsiella pneumonia ........ 38 Tabel 5. Hasil pengukuran zona hambat control CMC Na Terhadap bakteri streptococcus pneunomia , sthapylococcus aureus , Klebsiella Pneunomia ................................................................ 40 Tabel 6. Hasil pengukuran zona hambat antibotik siprofloksasin terhadap bakteri Streptococcus pneumonia,Sthapylococcus aureus,Klebsiella Pneunomia ..................................................... 41 Tabel 7. Hasil pengukuran zona hambat antibotik sefiksim terhadap bakteri Streptococcus pneumonia,Sthapylococcus aureus,Klebsiella Pneunomia ..................................................... 42 Tabel 8. Hasil pengukuran zona hambat antibotik azitromisin terhadap bakteri Streptococcus pneumonia,Sthapylococcus aureus,Klebsiella Pneunomia ..................................................... 43 xv Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Kultur bakteri pertama pada agar darah (A). Kultur bakteri dengan medium agar darah setelah diisolasi kembali (B) ............................................................................ 27 Hasil uji oksidase (A) positif denagan terbentuknya warna hitam pada permukaan kertas saring setelah ditetesi reagen oksidase, (B) negatif tidak ada perubahan warna hitam di permukaan kertas saring setelah ditetesi reagen oksidase. ............................................ 30 Uji Katalase .Gambar C, D memberikan hasil positif karena terdapat gelembung . Gambar A,B memberikan hasil negatif karena tidak terdapat gelembung ..................... 31 Hasil uji fermentasi karbohidrat, seluruh isolat memberikan hasil positif yang ditandai dengan terbentuknya gelembung gas pada tabung durham ............... 32 Gambar 5. Uji methyl red gambar A, B, D manunjukkan hasil positif yang ditandai dengan terbentuknya warna merah dan pada gambar C menunjukkan hasil negatif karena tidak ada perubahan warna menjadi merah. ........................... 33 Gambar 2. Gambar 3. Gambar 4. Gambar 6. Uji Voges Proskauer . Gambar A,B,D menunjukkan hasil positif yang ditandai dengaan terbentuknya warna merah bata dan Gambar C menunjukkan hasil negative karena tidak ada perubahan warna menjadi merah bata ........ 34 Uji Simmon’s Citrat . Gambar C,D menunjukkan hasil positif yang ditandai dengan terbentuknya warna biru dan Gambar A,B menunjukkan hasil negatif karena tidak terjadi perubahan warna . ............................................ 35 Hasil uji hidrolisis gelatin . Gambar A menunjukkan hasil yang positif yang ditandai dengan medium tetap dalam keadaan cair dan Gambar B,C,D menunjukkan hasil negative karena medium tersebut membeku. ................ 36 Hasil pewarnaan gram pada isolate bakteri gambar (A) Klebsiella pneumonia, (B) Staphylococcus aureus, (C) Streptococcus pneumonia ...................................................... 38 Gambar 10. Hasil Uji resistensi antibiotik menggunakan control, ciprofloxacin, cefixime, azhitromicin .................................... 39 Gambar 7. Gambar 8. Gambar 9. xvi Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Rumus perhitungan pengambilan sampel ......................... 51 Lampiran 2. Hasil hemolisis agar darah manusia pasien ke 1-7............ 52 Lampiran 3. Hasil uji biokimia katalase ................................................ 54 Lampiran 4. Hasil uji biokimia oksidase ............................................... 56 Lampiran 5. Hasil uji biokimia fermentasi karbohidrat......................... 57 Lampiran 6. Hasil uji biokimia voges proskauer .................................. 58 Lampiran 7. Hasil uji biokimia methyl red ........................................... 59 Lampiran 8. Hasil uji biokimia simmon’s citrate .................................. 60 Lampiran 9. Hasil uji biokimia hidrolisis gelatin .................................. 61 Lampiran 10. Hasil uji biokimia pasien 1-7 Lampiran 11. Pola uji biokimia bakteri Klebsiella Pneunomia , Streptococcus pneumonia , Staphylococcus Aureus menurut Bergey’s Manual of Determinative 9th edition................................................................................ Lampiran 12. 63 Pewarnaan gram untuk isolat Klebsiella Pneunomia, Streptococcus pneumonia , Staphylococcus Aureus ......... 64 Lampiran 13. Perhitungan antibiotik Azritromicin ................................. 65 Lampiran 14. Perhitungan antibiotik cefixime ....................................... 67 Lampiran 15. Perhitungan antibiotik ciprofloxacin ................................ 69 Lampiran 16. Hasil uji sensitivitas antibiotik menggunakan Azitromicin, Ciprofloxacin, Cefixime ............................. 71 Hasil uji sensitivitas antibiotik menggunakan Azitromicin, Ciprofloxacin, Cefixime .............................. 72 Lampiran 18. Ethical Clearance ................................................................. 74 Lampiran 19. Surat rekomendasi penelitian dari Kesbangpol Kota Purwokerto ........................................................................ 75 Lampiran 20. Lembar Informasi dan Kesediaan Responden ...................... 76 Lampiran 17. xvii Identifikasi Dan Uji..., Meilinda Putri Sulistiyowati, Fakultas Farmasi UMP, 2017
