Halaman CANCER CHEMOPREVENTION RESEARCH CENTER FAKULTAS FARMASI UGM Dokumen nomor : CCRC-02-005-00 Mengganti nomor : - URAIAN DIBUAT OLEH Jabatan Paraf Nama Tanggal Tanggal : Tanggal : - Staf CCRC DIPERIKSA OLEH Staf CCRC DIPERIKSA OLEH Supervisor CCRC DISETUJUI OLEH Pimpinan CCRC Adam Hermawan Aditya Fitriasari Muthi’ Ikawati Edy Meiyanto PROSEDUR TETAP PENGGANTIAN MEDIA DAFTAR ISI HALAMAN DAFTAR ISI 1 A. RIWAYAT REVISI DOKUMEN 2 B. TUJUAN 2 C. PENDAHULUAN 2 D. OPERASIONAL 2 A. RIWAYAT REVISI DOKUMEN No Dokumen - Isi No Dokumen CCRC-02005-00 Isi Tanggal Dibuat oleh Diperiksa oleh Endah P Septi Staff CCRC Menggunakan format lama Belum ada penomoran dokumen Tanggal Dibuat oleh Adam Hermawan Staff CCRC Menggunakan format baru Sudah ada penomoran dokumen Diperiksa oleh Riris Istighfari J Supervisor CCRC Diperiksa oleh Aditya Fitriasari Staff CCRC Diperiksa oleh Muthi’ Ikawati Supervisor CCRC Disetujui oleh Edy Meiyanto Pimpinan CCRC Disetujui oleh Edy Meiyanto Pimpinan CCRC B. TUJUAN Mengatur standar kerja penggantian media kultur sel pada penelitian in vitro di laboratorium penelitian CCRC C. PENDAHULUAN Dalam pertumbuhannya, konsentrasi sel yang tinggi menyebabkan produksi asam laktat dan berkurangnya nutrisi untuk pertumbuhan sel. Guna mencapai kondisi sel yang pertumbuhannya optimum diperlukan penggantian media pertumbuhan. Dalam proses penggantian media perlu diperhatikan beberapa faktor agar tidak mengganggu pertumbuhan dan kelangsungan hidup sel. D. OPERASIONAL 1. PERSIAPAN No Prosedur Kerja Perhatian 1. Kenakan baju kerja lab in vitro Jas lab, masker dan gloves 2. Siapkan peralatan untuk penggantian media, berupa : • Pipet pasteur • Conical tube 3. Siapkan bahan untuk penggantian media, berupa : • PBS • Media Kultur (MK) (DMEM/RPMI) - 2. PENGGANTIAN MEDIA No 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Prosedur Kerja Perhatian Lakukan pekerjaan dengan seaseptis Aliquot PBS dan MK di dalam conical tube. mungkindi dalam LAF Hisap dan buang media lama secara perlahan • Lakukan dengan hati-hati • Lakukan pekerjaan dengan dengan pipet Pasteur. seaseptis mungkin Lakukan dengan hati-hati Tuang 3 ml PBS ke dalam dish, goyanggoyangkan dish ke kanan dan ke kiri untuk mencuci sel. Lakukan pekerjaan dengan seaseptis mungkin Tuang 7 ml MK ke dalam dish yang berisi sel. Amati keadaan sel sebelum dan setelah diganti media. Homogenkan. Jika perlu lakukan pendokumentasian dengan pemotretan Buang PBS dengan pipet Pasteur Amati kondisi dan jumlah sel secara kualitatif pada mikroskop inverted. Inkubasi semalam dan amati keadaan sel keesokan harinya. 3. SANITASI No Prosedur Kerja Perhatian 1. Lakukan sanitasi peralatan sesuai dengan Lihat SOP Persiapan kerja Lab In kondisi tiap-tiap peralatan Vitro Jika ada sesuatu dalam SOP ini tidak bisa dilakukan atau tidak sesuai dengan kenyataan dilapangan, segera laporkan kepada kepada Staff/Supervisor CCRC