TRANSLASI Sintesis Protein TRANSLASI Sintesis protein terjadi di ribosom dg 4 tahap utama : aktivasi, inisiasi, elongasi & terminasi Substansi2 yg terlibat antara lain : ribosom, tRNA, aminoacyl-tRNA-synthetase, mRNA, protein faktor, ion2 anorganik (Mg2+, K+, NH4+) & guanosin triphosphate (GTP) tRNA adalah RNA ss dg 75-85 nukleotida, bertanggungjawab dlm proses pengenalan kodon pada mRNA. AKTIVASI Asam amino bergabung dengan tRNA melalui gugus karboksil AA tsb dg gugus 3’OH tRNA melalui ikatan ester tRNA dikatakan bermuatan Proses aktivasi ini memerlukan energi yg didapat dr proses adenilasi menggunakan ATP Asam amino yang teradenilasi akan diikatkan pada ujung 3’ tRNA (biasanya berupa sekuen CCA) & membentuk aminoasil tRNA. PROSES ADENILASI - AKTIVASI STRUKTUR TRNA INISIASI Proses inisiasi melibatkan perakitan komponen translasi yaitu : 2 sub unit ribosom mRNA aminoasil tRNA pertama (the charged tRNA with the 1st amino acid) GTP sbg sumber energi faktor inisiasi (initiation factor = IF) yang membantu perakitan kompleks inisiasi INISIASI Ribosom terdiri atas 3 site : A site : utk masuknya aminoasil tRNA (kecuali aminoasil tRNA pertama yg berupa fmet-tRNA) P site : tempat peptidil tRNA dibentuk E site : exit site of the uncharged tRNA INISIASI Inisiasi translasi dimulai dengan asosiasi ribosom sub unit kecil & besar IF1 memblok site A (agar hanya fmet-tRNA dpt terikat pd P site & tdk ada aminoasil tRNA lain yg dpt terikat pd A site selama inisiasi) IF3 memblok E site IF2 terikat pd fmet-tRNA & membantu terikatnya tRNA pd ribosom sub unit kecil INITIATION FACTOR TRANSLASI 61 buah kodon dpt digunakan utk pbtk ikatan peptida & 3 kodon : UAA, UAG & UGA merupakan tanda STOP (tdk dpt utk mengkode pbtk asam amino & bfgs sbg tanda berhentinya pbtk rantai polipeptida) & kodon START adalah : AUG metionin! ELONGASI Aminoasil tRNA bergerak menuju ke bagian A dengan bantuan elongation factor (EF) Ikatan peptida terbentuk dengan asam amino sebelumnya yg ada di bagian P Peptida bergerak keluar kompleks ribosom melalui bagian E ELONGASI ELONGASI Stlh EF-Tu menempatkan aminoasil-tRNA pd site A, GTP akan terhidrolisis mjd GDP. GDP dari EF-Tu akan melepaskan diri dr ribosom faktor kedua EF-Ts berikatan dg EF-Tu dg melepas GDP. GTP baru masuk kedlm kompleks EF-Tu-EF-Ts dg melepas EF-Ts & mulailah kompleks EF-Tu-GTP mengambil aminoasil-tRNA baru utk proses elongasi. TERMINASI Secara normal, aminoasil tdk dpt terikat pd kodon UAA, UAG & UGA (kodon STOP) & sel tdk mempunyai tRNA dg antikodon yg komplementer dg 3 kodon stop tsb. Faktor lain selain kodon stop yg dpt menghentikan translasi adalah faktor protein (release factor) RF-1 dan RF-2. RF-1 dpt mengenal kodon UAA & UAG sedangkan RF-2 mengenal UAA & UGA. Ikatan antara RF dg kodon stop akan mengaktifkan peptidil transferase yg menghidrolisa ikatan antara polipeptida dg tRNA pd site P. Rantai polipeptida akan meninggalkan ribosom diikuti tRNA & ribosom akan mengalami disosiasi. MONOSISTRONIK & POLISISTRONIK Molekul mRNA eukariot tdr atas rangkaian2 nukleotida yg dpt ditranslasi & tdk dapat ditranslasi. Polipeptida plg banyak hanya tdr atas 500 asam amino yg dpt ditranslasi, dikenal sbg mRNA monosistronik krn hanya mampu mbtk tdk lbh dr 1 mcm polipeptida. Molekul mRNA prokariotik dpt mentranskripsi lebih dr 1 macam polipeptida, dsbt mRNA polisistronik. Contoh : mRNA polisistronik E. coli pbtk triptofan dg pjg 7000 rangkaian basa dpt mbtk 5 mcm enzim. TERIMA KASIH