DAYA HAMBAT EKSTRAK RIMPANG KUNYIT (Curcuma domestica
advertisement
DAYA HAMBAT EKSTRAK RIMPANG KUNYIT (Curcuma domestica Val.) TERAHADAP PERTUMBUHAN Staphylococcus aureus DAN Staphylococcus epidermidis SECARA In Vitro SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat menyelesaikan Pendidikan Diploma IV Kesehatan Program Studi Analis Kesehatan Diajukan Oleh : Abdullatif G1C215033 PROGRAM STUDI D IV ANALIS KESEHATAN FAKULTAS ILMU KEPERAWATAN DAN KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SEMARANG 2016 http://lib.unimus.ac.id http://lib.unimus.ac.id http://lib.unimus.ac.id DAYA HAMBAT EKSTRAK RIMPANG KUNYIT (Curcuma domestica Val.) TERAHADAP PERTUMBUHAN Staphylococcus aureus DAN Staphylococcus epidermidis SECARA In Vitro Abdullatif1, Stalis Norma Ethica2, Muhammad Evy Prastiyanto3 1. Program Studi D IV Analis Kesehatan Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang, 2. Laboratorium Kimia Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang, 3. Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang, ABSTRAK Kunyit merupakan tanaman yang memiliki banyak manfaat sebagai obat karena memiliki senyawa seperti kurkumin, minyak atsiri, flavonoid dan alkaloid yang berfungsi sebagai antioksidan, antikostrol, antitumor, antivirus dan antibakteri. Bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri yang dapat penyebab infeksi kulit, infeksi saluran pencernaan, infeksi saluran pernapasan. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengatahui daya hambat ektrak rimpang kunyit terhadap Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis. Metode ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini yaitu cara maserasi dengan variasi konsentrasi 5%, 10%, 25% dan 50% v/v dan cara infusum konsentrasi 25%, 50%, 75% dan 100% b/v. Hasil ekstraksi di uji yang digunakan yaitu disk diffution, sumuran, waktu kontak dan serat halus rimpang kunyit. Hasil penelitian menunjukan bahwa ekstrak kunyit tidak mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis pada semua variasi konsentrasi yang ditunjukan dengan tidak terbentuk zona bening disekitar paper disk. Kata Kunci : Kunyit, S.aureus, S.epidermidis, Daya hambat. http://lib.unimus.ac.id INHIBITION EXTRACT TURMERIC (Curcuma domestica Val) ON THE GROWTH AND Staphylococcus aureus AND Staphylococcus epidermidis In Vitro IN Abdullatif1, Stalis Norma Ethica2, Muhammad Evy Prastiyanto3 1. 2. 3. Study Program Analyst D IV Health Faculty of Nursing and Health University of Muhammadiyah Semarang, Laboratory of Chemistry, Faculty of Nursing and Health Sciences, University of Muhammadiyah Semarang, Laboratory of Microbiology, Faculty of Nursing and Health Sciences, University of Muhammadiyah Semarang, ABSTRACT Turmeric is a plants that has many benefits as a medicine because it has compounds such as curcumin, essential oils, flavonoids and alkaloids that act as antioxidants, antikostrol, antitumor, antiviral and antibacterial. Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis is a bacteria that can cause skin infections, gastrointestinal infections, respiratory tract infections. The aim of this research is to know the inhibitation turmeric extract against Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis. The extraction method used is maceration using varying concentrations of 5%, 10%, 25% and 50% v / v and the way infusum concentration of 25%, 50%, 75% and 100% w / v. Extraction results in the test were used that disk diffution, pitting, contact time and fine fiber turmeric. The results showed that the turmeric extract is not able to inhibit the growth of Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis on all variations of concentration shown by not formed a clear zone around the paper disk. Keywords: Turmeric, S.aureus, S.epidermidis, Inhibitation. http://lib.unimus.ac.id http://lib.unimus.ac.id KATA PENGANTAR Segala puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan segala rahmat, hidayah dan inayah-Nya, Sholawat dan salam kepada junjungan kita Baginda Rasulullah SAW beserta keluarga dan para sahabat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas akhir yang berjudul “Daya Hambat Ekstrak Rimpang Kunyit (Curcuma domestica Val.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis secara In Vitro”. Penyusunan skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk menyelesaikan pendidikan Diploma IV Analis Kesehatan di Universitas Muhammadiyah Semarang 2016. Penulis menyadari bahwa terelesaikannya tugas akhir ini tidak lepas dari bimbingan, dukungan dan bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu pada kesempatan ini, penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih kepada : 1. Dr. Stalis Norma Ethica, M.Si selaku pembimbing pertama yang telah memberikan bimbingan, motivasi, arahan serta dukungan dalam penyusunan skripsi ini. 2. Muhammad Evy Prastiyanto, M. Sc selaku pembimbing kedua yang juga telah bersedia meluangkan waktunya untuk membimbing penulis. 3. Dr.Sri Darmawati, M.Si selaku penguji utama yang telah memberikan inspirasi, arahan, saran dan kritikan yang membangun dalam penyusunan skripsi ini. 4. Dra. Sri Sinto Dewi, M.Si. Med selaku ketua program studi DIV Analis Kesehatan Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang. 5. Kedua Orangtua tercinta dan keluarga besar Yamin Jafar yang selalu mendukung secara moral, moril dan materi. 6. Yunia Sulistia Amd.Ak yang selalu memberikan semangat yang tiada hentinya 7. Diaman Amd.Ak dan Muslimah Syamsyudin Amd.Ak yang selalu ada dalam suka maupun duka selama hidup di Semarang. http://lib.unimus.ac.id 8. Sahabat seperjuangan program studi DIV Analis Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang yang telah berjuang bersam-sama dalam menyelesaikan pendidikan studi DIV Analis Kesehatan dan semua pihak yang telah membantu Penulis menyadari masih banyak ketidaksempurnaan dan kekurangan dalam penulisan tugas akhir ini. Kritik dan saran yang membangun. Semoga tugas akhir ini dapat bermanfaat bagi para pembaca. Semarang, September 2016 Penyusun http://lib.unimus.ac.id DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN ...................................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................ iii ABSTRAK ...................................................................................................... iv SURAT PERNYATAAN ORIGINALITAS ................................................ vi KATA PENGANTAR .................................................................................... vii DAFTAR ISI ................................................................................................... ix DAFTAR TABEL .......................................................................................... xi DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xii BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang ................................................................................................. 1 Rumusan Masalah ............................................................................................ 3 Tujuan Penelitian ............................................................................................. 3 Tujuan Umum .................................................................................................. 3 Tujuan Khusus ................................................................................................. 4 Manfaat Penelitian ........................................................................................... 4 Orisinalitas Penelitian ...................................................................................... 5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA Tinjauan Teoritis .............................................................................................. 7 Tinjauan Umum Kunyit ................................................................................... 7 Umum Umum Bakteri ...................................................................................... 15 Tinjauan Umum Bakteri S. Aureus ................................................................. 15 Tinjauan Umum Bakteri S. epidermidis .......................................................... 22 Penyakit Yang Disebabkan Staphylococcus .................................................... 26 Mekanisme Kerja Antibiotik ............................................................................ 28 Metode Pengujian Antibakteri ......................................................................... 30 Metode Ekstraksi .............................................................................................. 32 Kerangka Teori................................................................................................. 36 Kerangka Konsep ............................................................................................. 36 BAB III METODE PENELITIA Jenis Penelitian ................................................................................................. 37 Desain Penelitian .............................................................................................. 37 Variabel Penelitian ........................................................................................... 37 Rancangan Penelitian ....................................................................................... 38 Defenisi Operasional ........................................................................................ 38 Obyek Penelitian .............................................................................................. 39 Alat dan Bahan ................................................................................................. 39 Prosedur Penelitian........................................................................................... 39 Alur Penelitian ................................................................................................. 43 Tehnik Pengumpulan Dan Analisis Data ......................................................... 44 Tempat Dan Waktu Penelitian ......................................................................... 44 http://lib.unimus.ac.id BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Gambaran Umum Sampel ......................................................................... 45 4.2. Hasil Penelitian ......................................................................................... 46 4.3. Pembahasan ............................................................................................... 51 4.2. Pembahasan ............................................................................................... 35 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan ............................................................................................... 56 5.2. Saran .......................................................................................................... .......................................................................................................................... 56 DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN http://lib.unimus.ac.id DAFTAR TABEL Halaman Tabel 1.1 Orisinalitas Penelitian ........................................................................... 5 Tabel 2.1 Kandungan Kimia Kunyit ..................................................................... 10 Tabel 2.2 Sifat Minyak Ansiri............................................................................... 12 Tabel 2.3 Klasifikasi Zona Hambat ...................................................................... 31 Tabel 3.1 Definisi Operasional ............................................................................. 38 Tabel 4.1 Hasil Zona Hambat Ekstrak Metode Maserasi ..................................... 46 Tabel 4.2 Hasil Zona Hambat Ekstrak Metode Infusum ...................................... 47 Tabel 4.3 Hasil Zona Hambat Ekstrak Metode Infusum 24 jam .......................... 48 Tabel 4.4 Hasil Zona Hambat Ekstrak Metode Infusum Spread plate ................. 48 Tabel 4.5 Hasil Zona Hambat Serat Kunyit .......................................................... 49 Tabel 4.6 Hasil Uji Kontrol Positif (Ampisilin) ................................................... 50 Tabel 4.7 Hasil Uji Kontrol Positif (kloramfenikol) ............................................. 50 http://lib.unimus.ac.id DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Struktur Pigmen Kunyit ............................................................... 11 Gambar 2.2 Kerangka Teori ............................................................................. 36 Gambar 2.3 Kerangka Konsep ......................................................................... 36 Gambar 3.1 Alur Penelitian.............................................................................. 43 http://lib.unimus.ac.id BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Penyakit infeksi merupakan salah satu permasalahan kesehatan yang sering terjadi di masyarakat yang tidak pernah dapat diatasi secara tuntas dan menjadi penyebab utama penyakit di daerah tropis seperti di Indonesia. Penyakit infeksi dapat ditularkan dari satu orang ke orang lain atau dari hewan ke manusia dan disebabkan oleh suatu mikroorganisme seperti virus, parasit, jamur dan bakteri (Jawetz, dkk. 2005). Penyakit karena bakteri yang sering terjadi di lingkungan sekitar yaitu infeksi kulit salah satunya, jerawat, bisul, dll yang umumnya ditemukan pada orang dengan sanitasi yang buruk. Staphylococcus epidermidis merupakan salah satu spesies bakteri jenis Staphylococcus yang secara alami umumnya hidup dikulit dan membran mukosa yang dapat menimbulkan peradangan (abses atau nanah) seperti jerawat, infeksi kulit, infeksi saluran kemih, dan infeksi ginjal (Radji, 2011). Selain bakteri Staphylococcus epidermidis yang menyebabkan penyakit infeksi kulit, Staphylococcus aureus juga merupakan bakteri Gram-positif, bersifat koagulase positif yang membedakan dengan spesies lain dan sering di temukan sebagai bakteri mikroflora normal pada kulit. Apabila bakteri ini masuk ke dalam tubuh, akan dapat menyebabkan pneumonia, meningitis, endokarditis, dan infeksi kulit (Jawetz, dkk. 2005). Banyak tanaman obat yang digunakan oleh masyarakat sebagai obat infeksi kulit yaitu kunyit. tanaman kunyit mempunyai efek antibakteri, selain itu juga mempunyai efek sebagai antiradang, dan antioksidan (Tjay dan Rahardja, 2002) http://lib.unimus.ac.id Bagian yang berperan dan banyak digunakan untuk obat dari kunyit yaitu rimpangnya. Rimpang kunyit digunakan secara tradisional untuk penambah napsu makan, obat luka, gatal-gatal, antiradang, sesak napas, antidiare, dan merangsang keluarnya angin dari perut. Sebagai obat luar, kunyit digunakan sebagai lulur kecantikan dan kosmetik. Secara umum rimpang kunyit digunakan untuk stimulansia, pemberi warna masakan dan minuman serta digunakan sebagai bumbu dapur (Sudarsono dkk, 1996). Kandungan utama rimpang kunyit yaitu kurkumin dan minyak atsiri yang berfungsi sebagai antioksidan, antikolestrol, antitumor, anti HIV dan antibakteri (Hargono, 2000). Beberapa grub senyawa kimia utama yang bersifat antimikroba antara lain fenol dan senyawa turunannya terbukti sebagai antibakteri dengan cara merusak dindang sel yang mengakibatkan lisis atau menghambat pembentukan komponen dinding sel pada sel yang sedang tumbuh, mengubah permeabilitas membran sitoplasma sehingga menyebabkan kebocoran nutrisi dari dalam sel, denaturasi protein sel, dan menghambat kerja enzim di dalam sel (Pelczar dan Reid, 1972). Selain itu senyawa antibakteri dalam kunyit yaitu flavonid dan alkaloid. Menurut Heinrich, (2009) senyawa flavonoid mampu merusak dinding sel sehingga menyebabkan kematian sel. Sundari et al., (1996) menyatakan bahwa flavonoid dapat menghambat pembentukan protein sehingga menghambat pertumbuhan mikroba. Selain flavonoid kandungan senyawa lain seperti senyawa tanin juga dapat merusak membran sel. Cowan (1999) menyatakan bahwa senyawa tanin dapat merusak pembentukan konidia jamur. Kandungan senyawa lain seperti http://lib.unimus.ac.id alkaloid dalam kunyit mampu mendenaturasi protein sehingga merusak aktivitas enzim dan menyebabkan kematian sel (Robinson, 1991). Hasil penelitian yang dilakukan oleh Hidayati (2002) secara in vitro membuktikan bahwa senyawa aktif dalam rimpang kunyit mampu menghambat pertumbuhan jamur, virus dan bakteri. Berdasarkan uraian tersebut, perlu dilakukan penelitian mengenai uji ektrak rimpang kunyit (Curcuma domestica Val.) terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis untuk menguji potensi ekstrak kunyit sebagai zat antibakteri alternatif yang alami. 1.2 Rumusan Masalah Berdasarkan latar belakang di atas, peneliti merumuskan masalah: “Bagaimana daya hambat ekstrak rimpang kunyit terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis?” 1.3 Tujuan Penelitian 1.3.1 Tujuan Umum Tujuan umum penelitian ini adalah untuk mengatahui daya hambat ektrak rimpang kunyit terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis. 1.3.2 Tujuan Khusus Tujuan khusus penelitian ini adalah untuk mengukur daya hambat ektrak rimpang kunyit pada berbagai konsentrasi terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis. http://lib.unimus.ac.id 1.4 Manfaat Penelitian 1.4.1 Manfaat bagi Ilmu Pengetahuan Penelitian ini diharapkan dapat menambah ragam penelitian di bidang Mikrobiologi. 1.4.2 Manfaat bagi Instansi Penelitian ini diharapkan dapat memberi tambahan informasi tentang mafaat rimpang kunyit dan tentang bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis, baik pada tingkat teoritis maupun pada tingkat praktik. 1.4.3 Manfaat bagi Tenaga laboratorium Hasil penelitian diharapkan dapat menjadi informasi tambahan atau menjadi referensi tambahan dalam proses penyempurnaan dan peningkatan profesionalisme kerja analis dalam bidang bakteriologi dan kimia. 1.4.4 Manfaat bagi Peneliti Penelitian ini diharapkan dapat memperluas wawasan pengetahuan peneliti dalam dunia bakteritologi dan kimia yang kemudian diterapkan dalam dunia http://lib.unimus.ac.id 1.5 Orisinalitas Penelitian Orisinalitas penelitian ini ditunjukkan pada Tabel 1.1 Tabel 1.1 Orisinalitas Penelitian No Judul Penelitian Nama Peneliti/ Tahun Metode Penelitian Hasil Penelitian 1. Daya Antibakteri Ekstrak Buah Mahkota Dewa Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus Nugroho Tristyanto, 2011 Jenis penelitian ini adalah penelitian ekperimen laboratorium bahwa ekstrak buah Mahkota dewa mempunyai daya hambat terhadap bakteri Staphylococcus aureus yaitu pada konsentrasi terendah 90% 2. Uji Efektivitas Ekstrak Kunyit Sebagai Antibakteri Terhadap Pertumbuhan Bakteri Bacillus Sp Dan Shigella Dysentriae Secara In Vitro Cut Marnaini, 2013 Penelitian ini merupakan penelitian ekperimental Laboratorik metode disc diffusion menunjukkan ekstrak kunyit mampu menghambat pertumbuhan bakteri Bacillus sp dan Shigella dysentriae. 3. Aktifitas antibakteri Ekstrak Etanol daun belimbing Wulung (Averrhoa Bilimbi L) Terhadap Staphylococcus aereus dan Staphylococcus epidermidis Siti Nur, 2012 Penelitian ini merupakan penelitian ekperimental Laboratorik. ekstrak etanol daun belimbing wuluh mempunyai aktivitas antibakteri terhadap S. aureus zona hambat sebesar 9,2 mm, 10,3 mm, dan 11,3 mm. Sedangkan S. epidermidis zona hambat sebesar 7,6 mm, 8,5 mm, dan 10,2 mm. Sehingga S. aureus lebih rentan terhadap ekstrak etanol daun belimbing wuluh. Berdasarkan Tabel 1.1, perbedaan antara penelitian pertama dengan penelitian yang akan dilakukan yaitu pada bahan ekstrak. Penelitian pertama menggunakan ekstrak buah mahkota dewa terhadap bakteri Staphylococcus aureus, sedangkan penelitian ini menggunakan ekstrak rimpang kunyit terhadap Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis. Perbadaan antara penelitian kedua dengan penelitian ini yaitu pada objek penelitian, penelitian kedua mengunakan bakteri Bacillus sp dan Shigella Dysentria, sedangkan penelitian ini mengunakan bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis, dan http://lib.unimus.ac.id perbadaan antara penelitian ketiga dengan penelitian ini yaitu penelitian ketiga mengunakan ektrak belimbing wulu terhadap Staphylococcusa ureus dan Staphylococcus epidermidis sedangkan penelitian ini mengunakan ektrak rimpang kunyit terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis. http://lib.unimus.ac.id BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Tinjauan Teoritis 2.1.1 Tinjauan Umum Kunyit 2.1.1.1 Definisi Kunyit Kunyit (Curcuma domestica Val.) adalah tanaman yang berasal dari Asia. Kunyit merupakan tumbuhan daerah subtropis sampai tropis dan tumbuh subur di dataran rendah lebih kurang 90 meter sampai 2000 meter di atas permukaan laut (Rukmana dan Rahmat, 1994) Berdasarkan klasifikasi botani, tanaman kunyit diklasifikasikan dalam (Thomas, 2006): Kingdom : Plantae Divisi : Spermatophyte Sub Divisi : Angiospermae Kelas : Monocotyledonae Ordo : Zingiberales Fimili : Zingiberaceae Genus : Curcuma Spesies : Curcums Domestica Valet 2.1.1.2 Nama Daerah Nama kunyit di berbagai daerah antara lain: Hunik (Batak), kunyir (Lampung), temu kuning, kunir (Jawa), koneng (Sunda), konyet, temu koneng (Madura), kunidi (Sulawesi Utara), kuminu (Ambon), dan rame (Irian). (Muhlisah, 2001). http://lib.unimus.ac.id 2.1.1.3 Morfologi Tanaman Tanaman kunyit tumbuh berumpun dengan tinggi 40-100 cm dengan ciri-ciri sebagai berikut: a) Batang merupakan batang semu, tegak berbentuk bulat, tersusun dari pelepah daun. b) Daun tunggal, bentuk bulat telur memanjang hingga 10-40 cm, lebar 8-12,5 cm dan pertulangan menyirip dengan warna hijau pucat. Ujung dan pangkal daun runcing tepi daun rata. c) Bunga majemuk berambut dan bersisik panjang 10-15 cm dengan mahkota panjang sekitar 3 cm dan lebar 1,5 cm, berwarna putih/kekuningan. d) Kulit luar rimpang berwarna jingga kecoklatan, daging buah merah jingga kekuning-kuningan (Hapsoh dan Rahmawati, 2008). Rimpang atau akar tinggal tanaman kunyit berbentuk bulat memanjang dan memiliki akar serabut. Rimpang kunyit memiliki dua bagian tanaman yaitu rimpang induk (umbi utama empu) dan tunas atau rimpang cabang. Rimpang utama ini biasanya ditumbuhi tunas-tunas yang tumbuh kearah samping. Jumlah tunas umumnya banyak, tumbuh mendatar atau melengkung, serta berbuku-buku pendek, lurus atau melengkung. Kulit rimpang berwarna jingga kecoklatan. Warna daging jingga kekuningan dengan bau khas dan rasanya agak pahit. Rimpang cabang akan berkembang secara terus-menerus membentuk cabang-cabang baru dan batang semu sehingga pada akhirnya terbentuk rumpun (Nugroho, 1997). http://lib.unimus.ac.id 2.1.1.4 Ekologi dan Penyebaran Tanaman kunyit tumbuh dan ditanam di Asia Selatan, Cina Selatan, Taiwan, Indonesia, dan Filipina. Tanaman kunyit tumbuh dengan baik ditanah yang baik tata pengairannya, curah hujan yang cukup banyak dan ditempat yang sedikit kenaungan, tetapi untuk menghasilkan rimpang yang lebih besar dan baik ditanam di tempat yang terbuka (Prawiro, 1977). 2.1.1.5 Sifat Rimpang kunyit mempunyai bau khas aromatik, rasa agak pahit, agak pedas dan dapat bertindak sebagai astringensia (Prawiro, 1977). Astringensia merupakan zat yang bekerja lokal yaitu dengan mengkoagulasi protein tetapi demikian kecil daya penetrasinya sehingga hanya permukaan sel yang dipengaruhi. Akibat dari aksi tersebut permeabilitas membran mukosa yang kontak dengan astringen menurun sehingga kepekaan bagian tersebut menurun pula (Santoso, 1993). 2.1.1.6 Kandungan Rimpang Kunyit Kandungan kimia pada rimpang kunyit berbeda-beda, tergantung daerah pertumbuhan serta kondisi pra panen dan pasca panen (Purseglove et al., 1981). Rimpang kunyit yang tua biasanya mengandung pati, protein, selulosa, beberapa mineral, kurkuminoid, dan minyak atsiri. Komponen yang paling banyak pada kunyit adalah pati yang berkisar 40-50% (Purseglove et al., 1981). Tabel 2 menunjukkan kandungan kimia rimpang kunyit, kunyit kering, dan bubuk kunyit per 100 gram bahan yang dapat dimakan. http://lib.unimus.ac.id Tabel 2.1 Kandungan kimia rimpang kunyit, kunyit kering, dan bubuk kunyit per 100 gram bahan yang dapat dimakan Tabel 2.1 Kandungan kimia kunyit Sumber : Farrell (1990) a , Shankaracharya dan Natarajan (1977). Faktor-faktor yang menentukan mutu kunyit adalah kandungan pigmennya (kurkumin), nilai organoleptik dan penampakan umum, ukuran, dan bentuk fisik rimpangnya. Mutu tersebut dipengaruhi oleh faktor intrinsik kultivar yang ditanam, umur rimpang waktu dipanen, penanganan, pengolahan dan teknik sortasinya (Purseglove et al., 1981). Kurkuminoid dan minyak atsiri merupakan komponen utama yang menentukan mutu kunyit. a) Kurkuminoid Kurkuminoid adalah senyawa yang berpartisipasi dalam pembentukan warna pada kunyit. Menurut Srinivasan (1953), kurkuminoid merupakan campuran analog antara kurkumin, desmetoksi kurkumin, dan bis-desmetoksi kurkumin pada kunyit, http://lib.unimus.ac.id dimana kurkumin merupakan komponen yang paling dominan. Gambar 2.2 menunjukkan struktur komponen kurkuminoid pada kunyit. Gambar 2.1 strukyur pigmen kurkuniod (Purseglove, 1981) Kurkumin merupakan senyawa berbentuk kristal bubuk dan berwarna kuning. Nama trivial kurkumin adalah 1.7 bis-(hidroksi-3-metoksi-fenil)-1.6-heptadiena-3.5 dione, atau di (4hidroksi-3-metoksi sinamoil) metana. Kurkumin memiliki rumus dan bobot molekul masing-masing adalah C21H20O6 dan 368.37. Titik lebur kurkumin berkisar 183 ºC. Kurkumin tidak larut dalam air dan eter, tetapi larut dalam etanol dan asam asetat glasial. Jacob (1944) menyatakan bahwa kurkumin sedikit larut dalam air panas. Kurkumin tidak stabil terhadap cahaya dan kondisi alkali, tetapi tahan terhadap perlakuan panas. Menurut Krisnamurthy et al. (1976), kunyit mengandung 2.5-6% pigmen kurkumin. Sedangkan berdasarkan penelitian Jusuf (1980), diperoleh gambaran bahwa kandungan kurkumin kunyit dari Jawa adalah 0.63-0.76% (w/w) dengan menggunakan analisa spektrofotometri terhadap ekstrak kasar kunyit. Fungsi lain dari kurkumin adalah sebagai antioksidan, anti inflamasi, efek pencegah kanker serta menurunkan risiko serangan jantung. Pada penelitian yang dilakukan oleh Chipault et al. (1955), kunyit mempunyai indeks antioksidan sebesar 15.9 (ulangan I) dan 29.6 (ulangan II) yang diuji dengan teknik http://lib.unimus.ac.id absorbsi oksigen. Sedangkan Cort (1974) yang dikutip Farrell (1990) menyatakan bahwa indeks antioksidan pada kunyit sebesar 5.0. b) Minyak atsirih Selain kurkumin, kunyit juga mengandung minyak atsiri yang menentukan aroma dan cita rasa kunyit. Dalam perdagangan Internasional, minyak ini dikenal sebagai turmeric oil atau turmerol (Purseglove, 1981). Minyak atsiri diperoleh dengan cara ekstraksi atau penyulingan. Minyak atsiri mempunyai beberapa sifat yang disajikan pada Tabel 2.2 Tabel 2.2. Sifat-sifat minyak atsiri kunyit Sumber :Krisnamurthy et al. (1976) Guenther (1952) menyatakan bahwa pada destilasi rimpang kunyit kering dihasilkan 1.3-5.5% minyak atsiri dengan bau aromatis dan berwarna jingga kemerahan. Sedangkan Krisnamurthy et al. (1976) melaporkan bahwa kandungan minyak atsiri rimpang kunyit bervariasi antara 2.5-7.5%, tergantung pada varietas kunyit dan tempat tumbuhnya. Kandungan lengkap dari minyak atsiri, yaitu (1) monoterpen yang terdiri dari p-simen, 1:8-sineol, α-feladren, sabinen, borneol dan (2) sesquiterpen yang terdiri dari turmeron, ar-turmeron, zingiberen, αatlanton, γ-atlanton, dan β-sesquifeladren (Purseglove et al., 1981). Kedua komponen di atas terdapat dalam empat bentuk yaitu monoterpen hidrokarbon, monoterpen http://lib.unimus.ac.id teroksigenasi, sesquiterpen hidrokarbon, dan sesquiterpen teroksigenasi. Komponen yang paling dominan adalah sesquiterpen teroksigenasi. Komponen utama dari minyak atsiri ini adalah turmerol yaitu suatu alkohol dengan rumus molekul C13H18O atau C14H10O (Purseglove et al., 1981). Turmerol merupakan sesquiterpen teroksigenasi yang terdiri dari turmeron dan ar-turmeron. 2.1.1.7 Kegunaan Kunyit Diantara semua genus Curcuma, kunyit merupakan jenis yang paling banyak kegunaannya. Menurut Rukmana (1995), manfaat kunyit antara lain : sebagai bahan bumbu dalam berbagai masakan, bahan pembuat ramuan untuk mengobati berbagai jenis penyakit pada manusia, bahan baku industri jamu dan kosmetika, bahan penunjang industri teknik dan kerajinan, mencegah serangan penyakit pada hewan contohnya penyakit pencernaan ayam, dan desinfektan untuk mengawetkan benih yang disimpan. Sedangkan menurut Sastroamidjojo (1988), kunyit mempunyai khasiat sebagai penghilang gatal, antipasmodikum, obat gingivatis (radang gusi), obat radang selaput mata, obat sesak nafas obat sakit perut, astrigentia, dan analgetika. Kunyit dapat digunakan sebagai obat dalam maupun luar. Kunyit sebagai obat luar berfungsi untuk mengobati eksim, bengkak dan rematik, bengkak karena digigit serangga atau gatal-gatal karena ulat bulu, dan memperlancar air susu ibu. Sedangkan sebagai obat dalam, kunyit digunakan untuk mengobati berbagai gangguan kesehatan, seperti panas dalam, demam, diare, gusi bengkak, kencing manis. kencing batu, hepatitis dan untuk membersihkan rahim baik pada wanita yang baru melahirkan maupun setelah mendapat haid (Sinaga, 2006). http://lib.unimus.ac.id 2.1.1.8 Sifat Antimikroba Kunyit Zat antimikroba adalah senyawa biologis atau kimia yang dapat menghambat pertumbuhan dan aktifitas mikroba (Pelczar dan Reid, 1972). Pada kunyit, senyawa yang memiliki aktifitas antimikroba adalah kurkumin. Pada penelitian Ramprasad dan Sirsi (1956) menunjukkan bahwa, kurkumin mempunyai sifat antibakteri, terutama terhadap Micrococcus pyrogenes var. aureus. Kurkumin dalam bentuk natrium kurkuminat, bersifat bakteristatik terhadap Micrococcus pyrogenes var. aureus dengan dosis 1 ppm. Hal ini karena kurkumin merupakan senyawa fenolik yang mekanisme kerjanya mirip dengan senyawa fenolik lainnya yang berfungsi sebagai antimikroba. Fenol dan senyawa turunannya telah terbukti mempunyai sifat bakteristatik dan bakterisidal sehingga sering digunakan sebagai desinfektan. Senyawa fenol berfungsi sebagai antimikroba dengan cara mendenaturasi protein sel dan merusak membran sel. Senyawa fenol bersifat aktif terhadap sel vegetatif bakteri, tetapi tidak terhadap spora bakteri. Keaktifannya menurun dengan adanya pengenceran dan reaksi dengan senyawa organik lain. Senyawa fenol sangat aktif pada pH asam (Hugo dan Russel, 1981). Kurkumin juga diduga memiliki struktur yang mirip dengan senyawa nordihidroguaiaretik (NDGA) yang mempunyai sifat antibakteri yang kuat. Shih dan Harris (1977) melaporkan bahwa NDGA pada konsentrasi 1000 ppm mempunyai pengaruh letalitas yang kuat terhadap E. coli, dan pada 50 ppm sangat menghambat pertumbuhan S. aureus. Menurut Fardiaz et al. (1988), kunyit bersifat http://lib.unimus.ac.id menghambat bakteri Gram positif berbentuk batang karena kandungan kurkuminnya. Kunyit memiliki sifat antimikroba dalam bentuk ekstrak maupun bubuk. Menurut Huhtanen (1980), bahwa ekstrak kunyit dalam etanol dapat menghambat Clostridium botulinum dengan Minimum Inhibitory Concentrations (MIC) sebesar 500 μg/ml. Pada penelitian Suwanto (1983) ditunjukkan bahwa pada konsentrasi sebesar 2 g/l, bubuk kunyit bersifat bakterisidal terhadap bakteri Gram positif batang, yaitu Bacillus subtilis dan Lactobacillus acidophilus. Lukman (1984) pada penelitiannya menyimpulkan bahwa bubuk kunyit utuh bersifat bakterisidal terhadap semua bakteri batang gram positif yaitu Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis, dan Bacillus megaterium dengan waktu kontak 0.5 jam. Bubuk kunyit residu dietil eter dan etanol juga bersifat bakterisidal pada waktu kontak yang cukup lama yaitu 168 jam. 2.1.2 Tinjauan Umum Bakteri 2.1.2.1 Bakteri Staphylococcus aureus a) Definisi Umum (Brooks, G. dkk, 1996) Staphylococcus berasal dari perkataan staphyle yang berarti kelompok buah anggur dan kokus yang berarti benih bulat. Kuman ini sering ditemukan sebagai kuman flora normal pada kulit dan selaput lendir pada manusia. Dapat menjadi penyebab infeksi baik pada manusia maupun hewan. Bakteri ini mudah tumbuh pada berbagai pembenihan dan mempunyai metabolisme aktif, meragikan karbohidrat, serta menghasilkan pigmen yang bervariasi dari putih sampai kuning tua. Beberapa diantaranya tergolong flora normal pada kulit dan selaput mukosa http://lib.unimus.ac.id manusia, golongan lainnya menyebabkan pernanahan, abses berbagai infeksi piogen, dan bahkan septicemia yang fatal. Staphylococcus cepat menjadi resisten terhadap banyak zat antimikroba sehingga menimbulkan masalah pengobatan yang sulit. Genus Staphylococcus terdiri dari sekurangnya 30 spesies. Tiga spesies utama yang penting secara klinik adalah Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermis, Staphylococcus saprophyticus. Staphylococcus aureus (S. aureus) merupakan bentuk koagulasi positif, hal ini membedakannya dengan spesies lain. S. aureus merupakan pathogen utama bagi manusia. Hampir setiap orang akan mengalami beberapa tipe infeksi S. aureus sepanjang hidupnya, bervariasi dalam beratnya mulai dari keracunan makanan atau infeksi kulit ringan, sampai infeksi berat yang mengancam jiwa. Bakteri S. aureus adalah bakteri Gram positif yang menghasilkan pigmen kuning, bersifat aerob fakultatif, tidak menghasilkan spora dan tidak motil, umumnya tumbuh berpasangan maupun berkelompok, dengan diameter sekitar 0,81,0. S. aureus tumbuh dengan optimum pada suhu 37 C dengan waktu pembelahan 0,47 jam. Infeksi serius akan terjadi ketika resistensi inang melemah karena adanya perubahan hormon, adanya penyakit, luka, atau perlakuan menggunakan steroid atau obat lain yang mempengaruhi imunitas shingga terjadi pelemahan inang. Infeksi S. aureus diasosiasikan dengan beberapa kondisi patologi, diantaranya bisul, jerawat, pneumonia, meningitis, dan arthritis. Sebagian besar penyakit yang disebabkan oleh bakteri ini memproduksi nanah, oleh karena itu bakteri ini disebut piogenik. S. aureus juga menghasilkan katalase, yaitu enzim yang mengkonversi http://lib.unimus.ac.id H2O2 menjadi H2O dan O2, dan koagulase, enzim yang menyebakan fibrin berkoagulasi dan menggumpal. Koagulase diasosiasikan dengan patogenitas karena menggumpalan fibrin yang disebabkan oleh enzim terakumulasi disekitar bakteri sehingga agen pelindung inang kesulitan mencapai bakteri dan fagositosis terhambat. b) Morfologi dan Klasifikasi (Syahrurachman A., dkk, 1994; Rosenbach,1884) Bakteri ini berbentuk sferis, bila berkumpul dalam susunan yang tidak teratur mungkin sisinya agak rata karena tertekan. Diameter kuman antara 0,8-1,0 mikron. Pada sediaan langsung yang berasal dari nanah dapat terlihat sendiri, berpasangan, berkumpul dan bahkan tersusun seperti rantai pendek. Susunan gerombolan yang tidak teratur biasanya ditemukan pada sediaan yang dibuat dari pembenihan padat, sedangkan dari pembenihan kaldu biasa ditemukan tersendiri atau tersusun sebagai rantai pendek Staphylococcus tidak bergerak dan tidak berspora. Akibat pengaruh beberapa zat kimia, misalnya penicillin, Staphylococcus bisa kehilangna dinding selnya yang keras dan berubah menjadi bentuk L (protoplas). Protoplas ini bisa berubah kembali menjadi Staphylococcus yang berdinding keras jika pengaruh bahan kimia yang bersangkutan dihilangkan dari lingkungan untuk beberapa waktu. Staphylococcus tidak dipengaruhi oleh garam empedu dan optochin. Sifat biakan Staphylococcus : Staphylococcus mudah tumbuh pada kebanyakan pembenihan bakteri pada keadaan aerobik atau microaerofilik. Bakteri ini tumbuh paling cepat pada suhu 37C, tetapi membentuk pigmen paling baik pada suhu kamar http://lib.unimus.ac.id (20-25 C). Pada lempeng agar koloni Staphylococcus terbentuk bulat, licin, cembung, dan mengkilat. Koloni Staphylococcus berwarna abu-abu sampai kuning tua keemasan. Pigmen dari Staphylococcus tidak terbentuk pada keadaan anaerob atau bila tumbuh pada medium cair Sifat pertumbuhan : S. aureus menghasilkan katalase, yang membedakannya dengan Strepcoccus. Bakteri ini meragikan banyak karbohidrat dengan lambat, menghasilkan asam laktat, tetapi tidak menghasikan gas. Menurut Rosenbach (1884) klasifikasi Staphylococcus aureus adalah sebagai berikut: Domain : Bacteria Kerajaan : Eubacteria Filum : Firmicutes Kelas : Bacilli Ordo : Bacillales Famili : Staphylococcaceae Genus : Staphylococcus Spesies : Staphylococcus aureus c) Struktur Antigen Staphylococcus aureus (Brooks, G. dkk, 1996). S. aureus mengandung polisakarida dan protein yang bersifat antigen yang merupakan substansi penting di dalam struktur dinding sel. Peptodoglikan, suatu polimer polisakarida yang mengandung subunit-subunit yang terangkai, merupakan eksoskeleton yang kaku pada dinding sel. Peptodoglikan dihancurkan oleh asam kuat atau lizozim. Hal ini penting dalam phatogenesis infeksi. Zat ini menyebabkan monosit membuat interleukin-1 (pirogen-endogen) dan antibody opsonik, dan zat http://lib.unimus.ac.id ini juga dapat menjadi zat kimia penarik (kemoaktraktan) untuk leukosit polimorfonuklir, mempunyai aktifitas mirip dengan endotoksin, menghasilkan fenomena Shwartzman local, dan mengaktifkan komplemen. Asam tekoat yang merupakan polimer gliserol atau ribitol fosfat, berkaitan dengan peptodoglikan dan menjadi bersifat antigenic. Antibodi antiteikoat, yang dapat diteksi dengan difusi gel, dapat ditemukan pada penderita endokarditis aktif yang disebabkan S. aureus. Protein A merupakan komponen dinding sel kebanyakan strain S. aureus yang terikat pada bagian Fc molekul IgG, kecuali IgG3. Bagian Fab pada IgC yang terikat pada protein A bebas untuk berkaitan dengan molekul IgG yang diarahkan terhadap antigen bakteri tententu akan mengaglutinasi bakteri yang mempunyai antigen itu (koaglutinasi). Beberapa strain S.aureus mempunyai sampai yang dapat menghambat fagositosis oleh leukosit polimorfonuklir, kecuali kalau ada antibody spesifik. Kebanyakan strain S.aureus mempunyai koagulase atau faktor penggumpal, pada permukaan dinding sel, koagulase terikat secara non enzimatik dengan fibrinogen, sehingga bakteri beragregasi. d) Faktor-faktor Pathogen Staphylococcus aureus Mekanisme dari S.aureus dalam menyebabkan penyakit merupakan multifaktor, melibatkan toksin, enzim, dan komponen seluler. Patogenitasnya merupakan efek gabungan dari berbagai macam metabolit yang dihasilkannya. Kuman phatogen (S. aureus) bersifat invasive, penyebab hemolisis, membentuk http://lib.unimus.ac.id koagulase, mencairkan gelatin, membentuk pigmen kuning emas dan menfermentasi manitol (Syahrurachman A., dkk, 1994). Faktor-faktor itu antara lain : 1) Enterotoxin A, B, C, D, E dan H menyebabkan gejala gastrointestinal akut yang dihubungkan dengan racun pada makanan. Enterotoksin resisten pada enzim dalam traktus gastrointestinal. 2) Toxic shock syndrome (TSS) memberikan banyak sifat biologis bersama dengan enterotoxin yang bertanggung jawab dalam pembentukan supraantigen keduanya hanya dapat menstimulasisebanyak 105 dari sel T pada manusia. Ketika antigen normal hanya dapat menstimulasi sekitar 1/1.000.000 sel T. intensitas respon imun ini mengakibatkan produksi interleukin-1 dan 2, faktor nekrosis tumor dan interferon. TSS adalah gen yang berperan dalam memproduksi syndrome toxic shock. 3) Alpha toxin merupakan eksotoksin yang letal pada banyak sel dalam konsentrasi yang rendah. Alpha toxin menghemolisis sel darah merah, menghancurkan platelet dan menyebabkan nekrosis pada kulit. 4) Leukocidin letal pada neutrophils melalui penghancuran membrane sedikit demi sedikit. 5) Koagulase merubah fibrinogen menjadi fibrin. Dalam proses ini koagulase melindungi Staphylococcus dari mekanisme pertahanan tubuh dan antibiotik. Selain itu, koagulase positif Staphylococcus tumbuh dengan baik pada serum normal manusia. Sementara koagulase negative Staphylococcus tidak. http://lib.unimus.ac.id 6) Protein A mengikat setengah Fe dari IgG 1 dan 2 dan menghalangi opsonisasi dari mediasi antibody. 7) Kapsul. Mayoritas dari Staphylococcus aureus diidolasi dari specimen klinis yang dimiliki kapsul polisakarida yang dapat berinterferensi yang mudah bercampur dengan fagositosis. 8) Exfoliatin atau epidermiolitik toxin merupakan agen yang bertanggung jawab untuk memproduksi Staphylococcal scalded skin syndrome (Ritter’s disease) pada jaringan baru untuk toxin epidermal necrolysis pada orang tua. Toxin ini merupakan enzim proteolitik yang memisahkan epidermis pada lapisan glanuler. Pasien sering demam dankadang-kadang memiliki penurunan mukopurulen mata. Diagnose ini harus dilakukan dengan hatihati, karena sindrom kulit tersiram air panas mungkin keliru untuk eritema multiforme atau nekrolisis epidermal toksik, yang dapat diobati dengan kortikosteroid. Keterlambatan pengobatan dapat meningkatkan bakteri yang dapat menyebabkan infeksi, meskipun angka kematian rendah pada anak dengan keadaan ini, kebanyakan kematian dikaitkan dengan keterlambatan dalam diagnosis (Tolan R. 2010). e) Pengobatan Diantara kokus Gram-positif, hampir semua infeksi oleh Staphylococcus disebabkan oleh kuman penghasil penisilinase dan karena itu harus diobati penisilin yang tahan terhadap penisilinase. Staphylococcus yang resisten terhadap metisilin (methicilin-resistant S. aureus = MRSA) harus dibasmi dengan vankomisin atau siprofloksasin ( Bagian Farmakologi, FKUI.2001 ). http://lib.unimus.ac.id 2.1.2.2 Bakteri Staphylococcus epidermidis a) Morfologi dan Identifikasi Bakteri Staphylococcus epidermidis (S. epidrmindis) merupakan bakteri yang bersifat oportunistik (menyerang individu dengan sistem kekebalan tubuh yang lemah). Bakteri ini adalah salah satu patogen utama infeksi nosokomial, khususnya yang berkaitan dengan infeksi benda asing. Orang yang paling rentan terhadap infeksi ini adalah pengguna narkoba suntikan, bayi baru lahir, lansia, dan mereka yang menggunakan kateter atau peralatan buatan lainnya. Organisme ini menghasilkan glycocalyx "lendir" yang bertindak sebagai perekat mengikuti ke plastik dan sel-sel, dan juga menyebabkan resistensi terhadap fagositosis dan beberapa jenis antibiotik. S. epidermidis memberikan kontribusi sekitar 65-90% dari semua Staphylococcus yang ditemukan dari flora aerobik manusia . Orang yang sehat dapat memiiliki hingga 24 strain (jenis) dari spesies, beberapa di antaranya dapat bertahan di permukaan yang kering untuk waktu yang lama. Hospes bagi organisme ini adalah manusia dan hewan berdarah panas lainnya (Nilsson, 1998). Klasifikasi dan morfologi Staphylococcus epidermidis menurut jawetz dkk (2005). Domain Kerajaan Filum Kelas Ordo Famili Genus Spesies : Bacteria : Eubacteria : Firmicutes : Bacilli : Bacillales : Staphylococcaceae : Staphylococcus : Staphylococcus epidermidis http://lib.unimus.ac.id Menurut Tortora tahun 2001, ciri-ciri bakteri Staphylococcus epidermidis : 1) Gram-positif, koagulasi negatif, katalase positif 2) Aerob dan anaerob. 3) Berbentuk kokus tunggal, bepasangan, tetrad dan berbentuk rantai juga tanpak dalam biakan cair. 4) Berdiameter 0,5-1,5 µm yang tersusun dalam bentuk kluster yang tidak teratur. 5) Bakteri yang tidak memiliki kapsul, tidak berspora dan tidak bergerak 6) Berkoloni mengerombol menyerupai buah anggur. Koloni biasanya berwarna putih atau krem bersifat anaerob. 7) S. epidermidis tumbuh cepat pada temperatur optimal 37 ºC. Bakteri Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri yang tergolong : 1) Koagulasi Negatif Koagulasi merupakan protein ekstraseluler yang mengikat prothrombin hospes dan membentuk kompleks yang disebut staphylothrombin. Karakteristik aktifasi protease pada thrombin diaktifkan dalam kompleks tersebut. Bakteri S. epidermidis tidak membentuk kompleks tersebut sehingga darah tidak menggumpal (Bergey. 2005). 2) Katalase Positif Uji katalase digunakan untuk mengatahui aktivitas katalase pada bakteri. Bakteri S. epidermidis memproduksi enzim katalase yang memecahkan H2O2 menjadi H2O dan O2. Karena H2O2 dapat menjadi racun bagi bakteri selain itu http://lib.unimus.ac.id proses tersebut merupakan mekanisme pernapasan bakteri tersebut (Bergey. 2005). Dinding luar bakteri S. epidermidis terdiri atas peptidoglikan yaitu suatu polimer protein polisakarida yang mengandung subunit-subunit. Lapisan tersebut menempel pada permukaan luar membran sel. Bakteri ini tidak memiliki membran luar maupun ruang periplasmik sehingga ketika mengunakan perwarnaan gram, maka akan terlihat warna ungu (Bergey, 2005). Peptidoglikan memiliki beberapa fungsi, yaitu (Ray dan George, 2004) : 1) Dapat mempertahankan bentuk bakteri 2) Dapat menahan tekana osmotik perlawanan sampai 20 atmosfir. 3) Sebagai antigen yang dapat membentuk Imunoglibulin pada manusia. 4) Bersifat sensitif sehingga hanya dapat didesifektan oleh basis fenol. b) Patologi Bakteri Staphylococcus epidermidis Infeksi S. epidermidis berhubungan dengan perangkat intravaskular (katup jantung buatan, shunts, dan lain-lain) , tetapi biasanya terjadi pada sendi buatan, kateter, dan luka besar. Infeksi kateter bersama dengan kateter-induced UTI menyebabkan peradangan serius dan sekresi nanah. Dalam hal ini, buang air kecil sangat menyakitkan. Septicaemia dan endokarditis termasuk penyakit yang berhubungan dengan S. epidermidis. Gejala yang timbul adalah demam, sakit kepala, dan kelelahan untuk anoreksia dan dyspnea. Septicemia terjadi akibat infeksi neonatal, terutama ketika bayi lahir dengan berat badan sangat rendah. Sedangkan, endokarditis adalah infeksi katup jantung dan bagian lapisan dalam dari otot jantung. S. http://lib.unimus.ac.id epidermidis dapat mencemari peralatan perawatan pasien dan permukaan lingkungan. c) Epidimiologi Staphylococcus terutama merupakan parasit manusia yang ada dimanamana. Sumber infeksi utama adalah tumpukan bakteri pada lesi manusia, benda – benda yang terkontaminasi lesi tersebut, dan saluran respirasi manusia serta kulit. Penyebaran infeks melalui kontak telah dianggap sebagai faktor yang penting di rumah sakit, dimana populasi luas dari staf dan pasien membawa Staphylococcus yang resisten antibiotika pada hidung atau kulit mereka. Meskipun kebersian, higienis, dan penatalaksanaan lesi secara aseptik dapat mengendalikan penyebaran Staphylococcus dari lesi tersebut beberapa metode tersedia untuk mencegah penyebarluasan Staphylococcus dari pembawa. Di rumah sakit yang merupakan daerah dengan risiko infeksi Staphylococcus paling tinggi adalah ruang perawatan bayi, unit perawatan intensif, ruang operasi, dan bangsal kemoterapi kanker (Geo, 2005). d) Pengobatan Infeksi S. epidermidis sulit disembuhkan sebab kuman tumbuh pada alat protese dimana bakteri dapat menghindar dari sirkulasi sehingga terhindar dari obat antimikroba. S. epidermidis lebih sering resisten terhadap antimikroba dari pada S. aureus, hampir 75% strain S. epidermidis resisten terhadap nafsilin. (Jawetz, dkk., 2001). Karena banyak galur yang resisten obat, maka tiap isolat Staphylococcus harus diuji kepekaan antimikrobanya untuk membantu memilih obat sistemik. http://lib.unimus.ac.id Resistensi terhadap grup eritromisin terjadi sangat cepat sehingga jangan digunakan secara tunggal untuk mengobati infeksi kronik. Resistensi obat (terhadap penicilin, tetrasiklin, aminoglikosida, dan eritromisin) ditentukan oleh plasmid yang ditransmisikan oleh Staphylococcus dengan transdksi dan juga dengan konjungasi. (Jawetz, dkk., 2001). Bakteri S. epidermidis merupakan bagian dari flora normal manusia, telah mengembangkan resistensi terhadap antibiotik yang umum seperti methicillin, novobiocin, klindamisin, dan penisilin benzil. Untuk mengobati infeksi digunakan vankomisin, hasil atau rifampin. 2.1.3 Penyakit-penyakit yang di sebabkan oleh Staphylococcus Menurut Tolan R. Tahun 2010. Penyakit-penyakit yang disebabkan oleh Staphylococcus adalah sebagai berikut : a) Infeksi superficial Infeksi pada bagian superficial tubuh adalah infeksi S. aureus yang paling sering ditemukan. Gejala-gejala yang khas dari penyakit tersebut adalah pembentukan nanah yang banyak, nekrosis jaringan setempat dan pembentukan abses yang penuh nanah. b) Infeksi jaringan yang dalam 1) Osteomyelitis, S. aureus paling sering ditemukan sebagai penyebab osteomyelitis, terutama pada anak-anak. Mikroba ini biasanya sampai ke tulang karena penyebab infeksi secara hematogen dari satu infeksi di tempat lain. http://lib.unimus.ac.id 2) Pneumonia, sering disertai terjadinya abses paru-paru, umumnya penderita dengan daya tahan tubuh yang rendah. Biasanya terjadi sebagai komplikasi virus influensa, setelah penderita menghirup benda asing. 3) Endokarditis akut, yang khas dengan adanya kolonisasi bakteri yang berkembang biak pada katup jantung. Hal ini biasanya terjadi pada pemakaian narkoba secara intravenous, atau setelah operasi katup jantung. 4) Arthritis, bakteremia, septicemia, dan abses organ dalam, misalnya abses otak, ginjal, paru-paru biasa disebabkan oleh S. aureus, S. epidermis, S. aprophyticus makin banyak diisolasi dari penderita infeksi saluran kemih dan bakteremia. c) Penyakit-penyakit akibat toksin 1) Scalded skin syndrome, satu manifestasi kulit dari strain S. aureus yang menghasilkan toxin ekfoliatif. Penyakit ini banyak menyerang anak-anak balita. Nampak eksfoliatif kulit menyebabkan sejumlah besar bulla-bulla yang luas di tempat yang jauh dari lokasi infeksi. 2) Keracunan makanan karena Staphylococcus (Staphylococcal food poisoning) ditandai dengan muntah yang eksplosof dan diare, yang terjadi 15 jam setelah memakan makanan yang terkontaminasi. Gejala ini disebabkan oleh enterotoxin yang dihasilkan oleh S. aureus yang tahan panas dan tidak bisa di rusak oleh asam lambung. 3) Toxic shock syndrome (TSS) yang secara klinik merupakan satu penyakit deman yang bisa berkembang menjadi kegagalan salah satu organ vital dan menyebabkan kematian. Definisi kasus mencakup demam, eritema makula http://lib.unimus.ac.id difus, dan tekanan darah rendah dengan melibatkan 3 atau lebih sistem organ. Muntah dan diare muncul pada saat sakit. Diare sekresi dan berlimpah, dan ditemukan pada hamper semua pasien dengan TSS, tetapi jarang pada pasien anti syok. Mialgia parah menjadi salah satu manifestasi awal dari penyakit. Aspek yang paling mencolok dari penyakit ini adalah dengan kecepatan penyakit yang dapat meningkatkan perkembangan dalam individu yang sebelumnya sehat dari segala usia. Hai ini terutama terjadi pada pasien pascaoperasi, terutama setelah operasi hidung, karena ini merupakan daerah yang umumnya terinfeksi dengan S. aureus akhir-onset temuan dermatologi termasuk pruritik makulopapular ruam dan merah, desquamation dari jari tangan dan kaki, dan telogen effluvium. 2.1.4 Mekanisme Kerja Antibakteri Faktor-faktor yang menghambat sintesis dinding sel bakteri telah dijelaskan dalam berbagai penelitian. Antibakteri merusak lapisan peptidoglikan yang menyusun dinding sel bakteri Gram negatif maupun Gram positif. Mekanisme kerjanya adalah dengan mencegah ikatan silang peptidoglikan pada tahap akhir sintesis dinding sel, yaitu dengan cara menghambat protein pengikat penisilin (penicillin binding protein), protein ini merupakan enzim dalam membran sel bakteri yang secara normal terlibat dalam penambahan asam amino yang berikatan silang dengan peptidoglikan dinding sel bakteri, dan memblok aktivasi enzim traspeptidase yang membungkus ikatan silang polimer-polimer gula panjan yang membentuk dinding sel bakteri sehingga bakteri menjadi rapuh dan mudah lisis. Termaksud didalam golongan β-laktam (misalnya, pinisilin, cephalosporins, dan http://lib.unimus.ac.id carbapenems) dan agen lainnya seperti cycloserine, vankomisin dan bacitracin (Brunton et al., 2006; Pratiwi, 2008). Contoh beberapa Antibakteri menurut Brunton et al., (2006) dan Pratiwi (2008): a) Antibiotik yang mengganggu fungsi membran sel, meningkatkan permeabilitas dan menyebabkan kebocoran senyawa intraselular. Membran plasma bersifat semipermeabel dan mengendalikan trasport berbagai metabolit kedalam dan luar sel. Adanya gangguan atau kerusakan struktur pada membran plasma dapat menghambat atau merusak kemampuan membran plasma sebagai penghalang (barrier) osmosis dan mengganggu sejumlah proses biosintesis yang diperlukan dalam membran. Agen yang mengganggu fungsi riboson subunit 30S atau 50S secara reversibel menghambat sintesis protein yang umumnya adalah bekteriostatik (misalnya kloramfenikol, tetrasiklin, eritromisin, klindamisin, streptogramins, dan linezolid) dan bakterisidal ( misalnya aminoglikosida). b) Agen yang mempengaruhi metabolisme asam nukleat bakteri. Penghambat terhadap transkripsi dan repikasi mikroorganisme, seperti firamycins (misalnya rifampisin dan rifabutin) yamg mengahmbat RNA polimerase dan quinolon yang menghambat topoisomerase. c) Antimetabolit yaitu sunstansi yang secara kompetitif menghambat metabolit mikroorganisme, karena memiliki struktur yang mirip dengan substrat normal bagi enzim metabolisme. Termaksud didalamnya trimetoprim dan sulfonamid, yang menghambat enzim penting metabolisme folat. http://lib.unimus.ac.id 2.1.3. Metode Pengujian Antibiotik Antibakteri Menurut Turnidge (2008), penentuan kepekaan bakteri terhadap antimikroba dapat dilakukan dengan dua metode pokok yaitu metode difusi dan dilusi. Pengujian ini memanfaatkan mikroorganisme sebagai indikator pengujian. Hal ini dilakukan untuk mengetahui sistem pengobatan yang efektif dan efisien dalam penanganan penyakit yang disebabkan oleh organisme uji. 2.1.4.1. Metode Difusi a) Disk diffusion Disk diffution adalah sebuah metode pengujian untuk menentukan aktivitas agen antibakteri. Cakram kertas saring yang berisi agen antibakteri diletakkan pada permukaan medium agar yang telah ditanami koloni murni suatu bakteri pada permukaannya. Area jernih yang terbentuk setelah inkubasi menunjukkan adanya hambatan pertumbuhan bakteri oleh agen antibakteri pada permukaan medium agar. zona hambatan yang terbentuk diukur untuk menentukan apakah bakteri sensitif atau resisten dengan cara membandingkan dengan standar pada obat. b) E- test E-test adalah suatu metode pemeriksaan yang dilakukan untuk mengetahui konsentrasi minimal suatu agen antimikroba dalam menghambat pertumbuhan mikroorganisme. Metode ini menggunakan strip plastik yang telah menganding agen antimikroba dari kadar terendah hingga kadar tertinggi yang diletakkan pada permukaan medium agar yang telah ditanami mikroorganisme. http://lib.unimus.ac.id c) Ditch- Plate Technique Metode ini dilakukan dengan cara meletakkan agen antimikroba pada parit yang dibuat dengan cara memotong media dalam cawan petri pada bagian tengahnya dan mikroba uji digoreskan kearah parit yang berisi agen anti mikroba. d) Cup- Plate Technique Metode ini hampir sama dengan metode disc diffusion. Metode ini dilakukan dengan cara membuat sumur pada media agar yang telah ditanami mikroorganisme dan pada sumuran tersebut diberi agen anti mikroba e) Gradient- Plate Technique Metode ini menggunakan agen antimikroba dengan konsentrasi bervariasi yang ditambahkan pada media agar dan diletakkan dalam cawan petri dalam posisi miring. Lalu ditmbahkan nutrisi kedua diatasnya dan diinkubasi agar agen antimikroba berdifusi dan permukaan media mongering. Mikroorganisme uji digoreskan pada media dan dihitung panjang total pertumbuhan mikroorganisme maksimum yang dibandingkan dengan panjang pertumbuhan hasil goresan. Klasifikasi respon daya hambat pertumbuhan bakteri ditunjukkan pada Tabel 2.3 Tabel 2.3 Klasifikasi Zona Hambat Diameter Zona Hambat Respon Hambat Bakteri >20 mm Kuat 16-20 mm Sedang 11-15 mm Lemah <10 mm Tidak Ada (Sumber : Greenwood, dkk. 1995) http://lib.unimus.ac.id 2.1.4.2. Metode Dilusi Metode Dilusi dibedakan menjadi dua jenis yaitu dilusi cair dan diusi padat. a) Dilusi cair Metode dilusi cair dilakukan dengan cara membuat seri pengenceran dari agen antibakteri dalam media cair lalu ditambahkan mikroba uji yang dilihat pertumbuhan bakteri dari kekeruhan yang terjadi (Jawetz et al., 2005). Prinsip dari metode ini untuk mengukur Kadar Hambat Minimum (KHM) dan Kadar Bunuh Minimum (KBM) dari agen antibakteri. Suatu larutan antibakteri pada kadar terkecil yang terlihat jernih setelah penambahan bakteri uji merupakan kadar hambat minimum dari agen antibakteri. Larutan yang telah ditetapkan sebagai KHM ini kemudian dikultur lagi untuk mengtahui kadar bunuh minimum. KBM ditetapkan jika dari larutan tersebut tidak menunjukkan penumbuhan bakteri setelah diinkubasi pada media cair tanpa agen antibakteri (Pratiwi, 2008). b) Metode dilusi padat Pada prinsipnya metode dilusi padat hampir sama dengan metode dilusi cair, hanya saja metode ini menggunakan media padat. Keuntungan metode ini dibandingkan yang cair adalah satu konsentrasi agen anti mikroba yang diuji padat (Pratiwi, 2008). 2.1.6. Metode Ekstraksi a) Tujuan ekstraksi (Harbone, 1987; Dirjen POM, 1986) Ekstraksi adalah penyarian zat-zat berkhasiat atau zat-zat aktif dari bagian tanaman obat, hewan dan beberapa jenis ikan termasuk biota laut. Zat-zat aktif terdapat di dalam sel, namun sel tanaman dan hewan berbeda demikian pula http://lib.unimus.ac.id ketebalannya, sehingga diperlukan metode ekstraksi dengan pelarut tertentu dalam mengekstraksinya. Tujuan ekstraksi bahan alam adalah untuk menarik komponen kimia yang terdapat pada bahan alam. Ekstraksi ini didasarkan pada prinsip perpindahan massa komponen zat ke dalam pelarut, dimana perpindahan mulai terjadi pada lapisan antar muka kemudian berdifusi masuk ke dalam pelarut. b) Jenis-jenis ekstraksi (Dirjen POM, 1986) Jenis ekstraksi bahan alam yang sering dilakukan adalah ekstraksi secara panas dengan cara refluks dan penyulingan uap air dan ekstraksi secara dingin dengan cara maserasi, perkolasi dan alat soxhlet. c) Cara-cara ekstraksi (Harbone, 1987; Dirjen POM, 1986) 1) Ekstraksi secara soxhletasi Ekstraksi dengan cara ini pada dasarnya ekstraksi secara berkesinambungan. Cairan penyari dipanaskan sampai mendidih. Uap penyari akan naik melalui pipa samping, kemudian diembunkan lagi oleh pendingin tegak. Cairan penyari turun untuk menyari zat aktif dalam simplisia. Selanjutnya bila cairan penyari mencapai sifon, maka seluruh cairan akan turun ke labu alas bulat dan terjadi proses sirkulasi. Demikian seterusnya sampai zat aktif yang terdapat dalam simplisia tersari seluruhnya yang ditandai jernihnya cairan yang lewat pada tabung sifon. http://lib.unimus.ac.id 2) Ekstraksi secara perkolasi Perkolasi dilakukan dengan cara dibasahkan 10 bagian simplisia dengan derajat halus yang cocok, menggunakan 2,5 bagian sampai 5 bagian cairan penyari dimasukkan dalam bejana tertutup sekurang-kurangnya 3 jam. Massa dipindahkan sedikit demi sedikit ke dalam perkolator, ditambahkan cairan penyari. Perkolator ditutup dibiarkan selama 24 jam, kemudian kran dibuka dengan kecepatan 1 ml permenit, sehingga simplisia tetap terendam. Filtrat dipindahkan ke dalam bejana, ditutup dan dibiarkan selama 2 hari pada tempat terlindung dari cahaya. 3) Ekstraksi secara maserasi Maserasi dilakukan dengan cara memasukkan 10 bagian simplisia dengan derajat yang cocok ke dalam bejana, kemudian dituangi dengan penyari 75 bagian, ditutup dan dibiarkan selama3-5 hari, terlindung dari cahaya sambil diaduk sekali-kali setiap hari lalu diperas dan ampasnya dimaserasi kembali dengan cairan penyari. Penyarian diakhiri setelah pelarut tidak berwarna lagi, lalu dipindahkan ke dalam bejana tertutup, dibiarkan pada tempat yang tidak bercahaya, setelah dua hari lalu endapan dipisahkan. 4) Ekstraksi secara refluks Ekstraksi dengan cara ini pada dasarnya adalah ekstraksi berkesinambungan. Bahan yang akan diekstraksi direndam dengan cairan penyari dalam labu alas bulat yang dilengkapi dengan alat pendingin tegak, lalu dipanaskan sampai mendidih. Cairan penyari akan menguap, uap tersebut akan diembunkan dengan pendingin tegak dan akan kembali menyari zat aktif http://lib.unimus.ac.id dalam simplisia tersebut, demikian seterusnya. Ekstraksi ini biasanya dilakukan 3 kali dan setiap kali diekstraksi selama 4 jam. 5) Ekstraksi secara penyulingan Penyulingan dapat dipertimbangkan untuk menyari serbuk simplisia yang mengandung komponen kimia yang mempunyai titik didih yang tinggi pada tekanan udara normal, yang pada pemanasan biasanya terjadi kerusakan zat aktifnya. Untuk mencegah hal tersebut, maka penyari dilakukan dengan penyulingan. 6) Ekstraksi cara infusum Pembuatan dilakukan dengan cara mencampurkan simplisia dengan kehalusan yang sesuai dengan iar secukupnya, panaskan di atas air panas selama 15 menit terhitung mulai suhu 90ºC sambil sesekali diaduk. Saring selagi panas melalui atau dengan menggunakan kain flannel, serta tambahkan air panas secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume infuse yang dikehendaki. http://lib.unimus.ac.id 2.1.7. Kerangka Teori Kerangka teori penelitian ini ditunjukkan pada Gambar 2.5 Rimpang Kunyit Antioksidan dan antiinfeksi Antiinflamasi dan peradanagan Zat aktif Antibakteri Minyak atsiri Alkaloid Flavonoid Kurkuminoid Mengganggu proses pembentukan membrane sel bakteri (Lee, 2000) Denaturasi Protein sehingga merusak aktivitas enzim (Aniszewki, 2007) Merusak membran sel dan menghambat pembentukan protein (Chee, 2009) Berinteraksi dengan dinding sel bakteri, terabsorbsi dan penetrasi ke dalam sel, sehingga terjadi denaturasi protein (Tarwija, (2001) Menghambat dan membunuh bakteri S. aurues dan S. epidermidis Gambar 2.5 Kerangka teori http://lib.unimus.ac.id 2.1.8. Kerangka Konsep Kerangka teori penelitian ini ditunjukkan pada Gambar 3. Variabel Bebas Variabel Terikat Ekstak Rimpang Kunyit Konsentrasi 5 % v/v, 10 % v/v, 25 % v/v, dan 50 % v/v Pertumbuhan bakteri S. aurues dan S. epidermidi yang dilihat dari diameter zona hambatnya Gambar 2.6 Kerangka konsep http://lib.unimus.ac.id BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Jenis Penelitian Jenis penelitian dalam metode ini adalah menggunakan jenis analisa kuantitatif dengan tujuan untuk menguji suatu obyek untuk menentukan nilai ukur atau persentase dalam perbandingan kadar konsentrasi. 3.2 Desain Penelitian Desain penelitian yang digunakan adalah eksperimental laboratorium. Sampel diberi perlakuan selanjutnya dilakukan pengukuran/pemeriksaan hasil dengan menggunakan metode disk diffution untuk melihat keefektifan ekstrak rimpang kunyit pada beberapa konsentrasi terhadap pertumbuhan bakteri S. aureus dan S. epidermidis. 3.3 3.3.1 Variabel Penelitian Variabel bebas Variabel bebas dari penelitian ini adalah ekstrak rimpang kunyit konsentrasi 5 % v/v, 10 % v/v, 25 % v/v, dan 50 % v/v. 3.3.2 Variabel terikat Variabel terikat dalam penelitian ini adalah pertumbuhan S. aureus dan S. epidermidis pada media MHA yang dilihat dari diameter zona hambat yang terbentuk. http://lib.unimus.ac.id 3.4 Rancangan Kerja Rancangan penelitian uji keefektifan ekstrak rimpang kunyit terhadap pertumbuhan S. aureus dan S. epidermidis dilakukan dengan rumus pengulangan Federer : (t- 1) (r – 1) ≥ 15 (4-1) (r-1) ≥ 15 3r-3 ≥ 15 3r ≥ 15 + 3 3r ≥ 18 r ≥6 Keterangan : t adalah konsentrasi ekstrak rimpang kunyit yang digunakan (5% v/v, 10% v/v, 25% v/v, dan 50% v/v), kontrol positif dan kontrol negatif, sedangkan r adalah jumlah sampel. 3.5. Definisi Operasional Definisi operasional dalam penelitian ini adalah sebagai berikut: Variabel Ekstrak kunyit Daya Hambat Pertumbuhan S. aureus dan S. epidermidis Definisi Operasional Rimpang kunyit yang telah dilakukan ekstraksi menggunakan dengan cara maserasi (perendaman) pada konsentrasi 5, 10, 25, dan 50 % v/v. Kemampuan zat (ekstrak kunyit) dalam menghambat pertumbuhan bakteri S. aureus dan S. epidermidis yang diukur pada paper disk Bakteri yang tumbuh pada media agar dengan karateristik berbentuk bulat, halus, menonjol, dan berkilau-kilau, pigmen berwarna kuning keemasan sampai warna putih yang terlihat di sekitar paper disk. http://lib.unimus.ac.id 3.6. Obyek Penelitian Obyek penelitian berupa kultur bakteri S. aureus dan S. epidermidis murni Isoliat TB negatif yang diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Universitas Muhammadiyah Semarang dan rimpang kunyit (Curcuma domestica Val.) dengan ciri berbentuk rimpang serta berwana kekuningan yang di ekstraksi menggunakan teknik maserasi. 3.7. Alat dan Bahan 3.7.1. Alat Alat yang digunakan dalam penelitian adalah seperangkat alat maserasi, batang pengaduk, rotary evaporator (Heidolph), neraca analitik, tabung reaksi, erlenmeyer, kertas saring Whatman nomor 4, mikropipet, cawan petri, , lampu spirtus, autoclave, dan inkubator. 3.7.2. Bahan Bahan yang digunakan antara lain rimpah kunyit (Curcuma Domestica Val), aquades streril, etanol 96%, sampel bakteri S. aureus, S. epidermidis, media BHI (Brain Heart Infusion), HIA miring, MSA (Manitol Salt Agar), standar Mc. Farland 0.5 konsentrasi 108 CFU/mL, media MHA (Mueller-Hinton Agar), dan larutan NaCl 0,9%. http://lib.unimus.ac.id 3.8. Prosedur Penelitian 3.8.1. Sterilisasi Alat Dalam proses sterilisasi alat yang terbuat dari gelas sebelum digunakan dicuci terlebih dahulu sampai bersih, dikeringkan kemudian dibungkus dengan kertas, diautoclave pada temperatur 121°C dengan tekanan 1 atm selama 15 menit setelah itu dikeringkan dalam oven temperatur 150 °C 30 menit. 3.8.2. Persiapan Bakteri Pada persiapan bakteri, bakteri S. aureus dan S. epidermidis murni isolat TB negatif yang diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Universitas Muhammadiyah Semarang pada bulan Juli 2016 dibuat suspensi bakteri dengan cara mengambil masing-masing satu koloni murni bakteri S. aureus dan S. epidermidis lalu dimasukkan ke dalam media BHI (Brain Heart Infusion) cair dalam tabung reaksi, diinkubasi pada temperatur 37 ºC selama 6-10 jam. Suspensi ditanam pada media MSA (Manitol Salt Agar), diinkubasi pada temperatur 37 ºC selama 24 jam. Suspensi kemudian ditanam pada media HIA miring yang diinkubasi pada temperatur 37 ºC selama 24 jam. Koloni dibuat suspensi pada tabung reaksi yang berisi NaCl 0,95% (fisiologis) dengan menggunakan ose mata, kemudian divortek supaya homogen. Kekeruhan suspensi disamakan dengan larutan standar Mc Farland 0,5 agar diperoleh bakteri sebanyak 1,5x108 sel/mL. 3.8.3. Persiapan dan Pembuatan Konsentrasi Larutan Uji. Penelitian ini diawali dengan pembuatan ekstrak kunyit. rimpang kunyit dipotong-potong, dan di keringkan tampa terkena sinar matahari langsung kemudian rimpang kunyit di-blender atau digiling. Sehingga didapakan serbuk http://lib.unimus.ac.id halus dari rimpang kunyit. Sebanyak 1 kg serbuk kunyit tersebut di larutkan dengan 10 liter etanol 96% (1:10). Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Ekstrak didiamkan selama 72 jam (3 x 24 jam) di tempat yang sejuk dan terlindung dari cahaya langsung sambil dilakukan pengadukan menggunakan stirer. Setelah 72 jam, hasil maserasi disaring menggunakan kertas saring Whatman nomor 4, semua maserat dikumpul dan diuapkan menggunakan vacuum rotary evaporator pada temperatur 50-60°C hingga diperoleh ekstrak kental (Kusuma, 2012). Selanjutnya ekstrak kental yang diperoleh diencerkan dengan aquades steril dibuat seri konsentrasi. Pembuatan konsentrasi 5% v/v ekstrak kunyit didapat dengan cara memipet ekstrak rimpang kunyit sebanyak 1 ml dan diencerkan dalam akuades steril sebanyak 20 ml. Konsentrasi 10 % v/v ekstrak rimpang kunyit didapat dengan cara memipet ekstrak rimpang kunyit sebanyak 2 ml dan diencerkan dengan 20 ml akuades steril. Konsentrasi 25 % v/v ekstrak rimpang kunyit didapat dengan cara memipet ekstrak rimpang kunyit sebanyak 5 ml dan diencerkan dengan 20 ml akuades steril. Konsentrasi 50 % v/v ekstrak rimpang kunyit didapat dengan cara memipet ekstrak rimpang kunyit sebanyak 10 ml dan diencerkan dengan 20 ml akuades steril. 3.8.4. Pembuatan Paper Disk Konsentrasi ekstrak kunyit yang telah dibuat dipipet sebanyak 50 μl dimasukkan kedalam tube. Larutan ekstrak rimpang kunyit lalu diteteskan ke disk paper yang diletakkan di cawan petri sebanyak 10 μl hingga disk blank lembab dan dimasukkan kedalam inkubator pada temperatur 40ºC hingga ekstrak menyerap http://lib.unimus.ac.id dalam paper disk. Setelah ekstrak menyerap lalu ditetesi lagi dengan larutan ekstrak yang dibuat sebanyak 10 μl dan diinkubasi hingga menyerap. Hal ini dilakukan hingga larutan dalam tube habis. 3.8.5. Uji Aktivitas Antibakteri Metode Disk Diffution Media HMA yang sudah dipadatkan ke dalam cawan petri kemudian dimasukkan 100 μL suspensi bakteri yang sudah disamakan dengan standar Mc Farland 0,5 (108 CFU/mL) dan diratakan dengan spreader glass diamkan selama 5 – 10 menit agar suspensi bakteri dapat meresap. Setelah suspensi kering media diletakan disk yang berisi masing-masing konsentrasi ekstrak kunyit yaitu 5, 10, 25, dan 50 % v/v. Kemudian diinkubasi selama 18 - 24 jam pada temperatur 37 0C tanpa dibalik. http://lib.unimus.ac.id 3.9. Alur Penelitian Alur penelitian ini ditunjukkan pada Gambar 3.1 berikut: Rimpang Kunyit Dikupas, dibersihkan, dikeringkan dan diblender/giling Serbuk kunyit Proses Maserasi 1 kg serbuk kunyit + 10 liter etanol 96 % Maserasi selama 3 x 24 jam Disaring Ekstrak cair Dievaporasi pada temperatur sampai-60º C Ekstrak kental Dibuat seri konsentrasi larutan uji 5 % v/v 10 % v/v 25 % v/v 50 % v/v Dibuat paper disk Media MHA + 100 µL suspensi bakteri + Paper disk Diamati dan diukur zona hambat di sekitar Paper disk Diinkubasi 18-24 jam Temperatur 37 0C Gambar 3.1. Alur penelitian http://lib.unimus.ac.id 3.10. Teknik Pengumpulan dan Analisis Data Data yang digunakan dalam penelitian ini merupakan data primer dan analisis hasil aktivitas antibakteri ekstrak kunyit dilakukan secara visual dengan mengukur diameter zona radikal di sekitar paper disk. 3.11. Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian akan dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi Universitas Muhammadiyah Semarang (UNIMUS), yang terletak di Jalan Kedungmundu Raya No. 18 Semarang. Waktu penelitian akan dilaksanakan Agustus - September 2016. http://lib.unimus.ac.id BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Gambaran Umum Sampel Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah rimpang kunyit. Rimpang yang sudah dikumpulkan kemudian dibersihkan, dipotong-potong dan dikeringkan tanpa terkena cahaya matahari langsung. Setelah kering potongan kunyit tersebut diblender sampai menjadi serbuk atau bubuk kunyit. Selanjutnya serbuk diekstrak mengunakan metode maserasi dengan menimbang sebanyak 1 kg serbuk kunyit tersebut kemudian di larutkan sebanyak 10 liter etanol 96 %, kemudian dipekatkan dengan alat rotary evaporator sehingga didapatkan ekstrak kental. Selanjutnya dibuat konsentrasi 5, 10, 25, dan 50% v/v. Dan masing-masing konsentrasi dipipet kedalam disk blank. Isolat S.aureus dan S.epidermidis yang telah murni didapat pada sputum BTA negatif, Strain murni tersebut kemudian ditanam pada media MSA miring dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C. Secara makroskopis S.aureus mampu memfermentasi manitol dan menghasilkan asam yang merubah indikator menjadi warna kuning, sedangkan S.epidermidis tidak menghasilkan warna. Hal ini menunjukan bahwa bakteri tahan terhadap kadar garam tinggi, tetapi tidak mampu memfermentasi manitol menjadi asam, sedangkan secara mikroskop yaitu dengan pengecatan Gram memiliki ciri-ciri berbentuk bulat berwarna ungu, bergerombol seperi anggur. http://lib.unimus.ac.id 4.2 Hasil Penelitian Setelah dilakukan penelitian mengenai daya hambat ekstrak rimpang kunyit terhadap pertumbuhan bakteri S. aureus dan S. epidermidis dengan menggunakan metode difusi paper disc dan sumuran, kemudian dilakukan uji daya hambat antibakteri setelah masa inkubasi selama 1x24 jam pada suhu 37 ºC dan hasil yang diperoleh dapat dilihat pada tabel 4.1. Tabel 4.1 Hasil zona hambat ekstrak rimpang kunyit metode maserasi Bakteri S. aureus S. epidermidis 5% - Zona Hambat Ekstrak Rimpang Kunyit (mm) Paper disc Sumuran Kontrol 10% 25% 50% 5% 10% 25% 50% (-) (+) 24 - - - - - - - - 29 Berdasarkan Tabel 4.1, hasil uji daya hambat bakteri S.aureus dan S.epidermidis menggunakan cara paper disk dan sumuran oleh ekstrak rimpang kunyit yang diekstraksi dengan metode maserasi dengan larutan etanol 96% pada konsentrasi 5, 10, 25, dan 50% v/v, belum menunjukkan zona hambat terhadap pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis. Dengan demikian hasil penelitian ini menunjukan bahwa ekstraks rimpang kunyit yang diperoleh dengan cara maserasi belum mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis. Karena daya hambat ekstrak secara maserasi belum menghasilkan zona hambat maka dilakukan eksperimen kedua dengan menggunakan metode ekstraksi yang berbeda yaitu dengan cara infusum. Ekstrak infusum yang diperoleh diuji dengan uji disk difusi metode paper disk dan sumuran dan hasilnya dapat dilihat pada tabel 4.2. http://lib.unimus.ac.id Tabel 4.2 hasil zona hambat ekstrak rimpang kunyit metode Infusun Bakteri S. aureus S. epidermidis 25% - Zona Hambat Infusum Rimpang Kunyit (mm) Paper disc Sumuran 50% 75% 100% 25% 50% 75% 100% - Kontrol (-) (+) 24 29 Berdasarkan Tabel 4.2, hasil uji daya hambat bakteri S.aureus dan S.epidermidis menggunakan cara paper disk dan sumuran oleh ekstrak rimpang kunyit yang diekstraksi dengan cara infusum pada konsentrasi 25, 50, 75, dan 100% b/v, juga belum menunjukkan zona hambat terhadap pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis. Dengan demikian hasil penelitian ini menunjukan bahwa ekstrak rimpang kunyit yang diperoleh dengan cara infusum belum mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis. Langkah lebih lanjut dilakukan eksperimen ketiga dengan merendam disk blank didalam ekstrak infusum dari hasil infusum dengan volume disk sebanyak 50 µl yang kemudian didiamkan selama 1x24 jam dan hasil dapat dilihat pada tabel 4.3. Tabel 4.3 hasil uji zona hambat ekstrak rimpang kunyit metode Infusun Bakteri S. aureus S. epidermidis Zona Hambat Infusum Rimpang Kunyit (mm) Paper disk (100%) Kontrol 24 29 Berdasarkan Tabel 4.3, hasil uji daya hambat bakteri menggunakan cara paper disk perendaman selama 24 jam oleh ekstrak rimpang kunyit yang diekstraksi dengan cara infusum pada konsentrasi 100% b/v, juga belum menunjukkan zona hambat terhadap pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis. Dengan demikian hasil penelitian ini menunjukan bahwa ekstrak rimpang kunyit yang http://lib.unimus.ac.id diperoleh dengan cara infusum dan direndam selama 1x24 jam belum mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis. Eksperimen keempat selanjutnya dilakukan yaitu dengan metode permukaan (spread plate) dengan ekstrak rimpang kunyit secara infusum dan hasil dapat dilihat pada tabel 4.4. Tabel 4.4 Hasil uji spread plate dengan ekstrak rimpang kunyit metode Infusun Bakteri S. aureus S. epidermidis Hambat Infusum Rimpang Kunyit (100%) Waktu kontak (30 menit) Kontrol Koloni tak terhitung Koloni tak terhitung Koloni tak terhitung Koloni tak terhitung Berdasarkan Tabel 4.4. hasil uji spread plate dilakukan dengan dengan konsentrasi ekstrak 100% b/v yang diperoleh dari cara infusum. Kontrol positif yang digunakan berisi suspensi bakteri sebesar 9x107cfu/ml sedangkan pada larutan uji ekstrak hasil infusum 100% b/v yaitu larutan kontrol positif dipipet sebanyak 100 µl suspense bakteri control positif ditambahkan 2000 µl ekstrak, kemudian campuran suspense bakteri dengan ekstrak tersebut didiamlan selama 30 menit dan dipipet sebanyak 10 µl ke dalam media uji dan di inkubasi selama 1x24 jam pada suhu 73 ºC. Hasil yang diperoleh diamati dengan cara membandingkan kontol positif dangan media uji. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa infusa rimpang kunyit belum mampu menghambat pertumbuhan koloni bakteri S.aureus dan S.epidermidis, karena hasilnya masih setara dengan kontrol positif. Karena hasil ekstraksi dengan dua metode dan beberapa cara uji diatas belum mampu menghambat maka dilakukan eksperimen kelima yaitu uji daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis dengan menggunakan serat kunyit dan hasilnya dapat dilihat pada tabel 4.5. http://lib.unimus.ac.id Tabel 4.5 Hasil uji zona hambat dengan serat kunyit Bakteri S. aureus S. epidermidis Zona Hambat Serat Kunyit (mm) Sumuran (100%) Kontrol 24 29 Berdasarkan Tabel 4.5, hasil uji daya hambat serat kunyit sebanyak 2 gram menggunakan cara sumuran pada konsentrasi 100%, juga tidak menunjukkan zona hambat terhadap pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis. dengan demikian hasil penelitian ini menunjukan bahwa serat kunyit juga belum mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis. Pada penelitian ini, awalnya peneliti menggunakan ampisilin sebagai kontrol positif dan paper disk yang berisi akuades steril sebagai kontrol negatif dan hasilnya dapat dilihat pada tabel 4.6. Tabel 4.6 Hasil uji kontrol positif (ampisilin) dan kontrol negatif akuades steril Bakteri S. aureus S. epidermidis Ampisilin - Zona Hambat Kontrol (mm) Akuades Steril - Berdasarkan Tabel 4.6, hasil uji kontrol positif (ampisilin) dan kontrol negatif (akuades steril). Menunjukkan anbiotik ampisilin tidak mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis. Karena antibiotik ampisilin tidak mampu menghambat bakteri maka peneliti menggunakan kloramfenikol sebagai kontrol pisitif dan menggunakan aquades steril. Dan hasil dapat dilihat pada tabel 4.7. http://lib.unimus.ac.id kontrol negatif Tabel 4.7 Hasil uji kontrol positif (ampisilin) dan kontrol negatif akuades steril Zona Hambat Kontrol (mm) Kloramfenikol Akuades Steril 24 29 - Bakteri S. aureus S. epidermidis Berdasarkan Tabel 4.7, hasil uji kontrol positif (kloramfenikol) dan kontrol negatif (akuades steril). Menunjukkan anbiotik kloramfenikol mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis dengan diameter masing-masing 24 dan 29 mm. 4.3 Pembahasan Penelitian dilakukan di Laboratorium kimia dan laboratorium mikrobiologi pada bulan Juli – September 2016. Sampel pada penelitian ini yaitu ekstrak rimpang kunyit yang di ekstrak secara maserasi, infusum dan serat kunyit dengan berbagai konsentrasi yang diuji disk diffution, sumuran, spread plate guna untuk mengatahui kemampuan daya hambat ekstrak kunyit dan mengukur zona hambat ekstrak kunyit terhadap pertumbuhan bakteri S. aureus dan S. epidermidis. Berdasarkan hasil pengamatan uji daya hambat ekstrak rimpang kunyit dengan cara maserasi, infusum, serat kunyi yang di uji dengan berbagai metode pengujian, menujukan bahwa tidak terdapat zona hambat terhadap bakteri S. aureus dan S. epidermidis. Secara umum terdapat beberapa faktor yang mempengaruhi daya hambat suatu ekstrak bahan hasil alam terhadap pertumbuahan bakteri, yakni kandungan senyawa antibakteri pada bahan tersebut, karakteritik dinding sel bakteri, dan terjadinya resistensi terhadap antibiotik. Pada penelitian ini beberapa jenis ekstrak kunyit yang diperoleh dari dua macam metode ekstraksi yaitu cara maserasi dan http://lib.unimus.ac.id infusum, dan hasilnya telah diujikan menggunakan cara paper disk dan sumuran terhadap pertumbuhan bakteri S. aureus dan S. epidermidis secara, penelitin dilakukan aseptis tetapi belum mampu menghambat pertumbuhan kedua spesies bakteri tersebut karena itu perlu dilakukan studi literatur yang membahas lebih jauh tentang kandungan senyawa aktif rimpang kunyit di bandingkan dengan bahan alam lain yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.aurues dan S.epidermidis. Menurut Rismunadar (1998) kandungan senyawa aktif dari rimpang kunyit yaitu minyak atsiri 1,3-5,5%, kurkuminoid 2.5-6%, alkaloid dan flavonoid. Komposisi kimia tersebut merupakan senyawa antibakteri. Komponen minyak atsiri yang diduga berperang aktif sebagai antibakteri adalah sabinen, β-mirsen, α-pinen, α-tuyan, trans-kariofelin dan, β- pinen. Senyawa β- pinen dan α-pinen merupakan senyawa terpenoid yang dikenal mempunyai efek antimikroba dan memiliki kemampuan untuk merusak intregitas seluler dan respon menghambat serta dapat merusak proses trasport (Lee, 2000). Kurkuminoid merupakan senyawa fenolik. Turunan fenol ini akan berinteraksi dengan dinding sel bakteri, selanjutnya terabsorbsi dan penetrasi ke dalam sel bakteri, sehingga menyebabkan presipitas dan denaturasi protein, akibatnya akan melisiskan membran sel bakteri, sedangkan aktivitas antibakteri kurkumin dengan cara menghambat proliferai sel bakteri (Tarwiyah, 2001). Flavonoid merupakan golongan terbesar senyawa fenol yang mempunyai sifat meningkatkan permeabilitas sel, dapat menghambat mikroorganisme karena kemampuannya membentuk senyawa kompleks dengan protein, dengan rusaknya protein maka aktifitas metabolisme mikroba menjadi terganggu sehingga http://lib.unimus.ac.id mengakibatkan kematian mikroba (Chee, 2009). Pembentukan kompleks menyebabkan rusaknya membran sel karena terjadi perubahan permeabilitas sel dan hilangnya kandungan isi sel di dalam sitoplasma yang mengakibatkan terhambatnya pertumbuhan sel atau matinya sel mikroba (Anggara et al., 2014). Menurut Aniszewki (2007), alkaloid merupakan senyawa yang memiliki aktivitas antimikroba, yaitu menghambat esterase, DNA dan RNA polimerase, serta menghambat respirasi sel dan berperan dalam interkalasi DNA. Alkaloid adalah zat aktif dari tanaman yang berfungsi sebagai obat, dan aktivator kuat bagi sel imun yang menghancurkan bakteri, virus, jamur serta sel kanker (Olivia et al., 2004), Ekstrak maserasi dan infusa rimpang kunyit pada penelitian ini tidak mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus dan S. epidermidis, hal ini mungkin dapat disebabkan oleh kandungan senyawa antibakteri yang sedikit yitu minyak atsiri 1,3-5,5%, kurkuminoid 2.5-6%, alkaloid dan flavonoid pada rimpang kunyit, sehingga diperkirakan dengan kandungan antibakteri yang sedikit belum mampu merusak dinding sel dan denaturasi protein sel bakteri S.aureus dan S. epidermidis. Pada penelitian yang dilakukan oleh Muhammad Tuasikal (2016), daging buah pala (M.fragrans Houtt) mampu menghambat dan membunuh bakteri S.aureus dan S. epidermidis dengan katagori sangat sensetif. Menurut Okukpe et al (2012), daging buah pala mengandungan senyawa antibakteri yaitu flavonoid 1,37%, saponin 49,32%, dan alkaloid 8,42%. Semakin banyak kandungan antibakteri pada suatu bahan alam semakin besar juga potensi dalam menghambat bahkan menbunuh http://lib.unimus.ac.id bakteri karena mampu merusak dinding sel dan masuk kedalam sel melakukan denaturasi protein sehingga bakteri tersebut menjadi lisis. Selain faktor kandungan senyawa antibakteri yang terkandung dalam bahan alam. Bakteri juga memiliki sistem pertahanan tubuh untuk melindungi diri demi keberlangsungan hidup, salah satunya yaitu dinding sel. Bakteri Staphylococcus memiliki dinding sel yang terdiri dari jaringan makromolekul (peptidoglikan) yang bias tersusun tunggal atau dengan kombinaksi dengan zat lain. Dinding bakteri Gram-positif mempunyai lapisan peptidoglikan yang banyak sehingga struktur yang terbentuk tebal dan kaku selain itu juga bakteri Gram-positif mengandung asam teichoic dan asam teichuronic yang mengatur fungsi elastisitas, porositas, kekuatan tarik dan sifat elektrstatis dinding sel. Selain itu bakteri S. aureus juga memiliki polisakarida kapsuler/capsuler polysaccharides (CPs) yang salah satu fungsinya yaitu meningkatkan kolonisasi dan ketahanan pada permukaan mukosa (Tortora, 2013 dan Jawetz 2010). Sehingga senyawa kurkuminoid dan flavoniod dalam kunyit tidak mampu merusak dinding sel bakteri S.aureus dan S.epidermidis. Selain itu, penggunaan antibiotik yang terus menerus meningkat dapat menimbulkan berbagai masalah. Salah satu masalah terpenting adalah timbulnya galur bakteri resisten terhadap berbagai jenis antibiotik yang dapat menyebabkan pengobatan penyakit infeksi dengan antibiotik tidak lagi efektif. Resisten yaitu kemampuan bakteri dalam menahan efek satu antibiotik atau lebih, diantaranya yaitu resisten antibiotik pinisilin (β laktam) terhadap bakteri Staphylococcus, dapat disebabkan satu dari empat mekanisme umum resisten: (1) inaktivasi antibiotik βlaktam oleh enzim β-laktase. Produksi enzim β-laktase merupakan mekanisme http://lib.unimus.ac.id tersering. Enzim β-laktase yang diproduksi oleh bakteri akan memecah struktur dari cincin antibiotik β laktam, sehingga otomatis antibiotik trsebut sudah tidak mempunyai daya antibakteri. (2) modifikasi target PBP (penicillin binding protein), antibiotik sebagai bahan antibakteri memiliki sebuah reseptor yang spesifik salah satu reseptor yaitu PBP. PBP merupakan protein spesifik dari antibiotik kelompok penisillin. Ketika PBP mengalami perubahan sifat ikatan seperti perubahan PBP2 menjadi PBP2a, maka kelompok penisillin tidak akan mampu bekerja sebagai bahan antibakteri. Pada bakteri MRSA PBP2a tidak mampu mengikat antibiotikantibiotik kelompok penisillin, akibatnya penisillin tidak mampu menghambat proses transpeptidase, shingga bakteri bakteri tetap mampu melakukan sintesis protein. (3) gangguan penembusan antibiotik ke PBP, semua bakteri termaksud genus Staphylococcus mempunyai membran plasma dan dinding sel. Kebanyakan zat antibiotik memasuki sel bakteri melalui pori-pori pada membran sel. Konsentrasi antibiotik dalam sel sebanding dengan jumlah pori-pori sel bakteri. Ada bakteri yang resisten terhadap antibiotik dengan mekanisme mengurangi jumlah pori-pori pada membran sel sehingga jumlah antibiotik yang masuk tidak cukup untuk merusak atau membunuh bakteri tersebut (4) pompa efflux. bakteri memproduksi pompa efluks untuk mengeluarkan antibiotik yang sudah terlanjur masuk sel sebelum antibiotik dapat merusaknya. Terdapat pompa khusus untuk obat tertentu saja dan dan pompa yang dapat mengekspor berbagai antibiotik. Pompa yang dapat mengekspor berbagai antibiotik ini dikenal sebagai pompa Multy Drug Resistance (MDR) dan bakteri yang mempunyai pompa ini resisten terhadap berbagai antibiotik. Pompa-pompa ini mungkain telah berevolusi dari fungsi aslinya http://lib.unimus.ac.id yaitu mengekspor substansi kimia toksin yang dijumpai bakteri di alam (Katzung, 2009 dan Freeman-cook, 2006). http://lib.unimus.ac.id BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian yang telah di lakukan dapat disimpulkan bahwa : 1. Ekstrak rimpang kunyit dengan metode ekstraksi cara dengan maserasi dan infusa rimpang kunyit yang dilakukan pada penelitian ini belum mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis yang telah diuji dengan menggunakan metode disk, sumuran dan permukaan (Spread plate) atau waktu kontak. 2. Variasi konsentrasi daya hambat maserasi rimpang kunyit dengan konsentrasi 5, 10, 25 dan 50% v/v dan infusa rimpang kunyit dengan konsentrasi 25, 59, 75 dan 100% b/v tidak mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis. 5.2 Saran Penelitian daya hambat ekstrak rimpang kunyit terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis telah dilakukan, sehingga disarankan agar : 1. Dapat dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai daya hambat ekstrak rimpang kunyit terhadap bakteri Gram-positif maupun Gram-negatif yang lain. http://lib.unimus.ac.id 2. Dapat dilakukan metode ekstraksi rimpang kunyit yang lain seperti refluks, digesti, perkolasi dan lain-lain untuk mendapatkan zat aktif secara murni, sehingga mampu menghambat pertumbuhan S. aureus dan S. epidermidis. 3. Selanjutnya perlu dilakukan uji kualitatif tarhadap kandungan rimpang kunyit terlebih dahulu agar dapat diketahui kandungan senyawa antimikroba yang terkandung didalam rimpang kunyit. 4. Dapat dilakukan penelitian terhadap pertumbuhan bakteri S.aureus dan S.epidermidis dengan bahan alam lain yang memiliki senyawa antibakteri yang tinggi. http://lib.unimus.ac.id DAFTAR PUSTAKA Agus Syahrurachman, dkk. 1994. Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran Edisi Revisi. Jakarta : Bina Rupa Aksara. Aniszewki, T. 2007. Alkaloid Secrets of Life. Amsterdam:Elsevier. pp. 18. Brooks, G. F. dkk, 2005, Medical Microbiology. New. York : Mc Graw Hill Budiono Santoso, dkk. 1993. Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokimia, dan Pengujian Klinik Pengembangan dan Pemanfaatan Obat Bahan Alam. Jakarta : Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medica. 19-21 Cowan, M.M.(1999). Plant Productas Antimicrobial Agents. Oxford. M331. Cut Marnaini, (2013). Uji Efektivitas Ekstrak Kunyit Sebagai Antibakteri Terhadap Pertumbuhan Bakteri Bacillus Sp Dan Shigella Dysentriae Secara In Vitro. Ditjen POM, Depkes RI, 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta,9-11,16. Fardiaz, 1988. Mikrobiologi Pangan I. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta. Farrell, K.T. 1990. Spices, Condiments and Seasonings. Edisi Kedua. Editor Van Vostrand. Reinhold: New York. Frazier, W.C. and D.C. Westhoff, 1979. Food Microbiology. Third Edition. Mc. Graw Hill Book Co. Inc, New Delhi. Greenwood, Norman N., Earnshaw, Alan, 1997, Chemistry of the Elements, 2 Hapsoh., Rahmawati. 2008. Modul Agronomi: Budidaya Tanaman Obat-Obatan. Fakultas Pertanian. Universitas Sumatera Utara. Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia, Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan.Terjemahan K. Padmawinata. Edisi II. Bandung: ITB Press. Halaman 152. Hargono, D., Winarso, M.W., Dan Werawati, A. (2000). Pengaruh Perasan Daun Ngokilo (Gynura Procumbens Lour. Merr.) Terhadap Aktivitas Sistem Imun Mencit Putih. Cermin Dunia Kedokteran 127: 22-29. Heinrich, M., Barnes, J., Gibbons, S., Williamson, E. (2009). Farmakognosi Dan Fitoterapi. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran. Hal. 85, 105. http://lib.unimus.ac.id Hidayati, E., Juli, N., Marwani, E. (2002). Isolasi Enterobacteriaceae Patogen Dari Makanan Berbumbu Dan Tidak Berbumbu Kunyit (Curcuma Longa L,) Serta Uji Pengaruh Ekstrak Kunyit (Curcuma Longa L,) Terhadappertumbuhan Bakteri Yang Diisolasi. Departemen Biologi, F MIPA ITB, Bandung. Hugo, W.B. and A.D. Russel.(1981). BlackwellScientific Publication.Oxford. Pharmaceutical Microbiology. Huhtanen, C.N. 1980. “Inhibition of Clostridium botulinum by spice extracts and aliphatic alcohols”.Journal Of Food Protect. 43(3) : 195 Jacob MB. 1944. The chemistry and technology of food and food products. Vo. 1, New York. Jawetz, E, J. Melnick, Et Al., 2005. Jakarta: EGC Mikrobiologi Kedokteran. Katzung, B., Masters, S. and Trevor, A. 2009. Basic& Clinical Pharmacology. New York: McGraw-Hill Medical Kedokteran, 107, 118, 201-207, 295, Jakarta, Buku Kedokteran EGC. Kerlinger, F. N. dan Lee, H. B. (2000). Foundation of Behavioral Research (Fourth Edition). USA: Holt, Reinnar & Winston, Inc. Krishnamurthy, N., A. G. Matthew, E. S. Nambudiri, S. Shivashankar, Y. S. Lewis, and C. P. Naratajan. 1976. Oil and oleoresin of turmeric. Trop. Sci. 18(1): 37-45. Muhlisah, F., 2005, Tanaman Obat Keluarga, Penebar Swadaya, Jakarta Murine Septic Arthritis. Infect and Immun.67(3):1045-1049. Nilsson, A.H., O. Hartford, T. Foster and A. Tarkawski. 1999. Alpha toxin and Gamma toxin Jointly Promote Staphylococcus aureus Virulensice in Nugroho Tristyanto, (2011). Daya Antibakteri Ekstrak Buah Mahkota Dewa Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus. Nugroho, N.A. (1997). Manfaat dan Prospek Pengembangan Kunyit. Yogyakarta: Penerbit Trubus Agriwidya. Hal. 6-7. Pelczar, M. J., D. Reid, dan E. C. S. Chan. 1977. Microbiology. 4th Edition. McGraw-Hill Book Co., London. http://lib.unimus.ac.id Pelczar, M.J., R.D. Reid. 1972. “Microbiology”. Mc Graw Hill Book Company, New York. Pratiwi, ST. (2008). Mikrobiologi Farmasi.Yogyakarta: Penerbit Erlangga. Halaman176. Prawiro., 1977. Tanaman Kunyit. Yogyakarta Purseglove, J.W, E B. Brown, C. L green and S. R. J. Robbins. 1981. Spices. Vol I. Longman, London and New York P. 229 – 285. Radji, M., 2011, Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi Rismunandar. 1993. Lada, Budidaya, dan Tataniaganya. Penebar Swadaya,Jakarta. Robinson, T.1991. Kandungan Organiktumbuhan Tinggi. Edisi Ke6.A.B.Kosasih Padmawinata. Penerbit ITB. Bandung. Rosenbach, M.E, E Orlans N Butters. 1974. immunoglobulin classes in the Hen’s Egg : their segregation in yolk and white. Eur J Immunol.4: 521-523. Rukmana HR. 1994. Kunyit. Jakarta: Penerbit Kanisius. Rukmana, R. 2004. Temu-temuan Apotik Hidup di Perkarangan. Kanisius. Yogyakarta. Sastroamidjojo, S., 1988. Obat Asli Indonesia. Dian Rakyat, Jakarta. Sinaga, M.S., 2006. Dasar-Dasar Ilmu Penyakit Tumbuhan. Penebar Swadaya. Jakarta. Siti Nur, (2012). Aktifitas antibakteri Ekstrak Etanol daun belimbing Wulung (Averrhoa Bilimbi L) Terhadap Staphylococcus aereus dan Staphylococcus epidermidis. Srinivasan, K.R. 1953. a Chromatographi of the curcuminiod in Curcuma longa. J. Pharm pharmacol. Sudarsono, Agus P, Didik G, Dkk. 1996. Tumbuhan Obat. Yogyakarta : UGM. Sundari, D., P. Kosasih, Dan K. Ruslan. 1996. Analisis Fitokimia Ekstrak Etanol Daging Buah Pare (Momordica Charantia L.). [Tesis]. Jurusan Farmasi. Suwanto, 1983. Kandungan dalam Rimpang Kunyit. Penebar Swadaya, Jakarta. http://lib.unimus.ac.id Tarwiyah, Kemal. 2001.Minyak Kelapa.Dewan Ilmu Pengetahuan, Teknologi dan Industri Sumatera Barat. http:// warintek. ristek. go. id. Diakses tanggal 05 Juli 2016 Thomas, A.N.S. (1989). Tanaman Obat Tradisional. Kanisius.Yogyakarta. Tolan, R.W. 2008. Pseudomonas aeruginosa infection. Avalaible online at:http://www.emedicine.com/ped/topic2704.htm Tolan, R.W., 2011. Taenia Infection. Available from: . [Accessed 30 April 2011]. http://emedicine.medscape.com/article/999727-overview#a0104 Trachtman, H., 2007. Bacteria and Foodborne Illness. Available from: (Accessed 2 April 2011) Tuasikal Muh (2016). Daya hambat ekstrak daging buah pala terhadap jamur penyebab sariawan secara in vitro. Universitas Muhammadiyah Semarang. Turnidge,J., Rao,N., Chang,F,Y., Fowler Jr,V,G., Kellie,S,M., Arnold,S., Lee,B,Y. (2008). „Staphylococcus aureus’ .6. http://www.antimicrobe.org/sample_staphylococcus.asp [accessed June 2012] http://lib.unimus.ac.id LAMPIRAN Lampiran 1. Pembuatan larutan kerja dan media pertumbuhan bakteri a. Pembuatan larutan NaCl fisoalogis 0,9 % Sebanyak 9 gr NaCl ditimbang lalu dilarutkan dalam 1 liter akuades steril. Selanjutnya larutan dihomogenkan dan ditutup dengan kapas dan aluminium foil dan disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121 ºC tekanan 2 bar selama 15 menit. b. Pembuatan standar Mac Farland 0,5 Sebanyak 0,5 ml larutan barium klorida 0,048 M (BaCl2 2H2O 1,175 %) dicampurkan dengan 9,5 ml larutan asam sulfat 0,18 M (H2SO4 1% b/v) dalam labu takar dan dihomogenkan. Suspensi ini digunakan sebagai larutan standar pembanding kekeruhan suspensi bakteri uji. c. Pembuatan media MHA (Manitol Salt Agar) Sebanyak 38 gram serbuk MHA ditimbang lalu dilarutkan dalam 1 liter akuades steril. Selanjutnya larutan tersebut dilarutkan dengan menggunakan merebus sampai larut. Kemudian di sterilisasi dengan autoklaf dengan suhu 121 ºC selama 10 – 15 menit. Kemudian dipadatkan pada cawing petri steril dengan ketebalan 0,6 ml. d. Pembuatan ekstrak kunyit dengan cara maserasi Sebanyak 50, 25, 10 dan, 5 gram serbuk kunyit dilarutkan kedalam masing-masing 100 ml etanol 96% selama 3 hari. Kemudian larutan tersebut Dievaporasi pada temperatur 50-60 ºC, larutan uji siap digunakan. e. Pembuatan ekstrak kunyit dengan cara infusum Sebanyak 100, 75, 50 dan, 25 gram kunyit dilarutkan kedalam 100 ml akuades steril (kecuali 100 gram). Kemudian larutan tersebut di panaskan pada water bath sampai suhu 90 ºC. Selanjutnya infusa tersebut di saring sampai mendapatkan cairan infusa tersebut, larutan uji siap digunakan. http://lib.unimus.ac.id Lampiran 2. Pembuatan paper disk blank, suspensi bakteri, media uji dan pewarnaan Gram. a. Pembuatan paper disk Larutan uji (ekstrak kunyit dengan cara marerasi dan infusum) di pipet sebanyak 10 µl ke dalam paper disk blank. Kemudian di simpan di oven selama 20 – 30 menit dengan suhu ± 30 ºC. dilakukan prosedur yang sama sampai volume dalam paper disk sebanyak 50 µl. b. Pembuatan suspensi bakteri Diambil sebanyak 1-2 ose koloni bakteri. Kemudian dimasukan kedalam tabung yang berisi NaCl 0.9 %. Dihomogenkan dan dibandingkan dengan standar Mac Farland. c. Pembuatan media uji Diambil media MHA yang sudah padat kemudian dipipet suspensi bakteri sebanyak 100 µl. selanjutnya di ratakan dan didiamkan selama 15 menit. Setelah itu media yang berisi suspensi bakteri di simpan dalam inkobator pada suhu 37 ºC selama 1x24 jam. d. Prosedur pewarnaan Gram Disiapkan preparat sampel dalam bentuk suspensi diatas kaca objek dan dikeringkan dengan mengangin-anginkan. Setelah itu lalukan di atas api sebanyak 3x. Ditetesi preparat tersebut dengan zat warna Karbol Gentian Violet. Didiamkan selama 30 detik. dibuang zat warna berlebih. Ditambahkan zat pematek Lugol (Iodium : Kalium Iodium : Aquades = 1 : 2 : 300), selama 30 detik. Kemudian dicuci dengan air. dibilas preparat dengan alkohol 96% selama 2 detik hingga zat warna larut kemudian dibilas dengan akuades. ditetesi preparat dengan pewarna safranin. Didiamkan selama 30 detik. Buang kelebihan zat warna. Bilas dengan akuades. Dikeringkan preparat. http://lib.unimus.ac.id Lampiran 3. Skema pembuatan isolat bakteri S.aureus dan S.epidermidis Strain murni dari media BHI inokolasi pada media MSA Mengamati makroskopis pada Mengamati mikroskopis media MSA : Pewarnaan Gram Warna : abu-abu Gram positif : warna ungu Bentuk : Bulat Gram negatif : warna merah Konsistensi : Smoot Elevasi : Cembung Mengamati warna media MSA : Warna kuning : S.aureus Warna pink : S.epidermidis Gambar 1 Bagan Skema Pembuatan Isolat bakteri S.aureus dan S.epidermidis http://lib.unimus.ac.id Lampian 4. Dokumentasi penelitian Gambar 2. koloni S.aureus (AU) dan S.epidermidis (EPI) pada media MSA Gambar 2. Pewarnaa Gram Gambar 3. Ekstrak maserasi kunyit Gambar 3. Ekstrak infusum maserasi konsentrasi 5, 10, 25 dan, 50% kunyit konsentrasi 25, 50, 75 dan, 100% Gambar 4. Larutan uji dengan berbagai metode ekstraksi ( maserasi, perasan lansung, infusum dan serat halus kunyit http://lib.unimus.ac.id Gambar 5. Hasil uji daya hambat ekstraksi cara infusum kunyit dengan paper disk konsentrasi 100, 75, 50 dan, 25 % terhadap bakteri S.aureus Gambar 6. Hasil uji daya hambat ekstraksi cara infusum kunyit dengan paper disk konsentrasi 100, 75, 50 dan, 25 % terhadap bakteri S.epidermidis http://lib.unimus.ac.id 100% 25% 100% 25% Gambar 7. Hasil uji daya hambat ekstraksi cara infusum kunyit dengan sumuran konsentrasi 100 % dan 25 % terhadap bakteri S.aurues dan S.epidermidis Gambar 7. Hasil uji daya hambat ekstraksi cara maserasi kunyit dengan sumuran konsentrasi 50 % terhadap bakteri S.aurues dan S.epidermidis http://lib.unimus.ac.id Gambar 8. Suspensi S.auareus dan S.epidermidis pengenceran 107 dan Infusa kunyit konsentrasi 100 % dengan waktu kontak 30 Menit Gambar 9. Hasil uji daya kontak terdapat pertumbuhan S.aureus dan S.epidermidis setelah dikontakkan 30 menit pada konsentrasi 100% yaitu 10x107 Cfu/ml. http://lib.unimus.ac.id 100% 100% Gambar 9. Hasil uji serat halus dan serat infusum kunyit konsentrasi 100% terhadap pertumbuhan S.aureus dan S.epidermidis Gambar 9. Hasil uji kontrol positif (kloramfenikol) terhadap pertumbuhan S.aureus (24 mm) dan S.epidermidis (29) http://lib.unimus.ac.id S. aureus S. epidermidis AMP Gambar 10. Hasil uji kontrol positif (ampisilin) terhadap pertumbuhan S.aureus dan S.epidermidis Gambar 9. Hasil uji ekstrak buah pala konsentrasi 25 dan 35 % terhadap pertumbuhan S.aureus dan S.epidermidis. http://lib.unimus.ac.id Lampiran 5. Hasil zona hambat ekstraksi kunyit cara maserasi dan infusum metode disk diffution san sumuran. Tabel 1 hasil zona hambat ekstrak kunyit metode maserasi Bakteri 5% - S. aureus S. epidermidis Zona Hambat Ekstrak Kunyit (mm) Paper disc Sumuran 10% 25% 50% 5% 10% 25% 50% - Kontrol (-) (+) 24 29 Tabel 42 hasil zona hambat ekstrak kunyit metode Infusun Bakteri 5% - S. aureus S. epidermidis Zona Hambat Infusum Kunyit (mm) Paper disc Sumuran 10% 25% 50% 5% 10% 25% 50% - Kontrol (-) (+) 24 29 Tabel 4.3 hasil uji zona hambat ekstrak kunyit metode Infusun Bakteri S. aureus S. epidermidis Zona Hambat Infusum Kunyit (mm) Paper disk (100%) Kontrol 24 29 Tabel 4.4 Hasil uji spread plate dengan ekstrak kunyit metode Infusun Bakteri S. aureus S. epidermidis Hambat Infusum Kunyit (100%) Waktu kontak (30 menit) Kontrol Koloni tak terhitung Koloni tak terhitung Koloni tak terhitung Koloni tak terhitung Tabel 4.5 Hasil uji zona hambat dengan serat halus kunyit Bakteri S. aureus S. epidermidis Zona Hambat Serat Kunyit (mm) Sumuran (100%) Kontrol 24 29 Tabel 4.6 Hasil uji kontrol positif (ampisilin) dan kontrol negatif akuades steril Bakteri S. aureus S. epidermidis Zona Hambat Kontrol (mm) Ampisilin Akuades Steril - http://lib.unimus.ac.id Tabel 4.7 Hasil uji kontrol positif (Kloramfenikol) dan kontrol negatif (akuades steril) Bakteri S. aureus S. epidermidis Zona Hambat Kontrol (mm) Kloramfenikol Akuades Steril 24 29 - http://lib.unimus.ac.id DAFTAR RIWAYAT HIDUP A. DATA PRIBADI Nama Lengkap : Abdullatif Jenis Kelamin : Laki-Laki Tempat dan Tanggal Lahir : Dompu, 12 Desember 1995 Alamat : Dusun Daha Barat RT 005/RW 002 Kelurahan Daha Kecamatan Hu‟u Kabupaten Dompu Provinsi Nusa Tenggara Barat B. RIWAYAT PENDIDIKAN 1. Tahun 2001 – 2007 : SDN 1 Hu‟u Dompu NTB 2. Tahun 2007 – 2009 : SLTP Negeri1 Hu‟u Dompu NTB 3. Tahun 2009 – 2012 : SLTA Negeri 1 Hu‟u Dompu NTB 4. Tahun 2009 – 2012 : DIII Analis Kesehatan STIKes Mega Rezky Makassar 5. Tahun 2015 – 2016 : DIV Analis Kesehatan UNIMUS http://lib.unimus.ac.id
