BAB III METODE PENELITIAN 1.1 Lokasi dan Waktu Penelitian 3.1.1

BAB III
METODE PENELITIAN
1.1
Lokasi dan Waktu Penelitian
3.1.1 Lokasi penelitian
Lokasi penelitian dilakukan di Kos Smart Center Kota Gorontalo dan
pengujiannya dilaksanakan di laboratorium.
3.1.2 Waktu penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Desember dari tanggal 3 sampai
tanggal 30 Tahun 2013.
1.2
Desain Penelitian
Metode penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode
survei deskriptif dengan pemeriksaan laboratorium, yaitu untuk mengambarkan
jumlah bakteri E.coli terhadap lama penggunaan Air Minum Isi Ulang (AMIU)
sumber depot pada penghuni Kos Smart Center Kota Gorontalo.
1.3
1.
Definisi operasional dan kriteria objektif
Air Minum Isi Ulang (AMIU)
Air Minum Isi Ulang (AMIU) yang diperoleh pada penghuni Kos Smart
Center dari pengisian isi ulang di depot air minum baik dengan metode
chlorinasi, aerasi, filtrasi dan penyinaran dengan sinar ultraviolet.
2.
Lama penggunaan
Air Minum Isi Ulang (AMIU) jangka waktu yang dibutuhkan oleh penghuni
Kos Smart Center dalam menggunakan Air Minum Isi Ulang (AMIU) dari
sejak dibeli sampai diisi kembali.
3.
Jumlah bakteri E.coli
a) Definisi
Yang dimaksud dengan jumlah bakteri E.coli pada penelitian ini adalah
banyaknya bakteri E.coli yang ditemukan
pada Air Minum Isi Ulang
(AMIU) di Kos Smart Center adalah ditinjau dengan menggunakan metode
MPN (Most Probable Number).
(b Kriteria objektif
Memenuhi syarat jika jumlah bakteti E.coli 0/100 ml.
Tidak memenuhi syarat jika jumlah bakteri E. coli lebih dari 0/100 ml.
1.4
Populasi dan Sampel
3.4.1 Populasi
Populasi dalam penelitian ini adalah seluruh Air Minum Isi Ulang (AMIU)
yang digunakan oleh penghuni Kos Smart Center.
3.4.2 Sampel
Pengambilan sampel dalam penelitian adalah teknik Total Sampling yaitu
teknik penentuan sampel yang menjadikan semua anggota populasi sebagai
sampel di dalam melakukan penelitian (Sugiono 2005). Maka sampel dalam
penelitian ini adalah seluruh Air Minum Isi Ulang (AMIU) yang digunakan oleh
penghuni Kos Smart Center sebanyak 19 galon,setiap 1 galon diambil 100 ml Air
Minum Isi Ulang (AMIU) sebagai sampel.
1.5
Teknik Pengumpulan Data
Pengumpulan data bertujuan untuk mendapatkan data-data yang diperlukan
untuk keperluan penelitian. Data-data yang diambil terdiri dari :
1) Mengunjungi, mengobservasi dan meminta izin kepada pemilik Kos Smart
Center untuk melakukan penelitian.
2) Wawancara dengan penghuni Kos Smart Center yang menggunakan Air
Minum Isi Ulang (AMIU).
3) Pengambilan sampel Air Minum Isi Ulang (AMIU) yang digunakan oleh
penghuni Kos Smart Center yaitu dilihat dari kualitas Air minum tersebut.
4) Pemeriksaan jumlah bakteri E.coli
pada sampel Air Minum Isi Ulang
(AMIU) di laboratorium.
1.6
Instrumen Penelitian
1) Wawancara
Wawancara digunakan oleh peneliti untuk mendapatkan informasi yang
berkaitan dengan variable yang diteliti.
2) Botol sampel
Botol sampel digunakan untuk menyimpan Air Minum Isi Ulang (AMIU).
3) Coolbox
Cool box digunakan untuk menyimpan sampel Air Minum Isi Ulang
(AMIU) yang telah diberi kode sampel.
4) Metode MPN (Most Probable Number)
a.
Alat: Tabung reaksi, Tabung durham, Cawan petri, Gelas ukur, Dispo 1 ml,
Jarum ose, Vortex, Hot Plate, Neraca, Inkubator, Oven, Autoclave, Gelas
kimia, Aluminium foil, Pengaduk, Botol sampel, Galon, Coolbox, Kapas,
dan Bunsen.
b.
Bahan: Aquades, Laktosa Broth, Bromo Thymol Blue, Eosin Methylen Blue
Agar dan Air Minum Isi Ulang (AMIU).
Alat dan bahan yang digunakan dan diperlukan dalam melakukan
pengamatan untuk mengetahui bakteri yang terdapat dalam Air Minum Isi Ulang
(AMIU) yang menjadi sampel dalam penelitian ini.
1.6.1 Langkah-langkah yang dilakukan sebelum pengambilan sampel
a) Proses Sterilisasi botol sampel sebelum pengambilan sampel
1.
Menyiapkan Botol sampel terlebih dahulu dan menggunakan botol sampel
yang tertutup rapat
2.
Membersihkan botol bilas hingga dua kali, kemudian disterilkan selama 60
menit dengan suhu 200 oC dalam oven
3.
Membungkus botol yang sudah disterilkan dengan aluminum foil
4.
Menyimpan botol yang sudah terbungkus tadi kedalam coolbox dengan
rapi.
b) Cara Pengambilan Sampel Air Minum Isi Ulang (AMIU) :
1.
memilih kran dispenser yang sering digunakan
2.
Mulut kran dispenser disterilkan dengan alkohol
3.
Setelah disterilkan kran, kran dispenser dibuka dengan aliran yang sedang,
lalu ditampung di dalam botol sampel
4.
Air ditampung kira-kira 3/4 volume botol
5.
Setelah selesai lalu botol diberi kertas label yang telah disiapkan
6.
memasukkan sampel ke dalam botol sampel dan dimasukkan ke dalam
coolbox
7.
Untuk pemeriksaan minimal diambil air 100ml. Botol sampel tidak boleh
terisi penuh karena :
a.
Memberi kesempatan bakteri untuk tetap hidup
b.
Memudahkan dalam penggojokan sampel.
2.6.2 Cara kerja di Laboratorium :
Pengujian kualitas Air Minum Isi Ulang (AMIU) dilakukan dengan
menggunakan uji penduga dan uji penguat.
1.
a.
Uji penduga
Membuat pengenceran dari sampel
yang akan diperksa mulai dari
pengenceran 10-1, 10-2, 10-3 atau 10-4, 10-5, 10-6.
b.
Menyediakan 12 tabung reaksi, 3 tabung berisi 9 ml aquades steril, 9
tabung berisi 9 ml laktosa broth (LB).
c.
Menyediakan sampel sebanyak 100 ml.
d.
Mengambil 1 ml dari sampel, masukan ke dalam tabung pertama (isi
aquades) kocok sampai homogen, hingga kosentrasi larutan dalam tabung
pertama 10 -1.
e.
Mengambil 1 ml dari tabung pertama masukan kedalam tabung kedua,
kocok sampai homogen, hingga kosentrasi larutan didalam tabung kedua
menjadi 10-2, dan buat juga pengenceran 10-3.
f.
Mengambil larutan dari tabung 10-1, sebanyak masing-masing 1 ml untuk
3 tabung (isi LB 9 ml) 10-1, kemudian ambil larutan dari tabung 10-2,
sebanyak masing-masing 1 ml untuk 3 tabung 10-2, juga untuk pengenceran
10-3.
g.
Menginkubasi dengan suhu 37 oC selama 2 x 24 jam.
h.
Mengitung jumlah tabung reaksi yang positif (di tandai dengan adanya
gas pada tabung durham atau kekeruhan). Lihat daftar MPN (Most
Probable Number) untuk menghitung jumlah bakteri per ml kemudian
kalikan dengan 1/pengenceran di tengah.
2.
Uji penguat
a.
Jarum Ose disterilkan terlebih dahulu.
b.
mengambil sampel pada uji penduga yang positif dengan menggunakan
jarum Ose.
c.
Digoreskan pada media EMBA dengan goresan sinambung.
d.
Kemudian diinkubasi selama 24 jam pada suhu 30 oC.
e.
Apabila koloni bakteri berwarna hijau metalik maka positif E.coli.
1.7
Teknik Analisis Data
Data yang terkumpul dalam penelitian ini dianalisis secara univariat.
Analisis univariat merupakan penyajian data secara deskriptif yang hanya
mempersoalkan satu variabel yang dalam penyajian berbentuk tabel distribusi
frekuensi dan analisa presentase, yaitu jumlah bakteri E.coli pada Air Minum Isi
Ulang (AMIU) hasil yang didapatkan akan dibandingkan dengan batas normal
jumlah
E.coli yakni
air minum tidak diperbolehkan mengandung bakteri
Coliform dan E.coli menurut Keputusan Mentri Kesehatan No. 907 Tahun 2002.