PENGARUH EKSTRAIC J W E (Zingiber officittale Roscoe) SEGAR DAN BERTUNAS TERHADAP PROLIFERASI BEBERAPA ALUR SEL KANKER DAN NORMAL Oleh : lCEU AGUSTINISARI F 30.0708 1998 PAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN TNSTITUT PERTANiAN ROGOR BOGOR Ice11 Agustinisari, F30.0708, PENGARUH EKSTRAK JAHE (Z~ttg~ber Officrnale Roscoe) SEGAR DAN BERTUNAS TERHADAP PROLIFERASI ALUR SEL KANKER DAN PRIMER Di bawah bimbingan Dr. Ir. Fransisca R Zaliaria, MSc dan Ir. Arif Hartoyo. Salah satu upaya yang dapat dilakukan untuh ~ncncegahkanker adalah dengan mengkonsumsi bahan pangan yang terbukti mempunyai aktifitas antikanker termasuk jenis bahan pangan yang berpotensi dalam pencegahan kanker Jahe Rempah- rempah ini sudah sangat dikenal dan luas penggunaannya, baik sebagai bumbu dapur maupun sebagai obat tradisional Untuk itu, dilakukan penelitian yang bertujuan niengetahui pengaruh ekstrak air jahe dan ekstrak etanol jalie terhadap proliferasi sel-sel kanker maupun sel normal Dalam penelitian ini akan diuji enam jenis ekstrak Keenam ekstrak tersebut adalah, ekstrak air jahe segar (JSA), ekstrak air jahe bertunas (JRA), ekstrak air jahe segar dengan berat molekul kurang dari 8 kDa (JSAcSkDa), ekstrak air jahe bertunas dengan berat molekul kurang dari 8 kDa (JBA<SkDa), ekstrak etanol jahe segar (JSE) dan ekstrak etanol jahe bertunas Keenam jenis ekstrak tersebut distandarisasi, sehingga mempunyai total padatan terlarut sebesar 1% Kemudian ekstrak jahe diencerkan dengan media RPh.II-1640, hingga didapat empat tingkat pengenceran, yaitu pengenceran 0 (tidak diencerkan), pengenceran dua kali, pengenceran tiga kali dan pengenceran empat kali Ekstrak jahe ditambahkan ke dalam kultur media sel TI-1P-I, K-562 , A549 dan Untuk m e n y k u r aktifitas proliferasi ditambahkan timidin beradioaktif yang Vero akan berinkorporasi ke dalam DNA sel yang berproliferasi Dari hasil penelitian diketahui bahwa semua jenis ekstrak jahe sampai dengan pengenceran tiga kali (kecuali JBE pengenceran dua kali) menimbulkan efek penghambatan proliferasi sel THP-1 yang berbeda nyata dengan kontrolnya pada taraf uji 0,05 Sementara itu, terhadap sel I<-562 semua jenis ekstrak jahe pada empat tingkat pengenceran (kecuali JBA<SkDa pengenceran tiga kali) memberikan pengaruh dalam penghambatan proliferasi yang berbeda nyata dengan kontrol pada taraf uji 0,OS Pada kultur sel monolayer (sel selapis) yaitu alur sel A549, ekstrak jahe dapat menghambat proliferasi sel, tetapi efek penghambatan tersebut tidak berbeda nyata dengan kontrolnya Sementara, pada kultur sel Vero yang mempakan sel normal, beberapa jenis ekstrak jahe berpengaruh nyata dalam penghambatan proliferasi sel Jenis-jenis ekstrak jahe tersebut adalah JSA tanpa pengenceran, JBA tanpa pengenceran, JBA pengenceran dua kali, JBE tanpa pengenceran dan JBE pengenceran dua kali Dengan demikian dapat dikatakan bahwa semua jenis ekstrak jahe yang diuji dalam penelitian ini pada konsentrasi tertenttl dapat menghambat proliferas1 sel-sel TI+-I, K-562, AS49 dan Vero Pada umumnya persentase indeks penghambatan proliferasi sel pada tiap tingkat pengenceran tidak berbeda nyata satu sama lain Tetapi ada kecenderungan bahwa ekstrak jahe konsentrasi awal (tanpa pengenceran) menimbulkan penghambatan proliferasi sel lebih besar daripada yang ditimbulkan oleh ekstrak jahe pada tingkat pengenceran selanjutnya Ekstrak jahe yang diuji dalam penelitian ini cenderung lebih rnenghambat proliferasi sel yang berkembang biak dalam bentuk suspensi (THP-1 dan I<-562) daripada sel yang berkembang biak dalam bentuk sel selapis (A549 dan Vero) Seperti telah disebutkan di atas, ekstrak jahe yang diuji ini selain menghambat proliferasi sel kanker (Sel THP-I, K-562 (tan A549), ji~gamenghambat proliferasi sel normal (sel Vero) Walaupun demikian, dibandingkan efek penghambatannya terhadap sel kanker, ekstrak jahe 'dapat dikatakan kurang menghambat sel normal Untuk mengetahui komponen dalam ekstrak jahe yang bersifat antiproliferatif, perlu dilakukan identifikasi komponen PENGARUH EKSTRAIC JANE (Zirtgiber OfJicinale Roscoe) SEGAR DAN BERTUNAS TERZIADAP PROLIFERASI BEBERAPA ALUR SEL KANICER DAN NORMAL Sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Teknologi Pertanian Pada Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor Oleh Iceu Agustinisari F 30.0708 1998 JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAN GIZl FAKULTAS TEICNOLOGI PERTANIAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR INSTITUT PERTANIAN BOGOR FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN PENGARUN EKSTRAK JANE (Zingiber Offinafe Roscoe) SEGAR DAN BERTUNAS TE DAP PROLIFERASI BEBERAPA ALUR SEL KANKER DAN NORMAL Sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Teknologi Pertanian Pada Jumsan Teknologi Pangan dan Gizi Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor Oleh Iceu Agustinisari F 30.0708 Dilahirkan di Subang tanggal 8 Agustus 1974 Tanggal lulus, 6 Januari 1998 Ir. Arif Hartovo Dosen Pembimbing I1 Dr. Ir. Fransisca R.Zakaria, MSG Dosen Pembimbing I KATA PENGANTAR Segala puji hanya bagi Allah SWT, yang telah memberikan rahmah dan hidayahNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar sajana. Skripsi ini berisi laporan hasil dari penelitian yang dilakukan penulis selama lebih kurang delapan bulan. Jangka waktu tersebut terhitung dari bulan Maret sampai dengan bulan Oktober 1997. Dalam kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih atas segala bimbingan dan bantuan yang telah diberikan selama penelitian dan selama penulisan skripsi ini kepada : 1. Ibu Dr. Ir. Fransiska R. Zakaria, MSc sebagai dosen pembimbing I yang telah banyak meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan 2. Bapak Ir. Arif Hartoyo sebagai dosen pembimbing I1 3 . Ibu Ir. Nuri A n d a w l a n , MSi dan Bapak Ir. Alfi Khatib atas kesediaannya menjadi dosen penguji 4. Ibu Ir. Endang Prangdimurti dan Ibu Ir. Tejasari, MS yang telah banyak memberikan bantuan dan masukan dalam penelitian dan penyelesaian skripsi 5. Pusat Studi Satwa Primata-Bogor dan US Narnnl-2 beserta segenap staf yang telah memberi keleluasaan untuk menggunakan peralatan yang dibutuhkan selama penelitian 6. Mama, Bapak , adik-adik Wulan dan Pupung, yang telah rnemberikan dukiingan rnoril tiada henti 7 Mbak Silmi, Mbak Anis dan Uda Bus Irwan atas bantuannya selama penelitian 8. Rekan satu penelitian, Fitri Yuliasari atas kerja sama dan bantuannya 9. Rekan-rekan di Laboratorium Biokimia TPG Yuliarni, Ispur, Ari, Vera, Olih, Kami, Aji, Dedi, Elfi dan Husna, juga Meti, Desi, Edwin, Yono, Wisnu, Tatik, Rosi, Dian dan semua rekan TPG 30 yang tidak dapat disebutkan satu persatu dalam lembar ini 10. Para teknisi laboratorium, Pak Dunung, Pak Edi, Pak Gatot, Bapak Sobirin, Mbak Ida, Mbak Navi, dan Mbak Ari atas segala bantuannya 11. Teman-teman di Ponytail dan di Sindang Barang 408, Imel, Baby, Rini, Rita, Wida dan Tanti atas segala kebaikannya selama tinggal bersama. Penulis menyadari dalam pembuatan skripsi ini masih banyak kekurangan. Unttlk itu penulis mohon maaf . Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi penibaca. Bogor. Pebruari 1998 Penulis ... KATA PENGANTAR 111 DAFTAR IS1 v DAFTAR TABEL ........ .... ........ . . . . . .. .. . . . . . . . . . . . . . . DAFTAR GAMBAR DAFTAR LAMPIRAN . ..... . ...... . ... x xi .......,.... . . .. .. . . . . . .. . . . . . . , . . .. . .. I. PENDAKULUAN xv 1 11. TMJAUAN PUSTAKA A. JAHE 4 1. Minyak Atsiri ......... ...... .. ..................... . . .. . . . .. . . . . . . . . . . . . . .. . 7 8 3 . Pertunasan Jahe 10 4. Manfaat Jahe II B . METODE EKSTRAKSI 12 1 . Ekstraksi Oleoresin 12 13 14 D. BAHAN PANGAN SEBAGAI ANTI KANKER E. ALUR SEL ((:ELI, LINE) 1 . Alur Sel THP-1 ............ . . . ... . ... 16 18 20 2. Alur Sel K-562 20 3. Alur Sel A549 20 4. Alur Sel Vero 21 F. KULTUR SEL 21 G. PROLIFERASI SEL 24 111. BAHAN DAN METODE A. BAHAN DAN ALAT 27 B. METODE PENELITIAN 29 1. Pembuatan Ekstrak Jahe 29 1.1. Ekstraksi Dengan Etanol 1.2. Penentuan Residu Etanol . . . .. . . .. .. . . . 29 ... ... . . . . . ... . .. . .. 1.3. Ekstraksi Dengan Air 30 30 2. Metode Analisa Ekstrak 2.1. Kadar Protein 31 2.2. Kadar Lemak 32 2.3. Penentuan dan Penyamaan Total Padatan Terlarut .......... ........ . 33 2.4. Penentuan Total Fenol 33 3. Pemeliharaan Sel 3.1. Pemeliharaan Suspensi Sel 3.2. Pemeliharaan Sel Selapis .............................. . ....... . 3.3. Penghitungan Sel 34 . . . 35 37