KEBERADAAN BAKTERI PATOGEN Vibrio cholerae
advertisement
TESIS KEBERADAAN BAKTERI PATOGEN Vibrio cholerae PADA BEBERAPA HASIL PERIKANAN YANG DIJUAL DI PASAR TRADISIONAL KOTA DENPASAR I WAYAN YOGI WIDYASTANA PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS UDAYANA DENPASAR 2015 TESIS KEBERADAAN BAKTERI PATOGEN Vibrio cholerae PADA BEBERAPA HASIL PERIKANAN YANG DIJUAL DI PASAR TRADISIONAL KOTA DENPASAR I WAYAN YOGI WIDYASTANA NIM 1092261013 PROGRAM MAGISTER PROGRAM STUDI BIOLOGI PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS UDAYANA DENPASAR 2015 i TESIS KEBERADAAN BAKTERI PATOGEN Vibrio cholerae PADA BEBERAPA HASIL PERIKANAN YANG DIJUAL DI PASAR TRADISIONAL KOTA DENPASAR Tesis untuk Memperoleh Gelar Magister Pada Program Magister, Program Studi Biologi Program Pascasarjana Universitas Udayana I WAYAN YOGI WIDYASTANA NIM 1092261013 PROGRAM MAGISTER PROGRAM STUDI BIOLOGI PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS UDAYANA DENPASAR 2015 ii Lembar Pengesahan TESIS INI TELAH DISETUJUI PADA TANGGAL 23 JUNI 2015 Pembimbing I, Pembimbing II, Dr. Dra. Retno Kawuri, M.Phil. NIP . 19610112 198803 2 002 Ir. A.A.Gde Raka Dalem, M.Sc.(Hons) NIP. 19650708 199203 1 004 Mengetahui, Ketua Program Studi Magister Biologi Program Pascasarjana Universitas Udayana, Direktur Program Pascasarjana Universitas Udayana, Ir. Ida Ayu Astarini, M.Sc., Ph.D NIP.19680327 199302 2 001 Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, Sp.S(K) NIP. 19590215 198510 2 001 iii Tesis ini Telah Diuji pada Tanggal 18 Juni 2015 Panitia Penguji Tesis Berdasarkan SK Rektor Universitas Udayana, No: 1779/UN14.4/HK/2015, Tanggal 16 Juni 2015 Ketua : Dr. Dra. Retno Kawuri, M.Phil. Anggota : 1. Ir. A.A. Gde Raka Dalem, M.Sc.(Hons) 2. Dr. I Ketut Ginantra, S.Pd., M.Si. 3. Drs. Ida Bagus Gede Darmayasa, M.Si. 4. Ni Made Suartini, S.Si., M.Si. iv SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT Saya yang bertandatangan di bawahini : Nama : I Wayan Yogi Widyastana NIM : 1092261013 Program Studi : Magister Biologi Judul Tesis : KEBERADAAN BAKTERI PATOGEN Vibrio cholerae PADA BEBERAPA HASIL PERIKANAN YANG DIJUAL DI PASAR TRADISIONAL KOTA DENPASAR Dengan ini menyatakan bahwa Tesis ini bebas plagiat. Apabila dikemudian hari terbukti plagiat dalam tulisan ini, maka saya bersedia menerima sanksi sesuai peraturan Mendiknas RI No. 17 Tahun 2010 dan Peraturan Perundang-undangan yang berlaku. Denpasar, 18 Juni 2015 Yang membuat pernyataan (I Wayan Yogi Widyastana) v UCAPAN TERIMA KASIH Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Ida Sang Hyang Widhi Wasa/Tuhan Yang Maha Esa, karena atas rahmat-Nya penulis dapat menyelesaikan tesis yang berjudul, Keberadaan Bakteri Patogen Vibrio cholerae pada Beberapa Hasil Perikanan yang Dijual di Pasar Tradisional Kota Denpasar. Tesis ini disusun sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat S-2 pada Program Studi Magister Biologi Pascasarjana Universitas Udayana. Dalam penyusunan tesis ini, penulis banyak mendapat bantuan, bimbingan, dukungan serta bantuan dana dari berbagai pihak. Pada kesempatan ini, penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih kepada: 1. Dr. Dra. Retno Kawuri, M.Phil., selaku dosen pembimbing I atas segala bimbingan, saran, dukungan, serta waktu selama penulis melakukan penelitian dan penyusunan tesis ini. 2. Ir. A.A. Gde Raka Dalem, M.Sc.(Hons), selaku pembimbing II atas segala bimbingan, saran, dukungan, serta waktu selama penulis melakukan penelitian dan penyusunan tesis ini. 3. Rektor Universitas Udayana, Prof. Dr. dr. Ketut Suastika, Sp.PD-KEMD atas kesempatan dan fasilitas yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti dan menyelesaikan pendidikan Program Magister di Universitas Udayana 4. Direktur Program Pascasarjana Universitas Udayana Prof. Dr. A. A. Raka Sudewi, Sp.S(K), atas kesempatan yang diberikan kepada penulis untuk vi menjadi mahasiswa Program Magister pada Program Pascasarjana Universitas Udayana. 5. Ketua Program Studi Magister Biologi Program Pascasarjana Universitas Udayana Ir. Ida Ayu Astarini, M.Sc., Ph.D atas bimbingan yang diberikan selama mengikuti perkuliahan. 6. Dr. I Ketut Ginantra, S.Pd., M.Si., Drs. Ida Bagus Gede Darmayasa, M.Si., Ni Made Suartini, S.Si., M.Si. atas masukan dan saran untuk menyempurnakan penulisan tesis ini. 7. Drs. Yan Ramona, M.App.Sc., Ph.D dan Ir. I Nengah Sujaya, M.Agr.Sc., Ph.D. atas bimbingannya selama penulis melakukan penelitian. 8. Seluruh dosen dan staf pegawai Program Studi S2 Biologi Universitas Udayana atas saran, bimbingan, arahan, semangat, serta kemudahan yang diberikan selama penulis menjadi mahasiswa. 9. Seluruh keluarga tercinta, Bapak Drs. I Ketut Wedhana, M.M, Ibu Mugi Hastuti, S.Pd, dan adik Ni Made Widyasari, S.Si, atas dukungan moral, semangat, dan material sehingga tesis ini dapat terselesaikan. 10. Ni Putu Purnama Dewi, S.Pd, atas dukungan semangat dan masukannya selama penulisan tesis ini. 11. Seluruh teman-teman S2 Program Studi Biologi angkatan 2010 dan 2011, yang tidak dapat disebutkan satu persatu atas segala dukungan dan semangat yang diberikan selama penulis melakukan penelitian dan pembuatan tesis ini. vii Penulis menyadari bahwa tesis ini masih jauh dari sempurna. Untuk itu penulis mengharapkan berbagai kritik dan saran dalam penyempurnaan tesis ini. Semoga tesis ini dapat berguna dan bermanfaat bagi ilmu pengetahuan, pembaca, serta bagi mahasiswa Program Studi Magister Biologi Universitas Udayana. Denpasar, Juni 2015 Penulis viii KEBERADAAN BAKTERI PATOGEN Vibrio cholerae PADA BEBERAPA HASIL PERIKANAN YANG DIJUAL DI PASAR TRADISIONAL KOTA DENPASAR ABSTRAK Penyakit kolera adalah penyakit yang disebabkan oleh bakteri Vibrio cholerae yang merupakan salah satu bakteri patogen yang bisa didapat dari hasil perikanan yang terkontaminasi bakteri V. cholerae. Disisi lain, sebagian besar warga Indonesia gemar menyantap makanan laut (seafood) dan mereka biasanya memperoleh hasil perikanan tersebut dari pasar tradisional terdekat. Namun, kurang higienisnya proses penyediaan bahan baku tersebut memungkinkan adanya kontaminasi dari bakteri V. cholerae. Studi ini bertujuan untuk mengetahui keberadaan bakteri patogen V. cholerae pada beberapa hasil perikanan yang dijual di pasar tradisional Denpasar. Studi ini menggunakan metode observational deskriptif dengan teknik pengambilan Purposive Random Sampling. Jumlah sampel yang diambil sebanyak 27 sampel bersumber dari Ikan Tongkol (Euthynnus affinis) 9 sampel, Udang Kelong (Penaeus indicus) 9 sampel, dan Kerang Kijing (Anodonta sp.) 9 sampel pada tiga pasar tradisional di Kota Denpasar, diantaranya Pasar Ketapian, Pasar Kumbasari, dan Pasar Pidada. Semua sampel dikultur dengan media Alkaline Peptone Water (APW) dilanjutkan dengan media Thiosulfate Citrate Bile salt Sucrose (TCBS), Uji Biokimiawi, dan Uji Serologi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa 2 sampel di Pasar Ketapian terbukti positif mengandung bakteri patogen V. cholerae, yaitu udang dengan kode UA2 dan kerang dengan kode KA2. Sedangkan di dua pasar tradisional lainnya tidak ditemukan adanya bakteri V. cholerae. Kata Kunci: Vibrio cholerae, pasar tradisional Kota Denpasar, hasil perikanan ix THE EXISTENCE OF PATHOGENIC BACTERIA Vibrio cholerae IN SOME FISHERY PRODUCTS THAT SOLD IN DENPASAR CITY TRADITIONAL MARKET ABSTRACT Cholera is a disease that caused by Vibrio cholerae which is one of pathogenic bacteria that can be gained from contaminating of fishery products. In the other hand, Indonesian people delight in consuming seafood; furthermore, they usually acquire the fishery products at the nearby traditional market. However, the unhygienic process of equipping materials possibly increases the contamination of V. cholerae. The purpose of this study is to find out the existence of V. cholerae in the fishery products in some Denpasar traditional markets. This study used observational descriptive method with Purposive Random Sampling technique. The number of samples that were taken as many as 27 samples which are from 9 samples of fishes (Euthynnus affinis), 9 samples of shrimps (Penaeus indicus), and 9 samples of shellfish (Anodonta sp.) which were taken from three traditional markets in Denpasar City, namely Ketapian Market, Kumbasari Market, and Pidada Market. All samples were cultured by Alkaline Peptone Water (APW) media, continued by Thiosulfate Citrate Bile salt Sucrose (TCBS), Biochemical Test and Serology Test. The results of this study were two samples in Ketapian Market were proved to be positive contain of V. cholerae. There were the shrimp with UA2 code and the shellfish with KA2 code. Meanwhile, there were no V. cholerae contaminations in two other traditional markets in Denpasar City. Key Words: Vibrio cholerae, Denpasar City traditional market, and fishery products x RINGKASAN KEBERADAAN BAKTERI PATOGEN Vibrio cholerae PADA BEBERAPA HASIL PERIKANAN YANG DIJUAL DI PASAR TRADISIONAL KOTA DENPASAR Berdasarkan data dari Badan Pusat Statistik (2014), kunjungan wisatawan domestik dan manca negara ke Pulau Bali menunjukan peningkatan yang sangat signifikan, yaitu pada tahun 2013 ke 2014, sebesar 14,89%. Adanya peningkatan jumlah wisatawan yang datang berkunjung ke Bali harus diimbangi dengan terjaganya kebersihan tempat wisata untuk menghindari adanya berbagai macam penyakit. Penyakit kolera adalah penyakit yang disebabkan oleh bakteri Vibrio cholerae yang merupakan salah satu bakteri patogen yang bisa didapat dari hasil perikanan yang terkontaminasi bakteri V. cholerae. Disisi lain, sebagian besar warga Indonesia gemar menyantap makanan laut (seafood) dan mereka biasanya memperoleh hasil perikanan tersebut dari pasar tradisional terdekat. Namun, kurang higienisnya proses penyediaan bahan baku tersebut memungkinkan adanya kontaminasi dari bakteri V. cholerae. Studi ini bertujuan untuk mengetahui keberadaan bakteri patogen V. cholerae pada beberapa hasil perikanan yang dijual di pasar tradisional Denpasar. Studi ini menggunakan metode observational deskriptif dengan teknik pengambilan Purposive Random Sampling. Jumlah sampel yang diambil sebanyak 27 sampel bersumber dari Ikan Tongkol (Euthynnus affinis) 9 sampel, Udang Kelong (Penaeus indicus) 9 sampel, dan Kerang Kijing (Anodonta sp.) 9 sampel pada tiga pasar tradisional di Kota Denpasar, diantaranya Pasar Ketapian, Pasar Kumbasari, dan Pasar Pidada. Isolasi bakteri V. cholerae patogen dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi, FMIPA, Universitas Udayana di kampus Bukit Jimbaran dan di UPT. Balai Laboratorium Kesehatan Provinsi Bali, dari bulan Mei sampai dengan Juni 2013. Media yang digunakan untuk isolasi bakteri V. cholerae yaitu, Alkaline Peptone Water (APW) OxoidTM, Media agar Thiosulfate Citrate Bile salt Sucrose (TCBS) OxoidTM, Media Triple Sugar Iron Agar (TSIA) OxoidTM, Media Sulfida Indol Motility (SIM) OxoidTM, Media agar Simmons Citrate OxoidTM , Serum Aglutinasi (Polyvalent, Inaba, Ogawa) Bio Farma dan Aquades steril. Berdasarkan hasil penelitian, diperoleh data bahwa dari beberapa sampel hasil pemeriksaan bakteri patogen V. cholerae yang diambil dari pedagang hasil perikanan pada tiga pasar tradisional, yaitu Pasar Ketapian, Pasar Kumbasari, dan Pasar Pidada terdapat beberapa sampel yang positif mengandung bakteri golongan Vibrio dan bakteri patogen V. cholerae. Sampel yang positif mengandung bakteri patogen V. cholerae yaitu sampel udang dengan kode UA2 dan kerang dengan kode KA2 yang ditemukan di Pasar Ketapian. Kondisi pasar tradisional umumnya kumuh dan berbau tak sedap, dengan lokasi yang kurang tertata rapi serta memiliki higienitas yang lebih buruk dibandingkan dengan pasar modern yang memiliki suasana nyaman dan bersih. Namun dalam hal penyediaan hasil perikanan, baik pasar modern maupun pasar xi tradisional tersebut mendapatkan sumber hasil perikanan dari tempat yang sama, seperti di pasar ikan atau pelabuhan ikan yang sama yang beberapa diantaranya telah terkontaminasi bakteri berbahaya misalnya bakteri V. cholerae (Hidayat dkk., 2006). Jika hasil perikanan tersebut dikonsumsi tanpa pengolahan yang baik, dapat menyebabkan konsumennya terinfeksi penyakit kolera. Selain itu fakta di lapangan bahwa tidak jarang pula para pedagang ikan di pasar tradisional juga kurang memperhatikan kehigeinisan dagangannya (Adawiyah, 2007). Hasil penelitian menunjukkan bahwa sampel hasil perikanan yang terdapat di salah satu pasar tradisional Denpasar sudah terinfeksi bakteri V. cholerae tipe Inaba yaitu pada Pasar Ketapian. Hasil tersebut telah melewati ambang batas persyaratan mutu dan keamanan pangan ikan segar (SNI 01-2729.1-2006). Hasil pemeriksaan tersebut memberi petunjuk bahwa tingkat infeksi terjadi salah satunya disebabkan oleh sistem pengelolaan pelelangan ikan yang kurang baik karena lingkungan yang kurang bersih, sehingga bakteri V. cholerae yang berasal dari laut yang tercemar dapat mencemari pasar tradisional (Badan Riset Kelautan dan Perikanan, 2012). Menurut Purwoko (2007), transmisi utama penyakit kolera ditentukan oleh faktor lingkungan seperti temperatur, kebersihan dan konsentrasi nutrien misalnya zooplankton dalam air. Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan oleh Pribadi (2008), faktor lokasi penjualan, peralatan, yang kurang higienis mempengaruhi adanya kontaminasi dari bakteri V. cholerae. Penyebaran V. cholerae dapat melalui penggunaan es bahan pengawet ikan yang digunakan oleh pedagang ikan yang telah tercemar sebelumnya. Tercemarnya hasil perikanan dapat disebabkan oleh air sungai atau laut yang merupakan sumber hasil perikanan terkontaminasi oleh bakteri V. cholerae (Waluyo, 2004). Bakteri V. cholerae menyebar melalui feses atau kotoran manusia. Bila kotoran yang mengandung bakteri ini mengkontaminasi air sungai atau air laut, maka hasil perikanan yang hidup diperairan tersebut akan terkontaminasi bakteri itu juga (Suriawiria, 2003). Selain itu, bila air yang terkontaminasi ini digunakan untuk keperluan sehari-hari seperti mencuci tangan, maka orang tersebut dapat membawa bakteri V. cholerae. Bila orang tersebut berprofesi sebagai nelayan atau pedagang ikan dan melakukan kontak dengan hasil perikanan, maka hasil perikanan yang disentuhnya dapat terkontaminasi bakteri V. cholerae. Hal ini juga diperkuat dengan pernyataan dari WHO (2004), menyatakan bahwa penularan penyakit kolera dapat melalui manusia yang kurang menjaga kebersihan diri dan lingkungan. Hasil penelitian ini, menunjukkan sampel udang dan kerang yang dijual di pasar tradisional Kota Denpasar, memiliki peluang tercemar bakteri V. Cholerae, walaupun peluang terjadinya pencemaran tersebut tidak tinggi, yaitu 7.4%. Bakteri V. cholerae ditemukan pada sampel udang dengan kode UA2 dan kerang dengan kode KA2 yang terdapat di Pasar Ketapian. xii DAFTAR ISI SAMPUL DALAM ..................................................................................................... i PRASYARAT GELAR ................................................................................................ ii LEMBAR PENGESAHAN ......................................................................................... iii PENETAPAN PANITIA PENGUJI ............................................................................ iv SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT............................................................. v UCAPAN TERIMAKASIH ......................................................................................... vi ABSTRAK ................................................................................................................... ix ABSTRACT ................................................................................................................. x RINGKASAN .............................................................................................................. xi DAFTAR ISI ................................................................................................................ xiii DAFTAR GAMBAR ................................................................................................... xvi DAFTAR TABEL ........................................................................................................ xvii DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................................ xviii BAB I. PENDAHULUAN ........................................................................................... 1 1.1 Latar Belakang ........................................................................................... 1 1.2 Rumusan Masalah ...................................................................................... 3 1.3 Tujuan Penelitian ....................................................................................... 4 1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................................... 4 BAB II. KAJIAN PUSTAKA ...................................................................................... 5 2.1 Wabah Penyakit Kolera dan Penyebarannya ............................................. 5 2.2 Bakteri Vibrio cholerae .............................................................................. 6 2.2.1 Morfologi Vibrio cholerae............................................................... 7 2.2.2 Fisiologi Vibrio cholerae ................................................................. 8 2.2.3 Klasifikasi Vibrio cholerae .............................................................. 9 2.2.4 Patogenesis dan Patologi Vibrio cholerae ........................................ 10 2.3 Kondisi Pasar Tradisional .......................................................................... 12 2.3.1 Pasar Ketapian .................................................................................. 13 xiii 2.3.2 Pasar Kumbasari ............................................................................... 14 2.3.2 Pasar Pidada ..................................................................................... 15 BAB III. KERANGKA BERFIKIR DAN KONSEP PENELITIAN .......................... 16 3.1 Kerangka Berfikir....................................................................................... 16 3.2 Konsep Penelitian....................................................................................... 17 BAB IV. METODE PENELITIAN ............................................................................. 18 4.1 Rancangan Penelitian ................................................................................ 18 4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ..................................................................... 18 4.3 Penentuan Sumber Data ............................................................................. 18 4.4 Variabel Penelitian .................................................................................... 19 4.4.1 Identifikasi dan Klasifikasi Variabel ............................................... 19 4.4.2 Definisi Operasional Variabel ......................................................... 19 4.5 Bahan Penelitian ........................................................................................ 20 4.6 Instrumen Penelitian................................................................................... 20 4.7 Prosedur Penelitian .................................................................................... 20 4.7.1 Pengambilan Sampel Produk Ikan (Ikan, Udang, dan Kerang) ....... 20 4.7.2 Isolasi Bakteri Vibrio cholerae ........................................................ 21 4.7.3 Pengamatan Makroskopis ................................................................ 21 4.7.4 Pengamatan Mikroskopis (Pewarnaan Gram) ................................. 21 4.7.5 Uji Biokimia Bakteri ....................................................................... 22 4.7.5.1 Uji TSIA ............................................................................ 22 4.7.5.2 Uji Motilitas ...................................................................... 22 4.7.5.3 Uji Simmon Citrate ........................................................... 22 4.7.6 Uji Serologi ...................................................................................... 23 4.8 Analisis Data ............................................................................................. 23 BAB V. HASIL PENELITIAN ................................................................................... 24 5.1 Pasar Ketapian ........................................................................................... 24 5.2 Pasar Kumbasari ........................................................................................ 24 xiv 5.3 Pasar Pidada .............................................................................................. 25 BAB VI. PEMBAHASAN ........................................................................................... 27 6.1 Isolasi Bakteri Vibrio cholerae .................................................................. 27 6.2 Kondisi Pasar Tradisional dan Keberadaan Bakteri Vibrio cholerae ........ 30 BAB VII. SIMPULAN DAN SARAN ........................................................................ 34 7.1 Simpulan ................................................................................................... 34 7.2 Saran .......................................................................................................... 34 DAFTAR PUSTAKA .................................................................................................. 35 LAMPIRAN-LAMPIRAN........................................................................................... 39 xv DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Bentuk Sel Bakteri Vibrio cholerae ................................................... 7 Gambar 3.1 Konsep Penelitian............................................................................... 17 xvi DAFTAR TABEL Tabel 5.1 Hasil Pemeriksaan Bakteri Patogen Vibrio cholerae di Pasar Ketapian ............................................................................................. 24 Tabel 5.2 Hasil Pemeriksaan Bakteri Patogen Vibrio cholerae di Pasar Kumbasari .......................................................................................... 25 Tabel 5.3 Hasil Pemeriksaan Bakteri Patogen Vibrio cholerae di Pasar Pidada ................................................................................................. 26 xvii DAFTAR LAMPIRAN 1. Hasil Isolasi dan Identifikasi Bakteri Vibrio cholerae pada Sampel Hasil Perikanan yang diperoleh dari Pasar Ketapian ..................................................... 39 2. Hasil Isolasi dan Identifikasi Bakteri Vibrio cholerae pada Sampel Hasil Perikanan yang diperoleh dari Pasar Kumbasari .............................................. 40 3. Hasil Isolasi dan Identifikasi Bakteri Vibrio cholerae pada Sampel Hasil Perikanan yang diperoleh dari Pasar Pidada .................................................... 41 4. Pertumbuhan Bakteri Vibrio cholerae pada Media Agar TCBS ...................... 42 5. Hasil Streak For Single Colony Bakteri Patogen Vibrio cholerae................... 42 6. Hasil Foto Bakteri Vibrio cholerae Perbesaran 1000 Kali............................... 43 7. Sampel Ikan Tongkol (Euthynnus affinis)........................................................ 43 8. Sampel Udang Kelong (Penaeus indicus)........................................................ 44 9. Sampel Kerang Kijing (Anodonta sp.) ............................................................. 44 10. Standar Mutu Ikan Segar .................................................................................. 45 xviii BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Bali merupakan salah satu tujuan wisata dunia yang merupakan sektor andalan bagi pemerintah Indonesia untuk menjaring devisa negara, karena pulau ini didukung objek wisata dan atraksi wisata yang beranekaragam. Berdasarkan data dari Badan Pusat Statistik (2014), kunjungan wisatawan domestik dan manca negara ke Pulau Bali menunjukan peningkatan yang sangat signifikan dari tahun ke tahun. Jumlah kunjungan wisata ke Bali mengalami peningkatan dari tahun 2013 ke 2014, sebesar 14,89%. Peningkatan kunjungan wisatawan ini seharusnya diimbangi dengan pelayanan yang semakin baik dari waktu ke waktu, terutama pelayanan kepada wisatawan yang berhubungan dengan masalah kesehatan dan kebersihan lingkungan pada objek-objek yang menjadi tujuan wisata. Kesehatan dan kebersihan lingkungan sangat mempengaruhi tingkat kesehatan semua komponen kepariwisataan (wisatawan dan pengelola kepariwisataan). Kondisi lingkungan objek pariwisata yang kurang dijaga kebersihannya akan berpengaruh secara signifikan pada tingkat kesehatan para wisatawan, terutama mereka yang berasal dari negara-negara maju, karena secara umum mereka sangat rentan terhadap infeksi mikroorganisme yang mencemari makanan atau minuman yang dikonsumsi (Nurmaini, 2001). Menurut Wirawan (2008) sebagian besar kasus gangguan kesehatan yang terjadi di Bali adalah masalah infeksi saluran pencernaan, setelah mengkonsumsi makanan yang tercemar oleh berbagai bakteri patogen. 1 2 Provinsi Bali pada tahun 2008 mengalami wabah muntah berak di Banjar Wali, Desa Yeh Embang dan Banjar Bangli, Desa Yeh Embang Kangin, Kecamatan Mendoyo yang disebabkan oleh Vibrio cholerae, pada tanggal 28 Agustus sampai dengan 4 September 2008. Berdasarkan hasil kultur rectal swab dan muntahan pada penderita muntaber ditemukan bakteri V. cholerae. Selain itu, kultur sampel makanan tahu, tempe, pepes pindang, air sungai, sumur, perpipaan desa serta perpipaan banjar positif tercemar bakteri V. cholerae. (Ikayana Kesmas, 2010) Vibrio cholerae merupakan salah satu mikroba penyebab penyakit yang sering ditemukan pada makanan (Siagan, 2002). Bila bakteri ini mencemari makanan dan terkonsumsi dalam jumlah tertentu, maka dapat menyebabkan penyakit kolera. Pada inangnya, bakteri V. cholerae dapat hidup pada permukaan tubuh inangnya (dengan cara menempel) atau pada organ tubuh bagian dalam inangnya, seperti hati, usus dan sebagainya. Dampak langsung bakteri patogen ini adalah terjadinya gangguan tingkat kesehatan inangnya, atau bahkan dalam keadaan tertentu dapat menyebabkan kematian (Pelczar and Chan, 2006). Penyakit kolera ditandai oleh terjadinya diare yang disertai oleh muntahmuntah yang akut dan hebat sebagai akibat dari enterotoksin yang dihasilkan bakteri tersebut. Bentuk gejala klinis yang khas pada penderita adalah dehidrasi, berlanjut dengan rejatan hipovolemik dan asidosis metabolik yang terjadi dalam waktu singkat akibat diare sekretorik. Bila tidak ditanggulangi, dapat mengakibatkan kematian pada penderita ( Jawetz et al., 2007). Vibrio cholerae banyak ditemukan pada permukaan air yang terkontaminasi oleh feses yang mengandung bakteri tersebut (Osawa, 2008). Oleh 3 karena itu, penularan penyakit kolera ini dapat melalui air, makanan, dan sanitasi yang buruk ( Purwoko, 2007). Bakteri V. cholerae dapat dibedakan menjadi 2 jenis berdasarkan toksisitasnya yaitu, V. cholerae serogroup O1 dan O139 dan V. cholerae serogroup non-O1 dan non-O139. V. cholerae serogroup O1 dan O139 merupakan kelompok Vibrio yang bersifat patogen, karena kelompok ini dapat menghasilkan toxin (Cholera Toxin = CT). CT inilah yang menyebabkan terjadinya diare (Tantillo et al., 2004). Penyakit kolera yang disebabkan oleh bakteri V. cholerae penyebarannya dapat berasal dari hasil perikanan yang terkontaminasi bakteri patogen tersebut (Osawa, 2008). Penjualan hasil perikanan banyak ditemukan di berbagai pasar tradisional. Pasar tradisional merupakan salah satu jenis pasar yang biasanya terletak dekat pemukiman masyarakat dimana pasar ini menjual berbagai barangbarang kebutuhan sehari-hari, diantaranya bahan makanan yang salah satunya adalah hasil perikanan. Dalam hal ini, pasar tradisional berperan sebagai sumber tempat jual beli hasil perikanan yang rentan terkontaminasi bakteri V. cholerae jika kondisi dan sanitasi pasar kurang terjaga kebersihannya. Berdasarkan latar belakang tersebut di atas, maka pada penelitian ini dilakukan isolasi bakteri V. cholerae (dari berbagai jenis hasil perikanan di beberapa pasar tradisional kota Denpasar, Bali), sehingga diperoleh informasi tentang keberadaan bakteri V. cholerae yang ditemukan di Denpasar. 1.2 Rumusan Masalah Bagaimanakah keberadaan bakteri V. cholerae patogen yang terdapat pada berbagai hasil perikanan yang dijual di pasar tradisional Denpasar? 4 1.3 Tujuan Penelitian Untuk melihat keberadaan bakteri V. cholerae patogen yang terdapat pada berbagai hasil perikanan yang dijual di pasar tradisional Denpasar. 1.4 Manfaat Penelitian Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi tentang bakteri V. cholerae yang terdapat pada hasil perikanan yang beredar di pasar tradisional Kota Denpasar. Dengan diketahuinya golongan Vibrio yang bersifat patogen, diharapkan dapat dilakukan antisipasi penanggulangan penyebaran penyakit diare yang disebabkan oleh kelompok V. cholerae penghasil toxin. Dalam perspektif yang lebih luas, data yang diperoleh pada penelitian ini diharapkan dapat dipakai sebagai dasar dalam pengembangan vaksin dan antibiotik dimasa yang akan datang, sehingga masyarakat, khususnya para wisatawan manca negara dapat terhindar dari infeksi kuman ini selama mereka berlibur di Bali. 5 BAB II KAJIAN PUSTAKA 2.1 Wabah Penyakit Kolera dan Penyebarannya Kolera adalah salah satu penyakit saluran pencernaan yang bersifat menular, yang disebabkan oleh bakteri V. cholerae. Bakteri ini biasanya masuk ke dalam tubuh melalui air minum yang terkontaminasi, karena sanitasi yang tidak memenuhi standar (Bitton, 2005). Selain itu, bakteri ini juga dapat masuk ke dalam saluran pencernaan melalui makanan yang tidak dimasak dengan benar. Gejala-gejala penyakit kolera yang disebabkan oleh V. cholerae antara lain diare hebat, perut keram, mual, muntah, dan dehidrasi. Kalau gejala diare hebat tersebut dibiarkan atau tidak ditangani dengan baik, maka penderita dapat mengalami kematian. Kematian pada penderita umumnya disebabkan oleh kasus dehidrasi (Dziejman et al., 2002). Pandemi penyakit kolera pertama kali ditemukan di Gangga Delta, suatu bagian dari distrik di India pada tahun 1817 dan berlangsung sampai tahun 1824 (Frerichs, 2010). Pada daerah ini, pandemi kolera telah terjadi sebanyak 7 kali selama 200 tahun terakhir. Selanjutnya penyakit ini menyebar dari India ke Asia Tenggara, Cina, Jepang, Timur Tengah, dan selatan Rusia. Pandemi kedua berlangsung dari tahun 1827-1835 yang tersebar di wilayah Amerika Serikat dan Eropa, yang dilanjutkan dengan pandemi ketiga pada tahun 1839-1856, dimana wabah Kolera meluas sampai Afrika Utara dan mencapai Amerika Selatan, dengan negara yang paling parah terkena dampak wabah kolera di wilayah 5 6 Amerika Selatan pada saat itu adalah Brasil. Pada tahun 1863-1875 terjadi pandemi keempat, wabah Kolera melanda wilayah sub-Sahara Afrika. Pandemi kelima dan keenam berlangsung pada tahun 1881-1896 dan 1899-1923. Mesir, Jazirah Arab, Persia, India, dan Filipina merupakan negara yang terkena dampak paling parah epidemi. Sementara daerah lain yang terkena wabah kolera, adalah Jerman pada tahun 1892 dan Naples 1910-1911. Pandemi akhir atau pandemi ke tujuh terjadi pada tahun 1961 di Indonesia yang ditandai oleh munculnya strain baru, yang dijuluki El Tor, dan masih berlanjut hingga hari ini di negara-negara berkembang (Dziejman et al., 2002). Pandemik ketujuh baru dimulai pada tahun 1961 ketika Vibrio pertama kali muncul dan menyebabkan epidemi kolera di Sulawesi, Indonesia. Penyakit ini lalu menyebar dengan cepat ke Negara Asia timur lainnya dan mencapai Bangladesh pada tahun 1963, India pada tahun 1964 dan kawasan Soviet-Russia pada tahun 1965-1966. Pada januari 1991, epidemi kolera menyerang Amerika latin. Dimulai di Peru, penyakit ini dibawa oleh nelayan ke Ekuador dan Kolombia dan dibawa pelancong ke seluruh Amerika Tengah dan Selatan. Pada tahun pertama wabah ini menyerang, sebanyak 400.000 kasus telah dilaporkan (Frerichs, 2010). 2.2 Bakteri Vibrio cholerae Fillipo Pacini, seorang ahli anatomi asal Italia, merupakan ilmuwan pertama yang berhasil mengisolasi V. cholerae pada tahun 1854. Namun, penemuannya ini kurang dikenal, karena pada masa tersebut masih berkembang Teori Racun (penyakit seperti Kolera disebabkan oleh racun) sehingga penemuan 7 Fillipo Pacini diabaikan oleh komunitas ilmiah (Frerichs, 2010). V. cholerae baru dikenal secara luas sebagai bakteri penyebab penyakit kolera setelah Robert Koch melaporkan hasil penelitiannya pada tahun 1884 (Taneja, 2005). Bakteri V. cholerae umumnya banyak ditemukan pada perairan yang terkontaminasi oleh feces yang mengandung bakteri tersebut, sehingga air dapat dianggap sebagai salah satu media penularan penyakit kolera yang disebabkan oleh bakteri tersebut. Selain itu, makanan yang sanitasinya buruk juga dapat dipakai sebagai medium oleh bakteri ini untuk menyebar dan menularkan penyakit kolera (Murray et al., 2002). 2.2.1 Morfologi Vibrio cholerae Vibrio cholerae termasuk bakteri gram negatif, berbentuk batang bengkok seperti koma dengan ukuran panjang 2-4 µm. (Gambar 2.1). Koch menamakannya Gambar 2.1. Bentuk sel bakteri V. cholerae (Howard and Daghlian, 2012) “kommabacillus”. Bila inkubasi diperpanjang, bentuk bakteri ini bisa berubah menjadi batang yang lurus yang mirip dengan bakteri enterik gram negatif. Bakteri ini dapat bergerak sangat aktif karena mempunyai satu buah flagellum 8 halus pada ujungnya (Monotrikh). Karakteristik morfologi lain dari bakteri ini antara lain, tidak membentuk spora, bentuk koloninya cembung (Convex), Opaque, dan bergranul bila disinari (Matson et al., 2007). 2.2.2 Fisiologi Vibrio cholerae Vibrio cholerae bersifat aerob atau anaerob fakultatif dengan suhu untuk pertumbuhan yang berkisar antara 18 sampai 37°C. Bakteri ini dapat tumbuh pada berbagai jenis media, termasuk media tertentu yang mengandung garam mineral dan asparagin sebagai sumber karbon dan nitrogen. Pertumbuhan V. cholerae akan menjadi lebih baik dan lebih cepat, bila ditumbuhkan pada medium padat Thiosulfate-citrate-bile-sucrose (TCBS). Pada media ini, koloni V. cholerae berwarna kuning, sehingga dapat dibedakan dari koloni bakteri lain untuk memudahkan dalam proses isolasinya (Purwoko, 2007) Umumnya V. cholerae memerlukan pH netral untuk pertumbuhannya dengan kecepatan optimum dan mengalami laju kematian yang sangat cepat pada pH asam (Yuwono, 2005). Namun, dalam keadaan tertentu, bakteri ini dapat juga tumbuh pada pH yang sangat tinggi (8,5-9,5). V. cholerae memfermentasi sukrosa dan manosa tanpa menghasilkan gas, memfermentasi nitrit, tetapi tidak memfermentasi arabinosa. Ciri khas lain yang membedakan Vibrio dari bakteri enterik gram negatif lain yang tumbuh pada agar darah adalah pada tes oksidasi yang hasilnya positif. Pada air peptone alkali, bakteri ini akan tumbuh dengan baik setelah 6 jam inkubasi pada suhu kamar, sehingga medium ini sering dipakai untuk mentransport sampel feses atau usapan dubur penderita penyakit kolera (Urassa et al., 2000). 9 Untuk membedakan species V. cholerae dari spesies Aeromonas, biasanya dipakai campuran 0/129 (2,4-diamino-6,7-diisopropylpteridine phosphate) atau medium yang mengandung 6% NaCI. Pada kedua kondisi tersebut, V. cholerae akan menunjukkan sifat sensitif terhadap campuran 0/129, tapi tumbuh pada media yang mengandung 6% NaCI, sedangkan sifat sebaliknya akan ditunjukkan oleh kelompok Aeromonas (Urassa et al., 2000). 2.2.3 Klasifikasi Vibrio cholerae Menurut National Standard Method (2007) klasifikasi dari V. cholerae adalah sebagai berikut: Kingdom : Bacteria Phylum : Proteobacteria Class : Gamma Proteobacteria Order : Vibrionales Family : Vibrionaceae Genus : Vibrio Species : Vibrio cholerae (Pacini, 1854) Vibrio cholerae diklasifikasikan menjadi dua tipe, yaitu serotype dan biotype. Untuk serotype, V. cholerae dibedakan atas kemampuan bakteri ini mengaglutinasi antisera polivalent O, yang juga terbagi atas tiga, yaitu Ogawa (AB), Inaba (AC), dan Hikojima (ABC). Sementara itu, untuk biotype, bakteri ini dibagi lagi berdasarkan sensitifitasnya terhadap bakteriofaga yaitu Klasikal dan El-Tor. V. cholerae lebih lanjut dibagi lagi ke dalam lebih dari 30 strain berdasarkan variasi antigen, genomik dan toksisitasnya (Moat et al., 2002). 10 Grup O1 dibagi atas biotype Klasikal dan El-Tor. Biotype Klasikal adalah penyebab kolera atau asiatik kolera. El-Tor pertama tercatat muncul di Sulawesi pada tahun 1961. Biotype ini selain menghasilkan toksin seperti biotype Klasikal juga menghasilkan hemolisin, yaitu suatu protein yang dapat menyebabkan hemolisis darah sehingga penderita diare mengalami diare yang berdarah (Urassa et al., 2000). Grup non O1 dianggap tidak begitu berbahaya, karena infeksi oleh bakteri V. cholerae non O1 hanya menyebabkan diare ringan. Namun, pada tahun 1991 dunia dikejutkan oleh wabah kolera di Banglades dan India yang disebabkan oleh V. cholerae non O1 yang memproduksi toksin seperti grup O1. Strain baru ini selanjutnya diberi nama V. cholerae O139 Bengal (Santoso, 2000). 2.2.4 Patogenesis dan patologi Vibrio cholerae Secara alamiah, V. cholerae hanya patogen terhadap manusia. Seseorang dengan asam lambung normal akan terinfeksi oleh Vibrio bila mengkonsumsi makanan yang mengandung sebanyak 102 - 104 sel/gram makanan, karena bakteri ini sangat sensitif dengan suasana asam. Beberapa proses pengobatan atau keadaan yang dapat menurunkan kadar asam dalam lambung membuat seseorang lebih sensitif terhadap infeksi V. cholerae ( Dziejman, 2002). Vibrio cholerae dapat menghasilkan enterotoksin, dengan berat molekul sekitar 90.000 yang mengandung 98% protein, 1% lipid, dan 1% karbohidrat. Bakteri ini tidak tahan asam dan panas. Pada tiap molekul enterotoksin V. cholerae terdapat 5 sub unit B (binding) dan 1 sub unit A (active). Sub unit A ini mempunyai 2 komponen A1 dan A2. Enterotoksin berikatan dengan reseptor 11 ganglion pada permukaan enterocytes melalui 5 sub unit B. Sedangkan komponen sub unit A2 mempercepat masuknya enterotoksin ke sel dan komponen sub unit A1 bertugas meningkatkan aktivitas Adenil siklase akibatnya produksi cyclic AMP meningkat yang menyebabkan meningkatnya sekresi cairan dan elektrolit. Sehingga menimbulkan diare masif dengan kehilangan cairan mencapai 20 liter perhari yang dikenal dengan Watery Diarrhea. Pada kasus berat dengan gejala dehidrasi, syok, dan gangguan elektrolit dapat menyebabkan kematian (Tantillo et al., 2004). Vibrio cholerae tidak bersifat invasif (tidak masuk ke dalam aliran darah), sehingga pada umumnya tetap berada di saluran usus penderita. Dalam proses infeksinya, V. cholerae virulen akan menempel pada mikrovili permukaan sel epithelial, dimana mereka melepaskan toksin kolera (enterotoksin). Toksin kolera diserap di permukaan gangliosida sel epitel dan merangsang hipersekresi air dan klorida dan menghambat absorpsi natrium. Akibatnya penderita akan kehilangan banyak cairan dan elektrolit, walaupun secara histologi usus tetap normal (Novotny et al., 2004). Sebagian besar infeksi yang disebabkan oleh V. cholerae ini asimptomatik atau terjadi diare yang ringan pada pasien. Bila terjadi infeksi oleh V. cholerae, gejala-gejala diare akan timbul setelah 1 – 4 hari masa inkubasi terlampaui. Gejala khas akibat terinfeksi oleh bakteri kolera ini biasanya dimulai dengan munculnya diare encer yang berlimpah tanpa didahului oleh rasa mulas dan tanpa adanya tenesmus. Dalam waktu singkat tinja yang semula berwarna dan berbau feses berubah menjadi cairan putih keruh yang mirip air cucian beras (rice water stool). 12 Cairan ini mengandung mucus, sel epithelial, dan sejumlah besar bakteri V. cholerae. Gejala mual akan timbul setelah diare yang diikuti gejala muntah, dan selanjutnya biasanya diikuti oleh kejang otot, terutama pada otot-otot betis, biseps, triseps, pektoralis, dan dinding perut (kram perut) (Nurmaini, 2001). Dalam waktu singkat setelah terjadi diare yang hebat, penderita akan kehilangan cairan dan elektrolit yang dapat mengarah pada dehidrasi berat, syok, dan anuria. Tanda-tanda dehidrasi tampak jelas, berupa perubahan suara menjadi serak seperti suara bebek manila (vox cholerica), kelopak mata cekung, mulut menyeringai karena bibir yang kering, tulang pipi menonjol, turgor kulit berkurang, jari jari tangan dan kaki tampak kurus dengan lipatan-lipatan kulit, terutama ujung jari yang keriput (washer women hand), diuresis berangsur-angsur kurang dan berakhir dengan anuria. Bila tidak diobati, tingkat kematian dapat mencapai 25% sampai 50% (Simanjuntak, 2002). Gejala-gejala yang ditimbulkan oleh serangan Vibrio ini dalam kasus-kasus yang bersifat sporadis maupun yang ringan tidak mudah untuk dibedakan dari penyakit diare yang lain (Suzita et al., 2009). 2.3 Pasar Tradisional Pasar tradisional merupakan tempat bertemunya penjual dan pembeli serta ditandai dengan adanya transaksi penjual pembeli secara langsung dan biasanya ada proses tawar-menawar, bangunan biasanya terdiri dari kios-kios atau gerai, los dan dasaran terbuka yang dibuka oleh penjual maupun suatu pengelola pasar. Kebanyakan pedagang menjual kebutuhan sehari-hari diantaranya bahan-bahan makanan berupa ikan, buah, sayur-sayuran, telur, daging, kain, pakaian barang 13 elektronik, jasa dan lain-lain. Selain itu, ada pula yang menjual kue-kue dan barang-barang lainnya (Soemirat, 2005). Pasar seperti ini masih banyak ditemukan di Indonesia, khususnya di Kota Denpasar. Umumnya, kondisi pasar tradisional identik dengan pasar yang kumuh dan kurang terjaga kebersihannya. 2.3.1 Pasar Ketapian Pasar Ketapian adalah salah satu pasar tradisional yang berlokasi di Jalan Katrangan, Kelurahan Sumerta, Denpasar Timur yang di bangun pada tahun 1978 dan mengalami revitalisasi pada tahun 2010. Pasar yang berdiri di atas tanah seluas 2200 m2 memiliki luas bangunan sekitar 975 m2. Sekarang pasar ini memiliki kios sebanyak 26 buah dan los sebanyak 75 buah (PD. Pasar Kota Denpasar, 2015). Sebelum mengalami revitalisasi, kondisi Pasar Ketapian sangat kumuh dan kurang tertata dengan baik. Terlebih lagi jika musim penghujan tiba, lantai pasar akan menjadi kotor dan berlumpur. Setelah mengalami revitalisasi, penempatan para pedagang dan kondisi di Pasar Ketapian menjadi lebih teratur, bersih dan nyaman untuk berbelanja. Pedagang sayuran, pakaian dan buah-buahan, berjualan di pinggir jalan dekat area pasar. Para pedagang yang berjualan kebutuhan pokok seperti sembako, ikan atau daging berada di dalam pasar. Jenis ikan yang dijual di Pasar Ketapian sebagian besar adalah jangki, kakap, gurami, udang, cumi, dan tongkol. Pedagang ikan disini juga menjual kerang hijau hanya saja tidak sering dan dalam jumlah yang sedikit bila ada yang memesan. Hasil perikanan tersebut mayoritas mereka dapatkan dari Kedonganan, Pasar Badung, dan ada pula yang 14 mendapatkannya dari pengepul ikan yang ada di kawasan Denpasar dan nelayan lokal di daerah Padang Galak (PD. Pasar Kota Denpasar, 2015). 2.3.2 Pasar Kumbasari Pasar Kumbasari dibangun pada tahun 1977 namun sempat terbakar pada tahun 2000 yang kemudian dibangun kembali pada tahun 2001. Pasar ini berdiri dengan luas tanah 7000 m2 dan luas bangunan sekitar 12.572 m2, serta memiliki kios sebanyak 489 buah dan los sebanyak 188 buah (PD. Pasar Kota Denpasar, 2015). Pasar Kumbasari termasuk pasar tradisional terbesar di Denpasar yang terletak di Jalan Gajah Mada, Kelurahan Pemecutan, Kecamatan Denpasar Barat. Pasar tradisional ini buka selama 24 jam dalam setiap harinya, dimana pasar ini terdiri atas dua lantai. Lantai dasar digunakan untuk menyediakan berbagai kebutuhan pokok. Lantai dua biasanya digunakan sebagai tempat berjualan aneka cinderamata kerajinan tangan yang dibuat masyarakat Bali seperti Kerajinan Perak, Batik Bali, Lukisan, Aksesoris dan pernak khas Bali, serta Tenun Ikat Bali (PD. Pasar Kota Denpasar, 2015). Para pedagang daging dan ikan biasanya berjualan di kanan dan kiri jalan dekat jembatan yang menghubungkan Pasar Kumbasari dengan Pasar Badung. Mereka menjajakan dagangannya di luar kios untuk mempermudahkan mereka membersihkan ikan-ikan yang mereka jual. Ikan-ikan yang dijual di pasar ini sebagian besar adalah jenis kakap merah, tongkol, udang, kerang, jangki, dan gurami. Adapula yang menjual kerang hijau, gurita, cumi-cumi, kepiting dan lobster. Hasil perikanan tersebut mereka dapatkan dari berbagai tempat. Ada yang 15 mendapatkannya dari pengepul ikan, ada yang berasal dari nelayan lokal Bali, seperti dari Kedonganan, Klungkung, Karangasem dan Negara, adapula dari Lombok, Banyuwangi dan Madura (PD. Pasar Kota Denpasar, 2015). 2.3.3 Pasar Pidada Pasar Pidada dibangun pada tahun 2000 dengan luas tanah 3200 m2 dan luas bangunan sekitar 2410 m2. Pasar ini terletak di Jalan Abimayu, Kelurahan Ubung, Kecamatan Denpasar Utara. Pasar Pidada memiliki 1 lantai dengan kios sebanyak 48 buah dan los sebanyak 211 buah yang menjual beraneka ragam jenis kebutuhan pokok. Kios sayur, daging dan ikan di pasar ini letaknya berdampingan. Sama seperti pasar-pasar sebelumnya, di pasar ini, para pedagang menjual hasil perikanan yang di dapat dari para pengepul ikan dari Kedonganan dan ada juga yang berasal dari Pasar Badung, dan Negara. Mayoritas pedagang disini menjual udang, ikan tongkol, mujair, kakap merah, gurami, cumi-cumi, kepiting, dan kerang hijau. Para pedagang disini juga jarang menjual kerang hijau, hanya ada beberapa yang menjual kerang hijau, mereka menjual ketika sedang ada pesanan (PD. Pasar Kota Denpasar, 2015). 16 BAB III KERANGKA BERPIKIR DAN KONSEP PENELITIAN 3.1 Kerangka Berpikir Provinsi Bali merupakan salah satu tempat tujuan pariwisata dunia. Sektor pariwisata merupakan sektor yang sangat diandalkan dimana didukung oleh adanya beranekaragam objek wisata yang menjadikan pariwisata berperan sebagai pemberi kontribusi pendapatan terbesar Bali. Dinas Pariwisata Provinsi Bali mencatat jumlah wisatawan mancanegara (Wisman) pada tahun 2014 mencapai 3.766.638 orang. Berdasarkan data capaian kunjungan Wisman itu, posisi teratas masih dipegang oleh wisatawan Australia, disusul China, Jepang, Malaysia, dan Korea Selatan (BPS, 2014). Banyaknya kunjungan wisatawan asing ke Bali ikut meningkatkan permintaan akan bahan makanan dari produk perikanan. Wisatawan asing asal China, Jepang, dan Korea Selatan sangat gemar mengkonsumsi ikan, khususnya wisatawan Jepang yang suka mengkonsumsi ikan mentah (Wirawan, 2008). Produk perikanan sangat rentan terhadap kontaminasi bakteri V. cholerae Bakteri ini telah menjadi wabah pandemik di beberapa negara di dunia selama hampir 200 tahun. Tidak semua jenis dari bakteri V. cholerae dapat menyebabkan wabah yang bersifat epidemik dan pandemik. Hanya bakteri V. cholerae patogen dari golongan serogroup O1 dan O139 yang dapat menyebabkan wabah kolera yang meluas (Amizar, 2001). 16 17 3.2 Konsep Penelitian Konsep penelitian disajikan dalam bentuk bagan seperti terlihat pada gambar berikut : Wisatawan Mancanegara dan Domestik Pariwisata Bali Permintaan Tinggi terhadap Hasil Perikanan (Ikan, Udang, Kerang) Masalah Kontaminasi Vibrio cholerae Ikan, Udang, dan Kerang Bakteri golongan Vibrio Bakteri bukan golongan Vibrio Bakteri spesifik Vibrio cholerae Ogawa Inaba Hikojima Gambar 3.1 Konsep Penelitian 18 BAB IV METODE PENELITIAN 4.1 Rancangan Penelitian Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah rancangan penelitian eksplorasi. Rancangan penelitian ini digunakan untuk melihat keberadaan bakteri V. cholerae patogen yang terdapat pada beberapa hasil perikanan yang tersebar pada pasar tradisional di Denpasar. Penelitian eksplorasi seperti ini dilakukan untuk mendapatkan data awal yang dapat digunakan sebagai acuan atau referensi untuk melakukan penelitian lebih lanjut dikemudian hari. 4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian Sampel hasil perikanan, yaitu Ikan Tongkol (Euthynnus affinis), Udang Kelong (Penaeus indicus), dan Kerang Kijing (Anodonta sp.) diambil dari Pasar Ketapian, Pasar Kumbasari, dan Pasar Ubung Pidada di kota Denpasar, Bali. Isolasi bakteri V. cholerae patogen dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi, FMIPA, Universitas Udayana di kampus Bukit Jimbaran dan di UPT. Balai Laboratorium Kesehatan Provinsi Bali, dari bulan Mei sampai dengan Juni 2013. 4.3 Penentuan Sumber Data Penelitian ini dilakukan pada hasil perikanan (ikan, udang, dan kerang) yang tersebar pada pasar tradisional di Denpasar. Teknik pengambilan sampel menggunakan metode Purposive Random Sampling. Jumlah sampel yang diambil 18 19 sebanyak 27 sampel bersumber dari Ikan Tongkol (Euthynnus affinis) 9 sampel, Udang Kelong (Penaeus indicus) 9 sampel, dan Kerang Kijing (Anodonta sp.) 9 sampel. 4.4 Variabel Penelitian 4.4.1 Identifikasi dan klasifikasi variabel Variabel dalam penelitian ini adalah isolat V. cholerae yang didapat dari berbagai hasil perikanan (ikan, udang, dan kerang) pada masing-masing pasar tradisional. 4.4.2 Definisi operasional variabel Setelah variabel dalam penelitian ini diidentifikasi dan diklasifikasi maka variabel-variabel tersebut harus didefinisikan agar tidak menimbulkan keraguan apabila ada yang melakukan penelitian lebih lanjut atau menguji penelitian yang telah dilaksanakan. Adapun definisi operasional variabel tersebut adalah sebagai berikut : 1. Hasil perikanan adalah jenis perikanan yaitu ikan, udang, dan kerang yang digunakan dalam penelitian ini berasal dari pasar tradisional di kota Denpasar yang diambil secara purposive random sampling. 2. Vibrio cholerae merupakan bakteri yang diperoleh dari sampel hasil perikanan (ikan, udang, dan kerang) melalui isolasi dan identifikasi bakteri dengan menggunakan media spesifik. 3. Pasar Tradisional adalah tempat transaksi jual beli secara langsung dan biasanya ada proses tawar-menawar, digunakan pengambilan sampel yang terletak di Kota Denpasar. sebagai tempat 20 4.5 Bahan Penelitian Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah berbagai hasil perikanan berupa Ikan Tongkol (Euthynnus affinis), Udang Kelong (Penaeus indicus), dan Kerang Kijing (Anodonta sp.). Media Alkaline Peptone Water (APW) OxoidTM, Media agar Thiosulfate Citrate Bile salt Sucrose (TCBS) OxoidTM, Media Triple Sugar Iron Agar (TSIA) OxoidTM, Media Sulfida Indol Motility (SIM) OxoidTM, Media agar Simmons Citrate OxoidTM , Serum Aglutinasi (Polyvalent, Inaba, Ogawa) Bio Farma dan Aquades steril digunakan untuk isolasi bakteri V. cholerae. 4.6 Instrumen Penelitian Penelitian ini membutuhkan instrumen berupa Cooler Box untuk menyimpan sampel. Untuk Isolasi bakteri V. cholerae menggunakan instrument berupa pisau scalpel, gunting, jarum lanset, jarum ose, pipet mikro (Gilson), pipet tetes, cawan petri, gelas beaker, dan timbangan analitik. Refrigerator dan Freezer digunakan untuk menyimpan bahan dan media penelitian. Inkubator (Memmert, Germany) digunakan untuk menginkubasi biakan bakteri. Untuk sterilisasi alat dan bahan menggunakan Autoclave (Hirayama, HH-300 niv, Japan). 4.7 Prosedur Penelitian 4.7.1 Pengambilan sampel hasil perikanan (ikan, udang, dan kerang) Masing-masing sampel (ikan, udang, dan kerang) diambil, kemudian dibungkus dengan plastik steril, dan diberi kode. Semua sampel disimpan dalam Cooler Box dan diberi es agar sampel kualitasnya tetap terjaga selama dibawa ke 21 Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi, FMIPA, Universitas Udayana di kampus Bukit Jimbaran. 4.7.2 Isolasi bakteri Vibrio cholerae Isolasi bakteri diawali dengan proses enrichment (pengayaan). Pada proses ini masing-masing sampel (ikan, udang, dan kerang) dipotong kecil dan dihancurkan terlebih dahulu, setelah itu diambil 1 g sampel dimasukkan dalam 9 ml media Alkaline Peptone Water (APW), lalu dihomogenkan kemudian diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37°C selama 24 jam. Setelah sampel diinkubasi, diambil satu jarum ose, digoreskan secara streak ke medium agar TCBS, diinkubasikan pada suhu 37°C selama 18-24 jam. Koloni yang dicurigai yaitu berwarna kuning dengan ukuran 2-3 mm diambil dengan jarum Ose dan distreak kembali pada medium agar TCBS untuk dilakukan pemurnian kemudian diinkubasi pada suhu 37°C. Selanjutnya, koloni bakteri yang terpisah diambil dengan menggunakan jarum ose dan dibiakan dimedia agar TCBS miring yang diinkubasi pada suhu 37°C selama 18 jam. 4.7.3 Pengamatan makroskopis Koloni yang tumbuh diamati secara makroskopis meliputi bentuk, ukuran, tekstur dan warna koloni pada media agar TCBS. Koloni yang diduga bakteri V. cholerae berwarna kuning, cembung, keruh, dan bergranul bila disinari. 4.7.4 Pengamatan mikroskopis (pewarnaan gram) Dibuat apusan bakteri pada kaca objek yang kering dan bersih. Kemudian difiksasi di atas nyala api bunsen dan diwarnai dengan larutan kristal violet 22 selama 1 sampai 1.5 menit. Setelah itu dicuci dengan air suling dan ditetesi dengan larutan garam iodin serta dibiarkan selama 1 menit. Selanjutnya dicuci dengan larutan alkohol 95 % sampai warnanya terhapus kurang lebih selama 30 detik. Kemudian dicuci dengan air dan diwarnai dengan safranin selama 5 sampai 15 menit lalu dicuci lagi dengan air. Setelah itu dikeringkan di udara atau diatas nyala api bunsen. Diamati di bawah mikroskop dengan perbesaran 1000 kali. 4.7.5 Uji biokimia bakteri 4.7.5.1 Uji TSIA Isolat dari agar miring TCBS diambil koloninya dengan menggunakan jarum ose, kemudian dimasukkan ke dalam media TSIA dengan cara ditusukkan, setelah itu digores pada lereng media. Inkubasi 37° C selama 24 jam. Kemudian, amati perubahan warna pada dasar media, lereng dan pembentuka H2S, gas. 4.7.5.2 Uji motilitas Isolat dari agar miring ditusukkan pada agar tegak semi solid (media SIM) kemudian diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37oC dan diamati uji motilitas bakteri. Uji motilitas positif jika pertumbuhan koloni menyebar luas pada agar. 4.7.5.3 Uji simmon citrate Isolat dari agar miring TCBS diambil koloninya dengan menggunakan jarum ose, kemudian dimasukkan ke dalam media Simmon Citrate dengan cara digores pada lereng media. Inkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam. Citrate positif jika terjadi perubahan warna pada lereng media dari hijau menjadi biru dan ada pertumbuhan bakterinya. 23 4.7.6 Uji serologi Diambil 1 ose kultur dari agar miring TCBS dan diletakkan diatas gelas preparat, kemudian ditetesi dengan larutan saline 0,85% dan diemulsikan. Setelah itu, diletakkan 1 tetes antiserum Polyvalent, Inaba, Ogawa disamping suspensi koloni dan dicampurkan antiserum sedikit demi sedikit dengan suspensi koloni sampai tercampur sempurna. Dilakukan kontrol dengan menggunakan laruran saline dan antiserum. Setelah itu, diamati reaksi penggumpalan. Reaksi positif terjadi apabila terdapat penggumpalan pada larutan kultur dan tidak terjadi penggumpalan pada larutan kontrol. Reaksi negatif ditunjukan dengan tidak terjadi penggumpalan baik pada larutan kultur maupun larutan kontrol. V. cholerae menghasilkan reaksi positif. 4.8 Analisis Data Data yang diperoleh dianalisis secara kualitatif, yaitu dengan mendeskripsikan hasil penelitian dari isolasi bakteri V. cholerae patogen yang terdapat pada beberapa hasil perikanan yang dijual di pasar tradisional Denpasar. 24 BAB V HASIL PENELITIAN 5.1 Keberadaan Vibrio cholerae pada Pasar Ketapian Masing-masing 3 sampel dari pedagang yang berbeda di Pasar Ketapian diambil untuk diperiksa keberadaan bakteri patogen V. cholerae. Berdasarkan Tabel 5.1 dapat dilihat bahwa dari beberapa sampel hasil pemeriksaan bakteri patogen V. cholerae yang diambil secara acak dari pedagang hasil perikanan di Pasar Ketapian terdapat beberapa sampel yang positif mengandung bakteri golongan Vibrio dan bakteri patogen V. cholerae. Sampel yang positif mengandung bakteri patogen V. cholerae yaitu sampel udang dengan kode UA2 dan kerang dengan kode KA2. Tabel 5.1 Hasil Pemeriksaan Bakteri Patogen V. cholerae di Pasar Ketapian No Jenis Sampel Kode Hasil Pemeriksaan Bakteri Gol. Bakteri Patogen Vibrio V. cholerae 1 Ikan IA1 Negatif Negatif IA2 Positif Negatif IA3 Negatif Negatif 2 Udang UA1 Negatif Negatif UA2 Positif Positif UA3 Positif Negatif 3 Kerang KA1 Negatif Negatif KA2 Positif Positif KA3 Positif Negatif 5.2 Keberadaan Vibrio cholerae pada Pasar Kumbasari Masing-masing 3 sampel di Pasar Kumbasari dari pedagang yang berbeda juga diambil untuk diperiksa keberadaan bakteri V. cholerae. Dari hasil 24 25 pemeriksaan ketiga sampel di Pasar Kumbasari, diperoleh bahwa ada beberapa sampel yang positif mengandung bakteri golongan Vibrio, yakni pada sampel ikan dan udang. Sedangkan, berdasarkan hasil pemeriksaan, semua sampel tidak ada yang mengandung bakteri patogen V. cholerae seperti yang ditunjukan pada Tabel 5.2. Tabel 5.2 Hasil Pemeriksaan Bakteri Patogen V. cholerae di Pasar Kumbasari No Jenis Sampel Kode Hasil Pemeriksaan Bakteri Gol. Bakteri Patogen Vibrio V. cholerae 1 Ikan IB1 Positif Negatif IB2 Negatif Negatif IB3 Positif Negatif 2 Udang UB1 Positif Negatif UB2 Negatif Negatif UB3 Positif Negatif 3 Kerang KB1 Negatif Negatif KB2 Negatif Negatif KB3 Negatif Negatif 5.3 Keberadaan Vibrio cholerae pada Pasar Pidada Berdasarkan hasil pemeriksaan ditemukan bahwa sampel yang diambil yaitu sampel ikan, udang, dan juga kerang, hampir semuanya mengandung bakteri golongan Vibrio. Akan tetapi, ketiganya tidak mengandung bakteri patogen V. cholerae. Seperti yang ada pada Tabel 5.3. 26 No 1 2 3 Tabel 5.3 Hasil Pemeriksaan Bakteri Patogen V. cholerae di Pasar Pidada Jenis Sampel Kode Hasil Pemeriksaan Bakteri Gol. Bakteri Patogen Vibrio V. cholerae Ikan IC1 Positif Negatif IC2 Positif Negatif IC3 Negatif Negatif Udang UC1 Negatif Negatif UC2 Positif Negatif UC3 Negatif Negatif Kerang KC1 Negatif Negatif KC2 Positif Negatif KC3 Positif Negatif 27 BAB VI PEMBAHASAN 6.1 Isolasi Bakteri Patogen V. cholerae Isolasi bakteri merupakan suatu cara untuk memisahkan atau memindahkan mikroba tertentu dari lingkungannya sehingga diperoleh kultur murni atau biakan murni (Agus, 2002). Pada penelitian ini, untuk mengisolasi bakteri V. cholerae pada sampel hasil perikanan digunakan medium pengaya APW. Pertumbuhan bakteri V. cholerae pada media APW diperoleh hasil yaitu media APW mengalami perubahan warna dari kuning bening menjadi keruh disertai timbulnya gelembung gas. Hal ini menunjukkan bahwa bakteri V. cholerae tumbuh dalam media tersebut, karena kandungan NaCl 2% dan pH alkali (8,5-9,5) pada media APW sangat sesuai untuk pertumbuhan bakteri V. cholerae (Davis et al., 2001). Pembiakan bakteri V. cholerae dapat menggunakan media selektif TCBS agar. Media selektif merupakan media yang selain mengandung nutrisi, juga ditambah suatu zat tertentu sehingga media tersebut dapat menekan pertumbuhan mikroba lain dan merangsang pertumbuhan mikroba yang diinginkan (Dwidjoseputro, 2005). Media selektif TCBS mengandung NaCl 3 % adalah suatu media yang paling tepat untuk mengisolasi V. cholerae dan Vibrio sp. lainnya. Kadar NaCl optimum dalam media TCBS untuk pertumbuhan bakteri patogen pada hewan laut adalah 3-4 % (Amelia, 2005). Media TCBS mempunyai pH yang sangat tinggi (8,5-9,5) yang dapat menekan pertumbuhan mikroba usus selain 27 28 Vibrio sp. Kandungan utama terdiri dari protein nabati dan hewani, campuran garam (bile salts), 1% Sodium Chlorida, Sodium Thiosulfate, Ferric Citrat, sukrosa dan ekstrak kapang. Sukrosa ditambahkan sebagai bahan karbohidrat yang dapat difermentasi oleh Vibrio dan sodium chlorida dapat merangsang pertumbuhan Vibrio dengan indikator campuran Bromothymol blue dan Thymol blue. Media TCBS agar berwarna hijau dan pH media bersifat basa. V. cholerae menghasilkan koloni berwarna kuning pada media TCBS Agar disebabkan karena bakteri tersebut memfermentasi sukrosa dan menurunkan pH media sehingga menjadi asam (Farouque et al., 2000). Uji biokimiawi menggunakan media TSIA, SIM, dan Simon Citrat. Uji fermentasi gula dan H2S merupakan serangkaian uji yang dilakukan dengan menggunakan medium TSIA (Triple Sugar Iron Agar). Tujuannya adalah untuk mengetahui kemampuan bakteri dalam memfermentasi gula untuk menghasilkan asam atau gas. Pada media TSIA mengandung tiga macam gula, yaitu glukosa, laktosa atau sukrosa dan indikator merah fenol serta FeSO4 (Amelia, 2005). Warna merah pada agar menunjukkan reaksi basa, sedangkan warna kuning menunjukkan reaksi asam. Warna merah pada permukaan (lereng) agar dan kuning di bagian bawah (dasar) agar menunjukkan terjadinya fermentasi glukosa sedangkan warna kuning pada bagian permukaan dan bawah tabung menunjukkan terjadinya fermentasi laktosa dan sukrosa (Provenzano et al., 2001). Uji TSIA ini dilakukan untuk melihat perubahan warna yang terjadi pada goresan miring (Slant) dan tusukan tegak (Butt) dan melihat reaksi bakteri terhadap asam dan basa, serta kemampuan bakteri manghasilkan gas dan H2S. 29 apabila terjadi perubahan warna merah pada goresan miring dan tusukan tegak maka bakteri bersifat K/K (basa), sedangkan apabila perubahan pada goresan miring menjadi warna kuning dan pada tusukan tegak menjadi merah maka bakteri bersifat A/K (Asam/Basa). Selain itu apabila terbentuk warna hitam, maka bakteri menghasilkan H2S dan apabila ada gas, maka bakteri dapat menghasilkan gas (Provenzano et al., 2001). Berdasarkan hasil penelitian diperoleh sampel hasil perikanan yang positif tercemar bakteri V. cholerae patogen adalah sampel dengan kode KA2 dan UA2. Pada sampel yang positif tercemar V. cholerae menunjukan hasil uji menggunakan media TSIA berupa lereng berwarna merah dan dasar berwarna kuning. Hal ini menunjukan bahwa bakteri V. cholerae mampu memfermentasikan gula. Menurut Yuwono (2005) sifat biokimia V. cholerae adalah adalah dapat meragikan sukrosa, glukosa, dan manitol menjadi asam tanpa menghasilkan gas, sedangkan laktosa dapat diragikan tetapi lambat. Pemeriksaan berikutnya adalah uji motilitas menggunakan media SIM. Media SIM merupakan media semi padat yang berfungsi untuk mendeteksi pergerakan bakteri. Pembiakan sampel yang tercemar bakteri patogen V. cholerae pada media SIM menunjukan hasil yang positif, yaitu pertumbuhan bakteri menyebar seperti akar. Hasil positif menunjukan bahwa V. cholerae memiliki sebuah flagel yang terdapat dibagian kutub (Monotrikh) sehingga bakteri ini dapat bergerak secara aktif (Farouque et al., 2000). Pada pemeriksaan sampel menggunakan media Simmons Citrate, menunjukan hasil yang negatif. Simmon’s citrate agar merupakan medium sintetik 30 dengan Na sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon, NH4+ sebagai sumber N dan brom thymol blue sebagai indikator pH. Hasil positif pada media Simmons Citrate akan mengubah media menjadi berwarna biru, sedangkan reaksi negatif tidak mengubah warna media, yaitu tetap berwarna hijau. Uji sitrat digunakan untuk melihat kemampuan bakteri menggunakan sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon. V. cholerae tidak mampu memfermentasikan sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon untuk metabolisme sehingga tidak terjadi perubahan warna pada media Simmons Citrate (Davis et al., 2001). 6.2 Kondisi Pasar Tradisional dan Keberadaan Bakteri Patogen Vibrio cholerae Kondisi pasar tradisional umumnya kumuh dan berbau tak sedap, dengan lokasi yang kurang tertata rapi serta memiliki higienitas yang lebih buruk dibandingkan dengan pasar modern yang memiliki suasana nyaman dan bersih. Namun dalam hal penyediaan hasil perikanan, baik pasar modern maupun pasar tradisional tersebut mendapatkan sumber hasil perikanan dari tempat yang sama, seperti di pasar ikan atau pelabuhan ikan yang sama yang beberapa diantaranya telah terkontaminasi bakteri berbahaya misalnya bakteri V. cholerae (Hidayat dkk., 2006). Jika hasil perikanan tersebut dikonsumsi tanpa pengolahan yang baik, dapat menyebabkan konsumennya terinfeksi penyakit kolera. Selain itu fakta di lapangan bahwa tidak jarang pula para pedagang ikan di pasar tradisional juga kurang memperhatikan kehigeinisan dagangannya (Adawiyah, 2007). Hasil penelitian menunjukkan bahwa sampel hasil perikanan yang terdapat di salah satu pasar tradisional Denpasar sudah terinfeksi bakteri V. cholerae tipe 31 Inaba yaitu pada Pasar Ketapian diantaranya pada sampel udang (UA2) dan kerang (KA2) atau sekitar 7.4% dari semua sampel telah tercemar bakteri V. cholerae. Hasil tersebut telah melewati ambang batas persyaratan mutu dan keamanan pangan ikan segar (SNI 01-2729.1-2006). Hasil pemeriksaan tersebut memberi petunjuk bahwa tingkat infeksi terjadi salah satunya disebabkan oleh sistem pengelolaan pelelangan ikan yang kurang baik karena lingkungan yang kurang bersih, sehingga bakteri V. cholerae yang berasal dari laut yang tercemar dapat mencemari pasar tradisional (Badan Riset Kelautan dan Perikanan, 2012). Penemuan yang sejenis dengan penelitian ini juga pernah didapatkan oleh Taneja (2005) yang melakukan studi pada 32 pasien yang menderita gejala-gejala penyakit kolera di India. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini yaitu hasil perikanan laut yakni udang, ikan, cumi dan lobster yang diketahui sebelumnya telah terkontaminasi bakteri V. cholerae. Dari penelitian tersebut diperoleh hasil yaitu 15 sampel terinfeksi oleh bakteri V. cholerae O1 tipe Inaba. Temuan lainnya yaitu sebuah penelitian yang dilansir Departemen pangan dan higienisitas lingkungan (Food and Environment Hygiene Department) di Hongkong pada tahun 2005, mengemukakan hasil studi bahwa 38% dari kasus kolera yang terjadi berasal dari hasil perikanan laut, dan dalam analisis berbeda didapatkan 59% kasus disebabkan karena makanan yang dimasak tidak secara matang. Menurut Purwoko (2007), transmisi utama penyakit kolera ditentukan oleh faktor lingkungan seperti temperatur, kebersihan dan konsentrasi nutrien misalnya zooplankton dalam air. Kondisi pasar sebagai tempat berjualan juga dapat 32 mempengaruhi keberadaan bakteri V. cholerae. Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan oleh Pribadi (2008), faktor lokasi penjualan, peralatan, yang kurang higienis mempengaruhi adanya kontaminasi dari bakteri V. cholerae. Beberapa penelitian tersebut menunjukkan bahwa terdapat berbagai sumber tranmisi dari bakteri V. cholerae. Sumber makanan yang berasal dari hasil perikanan merupakan salah satu sumber transmisi yang paling sering terjadi. Hal ini erat kaitannya dengan teori bahwa air dengan kadar garam tinggi seperti air laut adalah tempat hidup alami dari Vibrio sp., sehingga memudahkan proses kontaminasi (Madigan et al., 2002). Selain itu faktor seperti temperatur, kebersihan, dan konsentrasi dari makanan yang tercemar bakteri V. cholerae yang tidak sengaja dikonsumsi juga berpengaruh pada transmisi ini (WHO, 2005). Hal tersebut juga sesuai dengan hasil penelitian Ananta et al. (2011) bahwa penggunaan es bahan pengawet ikan yang digunakan oleh pedagang ikan juga dapat mengandung bakteri V. cholerae. Berdasarkan penelitian tersebut, 83,33% dari seluruh sampel es positif mengandung bakteri V. cholerae. Sampel yang diambil ini secara keseluruhan memiliki kontak dengan hasil perikanan dan air laut yang memiliki kadar garam tinggi. Selain itu, Shawyer (2003) menyatakan bahwa dalam penggunaan es maupun air es itu sendiri juga digunakan berulangulang sehingga kemungkinan untuk adanya kontaminan V. cholerae juga meningkat. Tercemarnya hasil perikanan dapat disebabkan oleh air sungai atau laut yang merupakan sumber hasil perikanan terkontaminasi oleh bakteri V. cholerae (Waluyo, 2004). Bakteri V. cholerae menyebar melalui feses atau kotoran 33 manusia. Bila kotoran yang mengandung bakteri ini mengkontaminasi air sungai atau air laut, maka hasil perikanan yang hidup diperairan tersebut akan terkontaminasi bakteri itu juga (Suriawiria, 2003). Selain itu, bila air yang terkontaminasi ini digunakan untuk keperluan sehari-hari seperti mencuci tangan, maka orang tersebut dapat membawa bakteri V. cholerae. Bila orang tersebut berprofesi sebagai nelayan atau pedagang ikan dan melakukan kontak dengan hasil perikanan, maka hasil perikanan yang disentuhnya dapat terkontaminasi bakteri V. cholerae. Hal ini juga diperkuat dengan pernyataan dari WHO (2004), menyatakan bahwa penularan penyakit kolera dapat melalui manusia yang kurang menjaga kebersihan diri dan lingkungan. 34 BAB VII SIMPULAN DAN SARAN 7.1 Simpulan Hasil penelitian ini, menunjukkan sampel udang dan kerang yang dijual di pasar tradisional Kota Denpasar, memiliki peluang tercemar bakteri V. Cholerae, walaupun peluang terjadinya pencemaran tersebut tidak tinggi, yaitu 7.4%. Bakteri V. cholerae ditemukan pada sampel udang dengan kode UA2 dan kerang dengan kode KA2 yang terdapat di Pasar Ketapian. 7.2 Saran Penelitian lebih lanjut agar dilakukan identifikasi secara molekular serta mengidentifikasi keragaman genetik bakteri Vibrio cholerae yang bersifat patogen sehingga diperoleh data yang lebih spesifik. 34 35 DAFTAR PUSTAKA Adawiyah , R. 2007. Pengolahan dan Pengawetan Ikan. Jakarta: Bumi Aksara . Agus, M. 2002. Mikrobiologi Terapan. Malang: Universitas Muhammadiyah Malang Press. Amelia, S. 2005. Vibrio cholerae. Medan: Departemen Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Sumatra Utara. Amizar, R. 2011. “Karakterisasi Molekuler dari V. parahaemolyticus dan V. cholerae yang Diisolasi dari Seafood (Udang, Kerang dan Kepiting) Asal Kota Padang, Sumatera Barat dan Muara Angke, Jakarta Utara” (tesis). Padang : Universitas Andalas. Ananta W.S., I.G.M. Wijaya, P.Yuniadi, I.G.P. Dhinarananta, dan M.Agus Hendryana. 2011. Deteksi Serotipe Bakteri Vibrio cholerae O1 pada Sampel Es Pengawet Hasil Laut di Pasar Ikan Kedonganan, Kuta. (laporan penelitian). Denpasar: Fakultas Kedokteran Universitas Udayana. Badan Pusat Statistik. 2014. Statistik Wisatawan Manca Negara ke Bali Tahun 2014. Denpasar : Badan Pusat Statistik Provinsi Bali. Badan Riset Kelautan dan Perikanan. 2012. Pengolahan Ikan dan Hasil Laut. Jakarta : Departemen Kelautan dan Perikanan. Badan Standarisasi Nasional. 2006. SNI 01-2729.1-2006 Spesifikasi Ikan Segar I. Jakarta : Badan Standarisasi Nasional. Bitton, G. 2005. Waste Water Microbiology. New Jersey: John Wiley and Son Inc. Davis, B. M., H. M. Kimsey, W. Chang, and M. K. Waldor. 2001. The Vibrio cholerae O139 Calcutta Bacteriophage CTX is Infectious and Encodes a Novel Repressor. Journal of Bacteriology, 181(21) : 67-79. Dwidjoseputro. 2005. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta : Djambatan. Dziejman, M., E. Balon, D. Byod, C.M. Fraser, J.F. Heidelberg, and J.J. Mekalanos. 2002. Comparative Genomic Analysis of Vibrio cholerae Genes that Correlate with Cholera Endemic and Pandemic Diseases. Proceeding of the National Academy of Sciences, 99 (2): 1556 – 1561. 35 36 Farouque, S. M., M. J. Albert, and J. J. Mekalanos. 2000. Epidemiology, Genetiks, and Ecology of Toxigenic Vibrio cholerae. Microbiology and Molecular Biology Reviews, 62 (4) : 1301-1314. Food and Environment Hygiene Department. 2005. Vibrio Species in Seafood. Hongkong: The Government of the Hongkong Special Administrative Region. Frerich, R.R. 2010. Who First Discovered Vibrio Cholerae?. Dept. of Edidemiology University of California, Los Angeles (serial online), [cited on 2013 Apr. 20]. Available from: URL : http://www.ph.ucla.edu/ epi/snow/firstdiscoveredcholera.html. Hidayat, N., M. C. Padaga, S. Suhartini. 2006. Mikrobiologi Industri. Yogyakarta: Penerbit ANDI. Howard, L., and C. Daghlian. 2012. Vibrio cholerae Acrylic Print. Fine Art America. [cited on 2013 Apr. 20]. Available from: URL : http: //fineartamerica.com/products/vibrio-cholerae-louisa-howard-and-charles -daghlian-and-photo-researchers-acrylic-print.html. Ikatan Alumni Kesehatan Masyarakat Universitas Udayana. 2010. Resume Hasil Penelusuran KLB Muntah Berak di Kabupaten Jembrana [cited 2015 Jun. 12]. Available from: URL: http://ikayanakesmas.blogspot.com/2008/10/resume-penelusuran-klbdiare-di.html Jawetz, E.,J. L. Melnick and E. A. Adelberg. 2007. Mikrobiologi Kedokteran. Surabaya: Salemba Medika. Madigan, M. T., P. J. Martinko, and J.Parker. 2002. Brock Biologi of microorganisms. New York : Prentice Hall International Inc., Englewood Cliff. Matson, J.S., J.H. Withey, and V.J. Dirita. 2007. Regulatory Networks Controlling Vibrio Cholerae Virulence Gene Expression. American Society for Microbiology, 64(4): 5542-5549. Moat, A. G., J. W. Foster, and M.P.Spector. 2002. Microbial Physiologi. New York : Wiley-Liss, Inc. Murray, P., R. Rosenthal, Kobayashi, and M.A. Pfaller. 2002. Medical Microbiology. 4th Ed. St. Louis: Mosby a Harcourt Health Science Company. 37 National Standard Method. 2007. Identification of Vibrio Cholerae Species. Northern Ireland: Standards Unit, Evaluations and Standard Laboratory. Novotny, L., L. Dvorska, A. Lorencova, V. Beran, and I. Pavlik. 2004. Fish: a Potential Source of Bacterical Pathogens for Human Beings. Czech Republic: Veterinarity Research Institute. 32(3): 343-358. Nurmaini. 2001. Pencemaran Makanan Secara Kimia dan Biologis. Medan : USU Library Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Sumatera Utara. Osawa. 2008. Osawa sensei’s Vibrio cholerae Isolation Protocol for Environmental Samples (Seafood and River or Melted Ice Water). Japan : KOBE University. Pelczar, Jr. dan E. C. S. Chan. 2006. Dasar-Dasar Mikrobiologi I&II. Jakarta : Universitas Indonesia (UI-Press). Perusahaan Daerah Pasar Pemerintah Denpasar. 2015. Info Potensi Pasar. [cited 2015 Jun. 12]. Available from: URL: http://pdpasar.denpasarkota.go.id/ index.php/profil/234/Info-Potensi-Pasar/ Pribadi A. 2008. Identifikasi Bakteri Vibrio cholerae pada Udang Bakar yang Dijual di Sekitar Jalan Pahlawan Semarang. [cited 2013 Des. 8]. Available from: URL : http://digilib.unimus.ac.id. Provenzano, D., D. A. Scuhmacher, J. L. Barker, and K. E. Klose. 2001. The Virulence Regulatory Protein ToxR Mediates Enhanced Bile Resistance in Vibrio cholerae and Other Pathogenic Vibrio Species. Journal of Clinical Microbiology, 12(2) : 7758-7763. Purwoko, T. 2007. Fisiologi Mikroba. Jakarta : Bumi Aksara. Santoso, S. B. 2000. “Isolasi dan Identifikasi Vibrio sp. dari Udang Windu (Penaeus monodon Fab.) yang Dipelihara di Tambak Tradisional dan Intensif di Kabupaten Lamongan (skripsi). Surabaya: Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Shawyer, M. 2003. The Use of Ice on Small Fishing Vissels. Food Agricultural Organization of the United Nations, 9(4): 9-21 Siagan, A. 2002. Mikroba Patogen Pada Makanan dan Sumber Pencemarannya. [cited 2012 Des. 9]. Available from: URL : http://library.usu.ac.id/ download/fkm/fkm-albiner3.pdf. Simanjuntak, C.H. 2002. Cholera in Indonesia in 1993-1999. The American Society of Tropical Medicine and Hygiene. 65(5): 788-797. 38 Soemirat, J. 2005. Toksikologi Lingkungan. Yogyakarta: Gajah Mada Universitas Press. Suriawiria. 2003. Mikrobiologi Air. Bandung: PT Alumni. Suzita, R., A.S. Abdulamir, F.A. Bakar, and R. Son. 2009. A Mini Review: Cholera Outbreak via Shellfish. American Journal of Infectious Disease, 5(1) : 40-47 Taneja, N. 2005. Emergence of Vibrio Cholerae O1 Biotipe E1 Tor Serotype Inaba in North India. Japan: Japan Journal of Infectious Disease, 8(3): 238-240. Tantillo, G.M., M. Fontanarods, A. Di Pinto, and M. Musti. 2004. Updated Perspectives on Emerging Vibrios Associated with Human Infections. Letters in Applied Microbiology, 39(1): 117-126. Urassa, W.K., Y.B. Mhando, F.S. Mhalu, and S.J. Mjonga. 2000. Antimicrobial Susceptibility Pattern of Vibrio cholerae O1 Strain During Two Cholerae Outbreaks in Dar es Salaam, Tanzania. East African Medical Journal. 77 (7) : 350-353 Waluyo, L. 2004. Mikrobiologi Umum. Malang: UMM Press. Wirawan, A. 2008. Bali Needs to Develop Tourism Health. [cited 2012 Des. 9]. Available from: URL : http://wordpress.com/tag/aviation-medicine/ World Health Organization. 2004. Cholera Outbreak: Assessing the Outbreak Response and Improving Preparedness. Global Task Force on Cholera Control. 9(2): 7-18 World Health Organization, Food and Agricultural Organization. 2005. Risk Assessment of Choleragenic Vibrio Cholerae O1 and O139 in Warmwater Shrimp in International Trade. Microbiological Risk Assessment Series. 9th Ed. 16(2): 17-21 Yuwono, T. 2005. Biologi Molekuler. Jakarta : Erlangga. 39 LAMPIRAN Lampiran 1. Hasil Isolasi dan Identifikasi Bakteri Vibrio cholerae pada Sampel Hasil Perikanan yang Diperoleh dari Pasar Ketapian APW TCBS UJI BIOKIMIAWI SIMON Kode Tumbuh PEWARNAAN TSIA SIM UJI Koloni CITRAT Sampel Bakteri/ Berwarna GRAM SEROLOGI Dasar/ Berwarna Keruh Kuning Gas H2 S Motilitas Lereng Biru IA1 Positif Gram Negatif Negatif IA2 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah IA3 Positif Gram Negatif Negatif UA1 Positif Gram Negatif Negatif UA2 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Inaba Merah UA3 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah KA1 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah KA2 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Inaba Merah KA3 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah Keterangan: IA : sampel ikan di Pasar Ketapian UA : sampel udang di Pasar Ketapian KA : sampel kerang di Pasar Ketapian 40 Lampiran 2. Hasil Isolasi dan Identifikasi Bakteri Vibrio cholerae pada Sampel Hasil Perikanan yang Diperoleh dari Pasar Kumbasari APW TCBS UJI BIOKIMIAWI SIMON Kode Tumbuh PEWARNAAN TSIA SIM UJI Koloni CITRAT Sampel Bakteri/ Berwarna GRAM SEROLOGI Dasar/ Berwarna Keruh Kuning Gas H2 S Motilitas Lereng Biru IB1 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah IB2 Positif Gram Negatif Negatif IB3 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah UB1 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah UB2 Positif Gram Negatif Negatif UB3 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah KB1 Positif Gram Negatif Negatif KB2 Positif Gram Negatif Negatif KB3 Positif Gram Negatif Negatif Keterangan: IB : sampel ikan di Pasar Kumbasari UB : sampel udang di Pasar Kumbasari KB : sampel kerang di Pasar Kumbasari 41 Lampiran 3. Hasil Isolasi dan Identifikasi Bakteri Vibrio cholerae pada Sampel Hasil Perikanan yang Diperoleh dari Pasar Pidada APW TCBS UJI BIOKIMIAWI SIMON Kode Tumbuh PEWARNAAN TSIA SIM UJI Koloni CITRAT Sampel Bakteri/ Berwarna GRAM SEROLOGI Dasar/ Berwarna Keruh Kuning Gas H2 S Motilitas Lereng Biru IC1 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah IC2 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah IC3 Positif Gram Negatif Negatif UC1 Positif Gram Negatif Negatif UC2 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah UC3 Positif Gram Negatif Negatif KC1 Positif Gram Negatif Negatif KC2 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah KC3 Positif Positif Gram Negatif Kuning/ Negatif Negatif Positif Negatif Negatif Merah Keterangan: IC : sampel ikan di Pasar Pidada UC : sampel udang di Pasar Pidada KC : sampel kerang di Pasar Pidada 42 Lampiran 4. Pertumbuhan Bakteri Vibrio cholerae pada Media Agar TCBS A B Ket: Gambar cawan A adalah media yang tidak ditumbuhi bakteri. Gambar cawan B adalah media yang ditumbuhi bakteri Vibrio cholerae Lampiran 5. Hasil Streak For Single Colony Bakteri Vibrio cholerae Patogen 43 Lampiran 6. Hasil Foto Bakteri Vibrio cholerae Perbesaran 1000 Kali Lampiran 7. Sampel Ikan Tongkol (Euthynnus affinis) 44 Lampiran 8. Sampel Udang Kelong (Penaeus indicus) Lampiran 9. Sampel Kerang Kijing (Anodonta sp.) 45 Lampiran 10. Standar Mutu Ikan Segar Persyaratan Mutu dan Keamanan Pangan Ikan Segar (SNI 01-2729.1-2006) Jenis Uji a. Organoleptik b. Cemaran Mikroba: - ALT - Escherechia coli - Salmonela - V. cholerae c. Cemaran kimia: - Raksa (Hg) - Timbal (Pb) - Histamin - Kadmium (Cd) d. Parasit Satuan Persyaratan Angka (1-9) 7 Koloni/ gram APM/ gram APM/ 25 gram APM/ 25 gram Maksimal 5x105 Maksimal <2 Negatif Negatif mg/kg mg/kg mg/kg mg/kg ekor Maksimal 0,5 Maksimal 0,4 Maksimal 100 Maksimal 0,1 Maksimal 0 Sumber : BSN (2006) Keterangan : ALT : Angka Lempeng Total APM : Angka Paling Memungkinkan
