POTENSI EKSTRAK DAUN DAN BATANG TUMBUHAN MANGROVE Avicennia marina DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Gelar Sarjana Strata Satu (S-1) Oleh: DI’AYATUL CHOERIYAH 1201070004 PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2017 i v Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 vi Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 vii Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 PERSEMBAHAN Sujud syukurku atas Kehadirat ILLahi Robbi atas semua yang telah diberikan kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “ Potensi Ekstrak Daun dan Batang Tumbuhan Mangrove Avicennia marina Dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophila Secara In-Vitro” tanpa halangan suatu apapun, dan penulis ingin mempersembahkan skripsi ini untuk : 1. Bapak H.M Khusaedi Warsim dan Ibu Hj.Musngidah tercinta sembah dan sujud ananda takan tiadanya hentinya serta senantiasa terucapkan tulus rasa terimakasih yang mendalam atas doa yang tiada henti-hentinya untuk penulis dan selalu mensuport penulis untuk selalu bersemangat dalam menyelesaikan skripsi ini 2. Kakakku tersayang Siti Nurkhayati, Syiam mukamal dan Muslichatun yang telah memberikan semangat untuk penulis, semoga jalinan kasih sayang dan persaudaraan kita takan pernah putus. v Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 “MOTTO” “ Sesungguhnya sesudah kesulitan ada kemudahan, maka apabila kamu telah selesai dari suatu urusan kerjakanlah dengan sungguh-sungguh urusan yang lain dan hanya kepada Tuhan-Mulah kamu berharap” (Q.S. Al-Insyiroh : 6-8) “ Dan apa saja nikmat yang ada pada kamu, maka dari Allah-lah (datangnya), dan bila kamu ditimpa oleh kemudratan, maka hanya kepada-Nya-lah kamu meminta pertolongan” (Q.S. An-Nahl : 53) “ Barang siapa yang meniti satu jalan untuk menuntut ilmu, akan Allah mudahkan dengan perbuatannya itu jalan menuju syurga” (HR. Tirmidzi) vi Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 UCAPAN TERIMAKASIH Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan rahmat, taufik serta hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan Skripsi yang berjudul “ Potensi Ekstrak Daun dan Batang Tumbuhan Mangrove Avicennia marina Dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophila Secara In-Vitro”. Sholawat serta salam senantiasa tercurahkan kepada Nabi Muhammad SAW yang telah membawa kita dari jaman kegelapan ke jaman yang benderang seperti sekrang ini. Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terimakasih kepada Ibu Dini Siswani Mulia, S.Pi, M.Si dan Bapak Drs. Heri Maryanto, M.Si selaku pembimbing skripsi yang dengan ikhlas dan sabar meluangkan waktunya dalam membantu, membimbing, memberikan arahan motivasi dan semangat selama penulisan skripsi ini. Selain itu penulis juga menyampaikan terimakasih kepada : 1. Drs. Pudiyono, M.Hum selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto. 2. Bapak Drs. Arief Husin, M.Si selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. 3. Kedua orang tuaku Bapak H.M Khusaedi Warsim dan Ibu Hj.Musngidah. Terimakasih untuk doa, kasih sayang dan semangat serta motivasi yang kalian berikan. 4. Kakakku tersayang Siti Nurkhayati, Syiam mukamal, dan Muslichatun yang telah memberikan semangat untuk penulis, semoga jalinan kasih sayang dan persaudaraan kita takan pernah putus. vii Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 5. Teruntuk yang terkasih Arwan arofik terimakasih atas doa, dukungan serta kasih sayang yang selalu diberikan. 6. Sahabat Penelitian Ana Miftahul Janah, Suci Dwi Rahayu, Yunitasari, Berlian Bun’ya Rista, dan Akbar Arifurrohman terimakasih untuk kerjasama dan kebersamaan kita selama ini. 7. Sahabatku Emilia Eka Priyanti, Epriliana Dewi, Mufliah, Vika Anggelika, Putri Utami dan Darmuti. 8. Teman-teman kos rizki Putri, Isti, Titi, dan Fitri. Terimakasih untuk keceriaan dan semangat yang kalian berikan. 9. Seluruh teman mahasiswa Program Studi Pendidikan Biologi angkatan 2012, terimakasih atas kerjasama dan motivasinya. 10. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang turut membantu hingga skripsi ini terselesaikan. Penulis menyadari bahwa dalam penulisan skripsi jauh dari sempurna, baik dari segi materi maupun penyususnannya. Mudah-mudahan skripsi ini dapat berguna bagi pembaca dan adanya kritik serta saran yang membangun dari pembaca sangat penulis harapkan. Purwokero, 4 Agustus 2017 Penulis viii Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 POTENSI EKSTRAK DAUN DAN BATANG TUMBUHAN MANGROVE ( Avicennia marina) DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO Oleh: DI’AYATUL CHOERIYAH 1201070004 ABSTRAK Penelitian bertujuan untuk mengetahui potensi ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove A.marina dalam menghambat pertumbuhan bakteri A.hydrophila secara in-vitro. Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi menggunakan 2 pelarut yaitu n-heksan dan metanol. Rancangan penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola faktorial dengan 3 faktor yaitu organ tumbuhan mangrove A.marina adalah daun dan batang, strain bakteri yang digunakan adalah GPl-04, GJ-01, GK-01, GB-01, GL-01, dan GL-02, Konsentrasi ekstrak mangrove yang digunakan adalah 0%, 10%, 20%, dan 30%. Parameter yang diukur yaitu diameter zona hambat menggunakan kertas cakram (metode Kirby-Bauer). Analisis data yang digunakan yaitu Non Parametrik Kruskall-Wallis Test dengan kepercayaan 95%. Hasil analisis menunjukan potensi esktrak metanol daun A.marina konsentrasi 20% menghasilkan zona hambat tertinggi sebesar 2,4 mm pada strain GL-02 dan batang A.marina konsentrasi 20% menghasilkan zona hambat tertinggi sebesar 1,93 mm pada strain GJ-01, sedangkan ekstrak n-heksan daun A.marina konsentrasi 20% menghasilkan zona hambat tertinggi sebesar 1,07 mm pada strain GB-01 dan ekstrak batang A.marina konsentrasi 10% menghasilkan zona hambat tertinggi sebesar 1,05 mm pada strain GL-01. Kata kunci : Aeromonas hydrophila, Avicennia marina, zona hambat ix Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 DAFTAR ISI HALAMAN HALAMAN JUDUL .......................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN ............................................................................ ii HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................ iii SURAT PERNYATAAN.................................................................................... iv PERSEMBAHAN ............................................................................................... v MOTTO............................................................................................................... vi UCAPAN TERIMA KASIH ............................................................................... vii ABSTRAK .......................................................................................................... ix DAFTAR ISI ...................................................................................................... x DAFTAR TABEL .............................................................................................. xii DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xiii DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xiv BAB I BAB II PENDAHULUAN ............................................................................. 1 1.1 Latar Belakang ............................................................................ 1 1.2 Perumusan Masalah .................................................................... 3 1.3 Tujuan Penelitian ....................................................................... 3 1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................... 3 TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................... 4 2.1 Tinjauan Umum Mangrove Avicennia marina ........................... 4 2.2 Bakteri Aeromonas hydrophilla .................................................. 8 x Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 BAB III METODE PENELITIAN .................................................................. 15 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian .................................................... 15 3.2 Alat dan Bahan Penelitian .......................................................... 15 3.3 Rancangan Penelitian ................................................................. 17 3.4 Cara Kerja ................................................................................... 17 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 25 4.1 Ekstraksi Tanaman Mangrove Avicennia marina ....................... 25 4.2 Analisis fitokimia ekstrak daun dan batang Avicennia marina dilakukan uji reaksi warna dengan KLT (Kromatografi Lapis Tipis). .......................................................................................... 28 4.3 Purifikasi Bakteri Aeromonas hydrophila strain GPL-04, GJ01, GK-01,GB-01, GL-01, GL-02. .............................................. 32 4.4 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila Strain GPL-04, GJ-01, GK-01,GB-01, GL-01, GL-02. ............... 33 4.5 Uji Potensi Ekstrak Daun dan Batang Avicennia marina dalam menghambat pertumbuhan bakteri Aeromonas hydrophila GPL-04, GJ-01, GK-01,GB-01, GL-01, GL-02. ....... 34 BAB V SIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 38 5.1 Simpulan ..................................................................................... 38 5.2 Saran ........................................................................................... 38 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 39 LAMPIRAN ....................................................................................................... 51 xi Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 DAFTAR TABEL Table 4.1 Bahan Pembuatan Ekstrak Daun dan Batang Avicennia marina dan Hasilnya .................................................................................... 27 Tabel 4.2 Bahan Pembuatan Ekstrak N-heksan dan Metanol Daun dan Batang A.marina ............................................................................. 27 Tabel 4.3 Hasil Uji Warna pada Plat KLT (Kromatografi Lapis Tipis) Ekstrak Batang dan Daun Avicennia marina Pelarut Non polar (n-heksan) ........................................................................................ 29 Tabel 4.4 Hasil Uji Warna pada Plat KLT (Kromatografi Lapis Tipis) Ekstrak Daun dan Batang Avicennia marina Pelarut Polar (metanol) ......................................................................................... 30 Tabel 4.5 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GPl-04, GB-01, GK-01, GJ-01, GL-01, dan GL-02 ....................... 35 Tabel 4.6 Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Tumbuhan Mangrove Avicennia marina Pelarut Metanol ................................................................... 35 Tabel 4.7 Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Tumbuhan Mangrove Avicennia marina Pelarut N-heksan ................................................................. 36 xii Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Tumbuhan Avicennia marina ........................................................ 5 Gambar 4.1. Hasil Uji Warna Plat KLT : A. Daun Flavonoid B. Batang Flavonoid C. Daun Alkaloid D. Batang Alkaloid E. Daun Terpenoid F. Batang Terpenoid G. Daun Tanin H. Batang Tanin ............................................................................................. 29 Gambar 4.2 Hasil Uji Warna Plat KLT : A. Daun Flavonoid B. Batang Flavonoid C. Daun Alkaloid D. Batang Alkaloid E. Daun Terpenoid F. Batang Terpenoid G. Daun Tanin H. Batang Tanin ............................................................................................. 31 Gambar 4.3 Hasil Purifikasi Isolat Bakteri A. hydrophila : A. Strain GPL04 B. Strain GJ-01 C. Strain GK-01 D. Strain GB-01 E. Strain GL-01 dan F. Strain GL-02. ........................................................... 32 Gambar 4.4 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GPL04 dengan TPC .............................................................................. 36 Gambar 4.5 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GL01 dengan TPC .............................................................................. 37 Gambar 4.6 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GL01 dengan TPC .............................................................................. 38 Gambar 4.7 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GJ-01 dengan TPC ................................................................................... 39 Gambar 4.8 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GK01 dengan TPC .............................................................................. 40 Gambar 4.9 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GPL04 dengan TPC .............................................................................. 41 xiii Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 ZONA HAMBAT N-HEKSAN ..................................................... 43 Lampiran 2 ZONA HAMBAT METANOL ...................................................... 46 Lampiran 3 Hasil perhitungan randemen ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove Avicennia marina ......................................... 53 Lampiran 4 Penghitungan koloni bakteri A. hydrophila dengan TPC .............. 54 Lampiran 5 Gambar Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila Strain GPL-04, GJ-01, GK-01,GB-01, GL-01, dan GL-02. .................................... 57 Lampiran 6 Data hasil zona hambat metanol dan n-heksan ............................. 59 Lampiran 7 Hasil Analisis SPSS Non-Parametrik Ekstrak Tumbuhan Mangrove Avicennia marina terhadap bakteri Aeromonas hydrophila strain GPL-04, GJ-01, GK-01,GB-01, GL-01, dan GL-02.. .......................................................................................... 61 Lampiran 8 Dokumentasi penelitian ................................................................. 83 xiv Potensi Ekstrak Daun..., Di'ayatul Choeriyah, FKIP UMP 2017