PERBEDAAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI FLAVONOID TOTAL DAN TANIN TOTAL PADA DAUN BANGUNBANGUN (Coleus amboinicus Lour) TERHADAP BAKTERI Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi TESIS OLEH Gelora Arihta Bangun 137006008/KIM PROGRAM STUDI MAGISTER ILMU KIMIA FAKULTAS MATEMATIKADAN ILMU PENGETAHUANALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2015 PERBEDAAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI FLAVONOID TOTAL DAN TANIN TOTAL PADA DAUN BANGUNBANGUN (Coleus amboinicus Lour) TERHADAP BAKTERI Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi TESIS Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Magister Sains dalam Program Studi Ilmu Kimia pada Program Pascasarjana Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sumatera Utara OLEH GELORA ARIHTA BANGUN 137006008/KIM PROGRAM STUDI MAGISTER ILMU KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUANALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2015 Judul Tesis : Perbedaan Aktivitas Antibakteri Flavonoid Total Dan Tanin Total Pada Daun BangunBangun (Coleus Amboinicus Lour) Terhadap Bakteri Shigella Dysenteriae, Escherichia Coli Dan Salmonella Typhi Nama Mahasiswa : Gelora Arihta Bangun Nomor Pokok : 137006008 Program Studi : Magister Ilmu Kimia Menyetujui Komisi Pembimbing (Prof. Dr. Tonel Barus) Ketua (Dr. Lamek Marpaung, M.Phil) Anggota Ketua Program Studi Dekan (Prof. Basuki Wirjosentono, MS, Ph.D) TanggalLulus : 17 Juni 2015 (Dr. Sutarman, M.Sc) Telah diuji pada Tanggal : 17 Juni 2015 PANITIA PENGUJI TESIS Ketua : Prof. Dr. Tonel Barus Anggota : 1. Dr. Lamek Marpaung, M.Phil 2. Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS 3. Dr. Sovia Lenny, MSi 4. Dr. Adil Ginting, MSc PERNYATAAN ORISINALITAS PERBEDAAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI FLAVONOID TOTAL DAN TANIN TOTAL PADA DAUN BANGUNBANGUN (Coleus amboinicus Lour) TERHADAP BAKTERI Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi TESIS Dengan ini saya menyatakan bahwa saya mengakui semua karya tesis ini adalah hasil karya saya sendiri kecuali kutipan dan ringkasan yang tiap satunya telah dijelaskan sumbernya dengan benar. Medan, 10 Agustus 2015 Gelora Arihta Bangun NIM. 137006008 KATA PENGANTAR Puji serta syukur Penulis ucapkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan rahmat dan anugerah-Nya sehingga Penulis dapat menyelesaikan tesis ini. Pada kesempatan ini, Penulis mengucapkan terimakasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya kepada kedua orang-tua tercinta dan tersayang, Ayahanda Alm N. Bangun dan Ibunda Dahmi Purba, S.Pd yang telah membesarkan dengan kasih sayang dan mendidik Penulis agar dapat menjadi manusia yang berguna bagi agama, bangsa, negara serta bermanfaat bagi orang lain. Dan terimakasih juga kepada suamiku Sepakat Ginting, S.Si dan anak-anakku Josua Leonard Ginting dan Jovanya Evelyn Ginting yang selalu memberi semangat, dukungan serta doanya kepada Penulis. Penulis juga mengucapkan terimakasih kepada Bapak Prof. Dr. Tonel Barus selaku Dosen Pembimbing I dan Bapak Dr. Lamek Marpaung, M.Phil selaku Dosen Pembimbing II, yang telah memberikan arahan, bimbingan dan dukungan penuh kepada Penulis dalam menyelesaikan tesis ini. Penulis juga berterimakasih kepada Bapak Prof. Basuki Wirjosentono, MS, Ph.D dan Bapak Dr. Hamonangan Nainggolan, M.Sc selaku Ketua dan Sekretaris Program Studi Magister Ilmu Kinia FMIPA USU yang telah mensahkan tesis ini. Dan juga terimakasih saya ucapkan kepada Bapak Dr. M. Pandapotan Nasution, M.PS, Ibu Dr. Sovia Lenny, M.Si dan Bapak Dr. Adil Ginting, M.Sc selaku dosen penguji yang telah memberikan banyak dukungan moril dan saran perbaikan tesis kepada Penulis selama masa studi untuk Program Magister (S2) di FMIPA USU, dan juga kepada seluruh Dosen Pascasarjana Ilmu Kimia FMIPA USU yang telah memberikan ilmu dan pengetahuan yang bermanfaat bagi Penulis. Penulis juga mengucapkan terimakasih kepada seluruh rekan-rekan pascasarjana ilmu kimia USU stambuk 2013-2015, seluruh asisten dan staf Laboratorium Kimia Bahan Alam FMIPA USU, seluruh staff Mikrobiologi Badan Riset dan Standarisasi Pangan (BARISTAN) yang telah mendukung dan memberikan fasilitas kepada penulis. Juga tidak lupa kepada kak Leli selaku bagian administrasi sekretariat pascasarjana ilmu kimia FMIPA USU atas bantuan serta fasilitas yang disediakan untuk Penulis. Hormat Penulis Gelora Arihta Bangun RIWAYAT HIDUP DATA PRIBADI Nama Lengkap : Gelora Arihta Bangun Tempat danTanggal Lahir : Pematang Siantar, 05 Juli 1979 Alamat Rumah : Teuku Umar Griya Jati Bening Blok D No.04 Binjai Telepon / HP : 085262868340 Email : [email protected] DATA PENDIDIKAN SD : SD Negeri 097522 Siantar Tamat : 1991 SMP : SMP Cinta Rakyat 2 P.Siantar Tamat : 1994 SMU : SMA Negeri 1 Siantar Tamat : 1997 Diploma-3 : Program Studi Kimia Industri FMIPA USU Tamat : 2001 Strata-1 : Program Studi Kimia FMIPA STKIP RIAMA Tamat : 2011 Strata-2 : Program Studi Magister Imu Kimia USU Tamat : 2015 PERBEDAAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI FLAVONOID TOTAL DAN TANIN TOTAL PADA DAUN BANGUNBANGUN (Coleus amboinicus Lour) TERHADAP BAKTERI Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi Abstrak Pengendalian bakteri patogen penting dilakukan untuk mencegah penyebaran penyakit infeksi, diantaranya dengan terapi antibiotik atau penggunaan bahan alam. Akan tetapi, penggunaan antibiotik dengan dosis dan waktu terapi yang tidak tepat dapat menimbulkan resistensi bakteri. Oleh karena itu, diperlukan adanya penemuan senyawa-senyawa antibakteri baru yang dapat digunakan untuk mengendalikan bakteri patogen, diantaranya adalah flavonoid dan tanin daun bangun-bangun (Coleus amboinicus Lour). Tujuan penelitian ini adalah mengetahui efek antibakteri dari flavonoid total dan tanin total daun bangun-bangun terhadap bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli, dan Salmonella typhi. Pemisahan flavonoid total dan tanin total dari daun bangun-bangun dilakukan dengan Metode Maserasi yang menggunakan pelarut metanol, dilanjutkan dengan pemisahan flavonoid dan tanin dengan cara ekstraksi yang menggunakan pelarut etilasetat, selanjutnya dilakukan pemurnian secara partisi dengan pelarut n-heksana. Penentuan flavonoid dan tanin dilakukan dengan pengujian yang menggunakan pereaksi FeCl3 5% untuk pencirian flavonoid total dan tanin total dimana apabila positif flavonoid berwarna hijau kehitaman dan positif tanin berwarna biru gelap. Uji antibakteri dilakukan dengan Metode Difusi Agar terhadap bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli, dan Salmonella typhi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar flavonoid total 0,31% dan tanin total 0,15%. Flavonoid total terhadap bakteri Shigella dysenteriae mempunyai aktivitas antibakteri pada konsentrasi 10 ppm (DDH 6,5 mm) dan terhadap bakteri Escherichia coli, Salmonella typhi mempunyai aktivitas antibakteri pada konsentrasi 25 ppm (DDH 7,1 dan 6,0 mm) sedangkan tanin total terhadap bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli, dan Salmonella typhi mempunyai aktivitas antibakteri pada konsentrasi 10 ppm (DDH 6,0 ; 6,1 dan 5,5, mm). Kata kunci : Daun Bangun-Bangun, Aktivitas Antibakteri, Ekstraksi, Flavonoid Total, tanin total THE DIFFERENCE OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY FLAVONOIDS TOTAL AND TANNINS TOTAL ON BANGUN-BANGUN LEAVES (Amboinicus coleus Lour) TOWARDS BACTERIA Shigella dysenteriae, Escherichia coli and Salmonella typhi Abstract Controlling pathogen bacteria is important to prevent the spread of disease and infection. One of the solution is by antibiotic therapy. However, the use of antibiotic with inappropriate dose and time can cause bacterial resistance. Therefore, it is necessary to discover new antimicrobial compounds which can be used to control phatogen bacteria. One of the new antimicrobial compounds is flavonoids and tannin of Bangun-bangun leaves (Coleus amboinicus Lour). The aim of this research is to know antimicrobial effect of flavonoids total and tannin total of Bangun-bangun leaves towards Shigella dysenteriae, Escherichia coli, and Salmonella typhi. Separating flavonoids total and tannins total of Bangun-bangun leaves was done by macerating them with methanol solvent, then extraction using ethyl acetate and the last partitioning them using n-hexane. The determination of chemical compounds group was done by test using reagents FeCl3 5% for identify flavonoid total and tannin total. Antibacteria test was conducted using Diffusion Method towards Shigella dysenteriae, Escherichia coli, and Salmonella typhi. The result of the research showing that flavonoid total has 0.31% and tannins total has 0.15%. Flavonoid total towards Shigella dysenteriae has antibacteria activity at 10 ppm (DDH 6.5 mm) and towards Escherichia coli, Salmonella typhi have antibacteria activity at 25 ppm (DDH 7.1 and 6.0 mm) while tannin total towards Shigella dysenteriae, Escherichia coli and Salmonella typhi have antibacteria activity at 10 ppm (DDH 6.0 ; 6.1 and 5.5 mm). Keywords : Bangun-bangun Leaves, antibacterial activity, extraction, flavonoid total, tanin total. DAFTAR ISI Halaman KATA PENGANTAR i DAFTAR RIWAYAT HIDUP iii ABSTRAK iv ABSTRACT v DAFTAR ISI vi DAFTAR TABEL viii DAFTAR GAMBAR ix DAFTAR LAMPIRAN x DAFTAR ISTILAH xi BAB1 PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang 1 1.2. Perumusan Masalah 3 1.3. Tujuan Penelitian 3 1.4. Manfaat Penelitian 4 1.5. Metodologi Penelitian 4 1.6. Waktu dan Tempat Penelitian 5 BAB2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Daun Bangun-bangun (Coleus amboinicus Lour) 6 2.2. Senyawa Flavonoid 8 2.3. Senyawa Tanin 10 2.4. Pemisahan Komponen dengan Ekstraksi 13 2.5. Mekanisme Kerja Penghambatan Senyawa Antibakteri 15 2.6. Bakteri Patogen 16 BAB 3 METODE PENELITIAN 3.1. Alat Penelitian 20 3.2. Bahan Penelitian 21 3.3. Metode Penelitian 22 3.3.1.Penyediaan Sampel 22 3.3.2. Pembuatan Ekstrak 22 3.3.3. Uji Aktivitas Antibakteri dengan Metode Difusi Agar 24 3.4. Bagan Penelitian 27 BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Hasil 34 4.1.1. Pemisahan flavonoid total dan tanin total dengan ekstraksi 34 4.1.2. Kadar flavonoid total dan tanin total 34 4.1.3. Uji aktivitas antibakteri 34 4.2. Pembahasan 38 4.2.1. Pemisahan flavonoid total dan tanin total dengan ekstraksi 38 4.2.2. Kadar flavonoid total dan tanin total 41 4.2.3. Pengujian Aktivitas Bakteri 42 BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan 49 5.2. Saran 49 DAFTAR PUSTAKA 50 LAMPIRAN 53 DAFTAR TABEL Nomor Judul Halaman Tabel 2.1 Komposisi Zat Gizi Daun Bangun-bangun Tabel 2.2 Komposisi Bakteri 17 Tabel 3.1 Komposisi nutrien agar (NA) 24 Tabel 3.2 Komposisi nutrien broth (NB) 25 Tabel 4.1 Pemisahan flavonoid total dan tanin total dengan ekstraksi 34 Tabel 4.2 Hasil ekstraksi daun bangun-bangun 34 Tabel 4.3 Diameter Daerah Hambat (DDH) aktivitas antibakteri flavonoid total terhadap bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi. 37 Diameter Daerah Hambat (DDH) aktivitas antibakteri tanin total terhadap bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi. 38 Diameter Daerah Hambat (DDH)rata-rata aktivitas antibakteri flavonoid total terhadap bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi. 45 Diameter Daerah Hambat (DDH)rata-rata aktivitas antibakteri tanin total terhadap bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi. 45 Tabel 4.4 Tabel 4.5 Tabel4.6 6 DAFTAR GAMBAR Nomor Judul Halaman Gambar 2.1 Flavonol 9 Gambar 2.2 Flavanonol 9 Gambar 2.3 Leukoantosianidin 9 Gambar 2.4 Antosianidin 9 Gambar 2.5 Asam gallat 10 Gambar 2.6 Gallotanin 11 Gambar 2.7 Katekin 12 Gambar 2.8 Catechol tannin 12 Gambar 4.1 Gambar Diameter Daerah Hambat (DDH) dari flavonoid Total daun bangun-bangun terhadap bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi. 35 Gambar 4.2 Gambar Diameter Daerah Hambat (DDH) dari tanin total Daun bangun-bangun terhadap bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi. 36 Gambar 4.3 Pemurnian flavonoid total dan tanin total Gambar 4.4 Aktivitas hambat flavonoid total terhadap bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi. 47 Gambar 4.5 Aktivitas hambattanin total terhadap bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli dan Salmonella typhi. 40 47 DAFTAR LAMPIRAN Nomor Judul Halaman Lampiran 1 Hasil Identifikasi Tumbuhan 53 Lampiran 2 IzinUji Aktivitas Bakteri 54 Lampiran 3 Alat dan Bahan Penelitian 55 DAFTAR ISTILAH Singkatan Kepanjangan NA nutrient agar NB nutrient broth MIC minimum inhibitory concentration MHA mueller hinton agar rpm rounds per minute DMSO dimethyl sulfoxide DDH diameter daerah hambat