DETEKSI Streptococcus agalactiae PENYEBAB MASTITIS
advertisement
DETEKSI Streptococcus agalactiae PENYEBAB MASTITIS SUBKLINIS PADA SAPI PERAH DI KECAMATAN CENDANA KABUPATEN ENREKANG SKRIPSI SRI RAHAYU O111 10 262 PROGRAM STUDI KEDOKTERAN HEWAN FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS HASANUDDIN MAKASSAR 2015 DETEKSI Streptococcus agalactiae PENYEBAB MASTITIS SUBKLINIS PADA SAPI PERAH DI KECAMATAN CENDANA KABUPATEN ENREKANG SRI RAHAYU O 111 10 262 Skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan pada Program Studi Kedokteran Hewan Fakultas Kedokteran PROGRAM STUDI KEDOKTERAN HEWAN FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS HASANUDDIN MAKASSAR 2015 PERNYATAAN KEASLIAN 1. Yang bertanda tangan dibawah ini : Nama : Sri Rahayu Nim : O 111 10 262 Menyatakan dengan sebenarnya bahwa : a. Karya skripsi saya adalah asli b. Apabila sebagian atau seluruhnya dari skripsi ini, terutama dalam bab hasil dan pembahasan, tidak asli atau plagiasi, maka saya bersedia dibatalkan dan dikenakan sanksi akademik yang berlaku. 2. Demikian pernyataan keaslian ini dibuat untuk dapat digunakan seperlunya. Makassar, 19 Agustus 2015 Sri Rahayu ABSTRAK SRI RAHAYU (O 111 10 262). Deteksi Streptococcus agalactiae Penyebab Mastitis Subklinis pada Sapi Perah di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang. Dibimbing oleh LUCIA MUSLIMIN sebagai pembimbing utama dan FIKA YULIZA PURBA sebagai pembimbing anggota. Mastitis subklinis adalah peradangan jaringan ambing tanpa disertai gejala klinis pada ambing maupun perubahan pada susu serta dapat menyebabkan penurunan produksi susu. Streptococcus agalactiae merupakan salah satu agen mikroorganisme patogen yang bisa menyebabkan mastitis subklinis pada sapi perah. Penelitian ini bertujuan untuk mendeteksi keberadaan bakteri Streptococcus agalactiae penyebab mastitis subklinis pada sapi perah di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang. Sampel pada penelitian ini sebanyak 33 sampel susu yang diperoleh dari 28 ekor sapi perah penderita mastitis subklinis yang tersebar di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang. Pemeriksaan mastitis subklinis pada sapi perah dilakukan dengan menggunakan reagen California Mastitis Test (CMT). Deteksi bakteri dilakukan melalui isolasi dan identifikasi di laboratorium dengan menggunakan metode kultur, pewarnaan Gram dan beberapa uji biokimia. Hasil penelitian menunjukkan bahwa dari 33 sampel susu yang diperoleh dari 28 ekor sapi perah penderita mastitis subklinis yang tersebar di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang, ditemukan 1 (3,03%) sampel susu positif mengandung bakteri Streptococcus agalactiae. Kata kunci : sapi perah, mastitis subklinis, Streptococcus agalactiae, Cendana, Enrekang ABSTRACT SRI RAHAYU (O 111 10 262). Detection of Streptococcus agalactiae Causes of Subclinical Mastitis in Dairy Cattle in Sub-District Cendana Enrekang Regency. Suvervised by LUCIA MUSLIMIN as the main supervisor and FIKA YULIZA PURBA as Supervisor Member. Subclinical Mastitis is an inflammation of the mamary gland without clinical symptoms in the mamary gland or change of milk, and can decrease milk production. Streptococcus agalactiae is one of pathogenic microorganism agent that can cause subclinical mastitis in dairy cattle. The aims of the study were to detect the presence of the Streptococcus agalactiae bacteria cause subclinical mastitis in dairy cattle in Cendana Sub-District, Enrekang Regency. total samples in this study is 33 milk samples were obtained from 28 dairy cattle patients scattered subclinical mastitis in Cendana Sub-District, Enrekang Regency. Examination of subclinical mastitis in dairy cattle performed using reagents California Mastitis Test (CMT). Bacterial detection is done through isolation and identification laboratory using method of bacterial culture, Gram stain and biochemical tests. The results showed that out of the 33 samples of milk were obtained from 28 dairy cattle patients scattered subclinical mastitis in Cendana Sub-District, Enrekang Regency were examined found 1 (3.03%) positive samples Streptococcus agalactiae. Keywords : dairy cattle, subclinical mastitis, Streptococcus agalactiae, Cendana, Enrekang KATA PENGANTAR Puji syukur penulis panjatkan atas kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan karunia-Nya kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Deteksi Streptococcus agalactiae Penyebab Mastitis Subklinis pada Sapi Perah di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang”. Shalawat dan salam dihaturkan kepada Nabi Muhammad SAW yang telah membawa manusia dari alam kegelapan menuju alam yang terang benderang. Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan (SKH) pada Program Studi Kedokteran Hewan Universitas Hasanuddin Makassar. Penulis menyadari bahwa dalam penelitian dan penulisan skripsi ini tidak akan terlaksana dengan baik tanpa bantuan dan peran serta berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis mengucapkan terima kasih yang tulus kepada: 1. Prof. Dr. dr. Andi Asadul Islam, Sp.BS selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin, 2. Prof. Dr. drh. Lucia Muslimin, M.Sc selaku Ketua Program Studi Kedokteran Hewan Universitas Hasanuddin, 3. Prof. Dr. drh. Lucia Muslimin, M.Sc selaku Pembimbing Utama dan drh. Fika Yuliza Purba, M.Sc selaku Pembimbing Anggota yang dengan penuh kesabaran telah memberikan bimbingan, arahan, ilmu, saran dan nasehat dalam penyelesaian penulisan skripsi ini, 4. Prof. Dr. drh. Ratmawati Malaka, M.Sc dan drh. Muhammad Fadhlullah Mursalim selaku dosen pembahas dan penguji yang telah memberikan saran dan kritik untuk perbaikan penulisan skripsi ini, 5. Kedua orang tua Ayahanda Lukman, S.P., M.M.A dan Ibunda Rahmatiah, S.Pd atas segala dukungan, motivasi, kasih sayang dan doa yang selalu diberikan kepada penulis, serta kedua kakak tercinta Wawan Gunawan dan Hildayanti yang selalu membantu dan mengerti segala kondisi sehingga penulisan skripsi ini dapat terselesaikan, 6. Dinas Peternakan dan Perikanan Kabupaten Enrekang, Bapak Sanusi, Bapak Ridwan, drh. Suhartila beserta staf yang telah memberikan bantuan selama penelitian, 7. Peternak sapi perah di lokasi penelitian yang telah memberikan data, informasi, dan dengan rasa kekeluargaan menerima dan membantu penulis selama penelitian berlangsung, 8. Seluruh dosen dan staf Program Studi Kedokteran Hewan yang telah banyak membantu penulis dalam menyelesaikan studi, 9. Teman seangkatan “V-Gen” yang telah memberikan pengalaman yang tidak terlupakan kepada penulis selama berkuliah di Program Studi Kedokteran Hewan, 10. Teman seperjuangan dalam penelitian Dzul haerah yang selalu menyemangati, memberikan saran, selalu membantu mulai dari penyusunan proposal, penelitian dan penyusunan skripsi. 11. Teman satu bimbingan Fatma, Aswan, Aqsar, Ashari, Rahayu, ita, yang selalu memberikan semangat dan saling membantu dalam penelitian dan penyusunan skripsi ini, 12. Sahabat “Chebee” Lilis, Mela, Hera, Darma, Ayu Tanro yang selalu memberikan bantuan dan menemani dalam suka duka, sejak awal penulis menuntut ilmu di akademik ini. Terima kasih atas segala pengertian dan dukungannya. Para “Pojok Kiri” Satrya, ade, indra, hastira, degi, christine, yuyun dan lidia, 13. Sahabat tercinta Maria Ulfah Sri Nurhayu dan Indriani, yang selalu memberikan semangat, doa dan selalu mengingatkan penulis agar cepat menyelesaikan pendidikan dan menjadi sarjana. 14. Semua pihak yang turut membantu dalam menyelesaikan skripsi ini dan yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu penulis mengharapkan kritik dan saran yang sifatnya membangun agar penulis dapat berkarya dengan lebih baik kedepannya. Wassalamu’ Alaikum Warahmatullahi Wabarakatuh. Makassar, 23 Februari 2015 Penulis DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL HALAMAN PENGESAHAN ABSTRAK KATA PENGANTAR DAFTAR ISI DAFTAR TABEL DAFTAR GAMBAR DAFTAR LAMPIRAN 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang 1.2 Rumusan Masalah 1.3 Tujuan Penelitian 1.4 Manfaat Penelitian 1.5 Hipotesis Penelitian 1.6 Keaslian Penelitian 1 2 2 2 3 3 2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Ambing 2.2 Mastitis Subklinis 2.2.1 Etiologi 2.2.2 Cara Penularan dan faktor predisposisi 2.2.3 Patogenesis 2.2.4 Gejala Klinis 2.2.5 Diagnosis 2.2.6 Pengendalian dan Pencegahan 2.2.7 Pengobatan 2.3 Bakteri Streptococcus agalactiae 4 5 6 6 7 7 8 8 8 8 3 METODOLOGI PENELITIAN 3.1 Waktu dan Lokasi 3.2 Materi Penelitian 3.2.1 Sampel dan Teknik Sampling 3.2.2 Bahan Penelitian 3.2.3 Alat Penelitian 3.3 Metode Penelitian 3.3.1 Pengambilan Sampel 3.3.2 Isolasi dan Identifikasi 3.3.3 Analisa Data 11 11 11 12 12 12 12 12 14 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Pemeriksaan Mastitis Subklinis 4.2 Isolasi dan Identifikasi Streptococcus agalactiae dari Sampel Susu Sapi Penderita Mastitis Subklinis i iii iv vi vi vi 15 15 17 5. KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan 5.2 Saran DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN RIWAYAT HIDUP 25 25 26 29 39 DAFTAR TABEL 1. Karakteristik Biokimia Streptococcus agalactiae 2. Jumlah Sampel Penelitian dan Hasil Pemeriksaan Mastitis Subklinis dengan Uji CMT di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang 3. Hasil Identifikasi Melalui Pewarnaan Gram 4. Hasil Identifikasi bakteri dengan Uji CAMP 5. Hasil Uji Biokimia terhadap 11 Sampel. 6. Data Jumlah Sampel Susu Positif Streptococcus agalactiae di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang 10 16 19 20 21 23 DAFTAR GAMBAR 1. Gambar skematik anatomi ambing sapi 2. Radang ambing pada sapi perah yang mengalami mastitis 3. Morfologi Streptococcus agalactiae yang diamati melalui mikroskop 4. Hasil Pengujian Mastitis Subklinis Menggunakan Reagen CMT 5. Hasil Pewarnaan Gram Bakteri yang diduga Streptococcus agalactiae dibandingkan dengan literatur 6. Hasil Uji CAMP dibandingkan dengan Literatur 7. Hasil Pengujian Biokimia Bakteri yang diduga Streptococcus agalactiae 8. Kultur bakteri diduga Streptococcus agalactiae pada media Blood Agar 5 6 9 15 18 21 22 22 DAFTAR LAMPIRAN 1. Hasil Isolasi dan Identifikasi Laboratorium 2. Identitas Peternak dan Data Sampel Sapi perah 3. Dokumentasi Penelitian 29 35 40 1 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Susu sebagai salah satu produk peternakan merupakan sumber protein hewani yang semakin dibutuhkan dalam meningkatkan kualitas hidup masyarakat. Sebagai upaya untuk memenuhi kebutuhan susu tersebut dilakukan peningkatan populasi, produksi dan produktifitas sapi perah. Kabupaten Enrekang adalah salah satu daerah yang telah menjadi prioritas pengembangan peternakan sapi perah di Sulawesi Selatan. Iklim di Kabupaten Enrekang mendukung untuk pengembangan sapi perah (Kasim dkk., 2011). Kabupaten Enrekang khususnya Kecamatan Cendana, merupakan salah satu pusat peternakan sapi perah. Berdasarkan data Disnakin (2014), Kecamatan Cendana merupakan kecamatan yang memiliki populasi sapi perah paling banyak di Kabupaten Enrekang yaitu 557 ekor. Salah satu faktor penghambat dalam peningkatan produksi susu dan merupakan masalah umum dalam usaha peternakan sapi perah adalah penyakit. Penyakit yang sering menyerang sapi perah saat memproduksi susu atau laktasi ialah mastitis (Hidayat dkk., 2002). Penyakit radang ambing atau yang dikenal sebagai mastitis merupakan penyakit yang sering terjadi dan merupakan masalah utama dalam dunia peternakan sapi perah karena dapat menyebabkan kerugian ekonomi yang sangat besar bagi peternakan sapi perah di seluruh dunia (Bannerman dan Wall, 2005). Kerugian ekonomi yang diakibatkan oleh mastitis, terutama mastitis subklinis meliputi penurunan produksi dan kualitas susu, peningkatan biaya perawatan dan pengobatan, pengafkiran ternak lebih awal serta pembelian sapi perah baru (Subronto, 2003). Dinyatakan oleh Bray dan Shearer (2003) bahwa penurunan produksi susu akibat mastitis sebesar 15-20% dari total produksi susu. Sedangkan menurut Taylor dan Field (2009) produksi susu akan mengalami penurunan 30%. Mastitis merupakan peradangan pada jaringan internal ambing (Sudarwanto, 2009). Berdasarkan gejalanya, mastitis yang sering menyerang sapi perah yang sedang laktasi ada 2 macam, yaitu mastitis klinis dan subklinis (Sudono dkk., 2003). Kejadian mastitis sekitar 97-98% merupakan mastitis subklinis, sedangkan 23% merupakan kasus mastitis klinis yang terdeteksi (Sudarwanto, 1999). Kasus mastitis subklinis sering tidak disadari oleh peternak yang melihat sapi dalam keadaan sehat, tetapi terjadi penurunan produksi susu. Penurunan produksi susu perhari perekor sapi penderita mastitis subklinis akan menyebabkan peternak mengalami kerugian. Mastitis subklinis dapat disebabkan oleh berbagai macam mikroorganisme seperi bakteri, kapang dan khamir. Tingkat keparahan mastitis sangat dipengaruhi oleh mikroorganisme penyebabnya. Streptococcus agalactiae dan Staphylococcus aureus adalah dua bakteri utama penyebab mastitis (Songer dan Post, 2005; Wahyuni dkk., 2005). Hasil penelitian Wibawan dkk. (1995), terisolasi Streptococcus agalactiae pada kejadian mastitis subklinis sebesar 83% di wilayah Bogor, 82% untuk wilayah Boyolali dan 80% untuk wilayah Malang. Sugiri dan Anri (2010) melaporkan bahwa prevalensi kejadian mastitis subklinis yang diakibatkan oleh agen patogen Streptococcus agalactiae di Jawa Barat sebesar 37%. 2 Streptococcus agalactiae termasuk salah satu bakteri patogen yang bisa menyebabkan mastitis subklinis. Secara ekonomis bakteri ini sangat merugikan bagi peternak, karena bisa menyebabkan penurunan produksi susu yang sangat signifikan (sekitar 10-20%) dan menurunkan kualitas susu secara umum serta secara signifikan akan meningkatkan jumlah sel somatik (SCC) pada suatu peternakan atau kelompok ternak yang terinfeksi (Kirk dan Lauerman, 1994). Streptococcus agalactiae merupakan bakteri Gram positif yang dapat menyebabkan penyakit pada manusia seperti meningitis pada bayi, sepsis neonatal dan tonsilitis (Songer dan Post 2005; Lukman dkk., 2009) Meski kejadian mastitis subklinis pada sapi perah di Indonesia cukup tinggi, namun penelitian mengenai deteksi dan identifikasi Sreptococcus agalactiae sebagai agen penyebab mastitis subklinis masih sedikit dilakukan khususnya di daerah Sulawesi Selatan. Oleh karena itu peneliti tertarik melakukan penelitian tentang Sreptococcus agalactiae sebagai penyebab mastitis subklinis di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang. Identifikasi agen penyebab mastitis merupakan faktor utama sebagai salah satu langkah dalam penanganan dan penentuan terapi terhadap kasus mastitis subklinis. Dengan mengetahui agen penyebab mastitis subklinis maka penanganan mastitis subklinis akan lebih mudah dilakukan. 1.2 Rumusan Masalah Berdasarkan latar belakang tersebut di atas, rumusan masalah pada penelitian ini adalah apakah terdapat bakteri Sreptococcus agalactiae pada susu yang diperoleh dari sapi perah penderita mastitis subklinis di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang. 1.3 Tujuan Penelitian 1.3.1 Tujuan Umum Tujuan umum dari penelitian ini adalah untuk mendeteksi keberadaan bakteri Streptococcus agalactiae sebagai penyebab mastitis subklinis pada sapi perah di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang. 1.3.2 Tujuan Khusus Tujuan khusus pada penelitian ini adalah untuk mengidentifikasi bakteri Sreptococcus agalactiae sebagai penyebab mastitis subklinis pada sapi perah di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang melalui isolasi dan identifikasi di laboratorium. 1.4 Manfaat Penelitian 1.4.1 Manfaat Pengembangan ilmu : Mendapatkan data keberadaan bakteri Streptococcus agalactiae sebagai penyebab mastitis subklinis pada sapi perah di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang. 3 1.4.2. Manfaat Aplikasi Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai bakteri Streptococcus agalactiae sebagai penyebab mastitis subklinis sehingga dapat dijadikan bahan pertimbangan dalam mengambil langkah pencegahan, pengobatan dan pengendalian penyakit mastitis subklinis pada sapi perah baik bagi peternak maupun bagi pemerintah di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang. 1.5 Hipotesis Penelitian Hipotesis penelitian ini adalah terdapat bakteri Streptococcus agalactiae pada susu sapi perah penderita mastitis subklinis di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang. 1.6 Keaslian Penelitian Penelitian mengenai deteksi Streptococcus agalactiae sebagai penyebab mastitis subklinis pada sapi perah di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang belum pernah dilakukan. Penelitian mengenai bakteri Streptococcus agalactiae sebagai penyebab mastitis subklinis pada sapi perah di Indonesia pernah dilakukan, namun fokus, tujuan, dan lokasinya berbeda, yakni Virgihani (2011) Tinjauan Resistensi Streptococcus agalactiae Penyebab Mastitis Subklinis di Peternakan Sapi Perah Kunak Bogor terhadap Beberapa Antibotik. Wahyuni dkk, (2006) Distribusi Serotipe Streptococcus agalactiae Penyebab Mastitis Subklinis pada Sapi Perah di Jawa Timur, Jawa Tengah dan Jawa Barat. 4 2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Ambing Ambing pada sapi terletak di daerah inguinal. Ambing sapi terdiri dari empat bagian. Bagian kiri dan kanan terpisah jelas, bagian ini dipisahkan oleh ligament yang berjalan longitudinal yang disebut sulcus intermammaria. Sedangkan bagian depan dan belakang jarang memperlihatkan batas yang jelas. Tiap bagian dilihat dari segi jaringan kelenjarnya, merupakan suatu kesatuan yang terpisah atau disebut juga kuartir. Antara kuartir yang satu tidak tergantung pada kuartir yang lain, khususnya dalam hal suplai darah, saraf dan apparatus suspensorius (Wiley dan Sons, 2009). Ambing memiliki beberapa sistem yang mendukung dalam strukturnya, antara lain terdapat sistem peredaran darah, limfe, saraf, dan sistem saluran yang berperan dalam penyimpanan dan sekresi susu ke dalam sel epitel yang disebut juga dengan alveoli (Foley dkk., 1972). Parenkima ambing (jaringan epitel) terdiri dari alveoli dan duktus kelenjar. Alveoli merupakan struktur dasar untuk produksi susu. Duktus-duktus kecil bersatu membentuk duktus yang lebih besar yang disebut duktus laktiferosa, yang terbagi menjadi empat bagian rongga yang besar yaitu pars glandularis (gland cistern) dan bagian yang lebih kecil di dalam puting disebut pars papilaris (teat cistern). Di dalam satu kuartir ambing, pars glandularis merupakan rongga yang terdapat di atas dasar puting dan berhubungan dengan pars papilaris. Pars papilaris berhubungan dengan bagian luar puting melewati bukaan tersempit pada ujung puting yang disebut streak canal, yang terbuka pada ostium papilae. Lumen Streak canal dalam keadaan normal ditutup oleh lipatan-lipatan epitelial yang menjulur dari dinding streak canal. Streak canal pada ujung puting dikelilingi oleh sfingter yang tersusun dari serabut-serabut otot polos sirkuler (Wiley dan Sons, 2009). Apparatus suspensorius merupakan sistem ligamen fibroelastis yang menyanggah ambing. penyangga utama ambing adalah ligamen suspensorius medial dan ligamen suspensorius lateral, sedangkan kulit luar hanya bersifat pelindung daripada sebagai penyangga ambing. Ligamen suspensorius medial mengandung banyak jaringan elastis. Ligamen suspensorius medial ini turun antara dua bagian ambing. Hampir tidak ada pembuluh darah atau saraf melewati ligamen medial dari sebagian ambing ke sebagian ambing lainnya. Sedangkan ligamen suspensorius lateral bersifat fibrous dan kurang elastis (Wiley dan Sons, 2009). Suplai darah ke ambing sebagian besar melalui arteri pudental (pudik) eksternal, yang merupakan cabang dari pudendo epigastrik. Arteri pudental eksternal bergerak ke arah bawah melalui canalis inguinalis yang berliku-liku dan terbagi menjadi cabang-cabang cranial dan caudal yang mensuplai bagian depan dan belakang kuartir ambing pada sisi yang sama dari arteri tersebut. Aliran vena dari ambing kebanyakan melalui lingkaran vena pada dasar ambing yang melekat pada dinding abdominal. Lingkaran vena dibentuk dari vena-vena utama yang mengaliri ambing. Vena pudental eksterna menerima darah dari kedua bagian kuarter ambing, baik cranial maupun caudal dari sisi yang sama. Kearah cranial masing-masing vena pudental eksternal bersambung dengan vena epigastrik 5 superficial caudal (subcutaneus abdominal) tepat pada atau di depan ambing, mengaliri lingkaran vena. Pembuluh-pembuluh limfa mengaliri ambing tampak pada permukaan, di bawah kulit, terutama pada sapi yang produksi susunya banyak. Pembuluh limfa tersebut mengalir dari seluruh ambing, meliputi puting susu, sampai ke inguinal superficial nod lymphaticus berada di dekat lingkaran inguinal superficial (eksternal) di atas bagian caudal dari dasar ambing (Wiley dan Sons, 2009). Gambar 1. Gambar skematik anatomi ambing sapi ( Bearden dan Fuquay, 1997). 2.2 Mastitis Subklinis Mastitis adalah istilah yang digunakan untuk peradangan yang terjadi pada jaringan internal ambing, baik bersifat akut, subakut ataupun kronis, dengan kenaikan sel di dalam susu dan perubahan fisik maupun susunan air susu, disertai atau tanpa adanya perubahan patologis pada kelenjar. Berdasarkan gejalanya, mastitis dibedakan menjadi dua, yaitu mastitis klinis dan mastitis subklinis. Mastitis klinis ditandai dengan gejala yaitu adanya pembengkakan, kemerahan, sakit dan penurunan fungsi pada ambing. Pemeriksaan fisik menunjukkan hewan mengalami kenaikan suhu tubuh, denyut jantung dan laju pernapasan (Subronto, 2003). Berbeda dengan mastitis klinis, mastitis subklinis adalah peradangan jaringan internal ambing tanpa disertai gejala klinis baik pada susu maupun pada ambing. Namun terjadi peningkatan jumlah sel radang, ditemukan mikroorganisme patogen dan terjadi perubahan kimia pada susu (Sudarwanto, 1999). Mastitis subklinis ditandai pada pemeriksaan susu secara mikroskopik yaitu terjadi peningkatan jumlah sel somatik lebih dari 400.000 sel/ml susu dan ditemukan bakteri patogen. Penurunan kuantitas susu jarang diamati oleh peternak sedangkan penurunan kualitas susu hanya dapat diperiksa di laboratorium, oleh karena itu diagnosa mastitis subklinis jarang dilakukan. Kualitas susu yang 6 diperiksa melalui perubahan kimiawi pada susu, meliputi penurunan jumlah kasein, total protein dan laktosa (Subronto, 2003). Hurley and Morin (2000), menyatakan bahwa mastitis subklinis merupakan kejadian paling tinggi dari semua kasus mastitis karena penyakit ini tidak menunjukan gejala klinis yang jelas sehingga peternak sulit untuk melakukan diagnosa. Mastitis subklinis dianggap lebih berbahaya karena tidak diketahui gejalanya dan menimbulkan kerugian yang sangat tinggi. Mastitis subklinis menyebabkan penurunan produksi susu mencapai 15%. Kerugian lain disebabkan peningkatan biaya produksi untuk pengobatan, terkadang sapi yang terkena mastitis subklinis juga harus dikeluarkan dari peternakan lebih awal karena biaya pemeliharaaan yang lebih tinggi dari produksinya. Kerugian ekonomis karena mastitis subklinis dapat mencapai Rp. 10.000.000/ekor/tahun (Rahayu, 2009). Gambar 2. Ambing yang mengalami pembengkakan karena terkena mastitis. (Syarif dan Harianto, 2011) 2.2.1 Etiologi Infeksi bakteri merupakan penyebab utama terjadinya mastitis. Bakteri penyebabnya adalah Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae dan berbagai jenis bakteri Gram negatif, meskipun demikian lebih dari 130 jenis bakteri telah dilaporkan dapat menyebabkan penyakit atau kelainan pada kelenjar ambing sapi perah (Kirk dan Lauerman, 1994). Dalam keadaan tertentu dijumpai pula penyebab mastitis oleh Mycoplasma sp. dan juga candida sp. (Dirjen Peternakan dan Keswan, 2012). Streptococcus agalactiae dan Staphylococcus aureus merupakan dua bakteri utama penyebab mastitis subklinis pada sapi perah di Indonesia (Wahyuni dkk., 2005). 2.2.2 Cara Penularan dan Faktor predisposisi Selain faktor mikroorganisme, faktor hewan dan kondisi lingkungan juga menentukan mudah tidaknya terjadi mastitis dalam suatu peternakan. Faktor predisposisi mastitis dari segi hewannya meliputi bentuk ambing dan faktor umur. Sedangkan faktor lingkungan yang mempengaruhi terjadinya mastitis meliputi pakan, jumlah sapi dalam suatu kandang, sanitasi kandang dan cara pemerahan (Subronto, 2003). Reneau dkk. (2003,) telah mengemukakan adanya korelasi positif antara kebersihan ambing dengan hasil perhitungan sel somatik dalam susu. 7 Kandang yang berukuran sempit menyebabkan sapi-sapi didalamnya berdesak-desakan. Apabila ada salah satu yang menderita infeksi penularan penyakit akan dipermudah. Penularan mastitis juga dapat melalui tangan pemerah, peralatan yang digunakan untuk membersihkan ambing yang tercemar oleh bakteri. Penularan mastitis juga dapat terjadi melalui pancaran susu pertama yang langsung dibuang ke lantai. Lantai kandang yang basah dan lembab akan mendukung pertumbuhan bakteri dan bila sapi berbaring akan memungkinkan bakteri masuk melalui lubang puting (Dirjen Peternakan dan Keswan, 2012). 2.2.3 Patogenesis Proses mastitis hampir selalu dimulai dengan masuknya mikroorganisme ke dalam kelenjar melalui lubang puting (sfingter) dan berkembang didalamnya sehingga menimbulkan reaksi radang. Sfingter puting berfungsi untuk menahan infeksi kuman. Pada dasarnya, kelenjar ambing sudah dilengkapi perangkat pertahanan, sehingga susu tetap steril. Perangkat pertahanan yang dimiliki oleh kelenjar ambing, antara lain : perangkat pertahanan mekanis, seluler dan perangkat pertahanan yang tidak tersifat (non spesifik) (Dirjen Peternakan dan Keswan, 2012) Duval (1997) menjelaskan bahwa proses infeksi pada mastitis terjadi melalui beberapa tahap, yaitu adanya kontak dengan mikroorganisme dimana sejumlah mikroorganisme mengalami multiplikasi di sekitar sfingter, kemudian dilanjutkan dengan masuknya mikroorganisme akibat lubang puting yang terbuka ataupun karena adanya luka. Tahap berikutnya, terjadi respon imun pada induk semang. Respon pertahanan pertama ditandai dengan berkumpulnya leukositleukosit untuk mengeliminasi mikroorganisme yang telah menempel pada sel-sel ambing. Apabila respon ini gagal, maka mikroorganisme akan mengalami multiplikasi dan sapi dapat memperlihatkan respon yang lain, misalnya demam. Peradangan pada ambing diawali dengan masuknya bakteri ke dalam ambing yang dilanjutkan dengan multiplikasi. Sebagai respon pertama, pembuluh darah ambing mengalami vasodilatasi dan terjadi peningkatan aliran darah pada ambing. Permeabilitas pembuluh darah meningkat disertai dengan pembentukan produk-produk inflamasi, seperti prostaglandin, leukotrine, protease dan metabolit oksigen toksik yang dapat meningkatkan permeabilitas kapiler ambing. Adanya filtrasi cairan ke jaringan menyebabkan pembengkakan pada ambing (Hurley dan Morin, 2000). 2.2.4 Gejala Klinis Berdasarkan gejalanya, mastitis dibedakan menjadi dua bentuk yaitu mastitis klinis dan subklinis (Subronto, 2003). Gejala mastitis klinis bentuk akut dapat ditandai dengan kondisi ternak lesu dan tidak mau makan, adanya peradangan pada ambing, ambing membengkak, panas, kemerahan, timbul rasa sakit bila dipalpasi, penurunan fungsi serta perubahan pada air susu seperti susu memancar tidak normal, bening atau encer, kental, menggumpal, warna berubah menjadi semu kuning, kecoklatan, kehijauan, kemerahan atau ada bercak-bercak merah. Gejala mastitis klinis bentuk kronis ternak terlihat seperti sehat, ambing teraba keras dan artropi (Hidayat, 2008). Keadaan ini berbeda dengan kejadian mastitis subklinis. Mastitis subklinis merupakan peradangan pada ambing tanpa ditemukan gejala klinis pada ambing 8 dan air susu. Ternak terlihat seperti sehat, nafsu makan dan suhu tubuh normal, ambing normal, air susu tidak menggumpal dan warna tidak berubah. Tetapi melalui pemeriksaan laboratorium akan didapatkan Jumlah sel radang meningkat, ditemukan kuman-kuman penyebab penyakit, adanya mikroorganisme patogen dan terjadi perubahan kimia susu (Hidayat, 2008). 2.2.5 Diagnosis Diagnosis mastitis klinis dapat ditentukan dari gejala klinis yang terlihat, yaitu adanya pembengkakan atau kemerahan pada ambing serta perubahan warna air susu yang dihasilkan. Sedangkan diagnosa mastitis subklinis dapat dilakukan uji lapang dengan menggunakan California Mastitis Test (CMT), yaitu suatu reagen khusus untuk pengujian adanya mastitis subklinis sebelum dilakukan isolasi dan identifikasi bakteri penyebab di laboratorium. Selain itu juga dapat dilakukan pengujian secara langsung dengan menghitung jumlah sel somatik menggunakan metode Breed. Pengambilan sampel dapat dilakukan dengan mengambil susu secara langsung dari setiap kuartir secara aseptis. (Subronto, 2003; Wahyuni dkk., 2005; Lukman dkk., 2009). 2.2.6 Pengendalian dan Pencegahan Pengendalian dan pencegahan yang dapat dilakukan terhadap mastitis adalah dengan membersihkan lantai kandang secara teratur dan usahakan senantiasa dalam keadaan kering, pemerah harus selalu berupaya agar tangan dalam keadaan bersih dan kuku tidak melukai putsing. Setiap akan diperah ambing harus selalu dalam keadaan bersih dan higienis, sapi yang terkena mastitis harus dipisahkan dari sapi-sapi yang sehat, melakukan pemerahan dengan baik dan benar dengan pemerahan sampai tidak ada air susu yang tertinggal dalam puting, melakukan pencegahan dengan pemberian antibiotika selama masa kering kandang, melakukan pemeriksaan secara rutin terhadap kejadian mastitis, dan melakukan pencelupan atau dipping putting ke dalam larutan desinfektan setelah selesai pemerahan (Arimbi, 2005). 2.2.7 Pengobatan Pengobatan dapat dilakukan dengan pemberian antibiotik yang sesuai dengan bakteri yang menginfeksi, dan disarankan dilakukan uji sensitivitas terhadap bakteri sebelum melakukan pengobatan agar dilakukan pengobatan yang optimal (Dirjen Peternakan dan Keswan, 2012). Di Amerika Serikat, pengobatan antibiotik melalui intramamaria untuk mastitis dengan penyebab Streptococcus agalactiae adalah dengan amoksisilin, penisilin dan eritromisin (Songer dan Post, 2005). 2.3 Bakteri Streptococcus agalactiae Streptococcus sp. berbentuk sesuai namanya yaitu bulat (coccus) dan berbentuk rantai atau berpasangan. Semua spesiesnya merupakan bakteri non motil dan tidak membentuk spora. Kelompok bakteri ini termasuk bakteri Gram positif. Semuanya anaerob fakultatif, kebanyakan berkembang di udara tetapi beberapa spesies Streptococcus membutuhkan CO2 untuk berkembang. Semua 9 spesies Streptococcus sp. tidak dapat mereduksi nitrat tetapi mampu memfermentasi glukosa dengan produk utama adalah asam laktat, tidak pernah berupa gas. Banyak spesies merupakan anggota dari mikroflora normal pada membran mukosa dari manusia ataupun hewan, dan beberapa bersifat patogen. Streptococcus sp. digolongkan berdasarkan kombinasi sifatnya, antara lain sifat pertumbuhan koloni, pola hemolisis pada agar darah (ά-hemolisis, β-hemolisis dan γ-hemolisis) (Songer dan Post, 2005). Streptococcus agalactiae termasuk dalam genus Streptococcus golongan B. Bakteri ini merupakan bakteri Gram positif. Streptococcus agalactiae merupakan satu-satunya anggota grup B menurut klasifikasi Lancefield (1867). Songer dan Post (2005) membagi genus Streptococus dengan klasifikasi spesies spesifik karbohidrat pada antigen dinding sel. Klasifikasi Kingdom : Bacteria Phylum : Firmicutes Class : Bacilli Ordo : Lactobacillales Family : Streptococcaceae Genus : Streptococcus Spesies : S. Agalactiae (Lehman dan Neumann, 2010) Gambar 3. Morfologi Streptococcus agalactiae yang diamati melalui mikroskop. Pembesaran 100x (Anonim, 2010) Bakteri ini secara khas menghasilkan hemolisin yang dapat menghemolisa sel darah merah secara in vitro. Kelompok Streptococcus dapat menghemolisa eritrosit dengan melepas hemoglobin secara sempurna termasuk dalam kelompok β-hemolitik (Jawetz, 1986). Pada media agar darah Streptococcus agalactiae berbentuk bulat, berwarna transparan, cembung dan membentuk daerah hemolisis yang hanya sedikit lebih besar dari koloninya (bergaris tengah 0,5-1 mm). Streptococcus golongan B menghidrolisis natrium hipurat dan memberi respon 10 positif pada CAMP test (Christie, Atkins, Munch-Peterson), oleh karena itulah Streptococcus agalactiae biasa diidentifikasi dengan CAMP test. Strain Streptococcus agalactiae meningkatkan aktivitas hemolitik pada Staphylococcal ß-toksin membentuk tanda seperti anak panah pada reaksi CAMP. Staphylococcus yang umum digunakan adalah Staphylococcus aureus (Songer dan Post, 2005). Berikut karakteristik biokimia Streptococcus agalactiae dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1. Karakteristik biokimia Streptococcus agalactiae Reaksi Karakteristik Katalase CAMP + Bile Eskulin Motilitas Indol Produksi urease Glukosa + Maltosa + Sukrosa + Sumber : Bergeys (1974) Streptococcus agalactie terkenal sebagai penyebab mastitis pada sapi. Pada hewan lain, seperti domba, kambing dan unta, bakteri ini juga menyebabkan mastitis dan laminitis. Streptococcus agalactiae dapat ditemukan pada vagina dan bagian orofaring manusia. Pada manusia, bakteri ini dapat menyebabkan meningitis. Streptococcus agalactiae juga merupakan bakteri yang hanya sedikit berespon terhadap terapi antibiotik (Songer dan Post, 2005). Utama dkk., (2000) menyatakan bahwa sebagian besar isolat lapang Streptococcus agalactiae yang diuji memiliki aktivitas hemaglutinasi pada eritrosit sapi dan ayam, serta sebagian kecil pada eritrosit manusia. Hal ini menunjukkan bahwa Streptococcus agalactiae kemungkinan dapat menginfeksi manusia secara sistemik. Bakteri ini merupakan penyebab penting infeksi postpartus dan infeksi neonatal pada manusia. Infeksi postpartus yang sering terjadi adalah endometritis dan infeksi neonatus berupa pneumonia, sepsis dan meningitis. 11 3 METODOLOGI PENELITIAN 3.1 Waktu dan Lokasi Penelitian Penelitian ini dilakukan pada bulan November 2014 - Januari 2015. Pengambilan sampel susu sapi perah dilaksanakan di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang dan pengujian laboratorium untuk isolasi dan identifikasi bakteri dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin Makassar. 3.2 Materi Penelitian 3.2.1 Sampel dan Teknik Sampling Populasi dalam penelitian ini adalah seluruh sapi perah yang terdapat di Kecamatan Cendana, Kabupaten Enrekang sebanyak 557 ekor (Data Disnakin Kabupaten Enrekang, 2014). Kecamatan Cendana dipilih sebagai lokasi penelitian karena memiliki jumlah populasi sapi perah yang paling tinggi di Kabupaten Enrekang. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah 28 ekor sapi perah betina laktasi yang tersebar di Kecamatan Cendana, Kabupaten Enrekang. Besaran sampel ditentukan dengan tingkat konfidensi 95%, asumsi tingkat prevalensi Streptococcus agalactiae sebagai penyebab mastitis subklinis di Kecamatan Cendana sebesar 10% (Sugiri dan Anri, 2010) dan besaran populasi 557 ekor. Besaran sampel dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut: n = [1 – (1- a)1/D] [N – (D – 1)/2] (Martin dkk., 1987) Keterangan : n : Besaran sampel yang digunakan a : Tingkat konfidensi (0,95) D : Jumlah hewan sakit dalam populasi N : Besaran populasi n = [1 – (1- a)1/D] [N – (D – 1)/2] n = [1 – (1- 0,95)1/56] [557 – (56 – 1)/2] n = [1 – (0,948)] [557 – 27,5] n = [0,052] [529,5] n = 28 Sampel adalah sapi perah betina laktasi yang berada di beberapa desa di wilayah Kecamatan Cendana, yang sebelumnya telah dipilih sebagai unit sampling yaitu Desa Lebang dan Desa Pinang. Teknik pengambilan sampel yang digunakan yaitu random sampling. 12 3.2.2 Bahan Penelitian Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah sampel susu sapi perah yang terkena mastitis, reagen CMT, alkohol 70%, alkohol 96%, Media Blood Agar Plate (BAP), Media Brain Heart Infusion Broth (BHIB), Media Bile Eskulin, Media Motility Indole Ornithine (MIO), Media uji gula-gula (glukosa, maltosa, sukrosa), Media Urea, aquades, kristal violet, lugol, safranin , H2O2 3%, isolat Staphylococcus aureus. 3.2.3 Alat Penelitian Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah padel CMT, Tabung steril, rak tabung, label, lap bersih, tisu, sarung tangan, icepack, coolbox, cawan petri, tabung reaksi, objek glass, ose, bunsen, pipet steril, incubator, autoclave, gelas ukur, mikroskop, alat tulis, kamera. 3.3 Metode Penelitian 3.3.1 Pengambilan Sampel Pengambilan sampel susu dilakukan pada saat pemerahan sore hari. Ambing sapi yang akan diperah dibersihkan dengan air bersih, kemudian dilap dengan tisu yang dibasahi alkohol 70%. Susu pancaran pertama dibuang dan pancaran selanjutnya diambil sebanyak 10 ml, sampel ditampung dalam tabung steril kemudian ditutup rapat dan disimpan dalam coolbox yang berisi icepack agar suhunya stabil untuk menghindari perkembangbiakan bakteri, hingga tiba di laboratorium. Sebelum sampel diambil, terlebih dahulu dilakukan uji mastitis menggunakan reagen California Matitis Test (CMT). Uji California Mastitis Test (CMT) Uji mastitis subklinis dilakukan setelah membuang pancaran susu yang pertama terlebih dahulu, kemudian sampel susu dari masing-masing kuartir yang akan diuji diperah langsung ke dalam Padel CMT. Sebanyak 2 ml susu diletakkan pada padel dan ditambahkan 2 ml reagen CMT. Digoyangkan secara horizontal perlahan-lahan selama 10-15 detik. Hasil pengujian negatif (bila campuran susu dan reagen CMT tetap homogen), positif 1 (Endapan terlihat jelas), positif 2 (Campuran langsung mengental dan gel bergerak ke tengah), dan positif 3 (Banyak terbentuk gel dan gel yang terbentuk menyebabkan permukaan menjadi cembung) (Setiawan dkk., 2012). 3.3.2 Isolasi dan Identifikasi Streptococcus agalactiae Sampel susu yang menunjukkan hasil mastitis subklinis yang positif dengan menggunakan pereaksi CMT ditumbuhkan dalam media Brain Heart Infusion Broth (BHIB) kemudian diinkubasi selama 18-24 jam dalam suhu 37°C. selanjutnya, dengan menggunakan ose steril diambil suspensi bakteri pada media BHIB yang telah diinkubasi lalu digoreskan pada media Nutrient Agar (NA) kemudian diinkubasi selama 18-24 jam dalam suhu 37°C. Koloni yang terbentuk setelah 24 jam diamati bentuk, warna, ukuran dan elevasi. Koloni yang diduga Streptococcus sp. yaitu berbentuk bulat, kecil, halus, cembung, transparan, 13 berukuran 0,5-1 mm. Hasil biakan bakteri yang diduga Streptococcus sp. pada media NA diambil koloni terpisahnya, kemudian diinokulasikan lagi pada media NA yang baru untuk mendapatkan isolat murni, untuk selanjutnya dilakukan uji identifikasi melalui beberapa pengujian biokimia. Pewarnaan Gram Koloni bakteri yang diduga Streptococcus agalactiae diambil secara aseptis dengan menggunakan ose dan diletakkan secara merata pada object glass lalu fiksasi di atas bunsen. Preparat yang telah difiksasi kemudian ditetesi dengan kristal violet sebanyak 2-3 tetes lalu didiamkan selama 1-2 menit. Dibilas dengan air mengalir. ditetesi lagi dengan larutan lugol dan dibiarkan selama 1 menit, lalu dibilas dengan air mengalir dan dikeringkan. Preparat ditetesi dengan alkohol 96% lalu didiamkan 30 detik, kemudian dibilas dengan air mengalir. Diteteskan zat warna safranin, dibiarkan selama 2 menit lalu dibilas dengan air mengalir kemudian dibiarkan kering. Preparat diamati di bawah mikroskop dengan perbesaran 100x dan memakai minyak emersi (BSN, 2011). Streptococcus sp. memiliki ciri berwarna ungu dan berbentuk bulat (coccus), berantai panjang (Songer dan Post, 2005). Uji Katalase Koloni yang diduga Streptococcus agalactiae diambil dengan menggunakan ose streril kemudian disapukan pada objek glass, lalu hidrogen peroksida 3% sebanyak 1 tetes ditempatkan diatas preparat dan diamati pembentukan buih/gelembung (BSN, 2011). Untuk Streptococcus agalactiae akan menunjukkan hasil yang negatif yaitu tidak adanya pembentukan buih. Uji Christie, Atkins, Munch-Peterson (CAMP Test) Uji CAMP dilakukan pada Media Blood Agar Plate dengan bakteri Staphylococcus aureus sebagai penanda. S. aureus ditanam dengan cara membuat garis ditengah-tengah media BAP dengan menggunakan ose. Kemudian tanamkan bakteri yang diduga Streptococcus agalactiae membentuk garis tegak lurus dengan S. aureus. Biakan diinkubasi selama 24-48 jam dalam suhu 37°C, biakan diamati kembali. Koloni Streptococcus agalactiae memperlihatkan hasil positif CAMP yaitu dengan membentuk zona berbentuk tanda seperti anak panah (Songer dan Post, 2005). Uji Gula-Gula Bakteri diinokulasikan dalam 5 ml Phenol Red Broth yang ditambah 1% gula kedalamnya (Glukosa, Sukrosa, Maltosa). Kultur bakteri tersebut kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam. Indikator Phenol Red akan menunjukkan perubahan warna dari merah menjadi kuning untuk reaksi positif, dan tetap merah untuk hasil reaksi negatif. Untuk bakteri Streptococcus agalactiae akan menunjukkan hasil positif terhadap glukosa, sukrosa, maltosa, Uji Bile Eskulin Tujuannya untuk mengidentifikasi bakteri mampu menghidrolisis eskulin. biakan bakteri diambil, kemudian ditanam pada media Bile-Eskulin Lalu diinkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam. Untuk hasil positif menunjukkan 14 perubahan warna media menjadi hitam. Bakteri Streptococcus agalactiae menunjukkan hasil negatif. Uji Motilitas dan Uji Indol Bakteri diinokulasikan pada media Motility Indole Ornithine (MIO) dilakukan secara aseptis dengan menusukkan ose steril yang mengandung isolat bakteri yang diduga, lurus kedalam tabung kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam. Reagen Kovac 0,2 ml sampai dengan 0,3 ml ditambahkan. Bakteri yang tumbuh menyebar dari garis tusukan menunjukkan sifat motil, sedangkan bila tumbuhnya hanya mengikuti garis tusukan menunjukkan sifat non motil. Hasil reaksi positif ditandai dengan adanya bentuk cincin merah pada lapisan atas media, sedangkan hasil reaksi negatif ditandai dengan terbentuknya cincin kuning. Bakteri Streptococcus agalactiae menunjukkan hasil negatif untuk uji motilitas dan uji indol Uji Urease bakteri dinokulasikan dengan menggunakan ose ke dalam media Urea Broth kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam. Hasil positif menunjukkan perubahan warna media menjadi merah muda. Bakteri Streptococcus agalactiae menunjukkan hasil negatif. Uji Hemolisis (Uji Patogenitas) Pengujian terhadap patogenitas dari S.agalactiae dilakukan pada Blood Agar Plate (BAP). Diambil koloni yang diduga S.agalactiae dari Nutrient Agar (NA) dengan ose kemudian ditanam pada media Blood Agar Plate (BAP) dengan menggunakan metode gores,lalu diinkubasi selama 18-24 jam. Patogenitas S.agalactiae ditandai dengan kemampuan melisiskan sel darah merah dapat dilihat dengan adanya zona bening di sekitar koloni pada media Blood Agar Plate. 3.3.3 Analisis Data Kejadian mastitis subklinis akibat Streptococcus agalactiae pada sapi perah di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang dikonfirmasi melalui identifikasi bakteri pada susu melalui pengujian laboratorium kemudian hasil data dianalisis secara deskriptif. 15 4 HASIL DAN PEMBAHASAN Penelitian ini bertujuan untuk mendeteksi keberadaan bakteri Streptococcus agalactiae penyebab mastitis subklinis pada sapi perah di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang. Penelitian dilaksanakan pada bulan November 2014 – Januari 2015. Sampel sapi perah yang digunakan dalam penelitian ini sebanyak 28 ekor sapi perah betina laktasi yang tersebar di dua desa, yaitu desa Lebang dan desa Pinang. Pemilihan lokasi penelitian dilakukan dengan pertimbangan kedua desa tersebut merupakan pusat pengembangan sapi perah dengan populasi sapi perah terbanyak di Kecamatan Cendana. Pengambilan sampel dilakukan dengan metode random sampling. 4.1 Pemeriksaan Mastitis Subklinis Penelitian ini diawali dengan melakukan pemeriksaan mastitis subklinis pada 28 ekor sapi perah betina laktasi yang telah dipilih menjadi sampel dalam penelitian. Pemeriksaan mastitis subklinis dilakukan dengan menggunakan reagen California Matitis Test (CMT) pada masing-masing kuartir ambing sapi. Pengujian CMT menunjukkan hasil positif apabila endapan terlihat jelas (positif 1), Campuran langsung mengental dan terbentuk gel bergerak ke tengah (positif 2), Banyak terbentuk gel dan gel yang terbentuk menyebabkan permukaan menjadi cembung (positif 3), dan hasil pengujian negatif apabila campuran susu dan reagen CMT tetap homogen (Setiawan dkk., 2012). Hasil pengujian CMT dapat dilihat pada gambar 4. Data jumlah sampel penelitian dan hasil pengujian mastitis subklinis dengan reagen CMT dapat dilihat pada Tabel 2. A B 2 4 1 3 3 4 Gambar 4. Hasil pengujian mastitis subklinis menggunakan reagen CMT. (A) Angka 1 dan 4 menunjukkan negatif CMT. Angka 2 dan 3 menunjukkan hasil positif CMT (positif 2) (B) Pembesaran dari gambar A. 16 Hasil pemeriksaan mastitis subklinis dengan uji CMT pada gambar 4, memperlihatkan dua kuartir ambing positif mastitis subklinis (2 dan 3), yang ditandai dengan adanya pembentukan gel (tanda panah) sehingga susu menjadi kental ketika dicampur dengan reagen CMT. Dua kuartir lainnya memperlihatkan hasil negatif mastitis subklinis (1 dan 4) yang ditandai dengan campuran susu dan reagen CMT yang masih homogen dan tidak terbentuknya gel atau endapan. Pemeriksaan mastitis subklinis dengan menggunakan reagen CMT memiliki tingkat sensitivitas dan spesifisitas yang cukup tinggi. Menurut hasil penelitian Setiawan dkk., (2012), reagen CMT memiliki sensitivitas sebesar 96,7% dan memiliki spesifisitas sebesar 100%. Hal ini juga didukung oleh Tanwar dkk., (2001), yang membandingkan diagnostik untuk deteksi mastitis subklinis dan menunjukkan hasil yaitu 100% sensitivitas untuk jumlah sel somatik dan 96% untuk reaksi CMT. Sensitivitas merupakan kemampuan suatu reagen untuk menunjukkan hasil positif pada sapi yang menderita mastitis subklinis, sedangkan spesifisitas merupakan kemampuan suatu reagen untuk menunjukkan hasil yang negatif pada sapi yang menderita mastitis subklinis. Reagen CMT mengandung deterjen atau surfaktan yang merupakan salah satu komposisi dimana surfaktan dapat digunakan untuk mendeteksi peningkatan kadar sel somatik dalam susu mastitis. Menurut Xia (2006), jenis surfaktan yang berbeda memiliki efek yang berbeda pula pada susu dimana CMT mengandung Aril sulfonat alkil (3%), natrium hidroksida (1,5%) dan bromocresol purple. Aril sulfonat alkil (3%) mempunyai sensitivitas yang besar pada pH susu, sedangkan bromcresol purple merupakan indikator warna sehingga memudahkan dalam pengamatan reaksi. Pada susu yang terkena mastitis, akan terjadi penambahan jumlah leukosit sehingga pHnya lebih alkalis. Jika ditambahkan zat aktif seperti Aril sulfonat alkil (3%) maka akan bereaksi dengan sel-sel somatik susu termasuk leukosit, akibatnya terjadi kenaikan konsentrasi susu menjadi lebih viscous (kental) dan membentuk gel. Tabel 2. Jumlah sampel penelitian dan hasil pemeriksaan mastitis subklinis dengan uji CMT di Kecamatan Cendana, Kabupaten Enrekang Jumlah kuartir yang diuji CMT (kuartir) Jumlah kuartir positif CMT (kuartir) Jumlah penderita mastitis subklinis (ekor) 19 (27,94%) 14 (31,81%) 33 (29,46%) 14 (82,35%) 9 (81,81%) 23 (82,14%) No Nama Desa Jumlah sampel (ekor) 1. Lebang 17 68 2. Pinang 11 44 Jumlah 28 112 Hasil pengujian CMT diperoleh positif mastitis subklinis sebanyak 33 kuartir (29,46%) dari 112 kuartir ambing yang diuji, dengan jumlah sapi penderita mastitis subklinis sebanyak 23 ekor (82,14%) dari 28 ekor sapi perah yang diuji. Di desa Lebang jumlah kuartir positif sebanyak 19 kuartir (27,94%) dari 68 kuartir yang diuji dengan jumlah sapi penderita mastitis subklinis sebanyak 14 ekor (82,35%) dari 17 ekor, sedangkan di desa Pinang jumlah kuartir positif 17 sebanyak 14 kuartir (31,81%) dari 44 kuartir yang diuji dengan sapi penderita mastitis subklinis sebanyak 9 ekor (81,81%) dari 11 ekor yang diuji (lihat tabel 2). Berdasarkan hasil penelitian pada tabel 2, terlihat bahwa kejadian mastitis subklinis di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang cukup tinggi, yaitu 82,14%. Hasil tersebut sesuai dengan beberapa hasil penelitian sebelumnya yang melaporkan bahwa kejadian mastitis subklinis cukup tinggi. Sudarwanto (1999), menyebutkan kejadian mastitis subklinis pada sapi perah di Indonesia sangat tinggi yaitu 95-98%. Sedangkan Wibawan dkk., (1995), menyebutkan kejadian mastitis subklinis di Indonesia yaitu 85%. Hasil penelitian lainnya menunjukkan bahwa 80% sapi laktasi di Indonesia menderita mastitis subklinis (Sudono dkk., 2003). Penyakit mastitis dikenal sebagai penyakit yang kompleks dengan penyebab yang beragam dan didukung oleh multi faktor yang mempengaruhi kejadiannya. Menurut Sugoro (2004), mastitis adalah penyakit radang ambing yang disebabkan oleh infeksi mikroorganisme seperti bakteri dan jamur. Ada tiga faktor yang menjadi sebab terjadinya mastitis, yaitu kondisi lingkungan yang buruk, mikroorganisme sebagai agen penyebab penyakit dan kondisi kesehatan sapi sebagai inang. Namun demikian dalam penelitian ini faktor-faktor yang mempengaruhi kejadian mastitis subklinis tidak dibahas lebih lanjut karena tidak menjadi tujuan dalam penelitian. 4.2 Isolasi dan Identifikasi Streptococcus agalactiae dari Sampel Susu Sapi Perah Penderita Mastitis Subklinis Dari 28 ekor sapi perah yang tersebar di desa Lebang dan desa Pinang Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang diperoleh 33 sampel susu positif mastitis subklinis yang diuji dengan menggunakan reagen CMT. Sampel susu yang berasal dari desa Lebang sebanyak 19 sampel susu dan dari desa Pinang sebanyak 14 sampel susu. Berdasarkan hasil pengujian sampel susu melalui isolasi dan identifikasi di laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin, diperoleh hasil 1 (3,03%) sampel dari 33 sampel positif mengandung bakteri Streptococcus agalactiae, sedangkan 32 sampel negatif atau tidak mengandung bakteri Streptococcus agalactiae. Isolasi dan identifikasi bakteri dilakukan dengan menginokulasikan sampel susu ke dalam media Brain Heart Infussion Broth (BHIB), setelah itu kultur dilakukan dengan menggunakan media Nutrient Agar (NA). NA adalah medium padat untuk pertumbuhan mikroorganisme yang umum digunakan dalam berbagai kultur mikroorganisme. NA merupakan media sederhana yang dibuat dari ekstrak beef, pepton, dan agar. Media ini berbentuk padat yang digunakan untuk pembiakan bakteri sehingga sehingga dapat diketahui bentuk, ukuran, konsistensi, warna koloni bakteri, sebelum dilakukannya uji lanjutan. Koloni Streptococcus sp. Pada media NA memiliki ciri berbentuk bulat, kecil, halus, cembung, transparan, berukuran 0,5-1 mm. Hasil penelitian terhadap 33 sampel susu yang dikultur pada media NA, memperlihatkan hasil pertumbuhan koloni yang sangat beragam, tetapi ada beberapa koloni yang memiliki ciri-ciri morfologi koloni Streptococcus sp. Morfologi koloni yang diduga Streptococcus sp. yaitu bulat, kecil dengan diameter bervariasi (0,5-2 mm), halus, berwarna transparan dan cembung. Semua 18 koloni yang diduga koloni Streptococcus kemudian dipisahkan dan disubkultur pada media NA yang baru, untuk selanjutnya dilakukan identifikasi bakteri dengan beberapa pengujian biokimia. Identifikasi bakteri dilanjutkan dengan pewarnaan gram. Koloni terpisah dari bakteri yang diduga Streptococcus sp. yang berasal dari media NA kemudian dilakukan pewarnaan gram. Pewarnaan Gram untuk membedakan kelompok bakteri Gram positif dan negatif, selain itu juga untuk membedakan morfologi bakteri yang berbentuk coccus dan basil. Hasil pewarnaan Gram pada koloni bakteri yang berasal dari 33 sampel susu, ditemukan 11 koloni menunjukkan kelompok bakteri Gram positif yang terlihat berwarna ungu dengan koloni berbentuk coccus berantai. Sebanyak 7 koloni berasal dari desa Lebang dan 4 koloni berasal dari desa Pinang. (Tabel 3). A B Gambar 5. Hasil pewarnaan gram bakteri yang diduga Streptococcus agalactiae dibandingkan dengan literatur. Pembesaran 100x (sampel S.07) A) Morfologi sel bakteri yang diduga Streptococcus agalactiae (hasil penelitian) B) Morfologi sel bakteri Streptococcus agalactiae (Anonim, 2010) Streptococcus termasuk kelompok bakteri Gram positif. Bakteri Gram positif mempertahankan zat pewarna ungu kristal sehingga sel berwarna ungu tua, sedangkan bakteri Gram negatif kehilangan ungu kristal ketika dicuci dengan aseton alkohol dan ketika diberi larutan pemucat safranin sel akan menyerap zat pewarna ini sehingga sel tampak bewarna merah. Terjadinya perbedaan warna sel ini dapat disebabkan oleh perbedaan dalam struktur kimiawi permukaan sel bakteri (Pelczar dan Chan, 2007). Hasil pewarnaan Gram dari sampel berkode S.07 memperlihatkan bahwa koloni yang tumbuh merupakan bakteri Streptoccous karena morfologi sel yang diamati berwarna ungu atau Gram positif, berbentuk coccus dan berantai (lihat gambar 5). Menurut Songer dan Post (2005), Streptococcus agalactiae memiliki bentuk bulat berwarna ungu dan berantai. Streptococcus agalactiae dapat dibedakan dari Gram positif lainnya berdasarkan bentuk koloni yang berantai ketika dilihat melalui mikroskop. 19 Tabel 3. Hasil identifikasi melalui pewarnaan Gram Pewarnaan Gram Kode sampel Sifat Gram Morfologi S.04 Positif Coccus, berantai Positif Coccus, berantai S.05 Positif Coccus, berantai S.07 Positif Coccus, berantai S.09 Positif Coccus, berantai S.11 Positif Coccus, berantai S.14 Positif Coccus, berantai S.16 Positif Coccus, berantai S.21 Positif Coccus, berantai S.23 Positif Coccus, berantai S.29 Positif Coccus, berantai S.30 Tahapan identifikasi selanjutnya dengan melakukan uji katalase terhadap 11 sampel tersebut dan diperoleh hasil seluruhnya bersifat katalase negatif (Tabel 5). Hasil ini ditandai dengan tidak terbentuknya gelembung udara pada koloni dan sekitarnya. Hal ini menandakan ketujuh sampel ini termasuk dalam kelompok Streptococcus. Uji katalase digunakan untuk mengetahui aktivitas katalase pada bakteri yang diuji. Kebanyakan bakteri memproduksi enzim katalase yang dapat memecah H2O2 menjadi H2O dan O2. Menurut Lay (1994), Hidrogen peroksida bersifat toksik terhadap sel karena bahan ini menginaktivasikan enzim dalam sel. Hidrogen peroksida terbentuk sewaktu metabolisme aerob, sehingga mikroorganisme yang tumbuh dalam lingkungan aerob harus menguraikan bahan toksik tersebut. Katalase merupakan salah satu enzim yang digunakan mikroorganisme untuk menguraikan hidrogen peroksida. Bakteri katalase negatif tidak menghasilkan gelembung-gelembung. Hal ini berarti H2O2 yang diberikan tidak dipecah oleh bakteri katalase negatif, sehingga tidak menghasilkan oksigen. Bakteri katalase negatif tidak memiliki enzim katalase yang menguraikan H2O2, termasuk genus Streptococcus Identifikasi selanjutnya dilakukan dengan uji CAMP. Untuk melakukan preidentifikasi Streptococcus Grup B atau S.agalactiae, uji CAMP memberikan hasil 98-100% positif. Hasil Positif uji CAMP menunjukkan zona hemolisa sempurna membentuk tanda anak panah atau setengah bulan pada daerah yang berdekatan dengan koloni Staphylococcus aureus (garis vertikal). Hasil Identifikasi 11 sampel dengan uji CAMP dapat dilihat pada tabel 4. Berdasarkan hasil identifikasi dengan uji CAMP, diperoleh bahwa dari 11 isolat yang berasal dari 11 sampel, hanya ada satu isolat yang menunjukkan hasil positif. Isolat tersebut berasal dari sampel sampel S.07. Menurut Songer dan Post (2005) Streptococcus agalactiae biasa diidentifikasi dengan CAMP test. Strain Streptococcus agalactiae meningkatkan aktivitas hemolitik pada Staphylococcal ß-toksin membentuk tanda seperti anak panah pada reaksi CAMP. Menurut Ruoff (1995), Streptococcus Grup B memiliki faktor CAMP, yaitu protein ekstraseluler yang menghasilkan hemolisis sinergis pada agar darah domba dengan Staphylococcal ß-lysin (sphingomyelinase C) yang dimiliki oleh 20 Staphylococcus aureus. Fenomena hemolisis sempurna dari uji CAMP akan membentuk zona seperti kepala panah. Tabel 4. Hasil identifikasi bakteri dengan uji CAMP No Nomor Sampel CAMP 1 S.04 2 S.05 3 S.07 + 4 S.09 5 S.11 6 S.14 7 S.16 8 S.21 9 S.23 10 S.29 11 S.30 Lang dan Palmer (2003) menjelaskan bahwa sphingomyelinase menginisiasi sphingomielin menjadi seramida yang membuat eritrosit mudah dilisiskan oleh aktivitas faktor CAMP. Eritrosit mamalia mempengaruhi kinerja faktor CAMP secara berbeda-beda tergantung dari kandungan sphingomielin pada membran sel. Pada darah domba kandungan sphingomielin sebesar 51% sedangkan pada darah kelinci dan manusia adalah 26% dan 19%. Semakin besar kandungan sphingomielin maka semakin jelas reaksi positif yang terbentuk pada uji CAMP. 1 2 3 1 3 2 A B Gambar 6. Hasil uji CAMP dibandingkan dengan literatur. A) 1) Staphylococcus aureus. 2) isolat bakteri menunjukkan hasil positif uji CAMP (sampel S.07). 3) isolat bakteri menunjukkan hasil negatif uji CAMP (sampel S.09) B) 1)Staphylococcus aureus. 2) Streptococcus agalactiae positif uji CAMP. 3) Streptococcus pyogenes negatif uji CAMP (Pradhan, 2013) Gambar 6 menunjukkan hasil uji CAMP yang dilakukan pada isolat yang berasal dari 2 sampel yaitu sampel dengan kode S.07 (2) dan S.09 (3). Koloni 21 yang membentuk garis vertikal adalah Staphylococcus aureus (1) dan 1 koloni vertikal yang membentuk zona setengah bulan ke arah Staphylococcus aureus adalah koloni yang diduga Streptococcus agalactiae. Tahap identifikasi selanjutnya dilakukan dengan beberapa pengujian biokimia antara lain, uji bile eskulin, uji gula-gula (glukosa, maltosa, sukrosa), uji motilitas, uji indol dan uji urea. Berdasarkan Bergeys Manuals of Determinative Bacteriology (1974), hasil uji biokimia Streptococcus agalactiae adalah bile eskulin negatif, glukosa positif, maltosa positif, sukrosa positif, motilitas negatif, indol negatif dan urease negatif. Hasil pengujian terhadap 11 isolat yang telah dicocokkan dengan Bergeys manual menunjukkan bahwa isolat dari sampel dengan kode S.07 adalah Streptococcus agalactiae. Hasil uji biokimia dapat dilihat pada tabel 5 dan gambar 7. Tabel 5. Hasil uji biokimia terhadap 11 sampel Kode Uji Gula-Gula Bile sampel Katalase Eskulin Glu Mal Suk Motilitas Indol S.04 + + + S.05 + + + S.07 + + + S.09 + + + S.11 + + + S.14 + + + S.16 + + + + S.21 + + + + S.23 + + + S.29 + + + + S.30 + + + - Urease - + 1 2 3 A B C D E Gambar 7. Hasil pengujian biokimia bakteri yang diduga S.agalactiae (S.07) Keterangan : A. Uji katalase menunjukkan hasil negatif (tidak ada buih) B. Uji Bile Eskulin, Negatif (tidak berubah warna), Positif (berwarna hitam) C. Uji gula-gula. Bakteri dapat memfermentasikan : Glukosa (1), Sukrosa (2), Maltosa (3). D. Uji Motilitas dan Indol menunjukkan hasil negatif E. Uji urease menunjukkan hasil negatif 22 Gambar 8. Kultur bakteri yang diduga Streptococcus agalactiae pada media Blood Agar Plate (BAP) Setelah pengujian identifikasi keberadaan S.agalactiae, koloni ditumbuhkan dengan cara streak pada Blood Agar Plate (BAP). Penanaman koloni S.agalactiae pada media BAP dilakukan untuk melihat kemampuan bakteri dalam menghemolisis eritrosit sehingga pada BAP akan terlihat zona bening di sekitar koloni. Menurut Songer dan Post (2005), pada media agar darah Streptococcus agalactiae berbentuk bulat, berwarna transparan, cembung dan membentuk daerah hemolisis yang hanya sedikit lebih besar dari koloninya (bergaris tengah 0,5-1 mm). Sedangkan menurut Pelczar dan Chan (2007) bahwa Streptococcus agalactiae menghasilkan zona hemolitik sempurna pada agar darah, diameter koloni bakteri 1-2 mm, berwarna agak kehijauan dan menghasilkan zona hemolitik hanya sedikit lebih besar di sekeliling koloni. Morfologi koloni yang diduga Streptococcus agalactiae (sampel S.07) dapat dilihat pada Gambar 8. Kelompok mikroorganisme yang sering dibedakan berdasarkan kemampuan menyebabkan lisis sel darah merah adalah Streptococcus dan Staphylococcus. Proses hemolisis disebabkan oleh enzim yang dilepaskan oleh mikroorganisme yang diterima oleh agar darah sehingga terjadi reaksi untuk melisiskan sel darah merah tersebut. Ada 3 jenis hemolisis yaitu beta hemolisis (β), alpha hemolisis (α) dan gamma hemolisis (γ). Beta hemolisis (β) atau biasa disebut hemolisis total, didefinisikan sebagai lisis seluruh sel darah merah. Sebuah zona yang jelas, mendekati warna dan transparansi media dasar, mengelilingi koloni. Alpha hemolisis (α) disebut juga hemolisis sebagian, adalah penurunan hemoglobin sel darah merah untuk methemoglobin dalam medium sekitar koloni. Hal ini menyebabkan perubahan warna hijau atau coklat dalam medium. Dan Gamma hemolisis (γ) disebut juga non hemolisis. Gamma menunjukkan kurangnya hemolisis. Berdasarkan hasil pemeriksaan laboratorium terhadap 33 sampel susu sapi perah penderita mastitis subklinis yang berasal dari dua desa Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang, ditemukan 1 (3,03%) sampel positif mengandung bakteri 23 Streptococcus agalactiae, sedangkan 32 sampel lainnya negatif atau tidak ditemukan bakteri Streptococcus agalactiae. Sampel positif merupakan sampel yang berasal dari desa Lebang, sedangkan untuk sampel yang berasal dari desa Pinang tidak ditemukan adanya bakteri Streptococcus agalactiae (tabel 6) Tabel 6. Data jumlah sampel susu positif Streptococcus agalactiae di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang. No 1. 2. Nama Desa Jumlah sampel susu Jumlah sampel positif S.agalactiae Lebang Pinang Jumlah 19 14 33 1 0 1 (3,03%) Hasil penelitian yang diperoleh mempunyai perbedaan dengan hasil penelitian sebelumnya yang menemukan cukup banyak bakteri Streptococcus agalactiae pada susu sapi perah penderita mastitis. Winata (2011) melaporkan Sebanyak 14 (9.79%) sampel positif mengandung Streptococcus agalactiae dari 143 sampel asal peternakan rakyat KUNAK Bogor. Menurut Sugiri dan anri (2010) melaporkan bahwa prevalensi patogen penyebab mastitis subklinis streptococcus agalactiae pada peternak skala kecil dan menengah di beberapa sentra peternakan sapi perah di Pulau Jawa sebesar 37,5%. Sedangkan laporan hasil penelitian Wibawan., dkk (1995) 83%, 82% dan 80% masing-masing diwilayah Bogor, Boyolali dan Malang. Adanya perbedaan hasil penelitian yang diperoleh kemungkinan disebabkan karena kegagalan isolasi bakteri, yang berkaitan dengan penggunaan media agar dan metode yang dipakai, serta adanya perbedaan jumlah sampel yang digunakan dalam penelitian. Menurut Subronto (2003), mastitis subklinis adalah peradangan pada ambing yang biasanya disebabkan oleh infeksi mikroorganisme. Banyak mikroorganisme yang dapat menyebabkan termasuk bakteri, kapang dan khamir. Mastitis subklinis umumnya disebabkan oleh infeksi Staphylococcus, Streptococcus, dan Colliform. Menurut Wahyuni dkk, (2005) Streptococcus agalactiae dan Staphylococcus aureus adalah dua bakteri utama penyebab mastitis. Sedangkan menurut Benda., dkk (1997) dua bakteri patogen yang sering ditemukan adalah S.agalactiae (92%) dan S.aureus (67%). Pada prinsipnya mikroorganisme patogen sebagai penyebab mastitis subklinis sendiri ada yang bersifat parasit obligat/non environment patogen dan environment patogen. S.agalactiae sendiri merupakan parasit obligat. Menurut Waage dkk., (2001) Streptococcus agalactiae merupakan parasit obligat di ambing sapi perah dan tidak ditemukan hidup bebas di lingkungan. Sapi dara yang dimasukkan dalam peternakan pertama kali dapat terinfeksi dengan Streptococcus agalactiae dan infeksi umumnya dihasilkan dari sapi dara menyusu dari induk yang terinfeksi patogen. Menurut Blowey (1995) Streptococcus agalactie sangat menular sebagai penyebab matitis subklinis dan mudah ditransmisi dari sapi ke sapi lainnya yang sedang laktasi. Resevoir utama dari infeksi bakteri ini adalah ambing. Meskipun adakalanya koloni ditemukan pada saluran puting dan kulit, terutama pada permukaan yang kasar. 24 Streptococcus agalactiae mampu bertahan pada inang dalam temperatur tinggi, tergantung dari kemampuannya untuk melawan fagositosis. Isolat dari Streptococcus agalactiae memproduksi kapsul polisakarida. Kapsul polisakarida tersebut merupakan faktor virulensi yang penting. Kapsul-kapsul tersebut menghalangi fagositosis dan sebagai komplemen saat tidak ada antibodi (Quinn dkk., 2002). Sedangkan menurut Wibawan dan Laemmler (1990), Streptococcus agalactiae memiliki kapsul yang tersusun dari asam sialat dan senyawa karbohidrat lainnya yang membentuk struktur oligosakarida. Kapsul ini sebagai salah satu faktor virulen dari Streptococcus agalactiae yang berperan dalam mencegah fagositosis, menentukan ketahanan hidup dan mencegah proses pembunuhan bakteri. 25 5 KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian ini dari 33 sampel susu yang positif uji California Mastitis Test (CMT) yang diperoleh dari 23 ekor sapi perah penderita mastitis subklinis yang tersebar di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang, ditemukan 1 (3,03%) sampel susu positif mengandung bakteri Streptococcus agalactiae. 5.2 Saran 1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut yaitu pengujian sensitivitas antibiotik terhadap bakteri Streptococcus agalactiae yang ditemukan agar pengobatan terhadap kasus mastitis subklinis di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang dapat dilakukan secara optimal. 2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai deteksi keberadaan bakteri Streptococcus agalactiae penyebab mastitis subklinis pada sapi perah di lokasi yang berbeda, yaitu di Kecamatan lain di Kabupaten Enrekang. 26 DAFTAR PUSTAKA Anonim. 2010. Bacteria Under Microscope, Streptococcus agalactiae http://www.bacteriainphotos.com/bacteria%20under%20microscope/strept ococcus%20agalactiae%20microscopy.html# tanggal akses 5 oktober 2014 Arimbi, Koestanti. 2005. Aplikasi Daun Sambiloto Sebagai Bahan Aktif Dipping Dalam Program Kontrol Mastitis Pada Sapi Perah. Lembaga Penelitian Dan Pengabdian Masyarakat, Universitas Airlangga, Surabaya. [BSN] Badan Standardisasi Nasional. 2011. SNI 2332.9:2011. Cara Uji Mikrobiologi-bagian 9: Penentuan Staphylococcus aureus Pada Produk Perikanan. Bannerman DD, Wall RJ. 2005. A Novel Strategy for the Prevention of Staphylococcus aureus-Induced Mastitis in Dairy Cows. Information Systems for Biotechnology News Report. Virginia Tech University. USA. 1 - 4. Bearden HJ dan Fuquay. 1997. Learning Reproduction in Farm Animals. Department of Animal Science. Oklahoma State University. Bergey. 1974. Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology. Baltimore. Amerika Serikat. Blowey R. 1995. Mastitis Control in Dairy Herds an Illustrated and Practical Guide. USA: Farming Press. Bray DR, Shearer JK. 2003. Milking Machines and Mastitis Control Handbook. Florida Cooperative Extension Service - Institute of Food and Agricultural Sciences University of Florida. Gainesville. [internet]. Tersedia pada : https://edis.ifas.ufl.edu/ [Disnakin] Dinas Peternakan dan Perikanan Kabupaten Enrekang, 2014. Data Statistik Peternakan Kabupaten Enrekang. Dinas Peternakan dan Perikanan Kabupaten Enrekang. Enrekang. Dirjen Peternakan dan Kesehatan Hewan. 2012. Manual Penyakit Hewan Mamalia. Subdit Pengamatan Penyakit Hewan. Dirjen pertanian dan keswan Republik Indonesia. Jakarta Duval J. 1997. Treating mastitis without antibiotics. Ecological Agriculture Projects. Tanggal Akses 28 April 2014 Foley CR, Bath LD, Dickinson NF, Tucker AH. 1972. Dairy Cattle: Principles, Practices, Problems, Profits. Philadelphia: Lea & Febiger. Hidayat AP, Efendi A, Fuad Y, Patyadi K, Taguchi dan T. Sugikawa. 2002. Buku Petunjuk Teknologi Sapi Perah di Indonesia : Kesehatan Pemerahan. Dairy Technology Improvement Project in Indonesia. Bandung Hidayat A., drh., 2008. Buku Petunjuk Praktis untuk Peternak Sapi Perah tentang, Manajemen Kesehatan Pemerahan. Dinas Peternakan Propinsi Jawa Barat. Hurley WL, Morin DE. 2000. Mastitis Lesson A. Lactation Biology. ANSCI 308. [terhubung berkala] http://classesaces.uiuc.edu/Ansci 308/ Tanggal Akses 28 April 2014 Jawetz EAA. 1986. Mikrobiologi Kedokteran. Terjemahan dari: Medical Microbiology. Jakarta: EGC. Kasim, Sirajuddin, Irmayani. 2011. Strategi Pengembangan Usaha Sapi Perah Di Kabupaten Enrekang. Jurnal Agribisnis. 10(3):81-97. 27 Kirk JH, Lauerman LH. 1994. Mycoplasma mastitis in dairy cows. The Compendium on Continuing Education for The Practicing Veterinarian. 16(4): 541-551 Lang S and Palmer M. 2003. Characterization of Streptococcus agalactiae CAMP factor as a pore-forming toxin. J Biol Chem 278:38167-73 Lay BW.1994. Analisis Mikroba di Laboraturium. Raja Grafindo Persada. Jakarta. Lehman KB dan Neumann R. 2010. Atlas Und Grundriss Der Bakteriologie Und Lehrbuch Der Speziellen Bakteriologischen Diagnostik, Volume 1 (German Edition). Nabu Press. German. Lukman DW, Sudarwanto M, Sanjaya AW, Purnawarman T, Latif H, Soejoedono RR. 2009. Higiene Pangan. Di dalam: Pisestyani H, editor. Bogor: Bagian Kesmavet Fakultas Kedokteran Hewan Instititut Pertanian Bogor. hlm 3947. Martin SW, Meek AH, Willeberg P. 1987. Veterinary Epidemiology. USA: Iowa State University Press. Pelczar, M. J. dan E. C. S., Chan. 2007. Dasar-Dasar Mikrobiologi. UIP. Jakarta. Quinn, P. J., B. K. Markey, M. E. Carter, W. J. Donnelly and F. C. Leonard. 2002. Veterinary Microbiology and Microbial Disease. Blackwell Publishing. USA. 43 - 46, 465 - 475 Rahayu ID. 2009. Kerugian Ekonomi Mastitis Subklinis Pada Sapi Perah. Fakutas Pertanian Jurusan Peternakan. Universitas Muhammadiyah Malang. Reneau JK, Seykora AJ, Heins BJ. 2003. Relationship of Cow Hygiene Scores and SCC.Pages 362–363 in Proc. Natl. Mast.Coun., Madison, WI Ruoff KL. 1995. Streptococcus, In: Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH. Manual of Clinical Microbiology. 6th. ed. ASM Press. Washington DC. Setiawan H, Trisunuwati P, Winarso D. 2012. Kajian Sensitivitas dan Spesifisitas Reagen CMT, WST dan SFMT Sebagai Bahan Uji Mastitis Subklinis di Peternakan Sapi Perah Rakyat, KUD Sumber Makmur Ngantang. [JURNAL]. Malang: Program Studi Pendidikan Dokter Hewan, Universitas Brawijaya. Songer JG, Post KW. 2005. Veterinary Microbiology Bacterial and Fungal Agents of Animal Disease 1st Ed. Elsevier Saunders. [internet]. Tersedia pada : http://vet.sagepub.com/ Subronto. 2003. Ilmu Penyakit Ternak (Mamalia) I. Edisi Kedua. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. 309 - 351. Sudarwanto, M. 1999. Usaha Peningkatan Produksi Susu Melalui Program Pengendalian Mastitis Subklinis. Orasi Ilmiah Guru Besar Tetap Ilmu Kesehatan Masyarakat Veteriner, Bogor 22 Mei 1999. Fakultas Kedokteran Hewan-Institut Pertanian Bogor. Sudarwanto, M. 2009. Mastitis dan kerugian ekonomi yang disebabkannya. Makalah pada TOT JICA The 3rd. Oktober 2009, Cikole-Lembang, Bandung Barat. Sudono A, Rosdiana FR, Setiawan RS. 2003. Beternak Sapi Perah Secara Intensif. AgroMedia Pustaka. Jakarta Sugiri, Y.D. dan Akira Anri. 2010. Prevalensi Patogen Penyebab Mastitis Subklinis (Staphylococcus aureus dan Streptococcus agalactiae) dan Patogen Penyebab Mastitis Subklinis Lainnya pada Peternakan Skala 28 Kecil dan menengah di Beberapa Sentra Peternakan Sapi Perah di Pulau Jawa. Balai Pengujian dan Penyidikan Penyakit Hewan dan Kesmavet (BP3HK) Cikole Lembang Bandung Barat, Jawa Barat, Indonesia Sugoro, I. 2004. Pengontrolan Penyakit Mastitis dan Manajemen Sapi Pemerahan Susu. Artikel PATIR-BATAN, Jakarta. Syarief EK dan Harianto B. 2011. Beternak & Bisnis Sapi Perah. AgroMedia Pustaka. Jakarta Tanwar RK, Vyas SK, Fakhruddin, Singh AP. 2001. Comparative efficacy of various diagnostic tests in diagnosis of SCM in Rathi cows. Advancement of Veterinary Research (IAAVR). Izatnagar, India. pp 161-163. Taylor RE, Field TG. 2009. Scientific Farm Animal Production: An Introduction To Animal Science 9th Ed. Pearson Prentice Hall. New Jersey. Utama IH, Kendran AAS, Wibawan IWT, Pasaribu FH, Wahyuni AETH. 2000. Aktivitas hemaglutinasi isolat Streptococcus agalactiae pada berbagai sel darah merah hewan dan manusia. Med Vet 7(2):5-8. Virgihani, Krisnia. 2011. Tinjauan Resistensi Streptococcus agalactiae Penyebab Mastitis Subklinis di Peternakan Sapi Perah Kunak Bogor Terhadap Beberapa Antibotik (Studi Kasus). Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor. Waage S, Odegaard SA, Lund A, Brattgjerd S, Rothe T. 2001. Case-control study of risk factors for clinical mastitis in postpartum dairy heifers. Journal of Dairy Science 84, 392-99 Wahyuni AETH, Wibawan IWT, Pasaribu FH, Priosoeryanto BP. 2006. Distribusi Serotipe Streptococcus agalactiae Penyebab Mastitis Subklinis pada Sapi Perah di Jawa Timur, Jawa Tengah dan Jawa Barat. J Vet (2006) 7(1):1-8 Wahyuni AETH, Wibawan IWT, Wibowo MH. 2005. Karakterisasi hemaglutinin Streptococcus agalactiae dan Staphylococcus aureus penyebab mastitis subklinis pada sapi perah. J Sains Vet 3( 2):79-86. Wahyuni, Agnesia Endang Tri Hastuti. 2002. Karakterisasi Fenotipe dan Genotipe Streptococus agalactiae Isolat Asal Indonesia Penyebab Masitis Subklinis pada Sapi Perah. Institut Pertanian Bogor. Wibawan IWT dan Ch Laemmler. 1990. Properties of Grup B Streptococci with Protein Surface Antigen X and R. J.Clin. Microbiol. 28:2834-836 Wibawan IWT, Pasaribu FH, Huminto H, Estuningsih S. 1995. Ciri Biovar Streptococcus Agalactiae Sebagai Petunjuk Infeksi Silang Antara Sapi dan Manusia. Laporan Hibah Bersaing IV Tahap-1. Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor Wiley J, Sons. 2009. Mammary Gland in The seventh edition of Anatomy and Physiology of Farm Animals by Rowen D. Frandson, W. Lee Wilke, Anna Dee Fails p. 450-455. Wiley-Blackwell Winata F. 2011. Hubungan antara penggunaan metode Breed dengan uji mastitis IPB-1 untuk diagnosa mastitis subklinis [skripsi]. Bogor: Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor. Xia, Stephen S. 2006. The Rheology of Gel Formed During the California Mastitis Test. The University of Waikato. Thesis. 29 LAMPIRAN Lampiran 1. Hasil isolasi dan identifikasi laboratorium Uji Gula-gula Morfologi koloni di Nutrien Agar G R A M Morfologi K A T A L A S E S.01 Putih, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm, + Coccus bergerombol + 2. S.02 hemolisis ά - Basil, rantai pendek 3. S.03 Putih kekuningan, cembung, pinggiran tidak rata, D=3-5 mm, 4. S.04 + Coccus, berantai - - - + + + - - - CAMP (-), Bukan S.agalactiae 5. S.05 + Coccus, berantai - - + - + + - - - Bile (+), glukosa (-) bukan s.agalactiae 6. S.06 No. Kode S A M P E L 1. Bening/transparan, cembung, pinggiran rata, D=0,5-1 Bening/transparan, cembung, pinggiran rata, D=0,5-1 Putih, cembung, pinggiran rata, D=2-4 mm, C A M P BILE E S K U L I N G L U K O S A M A L T O S A S U K R O S A M O T I L I T A S I N D O L U R E A S E Ket. Tidak dilanjutkan karena coccus bergerombol dan katalase (+) Tidak dilanjutkan karena gram negatif, basil Tidak dilanjutkan karena koloni yang tumbuh putih kekuningan & memiliki ukuran besar (3-5mm) Tidak dilanjutkan karena koloni yang tumbuh putih memiliki ukuran besar (2- 30 4mm) Bening/transparan, cembung, pinggiran rata, , D=0,5-1 Putih keabuan, cembung, pinggiran tidak rata, D=1-3 mm, Bening/transparan, cembung, pinggiran rata, , D=0,5-1 7. S.07 8. S.08 9. S.09 10. S.10 11. S.11 12. S.12 Putih kekuningan, cembung, pinggiran tidak rata, D=3-5 mm, 13. S.13 Putih keabuan, cembung, pinggiran tidak rata, D=35mm, 14. S.14 15. S.15 16. S.16 17. S.17 Putih keabuan, D=1-3 mm, hemolisis γ Putih, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm, Bening/transparan, cembung, pinggiran rata, D=0,5-1 mm Putih keabuan, cembung, pinggiran rata, D=1-3 mm, Bening/transparan, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm Putih keabuan, cembung, + Coccus, berantai - Basil pendek + Coccus, berantai - Basil, pendek - Basil,pendek + Coccus, berantai - Basil pendek + Coccus, berantai - Basil - + - + + + - - - Streptococcus agalactiae Tidak dilanjutkan karena gram negatif, basil - - + - + + - - - Bile (+), glukosa (-) bukan s.agalactiae Tidak dilanjutkan karena gram negatif, basil Tidak dilanjutkan karena gram negatif, basil Tidak dilanjutkan karena koloni yang tumbuh putih kekuningan & memiliki ukuran besar (3-5mm) Tidak dilanjutkan karena koloni yang tumbuh putih abu-abu & memiliki ukuran besar (3-5mm) + - - + + + - - - CAMP (-), Bukan S.agalactiae Tidak dilanjutkan karena gram negatif, basil + - - + + + - - - CAMP (-), Bukan S.agalactiae Tidak dilanjutkan karena 31 pinggiran rata, D=1-2 mm, 18. S.18 Putih keabuan, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm, + Coccus, bergerombol + 19. S.19 Bening/tranparan, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm, + diplococcus - S.20 Putih keabuan, cembung, pinggiran tidak rata, D=2-3 mm, 20. 21. 22. S.21 S.22 23. S.23 24. S.24 25. S.25 26. S.26 27. S.27 Bening/transparan, cembung, pinggiran rata, D=0,5-1 mm gram negatif, basil Tidak dilanjutkan karena coccus bergerombol, katalase (+) Tidak dilanjutkan karena diplococcus Tidak dilanjutkan karena koloni yang tumbuh putih keabuan & memiliki ukuran besar (2-3mm) + Coccus, berantai - - + + + + - - - Tidak dilanjutkan karena koloni yang tumbuh putih keabuan & memiliki ukuran besar (3-5mm) Putih keabuan, cembung, pinggiran tidak rata, D=3-5 mm, Bening/transparan, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm Putih keabuan, cembung, pinggiran rata D=1-2 mm, + Coccus, berantai - + Coccus, bergerombol + - Basil + Coccus, bergerombol Putih, cembung, pinggiran rata, D=3-5 mm, Putih keabuan, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm, Putih, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm CAMP (-), Bile (+) Bukan s.agalactiae + - - + + + - - - CAMP (-) Bukan s.agalactiae Tidak dilanjutkan karena coccus bergerombol, katalase (+) Tidak dilanjutkan karena koloni yang tumbuh putih, besar (3-5mm), tdk lisis Tidak dilanjutkan karena gram negatif, basil Tidak dilanjutkan karena coccus bergerombol, katalase 32 28. 29. 30. S.28 S.29 S.30 (+) Tidak dilanjutkan karena koloni yang tumbuh putih kekuningan & memiliki ukuran besar (2-3mm) Putih keabuan, cembung, pinggiran tidak rata, D=2-3 mm, Bening/transparan, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm Bening/transparan, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm + Coccus, berantai - - + + + + - - - CAMP (-), Bile (+), bukan s.agalactiae + Coccus, berantai - - + - + + - - - CAMP (-), Bile (+),glukosa (), bukan s.agalactiae 31. S.31 Putih kekuningan, cembung, pinggiran tidak rata, D=3-5 mm, 32. S.32 Putih, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm + Coccus, bergerombol + 33. S.33 Putih keabuan, cembung, pinggiran rata, D=1-2 mm, + Coccus, bergerombol + Tidak dilanjutkan karena koloni yang tumbuh putih kekuningan & memiliki ukuran besar (3-5mm) Tidak dilanjutkan karena coccus bergerombol, katalase (+) Tidak dilanjutkan karena coccus bergerombol, katalase (+) 33 Lampiran 2. Identitas Peternak dan Data Sampel Sapi Perah No Peternak & Alamat Alamat Peternak (Desa) Uji CMT Laktasi 1. Mahyuddin Lebang Ke-2 2. Mahyuddin Lebang Ke-5 3. Mahyuddin Lebang Ke-2 4. Mahyuddin Lebang Ke-2 5. Mahyuddin Lebang Ke-2 6. Mahyuddin Lebang Ke-2 7. Mahyuddin Lebang Ke-2 Ambing Scoring Kode sampel Kanan Depan Negatif - Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang +2 Negatif Negatif Negatif Negatif +1 Negatif Negatif Negatif +2 +2 Negatif Negatif +2 Negatif Negatif Negatif Negatif +2 Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif +3 S.01 S.02 S.03 S.04 S.05 Kondisi tubuh Waktu Pengambilan sampel Ket. Gemuk 30/11/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 30/11/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 30/11/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 30/11/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 30/11/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 30/11/14 Negatif Mastitis Subklinis Gemuk 30/11/14 Positif Mastitis Subklinis S.06 Tdk diambil S.07 34 8. Mahyuddin Lebang Ke-2 9. Mahyuddin Lebang Ke-2 10. Mahyuddin Lebang Ke-3 14. Samsia Lebang Ke-4 15. Samsia Lebang Ke-4 11. Amiluddin Lebang Ke-3 12. Amiluddin Lebang Ke-2 Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Negatif Negatif Negatif Negatif +2 Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif +2 +2 Negatif Negatif +2 Negatif Negatif Negatif Kanan Belakang Negatif Kiri Depan Negatif Kiri Belakang Negatif Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Negatif Negatif +2 +2 Negatif Negatif Negatif S.08 Gemuk 04/12/14 Positif Mastitis Subklinis Tdk diambil Gemuk 04/12/14 Negatif Mastitis Subklinis S.09 S.10 Gemuk 04/12/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 04/12/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 04/12/14 Negatif Mastitis Subklinis Gemuk 04/12/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 04/12/14 Positif Mastitis Subklinis S.11 Tdk diambil S.12 S.13 35 13. Amiluddin Lebang Ke-3 16. Abd. Halim Lebang Ke-5 17. Hamsia Lebang Ke-3 Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan 18. Abdul Halim Pinang Ke-1 19. Abdul Halim Pinang Ke-7 20. Abdul Halim Pinang Ke-2 21. Ridwan Pinang Ke-1 22. Ridwan Pinang Ke-2 Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang +1 Negatif +2 +2 Negatif Negatif Negatif Negatif +3 +2 +1 Negatif Negatif S.14 +3 S.20 Negatif Negatif Negatif Negatif +2 Negatif +2 Negatif Negatif Negatif Negatif +2 Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif S.15 S.16 S.17 S.18 S.19 S.21 Gemuk 17/12/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 17/12/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 17/12/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 17/12/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 17/12/14 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 17/12/14 Negatif Mastitis Subklinis Gemuk 12/01/15 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 12/01/15 Positif Mastitis Subklinis S.22 Tdk diambil S.23 36 23. Ridwan Pinang Ke-3 24. Hamsi Pinang Ke-2 25. Lestari Pinang Ke-7 26. Lestari Pinang Ke-8 27. Suryadi Pinang Ke-1 28. Suryadi Pinang Ke-1 Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang Kanan Depan Kanan Belakang Kiri Depan Kiri Belakang +2 +2 Negatif +2 +2 Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif +2 Negatif Negatif +2 +3 Negatif +3 Negatif Negatif Negatif Negatif +3 Negatif +2 Negatif Negatif S.24 S.25 S.26 S.27 Gemuk 12/01/15 Positif Mastitis Subklinis Tdk diambil Gemuk 12/01/15 Negatif Mastitis Subklinis Gemuk 12/01/15 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 12/01/15 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 12/01/15 Positif Mastitis Subklinis Gemuk 12/01/15 Positif Mastitis Subklinis S.28 S.29 S.30 S.31 S.32 S.33 37 Lampiran 3. Identitas Peternak dan Data Sampel Sapi Perah Foto 1. Reagen dan padel CMT untuk pengujian mastitis subklinis Foto 2. Wawancara dengan peternak sebelum pengambilan sampel 38 Foto 3. Pemerahan susu pada padel untuk uji CMT Foto 4. Penyimpanan sampel susu pada tabung steril 39 RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan pada tanggal 26 April 1992 di Polewali, Kab. Polman, Provinsi Sulawesi Barat dari pasangan Lukman, S.P., M.M.A dan Ibu Rahmatia, S.Pd. Penulis merupakan anak bungsu dari tiga bersaudara. Penulis menyelesaikan jenjang pendidikan sekolah dasar pada tahun 2004 di SD Negeri 028 Pekkabata dan pada tahun yang sama penulis melanjutkan pendidikan ke SMP Negeri 3 Polewali hingga lulus pada tahun 2007. Pendidikan sekolah menengah umum diselesaikan pada tahun 2010 di SMA Negeri 1 Polewali. Pada tahun 2010 penulis berkesempatan untuk melanjutkan pendidikan di Program Studi Kedokteran Hewan, Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin (PSKH-FK UNHAS) melalui Jalur Reguler. Semasa menjadi mahasiswa PSKHFK UNHAS penulis pernah aktif dalam kegiatan eksternal dan internal kampus, yaitu di Organisasi Himpunan Mahasiswa Kedokteran Hewan (HIMAKAHA) PSKH-FK UNHAS menjabat sebagai anggota divisi Administrasi dan Kesekretariatan periode 2011-2012, anggota himpunan Minat dan Profesi Ternak Besar dan Unggas periode 2012-2013 dan mengikuti berbagai kepanitiaan di dalam dan di luar kampus. Tugas akhir berupa skripsi dengan judul Deteksi Streptococcus agalactiae Penyebab Mastitis Subklinis pada Sapi Perah di Kecamatan Cendana Kabupaten Enrekang diselesaikan penulis dengan bimbingan dari Prof. Dr. drh. Lucia Muslimin, M.Sc dan drh. Fika Yuliza Purba, M.Sc
