(HASIL REVISI)IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR PEMANIS BUATAN NATRIUM SIKLAMAT PADA MINUMAN SERBUK INSTAN YANG DIJUAL DI KELURAHAN BANARA revisi
advertisement
IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR PEMANIS BUATAN NATRIUM SIKLAMAT PADA MINUMAN SERBUK INSTAN YANG DIJUAL DI KELURAHAN BANARAN KABUPATEN BOYOLALI KARYA TULIS ILMIAH Oleh : Andika Rusdi Pratama 29171439C PROGRAM STUDI D-III ANALIS FARMASI DAN MAKANAN FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SETIA BUDI SURAKARTA 2020 HALAMAN JUDUL IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR PEMANIS BUATAN NATRIUM SIKLAMAT PADA MINUMAN SERBUK INSTAN YANG DIJUAL DI KELURAHAN BANARAN KABUPATEN BOYOLALI KARYA TULIS ILMIAH Diajkukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Mencapai Derajat Ahli Madya Analis Farmasi dan Makanan Program Studi D-III Anafarma pada Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi Oleh : Andika Rusdi Pratama 29171439C PROGRAM STUDI D-III ANALIS FARMASI DAN MAKANAN FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SETIA BUDI SURAKARTA 2020 i PENGESAHAN KARYA TULIS ILMIAH ii PERNYATAAN Saya menyatakan bahwa Karya Tulis Ilmiah ini adalah hasil pekerjaan saya sendiri dan tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar Ahli Madya di suatu Perguruan Tinggi dan sepanjang pengetahuan saya tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Saya siap menerima sanksi, baik secara akademik maupun hukum apabila karya tulis ini merupakan jiplakan dari penelitian atau karya tulis atau skripsi orang lain Surakarta, Juli 2020 Andika Rusdi Pratama iii HALAMAN PERSEMBAHAN “ Sesungguhnya Allah tidak akan merubah keadaan suatu kaum sehingga mereka mengubah keadaan yang ada pada mereka sendiri ” ( QS. Ar Ra’d : 11 ) “ Dan bahwasanya seorang manusia tiada memperoleh selain apa yang telah diusahakannya ” ( An Najm : 39 ) Karya Tulis Ilmiah ini saya persembahkan kepada : Allah SWT yang telah selalu memberikan kekuatan kepada diri saya untuk menyelesaikan Tugas akhir ini. Orang Tua yang selalu memberi semangat, nasehat dan selalu mendoakan Bagas Dandhi K. Yang membantu sekaligus partner tugas akhir hingga selesai Sahabat yang selalu memberikan semangat Teman-teman yang membantu menyelesaikan tugas akhir hingga selesai. iv KATA PENGANTAR Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa atas segala berkat dan anugerah-Nya yang berlimpah sehingga dapat menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah yang berjudul “IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR PEMANIS BUATAN NATRIUM SIKLAMAT PADA MINUMAN SERBUK INSTAN YANG DIJUAL DI KELURAHAN BANARAN KABUPATEN BOYOLALI” Karya Tulis Ilmiah ini disusun dalam rangka memenuhi persyaratan untuk dapat mencapai derajat Diploma Analis Farmasi dan Makanan di Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi, Surakarta. Untuk itu, pada kesempatan kali ini penulis tak lupa mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada : 1. Dr. Ir. Djoni Tarigan, MBA., selaku rektor Universitas Setia Budi Surakarta. 2. Prof. Dr. Apt. R. A. Oetari, SU., MM., M.Sc., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi. 3. Dr. Apt. Ika Purwidyaningrum, M.Sc., selaku Ketua Program Studi D-III Analis Farmasi dan Makanan 4. Apt. Vivin Nopiyanti, M.Sc., selaku dosen pembimbing yang telah memberikan arahan, masukan, motivasi dan semangat dalam penyusunan Karya Tulis Ilmiah ini. 5. Dosen pengajar Program Studi D-III Analis Farmasi dan Makanan yang telah membagikan ilmu yang berguna untuk penyusunan Karya Tulis Ilmiah ini. 6. Ibu dan Bapak penguji yang telah meluangkan waktunya untuk menguji dan memberikan masukan guna menyempurnakan tugas akhir ini. 7. Staf Laboratorium Universitas Setia Budi Surakarta yang telah memberikan pelayanan dari awal kuliah sampai selesainya tugas akhir ini. 8. Orang tua dan keluarga untuk semua dukungan dan doa kepada penulis, sehingga dapat menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah ini. 9. Teman-teman yang telah memberi dukungan penuh untuk menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah ini. v Penulis menyadari dalam menyusun Karya Tulis Ilmiah ini masih banyak kekurangan, oleh karena ini mengharapkan saran dan nasehat dari pembaca agar lebih baik lagi dan semoga Karya Tulis Ilmiah ini bisa bermanfaat kedepannya. Surakarta, Juli 2020 Andika Rusdi Pratama vi DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL................................................................................................ i PENGESAHAN KARYA TULIS ILMIAH ........................................................... ii PERNYATAAN..................................................................................................... iii HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv KATA PENGANTAR .............................................................................................v DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. xi DAFTAR TABEL ................................................................................................. xii DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii INTISARI............................................................................................................ xvii ABSTRACT ...................................................................................................... xviiii BAB I PENDAHULUAN .....................................................................................1 A. Latar Belakang .............................................................................................1 B. Rumusan Masalah ........................................................................................3 C. Tujuan Penelitian..........................................................................................3 D. Manfaat Penelitian........................................................................................3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA..............................................................................4 A. Pemanis ........................................................................................................4 1. Jenis-jenis pemanis ....................................................................................4 1.1 Pemanis alami. ......................................................................................4 1.2 Pemanis buatan. .....................................................................................4 B. a. Sakarin................................................................................................4 b. Aspartam ............................................................................................5 c. Siklamat .............................................................................................5 Natrium Siklamat .........................................................................................5 1. Kelebihan natrium siklamat .......................................................................7 2. Regulasi......................................................................................................7 vii 3. Dampak penggunaan siklamat ...................................................................8 3.1 Dampak akut. ........................................................................................8 3.2 Dampak kronis ......................................................................................8 a. Efek testikular ....................................................................................9 b. Efek kardiovaskular ...........................................................................9 c. Kerusakan hati dan ginjal ...................................................................9 d. Kerusakan organ.................................................................................9 C. Minuman Serbuk ..........................................................................................9 D. Minuman Kemasan ......................................................................................9 E. Metode Analisis..........................................................................................10 1. Analisis kualitatif .....................................................................................10 2. Analisis kuantitatif ...................................................................................10 2.1 Definisi. ...............................................................................................10 2.2 Prinsip kerja.........................................................................................11 2.3 Bagian-bagian dari spektrofotometer. .................................................11 a. Sumber .............................................................................................12 b. Monokromator .................................................................................12 c. Sel absorbsi ......................................................................................12 d. Detektor ............................................................................................13 e. Pencatat arus listrik ..........................................................................13 2.4 Analisis secara spektrofotometri. ..........................................................13 a. Analisis kualitatif .............................................................................13 b. Analisis kuantitatif ...........................................................................13 2.5 Hukum lambert-beer. ........................................................................14 2.6 Rentang pembacaan absorbansi dan transmitan. .................................14 2.7 Tahapan-tahapan analisis secara spektrofotometri..............................15 2.8 Faktor-faktor yang mempengaruhi spektrum absorbansi. ...................15 2.9 Hal-hal yang harus diperhatikan dalam analisis...................................16 a. Pembentukan molekul yang dapat menyerap sinar uv-vis. ..............16 b. Waktu operasional (Operating Time)...............................................16 c. Pemilihan panjang gelombang maksimal.........................................16 viii d. Pembuatan kurva baku. ....................................................................16 e. Pembacaan absorbansi sampel .........................................................17 F. Landasan Teori ...........................................................................................17 G. Hipotesis .....................................................................................................18 BAB III METODE PENELITIAN.........................................................................19 A. Populasi dan Sampel ..................................................................................19 B. Variabel Penelitian .....................................................................................19 1. Identifkasi variabel utama ........................................................................19 2. Klasifikasi variabel utama........................................................................19 3. Definisi operasional variabel utama.........................................................19 C. Alat dan bahan ............................................................................................20 D. Jalannya penelitian .....................................................................................20 1. Peparasi sampel .......................................................................................20 2. Uji kualitatif .............................................................................................21 3. Uji kuantitatif ...........................................................................................21 1.1. Penetapan panjang gelombang. ...........................................................21 1.2. Penentuan operating time (OT). ..........................................................21 1.3. Pembuatan kurva kalibrasi. .................................................................21 1.4. Pembuatan larutan blanko. ..................................................................22 1.5. Penetapan kadar Na-siklamat pada sampel. ........................................22 E. Metode Analisis Hasil ................................................................................22 BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN .......................................24 A. Preparasi Sampel ........................................................................................24 B. Analisis Kualitatif ......................................................................................24 C. Penentuan Panjang Gelombang Maksimal .................................................26 D. Penentuan Operating Time .........................................................................26 E. Penentuan Kurva Baku ...............................................................................28 F. Penentuan kadar Na-siklamat dalam Sampel .............................................29 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .................................................................31 A. Kesimpulan.................................................................................................31 B. Saran ...........................................................................................................31 ix DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................32 LAMPIRAN ...........................................................................................................15 x DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Natrium siklamat 6 Gambar 2. Diagram sistem optik spektrofotometer 11 Gambar 3. Reaksi pembentukan endapan barium sulfat 26 Gambar 4. Kurva panjang gelombang maksimum 26 Gambar 5. Kurva operating time 27 Gambar 6. Grafik kurva kalibrasi natrium siklamat 28 xi DAFTAR TABEL Tabel 1. Hasil uji kualitatif .................................................................................................................................... 25 Tabel 2. Data hasil kurva baku nantrium siklamat .................................................................................................................................... 28 Tabel 3. Kadar Na-siklamat dalam sampel .................................................................................................................................... 29 xii DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Gambar Sampel .................................................................................................................................... 35 Lampiran 2. Alat dan Bahan .................................................................................................................................... 36 Lampiran 3. Hasil Uji Kualitatif .................................................................................................................................... 37 Lampiran 4. Data Kurva Panjang Gelombang Maksimum .................................................................................................................................... 39 Lampiran 5. Data Operating Time .................................................................................................................................... 40 Lampiran 4. Data Pembuatan larutan .................................................................................................................................... 40 4.1. Pembuatan Larutan NaOH 10 M ............................................................................................................................... 40 4.2. Pembuatan Larutan NaOH 0,5 M ............................................................................................................................... 40 4.3. Pembuatan Larutan Natrium Hipoklorit 1 % xiii ............................................................................................................................... 41 4.4. Pembuatan larutan H2SO4 30% ............................................................................................................................... 41 Lampiran 5. Data Pembuatan Larutan Baku .................................................................................................................................... 41 5.1. Baku Induk 1.000 ppm ............................................................................................................................... 41 5.2. λ max (800 ppm) ............................................................................................................................... 42 5.3. Baku 775 ppm ............................................................................................................................... 42 5.4. Baku 800 ppm ............................................................................................................................... 42 5.5. Baku 825 ppm ............................................................................................................................... 43 5.6. Baku 850 ppm ............................................................................................................................... 43 xiv 5.7. Baku 875 ppm ............................................................................................................................... 43 5.8. Baku 900 ppm ............................................................................................................................... 44 Lampiran 6. Data Validasi .................................................................................................................................... 44 6.1. Linearitas ............................................................................................................................... 44 6.2. Presisi ............................................................................................................................... 44 6.3. Akurasi ............................................................................................................................... 45 6.4. Batas Deteksi dan Batas Kuantitas ............................................................................................................................... 46 Lampiran 7. Data Perhitungan Kadar Sampel .................................................................................................................................... 46 7.1. Sampel A xv ............................................................................................................................... 47 7.2. Sampel B ............................................................................................................................... 48 7.3. Sampel C ............................................................................................................................... 49 7.4. Sampel D ............................................................................................................................... 50 xvi INTISARI PRATAMA, A.R., 2020 IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR PEMANIS BUATAN NATRIUM SIKLAMAT PADA MINUMAN SERBUK INSTAN YANG DIJUAL DI KELURAHAN BANARAN KABUPATEN BOYOLALI Minuman serbuk merupakan minuman yang diproduksi oleh industri minuman yang dikemas dalam kantong plastik. Minuman ini dapat ditemukan pada toko-toko, warung kecil, dan bahkan dapat ditemukan atau dijual dikaki lima bebas. Na-Siklamat salah satu pemanis buatan yang sering digunakan oleh industri makanan dan minuman. Siklamat mempunyai kemanisan 30-80 kali dari gula murni sehingga sangat disukai karena rasanya yang murni tanpa cita rasa tambahan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui adanya kandungan Na-siklamat dalam sampel minuman serbuk instan, kadar Na-siklamat dalam sampel minuman serbuk instan yang dianalisis secara spektrofotometri UV – Vis, dan kadar Na-siklamat dalam sampel minuman serbuk instan sesuai dengan Permenkes R1 No. 722/Menkes/Per/IX/1988 tentang batas maksimum penggunaan bahan tambahan pangan pemanis. Sampel yang dipergunakan sebanyak 8 sampel diambil sesuai kriteria yang memenuhi, yaitu tidak tertulis adanya Na-siklamat pada etiket kemasan. Metode penelitian ini dilakukan secara kualitatif dengan uji pengendapan menggunakan reagen pereaksi HCl, BaCl2, NaNO2 dan kuantitatif secara spektrofotometri UVVis pada panjang gelombang 269 nm. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa empat sampel positif mengandung siklamat. Kadar sampel yang diperoleh B sebesar 1,6673 ± 0,27x10-4 g/Kg; sampel C sebesar 1,7661 ± 0,17 x 10-4 g/Kg; sampel E sebesar 1,5358 ± 0,06 x 10-4 g/Kg; dan sampel G sebesar 1,6228 ± 0,09 x 10-4 g/Kg. Hasil ini menyimpulkan bahwa kandungan siklamat dalam minuman serbuk instan masih memenuhi persyaratan yang ditetapkan oleh Permenkes R1 No. 722/Menkes/Per/IX/1988 yaitu 3g/Kg. Kata kunci : Minuman serbuk instan, Na-siklamat, Spektrofotometri UV-Vis xvii ABSTRACT PRATAMA, A.R., 2020 IDENTIFICATION AND DETERMINATION OF LEVELS OF ARTIFICAL SWEETENERS OF SODIUM CYCLAMATE IN INSTANT POWDER DRINKS SOLD IN THE BANARAN SUB-DISTRICT OF BOYOLALI Powdered drinks are drinks produced by the beverage industry which are packaged in plastic bags. This drink can be found in stores, small shops, and can even be found or sold at five-foot free. Cyclamate is an artifical sweetener that is often used by the food and beverage industry. Cyclamate has a sweetness 30-80 times that of pure sugar so it is preferred because of its pure taste without additional flavor. This study aims to determine the presence of Na-cyclamate content in instant powder drink samples, Na-cyclamate content in instant powder drink samples analyzed by UV-Vis spectrophotometry, and Na-cyclamate content in instant powder drink samples according to Permenkes R1 No. 722 / Menkes / Per / IX / 1988 concerning the maximum limit of the use of sweetener food additives. The sample used as many as 8 samples were taken according to the criteria that met, namely not written the presence of Na-cyclamate on the packaging label The researh method was carried out qualitatively by the precipitation test using reagents HCl, BaCl2, NaNO2 dan quantitative by spectrophotometry uv-vis at a wavelenght of 269 nm. The results of this study indicate that four positive samples contained cyclamate. The level of cyclamate obtained by sample B was 1,6673 ± 0,27x10-4 g/Kg; sample C was 1,7661 ± 0,17 x 10-4 g/Kg; sample E was 1,5358 ± 0,06 x 104 g/Kg; and sample G was 1,6228 ± 0,09 x 10-4 g/Kg. These results conclude that the cyclamate content in instant powder driks still meets the requirements set by Permenkes R1 No. 722/Menkes/Per/IX/1988 that is 3 g/Kg. Keywords : Instant powder drinks, Na-cyclamate, Spectrophotometry Uv-Vis xviii BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang Perkembangan teknologi pengelolahan pangan di Indonesia cukup pesat. Bahan tambahan pangan yaitu berbagai bahan yang sengaja ditambahkan kedalam makanan dan bukan merupakan bahan utama, berguna untuk memperoleh produk olahan makanan atau minuman yang bercita rasa lezat, menarik, dan tahan lama (Mahyuddin, 2011). Masyarakat berkeinginan untuk mendapatkan makanan yang berkualitas tidak pernah terpuaskan karena dibatasi oleh berbagai produk awetan. Masalah penggunaan bahan tambahan pangan dalam proses produksi perlu diwaspadai bersama, baik oleh produsen maupun konsumen, mengingat penggunaanya dapat berakibat positif maupun negatif bagi masyarakat (Sukmawati, 2015) Bahan tambahan pangan ini terdiri dari beberapa jenis yaitu, bahan tambahan pangan secara langsung, bahan bantuan pemrosesan, pembentuk tekstur, pengawet, agen perasa dan penampakan, penambah nutisi serta zat pewarna. Dalam bahan agen perasa atau zat pemanis yang sering digunakan adalah natrium siklamat (Sembel, 2015). Minuman serbuk merupakan minuman yang diproduksi oleh industri minuman yang dikemas dalam kantong plastik. Minuman ini dapat ditemukan pada toko-toko, warung kecil, dan bahkan dapat ditemukan atau dijual dikaki lima bebas. Pada kemasan dalam bentuk instan tersebut, ada yang mencantumkan komposisinya dan ada yang tidak. Berbagai macam merk ada yang mencantumkan nama pemanis yang digunakan, tetapi tidak dituliskan berapa kadarnya. Siklamat jenis pemanis sintetis yang sering digunakan karena harganya murah dan tingkat kemanisanya lebih tinggi dari pemanis alami (Mulyatmo, 2015). Na-Siklamat adalah Pemanis sintetis yang umumnya digunakan industri makanan maupun minuman. Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis pemanis buatan berpotensi menyebabkan tumor dan bersifat karsinogenik. World 1 2 Health Organization (WHO) menyatakan adanya batas maksimum natrium siklamat yang boleh dikonsumsi per hari atau Acceptable Daily Intake (ADI) yakni 11 mg/kg (Devitria, 2018). Batas maksimum di Indonesia penggunaan bahan tambahan pangan pemanis buatan berdasarkan Permenkes R1 No. 722/Menkes/Per/IX/1988 kadar Natrium Siklamat yang ditetapkan adalah maksimum 3g/kg (Wibowotomo, 2008) Pemanis buatan Natrium Siklamat digunakan sebagai pencapur pada produk makanan atau minuman. Adapun minuman yang biasanya mengandung Natrium Siklamat diantaranya es krim, es cendol, es kelapa muda, es sirup dan es teller (Nurain, 2012). Es teller adalah olahan minuman segar yang menggunakan buah utuh sebagai bahan pembuatannya. Adapun bahan yang digunakan dalam pembuatan es teller ini adalah buah kelapa muda yang dikeruk dagingnya, buah alpukat yang dikeruk dagingnya, biji nangka yang di iris tipis, biji kolang kaling manis yang diiris tipis, susu kental manis, es serut. Sedangkan bahan untuk sirup adalah 400 ml air kelapa (atau air biasa) dan 100 gram gula pasir (Siswaty, 2013). Minuman jajanan menjadi salah satu contoh produk yang mencampurkan pemanis buatan. Dalam produk ini, takarannya harus sesuai dengan syarat yang berlaku berdasarkan aturan permenkes. Berdasarkan penelitian (Purwaningsih.dkk, 2010) menyatakan bahwa 25 sampel minuman es lilin yang di ambil dari pedagang Srondol Wetan dan Pedalangan, 17 sampel (68,0%) positif mengandung Natrium Siklamat dan 8 sampel (32,0%) negatif tidak mengandung Natrium Siklamat. Sampel positif mengandung Natrium Siklamat ada 14 sampel yang konsentrasi masih dibawah batas maksimum dan 3 sampel yang melebihi batas maksimum penggunaan yang ditetapkan pemerintah yaitu 3 g/kg atau setara dengan 3.000 ppm. Berdasarkan latar belakang tersebut, maka penting untuk dilakukan penelitian tentang analisis pemanis buatan Na-siklamat dalam minuman serbuk instan yang dijual di Kelurahan Banaran Kabupaten secara spektrofotometri UVVis. 3 B. Rumusan Masalah Berdasarkan latar belakang diatas, dapat dirumuskan masalah penelitian sebagai berikut : 1. Apakah sampel minuman serbuk instan yang beredar di Kelurahan Banaran Kabupaten Boyolali mengandung pemanis buatan Na-siklamat? 2. Berapa kadar Na-siklamat dalam sampel minuman serbuk instan yang dianalisis secara spektrofotometri UV - Vis ? 3. Apakah kadar Na-siklamat dalam sampel sesuai dengan Permenkes R1 No. 722/Menkes/Per/IX/1988 tentang batas maksimum penggunaan bahan tambahan pangan pemanis ? C. Tujuan Penelitian Berdasarkan perumusan masalah tersebut, tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui : 1. Mengetahui adanya kandungan Na-siklamat dalam sampel minuman serbuk instan. 2. Mengetahui kadar Na-siklamat dalam sampel minuman serbuk instan yang dianalisis secara spektrofotometri UV – Vis. 3. Mengetahui kadar Na-siklamat dalam sampel minuman serbuk instan sesuai dengan Permenkes R1 No. 722/Menkes/Per/IX/1988 tentang batas maksimum penggunaan bahan tambahan pangan pemanis. D. Manfaat Penelitian Berdasarkan tujuan penelitian, manfaat dari penelitian ini adalah sebagai berikut : 1. Bagi masyarakat, dapat menambah wawasan pengetahuan dan informasi tentang pemanis buatan khususnya pemanis Na-siklamat yang terdapat dalam minuman serbuk instan. 2. Bagi peneliti, dapat menambah informasi dan pengalaman terkait dalam analisis pemanis buatan Na-siklamat pada minuman serbuk instan. BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Pemanis Pemanis adalah salah satu jenis bahan tambahan pangan setelah pewarna, pengasam, peningkat flavor, pengawet dan lain-lain. Prodak pangan yang ditambahkan pemanis didalamnya akan memiliki rasa yang lebih manis dari sebelumnya. Adapun jenis pemanis seperti glukosa atau sukrosa juga dapat mengubah karakteristik lainnya dari suatu produk pangan yaitu warna, aroma, tekstur, menambah volume produk, bahkan dapat meningkatkan umur simpan produk jika ditambahkan dalam jumlah yang tinggi (Estiasih dkk, 2015). 1. Jenis-jenis pemanis 1.1 Pemanis alami. Jenis pemanis ini didapatkan dari tumbuhan, seperti kelapa, tebu, dan aren. Pemanis alami dapat pula diperoleh dari buah-buahan dan madu. Manfaat dari pemanis alami ini untuk meningkatkan cita rasa dan aroma manis, memperbaiki sifat-sifat fisik, sebagai pengawet, memperbaiki sifat-sifat kimia sekaligus merupakan sumber kalori bagi tubuh. 1.2 Pemanis buatan. Pemanis buatan merupakan suatu pemanis yang dihasilkan melalui proses kimia. Keuntungan dari penggunaan pemanis buatan yaitu untuk mengembangkan jenis minuman dan makanan dengan jumlah kalori terkontrol. Kontrol program pemeliharaan dan menurunkan berat badan, mengurangi kerusakan gigi, dan sebagai bahan tambahan pemanis utama. Pemanis buatan dengan nilai kalori rendah sangat dibutuhkan oleh penderita diabetes dan kencing manis (Murdiati, 2013). Beberapa contoh pemanis sintetis sebagai berikut : a. Sakarin Sakarin merupakan pemanis buatan yang mempunyai rasa manis 200700 kali sukrosa dan banyak digunakan dengan alasan utama harganya yang murah. 4 5 b. Aspartam Aspartam sebagai pemanis buatan pada berbagai jenis makanan dan minuman, terutama makanan dan minuman yang rendah kalori banyak digunakan. Begitu juga dengan siklamat karena sifatnya yang tahan panas, aspartam banyak digunakan pada berbagai jenis makanan dan minuman yang memerlukan pengolahan dalam suhu tinggi. c. Siklamat Siklamat hanya berasa manis yang melebihi dari pemanis alami, berbeda dengan sakarin yang memiliki rasa manis dengan meninggalkan rasa pahit. Siklamat mempunyai rasa manis 30 kali sukrosa. Siklamat banyak dipakai untuk makanan kaleng ataupun makanan lain yang diproses dalam suhu tinggi karena merupakan pemanis yang tahan panas (Yuliarti, 2007) B. Natrium Siklamat Pertama kalinya Natrium Siklamat ditemuakan dengan tidak sengaja oleh Michael Sveda pada tahun 1937. Mulai tahun 1950 siklamat ditambahkan dalam pangan dan minuman, siklamat biasanya terdapat dalam bentuk garam natrium dari asam siklamat dengan rumus molekul C6H11NHSO3Na. Natrium Siklohekssilsulfamat atau sering disebut Natrium Siklamat merupakan nama lain dari siklamat. Assugrin, sucaryl, atau sucrose dikenal sebagai nama dagang siklamat (Cahyadi, 2009). Natrium Siklamat adalah pemanis buatan yang mempunyai rasa manis tanpa ada rasa ikutan yang kurang disenangi atau rasa pahit. Pemanis ini mempunyai rasa manis ± 30 kali sukrosa, bersifat mudah larut dalam air. Natrium Siklamat dalam industri pangan sering dipakai sebagai bahan pemanis yang tidak mempunyai nilai gizi (non-nutritive) untuk pengganti sukrosa atau yang sering kita kenal dengan gula pasir atau gula tebu. Pemanis ini bersifat tahan panas, sehingga sering digunakan dalam pangan yang diproses dalam suhu tinggi, misalnya pangan dalam kaleng (Cahyadi, 2009). Natrium Siklamat meskipun memiliki tingkat kemanisan yang tinggi dan rasanya yang enak (tanpa rasa pahit) tetaplah dapat membahayakan kesehatan. 6 Menurut hasil penelitian National Academy Of Science tahun 1968 pada tikus yang diberikan Natrium Siklamat dapat menimbulkan kanker kantong kemih. Sikloheksilamin sebagai hasil metabolisme Natrium Siklamat bersifat karsinogenik. Hasil eksresinya melalui urine dapat merangsang pertumbuhan tumor. Hasil penelitian yang lebih baru menunjukkan bahwa Natrium Siklamat dapat menyebabkan atropi, yaitu terjadinya pengecilan testicular dan kerusakan kromosom. Penelitian yang dilakukan oleh para ahli Academy Of Siencepada pada tahun 1985 melaporkan bahawa Natrium Siklamat maupun turunannya (sikloheksiamin) tidak bersifat karsinogenik, tetapi diduga sebagai tumor promotor. Sampai saat ini hasil penelitian mengenai dampak Natrium Siklamat terhadap kesehatan masih diperdebatkan. Adanya peraturan bahwa penggunaan Natrium Siklamat dan Sakarin masih diperbolehkan, serta mudah didapatkan dengan harga yang relatif murah dibandingkan dengan gula alam. Hal tersebut menyebabkan produsen pangan dan minuman terdorong untuk menggunakan kedua jenis pemanis buatan tersebut didalam produk (Cahyadi, 2009). a. Struktur Kimia 1) Rumus molekul : C6H11NHSO3Na 2) Nama Kimia : natrium sikloheksisulfamat 3) Berat molekul : 201,22 4) pH : larutan siklamat 10,0 % b/v 5,5 sampai 7,5 b. Struktur Fisika 1) Pemerian : berbentuk kristal putih, tidak berbau, tidak berwarna 2) Kelarutan : sangat mudah larut dalam air,etanol, dan praktis tidak larut dalam eter , benzene, dan kloroform. Gambar 1. Natrium Siklamat 7 1. Kelebihan natrium siklamat Natrium Siklamat sebagai pemanis rendah kalori bermanfaat untuk mengontrol berat badan, mengelola diabetes, atau membantu mencegah kerusakan gigi. Natrium Siklamat stabil dan larut dalam air.Pemanis ini digunakan sebagai pemanis dalam minuman diet dan makanan rendah kalori lainnya dan juga berguna sebagai penambah rasa. Natrium Siklamat yang mempunyai stabilitas panas, tingkat kemanisan yang tinggi dan keunggulan teknologi lainnya membuat pemanis ini digunakan bagi banyak sediaan farmasi dan perlengkapan mandi (Nurul, 2015). Natrium Siklamat saat dikombinasikan dengan pemanis rendah kalori lainnya, hasil efek sinergis dari kedua pemanis tersebut akan menghasilkan kombinasi rasa manis yang biasanya akan diharapkan dari jumlah pemanis individu. Aftertaste yang kadang-kadang disebabkan oleh penggunaan pemanis tunggal dapat ditutupi dengan menggabungkan dua jenis pemanis. Misalnya, campuran dari sepuluhbagian natrium siklamat dan satu bagian sakarin adalah kombinasi yang banyak digunakan dalam makanan dan minuman. Natrium Siklamat dapat berfungsi sebagai pelengkap yang sangat baik untuk pemanis rendah kalori lain yang tersedia. Mempunyai unik sifat pemanis sinergis ini memungkinkan lebih banyak jenis produk rendah kalori dengan rasa yang baik. Natrium Siklamat stabil dalam panas dan dingin serta memiliki umur simpan yang baik. Pemanis ini lebih banyak digunakan dalam minuman karena kelarutannya dalam cairan memungkinkan (Sumawinata, 2004). Umumnya para pedagang pangan pada lebih memilih untuk menggunakan Natrium Siklamat dibanding pemanis alami karena memiliki tingkat kemanisan 30 kali lipat dibanding pemanis alami sehingga pemakaian sedikit sudah menimbulkan rasa manis, tidak memiliki nilai kalori sehingga tidak meningkatkan kandungan gula darah dan tidak menyebabkan rasa pahit seperti kebanyakan pemanis buatan lainnya (Lanywati, 2001). 2. Regulasi Natrium Siklamat disahkan sebagai bahan tambahan pangan oleh Food Drug Administration (FDA) Amerika Serikat pada tahun 1949. Akan tetapi, Kemudian siklamat dilarang penggunaannya di Amerika Serikat tahun 1970 Karena 8 diketahui berisiko menimbulkan kejadian tumor pada hewan uji (Smith, 1991). Organisasi Kesehatan Dunia Food and Agriculture Organization’s Joint Expert Committee on Food Additives (JECFA) Melegalkan penggunaan Natrium Siklamat sebagai bahan tambahan pangan dengan Nilai Acceptable Daily Intake atau konsumsi harian yang dapat diterima Sebesar 11 mg/kg (CCC, 2015). Menurut peraturan Menteri Kesehatan RI No. 722/Menkes/Per/IX/88, kadar maksimum asam siklamat yang diperbolehkan dalam pangan dan minuman berkalori rendah serta yang diperbolehkan bagi penderita Diabetes Melitus adalah 3 g/kg bahan pangan dan minuman. Berdasarkan Peraturan Kepala Badan POM Republik Indonesia Nomor 4 Tahun 2014 tentang batas maksimum penggunaan bahan tambahan pangan pemanis, kadar siklamat yang diperbolehkan dalam produk minuman adalah sebesar 250-350 mg/kg. Menurut WHO (World Health Organization), batas konsumsi harian siklamat yang aman atau ADI (Acceptable Daily Intake) adalah 0-11 mg/kg berat badan serta berdasarkan FAO (Food and Agriculture Organization) adalah 500-3000 ppm (Cahyadi, 2006). 3. Dampak penggunaan siklamat Siklamat dalam penggunaannya sebagai bahan tambahan pangan tidak boleh melebihi batas maksimum yang dipersyaratkan. Seperti yang telah disebutkan sebelumnya, batas maksimum konsumsi siklamat harian (Acceptable Daily Intake) menurut Organisasi Kesehatan Dunia Food and Agriculture Organization’s Joint Expert Committee on Food Additives (JECFA) adalah sebesar 11 mg/kg. Natrium Siklamat jika digunakan secara berlebih dapat menyebabkan gangguan kesehatan. Bakteri organik dalam saluran gastrointestinal dapat mengubah Natrium Siklamat yang dikonsumsi menjadi senyawa cyclohexilamine yang lebih toksik dibanding Natrium Siklamat itu sendiri (Lu, 1995). Dampak kesehatan yang ditimbulkan oleh senyawa Natrium Siklamat yaitu dampak akut dan kronis. 3.1 Dampak akut. Merangsang pertumbuhan kanker kandung kemih, alergi, bingung, diare, hipertensi, impotensi, iritasi, insomnia, kehilangan daya ingat, migrain, sakit kepala, tremor, kebotakan, kanker otak (Nurul, 2015). 3.2 Dampak kronis 9 a. Efek testikular Sejumlah studi toksikologi telah menunjukkan bahwa testis tikus merupakan organ yang paling sensitif terhadap sikloheksilamin, dan Senyawa sikloheksilamine dalam tubuh menyebabkan atropi (penghentian pertumbuhan) testikular. b. Efek kardiovaskular Natrium Siklamat yang dikonsumsi akan bermetabolisme menjadi sikloheksilamin dalam urin. Sebagian senyawa sikloheksilamin akan mengendap di dalam plasma darah dan meningkatkan tekanan darah. c. Kerusakan hati dan ginjal Paparan siklamat secara berulang-ulang dengan dosis tinggi dapat menyebabkan kerusakan hati dan ginjal. d. Kerusakan organ Berdasarkan hasil uji laboratorium pada hewan uji pemberian Natrium Siklamat dalam dosis tinggi dapat menyebabkan tumor kandung kemih, paru, limpa dan menyebabkan kerusakan genetik (Rosdayani, 2018). C. Minuman Serbuk Minuman serbuk merupakan minuman yang diproduksi oleh industri minuman yang dikemas dalam kantong plastik. Minuman ini dapat ditemukan pada toko-toko, warung kecil, dan bahkan dapat ditemukan atau dijual dikaki lima bebas. Pada kemasan dalam bentuk instan tersebut, ada yang mencantumkan komposisinya dan ada yang tidak. Berbagai macam merk ada yang mencantumkan nama pemanis yang digunakan, tetapi tidak dituliskan berapa kadarnya. Siklamat jenis pemanis sintetis yang sering digunakan karena harganya murah dan tingkat kemanisanya lebih tinggi dari pemanis alami (Mulyatmo, 2015). D. Minuman Kemasan Produk minuman kemasan yang beredar saat ini banyak dijumpai dimasyarakat dengan berbagai macam rasa variasi. Semakin meningkatnya tuntunan konsumen terhadap kepraktisan dalam mengonsumsi suatu minuman 10 menjadi penyebabnya. Kemudahan yang diberikan minuman sachet bagi konsumen selain dengan harga yang murah juga terdapat berbagai aroma (Yani, 2014). Minuman kemasan adalah suatu minuman yang dapat diminum langsung ataupun harus melalui proses terlebih dahulu yang dikemas dalam berbagai bentuk kemasan, termasuk kemasan sachet dan gelas. Minuman kemasan yang sering diperjual belikan dipasaran berupa minuman ringan yang terdiri dari dua jenis yaitu minuman berkarbonasi dan tidak berkarbonasi. Bahan tambahan pangan dalam minuman kemasan mempunyai keuntungan untuk menambah dan menjaga cita rasa, tetapi dampaknya berbahaya dalam kesehatan (Yani, 2014). E. Metode Analisis 1. Analisis kualitatif Analisis bahan pemanis sintetis jenis siklamat yang terdapat dalam minuman secara kualitatif dapat dilakukan dengan cara uji pengendapan seperti yang tertera dalam Standar Nasional Indonesia (SNI) No. 01-2893 tahun 1992. Terbentuknya endapan kristal putih dari reaksi antara BaCl2 10 % berfungsi untuk mengendapkan pengotor - pengotor yang ada dalam larutan, seperti adanya ikatan ion karbonat dengan NaNO2 10% berfungsi untuk memutuskan ikatan sulfat dalam siklamat. Ketika ikatan sulfat telah diputus makaion Ba2+ akan bereaksi dengan ion sulfat dan menghasilkan endapan barium sulfat (BaSO4) dalam suasana asam kuat menunjukan adanya asam siklamat, adapun fungsi dari pemanasan untuk menguapkan reaksi dari larutan HCl 10%, larutan BaCl2 10% dan NaNO2 10 % (Sudjadi, 2012). 2. Analisis kuantitatif Analisis kuantitatif siklamat dapat dilakukan dengan salah satu metode yaitu menggunakan spektrofotometri. 2.1 Definisi. Spektrofotometri merupakan alat yang digunakan untuk mengukur adsorben atau transmiten suatu zat tertentu. Zat ini biasanya ada dalam larutan dan waktu dilakukan pengukuran absorbansi zat pelarut tidak terukur. Pembuatan larutan blanko harus dilakukan guna membandingkan absorpsi oleh pelarut murni serta absorpsi oleh larutan sampel. Alat harus diatur sedemikian rupa 11 sehingga transmiten larutan blanko 100% (Wahyuni, 2008). Spektrofotometri sesuai dengan namanya yaitu alat yang terdiri atas spektrofotometer dan fotometer. Spektrofotometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometer sebagai alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau yang diabsorbsi. Spektrofotometer terdiri dari sumber spektrum tampak yang kontinyu, monokromator, sel pengabsorbsi dan alat pengukur perbedaan absorbsi antara sampel dan blanko ataupun pembanding (Khopkar, 1990). Gambar 2. Diagram sistem optik spektrofotometer Berdasarkan diagram pada Gambar 2.2 memperlihatkan unsur-unsur spektrofotometer sinar tunggal, panah yang menuju detektor menunjukkan energi radiasi, sedangkan panah dari detektor menuju ke pembacaan dan pengamatan menunjukkan hubungan listrik. Bagian optik dan bagian listrik dari alat bertemu pada sebuah detektor, suatu transducer yang mengubah energi radiasi ke dalam energi listrik (Day dkk, 2002). 2.2 Prinsip kerja. Prinsip kerja spektroskopi didasarkan adanya interaksi dan energi radiasi elektromagnetik dengan zat kimia. Hasil interaksi tersebut bisa menimbulkan satu atau lebih peristiwa seperti : pemantulan, pembiasan, interferensi, difraksi, penyerapan (absorbsi), flouresensi, fosforiensi dan ionisasi. Peristiwa absorbsi merupakan dasar dari cara spektroskopi karena proses absorbsi berbanding lurus dengan banyaknya zat kimia (Sudarmadji dkk, 2003). 2.3 Bagian-bagian dari spektrofotometer. Bagian-bagian dalam spektrofotometer adalah sebagai berikut : 12 a. Sumber Sumber yang biasa digunakan pada spektroskopi absorbsi adalah lampu wolfram. Arus cahaya tergantung pada tegangan lampu. Lampu hidrogen atau lampu deuterium digunakan untuk sumber pada daerah UV. Keuntungan lampu wolfram yaitu energi radiasi yang dibebaskan tidak bervariasi pada berbagai panjang gelombang. Sumber tenaga radiasi terdiri dari benda yang tereksitasi hingga ke tingkat tenaga yang tinggi oleh sumber listrik bertegangan tinggi oleh pemanasan listrik. Sumber tenaga radiasi yang ideal untuk pengukuran absorbansi harus menghasilkan spektrum kontinyu dengan intensitas yang seragam pada keseluruhan kisaran panjang gelombang tertentu. Sumber radiasi ada 2 yaitu sumber radiasi UV dan sumber radiasi terlihat (Wahyuni, 2008). b. Monokromator Monokromator adalah bagian spektrofotometer yang digunakan untuk memperoleh sumber sinar yang monokromatis. Alat ini dapat berupa prisma ataupun grating. Terdapat 2 tipe prisma, yaitu susunan Cornudan dan susunan Littrow. Sumber radiasi yang umum digunakan menghasilkan radiasi sinyal kontinyu dalam kisaran panjang gelombang yang lebar, dalam radiasi kontinyu dalam kisaran panjang gelombang yang lebar, dalam spektrofotometri radiasi polikromatik harus diubah menjadi radiasi monokromatik. Ada 2 jenis alat yang digunakan untuk menguraikan radiasi polikromatik menjadi radiasi monokromatik, yaitu penyaringan dan monokromator. Penyaringan dibuat dari benda khusus yang hanya meneruskan radiasi pada daerah panjang gelombang tertentu yang dapat menyerap radiasi dari panjang gelombang lain. Monokromator adalah serangkaian alat optik yang menguraikan radiasi polikromatik menjadi jalur-jalur yang efektif atau panjang gelombang tunggalnya dan memisahkan panjang gelombang tersebut menjadi jalur yang sangat sempit (Day dkk, 2002). c. Sel absorbsi Sampel yang akan dianalisis pada daerah ultraviolet atau daerah sinar terlihat biasanya berupa larutan yang ditempatkan dalam sel atau kuvet. 13 Pengukuran di daerah tampak kuvet kaca atau kuvet kaca corex dapat digunakan, tetapi untuk pengukuran pada daerah UV harus menggunakan sel kuarsa karena gelas tidak tembus cahaya pada daerah ini. Umumnya tebal kuvet adalah 10 mm. d. Detektor Peranan detektor penerima yaitu memberikan respon terhadap cahaya pada berbagai panjang gelombang. Detektor menyerap energi foton yang mengenainya dan mengubah energi tersebut untuk diukur secara kuantitatif seperti sebagai arus listrik atau perubahan-perubahan panas. Detektor kebanyakan menghasilkan sinar listrik yang dapat mengakibatkan meter atau pencatat. Persyaratan yang penting untuk detektor yaitu sensitifitas waktu respon yang pendek, stabilitasnya yang panjang dan lama untuk menjalin respon secara kuantitatif, sinyal elektronik yang mudah diperjelas. Detektor yang digunakan dalam daerah ultraviolet tampak disebut detektor fotolistrik (Day dkk, 2002). e. Pencatat arus listrik Alat ini merupakan alat untuk mencatat besar arus listrik. Alat ini diaktifkan oleh isyarat listrik yang dihasilkan oleh detektor. 2.4 Analisis secara spektrofotometri. Metode analisis menggunakan instrumen spektrofotometer dapat digunakan secara kualitatif dan kuantitatif. a. Analisis kualitatif Analisis kualitatif dibaca pada daerah ultraviolet dan cahaya tampak yaitu dengan menentukan panjang gelombang maksimum dan minimum atau dengan mengukur rasio absorbansi pada panjang gelombang tertentu dari larutan uji dan larutan baku (Yustisia, 2012). b. Analisis kuantitatif Pembuatan kurva absorbansi, kurva kalibrasi, dan pengenceran sampel merupakan langkah-langkah yang harus diperhatikan. Pembuatan kurva absorbansi bertujuan untuk memperoleh panjang gelombang maksimum dari senyawa tersebut. Panjang gelombang perlu dicari karena akan digunakan untuk penetapan kadar (Sanjaya, 2009). 14 2.5 Hukum lambert-beer. Menurut Hukum Lambert, absorbansi berbanding lurus terhadap ketebalan sel yang disinari. Menurut Beer, absorbansi berbanding lurus dengan konsentrasi. Kedua pernyataan ini dapat dijadikan satu dalam hukum Lambert – Beer, sehingga diperoleh bahwa absorbansi berbanding lurus terhadap konsentrasi dan ketebalan sel, yang dapat ditulis dengan persamaan sebagai berikut : A = a.b.c (g/liter) atau A = ε.b.c (mol/liter) Keterangan : A = absorbansi a = absorbtivitas b = ketebalan sel c = konsentrasi ε = absorptivitas mola Hukum Lambert-Beer menjadi dasar aspek kuantitatif spektrofotometri dimana konsentrasi dapat dihitung berdasarkan rumus tersebut. Absorptivitas merupakan suatu tetapan dan spesifik untuk molekul pada panjang gelombang dan pelarut tertentu (Dongoran, 2011). 2.6 Rentang pembacaan absorbansi dan transmitan. Analisis dengan spektrofotometri UV-Vis selalu melibatkan pembacaan absorbansi radiasi elektromagnetik oleh molekul atau radiasi elektromagnetik yang diteruskan. Keduanya dikenal sebagai absorbansi (A) tanpa satuan dan transmitan dengan satuan persen (%T). Persoalannya adalah bagaimana membaca rentang A dan T yang memenuhi syarat sehingga akan meminimalisir galat sistematik (galat individual). Untuk pembacaan absorbansi atau transmitan pada daerah yang terbatas, kesalahan penentuan kadar hasil analisis dinyatakan sebagai : ∆ / = 0,4343 / log . ∆T / C adalah konsentrasi zat sedangkan ∆T adalah harga rentang skala transmitan terkecil dari alat yang masih dapat terbaca pada analisis dengan metode spektrofotometri UV-Vis. Harga ∆T untuk setiap spektrofotometri UV-Vis biasanya bervariasi 0,2-1 % dan selalu dicantumkan sebagai spesifikasi instrumen. Rumus tersebut dapat diperhitungkan kesalahan pembacaan A atau T pada analisis 15 dengan metode spektrofotometri UV-Vis. Pembacaan A berkisar diantara rentang (0,2-0,8) atau %T (15%-65%) akan memberikan persentase kesalahan analisis yang dapat diterima (0,5-1%) untuk ∆T = 1 % (Mulja M & Suharman, 1995). 2.7 Tahapan-tahapan analisis secara spektrofotometri. Tahap- tahap penggunaan spektrofotometer dalam suatu analisis adalah sebagai berikut : menyiapkan larutan yang akan di analisis yaitu larutan uji dan larutan baku serta menentukan operating time. Operating time adalah waktu dimana saat larutan yang diamati dalam keadaan stabil, pada saat itu dilakukan pembacaan absorbansi pada spektrofotometer. Cara menentukan operating time dengan membaca absorbansi larutan yang diperiksa pada tiap menit pada panjang gelombang yang ditetapkan literatur, menentukan panjang gelombang maksimum. Panjang gelombang maksimum adalah panjang gelombang yang memberikan absorbansi maksimal. Tahapan yang terakhir adalah membuat kurva baku (Dep.Kes, 1988). 2.8 Faktor-faktor yang mempengaruhi spektrum absorbansi. Faktor-faktor yang mempengaruhi spektrum absorbansi adalah jenis pelarut, pH, kadar larutan, tebal kuvet dan lebar celah. Jenis pelarut ada yang polar dan non polar. Pemilihan pelarut yang digunakan dalam spektrofotometer UV sangat penting, pelarut tidak boleh mengabsorbsi cahaya pada daerah panjang gelombang dimana dilakukan pengukuran sampel. Faktor yang kedua adalah pH larutan, senyawa organik ada yang bersifat basa (mengandung gugus –NH2) dan ada pula yang bersifat asam (asam karboksil, penol). Senyawa ini sering kali dilarutkan dengan menggunakan pelarut yang bersifat asam (HCl 0,1N) atau basa (NaOH 0,1N), maka pembuatan pelarut harus diperhitungkan secara benar jumLah pelarut yang diperlukan baik itu sebagai pembilas, pencuci atau pengencer. Selain pH, kadar larutan juga dapat mempengaruhi spektrum absorbansi karena konsentrasi yang tinggi akan terjadi polikromatik yang menyebabkan kadar berubah. Kuvet dengan ketebalan berbeda akan memberikan spektrofotometri absorbansi yang berbeda. Begitu pula dengan lebar celah, lebar celah makin lebar makin lebar pula absorbansi cahaya, makin polikromatik, resolusi dan puncak-puncak spektrum semakin tidak sempurna (Day dkk, 2002). 16 2.9 Hal-hal yang harus diperhatikan dalam analisis. Ada beberapa hal yang harus diperhatikan dalam analisis dengan spektrofotometri UV-Vis, terutama untuk senyawa yang semula tidak berwarna yang akan dianalisis dengan spektrofotometri visible, karena senyawa tersebut harus diubah terlebih dahulu menjadi senyawa yang berwarna. Berikut adalah tahapan-tahapan yang harus diperhatikan menurut Gandjar (2007) : a. Pembentukan molekul yang dapat menyerap sinar uv-vis. Hal ini perlu dilakukan jika senyawa yang dianalisis tidak menyerap pada daerah tersebut. Cara yang digunakan adalah dengan merubah menjadi senyawa lain atau direaksikan dengan pereaksi tertentu. Pereaksi yang digunakan harus memenuhi beberapa persyaratan yaitu : reaksinya selektif dan sensitif, reaksinya cepat, kuantitatif dan reprodusibel (konstan), hasil reaksi stabil dalam jangka waktu yang lama. b. Waktu operasional (Operating Time). Penentuan operating time digunakan untuk pengukuran hasil reaksi atau pembentukan warna. Tujuannya adalah untuk mengetahui waktu pengukuran yang stabil. Waktu operasional ditentukan dengan mengukur hubungan antara waktu pengukuran dengan absorbansi larutan. c. Pemilihan panjang gelombang maksimal. Panjang gelombang yang digunakan untuk analisis kuantitatif adalah panjang gelombang yang mempunyai absorbansi maksimal. Pemilihan panjang gelombang maksimum, dilakukan dengan membuat kurva hubungan antara absorbansi dengan panjang gelombang dari larutan kurva baku yang dibuat. d. Pembuatan kurva baku. Pembuatan larutan baku dilakukan dengan cara, dibuat seri larutan baku dari zat yang akan dianalisis dengan berbagai konsentrasi. Masingmasing absorbansi larutan dengan berbagai konsentrasi diukur, kemudian dibuat kurva yang menunjukkan hubungan antara absorbansi (y) dengan konsentrasi (x). 17 e. Pembacaan absorbansi sampel Absorbansi yang terbaca pada spektrofotometri hendaknya antara 0,2 sampai 0,8 atau 15% sampai 70% jika dibaca sebagai transmitan. Anjuran ini berdasarkan anggapan bahwa kesalahan dalam pembacaan T adalah 0,005 atau 0,5% (Gandjar & Rohman, 2007). F. Landasan Teori Minuman serbuk merupakan minuman yang diproduksi oleh industri minuman yang dikemas dalam kantong plastik. Minuman ini dapat ditemukan pada toko-toko, warung kecil, dan bahkan dapat ditemukan atau dijual dikaki lima bebas. Pada kemasan dalam bentuk instan tersebut, ada yang mencantumkan komposisinya dan ada yang tidak. Berbagai macam merk ada yang mencantumkan nama pemanis yang digunakan, tetapi tidak dituliskan berapa kadarnya. Siklamat jenis pemanis sintetis yang sering digunakan karena harganya murah dan tingkat kemanisanya lebih tinggi dari pemanis alami (Mulyatmo, 2015). Natrium Siklamat sebagai pemanis rendah kalori bermanfaat untuk mengontrol berat badan, mengelola diabetes, atau membantu mencegah kerusakan gigi (Nurul, 2015). Siklamat biasanya terdapat dalam bentuk garam natrium dari asam siklamat dengan rumus molekul C6H11NHSO3Na. Natrium Siklohekssilsulfamat atau sering disebut Natrium Siklamat merupakan nama lain dari siklamat. Assugrin, sucaryl, atau sucrose dikenal sebagai nama dagang siklamat. Pemanis ini mempunyai rasa manis ± 30 kali sukrosa, bersifat mudah larut dalam air. Pemanis ini bersifat tahan panas, sehingga sering digunakan dalam pangan yang diproses dalam suhu tinggi, misalnya pangan dalam kaleng (Cahyadi, 2009). Identifikasi adanya pemanis siklamat secara kualitatif dapat dilakukan dengan cara uji reaksi pengendapan. Sampel direaksikan dengan reagen tertentu larutan HCl 10%, BaCl2 10%, dan NaNO2 10%. Menurut Standar Nasional Indonesia (SNI) nomor 01-2893-1992 dinyatakan positif mengandung siklamat dengan terbentuknya endapan kristal putih. Penetapan kadar secara kuantitatif dilakukan menggunakan metode spektrofotometer UV-Vis pada rentang panjang 18 gelombang maksimum yang telah didapatkan. Pemilihan metode ini dikarenakan mempunyai beberapa kelebihan antara lain cara penggunaannya mudah dan sederhana, cukup selektif, dapat menganalisa larutan yang konsentarsinya kecil, sedangkan kelemahan metode ini karena sifatnya multi unsur sehingga faktor interferensi dari unsur-unsur lain sangat berpengaruh. Oleh karena itu, diperlukan perlakuan awal terhadap sampel (Padmaningrum dan Siti, 2015) Analisis Natrium Siklamat pada produk olahan kelapa di swalayan Kota Manado menggunakan metode Spektrofotometri UV dilakukan oleh Putri Nindita R, dkk (2017). Identifikasi Siklamat pada minuman jajanan dikawasan pendidikan Kota Palangka Raya dilakukan oleh Rudi Hartono (2014). Analisis Siklamat pada minuman serbuk dan kemasan dengan metode Spektrofotometri Uv-Vis oleh Yuniar Kasih S. (2019). Analisis pemanis Natrium Siklamat pada minuman jajanan yang dijual di daerah sekitar kampus Universitas Sam Ratulangi Manado oleh Trisna M. Manoppo, dkk (2019) diukur pada panjang gelombang 268 nm dan oleh Putri Nindita R, dkk (2017) juga dilakukan pada panjang gelombang 268 nm. G. Hipotesis Berdasarkan landasan teori tersebut maka disusun hipotesis pada penelitian ini adalah : 1. Sampel minuman serbuk instan yang beredar di Kelurahan Banaran Kabupaten Boyolali mengandung pemanis buatan Na-siklamat. 2. Kadar Na-siklamat dalam sampel minuman serbuk instan yang dapat dianalisis secara kuantitatif menggunakan spektrofotometri UV-Vis 3. Kadar Na-siklamat dalam sampel sesuai dengan Permenkes R1 No. 722/Menkes/Per/IX/1988 tentang batas maksimum penggunaan bahan tambahan pangan pemanis. BAB III METODE PENELITIAN A. Populasi dan Sampel Populasi dari penelitian ini adalah minuman serbuk instan yang beredar di Kelurahan Banaran Boyolali yang berjumlah 20 minuman serbuk instan diambil dari 10 pedagang. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah minuman serbuk instan yang dilakukan pengambilan sampel secara purposive sampling yaitu dengan mengambil berdasarkan kriteria sampel. Berdasarkan kriteria tersebut, yaitu tidak tertulis adanya Na-siklamat pada etiket kemasan terdapat 8 minuman serbuk instan yang menjadi sampel. B. Variabel Penelitian 1. Identifkasi variabel utama Variabel utama dalam penelitian ini memuat tentang identifikasi dan penetapan kadar Na-siklamat dalam minuman serbuk instan secara Spektrofotometri UV– Vis. 2. Klasifikasi variabel utama Variabel bebas adalah variabel yang mempengaruhi atau menyebabkan terjadinya perubahan. Variabel bebas dalam penelitian ini adalah minuman serbuk instan. Variabel terikat adalah variabel yang dipengaruhi atau yang menjadi akibat karena adanya variabel bebas. Variabel terikat dalam penelitian ini adalah kadar natrium siklamat dalam minuman serbuk instan. 3. Definisi operasional variabel utama Definisi operasional variabel utama adalah definisi yang didasarkan atas sifat-sifat hal yang dapat diamati dan diperlukan bagi peneliti lain yang akan penguji kembali penelitian ini. Pada penelitian ini, definisi operasional variabel utama adalah minuman serbuk instan yang mengandung Na-siklamat. Minuman 19 20 serbuk yang dipergunakan berjumlah 8 jenis yang telah memenuhi kriteria penelitian diambil dari Kelurahan Banaran, Boyolali. Metode yang digunakan untuk analisis adanya Na-Siklamat dilakukan secara kualitatif dengan uji pengendapan dan kuantitatif spektrofotometri UV-Vis dengan panjang gelombang yang sesuai. C. Alat dan bahan Alat yang digunakan meliputi peralatan gelas, pemanas Hot plate, Pipet ukur, Pipet volume Neraca analitik, Kertas saring Whatman 42 dan Spektrofotometer UV-VIS 1800. Bahan yang digunakan adalah Sampel minuman serbuk instan, Bahan baku siklamat, Larutan HCl 10 % , Larutan BaCl2 10%, Larutan NaNO2 10%, larutan H2SO4 30%, larutan natrium hipoklorit 1% klor bebas, larutan NaOH 10 N, asam asetat, etil asetat, asam sulfat pekat, NaOH 0,5 N, aquades dan pelarut sikloheksana. D. Jalannya penelitian 1. Preparasi sampel Ditimbang secara seksama 5 g minuman sampel masukan beaker dan tambah 50 ml aquadest kemudian dimasukkan ke dalam corong pisah pertama, ditambahkan 2,5 mL asam sulfat pekat. Setelah dingin, ditambahkan 50 mL etil asetat, dikocok selama 2 menit. Dipisahkan lapisan etil esetat, kemudian dimasukkan ke dalam corong pisah ke-II. Dikocok 3 kali dengan 15 mL air, dikumpulkan lapisan air, dimasukkan ke dalam corong pisah ke-III, ditambahkan 1 mL natrium hidroksida 10 N, 5 mL sikloheksan dan dikocok selama 1 menit. Dipisahkan lapisan air dan dimasukkan ke dalam corong pisah ke-IV, ditambahkan 2,5 mL asam sulfat 30 %, 5 mL sikloheksan, 5 mL larutan klorit 1% dan dikocok selama 2 menit. Lapisan sikloheksan akan berwarna kuning kehijauan. Lapisan air dibuang, lapisansikloheksan ditambahkan 25 mL NaOH 0,5 M, dikocok dipisahkan dan diambil lapisan bawah. Lapisan bahwa dibuang, kemudian dibilas dengan 25 ml aquades. Lapisan atas dibaca absorbansinya. 21 2. Uji kualitatif Dihomogenkan sampel dengan cara membalik-balikkan kemasan ke atas dan kebawah. Dipipet 100 mL sampel, lalu dimasukkan dalam gelas kimia dan ditambahkan 10 mL HCl 10 % serta 10 mL larutan BaCl2 10 %. Larutan didiamkan selama 30 menit kemudian disaring dengan kertas Whatman 42, hasil setelah disaring, larutan akan menjadi jernih kemudian ditambahkan 10 ml NaNO2 10 %, dan dipanaskan di atas pemanas Hot plate. Larutan akan timbul endapan putih dari BaSO4 apabila positif mengandung siklamat. 3. Uji kuantitatif 1.1. Penetapan panjang gelombang. Ditimbang 0,25 gram baku Na- siklamat kemudian dimasukkan ke dalam labu takar 250 ml, ditambahkan aquades hingga tanda batas. Diperoleh konsentrasi Na-siklamat pada larutan induk baku adalah 1.000 mg/L. Larutan induk baku tersebut diencerkan sampai didapat konsentrasi 800 mg/L dengan memipet 8 ml dimasukkan ke dalam labu takar 10 ml dan ditambahkan aquades sampai tanda batas kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang 200 - 400 nm. 1.2. Penentuan operating time (OT). Dibuat larutan baku konsentrasi 800 ppm dengan dipipet 8 mL larutan induk baku dimasukkan ke dalam labu takar 10 mL dan ditambahkan aquades sampai tanda batas kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum mulai menit ke 0 sampai menit ke 30 dengan interval waktu 1 menit. 1.3. Pembuatan kurva kalibrasi. Dipipet larutan baku siklamat 1000 ppm masing-masing 7,75 ml; 8 ml; 8,25 ml; 8,5 ml; 8,75 ml; 9 ml dengan konsentrasi 775, 800, 825, 850, 875, dan 900 ppm dan diencerkan aquades sampai tanda batas. Larutan tersebut dimasukan kedalam corong pisah pertama, ditambahkan 2,5 ml H2SO4 pekat dan didinginkan, setelah dingin ditambahkan 50 ml etil asetat dikocok selama 2 menit lapisan bawah dibuang. Lapisan etil asetat dikocok 3 kali, setiap kali dengan 15 ml aquadest. Lapisan air dikumpulkan dan dimasukan kedalam corong pisah ke II, tambahkan 1 ml NaOH 10 M dan 5 ml 22 sikloheksane dan dikocok selama 1 menit. Lapisan atas dibuang, lapisan air dimasukan kedalam corong pisah ke III, ditambahkan 2,5 ml H2SO4 30%, 5 ml sikloheksane dan 5 ml larutan hipoklorit yang mengandung 1% klor bebas dikocok selama 2 menit. Lapisan sikloheksane (lapisan atas) akan berwarna kuning kehijauan bila tidak berwarna tambahkan lagi larutan hipoklorit kurang lebih 5 ml lapisan bawah dibuang. Lapisan sikloheksane (lapisan atas) dibilas dengan 25 ml NaOH 0,5 M kemudian dibilas lagi dengan 25 ml aquades. Lapisan bawah dibuang, lapisan atas diukur absorbansinya pada panjang gelombang 269 nm. 1.4. Pembuatan larutan blanko. Dipipet 50 ml air, dimasukan kedalam corong pisah pertama, ditambahkan 2,5 ml H2SO4 pekat dan didinginkan, setelah dingin ditambahkan 50 ml etil asetat dikocok selama 2 menit lapisan bawah dibuang. Lapisan etil asetat dikocok 3 kali, setiap kali dengan 15 ml aquadest. Lapisan air dikumpulkan dan dimasukan kedalam corong pisah ke II, tambahkan 1 ml NaOH 10 M dan 5 ml sikloheksane dan dikocok selama 1 menit. Lapisan atas dibuang, lapisan air dimasukan kedalam corong pisah ke III, ditambahkan 2,5 ml H2SO4 30%, 5 ml sikloheksane dan 5 ml larutan hipoklorit yang mengandung 1% klor bebas dikocok selama 2 menit. Lapisan sikloheksane (lapisan atas) akan berwarna kuning kehijauan bila tidak berwarna tambahkan lagi larutan hipoklorit kurang lebih 5 ml lapisan bawah dibuang. Lapisan sikloheksane (lapisan atas) dibilas dengan 25 ml NaOH 0,5 M kemudian dibilas lagi dengan 25 ml aquades. Lapisan bawah dibuang, lapisan atas digunakan sebagai larutan blanko. 1.5. Penetapan kadar Na-siklamat pada sampel. Larutan sampel hasil ekstraksi diukur absorbansinya menggunakan spektrofotometer UV – Vis pada absorbansinya operating time dan panjang gelombang yang didapat. E. Metode Analisis Hasil Metode yang digunakan pada analisis pemanis buatan Na-siklamat dalam minuman serbuk instan secara spektrofotometri UV - Vis ini, menggunakan pembacaan absorbansi sampel (y) yang kemudian dicari regresi liniernya (a dan b) menggunakan hubungan absorbansi sampel dengan konsentrasi mg/L. Kadar 23 siklamat dalam sampel minuman serbuk instan akan didapatkan dalam mg/L. Regresi linier : Y = a + bx Keterangan : Y = absorbansi yang diperoleh a = konstanta b = koefisien regresi (kemiringan) x = konsentrasi sampel Keterangan : FB = faktor pembuatan FP = faktor pengenceran V = volume sampel BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN A. Preparasi Sampel Metode analisis yang digunakan untuk menetapkan kadar Na-siklamat pada penelitian kali ini dalam sampel minuman serbuk instan dilakukan secara kualitatif dan kuantitatif. Analisis kualitatif dilakukan dengan metode uji pengendapan dan kuantitatif secara spektrofotometri UV-Vis. Sebelum dilakukan pengujian terlebih dahulu yang wajib dilakukan yaitu preparasi sampel uji dengan cara ekstraksi cair-cair secara kontinyu. Sampel terlebih dahulu direaksikan dengan H2SO4 dengan tujuan untuk mengubah natrium siklamat menjadi asam siklamat. Larutan asam siklamat kemudian diekstrak dengan etil asetat membentuk asam siklamat dalam fase organik dan di ekstrak kembali dengan aquades. Hasil ekstrak ditambahkan NaOH dan sikloheksan, diambil lapisan air yang jernih dan tidak berwarna kemudian ditambahkan H2SO4, siklohekan, dan hipoklorit sehingga membentuk dua lapisan yaitu lapisan atas (lapisan sikloheksan jernih berwarna sedikit kuning) dan lapisan bawah (jernih tidak berwarna). Lapisan sikloheksan diambil dan dicuci dengan NaOH dan dibilas lagi dengan aquades. Sikloheksan berfungsi sebagai pengekstrak siklamat dan hasil ekstraksi tersebut dilakukan pengujian kualitatif dan kuantitatif (Putri.dkk, 2017) B. Analisis Kualitatif Analisis kualitatif pada penelitian ini menggunakan metode pengendapan. Analisis kualitatif digunakan untuk mengetahui ada tidaknya kandungan natrium siklamat dalam sampel dengan membandingkan hasil reaksi yang terbentuk antara sampel dengan standar. Reagen yang digunakan dalam analisis kualitatif ini adalah HCl 10%, BaCl2 10%, dan NaNO3 10%. Analisis kualitatif dilakukan dengan cara mereaksikan sampel dengan reagen tersebut dan standar yang telah diperlakukan dengan cara yang sama. Hasil dari analisis kualitatif dapat dilihat pada tabel 1. 24 25 Tabel 1. Hasil uji kualitatif Sampel Hasil Pengamatan Keterangan A Tidak terjadi Endapan Negatif B Endapan putih Positif C Endapan putih Positif D Tidak terjadi endapan Negatif E Endapan putih Positif F Tidak terjadi endapan Negatif G Endapan putih Positif H Tidak terjadi endapan Negatif Standar Na-siklamat Endapan putih Positif Berdasarkan hasil analisis kualitatif pada tabel diatas, dapat dilihat bahwa keempat sampel dinyatakan positif mengandung pemanis natrium siklamat dan keempat lainya negatif. Hasil uji kualitatif yang terjadi dapat dilihat pada lampiran 3. Analisis kualitatif Na-siklamat dilakukan dengan penambahan reagen pereaksi yaitu HCl 10%, BaCl2 10%, dan NaNO2 10% masing-masing 10 ml. Pertama-tama sampel yang telah ditara dilarutkan dengan aquades bertujuan untuk menghidrolisis Na-siklamat menjadi ion Na+ dan ion siklamat sehingga sampel akan lebih mudah bereaksi dengan reagen yang akan direaksikan. Selanjutnya dilakukan penambahan HCl 10% dan BaCl2 10% masing-masing sejumlah 10 ml terjadi kekeruhan. Hal ini menunjukan semua sampel terdapat pengotor, biarkan selama 30 menit. Untuk menghilangkan ion pengotor sampel disaring dengan kertas saring whatman 42. Hasil saringan ditambahkan 10 ml NaNO2 10% terjadi perubahan menghasilkan larutan berbau dan berbuih yang telah dipanaskan dan didiamkan selama 20-30 menit akan membentuk endapan putih. Endapan putih yang terbentuk ini sukar larut dalam air. Penambahan HCl 10% dalam sampel berfungsi untuk mengasamkan larutan. Larutan dibuat dalam keadaan asam agar reaksi yang akan terjadi dapat lebih mudah bereaksi. Penambahan BaCl2 10% berfungsi untuk mengendapkan pengotor-pengotor yang ada dalam larutan, seperti adanya ion karbonat. 26 Penambahan NaNO2 10% berfungsi untuk memutuskan ikatan sulfat dalam siklamat. Ketika ikatan sulfat telah diputus maka ion Ba2+ akan bereaksi dengan ion sulfat dan menghasilkan endapan barium sulfat (BaSO4). Gas nitrogen yang dihasilkan dari reaksi dapat diketahui dengan bau yang menyengat ketika proses pengujian (Winarno, 1994). Gambar 3. Reaksi pembentukan endapan barium sulfat C. Penentuan Panjang Gelombang Maksimal Penentuan panjang gelombang maksimum bertujuan untuk mengetahui daerah serapan berapa zat yang dapat dibaca oleh spektrofotometri UV secara optimum dihasilkan berupa nilai absorbansi dari suatu larutan uji. Natrium siklamat dilarutkan dalam aquades dengan konsentrasi 800 ppm diukur absorbansinya pada daerah ultraviolet menggunakan spektrofotometri pada rentang panjang gelombang 200-400 nm. Hasil penentuan panjang gelombang natrium siklamat dapat dilihat pada gambar berikut Gambar 4. Kurva panjang gelombang maksimum Berdasarkan hasil kurva absorbansi diatas, didapat panjang gelombang maksimum natrium siklamat yaitu 269 nm pada absorbansi 0,3320. Panjang 27 gelombang berdasarkan literatur adalah 268 nm yang berarti terjadi pergeseran absorban ke daerah panjang gelombang yang lebih panjang. Hasil ini masih dalam kisaran daerah serapan optimum natrium siklamat yaitu 220-300 nm (Manopo.dkk, 2019). Sehingga dapat dikatakan hasil dari pengukuran panjang gelombang maksimum ini memenuhi syarat penggunaannya untuk analisis. Panjang gelombang maksimum yang mengalami perbedaan dari literatur dikarenakan adanya beberapa faktor yang mempengaruhi pembacaan absorbansi diantaranya adalah alat, pelarut, kondisi analisis yang berbeda, dan bisa juga kesalahan dari seorang analisnya dalam melakukan pengerjaan. Hasil panjang gelombang maksimum dilihat pada lampiran ke 4. D. Penentuan Operating Time Penentuan operating time bertujuan untuk mengetahui pada menit berapa serapan mulai stabil sehingga dapat diketahui kapan waktu yang tepat untuk pembacaan absorbansi sampel. Penentuan operating time digunakan larutan standar Na-Siklamat 800 ppm dilakukan dengan cara mengukur absorbansi pada lamda maksimal 269 nm. Operating time ditentukan dalam rentang waktu 0 – 30 menit sampai mendapatkan absorbansi yang stabil. Gambar 5. Kurva operating time Berdasarkan gambar di atas, sejak menit ke-9 sampai menit ke-15 menunjukan waktu pengukuran yang stabil dengan hasil absorbansi 0,48. Hal ini menunjukkan bahwa berdasarkan kestabilan waktu yang optimal untuk pembacaan 28 absorbansi adalah dimulai dari menit ke-9 sampai menit ke-15. Hasil operating time yang didapatkan hanya 6 menit maka pengukuran larutan kurva baku dan sampel harus dilakukan secara cepat dan tepat supaya mendapatkan hasil yang maksimal. Hasil operating time dilihat pada lampiran ke 5. E. Penentuan Kurva Baku Untuk melakukan validasi metode analisis maka hal pertama yang dilakukan adalah membuat kurva baku. Kurva baku diperoleh dengan cara membuat 6 konsentrasi yaitu 775, 800, 825, 850, 875, dan 900 ppm dari larutan standar 1000 ppm. Hasil absorbansi dari ke enam seri konsentrasi dapat dilihat pada tabel 2. Tabel 2. Data hasil kurva baku nantrium siklamat Konsentrasi (mg/L) 775 ppm 800 ppm 825 ppm 850 ppm 875 ppm 900 ppm Absorbansi 0,240 0,321 0,417 0,484 0,551 0,641 Dari data diatas kita dapat, kita dapat menentukan uji linieritas dengan melihat koefisien korelasi (r) pada persamaan linear y = a+bx. Hasil kurva kalibrasi dan persamaan regresi liner dapat dilihat pada gambar 5. Gambar 6. Grafik kurva kalibrasi natrium siklamat Persamaan regresi linear yang diperoleh adalah y = -2,1972 + 0,0032x dengan koefisien korelasi (r) = 0,999. Nilai koefisien korelasi menyatakan korelasi antara absorbansi (y) dan konsentrasi (x) sangat kuat nilai koefisien korelasi (r) 29 yang mendekati 1 menyatakan hubungan linear antara konsentrasi dengan absorbansi yang dihasilkan sangat baik (Sharger, 1985). Hasil perhitungan kurva kalibrasi dapat dilihat pada lampiran ke 3. F. Penentuan kadar Na-siklamat dalam Sampel Berdasarkan metode spektrofotometri UV, penentuan kadar Na-siklamat pada sampel minuman serbuk instan yang positif menggunakan persamaan regresi linear y = -2,1972 + 0,0032x. Berikut adalah hasil penetapan kadar Na-siklamat pada sampel minuman serbuk instan yang positif tertera pada tabel 3 berikut Tabel 3. Kadar Na-siklamat dalam sampel Sampel B C E G B1 B2 B3 C1 C2 C3 E1 E2 E3 G1 G2 G3 Kadar Nasiklamat (g/Kg) 1,6714 1,6594 1,6712 1,7648 1,7614 1,7720 1,5364 1,5394 1,5316 1,6220 1,6263 1,6200 Kadar rata-rata ± SD 1,6673 ± 0,27x10-4 1,7661 ± 0,17 x 10-4 1,5358 ± 0,06 x 10-4 1,6228 ± 0,09 x 10-4 Kadar asam siklamat (g/Kg) 1,4884 1,4777 1,4882 1,5716 1,5685 1,578 1,3682 1,3708 1,3639 1,4444 1,4482 1,4426 Berdasarkan tabel diatas dapat diketahui dari ke empat sampel yang telah dianalisis yaitu kadar sampel B sebesar 1,6673 ± 0,27x10-4 g/Kg; sampel C sebesar 1,7661 ± 0,17 x 10-4 g/Kg; sampel E sebesar1,5358 ± 0,06 x 10-4 g/Kg; dan sampel G sebesar 1,6228 ± 0,09 x 10-4 g/Kg. Kadar semua sampel yang dianalisis masih memenuhi persyaratan kadar Na-siklamat yang tercantum dalam Permenkes R1 No. 722 tidak melebihi batas maksimum penggunaan sebesar 3g/Kg atau setara dengan 3000 ppm, dengan demikian masih diperbolehkan untuk beredar dan aman untuk dikonsumsi oleh konsumen. Data dan perhitungan kadar sampel dapat dilihat pada bagian lampiran 4. 30 Penggunaan pemanis buatan perlu diwaspadai karena dalam takaran yang berlebih dapat menimbulkan efek samping yang dapat merugikan kesehatan manusia. Konsumsi siklamat dalam dosis yang lebih akan mengakibatkan kanker kandung kemih. Selain itu juga dapat menyebabkan tumor hati, limfa dan paru (Manopo.dkk, 2019). BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan 1. Sampel minuman serbuk instan yang beredar di Kelurahan Banaran Boyolali empat sampel positif mengandung pemanis buatan Na-siklamat. 2. Kadar sampel B sebesar 1,6673 ± 0,27x10-4 g/Kg; sampel C sebesar 1,7661 ± 0,17 x 10-4 g/Kg; sampel E sebesar1,5358 ± 0,06 x 10-4 g/Kg; dan sampel G sebesar 1,6228 ± 0,09 x 10-4 g/Kg 3. Kadar Na-siklamat pada sampel minuman serbuk instan tidak melebihi batas maksimum yang ditetapkan dalam Permenkes R1 No. 722/ Menkes /Per/IX/1988 tentang Bahan Tambahan Pangan Pemanis yaitu sebesar 3g/Kg. B. Saran 1. Disarankan untuk penelitian selanjutnya agar melakukan analisis pada pemanis lain seperti Sakarin, Aspartam, Neotam, Asesulfam. 2. Untuk penelitian selanjutnya agar dapat menentukan kadar pemanis yang lain dengan metode lain seperti KCKT. 3. Disarankan untuk peneliti selanjutnya agar melakukan analisis pada sampel lain seperti pada selai , saos tomat, kecap, dan jamu. 31 DAFTAR PUSTAKA BPOM RI. Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat Dan Makanan Republik Indonesia Nomor 4 Tahun 2014 Tentang Batas Maksimum Penggunaan Bahan Bahan Tambahan Pangan Pemanis. Jakarata: BPOM; 2014. 1-63 hal. Cahyadi W. Analisis & Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan. Edisi II. Rachmatika R, editor. Jakarta:Bumi Aksara: PT Bumi Aksara; 2009. 78-81 hal Day Jr., R.A., dan Underwood, A.L. 2002. Analisis Kimia Kuantitatif. Edisi Keenam. Jakarta : Erlangga. Devitria R, Sepriyani H. Identifikasi Natrium Siklamat Pada Minuman Sirup Yang Dijual Dilima SD Kecamatan Suka Jadi Di Pekan Baru. J Anal Kesehat Klin Sains. 2018;6(1):1–7. Gandjar IG, Rohman A. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar; 2007. 240-255 hal. Handayani T, Agustina A. Penetapan Kadar Pemanis Buatan (Na-Siklamat) Pada Minuman Serbuk Instan Dengan Metode Alkalimetri. J Farm Sains dan Prakt. 2015;I(1):1–6. Hadiana AB. Identifikasi Siklamat Pada Pangan Jajanan Anak Sekolah Dan Keluhan Kesehatan. J Kesehat Lingkung. 2018;10(2):191–200. Indonesia DKR. Farmakope Indonesia Edisi Ketiga 1979. Ketiga. Jakarata; 1979. Hadju.2012. “Analisis Zat Pemanis Buatan Pada Minuman Jajanan Yang Djual Di Pasar Tradisional Kota Manado.”Jurnal Ilmu Pertanian, No.1,1. Khopkar SM. 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik. Saptoraharjo A., Nurhadi A, penerjemah; Jakarta : UI Press. Manopo TM, Sudewi S, Wewengkang DS. Analisis Pemanis Natrium Siklamat Pada Minuman Jajanan Yang Di Jual Di Daerah Sekitar Kampus Universitas Sam Ratulangi Manado. J Ilm Farm. 2019;8(3):72–81. Menteri Kesehatan. 2012. Peraturan Perundangan Tentang Bahan Tambahan Pangan. Jakarta : Departemen Kesehatan RI Mulyatmo A, Hariyatmi. Pengaruh Konsumsi Minuman Instan dengan Frekuensi Berbeda Terhadap Kadar Ureum Darah Mencit (Mus musculus). Bioeksperimen: 2015;1(1):49–55. 32 33 Musiam S, Hamidah M, Kumulasari E. Penetapan Kadar Siklamat Dalam Sirup Merah Yang Dijual Di Banjarmasin Utara. J Ilm Ibnu Sina. 2016;1(1):19–25. Nasution VWP. Analisa Kadar Siklamat pada Minuman Ringan Kemasan Serbuk dan Pola Konsumsi Pada Anak SD di Kecamatan Medan Selayang Tahun 2017. [Medan]: Skrpisi; 2018. Nurlailah, Alma NA, Oktiyani N. Analisis Kadar Siklamat Pada Es Krim Di Kota Banjarbaru. Med Lab Technol J. 2017;3(1):77–81. Sukmawati, Rauf S, Nadimin, Khalifah N. AnalisisPenggunaan Bahan Tambahan Makanan (BTM) Di Kantin Nutrisia Jurusan Gizi Poltekes Kemenkes Makassar. Media Gizi Pangan. 2015;XIX(1):73–7. Permenkes. 2012. Bahan Tambahan Pangan. No.033. Jakarta : Menteri Kesehatan RI. Purwaningsih R, Astuti R, Salawati T. Penggunaan Natrium Siklamat Pada Es Lilin Berdasarkan Pengetahuan Dan Sikap Produsen Di Kelurahan Srondol Wetan Dan Pedalangan Kota Semarang. Pangan dan Gizi. 2010;01(02):19–26. Qamariah N, Rahmadhani EA. Analisis Kualitatif Dan Kuantitatif Pemanis Buatan Siklamat Pada Sirup Merah Dalam Es Campur Yang DIjual Di Kelurahan Kalampangan Kota Palangkaraya. J surya Med. 2017;3(1):27–39. Ramadhani N, Herlina, Utama AJF. Penetapan Kadar Natrium Siklamat Pada Minuman Ringan Kemasan Dengan Menggunakan Metode Spektrofotometri UV. Mandala Pharmacon Indones. 2018;4(1):7–12. Rasyid R, R MY, Mahyuddin. Analisis Pemanis Sintetis Natrium Sakarin Dan Natrium Siklamat Dalam Teh Kemasan. J Farm higea. 2011;3(1):52–7. Rauf PN, Sudewi S, Rotinsulu H. Analisis Natrium Siklamat Pada Produk Olahan Kelapa Di Swalayan Kota Manado Menggunakan Metode Spektrofotometri Ultra Violet. J Ilm Farm. 2017;6(4):165–73. Rohman A, Sumantri. Analisis Makanan. Jogjakarta: Gajah Mada University Press; 2007. Rohman A. Validasi dan Penjaminan Mutu Metode Analisis Kimia. Yogyakarta: Gajah Mada University Press; 2014. Rosdayani. Identifikasi Pemanis Buatan Natrium Siklamat Pada Es Teler Yang Di Jual Di Kecamatan Kambu Kota Kendari Suawesi Tenggara. Politeknik Kesehatan Kendari; 2018. 34 Sembel, Dantje.2015. Toksikologi Lingkungan. Edisi 1.Yogyakarta : Andi Setiawan EA, Nuh Ibrahim M, Wahab D. Analisis Kandungan Zat Pemanis Sakarin Dan Siklamat Pada Minuman Yang Di Perdagangkan Di Sekolah Dasar Di Kelurahan Wua-Wua Kota Kendari. J Sains dan Teknol Pangan. 2016;1(1):45– 50. Srianta I, Trisnawati CY. Pengantar Teknologi Pengolahan Minuman. Yogyakarta: Pustaka Pelajar; 2015. 34-44 hal. Sudjadi.2012. analisis farmasi.Yokyakarta : pustaka pelajar. Wibowoutomo. 2002. Pengembangan Metode Penetapan Kadar Siklamat Kromatografi Kinerja Tinggi Guna Diimplementasikan Dalam Kajian Paparan. Jakarta : Teknologi Dan Kejujuran, PT Kalma Media Widyaningsih R, Utami PI. Analisis Siklamat Pada Agar-Agar Yang Beredar Di Pasar Wage Purwokerto Dengan Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi. Pharmacy. 2009;6(3):65–71. Yani RA. Pengaruh Minuman Kemasan Sachet (M) Dengan Frekuensi Berbeda Terhadap Kadar Kolesterol Darah Mencit (Mus musculus). Fakultas Keguruan Dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Surakarta. Risa Andri Yani; 2014. 1--10 hal. Yuliarti N. Awas! Bahaya Dibalik Lezatnya Makanan. Hardjono D, editor. Yogyakarta: C.V Andi Offset; 2007. Yustisia, Kurnia Dara. 2012. Perbandingan Kadar Vitamin C dalam Tomat Merah dan Tomat Hijau Secara Spektrofotometri UV-Vis. Karya Tulis Ilmiah. Fakultas Farmasi : Universitas Setia Budi Surakarta. LAMPIRAN Lampiran 1. Gambar Sampel A B D E G H 35 C F 36 Lampiran 2. Alat dan Bahan Peralatan Gelas Mikropipet Spektrofotometri UV-Vis Timbangan Analitik Pipet volume Corong pisah 37 NaNO2 BaCl2 BaCl2 HCl Lampiran 3. Hasil Uji Kualitatif 1 2 3 (+) 1 A 2 3 B (+) 38 1 3 2 (+) (+) 2 3 1 1 2 3 3 3 C D 1 E 3 2 (+) (+) 1 2 3 (+) 3 3 1 3 3 2 F (+) G H 39 Lampiran 4. Data Kurva Panjang Gelombang Maksimum Gambar kurva panjang gelombang maksimum Data serapan kurva panjang gelombag maksimum 200-300 nm 40 Lampiran 5. Data Operating Time Lampiran 4. Data Pembuatan larutan 4.1. Pembuatan Larutan NaOH 10 M Berat penimbangan = Berat penimbangan = volume 1000 30 1000 × BM NaOH× molaritas NaOH × 40 × 10M = 12 g Cara pembuatan : Ditimbang sebanyak 12 gram kristal NaOH dimasukkan ke dalam gelas kimia 50 ml, kemudian dilarutkan dengan aquades sampai batas volume 30 ml. 4.2. Pembuatan Larutan NaOH 0,5 M Berat penimbangan = volume 1000 × BMNaOH × molaritas NaOH 41 Berat penimbangan = 400 1000 × 40 × 0,5M = 8 g Cara pembuatan : Ditimbang sebanyak 8 gram kristal NaOH, kemudian dimasukkan ke dalam gelas kimia 1000 ml dan dilarutkan dengan aquades sampai volume 400 ml. 4.3. Pembuatan Larutan Natrium Hipoklorit 1 % V.C(12%) = V.C(1%) V.12%= 50 mL.1% V = 4,16 mL Cara pembuatan: Diukur H2SO4 pekat sebanyak 4,16 ml menggunakan pipet ukur lalu dimasukkan lewat dinding ke dalam gelas kimia yang telah terdapat sedikit aquades, kemudian ditambahkan aquades sampai batas 50 ml dan dihomogenkan. 4.4. Pembuatan larutan H2SO4 30% V.C(95%) = V.C(30%) V.95%= 50 mL.30% V = 15,8 mL Cara pembuatan : Diukur H2SO4 pekat sebanyak 15,8 ml menggunakan pipet ukur lalu dimasukkan lewat dinding ke dalam gelas kimia yang telah terdapat sedikit aquades, kemudian ditambahkan aquades sampai batas 50 ml dan dihomogenkan. Lampiran 5. Data Pembuatan Larutan Baku 5.1. Baku Induk 1.000 ppm Perhitungan : 42 Berat penimbangan (mg) = Berat penimbangan (mg) = ppm 1000 1.000 1000 ×100 × 250 ml = 250 mg =0,25 g Berat kertas kosong = 0,2609 gram Berat kertas + zat = 0,5112 gram Berat kertas + sisa = 0,2611 gram Berat Bahan Koreksi kadar = = 0,2501 gram 0,2501 gram 0,2500 gram × 1000 ppm = 1.000 ppm Cara pembuatan : Ditimbang baku Na-Siklamat sebanyak 0,2501 gram, kemudian dimasukkan ke dalam labu takar 250 ml, lalu ditambahkan aquades dan dihomogenkan. 5.2. 𝝀 max (800 ppm) Dari OT (800 ppm) 8 menit Perhitungan : V1. C1 = V2. C2 V1. 1000 = 10 . 800 V1 = 8 ml 5.3. Baku 775 ppm Perhitungan: V. C(baku induk) = V.C( baku 775 ppm) V1 . 1000 = 10 . 775 V1 = 7,75 ml Cara pembuatan: Dipipet larutan baku induk sebanyak 7,75 ml menggunakan mikropipet, dimasukkan ke dalam labu takar 10 ml dan ditambahkan aquades hingga tanda batas serta dihomogenkan. 43 5.4. Baku 800 ppm Perhitungan : V.C(baku induk) = V . C(baku 800 ppm) V1. 1000 = 10 . 800 V1 = 8 ml Cara pembuatan: Dipipet larutan bau induk sebanyak 8 ml menggunakan mikropipet, dimasukkan ke dalam gelas tajar 10 ml dan ditambahkan aquades hingga tanda batas serta dihomogenkan. 5.5. Baku 825 ppm Perhitungan: V . C(baku induk) = V. C(baku 825 ppm) V1 . 1000 = 10 . 825 V1 = 8,25 ml Cara pembuatan : Dipipet larutan induk sebanyak 8,25 ml menggunakan mikropipet, dimasukkan ke dalam labu takar 10 ml dan ditambahkan aquades hingga tanda batas serta dihomogenkan. 5.6. Baku 850 ppm Perhitungan : V.C(baku induk) = V.C(baku 850 ppm) V1 . 1000 = 10 . 850 V1 = 8,5 ml Cara pembuatan: Dipipet larutan baku induk sebanyak 8,5 ml menggunakan mikropipet, dimasukkan ke dalam labu takar 10 ml dan ditambahkan aquades hingga tanda batas serta dihomogenkan. 44 5.7. Baku 875 ppm Perhitungan : V.C(baku induk) = V.C (baku 875 ppm) V1. 1000 = 10 . 875 V1 = 8,75 ml Cara pembuatan : Dipipet larutan baku induk sebanyak 8,75 ml menggunakan mikropipet, dimasukkan ke dalam labu takar 10 ml dan ditambahkan aquades hingga tanda batas serta dihomogenkan. 5.8. Baku 900 ppm Perhitungan : V.C(baku induk) = V.C(baku 900 ppm) V1. 1000 = 10 . 900 V1 = 9 ml Cara pembuatan : Dipipet larutan baku induk sebanyak 9 ml menggunakan mikropipet, dimasukkan ke dalam labu takar 10 ml dan ditambahkan aquades hingga tanda batas serta dihomogenkan. Lampiran 6. Data Validasi 6.1. Linearitas X(konsentrasi) Y(Abs) a b r 775 ppm 0,2401 -2,197 0,003 0,9990 800 ppm 0,3212 825 ppm 0,4171 850 ppm 0,4837 875 ppm 0,5507 900 ppm 0,6406 Keterangan : 45 Berdasarkan tabel diatas diketahui korelasi sebesar 0,9990 sehingga nilai tersebut dinyatakan memenuhi syarat kelinearan garis yaitu r≥ 0,9999. 6.2. Presisi No Y (x-xi)2 X 1 0,257 818,00 1,44 2 0,259 818,67 0,28 3 0,264 8203,3 1,28 4 0,253 816,67 6,42 5 0,258 818,33 0,75 6 0,261 819,33 0,02 7 0,264 820,33 1,28 8 0,264 820,33 1,28 9 0,261 819,33 0,02 10 0,265 820,67 2,15 Jumlah 8192,00 14,93 Rata-rata 819,20 1,49 SD: √ RSD: ∑(x−xi)2 n−2 SD x̅ = √ × 100% = 14,93 8 = 1,36 1,36 8192,00 × 100% = 0,017 ≤ 2 % (memenuhi syarat) Keterangan : Nilai Relative Standard devation (RSD) sebesar 0,017 % memenuhi syarat presisi yang baik karena ≤ 2 %. 6.3. Akurasi %baku Y CT CH % keterangan 46 80% 100% 120% 0,219 750 805,33 93,13 93,05% 0,221 750 806,00 93,05 Memenuhi 0,223 750 806,67 92,98 0,264 775 820,33 94,47 94,51% 0,261 775 819,33 94,59 Memenuhi 0,264 775 820,33 94,47 0,300 800 832,33 96,12 95,97% 0,301 800 832,67 96,08 Memenuhi 0,310 800 835,67 95,73 Keterangan : Y : abs CT : konsentrasi teori CH : konsentrasi hitung Syarat : 80% - 120 % Berdasarkan tabel diatas nilai presentase dari masing-masing baku 80 %, 100 % dan 120 % dinyatakan memenuhi syarat akurasi yang baik karena berada dalam rentang 80 % -120 %. 6.4. Batas Deteksi dan Batas Kuantitas No Konsentrasi (X) Absorbansi (Y) Yi (Y-Yi) (Y-Yi)2 1 775 0,240 0,128 0,112 0,013 2 800 0,321 0,203 0,118 0,014 3 825 0,417 0,278 0,139 0,019 4 850 0,484 0,353 0,131 0,017 5 875 0,551 0,428 0,123 0,015 6 900 0,641 0,503 0,138 0,019 ∑ 0,097 47 Sy/x :√ LOD : LOQ : ∑(y−yi)2 0,097 =√ n−2 3 × Sy/x Slope Slope = 0,156 mg/L 3 × 0,156 = 10 × Sy/x 4 0,003 = = 155,7 mg/L 10 × 0,156 0,003 = 519 mg/L Lampiran 7. Data Perhitungan Kadar Sampel Y = a + bx X= Y−a b g L X( )×faktor pembuatan (L)×faktor pengenceran Kadar = berat sampel (Kg) Kadar sebagai asam siklamat = BM asam siklamat BM Na−siklamat × kadar (mg/Kg) 7.1. Sampel A Replikasi 1 : Penimbangan sampel : Zat : 5,0394 g Absorbansi : 0,310 X1 = 0,310+2,197 = 835,67 mg/L = 0,8357 g/L 0,003 Kadar = 0,8357 g/L ×0,01L 0,0050 Kg = 1,6714 g/Kg 179 Kadar sebagai asam siklamat = 201 Replikasi 2 : Penimbangan sampel : Zat : 5,1055 g Absorbansi : 0,342 × 1,6714 mg/Kg = 1,4884 g/Kg 48 X2 = 0,342+2,197 = 846,33 mg/L = 0,8463 g/L 0,003 Kadar = 0,8463 g/L ×0,01L 0,0051 Kg = 1,6594 g/Kg Kadar sebagai asam siklamat = Replikas 3 179 201 × 1,6594 g/Kg = 1,4777 g/Kg : Penimbangan sampel: Zat : 5,1404 g Absorbansi : 0,360 X3 = 0,360+2,197 0,003 Kadar = = 852,33 mg/L = 0,8523 g/L 0,8523 g/L ×0,01L 0,0051 Kg = 1,6712 g/Kg Kadar sebagai asam siklamat = Rata- rata kadar = 179 201 × 1,6712 g/Kg = 1,4882 g/Kg 1,4884 g/Kg + 1,4777 g/Kg +1,4882 g/Kg 3 = 1,4848 g/Kg 7.2. Sampel B Replikasi 1 : Penimbangan sampel : Zat : 5,1990 g Absorbansi : 0,695 X1 = 0,695+2,197 = 917,65 mg/L = 0,9177 g/L 0,003 Kadar = 0,9177 g/L ×0,01L 0,0052 Kg = 1,7648 g/Kg Kadar sebagai asam siklamat = 179 201 × 1,7648 g/Kg = 1,5716 g/Kg 49 Replikasi 2 : Penimbangan sampel : Zat : 5,0905 g Absorbansi : 0,634 X2 = 0,634+2,197 = 898,29 mg/L = 0,8983 g/L 0,003 Kadar = 0,8983 g/L ×0,01L 0,0051 Kg = 1,7614 g/Kg Kadar sebagai asam siklamat = Replikasi 3 179 201 × 1,7614 g/Kg = 1,5685 g/Kg : Penimbangan sampel : Zat : 5,1120 g Absorbansi : 0,651 X3 = 0,651+2,197 = 903,68 mg/L = 0,9037 g/L 0,003 Kadar = 0,9037 g/L ×0,01L 0,0051 Kg = 1,7720 g/Kg 179 Kadar sebagai asam siklamat = 201 × 1,7720 g/Kg = 1,5780 g/Kg 1,5716 g/Kg + 1,5685 g/Kg +1,5780 g/Kg Rata- rata kadar = 3 = 1,5727 g/Kg 7.3. Sampel C Replikasi 1 : Penimbangan sampel : Zat : 4,9980 g Absorbansi : 0,224 X1 = 0,224+2,197 = 768,16 mg/L = 0,7682 g/L 0,003 50 Kadar = 0,7682 g/L ×0,01L 0,0050 Kg = 1,5364 g/Kg Kadar sebagai asam siklamat = Replikasi 2 179 201 × 1,5364 g/Kg = 1,3682 g/Kg : Penimbangan sampel : Zat : 4,9999 g Absorbansi : 0,229 X2 = 0,229+2,197 = 769,72 mg/L = 0,7697 g/L 0,003 Kadar = 0,7697 g/L ×0,01L 0,0050 Kg = 1,5394 g/Kg Kadar sebagai asam siklamat = Replikasi 3 179 201 × 1,5394 g/Kg = 1,3708 g/Kg : Penimbangan sampel : Zat : 4,9708 g Absorbansi : 0,216 X3 = 0,216+2,197 = 765,78 mg/L = 0,7658 g/L 0,003 Kadar = 0,7658 g/L ×0,01L 0,0050 Kg = 1,5316 g/Kg Kadar sebagai asam siklamat = Rata- rata kadar = 179 201 1,3682 g/Kg + 1,3708 g/Kg +1,3639 g/Kg 3 = 1,3637 g/Kg 7.4. Sampel D Replikasi 1 : Penimbangan sampel : Zat × 1,5316 g/Kg = 1,3639 g/Kg : 5,1269 g 51 Absorbansi X1 = : 0,410 0,410+2,197 = 827,21 mg/L = 0,8272 g/L 0,003 Kadar = 0,8272 g/L ×0,01L 0,0051 Kg = 1,6220 g/Kg Kadar sebagai asam siklamat = Replikasi 2 179 201 × 1,6220 g/Kg = 1,4444 g/Kg : Penimbangan sampel : Zat : 5,1305 g Absorbansi : 0,417 X2 = 0,417+2,197 = 829,44 mg/L = 0,8294 g/L 0,003 Kadar = 0,8294 g/L ×0,01L 0,0051 Kg = 1,6263 g/Kg Kadar sebagai asam siklamat = Replikasi 3 179 201 × 1,6263 g/Kg = 1,4482 g/Kg : Penimbangan sampel : Zat : 5,1207 g Absorbansi : 0,407 X3 = 0,407+2,197 = 826,26 mg/L = 0,8262 g/L 0,003 Kadar = 0,8262 g/L ×0,01L 0,0051 Kg = 1,6200 g/Kg Kadar sebagai asam siklamat = Rata- rata kadar = 179 201 × 1,6200 g/Kg = 1,4426 g/Kg 1,4444 g/Kg + 1,4482 g/Kg + 1,4426 g/Kg = 1,4451 g/Kg 3 52 Berikut adalah tabel yang memuat data kadar Na-siklamat secara keseluruhan : Sampel B1 B2 B3 C1 C2 C3 E1 E2 E3 G1 G2 G3 Kadar Nasiklamat (g/Kg) 1,6714 1,6594 1,6712 1,7648 1,7614 1,7720 1,5364 1,5394 1,5316 1,6220 1,6263 1,6200 Kadar ratarata 1,6673 1,7661 1,5358 1,6228 (x-xi)2 0,17x10-4 0,63x10-4 0,15x10-4 0,02x10-4 0,22x10-4 0,35x10-4 0 0,13x10-4 0,18x10-4 0,01x10-4 0,12x10-4 0,08x10-4 SD 0,27x10-4 0,17x10-4 0,09x10-4 0,06x10-4
