Pengendalian Mutu Simplisia dan Ekstrak

Pengendalian Mutu
Simplisia dan Ekstrak
Tanaman Obat
PEKALONGAN 18 JUNI 2014
ACUAN
O Materia Medika Indonesia
O Farmakope Herbal Indonesia, 2008
O Parameter Standar Umum Ekstrak
Tumbuhan Obat, Departemen Kesehatan,
2000 (Keputusan Menteri Kesehatan R.I
No: 55/MENKES/SK/I/2000
O Monografi Ekstrak Tumbuhan Obat
Indonesia (METOI), Badan POM 2004
Bentuk bahan obat/produk
kefarmasian
O Simplisia
O Produk dari P4TO
O Ekstrak
O Produk dari PED
SIMPLISIA
Simplisia
O Bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat
yang belum mengalami pengolahan apapun juga dan
kecuali dikatakan lain, berupa bahan yang telah
dikeringkan (MMI)
O Jenis simplisia:
O Simplisia nabati: simplisia yang berupa tumbuhan
utuh, bagian tumbuhan atau eksudat tumbuhan.
Eksudat tumbuhan adalah isi sel yang secara
spontan keluar dari tumbuhan atau isi sel yang
dengan cara tertentu dipisahkan dari tumbuhannya
dan belum berupa senyawa kimia murni
O Simplisia hewani
O Simplisia pelikan (mineral)
O Simplisia menurut MMI hanya untuk
penggunaan pengobatan
O Secara umum adalah simplisia nabati yang telah
melalui proses pasca panen dan proses
preparasi secara sederhana menjadi bentuk
produk kefarmasian yang siap pakai atau siap
diproses lebih lanjut yaitu:
O Jamu: siap pakai dalam bentuk serbuk halus
untuk diseduh sebelum diminum
O Infus: siap dipakai untuk dicacah dan digodok
sebagai jamu godokan
O Diproses lebih lanjut untuk dijadikan produk
sediaan farmasi lain yang umumnya melalui
proses ekstraksi, separasi dan pemurnian yaitu
menjadi ekstrak, fraksi atau bahan isolat senyawa
murni
Pentingnya kontrol mutu
O Simplisia sebagai produk pertanian atau tumbuhan liar
memiliki kualitas mutu yang dipengaruhi oleh:
O Variasi bibit: Identitas (spesies)
O Tempat tumbuh dan iklim: lingkungan (tanah dan atmosfer),
energi (cuaca, temperatur, cahaya) dan materi (air, senyawa
organik dan anorganik)
O Proses tumbuh (fertilizer, pestisida,...)
O Kondisi panen (umur dan cara): Periode pemanenan hasil
tumbuhan: dimensi waktu terkait metabolisme pembentukan
senyawa terkandung
O Proses pasca panen dan preparasi akhir:
O Untuk simplisia dari tumbuhan hasil budidaya, dipengaruhi juga
oleh proses GAP (Good Agricultural Practice)
O Untuk simplisia dari tubuhan liar (wild crop), dipengaruhi juga
oleh proses pengeringan yang umumnya dilakukan di lapangan.
O Penyimpanan bahan tumbuhan: berpengaruh pada stabilitas
bahan (kontaminasi biotik dan abiotik)
Mutu suatu simplisia/ekstrak
dikontrol dengan melakukan
STANDARDISASI
Standardisasi
O Serangkaian parameter, prosedur dan cara pengukuran
yang hasilnya merupakan unsur-unsur terkait paradigma
mutu kefarmasian, mutu dalam artian memenuhi
standar (kimia, biologi dan farmasi), termasuk jaminan
(batas-batas) stabilitas sebagai produk kefarmasian
umumnya.
O Proses menjamin bahwa produk akhir (obat, ekstrak
atau produk ekstrak) mempunyai nilai parameter
tertentu yang konstan dan ditetapkan (dirancang dalam
formula) terlebih dahulu
O TUJUAN: agar diperoleh bentuk bahan baku atau produk
kefarmasian yang bermutu, aman serta bermanfaat
BAHAN BAKU
SIMPLISIA BASAH
PROSES PASCA
PANEN
KONTROL
MUTU
SIMPLISIA KERING
EKSTRAKSI
EKSTRAK
CPOTB
Standardisasi/Kontrol mutu simplisia
Acuan: Materia Medika Indonesia
O Kebenaran jenis (identifikasi spesies tumbuhan)
O Parameter makroskopik: deskripsi morfologis simplisia
O Parameter mikroskopik: mencakup pengamatan terhadap
penampang melintang simplisia atau bagian simplisia dan terhadap
fragmen pengenal serbuk simplisia
O Reaksi identifikasi: Reaksi warna untuk memastikan identifikasi dan
kemurnian simplisia (terhadap irisan/serbuk simplisia)
O Kemurnian (bebas dari kontaminasi kimia, biologis): tidak selalu
mungkin memperoleh simplisia sepenuhnya murni. Bahan asing
yang tidak berbahaya dalam jumlah sangat kecil pada umumnya
tidak merugikan
O Harus bebas dari serangga, fragmen hewan/kotoran hewan
O Tidak boleh menyimpang bau dan warnanya
O Tidak boleh mengandung lendir dan cendawan atau menunjukkan
tanda-tanda pengotoran lain
O Tidak boleh mengandung bahan lain yang beracun/berbahaya
O Aturan penstabilan: wadah, penyimpanan, trasportasi
O Pengawetan: Simplisia nabati boleh diawetkan dengan
penambahan kloroform, karbon tetraklorida, etilenoksida
atau bahan pengawet lain yang cocok, yang mudah
menguap dan tidak meninggalkan sisa
O Wadah dan bungkus: tidak boleh mempengaruhi bahan
yang disimpan baik secara kimia/fisika, tertutup baik dan
rapat.
O Penyimpanan: agar dihindari dari cahaya dan penyerapan
air.
O Simplisia sebagai bahan/produk yang dikonsumsi
manusia sebagai obat:
O Mutu, aman, manfaat
O Simplisia sebagai bahan dengan kandungan kimia yang
bertanggungjawab terhadap respon biologis: harus
memiliki spesifikasi kimia yaitu informasi komposisi (jenis
dan kadarnya) senyawa kandungan.
Syarat baku simplisia
O Kadar air: tidak lebih dari 10%
O Angka lempeng total: tidak lebih dari 10
O Angka kapang dan khamir: tidak lebih dari 10
O Mikroba patogen: Negatif
O Aflatoksin: tidak lebih dari 30 bagian per juta
Sari Jamu:
O Diperbolehkan mengandung etanol tidak lebih
dari 1% v/v (20oC)
O Kadar metanol: tidak lebih dari 0,1% dari kadar
etanol
EKSTRAK
Standardisasi ekstrak
O Simplisia sebagai bahan baku harus memenuhi persyaratan
monografinya (MMI)
O Produk ekstrak harus memenui persyaratan:
O Parameter standar umum
O Parameter standar spesifik
O Buku monografi
O Ekstrak: sediaan kental yang diperoleh dengan cara
mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia menggunakan pelarut
yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut
diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan
sedemikian rupa sehingga memenuhi baku yang telah ditetapkan
O Ekstrak cair: adalah sediaan dari simplisia yang mengandung
etanol sebagai pelarut atau sebagai pengawet. Biasanya pada tiap
ml ekstrak, mengandung senyawa aktif dari 1 g simplisia yang
memenuhi syarat
O Infus: adalah sediaan cair yang dibuat dengan mengekstraksi
simplisia dengan air pada suhu 90oC selama 15 menit.
Faktor yang mempengaruhi
mutu ekstrak
O Faktor Biologi: Bahan asal tumbuhan
O Identitas (spesies)
O Lokasi tumbuhan asal: lingkungan (tanah dan atmosfer), energi
O
O
O
O
O
(cuaca, temperatur, cahaya) dan materi (air, senyawa organik
dan anorganik)
Periode pemanenan hasil tumbuhan: dimensi waktu terkait
metabolisme pembentukan senyawa terkandung
Penyimpanan bahan tumbuhan: berpengaruh pada stabilitas
bahan (kontaminasi biotik dan abiotik)
Umur tumbuhan dan bagian yang digunakan
Untuk simplisia dari tumbuhan hasil budidaya, dipengaruhi
juga oleh proses GAP (Good Agricultural Practice)
Untuk simplisia dari tubuhan liar (wild crop), dipengaruhi juga
oleh proses pengeringan yang umumnya dilakukan di
lapangan.
O Faktor Kimia:
O Faktor internal:
O Jenis senyawa aktif dalam bahan
O Komposisi kualitatif senyawa aktif
O Komposisi kuantitatif senyawa aktif
O Kadar total rata-rata senyawa aktif
O Faktor eksternal:
O Metode ekstraksi
O Perbandingan ukuran alat ekstraksi (diameter
O
O
O
O
dan tinggi alat)
Ukuran, kekerasan dan kekeringan bahan
Pelarut yang digunakan dalam ekstraksi
Kandungan logam berat
Kandungan pestisida
O Mutu ekstrak berkaitan dengan senyawa kimia
yang dikandung karena respon biologis yang
diakibatkan oleh ekstrak disebabkan oleh
senyawa kimia
O Ditinjau dari asalnya, senyawa kimia dalam
ekstrak terbagi menjadi:
O Senyawa kandungan asli dari tumbuhan asal:
senyawa yang memang sudah ada sejak masa
tumbuhan tsb hidup
O Senyawa hasil perubahan dari senyawa asli: Dari
penelitian telah diprediksi terjadinya perubahan
kimia senyawa asli karena sifat fisikokimia yang
labil
O Senyawa kontaminasi: polutan atau aditif
O Senyawa hasil interaksi kontaminasi dengan
senyawa asli atau senyawa perubahan
PARAMETER NON SPESIFIK
O Kadar air dan Susut Pengeringan
O Kadar abu
O Sisa Pelarut
O Residu Pestisida
O Cemaran logam berat
O Cemaran mikroba
O Kadar Sari Larut Air dan Larut Etanol
PARAMETER SPESIFIK
O Identitas:
Meliputi deskripsi tata nama, bagian tumbuhan yang
digunakan dan senyawa identitas.
O Organoleptik
Meliputi penggunaan panca indera untuk
mendeskripsikan bentuk (padat, serbuk, kental, cair),
warna, bau dan rasa
O Kandungan kimia
Untuk memberikan gambaran awal jumlah senyawa
terkandung
UJI KANDUNGAN KIMIA EKSTRAK
O Pola kromatogram: KLT, KCKT, KG
O Kadar Total Golongan Kandungan Kimia:
spektrofotometri, titrimetri, volumetri, gravimetri dll:
O
O
O
O
O
O
O
Golongan minyak atsiri
Golongan steroid
Golongan tanin
Golongan flavonoid
Golongan triterpenoid (saponin)
Golongan alkaloid
Golongan antrakinon
O Kadar kandungan kimia tertentu: senyawa identitas
atau senyawa kimia utama atau senyawa aktif
O Densitometer, KG, KCKT
LEMBAR KERJA
PENGUJIAN
: KADAR SUSUT PENGERINGAN
SAMPEL
:
TANGGAL
:
Berat Sampel (gram) [a]
Berat Sampel Setelah Pemanasan
105oC [b]
Berat Penyusutan =[a-b]
Kadar Susut Pengeringan (%) =
[a-b]/a x 100%
Kadar rata-rata susut
pengeringan
KESIMPULAN
Dilaksanakan oleh
1.
1.
2.
2.
3.
3.
1.
1.
2.
2.
3.
3.
Diperiksa oleh Penanggungjawab lab.
Tanggal,
(__________________________)
(____________________________)
Lampiran 1. Contoh Catatan Hasil Pengujian
Nama Perusahaan
Alamat Perusahaan
Telp. …… Fax …….
LAPORAN PENGUJIAN
No. …../..…/…../20..
Nama Sampel : Simplisia Rajang
Rimpang Kunyit
Asal Sampel
: ………………
No. Batch
: ………………
No.
1.
PEMERIKSAAN
Pemerian
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Mikroskopik
Pola kromatografi
Susut pengeringan
Abu total
Abu tidak larut asam
Sari larut air
Sari larut etanol
Kandungan kimia
simplisia :
a. Kadar minyak atsiri
b. Kadar kurkuminoid
a.
b.
10.
SPESIFIKASI
Bentuk kepingan ringan, rapuh, warna kuning
jingga, kuning jingga kemerahan sampai kuning
jingga kecoklatan, bau khas, rasa agak pahit, agak
pedas, lama kelamaan menimbulkan rasa tebal
Sesuai FHI Edisi I 2008
Sesuai FHI Edisi I 2008
Tidak lebih dari 12%
Tidak lebih dari 8,2%
Tidak lebih dari 0,9%
Tidak kurang dari 11,5%
Tidak kurang dari 11,4%
Tidak kurang dari 3,02%
Tidak
kurang
dari
6,60%
kurkumin
Mikrobiologi :
a. Angka Lempeng
Tidak lebih dari 10 7
Total
b. Angka Kapang dan
Tidak lebih dari 10 4
Khamir
c. Bakteri Pathogen
E. coli
Negatif
Salmonella sp.
Negatif
Staphylococcus
Negatif
aureus
Pseudomonas
Negatif
aeruginosa
Kesimpulan : memenuhi syarat
Nama Kota, Tanggal
Penanggung Jawab Pengujian
………………………
Tanggal Penerimaan : ……………….
Tanggal Pemeriksaan : ……………….
Metoda
: FHI Edisi I 2008
SK Menkes RI
No. 661/Menkes/SK/VII/1994
dihitung
sebagai
HASIL
STANDARDISASI
O TOTAL FLAVONOID
Kurva Linier Standar Rutin
0.5
y = 0.0116x + 0.0533
R² = 0.9987
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0
Sampel
Daun Sirih Merah
Kulit Manggis
Keladi Tikus
Daun Sirsak
Berat (µg) A1
1000
1080
6144
1683
0,751
1,624
0,424
1,925
A2
A3
0,753
2,242
0,415
1,926
0,764
1,858
0,477
1,052
10
Arata-2
0,756
1,908
0,439
1,634
20
30
Kadar Total
Flavonoid
equivalen rutin
(μg) dalam ekstrak
60,58
159,89
33,22
136,30
40
% Kadar Total
Flavonoid
dalam ekstrak
6,06
14,80
0,54
8,10
O TOTAL FENOL
Kurva Linier Standar Pyrogallol
2.500
y = 0.0483x + 0.0387
R² = 0.9969
2.000
1.500
1.000
0.500
0.000
0
Sampel
Daun Sirih
Merah
Kulit Manggis
Keladi Tikus
Daun Sirsak
Berat
(μg)
84,48
69,24
687,00
68,70
10
A1
A2
A3
0,170
0,074
0,143
0,416
0,254
0,086
0,152
0,416
0,228
0,034
0,146
0,420
20
30
40
total Fenol eq
Arata-rata pyrogallol (µg)
dalam ekstrak
0,217
0,065
0,147
0,417
3,70
0,54
2,24
7,84
50
% Kadar total fenol
eq. pyrogallol
dalam ekstrak
4,38
0,79
0,33
11,41
O KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
O ekstrak Kulit manggis menggunakan standar α-mangostin
Ekstrak
Kulit
Manggis
α- mangostin
O Daun Sirih Merah dan Daun Sirsak
Standar Rutin
Sampel
Daun
Sirsak
Daun
Sirih
Merah
Konsentr
asi
(μg/µl)
Ekstrak Daun
Sirsak
Vol
penotol
an
sampel
(μl)
Berat
sampel
(µg)
D1
D2
11,44
5
57,2 1001,8 1491,4
10,7
5
53,5
474,7
476,7
D3
Ekstrak Daun
Sirih Merah
Dratarata
Kadar
rutin (μg)
dalam
ekstrak
% kadar
rutin
dalam
ekstrak
1701,4
1398,2
1,16
2,03
513,4
488,3
0,58
1,08
Prosedur Uji Fitokimia
O Terpenoid
Pada plat tetes, sejumlah sampel di oles pada plat
tetes kemudian ditambahkan vanillin dan 2 tetes
asam sulfat pekat (H2SO4p. p.a). Diamati perubahan
warna yang terjadi. Senyawa golongan terpenoid
positif jika terjadi warna merah sampai ungu
+
O Steroid/triterpenoid
Pada plat tetes, sejumlah sampel dioles pada plat
tetes, kemudian ditambahkan asam asetat anhidrid
sampai terendam selama 5 menit, kemudian
ditambahkan 1 tetes asam sulfat pekat. Diamati
perubahan warna yang terjadi. Senyawa golongan
steroid positif jika terjadi warna hijau kebiruan dan
senyawa golongan triterpenoid berwarna merah
sampai ungu.
+
+
+
O Saponin
Sejumlah sampel di masukkan kedalam tabung
reaksi, kemudian ditambahkan aquadest sampai
terendam dan dipanaskan dalam waterbath 100oC
selama 15 menit. Setelah dingin dikocok kuat-kuat
arah vertical. Senyawa golongan saponin positif jika
terbentuk busa yang mantap.
-
-
-
O Fenol
Pada plat tetes, sejumlah sampel dioleskan pada
plat tetes kemudian ditambahkan larutan FeCl3
(10% b/v dalam etanol). Diamati perubahan warna
yang terjadi. Senyawa golongan fenol positif jika
terjadi warna hitam, ungu, hijau,
+
+
+
O Flavonoid
Sejumlah sampel dimasukkan kedalam tabung reaksi
dan ditambahkan butiran Mg. Kemudian ditambahkan
HCl 2N sampai terendam dan dipanaskan pada
waterbath 100 C selama 15 menit. Setelah dingin
ditambahkan 5 tetes amyl alcohol. Senyawa golongan
flavonoid positif jika terjadi warna merah sampai
jingga pada lapisan amil alcohol.
-
-
-/+
O Tannin
Sejumlah sampel dimasukkan kedalam tabung
reaksi. Kemudian ditambahkan larutan HCl 2N
sampai terendam dan dipanaskan dalam waterbath
100 C selama 15 menit. Setelah dingin ditambahkan
5 tetes amil alcohol. Senyawa golongan tannin positif
jika terbentuk warna merah-jingga pada lapisan amil
alkohol
-
-
-
O Alkaloid
Sejumlah sampel dibasakan dengan menggunakan
Ammonia 10%, kemudian di ekstraksi dengan pelarut
organik kloroform. Filtrat kloroform diambil dan
ditambahkan HCl 2N, kemudian lapisan air diambil
dan direaksikan dengan reagen Dragendorf. Senyawa
golongan alkaloid positif jika terbentuk endapan
berwarna merah bata.
-
-
+
TAMBAHAN
O Farmakope Herbal Indonesia: buku standar
di bidang farmasi terutama untuk simplisia
dan ekstrak yang berasal dari tumbuhan
atau bahan alam lainnya, metode analisis,
prosedur dan instrumennya, bahan baku
pembanding, sediaan umum, ketentuan
umum, lampiran2 dan penetapan standar
yang berkaitan dgn standardisasi di bidang
farmasi
O
O
O
O
O
O
O
O
O
O
O
O
Dasar Hukum
UU No.36 Tahun 2009 tentang Kesehatan
UU No.5 Tahun 1984 tentang Perindustrian
PP No.17 Tahun 1986 tentang Kewenangan Pengaturan, Pembinaan dan
Pengembangan industri
Kepmenkes Nomor HK.03.01/60/I/2010 tentang Rencana Strategis Kementerian
Kesehatan Tahun 2010 – 2014
Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1144/MENKES/PER/VIII/2010 tentang
Organisasi dan Tata Kerja Kementerian Kesehatan
Permenkes 1799 Tahun 2010 tentang Industri Farmasi
Peraturan Pemerintah No.72 Tahun 1998 tentang Pengamanan Sediaan Farmasi dan
Alat Kesehatan
Keputusan Ka BPOM no. HK.00.05.4.2411 tahun 2004 tentang Ketentuan Pokok
Pengelompokkan dan Penandaan Obat Bahan Alam Indonesia
Kepmenkes No. 381 Tahun 2007 tentang Kebijakan Obat Tradisional Nasional
(KOTRANAS)
Peraturan Menteri Kesehatan No. 1109/Menkes/Per/IX/2007 tentang
Penyelenggaraan Pengobatan Komplementer dan Alternatif di Fasilitas Kesehatan
Masyarakat
Kepmenkes No.121 Tahun 2008 tentang Standar Pelayanan Medik Herbal
Peraturan Menteri Kesehatan No.003/Menkes/Per/I/2010 tentang Saintifikasi Jamu
dalam Penelitian Berbasis Pelayanan Kesehatan