1 ISOLASI DAN IDENTIFIKASI BAKTERI PENDEGRADASI WARNA (DEKOLORISASI) PADA LIMBAH PEWARNAAN BATIK DI SOKARAJA KABUPATEN BANYUMAS SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana S-1 Oleh: INDITIA RARA PARUMASARI 1201070028 PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2017 2 ii Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 3 iii Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 4 iv Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 5 MOTTO “Dan (ingatlah juga), tatkala Tuhanmu memaklumkan; "Sesungguhnya jika kamu bersyukur, pasti Kami akan menambah (nikmat) kepadamu, dan jika kamu mengingkari (nikmat-Ku), maka sesungguhnya azab-Ku sangat pedih” (Q.S. Ibrahim [14] : 7) “Barang siapa yang menghendaki keuntungan di akhirat akan Kami tambah keuntungan itu baginya dan barang siapa yang menghendaki keuntungan di dunia Kami berikan kepadanya sebagian dari keuntungan dunia dan tidak ada baginya suatu bahagianpun di akhirat” (Q.S. As-Syura [42] : 20) “Kemenangan yang seindah-indahnya dan sesukar-sukarnya yang boleh direbut oleh manusia ialah menundukkan diri sendiri” ( R.A. Kartini ) “Harga kebaikan manusia adalah diukur menurut apa yang telah dilaksanakan/diperbuatnya” ( Ali Bin Abi Thalib ) v Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 6 PERSEMBAHAN Untuk: Mama Papa tercinta adikku tersayang, Arinda Nina dan teman terbaikku Ahmad Arif Saputra vi Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 7 UCAPAN TERIMAKASIH Segala puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SAW yang telah memberikan rahman dan karunia-Nya. Shalawat dan salam semoga masih tercurah kepada Nabi Muhammad SAW, keluarga, sahabat dan para pengikutnya yang istiqomah dalam islam. Berkat rahmat Allah Yang Mahakuasa, akhirnya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang sederhana ini. Dalam proses penelitian dan penyusunan atau penulisan skripsi ini, peneliti telah berusaha seoptimal mungkin untuk menghasilkan karya yang terbaik. Penulis juga ingin menyampaikan penghargaan dan mengucapkan terimakasih yang setulus-tulusnya kepada: 1. Drs. Pudiyono, M.Hum, Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto. 2. Drs. Arief Husin, M.Si. Ketua Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto atas motivasi dan sarannya. 3. Drs. Heri Maryanto, M.Si. Pemimbing yang selalu memberikan semngat, saran yang membangun dan dengan ikhlas mengoreksi dengan cermat. 4. Tim Penguji Skripsi yang telah memberi saran dan kritik serta perbaikan dalam penulisan skripsi. 5. Segenap dosen Program Studi Pendidikan Biologi, yang telah memberikan ilmu dengan penuh dedikasi. vii Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 8 6. Staff laboran Program Studi Pendidikan Biologi yang memberi bantuan selama penelitian: Selvi Yenitasari, S.Pd, Alhikmah, S.Si & R. Nindra, S.Si 7. Staff karyawan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan 8. Mama, Papa dan adik yang selalu memberikan semngat dengan cara-cara yang berbeda, sehingga penulis mendapatkan banyak pelajaran berharga yang diterapkan dalam penyelesaian skripsi. Terimakasih untuk Do’a dan segala dukungan yang diberikan tak bisa penulis menghitung kebaikan yang tak mungkin terbalaskan. 9. Teman-teman penelitian: Lala, Darmuti, Lina, Putri, Nurul, Cintia, Hani dan Dio telah membantu dalam pelaksanaan penelitian. 10. Teman-teman seperjuangan di Program Studi Pendidikan Biologi angkatan 2012 atas kerjasamanya selama ini. 11. Teman-teman organisasi: HIMAPBIO. 12. Semua pihak yang membantu dalam penyusunan skripsi ini, yang tidak bisa peneliti sebutkan satu persatu. Billahi fii Sabiililhaq. Fastabiqul Khairat. Semoga skripsi ini bermanfaat sebagai dasar pemikiran untuk penelitian selanjutnya, baik oleh peneliti sendiri maupun peneliti lain. Purwokerto, 17 Januari 2017 Peneliti viii Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 9 ISOLASI DAN IDENTIFIKASI BAKTERI PENDEGRADASI WARNA (DEKOLORISASI) DARI LIMBAH PEWARNAAN BATIK DI SOKARAJA KABUPATEN BANYUMAS Oleh: Inditia Rara Parumasari 1201070028 ABSTRAK Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi bakteri yang mampu mendegradasi warna dari limbah pewarnaan batik. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampai tingkat 10-3 dilanjutkan pourplate pada medium nutrient agar yang masing-masing mengandung pewarna naftol 10%. Isolat murni yang diperoleh diidentifikasi berdasarkan pengamatan karakteristik makroskopis koloni, mikroskopis sel dan uji biokimia aktivitas sel bakteri. Isolat bakteri diidentifikasi menggunakan buku Bergey’s Manual Determinative of Bacteriology (Holt et al., 1994) dan menurut Fapohunda (2014) serta Rajput (2012). Hasil identifikasi terdapat 4 genus bakteri yaitu Neisseria, Bacillus, Micrococcus dan Pseudomonas. Uji tantang terhadap ke-empat bakteri dilakukan pada konsentrasi 5% dan 10% pewarna naftol. Data berupa jenis isolat dan kemampuan masing-masing isolat hidup (toleran) pada medium uji yang dianalisis secara deskriptif kualitatif. Hasil penelitian menunjukkan ke-empat genus/isolat bakteri mampu hidup pada medium yang mengandung 5% dan 10% pewarna naphtol tetapi tidak mampu menghasilkan zona bening. Diperoleh 4 genus toleran terhadap pewarna naphtol tetapi tidak mampu mendegradasinya. Kata Kunci: Bakteri, Batik, Dekolorisasi, Naftol, Toleran ix Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 10 ISOLATION AND IDENTIFICATION THE BACTERIUM DEGRADING COLOR (DECOLORIZATION) TO BATIK DYING WASTE IN SOKARAJA, BANYUMAS REGACY By: Inditia Rara Parumasari 1201070028 ABSTARCT This study aims to isolate and identy the bacterium which can degrade the color from the batik dying waste. The isolation was done by diluting in 10 -3 then pourplate in Nutrient Agar medium in order the color of each part is 10% naphtol. Pure isolate obtained was identified based on the observation of the characteristics of macroscopic colonies, microscopic cell and biochemical test on bacteria cell activity. Bacterium isolate were identified using Bergey’s Manual Determinative of Bacteriology book (Holt et al., 1994) and Fapohunda (2014) as well as Rajput (2012). From the identification, there were 4 bacterium genus namely Neisseria, Bacillus, Micrococcus, and Pseudomonas. The test challenge to those bacterium genus was done to the concentrate 5% and 10% of dye naphtol. The form of the data is an isolate and the ability of each living isolate (tolerant) to test medium which was analyzed using descriptive qualitative. The result revealed that four genus/bacterium isolate could live in a medium containing 5% and 10% dye naphtol but they could not produze clear zone. It obtained four tolerant genus to the dye naphtol but they could not degrade. Keyword: Bacterium, Batik, Decolorization, Naphtol, Tolerant. x Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 11 DAFTAR ISI Halaman UCAPAN TERIMAKASIH ……………………………………………….. vii ABSTRAK ………………………………………………………………….. ix DAFTAR ISI………………………………………………………………… xi DAFTAR LAMPIRAN……………………………………………………… xiii DAFTAR GAMBAR………………………………………………………… xiv BAB I BAB II PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Masalah………………………………........… 1 1.2 Rumusan Masalah……………………………………….......… 3 1.3 Tujauan Penelitian………………………………………….… 4 1.4 Manfaat Penelitian…………………………………………..… 4 TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Proses Pembuatan Batik……………………………………..… 5 2.2 Limbah Cair………………………………………………....… 8 2.3 Karakteristik Limbah Cair…………………………………..… 11 2.4 Zat Warna Azo……………………………………………...… 13 2.5 Isolasi Bakteri ……………………………………………...… 16 2.6 Identifikasi Bakteri………………………………………........ 19 2.7 Bakteri Pendegradasi Warna………………………………..… 24 BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Lokasi dan Waktu ………………………………………….… 26 3.2 Alat dan Bahan …………………………………………….… 26 3.3 Metode Penelitian ………………………………………….… 27 xi Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 12 3.4 Pembuatan Medium……………………………………………. 27 3.5 Pengambilan Sampel…………………………………………... 30 3.6 Isolasi dan Identifikasi Bakteri………………………………… 31 3.7 Uji Dekolorisasi……………………………………………….. 37 3.8 Identifikasi…………………………………………………….. 37 3.9 Analisis Data…………………………………………………... 37 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN BAB V 4.1 Hasil Penelitian………………………………………………… 38 4.2 Pembahasan……………………………………………............ 52 KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan …………………………………………………… 68 5.2 Saran ………………………………………………………….. 68 DAFTAR PUSTAKA………………………………………………………… 69 LAMPIRAN……………………………………………………………......... 75 xii Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 13 DAFTAR TABEL Halaman Tabel 2.1 Zat warna dan zat pembantu untuk pewarna batik ………… 7 Tabel 2.2 Karakteristik Limbah Batik ………………………………… 11 Tabel 4.1 Isolat bakteri yang berhasil diisolasi dari limbah batik ……. 38 Tabel 4.2 Karakteristik kode isolat NP-1 dan NP-4 ………………….. 47 Tabel 4.3 Karakteristik kode isolat NP-2, NP-3 dan NP-7 …………… 48 Tabel 4.4 Karakterisktik kode isolat NP-5 dan NP-6 …………………. 50 Tabel 4.5 Karakteristik kode isolat NP-8 ……………………………… 51 xiii Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017 14 DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 4.1 Hasil Pengamatan karakteristik makroskopis bakteri ……… 40 Gambar 4.2 Hasil uji indol ……………………………………………….. 41 Gambar 4.3 Hasil uji MR ………………………………………………… 42 Gambar 4.4 Hasil uji VP …………………………………………………. 43 Gambar 4.5 Hasil uji Simmons Citrate …………………………………... 43 Gambar 4.6 Hasil uji urease ……………………………………………... 44 Gambar 4.7 Hasil uji fermentasi karbohidrat ……………………………. 44 Gambar 4.8 Hasil uji katalase ……………………………………………. 45 Gambar 4.9 Reaksi penguraian tryptofan ………………………………... 53 Gambar 4.10 Persamaan reaksi hidrolisis glukosa ………………………. 54 Gambar 4.11 Persamaan reaksi kimia uji VP …………………………… 55 Gambar 4.13 Reaksi kimia uji penggunaan sitrat ……………………….. 56 Gambar 4.14 Persamaan reaksi kimia uji urease ………………………… 57 Gambar 4.15 Persamaan reaksi uji katalase ……………………………… 59 xiv Isolasi Dan Identifikasi…, Inditia Rara Parumasari, FKIP UMP, 2017