View/Open - Repository UNISBA

BAB II
METODE PENELITIAN
Penelitian ini terdiri dari beberapa tahap, yaitu dimulai dengan melakukan
pengumpulan sampel, persiapan dan uji kemurnian bakteri uji, persiapan
inokulum bakteri, penentuan kadar hambat minimum (KHM) dan kadar bakterisid
minimum dengan metode dilusi cair, uji potensi antibakteri madu pahit dan madu
manis murni terhadap antibiotik tetrasiklin sebagai pembanding antibiotik.
Pengumpulan sampel dilakukan dengan cara pengambilan sampel secara acak
pada penggunaan merk madu pahit yang berada di pasaran dan madu manis murni
yang diperoleh dari peternak lebah di Lembang, kemudian dilakukan pengenceran
terhadap setiap sampel madu pahit dan madu manis murni yang akan diuji. Uji
kemurnian bakteri menggunakan metode gores pada media selektif dan uji
identifikasi bakteri menggunakan uji pewarnaan Gram. Selanjutnya dibuat
inokulum yang akan digunakan dalam pengujian madu pahit. Madu pahit yang
telah disampling dari pasaran kemudian diuji aktivitas antibakterinya dengan
menggunakan metode difusi agar untuk menentukan diameter hambat madu
dilanjutkan dengan penentuan kadar hambat minimum dengan menggunakan
metode dilusi cair (Broth Dilution Method) dan kadar bakterisid minimum madu.
Agar dapat diketahui seberapa besar potensi antibakteri yang dihasilkan oleh
madu pahit dan madu manis murni dilakukan uji banding terhadap antibiotik
tetrasiklin menggunakan metode difusi agar 5+1 sesuai Farmakope Indonesia IV.
Perhitungan selanjutnya untuk menentukan seberapa besar potensi yang
21
repository.unisba.ac.id
22
dihasilkan serta mengetahui apakah terdapat perbedaan antara sampel madu pahit,
madu manis murni, dan tetrasiklin menggunakan analisis statistika uji t-student.
Kerangka penelitian dapat digambarkan sebagai berikut:
Penetapan tujuan dan
tinjauan pustaka
Pengumpulan sampel
madu
Pemilihan bakteri Gram
positif dan Gram
negatif yang akan
dijadikan uji
Penentuan kadar
hambat minimum
(KHM)
Penentuan diameter
hambat
Uji kemurnian dan
identifikasi bakteri
Penentuan kadar
bakterisid minimum
(KBM)
Pengujian potensi madu
pahit dan madu biasa
murni dibandingkan
terhadap antibiotik
Pengolahan dan
kesimpulan data
Gambar II.1 Skema alur penelitian
repository.unisba.ac.id