PENGARUH VARIASI SUHU PENGERINGAN PREPARAT APUSAN

PENGARUH VARIASI SUHU PENGERINGAN PREPARAT
APUSAN DARAH TEPI TERHADAP HASIL
MAKROSKOPIS DAN MORFOLOGI
SEL DARAH MERAH (Erythrocyte)
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat menyelesaikan
Pendidikan Diploma IV Kesehatan
Program Studi Analis Kesehatan
Diajukan Oleh :
M. Ardi Afriansyah
G1C012033
PROGRAM STUDI D IV ANALIS KESEHATAN
FAKULTAS ILMU KEPERAWATAN DAN KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SEMARANG
2016
i
http://lib.unimus.ac.id
ii
http://lib.unimus.ac.id
iii
http://lib.unimus.ac.id
PENGARUH VARIASI SUHU PENGERINGAN PREPARAT APUSAN
DARAH TEPI TERHADAP HASIL MAKROSKOPIS DAN
MORFOLOGI SEL DARAH MERAH (Erythrocyte)
M. Ardi Afriansyah1, Tulus Ariyadi2, Budi Santosa3
1.
Program Studi D IV Analis Kesehatan Fakultas Ilmu Keperawatan dan
Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang.
2,3.
Laboratorium Biologi Molekuler Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan
Universitas Muhammadiyah Semarang.
ABSTRAK
Sediaan apus darah tepi merupakan suatu pemeriksaan untuk menghitung jenis
dan mengidentifikasi morfologi darah. Sediaan apus darah yang baik secara
makroskopis dan mikroskopis sangat penting dalam menilai keberhasilan sediaan
apus darah. Salah satu faktor penentu adalah suhu, faktor lingkungan seperti suhu
dapat mempengaruhi makroskopis dan mikroskopis, suhu dapat mempengaruhi
aktivitas biologis darah. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui ada atau
tidaknya pengaruh variasi suhu pengeringan preparat sediaan apus darah tepi
terhadap hasil makroskopis dan morfologi sel darah merah (eritrosit). Jenis
penelitian ini adalah eksperimen yaitu sampel diberikan perlakuan terlebih dahulu
lalu kemudian diperiksa. Populasi dalam penelitian ini adalah mahasiswa DIV
Analis Kesehatan semester 7 Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan
Universitas Muhammadiyah Semarang yang berjumlah 9 orang. Teknik sampling
yang digunakan adalah simple random sampling. Analisis data menggunakan uji
statistik Chi-square. Hasil penelitian menunjukkan bahwa hasil makroskopis
semuanya memiliki kriteria baik sementara itu hasil penelitian terhadap morfologi
sel darah merah ditemukan bahwa hasil yang baik lebih banyak terjadi pada suhu
pengeringan 25°C yaitu sejumlah 8 preparat (88,9%) dibandingkan pada suhu
pengeringan 30°C sejumlah 7 preparat (77,8%) ataupun suhu pengeringan 40°C
sejumlah 1 preparat (11,1%). Berdasarkan hasil analisis data menggunakan uji
Chi-square, nilai p-value 0,001 < α (0,05), maka disimpulkan bahwa ada
pengaruh variasi suhu pengeringan preparat apusan darah tepi terhadap hasil
morfologi sel darah merah (Eritrosit).
Kata Kunci : SADT , Makroskopis, Morfologi SDM, Suhu.
iv
http://lib.unimus.ac.id
INFLUENCE OF DRYING TEMPERATURE VARIATION OF
PERIPHERAL BLOOD SMEAR PREPARATION TO
RESULTOF MACROSCOPIC AND RED BLOOD
CELLS MORPHOLOGY (Erythrocyte)
M. Ardi Afriansyah1, Tulus Ariyadi2, Budi Santosa3
1.
Medical Laboratory Study Programe of Nursing and Health Faculty
Muhammadiyah University of Semarang.
2,3.
Molecular Biology Laboratory Faculty of Nursing and Health Muhammadiyah
University of Semarang.
ABSTRACT
Peripheral blood smear is an inspection to calculate and identify varieties of blood
morphology. Blood smears were both macroscopically and microscopically is
really important in assesing succes of blood smear. One of defining factor is
temperature, environment factor like temperature can influence biology activity of
blood. This study purpose to find out is there any or no the influence of drying
temperature variation of peripheral blood smear preparation to result of
macroscopic and red blood cells morphology (erythrocyte). Kind of this study is
experiment that the sample is given treatment first and then be checked.
Population of this study are students DIV medical laboratory 7 semester
Muhammadiyah University of Semarang which amount to 9 student. Sampling
technic is applied simple random sampling. Data analysis is applied statistic test
Chi-square. Result of this study show that all of macroscopic result belong to
good criteria while study result to red blood cells morphology found that better
result which more going to drying temperature 25°C that is amounts 8 preparation
(88,9%) compared to drying temperature 30°C is amounts 7 preparation (77,8%)
or drying temperature 40°C is amount 1 preparation (11,1%). Based on the data
analysis which is applied Chi-square test, score p-value 0,001 < α (0,05), then
concluded that there is influence of drying temperature variation of peripheral
blood smear preparation to result of red blood cells morphology (Erythrocyte).
Keywords : Peripheral Blood Smear, Macroscopic, RBC Morphology,
Temperature.
v
http://lib.unimus.ac.id
vi
http://lib.unimus.ac.id
KATA PENGANTAR
Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan
hidayahnya, sehingga penulis menyelesaikan penyusunan Skripsi yang diajukan
sebagai salah satu syarat untuk menyelesaikan pendidikan Diploma IV ( empat )
Kesehatan bidang Analis kesehatan.
Dalam penyusunan Skripsi, penulis telah banyak mendapat bantuan dari
berbagai pihak untuk itu penulis mengucapkan terimakasih yang sebesar –
besarnya kepada yang terhormat :
1. Tulus Ariyadi, SKM, M.Si selaku Pembimbing I yang telah memberikan
bimbingan dan pengarahan kepada penulis.
2. Dr. Budi Santosa, SKM, M.Si. Med selaku Pembimbing II yang juga telah
membantu dan memberikan petunjuk kepada penulis.
3. Dra. Sri Sinto Dewi, M.Si. Med selaku Ka. Progam D IV Analis Kesehatan
FIKKES Universitas Muhammadiyah Semarang.
4. Bapak, Ibu, kakak, adik yang senantiasa memberikan motivasi, dukungan dan
doa selama proses penyusunan skripsi ini.
5. Teman – teman mahasiswa seangkatan yang menempuh pendidikan D IV
Analis Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang.
6. Semua pihak yang telah membantu yang tidak dapat penulis sebutkan satu
persatu.
Diharapkan semoga Skripsi ini dapat bermanfaat bagi penulis khususnya
dan pembaca pada umumnya.
Semarang, 12 Juli 2016
Penyusun
vii
http://lib.unimus.ac.id
DAFTAR ISI
Halaman
Halaman Judul ............................................................................................. i
Halaman Persetujuan ... ............................................................................... ii
Halaman Pengesahan ................................................................................... iii
Abstrak ........................................................................................................... iv
Surat Pernyataan Originalitas .................................................................... vi
Kata Pengantar ............................................................................................. vii
Daftar Isi ..................................................................................................... viii
Daftar Tabel................................................................................................... x
Daftar Gambar ............................................................................................. xi
Daftar Lampiran . ......................................................................................... xii
BAB I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang ........................................................................................ 1
1.2. Perumusan Masalah ................................................................................. 3
1.3. Tujuan Penelitian ..................................................................................... 3
1.4. Manfaat Penelitian ................................................................................... 3
1.5. Orisinalitas Penelitian ............................................................................. 4
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Darah ..................................................................................................... 5
2.2. Sel Darah Merah ..................................................................................... 5
2.2.1. Kelainan Ukuran .................................................................................. 6
2.2.2. Kelainan Bentuk ................................................................................... 7
2.2.3. Kelainan Warna .................................................................................... 10
2.3. Pemeriksaan Laboratorium ..................................................................... 11
2.3.1. Sediaan Apus Darah Tepi ..................................................................... 11
2.3.2. Pewarnaan Sediaan Darah .................................................................... 14
2.3.3. Pengecatan Giemsa .............................................................................. 15
2.4. Suhu ..................................................................................................... 16
2.5. Tehnik Pembacaan Preparat Apusan Darah ............................................ 17
2.6. Kerangka Teori ........................................................................................ 18
2.7. Kerangka Konsep .................................................................................... 18
2.8. Hipotesis .................................................................................................. 18
BAB III. METODE PENELITIAN
3.1. Jenis Penelitian ........................................................................................ 19
3.2. Waktu dan Tempat Penelitian ................................................................. 19
3.3. Populasi dan Sampel ............................................................................... 19
3.4. Tehnik Pengumpulan Data ...................................................................... 20
3.5. Variabel Penelitian .................................................................................. 20
3.6. Rancangan Penelitian ............................................................................... 21
3.7. Definisi Operational ................................................................................. 21
3.8. Alur Penelitian ........................................................................................ 22
3.9. Alat dan Bahan ......................................................................................... 22
3.9.1. Alat ..................................................................................................... 22
viii
http://lib.unimus.ac.id
3.9.2. Bahan ....................................................................................................
3.10. Prosedur Penelitian.................................................................................
3.10.1. Pengambilan Darah Vena ...................................................................
3.10.2. Pembuatan Sediaan Apus Darah Tepi ................................................
3.10.3. Prosedur Pewarnaan ...........................................................................
3.11. Analisis Data .........................................................................................
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1. Gambaran Umum Sampel .. .....................................................................
4.2. Hasil Penelitian . ..................................................................................... .
4.2.1. Gambar Hasil Pengamatan Makroskopis .......... .......................... .........
4.2.2. Hasil Pengamatan Makroskopis . ......................................................... .
4.2.3. Gambar Hasil Pengamatan Morfologi Eritrosit . ................................. .
4.2.4. Hasil Pengamatan Morfologi Sel Darah Merah . ................................. .
4.3. Pembahasan . ........................................................................................... .
4.3.1. Makroskopis . ....................................................................................... .
4.3.2. Morfologi Sel Darah Merah .. .............................................................. .
4.3.3. Pengaruh Suhu Terhadap Kwalitas Sediaan Apus Darah . .................. .
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN
5.1. Kesimpulan . ........................................................................................... .
5.2. Saran . . ....................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................
LAMPIRAN
ix
http://lib.unimus.ac.id
23
23
23
23
24
24
25
25
25
25
26
27
30
30
30
31
33
34
36
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Orisinalitas Penelitian ........................................................................
Tabel 2. Sebab akibat sediaan apus tidak layak diperiksa ...............................
Tabel 3. Definisi Operational ..........................................................................
Tabel 4. Gambar hasil pengamatan makroskopis . ..........................................
Tabel 5. Hasil Pengamatan makroskopis . .......................................................
Tabel 6. Gambar hasil pengamatan morfologi eritrosit . .................................
Tabel 7. Hasil pengamatan morfologi eritrosit . ..............................................
Tabel 8. Hasil uji Chi Square pengaruh variasi suhu pengeringan
terhadap Morfologi Eritrosit . ............................................................
x
http://lib.unimus.ac.id
4
13
21
25
26
27
28
30
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Microcyte ........................................................................................ 6
Gambar 2. Macrocyte ....................................................................................... 6
Gambar 3. Sferosit ............................................................................................ 7
Gambar 4. Achantocyte .................................................................................... 7
Gambar 5. Burrcell........................................................................................... 8
Gambar 6. Sel Krenasi .................................................................................... 8
Gambar 7. Eliptosit .......................................................................................... 9
Gambar 8. Stomatosit ....................................................................................... 9
Gambar 9. Leptosit ........................................................................................... 9
Gambar 10. Sickle Cell .................................................................................... 10
Gambar 11. Hipokrom ...................................................................................... 11
Gambar 12. Anulosit......................................................................................... 11
Gambar 13. Kerangka Teori ............................................................................. 18
Gambar 14. Kerangka Konsep ........................................................................ 18
Gambar 15. Alur Penelitian ............................................................................. 22
Gambar 16. Hasil morfologi sel darah merah berdasarkan suhu
pengeringan ................................................................................. 29
xi
http://lib.unimus.ac.id
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Hasil pengamatan makroskopis ................................................... 37
Lampiran 2. Hasil pengamatan morfologi sel darah merah ............................. 37
Lampiran 3. Hasil uji statistik Chi-square........................................................ 38
xii
http://lib.unimus.ac.id
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Pemeriksaan darah rutin seperti hitung jenis sel darah dapat dimanfaatkan
untuk menentukan karakteristik morfologi darah. Hitung jenis ini dilakukan
dengan prosedur tertentu yaitu mengoleskan setetes darah vena atau kapiler
setelah itu dengan hati-hati ditipiskan diatas object glass (kaca obyek) kemudian
dilakukan pengecatan dengan giemsa/wright. Pemeriksaan ini disebut sediaan
apus darah tepi (D’Hiru 2013).
Sediaan apus darah tepi merupakan suatu pemeriksaan untuk menghitung
jenis dan mengidentifikasi morfologi darah. Sediaan apus darah tepi adalah slide
yang salah satu sisinya dilapisi dengan lapisan tipis darah dan diwarnai dengan
pewarnaan giemsa atau wright, kemudian diperiksa dibawah mikroskop. Preparat
terlebih dahulu difiksasi menggunakan methanol kemudian dilakukan pengecatan
giemsa (Houwen, Berend 2000).
Sediaan apus darah tepi yang baik secara makroskopis dan mikroskopis
sangat penting dalam menilai keberhasilan dalam pembuatan sediaan apus darah
tepi. Secara makroskopis, bentuk dan tampilan preparat merupakan hal yang
penting untuk diperhatikan, sediaan kering yang tipis dan telah dipulas
memungkinkan untuk mempelajari keadaan sel darah. Salah satu faktor penentu
dalam hal ini yaitu teknik pembuatan sediaan apus darah serta faktor-faktor
lainnya seperti suhu.
1
http://lib.unimus.ac.id
2
Menurut penelitian yang dilakukan oleh Koko Putro Pamungkas, (2014).
lamanya waktu fiksasi memberi pengaruh terhadap bentuk sel darah merah.
Penelitian lain yang dilakukan oleh Maryo Vegas Carascollo, (2012). kualitas
pewarnaan sediaan apus darah tepi tidak memberi pengaruh terhadap morfologi
sel darah merah.
Faktor lingkungan seperti suhu dan kelembaban dapat mempengaruhi
suatu pemeriksaan yang berhubungan dengan cairan tubuh salah satunya sediaan
apus darah tepi (Kiswari R, 2014). Sediaan apus darah hendaknya cepat
mengering pada kaca obyek, sediaan yang lambat mengering akan menyebabkan
perubahan pada morfologi eritrosit. Pengeringan yang normal yaitu preparat
apusan darah dibiarkan kering diudara kemudian dilakukan pengecatan
(Gandasoebrata R, 2007). Pengeringan menggunakan suhu tinggi dapat
menyebabkan sel darah merah menjadi rusak, yaitu pecahnya membran sel
eritrosit yang disebabkan oleh pemanasan, apabila membran sel eritrosit pecah
maka cairan yang terdapat didalam eritrosit akan keluar sel sehingga sel
mengalami krenasi yang menyebabkan sel berkeriput karena kekurangan air
(Masters, 2002). Suhu merupakan salah satu faktor yang dapat mempengaruhi
aktivitas sel darah terutama mengatur aktivitas biologis sel darah (Ramadhani,
2011).
Faktor suhu sering dianggap tidak penting oleh beberapa tenaga
laboratorium misalnya dirumah sakit atau laboratorium dengan banyaknya
permintaan dan sampel pemeriksaan untuk pembuatan sediaan apus darah yang
mengharuskan untuk mengeluarkan hasil pemeriksaan secepatnya sehingga
http://lib.unimus.ac.id
3
memungkinkan untuk mengeringkan preparat tanpa memperhatikan mengenai
suhu. Faktor inilah yang melatar belakangi penulis untuk melakukan penelitian
tentang pengaruh variasi suhu pengeringan preparat apusan darah tepi terhadap
hasil makroskopis dan morfologi sel darah merah (Erythrocyte).
1.2. Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang diatas dapat dirumuskan suatu permasalahan
yaitu bagaimanakah “Pengaruh variasi suhu pengeringan preparat apusan darah
tepi terhadap hasil makroskopis dan morfologi sel darah merah (Erythrocyte).
1.3. Tujuan Penelitian
1.3.1. Tujuan Umum
Mengetahui pengaruh variasi suhu pengeringan preparat apusan darah tepi
terhadap hasil makroskopis dan morfologi sel darah merah (Erythrocyte).
1.3.2. Tujuan Khusus
a. Mengidentifikasi secara makroskopis sediaan apus darah tepi dengan suhu
pengeringan 25°C, 30°C dan 40°C.
b. Mengidentifikasi gambaran morfologi sel darah merah pada sediaan apus darah
tepi dengan suhu pengeringan 25°C, 30°C dan suhu 40°C.
c. Menganalisis pengaruh suhu ruang (25°C), 30°C dan 40°C terhadap kwalitas
makroskopis dan morfologi sel darah merah (Erythrocyte) sediaan apus darah
tepi.
http://lib.unimus.ac.id
4
1.4. Manfaat Penelitian
1. Penambah wawasan bagi penulis dan tenaga laboratorium tentang pengaruh
variasi suhu pengeringan preparat apus darah terhadap hasil makroskopis dan
morfologi sel darah merah (Erythrocyte).
2. Penambah referensi bagi pengembangan ilmu pengetahuan dan teknologi
khususnya dibidang hematologi yaitu perbedaan hasil makroskopis dan
morfologi sel darah merah (Erythrocyte) sediaan apus darah terhadap variasi
suhu pengeringan preparat.
1.5. Orisinalitas Penelitian
Tabel 1. Orisinalitas Penelitian
No
Peneliti, Penerbit,
Judul Penelitian
Hasil Penelitian
Tahun terbit
1
Koko Putro
Pamungkas, 2014
2
Maryo Vegas
Carascollo, 2012
Gambaran Morfologi
Eritrosit Dengan
Perbandingan Lama
Fiksasi.
Perbedaan Hasil
Pewarnaan Giemsa dan
Wright Terhadap
Morfologi Eritrosit dan
Kualitas Cat Pada
Preparat Darah Apus.
Perbandingan
lama
fiksasi
memberi pengaruh pada kelainan
bentuk eritrosit tetapi tidak pada
warna dan ukuran.
Cat giemsa memiliki kualitas
pewarnaan
lebih
baik
dibandingkan cat wright, dan
tidak mempengaruhi morfologi
eritrosit.
Perbedaan dengan penelitian-penelitian sebelumnya adalah pada penelitian
ini memperhatikan mengenai gambaran makroskopis dan morfologi sel darah
merah pada sediaan apus darah tepi dengan menggunakan variasi suhu
pengeringan preparat yaitu suhu ruang (25°C ), 30°C dengan suhu 40°C.
http://lib.unimus.ac.id
5
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Darah
Darah merupakan gabungan cairan, sel-sel dan partikel yang menyerupai
sel, yang mengalir dalam arteri, kapiler dan vena yang mengirirm oksigen dan zatzat gizi ke jaringan dan membawa karbondioksida dan hasil limbah lainnya.
Sebagian besar darah merupakan cairan (plasma), yang mengandung garam-garam
terlarut dan protein. Protein utama dalam plasma adalah albumin. Protein lainnya
adalah antibodi (imunoglobulin) dan protein pembekuan. Selain itu plasma juga
mengandung hormon-hormon, elektrolit, lemak, gula, mineral dan vitamin.
Komponen sel darah terdiri dari eritrosit, leukosit dan trombosit (Kusumawardani
E, 2010).
2.2. Sel Darah Merah
Morfologi sel darah merah terdiri dari bentuk, warna, ukuran dapat diamati
pada sediaan apus dengan pewarnaan Giemsa / Wright / lainnya. Bentuk normal
bikonkaf dengan diameter 6–8 μm dan berwarna kemerah-merahan. Eritrosit
normal berukuran sama dengan inti limfosit kecil pada sediaan apus. Kelainan
morfologi eritrosit berupa kelainan ukuran (size), kelainan bentuk (shape),
kelainan warna (staining characteristics), dan benda-benda inklusi.
http://lib.unimus.ac.id
5
6
Berikut merupakan penyimpangan morfologi pada sel darah merah :
2.2.1. Kelainan Ukuran
Istilah umum yang digunakan dalam hematologi untuk menunjukkan suatu
variasi dalam hal ukuran sel disebut anisositosis. Anisositosis tanpak jelas pada
anemia berat. Anisositosis terdiri makrositosis, mikrositosis.
Contoh kelainan ukuran :
1. Microcyte : Eritrosit lebih kecil daripada ertirosit normal, dengan ukuran
<6μm.
Gambar 1. Microcyte
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
2. Macrocyte : Eritrosit lebih besar daripada eritrosit normal, dengan ukuran >
8μm.
Gambar 2. Macrocyte
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
3. Sferosit : Eritrosit lebih kecil, lebih bulat, dan lebih padat warnanya dari pada
ertrosit normal serta tidak didapat bagian yang pucat ditengah sel.
http://lib.unimus.ac.id
7
Gambar 3. Sferosit
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
2.2.2. Kelainan Bentuk
Istilah umum dari hematologi yang digunakan untuk menunjukan suatu
variasi bentuk disebut poikilositosis. Poikilositosis dapat bervariasi dalam
beberapa bentuk, seringkali menyerupai benda-benda seperti telur, pensil dan air
mata, nama spesifik untuk jenis ini meliputi akantosit sel lepuh, sel duri,
erytrhocyte crenation, echinocyte, eliptocyte, ceratocyte, ovalocyte, pikmocyte,
schistocyte, sel sabit, eritrosit berspikula, sverocyte, stomatocyte, sel target, dan
sel air mata.
Contoh kelainan bentuk :
1. Achantocyte : ditandai dengan adanya proyeksi halus dipermukaan eritrosit,
menyerupai duri (kata yunani : achanta : duri). Kelainan bawaan yang jarang :
acanthtocytosis, bisa mencapai lebih dari 50%.
Gambar 4. Achantocyte
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
http://lib.unimus.ac.id
8
2. Burr cell : menunjukkan proyeksi-proyeksi atau tonjolan-tonjolan pendek
misalnya pada uremia dan carsinomatosis. Bedakan dengan achantosit dan sel
krenasi (artefak).
Gambar 5. Burr cell
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
3. Sel Krenasi : merupakan kelainan bentuk dari eritrosit (poikilositosis) yang
berbentuk seperti artefak. Suhu yang panas dapat menyebabkan membran sel
eritrosit pecah sehingga sel mengalami pengerutan yang disebut krenasi akibat
cairan yang berada di dalam sel keluar melalui membran (Masters, 2002).
Morfologi krenasi dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor, misalnya terjadinya
kesalahan pada prosedur pemeriksaan pra-analitik (Nugraha G, 2015).
Gambar 6. Sel krenasi
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
4. Eliptosit: bentuk seperti elip atau oval, juga disebut ovalosit. Bila ada dalam
jumlah yang besar mungkin disebabkan karena anomali bawaan, ovalositosis.
http://lib.unimus.ac.id
9
Gambar 7. Eliptosit
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
5. Stomatosit : bentuk seperti topi meksiko. Pusatnya tidak hipokrom tetapi
berwarna merah.
Gambar 8. Stomatosit
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
6. Leptosit : disebut juga sel target karena dibagian tengah eritrosit yang pucat
terdapat lingkaran berwarna merah dipusat eritrosit.
Gambar 9. Leptosit
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
7. Poikilositosit: bentuk tidak rata. Tergolong disini : sel burr, sel buah jambu,
dan sebagainya.
http://lib.unimus.ac.id
10
8. Sickle cell : bentuk sabit. Berwarna lebih padat daripada eritrosit biasa. Didapat
pada anemia hemolitik sabit.
Gambar 10. Sickle cell
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
9. Schitosit : hasil fragmentasi eritrosit, bisa berbentuk segitiga, elips dengan
indentasi atau sebagai sel dengan permukaan tidak rata. Biasanya didapat pada
anemia hemolitik.
2.2.3. Kelainan Warna
Eritrosit normal memiliki penampilan berwarna merah dengan bagian
pusat berwarna lebih terang (pucat) ketika diwarnai dengan pewarnaan
konvensional. Warna merah merupakan refleksi banyaknya hemoglobin dalam sel
(Kiswari R, 2014). Kelainan warna juga bisa terjadi pada waktu pemeriksaan
sediaan apus darah yang bisa dipengaruhi oleh cat giemsa karena cat geimsa yang
diencerkan harus langsung digunakan jika disimpan dengan tidak baik maka akan
mempengruhi
hasil
pengamatan.
Penurunan
sintesa
hemoglobin
bisa
menyebabkan hipokrom serta peningkatan sintesa hemoglobin bisa menyebabkan
hiperkrom. Hemoglobin sangat berpengaruh terhadap warna karena yang memberi
warna pada sel darah merah adalah hemoglobin dengan bantuan zat besi didalam
tubuh.
http://lib.unimus.ac.id
11
Contoh kelainan warna :
1. Hipokrom : warna pucat pada bagian tengah, eritrosit lebih besar dari biasanya.
Gambar 11. Hipokrom
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
2. Polikromasia : mengikat zat warna asam sehingga disamping warna merah ada
kebiru-biruan. Pematangan sitoplasma lebih lambat dibadingkan pematangan
inti.
3. Anulosit : diameter cekungan ditengah eritrosit yang berwarna lebih pucat dari
darah tepi, berukuran besar (sel hipokrom ekstrim).
Gambar 12. Anulosit
(Sumber : Koko Putro Pamungkas, 2014)
2.3. Pemeriksaan Laboratorium
2.3.1. Sediaan Apus Darah
Pemeriksaan sediaan apus darah merupakan suatu pemeriksaan untuk
menilai berbagai macam unsur sel darah tepi seperti eritrosit, leukosit, dan
trombosit, selain itu juga mancari adanya parasit seperti malaria, plasmodium.
http://lib.unimus.ac.id
12
Dasar dari pemeriksaan Romanowsky adalah penggunaan dua zat warna
yang berbeda yaitu Azur B (Trimetiltionin) yang bersifat basa dan eosin y
(tetrabromoflurescein) yang bersifat asam. Azur B akan mewarnai komponen sel
yang bersifat asam seperti kromatin, DNA dan RNA sedangkan eosin yang akan
mewarnai komponen sel yang bersifat basa seperti granula eosinofil dan
hemoglobin. Ikatan eosin pada Azur B yang beragregasi dapat menimbulkan
warna ungu, dan keadaan ini dikenal sebagai efek Romanowsky giemsa. Efek ini
terjadi sangat nyata pada DNA tetapi tidak pada RNA sehingga menimbulkan
kontras antara inti yang berwarna ungu dengan sitoplasma yang berwarna biru
(Kiswari R, 2014).
Apusan darah tepi sangat penting dalam bidang hematologi, karena dari
apusan darah tepi inilah kita akan mendapatkan banyak informasi, bukan saja
berkaitan dengan morfologi sel darah, tetapi juga dapat memberi petunjuk
keadaan hemalogik yang semula tidak diduga. Prerapat AD yang layak untuk
diperiksa, harus memenuhi beberapa persyaratan yang telah ditetapkan (Kiswari
R, 2014).
Menurut Kiswari R, (2014). Apusan darah yang baik secara visual, ada
beberapa persyaratan yang harus dipenuhi untuk membuat apusan darah tepi yang
baik secara visual, diantaranya yaitu:
1. Ketebalanya gradual, paling tebal di daerah kepala, makin menipis kearah ekor
(pada saat proses pengeringan dimulai dari bagian ekor menuju ke kepala).
2. Apusan tidak melampaui atau menyentuh pinggir kaca obyek.
3. Tidak bergelombang atau tidak terputus-putus.
http://lib.unimus.ac.id
13
4. Tidak berlubang-lubang
5. Bagian ekornya tidak membentuk “bendera robek”
6. Panjang apusan kira-kira 2/3 panjang kaca obyek.
Menurut Kiswari R, (2014). Untuk mendapatkan apusan darah yang baik
atau memenuhi syarat diperlukan latihan terus-menerus. Pertanyaan mengenai
berapa besar tetesan, bagaimana membuat sudut apusan, berapa geseran,
kecepatan geseran, dan sebagainya, akan terjawab dengan sendirinya bila kita
telah benar-benar terampil membuat apuasan darah. Beberapa sebab dan akibat
yangtimbul sehingga apusan darah menjadi tidak layak untuk diperiksa.
Tabel 2. Sebab akibat sediaan apus tidak layak diperiksa
No
Sebab
1
Pemeriksaan ditunda setelah sempel
berhasil diambil
Lambat melakukan apusan setelah
darah diteteskan pada kaca objek
2
3
4
5
6
7
8
Akibat
Kaca objek kotor
Tetesan terlalu banyak atau terlalu
sedikit.
Sudut geseran terlalu besar atau
terlalu kecil
Geseran telalu lambat
Tekanan spreader pada kaca obyek
tidak akurat
Kelembaban ruang
Distorsi atau kerusakan sel-sel darah.
Terjadi disproporsi sel-sel yang berukuran besar
seperti monosit dan neutrofil pada “feather
edge”.
Bintik-bintik pada apusan.
Apusan terlalu tebal dan panjang atau tipis dan
pendek.
Bila sudut terlalu besar, maka apusan terlalu
tebal; dan bila sudut terlalu kecil, maka apusan
akan terlalu panjang.
Penyebaran sel tidak baik.
Tekanan yang terlalu kuat akan menyebabkan
apusa terlalu tipis
Kelembaban yang tinggi dapat menyebabkan
apusan lama menjadi kering. Pengeringan yang
lama mengakibatkan eritrosit rusak.
Sediaan kering yang tipis dan telah dipulas memungkinkan untuk
mempelajari morfologi parasit dan keadaan sel darah. Sediaan ini memberikan
suatu kemungkinan untuk membedakan morfologi sel darah dan lebih dapat
http://lib.unimus.ac.id
14
dipercaya daripada sediaan yang tebal. Teknik pembuatan sediaan baik pada kaca
tutup, sama seperti penelitian parasitologi.
2.3.2. Pewarnaan Sediaan Darah
Macam-macam pewarnaan menurut Romanowsky ada 4 yaitu Pewarnaan
Wright, Pewarnaan Liesman, Pewarnaan May Grunwald, dan Pewarnaan Giemsa.
Prinsip pengecatan preparat darah yaitu sediaan apus darah difiksasi dengan
methanol selama 5 menit dan digenangi dengan zat warna giemsa yang sudah
diencerkan dibiarkan 20 menit setelah itu dibilas dengan air keran dan dibiarkan
sampai mengering (Gandasoebrata R,2007).
Menurut J. Samidja Onggowaluyo (2001). Kriteria pembuatan dan
pewarnaan sediaan darah yang baik, yaitu :
a. Inti leukosit berwarna ungu (tanda umum)
b. Trombosit berwarna ungu muda dan merah muda
c. Sisa-sisa eritrosit muda berwarna biru atau biru muda
d. Sitoplasma limfosit kelihatan biru pucat
e. Sitoplasma monosit berwarna biru
f. Granula eosinofil berwarna orange
g. Latar belakang sediaan bersih dan kelihatan biru pucat.
Faktor yang menentukan mutu pewarnaan giemsa antara lain :
a. Kualitas giemsa baik tidak tercemar air, pengenceran giemsa dengan
perbandingan tepat
b. Waktu pewarnaan dan fiksasi
c. Ketebalan pewarnaan, kebersihan sediaan
http://lib.unimus.ac.id
15
2.3.3. Pengecatan Giemsa
Giemsa adalah zat warna yang terdiri dari eosin dan metilen biru. Eosin
memberi warna merah muda pada sitoplasma dan metilen biru memberi warna
biru pada inti. Zat warna ini dilarutkan dengan metil alkohol dan gliserin
kemudian dikemas dalam botol coklat (100 – 500 – 1000 cc) dan dikenal sebagai
giemsa stock. Giemsa stok harus diencerkan lebih dulu sebelum dipakai untuk
mewarnai sel darah. Elemen-elemen zat warna giemsa meralut selama 40 – 90
menit dengan aquadest atau buffer. Setelah itu semua elemen zat warna akan
mengendap dan sebagian lagi balik kepermukaan membentuk lapisan tipis seperti
minyak, oleh karena itu stok giemsa tidak boleh tercemar air (Kiswari R, 2014).
Pedoman Pemakaian Giemsa
1. Giemsa stok baru boleh diencerkan dengan aquades, buffer, atau air sesaat
akan digunakan agar diperoleh efek pewarnaan yang optimal.
2. Mengencerkan giemsa sebanyak yang dibutuhkan, sebab bila berlebihan
terpaksa harus dibuang.
3. Mengambil stok giemsa dari botol, gunakan pipet khusus agar stok giemsa
tidak tercemar.
4. Metanol dapat menarik air dari udara, sebab itu stok giemsa harus ditutup rapat
dan tidak boleh sering dibuka. Pisahkan giemsa dibotol tetes atau botol dari
stok.
5. Tolak ukur sebagai dasar perhitungan :
a. 1cc = 20 tetes
b. Seluruh permukaan kaca sediaan dapat ditutupi cairan sebanyak 1cc.
http://lib.unimus.ac.id
16
c. Berdasarkan tolak ukur ini dapat dihitung banyaknya giemsa enceryang
harus dibuat sesuai dengan kebutuhan terutama bila melakukan pewarnaan.
6. Takaran pewarnaan
Pewarnaan individu dilakukan pada stock giemsa 1tetes tambah
pengenceran sepuluh tetes dengan lama pewarnaan15 – 20 menit(giemsa 10%)
atau stok giemsa 1 tetes ditambah pengencer 1 cc denganlama pewarnaan 45 –
60 menit.
7. Gunakan air/ buffer pengencer dengan pH 7
2.4. Suhu
Faktor lingkungan seperti suhu dan kelembaban dapat mempengaruhi
suatu pemeriksaan yang berhubungan dengan cairan tubuh salah satunya sediaan
apus darah tepi (Kiswari R, 2014). Faktor suhu dan kelembaban dapat
menyebabkan lambatnya proses pengeringan pada sediaan apus darah yang dapat
menyebabkan perubahan morfologi pada eritrosit (Gandasoebrata R, 2007).
Pengeringan preparat befungsi agar darah pada kaca obyek kering. Pengeringan
yang optimal akan meyebabkan darah melekat kuat sehingga yakin bahwa sel-sel
didalamnya strukturnya tetap normal (Koko Putro Pamungkas, 2014).
Suhu merupakan salah satu faktor yang dapat mempengaruhi aktivitas sel
darah terutama dalam mengatur aktivitas biologis sel darah (Ramadhani, 2011).
Pengeringan menggunakan suhu tinggi seperti suhu 30°C dan 40°C dapat
menyebabkan perubahan pada morfologi sel didalamnya. Suhu 30°C dan 40°C
merupakan suhu yang cenderung panas, kondisi lingkungan yang panas dapat
menyebabkan darah menjadi hemolisis. Hemolisis yaitu pecahnya membran sel
http://lib.unimus.ac.id
17
eritrosit yang disebabkan oleh pemanasan sehingga menyebabkan kelainan
morfologi. Pengeringan menggunakan suhu tinggi dapat menyebabkan sel darah
merah menjadi rusak, yaitu pecahnya membran sel eritrosit yang disebabkan oleh
pemanasan, apabila membran sel eritrosit pecah maka cairan yang terdapat
didalam eritrosit akan keluar sel sehingga sel mengalami krenasi yang
menyebabkan sel berkeriput karena kekurangan air (Masters, 2002). Suhu yang
terlalu rendah dapat menyebabkan perubahan yang jelas terhadap morfologi
eritrosit seperti kehadiran echinocytes dan spheronocytes. Kondisi penyimpanan
darah yang berbeda dapat mempengaruhi secara mikroskopis sel darah seperti
kehadiran sel krenasi (T. Wagner et. al., 2014).
2.5. Teknik Pembacaan Preparat Apusan Darah
Faktor penilaian sediaan apus yang benar diperlukan preparat sediaan apus
yang memenuhi kriteria yang baik antara lain lebar, panjang tidak memenuhi
seluruh kaca obyek, ketebalannya gradual, tidak berlubang, tidak terputus-putus
dan memiliki pengecatan yang baik. Preparat darah apus yang baik memiliki tiga
bagian yaitu kepala, badan dan ekor. Bagian badan terdiri dari enam zona sampai
ekor. Pembacaan preparat apusan darah dapat dilakukan pada bagian atas dan
bawah pada zona IV sampai VI yang dekat dengan bagian ekor. Teknik
pembacaan merupakan salah satu faktor penentu dalam menilai keberhasilan
penilaian sediaan apus darah ( Santosa B, 2010).
http://lib.unimus.ac.id
18
2.5. Kerangka Teori
Darah
Sel Darah Merah
Pemeriksaan Laboratorium
SADT
Visual SADT
Morfologi sel
Suhu
darah merah
Gambar 13. Kerangka Teori Pengaruh Variasi Suhu Pengeringan Preparat Apusan
Darah Terhadap Hasil Makroskopis dan Morfologi Sel Darah Merah
(Erythrocyte).
2.6. Kerangka Konsep
Suhu pengeringan
Hasil Makroskopis
preparat apus darah
(gambaran visual sediaan
menggunakan suhu ruang
apus darah) dan morfologi
(25°C), 30°C dan 40°C.
sel darah merah (eritrosit).
Gambar 14. Kerangka Konsep Pengaruh Variasi Suhu Pengeringan Preparat Apusan
Darah Terhadap Hasil Makroskopis dan Morfologi Sel Darah
Merah (Erythrocyte).
2.7. Hipotesis
Ada pengaruh variasi suhu pengeringan preparat apusan darah tepi
terhadap hasil makroskopis dan morfologi sel darah merah (Erythrocyte).
http://lib.unimus.ac.id
19
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1. Jenis Penelitian
Jenis penelitian ini adalah eksperimen, yaitu sampel diberikan perlakuan
kemudian baru dilakukan pemeriksaan sampel.
3.2. Tempat dan Waktu Penelitian
3.2.1. Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan maret-mei 2016.
3.2.2. Tempat penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Biologi Molekuler Universitas
Muhammadiyah Semarang.
3.3. Populasi dan Sampel
3.3.1. Populasi
Populasi dalam penelitian ini adalah seluruh mahasiswa D IV Analis
Kesehatan semester tujuh FIKKES UNIMUS.
3.3.2. Sampel
Sampel dalam penelitian ini adalah mahasiswa D IV Analis Kesehatan
semester tujuh FIKKES UNIMUS yang berjumlah sembilan orang yang dipilih
secara acak dengan teknik sampling menggunakan Simple Random Sampling.
Banyaknya sampel diperoleh dari hasil perhitungan dengan menggunakan rumus
( t - 1 ) ( r – 1 ) ≥ 15 dimana t adalah perlakuan dan r adalah besar sampel. Berikut
adalah rumusan yang digunakan :
19
http://lib.unimus.ac.id
20
( t - 1 ) ( r – 1 ) ≥ 15
( 3 - 1 ) ( r – 1 ) ≥ 15
( 2 ) ( r – 1 ) ≥ 15
2r ≥ 17
r ≥9
Jadi jumlah sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebanyak
sembilan sampel. Sedangkan jumlah pengulangan yang akan diteliti adalah:
Total pengulangan = jumlah sampel × perlakuan
=9×3
= 27 kali pengulangan
Jadi jumlah pengulangan yang akan diteliti adalah sebanyak 27 kali pengulangan.
3.4. Teknik Pengumpulan Data
Data diambil dari data primer, data tersebut diambil dari hasil pemeriksaan
sediaan apus darah tepi yang dilakukan di Laboratorium Biologi Molekuler
Universitas Muhammadiyah Semarang.
3.5. Variabel Penelitian
3.5.1. Variabel Bebas
Variabel bebas dalam penelitian ini adalah variasi suhu pengeringan
preparat apusan darah tepi dengan menggunakan suhu ruang (25°C), 30°C dan
40°C.
3.5.2. Variabel Terikat
Variabel
terikat
dalam
penelitian
ini
adalah
hasil
makroskopis dan morfologi sel darah merah sediaan apus darah tepi.
http://lib.unimus.ac.id
pemeriksaan
21
3.6. Definisi Operasional
Tabel 3. Definisi Operasional
No
Variabel Penelitian
Definisi Operasional
Skala
Data
Nominal
1
Variasi suhu
pengeringan preparat
apus darah tepi
Variasi suhu pengeringan preparat dengan
menggunakan suhu ruang (25°C), 30°C dan
40°C. Setelah sediaan apus darah dibuat lalu di
keringkan menggunakan suhu ruang (25°C)
yang dikeringkan langsung pada ruangan yang
telah diatur suhunya menjadi 25°C, kemudian
30°C dan 40°C, suhu ini dikendalikan dengan
menggunakan alat inkubator.
2
Makroskopis sediaan
apus darah tepi
Makroskopis sediaan apus darah tepi yaitu
gambaran visual terhadap bentuk dan tampilan
SADT. Makroskopis dalam hal ini antara lain
darah pada kaca
Obyek kering merata, tidak pecah-pecah, tidak
terkelupas. Penilaian dilakukan sebelum
preparat diwarnai.
Kriteria penilaian :
Baik = Darah pada kaca obyek tidak terkelupas,
tidak pecah-pecah, kering merata.
Buruk = Darah pada kaca obyek terkelupas,
pecah-pecah.
Nominal
3
Morfologi Eritrosit
Gambaran terhadap morfologi eritrosit yang
dilihat menggunakan mikroskop perbesaran
100x. Penilaian sebelum preparat diwarnai.
Kriteria Penilaian :
Baik : tidak ditemukan kelainan morfologi
krenasi.
Buruk : ditemukan kelainan mofologi krenasi.
Nominal
http://lib.unimus.ac.id
22
3.7. Alur Penelitian
Sampling darah vena
+ antikoagulan EDTA
Pembuatan apusan
darah pada kaca obyek
Pengeringan preparat
Pengeringan preparat
Pengeringan preparat
apusan darah
apusan darah pada
apusan darah
menggunakan suhu 30°C
suhu 25°C
menggunakan suhu 40°C
Pengamatan makroskopis
dan morfologi sel darah
merah (Erythrocyte)
Hasil dan Analisis Data
Gambar 15. Alur Penelitian
http://lib.unimus.ac.id
23
3.8. Alat dan Bahan
3.8.1. Alat
Spuit 3 ml, tourniquet, hepafiks, kapas alkohol, tabung reaksi, rak tabung
reaksi, object glass, deck glass, micropipet 10 μ, yellow tip, spreader / kaca
penggeser, mangkok, mikroskop.
3.8.2. Bahan
Darah vena dengan antikoagulan EDTA, Alkohol 70%.
3.9. Prosedur Penelitian
3.9.1. Pengambilan Darah Vena
1. Mengatur posisi pasien, pasang torniquet, dan minta pasien untuk mengepalkan
tangannya.
2. Memilih vena, buka tahanan torniquet, minta pasien untuk membuka kepalan
tangannya
3. Melepaskan torniquet. Disinfektan daerah situs
4. Mengulangi pemasangan torniquet, siapkan jarum suntik.
5. Menusuk daerah yang ditentukan dengan mendorong barrel jarum suntik.
6. Menghisap darah dengan menarik pluger. Pasang kasa steril di atas tusukan,
tarik jarum dari tusukan.
7. Menekan kasa steril, terapkan plester di atas kasa.
8. Membuang jarum ke dalam kontainer benda tajam.
http://lib.unimus.ac.id
24
3.9.2. Pembuatan Sediaan Apus Darah Tepi
1. Mengatur suhu inkubator terlebih dahulu pada suhu 30°C dan 40°C.
2. Darah EDTA diteteskan sebanyak 10µl pada kaca obyek disalah satu sisi 1 cm
dari tepi.
3. Meletakkan kaca penggeser didepan tetesan darah dengan membentuk sudut
45°
4. Mempertahankan posisi penggeser pada 45°, kemudian menarik mundur
menyentuh darah, darah melebar sepanjang tepi lalu mendorong ke depan
dengan cepat penggeser pada posisi 45° dan setelah mencapai kepanjangan 2,5
cm gerakan mendorong selesai dengan jalan mengangkat penggeser sehingga
terlepas dari persentuhan dengan kaca obyek, kemudian
5. Mengeringkan preparat pada inkubator menggunakan suhu 30°C dan 40°C dan
pada suhu ruang, tunggu sampai preparat mengering,
6. Mengeluarkan preparat dari inkubator
3.9.3. Prosedur Pengamatan
1. Melakukan pengamatan makroskopis dengan melihat bentuk dan tampilan
sediaan apus darah tepi.
2. Melakukan pengamatan morfologi sel darah merah menggunakan mikroskop
perbesaran obyektif 100 X pada zona IV sampai IV.
3.10. Analisis Data
Data yang diambil adalah data primer dari hasil pemeriksaan. Data yang
diperoleh disajikan dalam bentuk tabel kemudian dianalisa secara statistik
menggunakan uji Chi Square.
http://lib.unimus.ac.id
25
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1. Gambaran Umum Sampel
Sampel diambil dari mahasiswa DIV Analis Kesehatan semester tujuh
Universitas Muhammadiyah Semarang yang berjumlah sembilan orang. Darah
diambil sebanyak 1 ml kemudian dimasukkan kedalam tabung yang berisi
antikoagulan EDTA lalu diberi label, sampel tersebut digunakan untuk membuat
sediaan apus darah kemudian dikeringkan pada suhu ruang (25°C), 30°C dan
40°C kemudian diperiksa. Penilaian preparat apusan darah dalam penelitian ini
adalah dengan melihat makroskopis yaitu tampilan sediaan apusan darah dan
mikroskopis yaitu morfologi sel darah merah (eritrosit).
4.2. Hasil Penelitian
4.2.1. Gambar Hasil Pengamatan Makroskopis
Tabel 4. Gambar Hasil Pengamatan Makroskopis
Suhu 25°C
Keterangan
Kriteria Baik :
Darah pada kaca obyek kering
merata, tidak pecah-pecah, tidak
terkelupas.
25
http://lib.unimus.ac.id
26
Suhu 30°C
Keterangan
Kriteria Baik :
Darah pada kaca obyek kering
merata, tidak pecah-pecah, tidak
terkelupas.
Suhu 40°C
Keterangan
Kriteria Baik :
Darah pada kaca obyek kering
merata, tidak pecah-pecah, tidak
terkelupas.
4.2.2. Hasil Pengamatan Makroskopis
Tabel 5. Hasil Pengamatan Makroskopis berdasarkan suhu 25°C, 30°C, 40°C
Suhu
25°C
30°C
40°C
Makroskopis
Baik
9
9
9
Buruk
0
0
0
Berdasarkan hasil pengamatan makroskopis terhadap sembilan sampel
(tabel 5) ditemukan bahwa preparat apusan darah dengan pengeringan
menggunakan suhu ruang 25°C, 30°C dan 40°C menunjukkan hasil yang sama,
yaitu semua sampel memiliki kriteria baik antara lain darah pada kaca byek kering
merata, tidak pecah-pecah dan tidak terkelupas untuk semua variasi suhu
pengeringan baik pada suhu 25°C, 30°C maupun suhu 40°C.
http://lib.unimus.ac.id
27
4.2.3. Gambar Hasil Pengamatan Morfologi Eritrosit
Tabel 6. Gambar Hasil Pengamatan Makroskopis
Suhu 25°C
Keterangan
Kriteria Baik :
Tidak ditemukan kelainan morfologi krenasi.
Suhu 30°C
Keterangan
Kriteria Baik :
Tidak ditemukan kelainan morfologi krenasi.
Suhu 40°C
Keterangan
Kriteria Buruk :
Ditemukan Kelainan Morfologi Krenasi.
http://lib.unimus.ac.id
28
4.2.4. Hasil Pengamatan Morfologi Sel Darah Merah
Tabel 7. Hasil Pengamatan Morfologi Eritrosit berdasarkan suhu 25°C, 30°C, 40°C
Suhu
25°C
30°C
40°C
Morfologi Sel Darah Merah
Baik
Buruk
8
1
7
2
1
8
Berdasarkan hasil pengamatan morfologi sel darah merah terhadap
sembilan sampel yang dibuat sediaan apus darah kemudian dikeringkan pada suhu
ruang 25°C, 30° dan 40°C diperoleh hasil bahwa preparat apusan darah dengan
pengeringan menggunakan suhu ruang (25°C) ditemukan bahwa 8 sampel
(88,9%) memiliki morfologi yang baik sedangkan 1 sampel (11,1%) memiliki
morfologi buruk. Pengamatan preparat apusan darah dengan pengeringan
menggunakan suhu 30°C terhadap sembilan preparat ditemukan 2 preparat
(22,2%) memiliki morfologi buruk dan 7 preparat (77,8%) memiliki morfologi
baik, sedangkan pengamatan preparat apusan darah dengan pengeringan
menggunakan suhu 40°C terhadap sembilan preparat diperoleh 8 preparat (88,9%)
memiliki morfologi buruk dan hanya 1 preparat (11,1%) yang memiliki morfologi
baik.
http://lib.unimus.ac.id
29
Pengaruh variasi suhu pengeringan preparat apusan darah tepi terhadap
hasil morfologi sel darah merah bisa dilihat dari hasil grafik berikut ini.
Bar Chart
Morfologi
8
Baik
Buruk
6
4
88
Count
8
7
2
2
1
1
0
Suhu 25
Suhu 30
Suhu 40
Suhu
Gambar 16. Hasil Morfologi Sel Darah Merah Berdasarkan Suhu Pengeringan
Berdasarkan grafik diatas menunjukkan bahwa hasil morfologi sel darah
merah yang baik lebih banyak terjadi pada suhu pengeringan 25oC dibandingkan
pada suhu 30oC dan 40oC.
http://lib.unimus.ac.id
30
Pengaruh variasi suhu pengeringan terhadap hasil morfologi sel darah
merah juga dapat dilihat pada hasil uji Chi Square berikut ini.
Tabel 8.
Hasil Uji Chi Square pengaruh variasi suhu pengeringan terhadap Morfologi
Eritrosit
Morfologi Eritrosit
Suhu
Buruk
f
o
Suhu 25 C
Suhu 30oC
Suhu 40oC
Total
1
2
8
11
Baik
%
11,1
22,2
88,9
40,7
f
8
7
1
16
Total
%
88,9
77,8
11,1
59,3
f
%
9
9
9
27
100
100
100
100
2
13,193
p-value
0,001
Hasil pada tabel 8 menunjukkan bahwa hasil morfologi sel darah merah
yang baik lebih banyak terjadi pada suhu pengeringan 25oC yaitu sejumlah 8
preparat dibandingkan pada suhu pengeringan 30oC sejumlah 7 preparat ataupun
suhu 40oC sejumlah 1 preparat. Hasil uji Chi Square diperoleh p-value 0,001 < α
(0,05), hal ini menunjukkan bahwa terdapat pengaruh secara bermakna variasi
suhu pengeringan preparat apus darah tepi terhadap hasil morfologi sel darah
merah.
4.3. Pembahasan
4.3.1. Makroskopis
Berdasarkan hasil pengamatan makroskopis terhadap sembilan sampel
(tabel 5) ditemukan bahwa preparat apusan darah dengan pengeringan
menggunakan suhu ruang 25°C, 30°C dan 40°C menunjukkan hasil yang sama,
yaitu semua sampel memiliki bentuk dan tampilan yang baik untuk semua variasi
suhu pengeringan baik pada suhu 25°C, 30°C ataupun 40°C, hal ini menunjukkan
http://lib.unimus.ac.id
31
bahwa variasi suhu pengeringan tidak mempengaruhi bentuk dan tampilan sediaan
apus darah.
Pengeringan menggunakan suhu yang cenderung tinggi seperti 25°C, 30°C
dan 40°C menyebabkan sediaan apus darah cepat mengering secara optimal.
Pengeringan yang cepat dan optimal menyebabkan darah kering merata dan
melekat kuat pada kaca obyek. Darah yang melekat kuat pada kaca obyek akan
menyebabkan struktur dan lapisan darah tetap normal (Koko Putro Pamungkas,
2014).
Faktor suhu dan kelembaban dapat memberikan pengaruh terhadap
makroskopis sediaan apus darah. Suhu yang lembab dapat menyebabkan proses
pengeringan menjadi lambat sehingga pengeringan menjadi tidak optimal.
Sediaan apus yang lambat mengering dapat menyebabkan perubahan morfologi
sel didalamnya (Gandasoebrata R, 2007).
4.3.2. Morfologi Sel Darah Merah (Eritrosit)
Berdasarkan hasil penelitian didapat bahwa suhu 25°C tidak memberikan
pengaruh terhadap morfologi sel darah merah, sedangkan suhu 30°C dan 40°C
memberikan pengaruh terhadap morfologi sel darah merah.Sediaan apusan darah
dilakukan dengan meneteskan darah diatas kaca obyek lalu disebar dengan
menggunakan kaca penggeser sehingga sel-sel darah seperti eritrosit akan terpisah
satu sama lain. Pengeringan sediaan apus darah pada suhu yang cenderung panas
seperti suhu 30°C dan 40°C akan menyebabkan eritrosit yang ada pada sediaan
apusan darah tersebut terpapar langsung oleh suhu yang panas sehingga
http://lib.unimus.ac.id
32
menyebabkan terjadinya rusak dan mengalami kelainan morfologi (Masters,
2002).
Kondisi penyimpanan yang berbeda dapat mempengaruhi secara
mikroskopis sel darah (T. Wagner et. al., 2014). Lingkungan yang panas dapat
menyebabkan sel darah merah menjadi rusak, yaitu pecahnya membran sel
eritrosit, apabila membran sel eritrosit pecah maka cairan yang terdapat didalam
eritrosit akan keluar sel sehingga sel mengalami krenasi yang menyebabkan sel
berkeriput karena kekurangan air (Masters, 2002). Suhu merupakan salah satu
faktor penting dalam mengatur aktivitas biologis sel darah (Ramadhani, 2011).
4.3.3. Pengaruh Suhu Terhadap Kwalitas Sediaan Apus Darah
Sediaan apus darah merupakan salah satu pemeriksaan darah rutin yang
dimanfaatkan untuk menentukan karakteristik morfologi darah. Pemeriksaan ini
disebut sediaan apus darah tepi (D’Hiru, 2013). Sediaan apus darah yang
berkwalitas dapat dinilai dari aspek makroskopis dan mikroskopis. Aspek
makroskopis dan mikroskopis yang baik sangat penting dalam menilai
keberhasilan pemeriksaan sediaan apus darah tepi.
Berdasarkan hasil penelitian didapat bahwa pengeringan preparat sediaan
apus darah tepi yang paling baik adalah menggunakan suhu ruang (25°C).
Pengeringan preparat sediaan apus darah menggunakan suhu 30°C dan 40°C
memberikan hasil yang buruk terhadap kwalitas mikroskopis sediaan apus darah,
hal ini menunjukkan bahwa suhu ruang (25°C) merupakan suhu optimal yang bisa
digunakan untuk mengeringkan preparat sediaan apus darah karena pada suhu
http://lib.unimus.ac.id
33
tersebut memberi pengaruh baik terhadap makroskopis dan mikroskopis
morfologi sel darah merah.
Suhu merupakan faktor yang dapat mempengaruhi kwalitas darah. Darah
apabila disimpan pada suhu yang tinggi dapat menyebabkan sel darah merah
menjadi rusak, yaitu pecahnya membran sel eritrosit yang disebabkan oleh
pemanasan sehingga menyebabkan perubahan padamorfologi eritrosit (Masters,
2002). Kondisi penyimpanan darah yang berbeda dapat mempengaruhi secara
mikroskopis sel darah (T. Wagner et. al., 2014).
Keterbatasan Penelitian
Keterbatasan dalam penelitian ini antara lain:
1. Suhu ruang tidak dilakukan pengontrolan secara berkala
2. Pengeringan pada suhu 25°C tidak menggunakan inkubator
3. Proses pembuatan sediaan apusan darah tidak sampai pada fiksasi dan
pengecatan
4. Proses pengeringan preparat apusan darah tidak dilakukan perhitungan waktu.
http://lib.unimus.ac.id
34
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1. Kesimpulan
1. Pengamatan makroskopis terhadap sembilan sampel ditemukan bahwa preparat
apusan darah tepi dengan pengeringan baik pada suhu 25°C, 30°C dan 40°C
menunjukkan hasil yang sama, yaitu semua sampel memiliki bentuk dan
tampilan yang baik untuk semua variasi suhu tersebut.
2. Pengamatan morfologi sel darah merah (eritrosit) terhadap sembilan sampel
yang dibuat sediaan apus kemudian dikeringkan pada suhu 25°C ditemukan
delapan sampel (88,9%) dengan morfologi baik dan satu sampel (11,1%)
dengan morfologi buruk. Pada suhu 30°C ditemukan dua preparat (22,2%)
dengan morfologi buruk dan tujuh preparat (77,8%) dengan morfologi baik.
Pada suhu 40°C ditemukan delapan preparat (88,9%) dengan morfologi buruk
dan satu preparat (11,1%) dengan morfologi baik.
3. Ada pengaruh variasi suhu pengeringan preparat apusan darah tepi terhadap
hasil morfologi sel darah merah (eritrosit).
5.2. Saran
1. Bagi Tenaga Laboratorium
Bagi tenaga laboratorium diharapkan untuk lebih memperhatikan
mengenai faktor suhu terhadap proses pengeringan preparat apus darah tepi
agar tidak terjadi kesalahan dalam pemeriksaan.
http://lib.unimus.ac.id
34
35
2. Bagi Peneliti Selanjutnya
Bagi peneliti selanjutnya diharapkan agar meneliti lebih dalam lagi
pada morfologi sel darah, seperti melakukan pengamatan tidak hanya eritrosit
saja tetapi leukosit dan trombosit.
http://lib.unimus.ac.id
36
DAFTAR PUSTAKA
Abeshi, J. et al., 2014. Effects of Strorage at Room and Refrigerator Temperatures
on Dogs Blood Parameters. Research Article. 13(3):21-27.
Agus R, 2011. Aplikasi Metodologi Penelitian Kesehatan. Nuha Medika,
Yogyakarta.
Blasi, B et al., 2012. Red Blood Cell Strorage and Cell Morphology. Journal of
the British Blood Transfusion Society. 22: 90-96.
D’Hiru. 2013. Live Blood Analysis. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta
Gandasoebrata R, 2007. Penuntun Laboratorium Klinik. Dian Rakyat, Jakarta.
Houwen, Berend. 2000. Blood Film Preparation and Staining Procedures. Loma
Linda University School of medicine, California.
Kiswari R, 2014. Hematologi dan Tranfusi. Erlangga, Jakarta.
Koko Putro Pamungkas, 2014. Gambaran Morfologi Eritrosit Dengan
Perbandingan Lama Fiksasi. Universitas Muhammadiyah Semarang,
Semarang.
Kusumawardani E, 2010. Waspada Penyakit Darah Mengintai Anda. Hanggar
Kreator, Yogyakarta.
Masters, S. B. 2002. Farmakologi Dasar dan Klinik katzing: alkohol. Salemba
Medika. Jakarta.
Maurer-spurej, Elisabeth. 2001. Room Temperature Activates Human Blood
Platelets. Laboratory Investigation. 81(4):581-593.
Nugraha G, 2015. Panduan Pemeriksaan Laboratorium Hematologi Dasar. Trans
Info Media. Jakarta.
Onggowaluyo, Samidja. 2001.
Sederhana. FKUI, Jakarta.
Pemeriksaan
Laboratorium
Hematologi
Peare, Evelyn C. 2006. Anatomi dan Fisiologi Untuk Paramedis. Gramedia,
Jakarta.
Vegas, Maryo. 2012. Perbedaan Hasil Pewarnaan Giemsa dan Wright Terhadap
Morfologi Eritrosit dan Kualitas Kerataan Cat Pada Preparat Darah
Apus. Unimus, Semarang.
Wagner, T et al., 2014. Impact of Constant Strorage Temperatures and Multiple
Warming Cycles on the Quality of Stored Red Blood Cells. International
Journal of Transfusion Medicine. 106: 45-54.
http://lib.unimus.ac.id
37
Lampiran 1. Data Hasil Penelitian Makroskopis
Sampel
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Suhu 25⁰C
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Makroskopis
Suhu 30⁰C
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Suhu 40⁰C
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Lampiran 2. Data Hasil Penelitian Morfologi Sel Darah Merah
Sampel
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Suhu 25⁰C
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Baik
Buruk
Baik
Morfologi Eritrosit
Suhu 30⁰C
Baik
Baik
Baik
Buruk
Baik
Baik
Buruk
Baik
Baik
http://lib.unimus.ac.id
Suhu 40⁰C
Buruk
Buruk
Baik
Buruk
Buruk
Buruk
Buruk
Buruk
Buruk
38
Lampiran 3. Hasil Uji Statistik Chi-Square
Crosstabs
Case Processing Summary
Cases
Missing
N
Percent
0
,0%
Valid
N
Suhu * Morf ologi
27
Percent
100,0%
Total
N
27
Suhu * Morfol ogi Crosstabulation
Suhu
Suhu 25
Suhu 30
Suhu 40
Total
Morf ologi
Buruk
Baik
1
8
3,7
5,3
11,1%
88,9%
2
7
3,7
5,3
22,2%
77,8%
8
1
3,7
5,3
88,9%
11,1%
11
16
11,0
16,0
40,7%
59,3%
Count
Expected Count
% wit hin Suhu
Count
Expected Count
% wit hin Suhu
Count
Expected Count
% wit hin Suhu
Count
Expected Count
% wit hin Suhu
Total
9
9,0
100,0%
9
9,0
100,0%
9
9,0
100,0%
27
27,0
100,0%
Chi-Square Tests
Pearson Chi-Square
Likelihood Ratio
Linear-by -Linear
Association
N of Valid Cases
Value
13,193a
14,406
2
2
Asy mp. Sig.
(2-sided)
,001
,001
1
,001
df
10,858
27
a. 3 cells (50,0%) hav e expected count less t han 5. The
minimum expected count is 3,67.
http://lib.unimus.ac.id
Percent
100,0%
39
Frequencies
Statistics
N
Valid
Missing
Morf ologi
Suhu 25
9
0
Morf ologi
Suhu 30
9
0
Morf ologi
Suhu 40
9
0
Frequency Table
Morfologi Suhu 25
Valid
Buruk
Baik
Total
Frequency
1
8
9
Percent
11,1
88,9
100,0
Valid Percent
11,1
88,9
100,0
Cumulat iv e
Percent
11,1
100,0
Morfologi Suhu 30
Valid
Buruk
Baik
Total
Frequency
2
7
9
Percent
22,2
77,8
100,0
Valid Percent
22,2
77,8
100,0
Cumulat iv e
Percent
22,2
100,0
Morfologi Suhu 40
Valid
Buruk
Baik
Total
Frequency
8
1
9
Percent
88,9
11,1
100,0
Valid Percent
88,9
11,1
100,0
http://lib.unimus.ac.id
Cumulat iv e
Percent
88,9
100,0
40
Bar Chart
Morfologi Suhu 25
8
Frequency
6
4
8
2
1
0
Buruk
Baik
Morfologi Suhu 25
Morfologi Suhu 30
7
6
Frequency
5
4
7
3
2
1
2
0
Buruk
Baik
Morfologi Suhu 30
http://lib.unimus.ac.id
41
Morfologi Suhu 40
8
Frequency
6
4
8
2
1
0
Buruk
Baik
Morfologi Suhu 40
http://lib.unimus.ac.id