i. pengenalan dan pengamatan mikroba

I. PENGENALAN DAN PENGAMATAN MIKROBA
PENDAHULUAN
Keilmuan Mikrobiologi berurusan dengan obyek mahluk hidup yang berukuran kecil
(mikroskopik) tidak kasat mata yang mencakup virus, bakteri, akhaea, aktinomiset,
fungi, ragi, mikroalga dan protozoa. Pengamatan secara visual merupakan aspek
penting dalam mempelajari mikroba. Dalam upaya pengamatan secara visual
diperlukan alat bantu berupa mikroskop. Pemahaman dan ketrampilan dalam
menggunakan mikroskop menjadi tuntutan penting dalam dunia mikrobiologi. Mikroskop
secara umum dibagi menjadi 2 yakni mikroskop cahaya dan elektron. Dalam praktikum
ini akan diperkenalkan teknik pengamatan dengan mikroskop cahaya. Mikroskop
cahaya yang akan dipakai adalah cahaya tampak (monokromatis) yang bersumber dari
lampu listrik. Beberapa contoh mikroba akan diperkenalkan dalam praktikum ini.
TUJUAN
1.
2.
3.
4.
5.
Dapat menggunakan mikroskop cahaya dengan benar
Dapat mengenal dan membedakan beberapa contoh mikroba
Dapat membuat preparat mikroba untuk pengamatan mikroskopik
Dapat melakukan pengukuran mikroskopis
Dapat merawat mikroskop setelah selesai digunakan
PERALATAN
1. Mikroskop cahaya
2. Kaca obyek dan penutup
3. Mikrometer stage dan skala okuler
4. Pipet
5. Botol semprot
6. Kawat Oose
7. Lampu spiritus / bunsen burner
8. Pinset
BAHAN
1. Sampel bahan alam mengandung mikroba (bakteri, fungi, ragi, mikroalgae,
protozoa)
2. Air destilasi
3. Kertas saring
4. Alkohol
1.1 PENGAMATAN BAKTERI
1
1. Bersihkan kaca obyek dengan alkohol dan kertas tissue
2. Teteskan dua-tiga tetes air destilasi ke atas kaca obyek
3. Sentuhkan bagian sampel yang mengandugn bakteri dengan Oose
4. Suspensikan sampel tersebut ke tetesan air pada kaca obyek
5. Tutup apusan dengan kaca penutup lalu pasang pada meja mikroskop
6. Posisikan lensa obyektif perbesaran 10x ke preparat
7. Atur fokus dengan pengatur fokus kasar dan halus secara hati-hati
8. Ganti perbesaran dengan lensa obyektif 40x lalu fokuskan
9. Jika kurang jelas lakukan pengaturan cahaya melalui diafragma
10. Lakukan pengamatan dan dokumentasikan hasilnya
1.2 PENGAMATAN RAGI
1. Bersihkan kaca obyek dengan alkohol dan kertas tissue
2. Teteskan dua-tiga tetes air destilasi ke atas kaca obyek
3. Sentuhkan bagian sampel yang mengandung ragi dengan Oose
4. Suspensikan sampel tersebut ke tetesan air pada kaca obyek
5. Tutup apusan dengan kaca penutup lalu pasang pada meja mikroskop
6. Posisikan lensa obyektif perbesaran 10x ke preparat
7. Atur fokus dengan pengatur fokus kasar dan halus secara hati-hati
8. Ganti perbesaran dengan lensa obyektif 40x lalu fokuskan
9. Jika kurang jelas lakukan pengaturan cahaya melalui diafragma
10. Lakukan pengamatan dan dokumentasikan hasilnya
1.3 PENGAMATAN JAMUR
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Bersihkan kaca obyek dengan alkohol dan kertas tissue
Teteskan 1-2 tetes air destilasi ke atas kaca obyek
Ambil sebagian jaringan sampel yang mengandung miselium dan konidia
Letakkan pada kaca obyek lalu dicerai-beraikan
Tutup preparat dengan kaca penutup
Lakukan pengamatan mulai perbesaran kecil ke besar (maksimum 40x)
1.4 PENGAMATAN MIKROALGAE
1. Bersihkan kaca obyek dengan alkohol dan kertas tissue
2. Teteskan 1-2 tetes air sampel yang mengandung mikroalgae
3. Amati di bawah mikroskop mulai dengan perbesaran kecil sampai besar
(maksimum 40x)
4. Catat dan dokumentasikan hasilnya (bentuk dan atribut sel)
1.5 PENGAMATAN PROTOZOA
2
1. Bersihkan kaca obyek dengan alkohol dan kertas tissue
2. Teteskan 1-2 tetes air sampel yang mengandung Protozoa
3. Amati dengan mikroskop mulai dengan perbesaran kecil sampai besar
(maksimum 40x)
4. Catat dan dokumentasikan hasilnya (bentuk sel, cilia, dan pola pergerakannya)
1.6 PENGUKURAN MIKROSKOPIS
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Letakkan skala pada meja mikroskop dan lensa okuler
Lakukan pensejajaran skala obyektif dengan skala okuler
Catat skala okuler (ok1) yang tepat berimpitan dengan skala obyektif (ob)
Skala obyektif diganti dengan preparat sesungguhnya diukur
Hitung skala okuler (ok2) obyek yg akan diukur
Konversikan dari skala tersebut ke ukuran m
Hasil pengukuren akhir = (ok1/ok2 x ob) m
ALTERNATIF CARA PENGUKURAN MIKROSKOPIS
1. Lakukan pemotretan terhadap mikrometer stage pada perbesaran lensa obyektif
yang dipakai pengamatan
2. Lakukan pemotretan terhadap obyek mikroba yang hendak diukur
3. Lakukan proses ‘super impose’ terhadap kedua image (mikrometer dan obyek)
yang ukuran original (belum dilakukan modifikasi)
Catatan : 1 skala mikrometer obyektif = 1µm
3