Analgesic Activity of Ethanolic Extracts of Karika Leaves (Carica

Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research, 2016, 01, 83 – 89
Analgesic Activity of Ethanolic Extracts of Karika Leaves (Carica
pubescens) In Vivo
Aktivitas Analgesik Ekstrak Etanol Daun Karika (Carica
pubescens) Secara In Vivo
Heru Sasongko1,3*, Sugiyarto2,3, Yeni Farida1 , Nur Rohman Efendi1 , Diah Pratiwi1, Ahmad Dwi
Setyawan2,3 and Tetri Widiyani2,3
1
2
3
Department of Pharmacy, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Universitas Sebelas Maret.
Jl. Ir. Sutami 36A Surakarta 57 126, Central Java, Indonesia.
Department of Biology, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Universitas Sebelas Maret.
Jl. Ir. Sutami 36A Surakarta 57 126, Central Java, Indonesia.
Biodiversity Reaserch Group, Department of Biosains Postgraduate Programe, Universitas Sebelas
Maret. Jl. Ir. Sutami 36A Surakarta 57 126, Central Java, Indonesia.
*email korespondensi: [email protected]
Abstract: Karika (Carica pubescens)is a typical plant of the Dieng plateau. Previous study
showed that Caricapubescenscontains chemical compound such as flavonoid that play role
in analgesic activity. This study was aimed to determine the analgesic activity of etanolic
extracts of karika leaves) in vivo using writhing method. The study was conducted on 25
male mice strain Swiss-Webster (20-30 g, 2-3 months) that were randomly divided into 5
groups. Group I was given distilled water 1 mL (p.o) as negative control, group II was
given tramadol 50 mg/kgBW (p.o) as positive control, and group III-V received an etanolic
extracts of karika leaves in 3 doses, i.e. 20 mg/kgBW, 40 mg/kgBW, and 80 mg/kgBW
(p.o), respectively. Acetic acid 0,5% (v/v) was used as pain inductor. The writhe was
observed within 1 hour. Data analysis was carried out by using one way ANOVA. The
result showed that the ethanol extract of leaves Karika (Carica pubescens) have activity as
an analgesic at a dose of 20 mg / kg, 40 mg / kg and 80 mg / KgBW (p <0.05), chemically
induced, where a dose of 80 mg / KgBW (p.o) produce the most high analgesic activity.
Abstrak: Karika (Caricapubescens) merupakan tanamankhas datarantinggiDieng yang
termasukdalamfamiliCaricaceaedansatu genus dengan pepaya. Penelitian sebelumnya
menunjukkan bahwa Carica pubescens memiliki kandungan kimia berupa flavonoid yang
berperan sebagai analgesik. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas analgesik
ekstrak etanol daun karika (Carica pubescens) secara in vivo dengan menggunakan metode
geliat. Pengujian dilakukan terhadap 25 ekor mencit jantan galur Swiss-Webster (20-30 g,
Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research, 2016
84
2-3 bulan) yang diacak menjadi 5 kelompok. Kelompok I diberi aquades 1 mL (p.o)
sebagai kontrol negatif, kelompok II diberi tramadol dosis 50 mg/kgBB (p.o) sebagai
kontrol positif, dan kelompok III-V diberi ekstrak etanol daun karika dengan dosis secara
berturut-turut 20 mg/kgBB, 40 mg/kgBB, dan 80 mg/kgBB (p.o). Asam asetat 0,5 % (v/v)
digunakan sebagai induktor nyeri. Geliat diamati selama 1 jam. Analisis data dilakukan
dengan menghitung persentase daya analgetik dari jumlah kumulatif geliat mencit,
kemudian dianalisis dengan one way ANOVA. Dari hasil penelitian diketahui bahwa
ekstrak etanol daun karika (Caricapubescens) mempunyai aktivitas sebagai analgetik pada
dosis 20 mg/KgBB, 40 mg/KgBB dan 80 mg/KgBB (p<0.05) yang diinduksi secara kimia,
dimana dosis 80 mg/KgBB menghasilkan aktivitas analgetik yang paling tinggi.
Keywords:Ethanolic Extracts, Caricapubescens, Analgesic, in vivo
1.
Pendahuluan
Nyeri didefinisikan sebagai suatu pengalaman sensorik dan emosional yang berkaitan dengan
kerusakan jaringan (Merskey dan Bogduk, 1994). Senyawa yang dalam dosis terapeutik
meringankan atau menekan rasa nyeri tanpa memiliki kerja anestesi umum disebut sebagai
analgesik (Mutschler, 1991). Analgesik yang saat ini sering digunakan adalah non-steroidal antiinflammatory drugs (NSAIDs), opioid, dan antidepresan. NSAIDs adalah obat yang sering
digunakan dalam terapi karena mempunyai efek analgetik dan antiinflamasi sekaligus. Efek
samping NSAIDs terutama terjadi pada gastrointestinal, hematologis, dan renal sehingga
penggunaannya harus dibatasi (Sigh et al, 2015). Beberapa tahun ini studi tentang tanaman
herbal marak dilakukan, mengingat efisiensi tanaman herbal dan kekhawatiran akan efek
samping obat kimia (Ripa et al, 2015). Keuntungan penggunaan obat dari bahan alam
diantaranya efektif khasiatnya, efek toleransi yang baik, efek samping dan alergi cenderung
sedikit (Hasan et al, 2015).
Karika (Carica pubescens) merupakan tumbuhan khas di dataran tinggi Dieng yang termasuk
dalam familia Caricaceae dan satu genus dengan papaya (Laily, 2011). Dalam daun karika
(Carica pubescens) selain terdapat vitamin C juga terdapat senyawa fitokimia yaitu flavonoid,
alkaloid, tannin dan fenol (Novalina et al 2013). Bagi manusia, flavonoid berguna sebagai
antioksidan, antimikrobia, antibakteri, antivirus (Harborne and Williams, 2000), antiinflamasi,
antialergi, antimutagenik, antiklastogenik, antikanker , dan antiplatelet (Setyawan dan
Darusman, 2008).Flavonoid juga berperan sebagai analgesik dengan cara menghambat kerja
enzim siklooksigenase dengan cara mengurangi produksi prostaglandin oleh asam arakidonat
sehingga mengurangi rasa nyeri. Selain itu flavonoid juga menghambat degranulasi neutrofil
sehingga akan menghambat pengeluaran sitokin, radikal bebas, serta enzim yang berperan dalam
peradangan (Christiana et al, 2012).
Sampai saat ini belum ada penelitian tentang aktivitas analgetik dari daun Carica pubescens.
Pada daun Carica papaya yang merupakan satu family dari Carica pubescens telah diketahui
aktivitasnya sebagai analgetik dengan dosis efektif 2,4 g/KgBB (Octavianus, 2014). Penelitian
Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research, 2016
85
oleh Anaga and Onehi (2010) menunjukkan bahwa Carica papaya pada dosis 20 mg/kg
mempunyai aktivitas sebagai antinociceptiveatau antinyeri.Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas analgetik daun karika (Carica pubescens) pada mencit dengan metode
geliat (writhing test).
2.
Bahan dan Metode
2.1
Waktu dan tempat penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret-April 2016 di Laboratorium Farmasetika FMIPA
UNS untuk ekstraksi tanaman dan Laboratorium Farmakologi FMIPA UNS untuk uji analgetik.
2.2
Bahan dan alat
Dalam penelitian ini digunakan 25 ekor mencit putih jantan galur Swiss-webster dengan usia 2-3
bulan dan berat 20-30 gram. Bahan percobaan berupa daun karika dari lereng Pegunungan Lawu,
etanol 70% (teknis), aquades, NaCl, asam asetat 0,5%, dan tramadol 50 mg (Kimia Farma®).
Alat-alat yang digunakan meliputi neraca analitik, pisau, ayakan, oven, stirer, cawan uap,
waterbath, blender, stopwatch, kertas saring, kandang pengamatan, spuit injeksi, sonde oral, dan
alat-alat gelas (Pyrex Iwaki®).
3.
Cara kerja
3.1
Rancangan penelitian
Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) dengan lima macam perlakuan,
masing-masing perlakuan tiga replikasi.
3.2
Ekstraksi daun karika
Daun karika dibersihkan dan dikeringkan dengan oven pada suhu 50oC.Setelah kering daun
dipotong kecil-kecil, diserbuk dan diayak dengan ayakan 40 mesh.Serbuk diekstrak dengan
maserasi sederhana menggunakan etanol 70% selama 5 hari. Selama proses perendaman, wadah
disimpan pada suhu kamar dan terlindung dari cahaya matahari. Setelah proses perendaman
selesai dilakukan penyaringan hingga didapat maserat. Ampas dari proses penyaringan
diremaserasi dengan pelarut yang sama hingga didapat hasil maserat yang jernih. Maserat
dievaporasi dengan waterbath hingga diperoleh ekstrak kental.Untuk pengujian, ekstrak kental di
suspensikan dalam larutan CMC Na 0,5%
3.3
Persiapan hewan uji
Sebelum perlakuan, mencit diadaptasikan terhadap lingkungan dan makanan selama 1 minggu
dan selama 18 jam sebelum pemberian bahan uji mencit dipuasakan namun tetap diberi minum.
Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research, 2016
3.4
86
Uji daya analgetik
Sebanyak 25 ekor mencit jantan dibagi dalam 5 kelompok perlakuan dengan ketentuan sebagai
berikut.
Kelompok I
Kelompok II
Kelompok III
Kelompok IV
Kelompok V
: diberi suspensi CMC Na 0,5% 1 mL (kontrol negatif)
: diberi tramadol dosis 50 mg/kgBB (kontrol positif)
: diberi ekstrak etanol daun karika dosis 20 mg/kgBB
: diberi ekstrak etanol daun karika dosis 40 mg/kgBB
: diberi ekstrak etanol daun karika dosis 80 mg/kgBB
Dosis ekstrak etanol daun karika ditetapkan secara bertingkat berdasarkan penelitian
pendahuluan pada daun Carica papayasebagai antinociceptive
atau antinyeri dengan
mempertimbangkan kesamaan famili (Anaga and Onehi, 2010)
Mencit sebagai hewan uji diberi ekstrak etanol daun karika secara peroral. Setelah 15 menit
perlakuan dilanjutkan dengan diinduksi nyeri dengan asam asetat 0,5% secara intraperitonial,
dan ditempatkan pada kotak perlakuan. Jumlah geliat dihitung pada masing-masing kelompok
perlakuan.Satu geliat ditandai dengan kaki mencit ditarik kedepan dan belakang disertai
abdomen yang menyentuh lantai.Jumlah geliat dari tiap kelompok dirata-rata dan dibandingkan
antara kelompok perlakuan dan kontrol.Jumlah geliat yang lebih sedikit dari kelompok kontrol
menandakan adanya aktivitas analgetik pada hewan uji (Goenarwoet al., 2011).
3.5
Perhitungan daya analgetik dan efektivitas analgetik
Besarnya penghambatan jumlah geliat dihitung dengan persamaan Handerson dan Forsalt yaitu :
% Proteksi geliat = 100- [(P/K) x 100 %]
Keterangan :
P = jumlah kumulatif geliat hewan uji setelah pemberian obat yang ditetapkan
K = jumlah kumulatif geliat hewan uji kontrol negative (Turner, 1965)
Perhitungan efektivitas analgetik dilakukan berdasarkan persamaan berikut.
Efektivitas analgetik =
3.6
Analisis Data
Data hasil pengamatan dikumpulkan dan disajikan dalam bentuk tabel, grafik dan analisis
statistik uji one way ANOVA (Analysis of Variance).
Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research, 2016
4.
87
Hasil dan Pembahasan
Pada penelitian ini sampel yang digunakan adalah daun karika yang telah dikeringkan menjadi
simplisia kering. Randemen hasil ekstraksi menggunakan etanol 70% didapatkan
sebesar27,13%.Penelitian yang sudah pernah dilakukan bahwa ektrak etanol 70% daun Karika
(Carica pubescens) diketahui mengandung metabolit sekunder berupa flavonoid, alkaloid, tannin
dan fenol (Novalina dkk, 2013).Pemberian asam asetat 1% pada hewan percobaan yang
digunakan sebagai penginduksi nyeri karena menyebabkan rasa sakit akibat iritasi yang berat
pada mukosa membran rongga perut sehingga kaki tertarik ke belakang, meregang dan abdomen
menyentuh dasar plate form (Afrianti dkk, 2014).Pada kontrol negatif diberikan suspensi CMC
Na 0,5%1 ml untuk melihat efek geliatan tanpa diberi obat sedangkan pembanding diberikan
larutan tramadol dengan dosis 50 mg/kgBB yang merupakan obat analgetik potensial(Kaneko et
al, 2014). Hasil uji farmakologi terhadap persen (%) proteksi geliat (%PG) dapat dilihat pada
gambar 1.
Gambar 1. Uji % Daya Analgetik dari kumulatif jumlah geliat
Berdasarkan perhitungan % proteksi geliat (%PG) menggunakan perhitunganTurner (1965),
terlihat jelas seperti tertera pada gambar 1 bahwa daun karika pada dosis20 mg/KgBB, 40
mg/KgBB dan 80 mg/KgBB mempunyai aktivitas analgetik. Pada kontrol negatif dimana tidak
diberikan perlakuan ekstrak dan hanya diberikan suspensi CMC Na 0,5% memberikan efek
proteksi geliat yang tidak ada sehingga memiliki %PGsebesar 0%. Hal ini menunjukkan bahwa
hanya dengan pemberian CMC Na 0,5% tidak memberikan efek analgetik pada perlakuan
mencit. Kontrol positif dimana kelompok uji diberikan tramadol secara peroral memberikan %
PG yang sangat tinggi yaitu 100%.Hal ini sesuai dengan khasiat dari Tramadol yang yaitu
memberikan efek antinyeri baik secara akut maupun kronis (Kaneko et al, 2014). Pada kelompok
perlakuan dengan pemberian secara oral ekstrak karika dosis 20 mg ; 40 mg dan 80 mg masing –
masing memberikan %PG secara berturut – turut 65,4%; 63,5% dan 85,4%. Diketahui dosis 20
dan 40 mg hampir memiliki %PG yang sama, sedangkan dosis 80 mg / KgBB mencit
memberikan %PG yang paling tinggi dari semua dosis ekstrak yang diberikan.
Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research, 2016
88
Dari uji statistik terhadap jumlah kumulatif geliat selama 1 jam menggunakan ANOVA satu arah, ekstrak
etanol daun Karika (Carica pubescens) dengan dosis 20 mg/KgBB dan 40 mg/ KgBB, menghasilkan
efek analgetik tidak berbeda nyata (p>0,05). Akan tetapi pada dosis 80 mg/ KgBB menghasilkan efek
analgetik yang berbeda bermakna (p<0,05).Ekstrak daun Karika (Carica pubescens) diketahui
mengandung senyawa fitokimia yaitu flavonoid, alkaloid, tannin dan fenol (Novalina,
2013).Penelitian yang dilakukan pada daun Karica papaya (Carica papaya)yang merupakan satu
familli dengan Karika (Carica pubescens) menunjukkan bahwa ektrak etanol daun papaya
memiliki efek analgetik yang diujikan pada mencit (Octavianus dkk, 2014).Diketahui daun
papaya mengandung flavonoid, dimana metabolit sekunder ini juga berperan dalam aktivitas
analgetik melalui mekanisme kerja menghambat kerja enzim siklooksigenase yang berperan
dalam sistesis prostaglandin sebagai mediator pembentuk rangsang nyeri (Afrianti, 2014).
5.
Kesimpulan
Dari hasil penelitian diketahui bahwa ekstrak etanol daun Karika (Carica Pubescens)
mempunyai aktivitas sebagai analgetik pada dosis 20 mg/KgBB, 40 mg/KgBB dan 80 mg/KgBB
(p<0.05) yang diinduksi secara kimia, dimana dosis 80 mg/KgBB menghasilkan aktivitas
analgetik yang paling tinggi.
Ucapan Terimakasih
Ucapan terimakasih disampaikan kepada Universitas Sebelas Maret atas bantuan pendanaan
penelitian melalui Hibah PNBP dengan skema PUT MRG
Conflicts of Interest
The authors declare no conflict of interest
Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research, 2016
89
Daftar Pustaka
Afrianti,R.,Yenti,R dan Meustika,D. Uji Aktifitas Analgetik Ekstrak Etanol Daun Pepaya (Carica
papaya L.) pada Mencit Putih Jantan yang di Induksi Asam Asetat 1%. Jurnal Sains Farmasi
& Klinis.2014; 1(1): 54-60
Anaga,A.O and Onehi, E.V.Antinociceptive and anti-inflammatory effects of themethanol seed
extract of Carica papaya in mice andrats, African Journal of Pharmacy and Pharmacology.
2010; Vol. 4(4):140-144
Christiana,I.,Evacuasiany,E.,Hidayat,M.,The Analgetic Effect Of
KayuRapat Bark Infusion
(Parameria laevigata (Juss.) Moldenke) On Male Mice Treated With Thermal Induction.
Jurnal Medika Planta. 2012; Vol. 2: No. 1.
Goenarwo,E., Chodidjah dan Susanto, H. Uji Efektifitas Analgetik Madu pada Tikus dengan
Metoda Geliat Asetat, Journal of Madicine and Health. 2011; 3(1): 48–53.
Harborne, J.B. and Williams,C.A. Advances in flavonoid research since 1992.
Phytochemistry.2000;55: 481-504.
Hasan,M.Y.,Mahamud,R.A., Rahman,S.,Ahmad,I., Rahmatullah,M. A Preliminary Report on
Antihyperglycemic and Analgesic Properties of Methanol Extract Of Brassica Oleracea L.
Var. Italica Sprouts.World Journal Of Pharmacy And Pharmaceutical Sciences. 2015;Vol 4,
Issue 09: 225-234.
Kaneko,K.,Umehara,M.,Homan,T.,Okamoto,K.,Oka,M.,Oyama,T. The analgesic effect of tramadol
inanimal models of neuropathic pain and fibromyalgia, Neuroscience Letters. 2014; 562: 28–
33
Laily AN. 2011.Karakterisasi Carica pubescens Lenne & K. Koch berdasarkan morfologi, kapasitas
antioksidan, dan pola pita protein di Dataran Tinggi Dieng.[Tesis]. Universitas Sebelas Maret.
Surakarta.
Merskey and Bogduk,N. 1994. Classification of Chronic Pain, Second Edition, IASP Task Force on
Taxonomy. Seattle : IASP Press.
Mutschler,E. 1991. Dinamika Obat Farmakologi dan ToksikologiEdisi Kelima. Bandung
:
Institut Teknologi Bandung.
Octavianus, S., Fatimawali dan Lolo.W.A. Uji Efek Analgetik Ekstrak Etanol Daun
Pepaya
(Carica papaya L) pada Mencit Putih Jantan (Mus mucculus). Pharmacon. 2014; Vol. 3 No. 2
: 87-92
Ripa, F.A.,Dash.P.R and Faruk,M.O. CNS Depressant, Analgesic And Anti-Inflammatory
Activities Of Methanolic Seed Extract Of Calamus
rotang Linn. Fruits In Rat. Journal
of Pharmacognosy And Phytochemistry.2015; 3(5):
121-125.
Novalina, D.,Sugiyarto, Susolowati,A. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Carica pubescens dari Dataran
Tinggi Dieng
terhadap Bakteri Penyebab Diare, El-VIVO. 2013; No1 Vol 1
Setyawan, A.D dan Darusman,L.K. REVIEW : Senyawa
Biflavonoid pada Selaginella Pal.
Beauv. dan Pemanfaatannya. Biodiversitas.2008;Volume 9: 64-81.
Singh,S., Sachan,A., Singh,H., Shankar,P., Kumar,D., Sachan,A.K., Nath,R And Dixit,R.K. Study
Of Analgesic Activity Of Mucuna pruriens Extract On Swiss Albino Mice. World Journal Of
Pharmaceutical Research.2015; Volume 4, Issue 5: 1124-1132.
Turner,R.A.1965, Screening Methods Pharmacology, Academic Press New York, 11-3116