PERENDAMAN INFUSA MENIRAN (Phyllantus niruri) PADA IKAN
advertisement
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN (Phyllantus niruri) PADA IKAN GURAME (Osphronemus gouramy) YANG DIINFEKSI Vibrio anguillarum TERHADAP KADAR HEMOGLOBIN, PACKED CELL VOLUME DAN JUMLAH ERITROSIT Oleh : MOCH. BASYARUL HAQ NIM 061111163 FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN UNIVERSITAS AIRLANGGA SURABAYA 2015 SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA PERENDAMAN INFUSA MENIRAN (Phyllantus niruri) PADA IKAN GURAME (Osphronemus gouramy) YANG DIINFEKSI Vibrio anguillarum TERHADAP KADAR HEMOGLOBIN, PACKED CELL VOLUME DAN JUMLAH ERITROSIT Skripsi Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan pada Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga Oleh : MOCH. BASYARUL HAQ NIM 061111163 Menyetujui, Komisi Pembimbing (Prof. Dr. Nunuk Dyah Retno L, drh.,M.S) Pembimbing Pertama (Retno Sri Wahyuni., drh., M.S) Pembimbing Kedua ii SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA PERNYATAAN Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi berjudul : PERENDAMAN INFUSA MENIRAN (Phyllantus niruri) PADA IKAN GURAME (Osphronemus gouramy) YANG DIINFEKSI Vibrio anguillarum TERHADAP KADAR HEMOGLOBIN, PACKED CELL VOLUME DAN JUMLAH ERITROSIT Tidak t erdapat ka rya ya ng pe rnah diajukan untuk memperoleh ge lar ke sarjanaan di s uatu pe rguruan t inggi da n sepanjang pe ngetahuan s aya j uga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Surabaya, 27 Februari 2015 Moch. Baasyarul Haq NIM. 061111163 iii SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DIPPING OF MENIRAN INFUSION (Phyllantus niruri) ON GOURAME (Osphronemus gouramy) INFECTED WITH Vibrio anguillarum TOWARD THE LEVEL OF HEMOGLOBIN, PACKED CELL VOLUME AND NUMBER OF ERYTHROCYTES Moch. BasyarulHaq ABSTRACT The ai m o f t his r esearch i s t o p rove t he ef fect o f dipping meniran infusion c an increase Hb, PCV and the number of erythrocytes of Gourame infected with V. anguillarum. This research was conducted 5 group treatments and 4 replications. P0(-) was a control group, gouramy was not infected with V.anguillarum and wasn’t given any treatment, P0(+) gruop was infected with V. anguillarum and wasn’t given meniran i nfusion and P1, P 2 and P 3 group was infected with V. anguillarum and dipping in meniran infusion at a dose of 10%, 20%, 30%. D ata were an alyzed with ANOVA (Analysis o f Variant) if there obtained a significant effect th en followed w ith D uncan's multiple ra nge te st significance level o f 5 %. The results sh ow dipping meniran infusion in gouramy i nfected with V. anguillarum can increase H b, P CV a nd total e rythrocyte. D ose of 30% s how r esult efective d ose dipping meniran infusion in gouramy infected with V. anguillarum. Key word : meniran infusion (Phyllantus niruri L), gouramy (Osphronemus gouramy), Vibrio anguillarum, Hb (Haemoglobin), PCV (Packed Cell Volume), erythrocytes SKRIPSI vi PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA Telah dinilai pada Seminar Hasil Penelitian Tanggal : 13 Februari 2015 KOMISI PENILAI SEMINAR HASIL PENELITIAN Ketua : Emy Koestanti Sabdoningrum, drh., M.Kes Sekretaris : M. Gandul Atik yuliani, drh, M.Kes Anggota : Dr. Lilik Maslachah, drh., M.Kes Pembimbing Utama : Prof. Dr. Nunuk Dyah Retno L, drh, M.S Pembimbing Serta : Retno Sri Wahyuni, drh, M.S iv SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA Telah diuji pada Tanggal : 27 Februari 2015 KOMISI PENGUJI SKRIPSI Ketua : Emy Koestanti Sabdoningrum, drh., M.Kes Anggota : M. Gandul Atik yuliani, drh, M.Kes Dr. Lilik Maslachah, drh., M.Kes Prof. Dr. Nunuk Dyah Retno L, drh, M.S Retno Sri Wahyuni, drh, M.S Surabaya, 27 Februari 2015 Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Dekan Prof. Hj. Romziah Sidik, drh., PhD NIP 195 312 161 978 062 001 v SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA UCAPAN TERIMA KASIH Puji s yukur K ehadirat Allah S WT a tas ka runia ya ng t elah dilimpahkan sehingga penulis dapat melaksanakan penelitian dengan judul Perendaman Infusa Meniran (Phyllantus niruri) pada I kan G urame (Osphronemus gouramy) yang Diinfeksi Vibrio anguillarum terhadap kadar Hb, PCV dan Jumlah Eritrosit. Pada kesempatan kali ini penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada : 1. Allah S WT ya ng t elah memberi r akhmat da n hi dayah-Nya s ehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini. 2. Prof. R omziah S idik, drh., Ph.D selaku D ekan F akultas K edokteran Hewan U niversitas A irlangga a tas kesempatan m engikuti pendidikan di Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. 3. Prof. Nunuk D yah R etno L , MS., dr h sebagai pe mbimbing ut ama da n Retno S ri W., dr h., M .S sebagai pembimbing ser ta y ang t elah b ersedia memberikan bimbingan, saran serta nasehat dalam penyusunan skripsi ini. 4. Emy Koestanti S abdoningrum, dr h., M .Kes selaku ke tua pe nguji, M. Gandul A tik yul iani, d rh, M .Kes selaku sek ertaris p enguji d an Dr. Lilik Maslachah, drh., M.Kes selaku anggota penguji. 5. Seluruh s taf pe ngajar Fakultas K edokteran H ewan U niversitas A irlangga atas b imbingan da n dor ongan s emangat s erta motivasi s elama mengikuti pendidikan di Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. 6. Kedua or ang t ua p enulis, B apak H . B ambang Edy S uryanto da n I bu Hj. Siti F atimah, kakak t ersayang R izky F ameiyanti B R serta seg enap vii SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA keluarga ya ng s elalu memberikan do’ a, dukunga n ba ik s ecara m ateril maupun spiritual kepada penulis selama ini. 7. Pendamping pe nulis, A lfiana L aili D wi A gustin ya ng telah m emberi dorongan dan semangat pribadi kepada penulis. 8. Teman-teman kuliah penulis, teman satu kelompok penelitian Aurora, Dini, Dwi dalam membantu proses keberhasilan penelitian ini dan teman-teman seperjuangan Rezha s etyo, A gil R ahmat, R ifqi N ajwan, M. R ofi, F aiq Mudhafar, Asri A yu, Mentari Maharani, T utuk W ahyuningtyas, N atalia Cyntia, H ana C ipka, Karinadhinta, s erta t eman-teman angkatan 2 011 lainnya ya ng t elah ba nyak memberi dor ongan da n s emangat ke pada penulis. 9. Semua pihak ya ng tidak sempat penulis sebutkan satu-persatu yang telah banyak membantu penulis sehingga selesainya penulisan ini. Akhirnya, semoga s kripsi i ni bermanfaat ba gi s emua pi hak ya ng membutuhkan. Surabaya, 27 Februari 2015 Penulis viii SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DAFTAR ISI Halaman HALAMAN PENGESAHAN............................................................ HALAMAN PERNYATAAN ........................................................... HALAMAN IDENTITAS ................................................................. ABSTRACT ....................................................................................... UCAPAN TERIMAKASIH ............................................................... DAFTAR ISI ...................................................................................... DAFTAR TABEL .............................................................................. DAFTAR GAMBAR ......................................................................... DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................... DAFTAR SINGKATAN DAN ARTI LAMBANG .......................... ii iii iv vi vii ix xi xii xiii xiv BAB 1 PENDAHULUAN ................................................................. 1.1. Latar belakang masalah....................................................... 1.2. Rumusan masalah ............................................................... 1.3. Landasan teori ..................................................................... 1.4. Tujuan penelitian ................................................................ 1.5. Manfaat penelitian .............................................................. 1.6. Hipotesis .............................................................................. 1 1 3 3 4 5 5 BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ........................................................ 2.1. Ikan Gurame (Osphronemus gouramy) .............................. 2.1.1. Morfologi ikan gurame (Osphronemus gouramy) ... 2.1.2. Klasifikasi ikan gurame (Osphronemus gouramy) .. 2.1.3. Sistem peredaran darah ............................................ 2.2. Meniran (Phyllanthus niruri L) ............................................ 2.2.1 Klasifikasi dan morfologi meniran .......................... 2.2.2 Kandungan kimia dan farmakologis meniran ......... 2.3. Morfologi Vibrio anguillarum ............................................. 2.4. Darah Ikan............................................................................ 2.4.1 Hemoglobin.............................................................. 2.4.2 Hematokrit (PCV) .................................................... 2.4.3 Eritrosit ikan............................................................. 6 6 7 7 7 8 8 9 11 12 12 13 13 BAB 3 MATERI DAN METODE ..................................................... 3.1. Tempat dan Waktu Penelitian .............................................. 3.2. Bahan dan Materi Penelitian ................................................ 3.2.1 Hewan coba .............................................................. 3.2.2 Bahan penelitian ...................................................... 3.2.3 Alat penelitian ......................................................... 3.3. Metode Penelitian ................................................................ 3.3.1 Pembuatan s uspensi ba kteri, pe ngenceran da n perhitungan jumlah bakteri vibrio anguillarum........ 3.3.2 Pembuatan infusum meniran .................................... 15 15 15 15 15 16 16 16 18 ix SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 3.3.3 Penentuan jumlah sampel ........................................ 3.4. Pelaksanaan Peneltian .......................................................... 3.4.1 Persiapan akuarium penelitian .................................. 3.4.2 Kelompok perlakuan................................................. 3.4.3 Pemberian perlakuan ................................................ 3.4.4 Pengambilan darah ................................................... 3.4.5 Pemeriksaan kadar hemoglobin ................................ 3.4.6 Pemeriksaan hematokrit (PCV) ................................ 3.4.7 Pemeriksaan jumlah eritrosit .................................... 3.5. Variabel Penelitian .............................................................. 3.6. Definisi Operasional Variabel.............................................. 3.7. Rancangan Percobaan dan Analisis Data ............................. 3.8. Kerangka operasional penelitian ......................................... 18 19 19 19 20 20 21 22 22 23 23 24 25 BAB 4 HASIL PENELITIAN .......................................................... 4.1 Pengamatan gejala klinis...................................................... 4.2 Kadar Hemoglobin (Hb) ...................................................... 4.3 Kadar hematokrit (PCV) ...................................................... 4.4 Jumlah eritrosit..................................................................... 26 26 27 28 29 BAB 5 PEMBAHASAN ................................................................... 5.1 Pengamatan Gejala Klinis ................................................... 5.2 Kadar Hemoglobin(Hb) ..................................................... 5.3 Kadar Hematokrit (PCV) .................................................... 5.4 Jumlah Eritrosit ................................................................... 31 31 31 33 34 BAB 6 KESIMPULAN DAN SARAN ............................................ 6.1 Kesimpulan .......................................................................... 6.2 Saran ................................................................................... 37 37 37 RINGKASAN .................................................................................... DAFTAR PUSTAKA ........................................................................ LAMPIRAN ...................................................................................... 38 40 45 x SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DAFTAR TABEL Tabel Halaman 4.1 Rata-rata h asil s tandar deviasi ( x ± S D) Kadar hemoglobin (Hb) ikan gurame pada akhir penelitian ..................................... 27 4.2 Rata-rata h asil s tandar deviasi ( x ± S D) kadar hematokrit (PCV) ikan gurame pada akhir penelitian .................................. 28 4.3 Rata-rata hasil standar deviasi ( x ± SD) jumlah eritrosit ikan gurame pada akhir penelitian ...................................................... 29 xi SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DAFTAR GAMBAR Gambar Halaman 2.1 Gurame (Osphronemus gouramy)............................................... 6 2.2 Tanaman meniran........................................................................ 8 2.3 Bakteri vibrio sp. ......................................................................... 11 2.4 Eritrosit ikan................................................................................ 14 3.1 Skema kerangka penelitian ......................................................... 25 4.1 Ulcer pada daerah tubuh ikan .................................................... 26 4.2 Hemoraghi pada tubuh ikan ........................................................ 27 4.3 Luka pada bibir ikan ................................................................... 27 4.4 Kadar hemoglobin (Hb) .............................................................. 28 4.5 Kadar hematokrit (PCV) ............................................................. 29 4.6 Jumlah eritrosit............................................................................ 30 xii SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DAFTAR LAMPIRAN Lampiran Halaman 1. Skema pengenceran bakteri ........................................................... 45 2. Perhitungan dosis infusum meniran ............................................. 46 3. Hasil analisis data menggunakan SPSS......................................... 47 4. Dokumentasi kegiatan penelitian ................................................. 53 xiii SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA SINGKATAN DAN ARTI LAMBANG Hb PCV pH MCV CFU EDTA ID RAL ANOVA Dpl MCHC Rpm : : : : : : : : : : : : Haemoglobin Packed Cell Volume Potential of Hydrogen Mean Corpuscular Volume Cell Form Unit Ethylene Diamine Tetra Acetid Acid Infectious Dosage Rancangan Acak Lengkap Analysis of Variant Di atas permukaan laut Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration Rotation per minutes Xiv SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA BAB 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Ikan gur ame ( Osphronemus gouramy) m erupakan sal ah s atu i kan ai r t awar yang di budidayakan s ecara m eluas d an k omersial. Ikan i ni t ersebar di k awasan tropis mulai dari India sampai Semenanjung Malaya dan Indonesia. Ikan gurame bernilai ekonomis dan harganya di pasar cukup tinggi (Effendi dkk., 2006). Salah satu kendala yang dihadapi peternak ikan gurame adalah gangguan penyakit, baik yang bersifat infeksius maupun yang bersifat non-infeksius. Vibriosis merupakan penyakit infeksius y ang m ampu menyerang ikan gur ame. Bakteri ini berdampak pada pe nurunan ha sil produksi dan menyebabkan kematian massal seh ingga menimbulkan ke rugian ekonomi ya ng c ukup t inggi ( Purwaningsih da n T aukhid, 2010). Vibriosis m erupakan p enyakit y ang salah s atunya disebabkan o leh Vibrio anguillarum (V. anguillarum) (Desrina dkk., 2006). Gejala klinis yang di tunjukan oleh i kan y ang t erinfeksi Vibrio adalah l esu, w arna kul it ge lap, sisik l epas, peradangan pa da r ahang, a bdomen, t utup i nsang, pa ngkal s irip, l uka ya ng berkembang m enjadi ulcer pada tubuh, pe rdarahan pa da o rgan da lam, ha ti dan ginjal be ngkak ( Nitimulyo dkk., 2005). Menurut Sarjito dkk., (2007) perdarahan pada or gan ( haemorarrghic) diakibatkan o leh a danya haemolysin yang dikeluarkan oleh bakteri dan merusak sel darah merah. Vibrio m erupakan ba kteri ya ng berkemampuan s ebagai pa togen ketika mekanisme pertahanan inang melemah yang ada dalam lingkungan pemeliharaan, 1 SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 2 bakteri v ibrio in i berkembang menjadi p atogenik bi la b erada p ada kondi si lingkungan yang memungkinkan. Bakteri vibrio dapat hidup di bagian luar tubuh organisme de ngan j alan m enempel, m aupun pa da or gan t ubuh b agian da lam seperti hati, usus, dan lain sebagainya (Yanuhar, 2011). Bakteri memasuki darah melalui i nsang da n m enyebar pa da or gan d alam, ba kteri dapat m enyebabkan kematian sep erti septicaemia. Vibriosis pa da or gan e ksternal da n i nternal memperlihatkan haemorrhage dan ulcer superficial tertutup pada kepala atau anus (Valiente et al., 2008). Bakteri vibrio memiliki haemolysin yang bila dikeluarkan dapat memecah eritrosit dan keluar dari pembuluh darah (Sarjito dkk., 2007). Pengendalian vibriosis de ngan menggunakan a ntibiotik seperti ampicilin, chloramphenicol, tetracycline belum memberikan ha sil ya ng m emuaskan. Penggunakan antibiotik untuk jangka lama mempunyai beberapa kelemahan yaitu menimbulkan r esistensi pada ba kteri, mencemari l ingkungan da n meninggalkan residu pada tubuh ikan (Desrina dkk., 2006 ; Lukistyowati dan Syawal, 2013). Alternatif y ang da pat digunakan adalah p enggunaan a nti ba kterial ya ng bersifat a lami, efektif, dan mudah t eruarai di p erairan sal ah sa tunya ad alah meniran (phyllantus niruri L.) (Sudarno dkk., 2011). Tanaman meniran d apat b erfungsi seb agai an tibakteri karena m emiliki kandungan ba han a ntibakteri di antaranya f lavonoid, a lakaloid, f enol, da n t anin (Sudarno dkk., 2011). Penelitian yang di lakukan M angunwardoyo dkk., (2009) pada pengujian aktivitas anti mikroba terhadap bakteri Gram positif, Gram negatif, dan kha mir. E kstrak m eniran yang mengandung s enyawa gol ongan a lkaloid, flavonoid, tanin dan s afonin, m emiliki a ktifitas a ntimikroba te rlihat d ari SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 3 penghambatan pe rtumbuhan mikroba ha l i ni terjadi karena ad anya h ambatan sintesis d inding s el, pe rubahan pe rmeabilitas membran s el a tau t ransport a ktif melalui membran s el, pe nghambatan s intesis pr otein, da n pe nghambatan s intesis asam nukleat. Perendaman meniran pada i kan g urame yang b ersifat a ntibakteri dapat menghambat bahkan membunuh bakteri diharapkan dapat memberi perlindungan terhadap infeksi V. anguillarum yang terlihat dari perubahan kadar Haemoglobin (Hb), packed cell volume (PCV) dan jumlah eritrosit. 1.2 Perumusan Masalah Berdasarkan latar belakang tersebut, maka dapat dirumuskan masalah sebagai berikut yaitu apakah perendaman infusa meniran pada ikan gurame yang diinfeksi V. anguillarum dapat meningkatkan kadar Hb, PCV dan jumlah eritrosit ? 1.3 Landasan Teori Penyakit Vibriosis berdampak pa da pe nurunan ha sil pr oduksi budi daya perikanan. P enyakit t ersebut m enyebabkan ke rugian be sar s erta m enghancurkan berbagai budidaya perikanan salah satunya adalah ikan gurame. Ikan gurame yang terserang V.anguillarum akan m enjadi l esu da n a kan m enyebabkan w arna k ulit ikan berubah menjadi gelap, sisik lepas, peradangan pada rahang, abdomen, tutup insang, pangkal sirip, perdarahan pada organ dalam dan akan bisa menyebabkan kematian massal (Sarida dkk., 2010). SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 4 Salah satu penyebab kematian massal yang terjadi pada ikan gurame karena adanya haemolysin yang diproduksi oleh bakteri V.anguillarum. Haemolysin yang dikeluarkan ol eh ba kteri V.anguillarum dapat m emecah e ritrosit da n da pat menyebabkan e ritrosit k eluar da ri p embuluh da rah s ehingga da pat m enyebabkan haemorrhage, dan bahkan dapat menyebabkan anemia (Nasi dkk., 2011). Anemia secara fungsional didefinisikan sebagai penurunan jumlah eritrosit. Secara praktis ada 3 pa rameter unt uk m enegakkan a danya anemia ya itu : ka dar H b, PCV da n jumlah eritrosit (Syawal dan Ikhwan, 2011). Meniran m erupakan tanaman ya ng m empunyai ba nyak kha siat s eperti memperbaiki j aringan hati da n d igunakan s ebagai oba t t radisional. Khasiat tanaman t ersebut be rasal da ri ka ndungan s enyawa gol ongan alkaloid, f lavonoid, tanin da n saponin ( Mangunwardoyo dkk., 2009) . S enyawa gol ongan tanin merupakan a ntibakterial yang da pat mencegah pe rtumbuhan ba kteri da n menghentikan pe rdarahan sehingga da pat m eningkatkan k adar H b, P CV da n jumlah eritrosit (Mathivanan et al., 2006). Analisis karakteristik sel darah dapat memberikan beberapa petunjuk keberadaan penyakit yang ditemukan dalam tubuh organisme. P emeriksaan d arah sangat p erlu terutama p ada k eadaan patologis tertentu (Andayani dkk., 2006). 1.4 Tujuan Penelitian Penelitian ini be rtujuan unt uk membuktikan pengaruh perendaman infusa meniran dapat m eningkatkan kadar Hb, P CV d an jumlah eritrosit pada ikan gurame yang diinfeksi V. anguilarium. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 1.5 5 Manfaat Penelitian Diharapkan hasil dari penelitian ini dapat diketahui konsentrasi meniran yang dapat meningkatkan kadar Hb, PCV dan jumlah eritrosit pada ikan gurame yang diinfeksi bakteri V. anguillarium. 1.6 Hipotesis Berdasarkan p ermasalahan tersebut d i atas da pat di ajukan hi potesis ba hwa perendaman infusa m eniran dapat m eningkatkan kadar Hb, P CV d an jumlah eritrosit pada ikan gurame yang diinfeksi V. anguilarium. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Ikan Gurame (Osphronemus gouramy) Gurame umumnya hidup dan banyak dipelihara di perairan air tawar. Namun ada j uga gu rame ya ng hi dup di pe rairan pa yau. K etinggian l okasi y ang c ocok untuk budi daya gur ame a dalah 0 – 800 m dpl de ngan s uhu 24 -28oC. Gu rame tergolong ikan yang peka terhadap suhu rendah sehingga tidak akan produktif jika suhu tempat hidupnya lebih rendah dari kisaran suhu optimal (Brotoadji, 2011). Gambar 2.1. Osphronemus gouramy (Standar Nasional Indonesia, 2000) 2.1.1 Morfologi ikan gurame (Osphronemus gouramy) Gurame memiliki be ntuk f isik kha s. B adannya pipih, a gak panjang da n lebar. Badan itu tertutup sisik yang kuat dengan tepi agak kasar. Mulutnya kecil, letaknya m iring, t idak tepat di ba wah uj ung moncong. B ibir ba wah t erlihat menonjol sedikit dibandingkan bibir atas. Gurame dewasa memiliki badan hampir dua ka li pa njang ke pala a tau ¾ k ali pa njang t ubuh. B entuk ke pala de mpak (tumpul), berdahi agak menonjol. Sedangkan gurame muda yang masih berukuran kecil m emiliki delapan garis t egak berwarna h itam p ada k edua si si b adannya. 6 SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 7 Berkepala l ancip ke de pan, be rdahi nor mal da n r ata ( Sitanggang da n Sarwono, 2011). 2.1.2 Klasifikasi ikan gurame (Osphronemus gouramy) Klasifikasi Ikan Gurame menurut Sutanto (2011) adalah sebagai berikut: Kelas : Pisces Sub kelas : Teleostei Ordo : Labyrinthici Sub Ordo : Anabantoidae Famili : Anabantidae Genus : Osphronemus Species : Osphronemus gouramy 2.1.3 Sistem peredaran darah ikan Sistem si rkulasi d arah pada i kan berbeda de ngan ve rtebrata um umnya. Sistem s irkulasi i kan be rsifat t unggal. O rgan ya ng t erlihat a dalah j antung da n pembuluh-pembuluh da rah. P embuluh da rah pa da or gan-organ d isebut si stem portal dan merupakan jalinan buluh kapiler. Umumnya, sistem portal ditemukan pada i nsang, l iver, d an ren (Juni dk k., 2010) . S istem he matopoetik pa da i kan meliputi: limpa, gi njal, da n t hymus. P embentukan e ritrosit terjadi d i g injal d an limpa, sedangkan leukosit di bantu thymus dan bagian atas ginjal (Bijanti, 2010). 2.2 Meniran Pohon meniran be rupa semak de ngan t inggi m encapai 50 cm, be rbatang basah dan bentuk bulat. Tanaman ini mempunyai daun bersirip genap setiap satu SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 8 tangkai da un t erdiri da ri da un m ajemuk ya ng m empunyai ukur an k ecil da n berbentuk l onjong. N ama l atinnya a dalah Phyllantus nirui Linn. Dari s uku Euphorbiaceae (Mun’im dan Hanani, 2011). 2.2.1 Klasifikasi dan morfologi Klasifikasi meniran menurut (Robinson, 1995) adalah : Kingdom : Plantae Division : Spermatophyta Subdivision : Angiospermae Class : Dicotylae Order : Euphorbiales Family : Euphorbiaceaea Genus : Phyllanthus LINN Species : Phillanthus niruri Gambar 2.2 Tanaman Meniran (Husna, 2007) SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 9 2.2.2 Kandungan kimia dan efek farmakologis meniran (Phyllanthus niruri Linn) Tumbuhan meniran (Phyllanthus niruri L.) mengandung berbagai macam senyawa ki mia a ktif ya itu f lavonoid, t anin dan s aponin ( R iana, 2006) . Flavonoid merupakan salah s atu g olongan f enol ya ng t erdapat dalam sem ua tumbuhan be rbiji ( monokotil). M enurut s trukturnya, f lavonoid m erupakan turunan senyawa induk flavon. Flavonoid mengandung atom karbon dalam inti dasarnya. Seluruh va rian f lavonoid s aling be rkaitan ka rena jalur b iosintesis yang berasal dari jalur sikimat dan jalur asetat malonat. Senyawa ini umumnya terikat seb agai g likosida, b aik O -glikoksida m aupun C -glikoksida (Mangunwardoyo, dkk 2009). Senyawa flavonoid juga berperan dalam memberikan banyak warna lain di alam, terutama daun mahkota kuning dan jingga. bahkan flavonoid yang tidak bewarna m engabsorbsi cahaya pa da s pektrum U V ( karena ba nyak gu gus kromofor) da n da pat dilihat ol eh ba nyak s erangga. Senyawa i ni d iduga mempunyai manfaat e kologi ya ng be sar di a lam be rkat w arnanya s ebagai penarik s erangga da n bur ung untuk m embantu penyerbukan t anaman. Flavonoid tertentu j uga m empengaruhi rasa m akanan secara si gnifikasi, misalnya b eberapa tanaman memiliki r asa p ahit d an k esat sep erti g likosida flavon narigin ada kulit grapefruit (Citrus paradisi). Senyawa flavonoid diduga sangat b ermanfaat d alam makanan k arena, b erupa sen yawa f enolik, senyawa ini bersifat antioksidan kuat.( Heinrich and Barnes, 2010). SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 10 Tanin termasuk senyawa polifenol alami yang mengandung gugus hidroksi fenolik dan karboksil dengan bobot molekul 300−5000 Dalton. Tanin memiliki sifat ut ama da pat be rinteraksi de ngan pr otein membentuk i katan ya ng kua t. Ikatan t anin da n p rotein s angat di pengaruhi o leh pH lingkungan. S enyawa tanin terdiri dari katekin, leukoantosianin, dan asam hidroksi (asam galat, asam kafeat, d an k lorogenat) ser ta est er d ari a sam-asam t ersebut, ya itu 3 galoilepikatekin, 3 -galoilgalokatekin, da n f enil ka feat (Mangunwardoyo, dkk 2009). Tannin dapat d imanfaatkan seb agai b ahan an tiseptik ser ta an tioksidan dalam makanan Z ulaikha ( 2006). Tanin be rsifat m engendapkan pr otein da n berkhasiat sebagai a dstringensia, yaitu da pat meringankan di are d engan mengecilkan at au menciutkan l ender u sus. Tanin mudah l arut da lam a ir, gliserol, alkohol, al kali en cer d an aset on, ser ta t idak larut d alam et er d an benzena dalam Aziz (2004). Menurut H arbone ( 1987) da lam H arimukti ( 2013) S aponin a dalah j enis glikosida triterpenoid d an s terol y ang ba nyak di temukan da lam t umbuhan. Saponin a da pa da s eluruh t anaman de ngan kons entrasi t inggi pa da ba gianbagian tertentu, dan dipengaruhi oleh varietas tanaman dan tahap pertumbuhan. Saponin m erupakan senyawa a ktif permukaan ya ng kua t y ang m enimbulkan busa j ika dikocok da lam a ir da n pa da ko nsentrasi y ang r endah s ering menyebabkan he molisis s el da rah merah. Saponin m erupakan senyawa y ang berasa pa hit menusuk, be rbusa dalam a ir da n l arut da lam a ir da n a lkohol da n tidak l arut d alam et er se hingga m enyebabkan b ersin se rta i ritasi p ada s elaput lendir. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 2.3 11 Morfologi Vibrio anguillarum Bakteri V. anguillarum merupakan ba kteri pa togen pada spesies i kan l aut memiliki flagella dan chemotactic motility yang penting sebagai faktor verulensi setelah in feksi p erendaman te tapi tid ak t erlalu in fektif jik a d isuntikkan intraperitonial. C ara p enetrasi m asih di perdebatkan p ada us us, insang, da n anggota l ain t etapi s angat di mungkinkan ba kteri i ni bi sa masuk da lam s emua organ. S ebelum pe netrasi pa da kul it ba kteri ha rus m enembus l apisan pe lindung ikan yaitu lendir, motilitas, dan kemotaksis (Lanser et al., 2001). Gambar 2.3 Bakteri Vibrio anguillarum (Crosa, 1980) Vibrio anguillarum merupakan pe nyebab ut ama da ri pe rdarahan s eptikemia. Vibriosis m erupakan pe nyakit be rat ya ng mempengaruhi b anyak s pesies i kan. fungsi f lagella da lam v irulensi terbawa o leh a ir y ang d imediasi motilitas kemotaktik ( Toole et al., 2004) . F lagella V. anguillarum memiliki s truktur ya ng komplek berisi empat atau mungkin lebih protein flagell yang terbungkus dalam selubung m embran. Penelitian terbaru m enunjukan ba hwa f lagella m embantu V. anguillarum penetrasi p ada i ntegumen. Flagella p ada b eberapa b akteri p atogen telah t erbukti b erperan d alam in vasi p ada ja ringan host. S elama masa aw al penetrasi ke dalam host flagella berfungsi sebagai organel motilitas atau sebagai SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 12 organel y ang berfungsi seb agai p elekat untuk m engikat j aringan m ukosa (Ormonde et al., 2000) 2.4 Darah Ikan Darah ikan tersusun dari sel-sel yang tersuspensi dalam plasma dan diedarkan ke s eluruh jaringan tu buh m elalui sistem s irkulasi tertutup. M enurut Maswan (2009), da rah t ersusun a tas c airan da rah ( plasma da rah) da n elemen-elemen seluler (sel-sel darah). Plasma darah terdiri dari air, protein, lipid dan ion, adapun sel-sel d arah y ang t erdiri d ari s el darah m erah (e ritrosit) d an s el d arah p utih (leukosit). Sel dan cairan darah (plasma darah) merupakan aspek diagnosa yang penting untuk dikaji, karena kedua aspek tersebut mempunyai peran fisiologis yang sangat penting s erta m ampu menggambarkan kondi si kesehatan i kan Dalam p enelitian hematologic i kan, pa rameter da rah ya ng di ukur m eliputi ka dar he moglobin, hematokrit dan jumlah eritrosit (Nabib dan Pasaribu 1989). 2.4.1. Hemoglobin Hemoglobin m erupakan pr otein yang be rperan pa ling be sar da lam transpor oks igen ke jaringan da n k arbondioksida ke pa ru-paru. H emoglobin merupakan pr otein he me s ama s eperti m yoglobin, m yoglobin ya ng bersifat monomerik ( mengandung s atu s ubunit) ba nyak ditemukan d i ot ot, s edangkan hemoglobin yang ditemukan di darah memiliki empat subunit polipeptida maka disebut te tramerik (Shabir et al., 2013). Faktor-faktor ya ng da pat mempengaruhi ka dar hemoglobin ya itu um ur, j enis ke lamin, a ktivitas ot ot, SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 13 kondisi p sikis, m usim, t ekanan uda ra da n ke biasaan hi dup spesies ( Maswan, 2009). 2.4.2. Hematokrit (PCV) Hematokrit (PCV) a dalah vol ume e ritrosit d alam 100 ml da rah da n volume darah dinyatakan dalam bentuk persen. Kadar hematokrit (PCV) adalah presentase dari volume darah yang terdiri dari eritrosit. Nilai PCV merupakan petunjuk ya ng s angat baik unt uk menentukan j umlah e ritrosit da n ka dar hemoglobin da lam s irkulasi d arah. N ilai P CV merupakan pe tunjuk da ya pengikat ok sigen ol eh darah da n be rmanfaat bagi s uatu diagnosa u mtuk menentukan Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (MCHC) d an Mean Corpuscular Volume (MCV). Jika dalam suatu keadaan ditemukan nilai PCV ya ng m elebihi nor mal, maka ke mungkinan t erjadi he mokonsentrasi d an jika n ilai P CV t urun s ampai di ba wah nor mal di sebut da lam ke adaan a nemia (Maswan, 2009). Hasil dari pemeriksaan hematokrit ini bervariasi, tergantung dari kondi si f isiologis dan kesehatan ser ta ak tivitas d ari i kan y ang d iambil sampel darahnya (Bijanti, 2010). 2.4.3. Eritrosit Ikan Sel d arah merah ( eritrosit) m erupakan sal ah sat u k omponen sel y ang terdapat dalam darah, fungsi utama dari eritrosit adalah mentranfer hemoglobin (Warni, 2009). Selain mentranfer hemoglobin, sel darah merah juga berfungsi mengkatalisis r eaksi de ngan ka rbon di oksida dan mentransport C O 2 dari jaringan ke insang (Bijanti, 2010). SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 14 Gambar 2.4 Eritrosit ikan (Maswan, 2009) Sel da rah merah ( eritrosit) p ada i kan m empunyai i nti yang berbentuk bulat d an o val te rgantung p ada je nis ik annya. I nti s el e ritrosit te rletak s entral dengan si toplasma t erlihat j ernih k ebiruan d engan p ewarnaan g iemsa. Ju mlah eritrosit berbeda-beda pada jenis spesies dan juga sangat dipengaruhi oleh suhu, namun u mumnya b erkisar an tara 1 – 3 ju ta s el/mm3. Rendahnya j umlah eritrosit menunjukkan bahwa ikan mengalami infeksi (Maswan, 2009). SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA BAB 3 MATERI DAN METODE 3.1 Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian i ni di lakukan pada bul an S eptember – November 201 4 di Laboratorium P atologi V eteriner D epartemen P atologi V eteriner F akultas Kedokteran Hewan U niversitas A irlangga S urabaya. Bakteri Vibrio anguillarum diperoleh dari prodi Biologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Airlangga Surabaya. Isolasi, id entifikasi, da n pengenceran ba kteri Vibrio anguillarum dilakukan di Laboratorium Bakteriologi dan Mikologi, Departemen Mikrobiologi Veteriner Fakultas K edokteran H ewan U niversitas A irlangga S urabaya. Proses pengambilan darah, pembuatan preparat darah, dan penghitungan kadar Hb, PCV dan jumlah eritrosit dilakukan d i la boratorium P atologi K linik V eteriner, Departemen Kedokteran Dasar Veteriner. 3.2 Bahan dan Materi Penelitian 3.2.1 Hewan coba Hewan c oba ya ng di gunakan a dalah i kan gur ame s ebanyak 25 e kor dengan rata-rata berat badan 100 gram dengan panjang tubuh 10-15 cm. Umur 3 bul an. H ewan c oba di peroleh da ri B alai B enih I kan T angunan K ecamatan Puri Kabupaten Mojokerto. 3.2.2 Bahan penelitian Bahan-bahan yang diperlukan adalah pakan pellet jenis 208 produksi PT. Phokphan. M eniran di peroleh de ngan c ara m embeli di d aerah P robolinggo. 15 SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 16 Bakteri Vibrio anguillarum diperoleh dari prodi B iologi Fakultas Sains da n Teknologi Universitas A irlangga Surabaya, ke mudian di lakukan pe ngenceran berjumlah 10 6 CFU/ml d iperoleh se telah d ilakukan i solasi dan i dentifikasi d i Laboratorium Bakteriologi dan Mikologi, Departemen Mikrobiologi Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Surabaya. 3.2.3 Alat penelitian Peralatan ya ng di gunakan unt uk pe rlakuan a dalah aquarium sebanyak 5 buah de ngan ukur an p anjang 30 cm t inggi 30 cm da n l ebar 60 cm, m esin aerator 5 buah, selang aerator 5 buah dan jaring ikan. Peralatan y ang di gunakan unt uk i solasi i dentifikasi da n pengenceran bakteri Vibrio anguillarum serta penghitungan jumlah bakteri adalah autoclave, inkubator, p ipet 1m l, os e, c awan pe tri, tabung reaksi, erlenmeyer, ge las ukur dan bunsen. Peralatan u ntuk pengambilan da rah, menghitung j umlah Hb, P CV d an eritrosit adalah spuit insulin d engan j arumnya, tabung E DTA, t abung mikrohematokrit, centrifuge, t abung cuvette, spektrofotometer, pipet pasteur, larutan dacies, kamar hitung Improved Neubauer, mikroskop cahaya. 3.3 Metode Penelitian 3.3.1 Pembuatan suspensi bakteri, pengenceran bakteri Vibrio anguillarum Isolat vibrio sp yang di dapat da ri P rodi B iologi F akultas S ains da n Teknologi Universitas Airlangga S urabaya d iambil de ngan m enggunakan os e SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 17 steril kemudian dimasukkan ke dalam media APW dengan kandungan NaCl 2%. K emudian s uspensi di buat ho mogen de ngan a lat vortex dan d ilakukan penambahan suspensi bakteri hingga kekeruhannya sebanding dengan standart Mc.Farland no. 1 ( Konema et al., 1992). Tabung yang berisi suspensi bakteri sesuai standart M c. Farland no 1 memiliki kons entrasi ba kteri s ejumlah 3.10 8 CFU/ml. Penetapan dosis infeksi V. anguillarum konsentrasi 10 6 CFU/ml (Ilmiah dkk., 2012) , di sesuaikan de ngan infeksi ikan d alam 15 L a ir akuarium. Suspensi bakteri dengan konsentrasi 106 CFU/ml dibutuhkan sebanyak 150 ml ditambah 14.850 ml s ehingga di dapatkan 15 L de ngan kons entrasi bakteri 106 CFU/ml (Lampiran 1). Cara p enginfeksian b akteri Vibrio anguillarum adalah de ngan l angsung menuangkan 150 ml suspensi bakteri yang telah dilakukan pengenceran dengan konsentrasi 10 6 CFU/ml ke dalam a ir a kuarium dan a kan di dapatkan 15 L a ir akuarium. Setelah p enginfeksian b akteri se luruh i kan g urame d iamati sat u p ersatu terhadap k emunculan ge jala kl inis i kan y ang t erserang vi briosis b ila menunjukkan l esu, w arna kul it ge lap, s isik l epas, pe radangan pa da r ahang, abdomen, t utup i nsang, pa ngkal s irip, l uka ya ng be rkembang menjadi ulcer pada tubuh, perdarahan pada organ dalam, hati dan ginjal bengkak (Nitimulyo, dkk 2005). SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 18 3.3.2 Pembuatan infusum meniran Diperlukan herba m eniran s ebanyak 1kg . Meniran ya ng s udah di cuci dikeringkan di uda ra t erbuka t anpa t erkena s inar m atahari s ampai ke ring selanjutnya dihancurkan. Infusum meniran dibuat dengan mencampurkan 1 kg simplisia m eniran dengan akuades sampai v olume 1 L, campuran di rebus dalam wadah di atas air panas (panci infusum) dihitung mulai suhu 90° selama 15 menit kemudian diperas dengan ka in f lannel, jika be lum mencapai 1L ampas meniran di tambahkan a qudes pa nas s ampai vol ume ya ng d idapat mencapai 1L i nfusum m eniran dengan kons entrasi 100% (Farmakope Indonesia, 1995; B POM, 2010) . Digunakan s ebagai i nfusum unt uk dos is perlakuan 1 0%,20% da n 30% ( Putra, 2013 ). P erhitungan dos is infusum meniran berdasarkan penelitian pendahuluan dapat dilihat pada (Lampiran 2). 3.3.3 Penentuan Jumlah Sampel Rumus besaran sampel ad alah t (n-1)> 15, d imana t adalah ba nyaknya perlakuan d an n adalah ba nyaknya ul angan (Federer da lam kus riningrum, 2008). D ari r umus di atas m aka ul angan ya ng digunakan adalah 4 e kor i kan gurame p ada set iap p erlakuan. Untuk menghindari mati maka di tambahkan 1 ekor pada tiap kelompok, sehingga setiap perlakuan menggunakan 5 ekor ikan gurame. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 3.4 19 Pelaksaan Penelitian 3.4.1 Persiapan akuarium penelitian Akuarium yang digunakan sejumlah 5 bua h dengan ukuran 30 x 30 x 6 0 cm. Akuarium I unt uk i kan gur ami s ebagai ko ntrol (-), akuarium I I seb agai kontrol ( +), a kuarium I II unt uk i kan gur ami de ngan pe rlakuan dos is i nfusum meniran 10%, akuarium IV untuk ikan gurami dengan dosis infusum meniran 20%, akuarium V untuk ikan gurami yang diberi dosis infusum meniran 30%. 3.4.2 Kelompok Perlakuan Setelah ad aptasi se lama sa tu minggu ke lompok pe rlakuan P0+, P 1, P 2, dan P 3 dari he wan c oba di infeksi dengan ba kteri V. anguillarum kemudian setelah m enunjukan ge jala k linis s emua direndam de ngan i nfusa m eniran 3 menit/hari selama 5 hari kecuali P0- (kontrol negatif) dan P0+ (kontrol positif). Kelompok perlakuan diberi perlakuan sebagai berikut : PO- = kontrol negatif tanpa perlakuan PO+ = kontrol positif ikan diinfeksi V. anguillarum 106 CFU/ml tanpa direndam infusa meniran P1 = ikan diinfeksi V. anguillarum 106 CFU/ml direndam infusa meniran 10% dalam volume 1000 ml selama 3 menit P2 = ikan diinfeksi V. anguillarum 106 CFU/ml direndam infusa meniran 20% dalam volume 1000 ml selama 3 menit P3 = ikan diinfeksi V. anguillarum 106 CFU/ml direndam infusa meniran 30% dalam volume 1000 ml selama 3 menit SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 20 Setelah perlakuan lima hari, darah ikan diambil melalui pembuluh darah bagian cau dal kemudian di amati ga mbaran da rah ya ng m eliputi jumlah H b, PCV dan eritrosit. 3.4.3 Pemberian perlakuan Semua ke lompok pe rlakuan da lam a kuarium diberi pa kan ya ng s ama sebanyak d ua ka li s ehari s etiap p agi da n s ore ha ri. K emudian di lakukan adaptasi s elama s atu m inggu, s etelah itu d iinfeksi de ngan m enuangkan langsung bakteri Vibrio anguillarum konsentrasi 10 6 pada air akuarium untuk PO(+), P1, P2, P3 sedangkan PO(-) sebagai kontrol negatif. Ikan gur ame ya ng m enunjukkan g ejala kl inis seperti l esu, t ubuh i kan menjadi gelap, hemoraghi dan ulcer setelah 3hari diinfeksi V. anguillarum pada kelompok perlakuan P1, P2 dan P3 dilakukan dipping dengan infusum meniran sesuai d engan masing-masing ke lompok pe rlakuan. Ikan gur ami di dipping dengan i nfusum meniran sel ama t iga m enit/hari, d ilakukan sel ama l ima h ari berturut-turut. Hari berikutnya setelah dipping infusum meniran dilakukan pengamatan terhadap he wan c oba. Setelah d ilakukan p engamatan t erhadap i kan g urame baru di laksanakan pr oses pe ngambilan da rah u ntuk pe meriksaan ka dar H b, PCV dan jumlah eritrosit. 3.4.4 Pengambilan Darah Pengambian d arah pada i kan di lakukan dengan t eknik Punctie Vena Caudal. Prosedur pengambilan darah ikan Gurame dengan teknik Punctie Vena Caudal yaitu : SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 21 Ikan ya ng sudah di eutinasi, d isiapkan unt uk diambil da rah, ha l y ang harus di siapkan pe rtama a dalah m empersiapkan s puit i nsulin l engkap de ngan jarum, ke mudian a ntikoagulan Ethylene Diamine Tetra Acetid (EDTA) dimasukan kedalam spuit. Jarum yang sudah ada EDTA ditusukkan pada garis tengah tubuh ikan di belakang sirip anal. Jarum dimasukan ke dalam muskulus sampai mencapai t ulang belakang (columna spinalis), ke mudian s puit ditarik perlahan sampai darah masuk ke dalam spuit (Bijanti, 2010). 3.4.5 Pemeriksaan Kadar Hemoglobin Kadar he moglobin da rah da pat di tentukan de ngan be rmacam-macam cara, ya ng banyak di pakai da lam l aboratorium kl inik ya itu c ara kol orimetri visual (cara Sahli Adams) dan cara fotoelektrik (memakai Spektrofotometer). Prosedur pelaksanaan fotoelektrik: Darah di ambil s ebanyak 20 µ l ke mudian di masukan ke dalam t abung reaksi. T abung ya ng be risi da rah ditambah d engan 5 ml l arutan Drabkin’s kemudian campur rata. Larutan tersebut diambil sebanyak 2 ml dan dimasukan ke d alam cuvette. H asil pa da s pektrofotometer dibaca de ngan pa njang gelombang 540 nm, sebagai blanko digunakan larutan Drabkin’s. Konsentrasi Hemoglobin da ri sampel da rah dihitung de ngan c ara m embandingkan absorbansinya dengan kurva standart Hemoglobin (Bijanti, dkk 2010). Ada kor elasi ya ng kua t a ntara he matokrit de ngan j umlah he moglobin darah, m akin r endah j umlah s el-sel e ritrosit maka s emakin r endah pul a kandungan hemoglobin dalam darah (Bijanti, 2010). SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 22 3.4.6 Pemeriksaan Hematokrit (PCV) Hematokrit adalah presentase bagian volume sel darah merah (eritrosit) yang mengendap da lam vol ume da rah s eluruhnya. P emeriksaan i ni h asilnya bervariasi t ergantung da ri kondi si f isiologis da n ke sehatan s erta aktivitas da ri ikan yang diambil sampel darahnya. Prosedur Pelaksanaan : Darah di ambil de ngan menggunakan t abung m ikrohematokrit. T abung diisi de ngan da rah s ampai ¾ t abung. S alah s atu u jung t abung ditutup menggunakan ba han pe nutup khus us t abung kapiler. D imasukan ke da lam centrifuge he matokrit yang mempunyai ke cepatan l ebih da ri 16.00 0 r pm selama 3 -5 m enit, ke mudian ha sil centrifuge di baca d engan a lat khusus (Mikrohematocrit Reader) unt uk mengetahui ni lai he matokrit ( Bijanti, dkk 2010). 3.4.7 Pemeriksaan Jumlah Eritrosit Pemeriksaan j umlah s el da rah pa da i kan ya ng pa ling ba nyak di gunakan adalah m etode Blaxhall dan Daisley. Metode i ni ba ik di gunakan unt uk pemeriksaan jumlah eritrosit maupun pemeriksaan jumlah leukosit. Perbedaan hanya t erletak pa da penghitungan de ngan menggunakan ka mar hi tung Neubauer. Prosedur Pelaksanaan: Darah ya ng di peroleh di encerkan de ngan pe rbandingan 1 : 50 menggunakan l arutan Dacies. S ebelum di encerkan, l arutan Dacies disaring terlebih da hulu. L arutan Dacies SKRIPSI dan da rah dicampur pe rlahan a gar t idak PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 23 merusak sel d arah. L arutan tersebut d iambil d an d imasukan k e d alam k amar hitung Improved Neubauer. Cover glass diletakkan di a tas ka mar h itung Improved Neubauer, ke mudian di amati di ba wah mikroskop unt uk di hitung jumlah e ritrosit ya ng terdapat pa da kamar hi tung tertentu khus us e ritrosit (Bijanti, 2010). 3.5 Variabel Penelitian Variabel bebas : Dosis infusum meniran (10%, 20%, 30%) Variabel tergantung : Kadar Hb, PCV dan jumlah eritrosit Variabel kendali : Vibrio anguillarum 10⁶ CFU/ml, Ikan gurami,Panjang ikan, berat ikan, akuarium, pakan. 3.6 Definisi Operasional Variabel 1. Infeksi V.anguillarum adalah i nfeksi V. anguillarum dengan langsung menuangkan 150 ml s uspensi ba kteri de ngan konsentrasi 106 CFU/ml kedalam air akuarium yang berisi ikan gurame dengan berat badan ratarata 100 gram dengan panjang tubuh 10-15 cm 2. 10% i nfusum meniran di buat da ri 100 g meniran kering ditambah akuades a d 1 l iter di rebus da lam p anci i nfusum di hitung m ulai s uhu 90°C s elama 15 menit, ke mudian di saring d engan ka in f lanel da n diperas. Untuk dos is 20 % da n 30% di lakukan dengan c ara ya ng s ama, SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 24 akan t etapi untuk dos is 20% m engggunakan 200 g m eniran kering dan 30% menggunakan 300 g meniran kering. 3. Kadar H b ya ng di periksa a dalah da rah i kan gur ame yang di ambil sebanyak 2 0µl ke mudian di campur de ngan larutan d rabkin 5m l dan diperiksa menggunakan fotoelektrik dengan membandingkan pada kurva standart hemoglobin. 4. Kadar P CV ya ng di periksa a dalah da rah i kan gur ame ya ng di ambil dengan t abung mikrohematokrit s ampai ¾ t abung da n di tutup de ngan bahan pe nutup khus us t abung ka piler ke mudian m asukkan ke dalam centrifuge hematokrit sel ama 3 -5 m enit da n di hitung de ngan menggunakan mikrohematokrit reader. 5. Jumlah eritrosit yang diperiksa adalah darah ikan gurame yang diperoleh diencerkan dengan pe rbandingan 1 : 50 menggunakan l arutan dacies kemudian dihitung de ngan menggunakan ka mar hi tung improved neubauer. 3.7 Rancangan Percobaan dan Analisis Data Rancangan yang di gunakan a dalah R ancangan A cak L engkap ( RAL) dengan ul angan ya ng s ama pa da s etiap pe rlakuan ya itu e mpat pe rlakuan da n 4 ulangan ( Kusriningrum, 2010 ). Data ya ng di peroleh di analisis de ngan menggunakan A NOVA ( analysis of variant). A pabila t erdapat pengaruh yang signifikan maka di lanjutkan de ngan uj i j arak be rganda Duncan dengan t araf signifikan 5% (Kusriningrum,2010). SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 25 Kerangka Operasional Penelitian GURAME Gurame sebanyak 20 ekor dengan Berat Badan 100g, Panjang 10cm Adaptasi 1minggu P0 (-) P0 (+) P1 P2 P3 4 ekor 4 ekor 4 ekor 4 ekor 4 ekor Diinfeksi Vibrio sp 106CFU/ml 3 hari setelah diinfeksi P0 (-) tanpa perlakuan P0 (+) diinfeksi V. anguillarum P1 + Phyllanthus P2 + Phyllanthus P3 + Phyllanthus 10 % 20 % 30 % Dipping 3 menit/hari selama 5 hari Pengambilan sampel darah, pemeriksaan kadar hemoglobin, pemeriksaan hematokrit (PCV) dan pemeriksaan jumlah eritrosit Analisis Data Gambar 3.1. Skema Kerangka Penelitian. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA BAB 4 HASIL PENELITIAN Hasil penelitian perendaman i nfusa meniran (Phyllantus niruri) pada i kan gurame (Osphronemus gourame) yang diinfeksi V. anguillarum dilakukan langkah awal dengan cara memisahkan ikan gu rame berdasarkan masing-masing perlakuan, ikan di infeksi suspensi V. anguillarum dengan jumlah 10 6CFU/ml, virulensi in feksi V. anguillarum pada i kan t erlihat dari gejala klinis yang nampak. Setelah terlihat gejala klinis, dilakukan terapi pada masingmasing perlakuan P1, P2 dan P3 berupa perendaman infusa meniran dengan dosis 10%, 20% dan 30% , 3menit/hari s elama 5 ha ri. P engaruh pe rendaman i nfusa meniran bi sa di lihat da ri perubahan jumlah hemoglobin (Hb), hematokrit (PCV), dan eritrosit. Hasil pada perlakuan P3 melebihi kontrol negatif (P0-) yang dapat dilihat seperti dibawah ini : 4.1 Pengamatan Gejala Klinis Ikan gur ame ( Osphronemus gourame) ya ng di infeksi V. anguillarum pada pe rlakuan P0(+) didapatkan gejala k linis seperti ulcer pa da t ubuh i kan t erlihat pa da ga mbar 4.1, hemoraghi di daerah badan ikan terlihat pada gambar 4.2, l uka pada bibir ikan yang terlihat pada gambar 4.3. Gambar dibawah ini menunjukan gejala yang ditimbulkan oleh bakteri V. anguillarum pada ikan gurame. Gambar 4.1. Ulcer pada daerah tubuh ikan gurame pada perlakuan P0 (+) (Dokumentasi pribadi) SKRIPSI 26 PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 27 Gambar 4.2. Hemoraghi pada daerah tubuh ikan Gurame pada perlakuan P2 (Dokumentasi pribadi) Gambar 4.3. Luka pada bibir ikan Gurame pada perlakuan P0 (+) (Dokumentasi pribadi) 4.2 Kadar Hemoglobin (Hb) Hasil perhitungan kadar hemoglobin (Hb) pada setiap perlakuan dapat dilihat pada tabel dibawah ini : Tabel 4.1 Rata-rata Hasil dan Standar Deviasi ( x ± SD) kadar Hemoglobin (Hb) Ikan Gurame pada Akhir Penelitian Keterangan SKRIPSI Perlakuan Kadar Hemoglobin (Hb) (g%) ( х ± SD) PO (-) 9.18b ± 0.95 PO (+) P1 P2 7.07a ± 0.53 8.53b ± 0.73 8.93b ± 0.61 P3 9.43b ± 1.45 : S uperskrip y ang berbeda pada k olom y ang sama menunjukan a danya perbedaan yang nyata (p<0,05) PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 28 Kadar Hemoglobin Kadar Hemoglobin (Hb) 10 5 0 P0(-) P0(+) P1 P2 P3 Kelompok Perlakuan Gambar 4.4 Kadar Hemoglobin (Hb) Setiap Perlakuan (g%) pada Berbagai Dosis Hasil ya ng ditunjukkan pa da kadar H b, berdasarkan u ji A NOVA d iperoleh hasil penelitian tentang kadar hemoglobin (Hb) ikan Gurame F hitung 4.137 > F tabel 3,06, maka dapat di simpulkan ha sil pe nelitian H b i kan Gurame be rbeda nya ta (p<0,05). T ahap berikutnya dilakukan uji Jarak Berganda Duncan dengan taraf signifikansi 5%. Berdasarkan hasil uji Jarak Berganda Duncan menunjukan bahwa antara perlakuan P0 (+) dengan P0 (-), P1, P2, dan P3 menunjukan hasil berbeda nyata (p<0,05). 4.3 Hematokrit (PCV) Hasil penelitian te rhadap Hematokrit (P CV) pada set iap p erlakuan dapat di lihat pada tabel dibawah ini : Tabel 4. 2 Rata-rata Hasil d an S tandar D eviasi ( x ± S D) kadar Hematokrit (P CV) Ikan Gurame pada Akhir Penelitian Perlakuan Kadar Hematokrit (PCV) (%) ( х ± SD) PO (-) 28.25b ± 5.25 PO (+) 21.25a ± 2.75 P1 P2 27.00a ± 3.16 30.00b ± 3.74 P3 32.25b ± 3.94 Keterangan : Superskrip yang berbeda pada kolom yang sama menunjukan adanya perbedaan yang nyata (p<0,05) SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 29 Kadar Hematokrit (PCV) Kadar Hematokrit (PCV) 40 30 20 10 0 P0(-) P0(+) P1 P2 P3 Kelompok Perlakuan Gambar 4.5 Kadar Hematokrit (PCV) Setiap Perlakuan (%) pada Berbagai Dosis Berdasarkan uji ANOVA diperoleh hasil penelitian tentang kadar hematokrit (PCV) ikan G urame F hitung 4,574 > F tabel 3,06, m aka da pat d isimpulkan ha sil pe nelitian kadar PCV be rbeda nya ta ( p<0,05). T ahap be rikutnya di lakukan uj i J arak B erganda D uncan dengan taraf signifikansi 5%. Berdasarkan hasil uji Jarak Berganda Duncan menunjukan bahwa a ntara pe rlakuan P0 ( +) de ngan P 1 t idak be rbeda nya ta, s edangkan P 0 ( +) menunjukan perbedaan yang nyata (p<0,05) dengan perlakuan P0(-), P2, dan P3. 4.4 Jumlah Eritrosit Hasil p enelitian terhadap ju mlah Eritrosit pada s etiap perlakuan dapat d ilihat pada tabel dibawah ini : Tabel 4.3 Rata-rata Hasil d an S tandar D eviasi ( x ± S D) Jumlah Eritrosit Ikan G urame pada Akhir Penelitian Perlakuan Jumlah Eritrosit (x 106/mm3) ( х ± SD) PO (-) PO (+) P1 P2 P3 1.03b ± 0.32 0.02a ± 0.01 0.08a ± 0.03 0.84b ± 0.19 1.08b ± 0.29 Keterangan : Superskrip yang berbeda pada kolom yang sama menunjukan adanya perbedaan yang nyata (p<0,05) SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 30 Jumlah eritrosit Jumlah Eritrosit 1500000 1000000 500000 0 P0(-) P0(+) P1 P2 P3 Kelompok Perlakuan Gambar 4. 6 Jumlah Eritrosit pa da S etiap Perlakuan ( x 10 Berbagai Dosis 6 sel/mm3) pa da Hasil penelitian tentang jumlah eritrosit ikan Gurame berdasarkan uji ANOVA yaitu, F hitung 23,64 > F tabel 3,06, maka da pat di simpulkan t erdapat perbedaan nyata ( p<0,05). Tahap berikutnya dilakukan uji Jarak Berganda Duncan dengan taraf signifikansi 5%. Berdasarkan hasil uji Jarak Berganda Duncan menunjukan bahwa antara perlakuan P0 ( +) d an P1 t idak b erbeda nya ta, s edangkan P0 ( -), P 2, da n P 3 m enunjukan ha sil berbeda nyata (p<0,05). Hasil ditunjukkan pada tabel 4.3. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA BAB 5 PEMBAHASAN 5.1 Pengamatan Gejala Klinis Ikan gur ame ya ng di infeksi Vibrio anguillarum selama 3 ha ri m enunjukan gejala klinis seperti lesu, ulcer, haemorarrghic pada bagian tubuh ikan, dan luka pada bibir, sesuai dengan yang dikatakan oleh Nitimulyo dkk., (2005) bahwa ikan yang terinfeksi Vibrio adalah lesu, warna kulit pucat, sisik lepas, peradangan pada rahang, t utup i nsang, pa ngkal s irip, l uka ya ng be rkembang menjadi ulcer pada tubuh. Bakteri y ang m asuk da lam pe mbuluh d arah a kan menyebar pa da or gan dalam sehingga m enyebabkan haemorarrghic dan ulcer (Valiente et al., 2008). Gejala k linis ya ng t ampak pa da i kan gur ame di sebabkan karena Bakteri v ibrio memiliki haemolysin. Haemolysin yang dikeluarkan oleh b akteri V.anguillarum dapat memecah eritrosit d an keluar da ri p embuluh d arah sehingga d apat menyebabkan haemorarrghic yang diikuti de ngan t imbulnya ulcer (Sarjito dkk., 2007). Vibrio m emiliki vi li ya ng di gunakan s ebagai f aktor vi rulensi ya ng membuat mikroba dapat bertahan dalam tubuh inang dan menimbulkan kerusakan (Yanuhar, 2008). 5.2 Kadar Hemoglobin (Hb) Kadar Hb dalam penelitian ini P0 (+) dan P1 mengalami penurunan, kadar Hb P0 (-) 9,8 g%, P2 8,93 g% , dan P3 9,43 g% sesuai dengan kadar Hb minimal ikan gur ame m enurut A ndayani dkk., (2014) m inimal s ebesar 8,8 g%, t etapi jumlah Hb P0 (+) dan P1 kurang dari kadar minimal Hb ikan gurame yaitu sebesar 7,07 g% dan 8,53 g%. 31 SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 32 Kadar Hb dapat di jadikan pa tokan unt uk menentukan ke sehatan ikan, Hb yang a bnormal atau penurunan kadar Hb dapat menjadi salah satu indikasi ikan terinfeksi ( Anderson, 1 990). A danya i nfeksi V. anguillarum pada i kan gur ame dapat menyebabkan r usaknya e ritrosit dan da pat m enyebabkan a nemia sehingga berpengaruh pa da ka dar H b da lam da rah, H b be rfungsi m engangkut oks igen dalam d arah, d aya an gkut oks igen be rgantung pa da kons entrasi H b d alam s el darah merah (Lagler et al.,1997). Kegagalan Hb mengangkut oksigen dalam darah menimbulkan gejala klinis seperti lesu, warna kulit gelap, sisik lepas, peradangan pada rahang, tutup insang, ulcer dan haemoraghi. Hasil ya ng di tunjukkan pa da ka dar H b pe rlakuan P 2 da n P 3 t idak menunjukkan perbedaan yang nyata, tetapi P2 dan P3 memiliki hasil yang berbeda nyata terhadap perlakuan P1, karena dosis P2 dan P3 lebih besar. Peningkatan kadar Hb ikan gurame yang telah diinfeksi V. anguillarum ini karena infusa meniran memiliki kandungan antibakteri salah satunya yaitu tanin, menurut A jizah ( 2004) toksisitas tanin dapat m erusak membrane sel b akteri, senyawa astringent tanin berikatan dengan ion logam yang dapat menambah daya toksisitas tanin. Tanin dapat mengkerutkan dinding sel atau membran sel sehingga mengganggu permeabilitas se l b akteri. A kibat t erganggunya p ermeabilitas se l tidak da pat melakukan a ktivitas s ehingga pe rtumbuhan b akteri t erhambat a tau bahkan m ati, selain dapat m embunuh pertumbuhan ba kteri tanin dapat menghentikan pe rdarahan. Berhentinya pe rdarahan m enyebabkan pe ningkatan eritrosit. Kadar H b da lam da rah i kan be rkaitan de ngan j umlah s el da rah merah. Kadar Hb umumnya berbanding lurus dengan jumlah eritrosit (Putri dkk., 2013). SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 33 Menurut Fujaya (2004) terdapat korelasi yang kuat antara Hb dan jumlah eritrosit darah, di mana meningkatnya j umlah e ritrosit maka meningkat pula ka dar Hb dalam darah. 5.3 Kadar Hematokrit (PCV) Hasil dari p enelitian ini ka dar P CV i kan gur ame pa da a khir pe nelitian menunjukkan ba hwa a ntara pe rlakuan P 0 ( +) de ngan P 1 tidak be rbeda nya ta, sedangkan P0 (+) menunjukkan perbedaan yang nyata (p<0,05) dengan perlakuan P0 ( -), P 2, P3. P erlakuan P 0 ( +) menunjukkan ha sil ka dar P CV ya ng s angat rendah yaitu 21.25 % dibanding dengan nilai normal P0 (-) 28.25 %, kadar PCV dapat dijadikan patokan untuk menentukan kadar kesehatan ikan, indikasi stress, infeksi patogen, perubahan kondisi lingkungan atau pencemaran lingkungan akan menyebabkan kadar PCV mengalami penurunan (Putri dkk., 2013) Salah s atu g ejala k linis y ang t erjadi a kibat infeksi V. anguillarum disebabkan ka rena haemolysin yang di keluarkan ol eh ba kteri V. anguillarum. Haemolysin mengakibatkan terjadinya perdarahan (Nasi dkk., 2011). Kadar PCV merupakan p resentase volume er itrosit d alam d arah ikan. H asil p emeriksaan terhadap kadar PCV dapat dijadikan sebagai salah satu patokan untuk menentukan keadaan ke sehatan i kan, ka dar P CV kur ang da ri 22% m enunjukkan t erjadinya anemia (Nabib dan Pasaribu, 1989). Hasil ya ng di tunjukkan pa da ka dar P CV pe rlakuan P 2 da n P 3 tidak menunjukkan perbedaan yang nyata, tetapi P2 dan P3 memiliki hasil yang berbeda nyata terhadap perlakuan P1, karena dosis P2 dan P3 lebih besar. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 34 Perlakuan P1, P2 dan P3 menunjukan peningkatan kadar PCV, hal ini terjadi karena pada perlakuan P1, P2 dan P3 ikan direndam menggunakan infusa meniran yang m engandung s enyawa gol ongan t anin, karena s enyawa gol ongan t anin merupakan antibakterial ya ng m emiliki ke mampuan m enginaktivasi adhesi s el bakteri ( molekul yang menempel pada sel i nang) yang terdapat pada permukaan sel, tanin mempunyai target pada polipeptida dinding sel yang akan menyebabkan kerusakan pada di nding s el ( Naim, 2004) . Tanin j uga da pat menghentikan perdarahan s ehingga da pat meningkatkan jumlah e ritrosit ( Mathivanan et al ., 2006). Peningkatan jumlah eritrosit erat kaitannya dengan peningkatan kadar PCV dalam d arah k arena P CV ad alah p resentase v olume er itrosit d alam d arah i kan (Nabib dan Pasaribu, 1989). 5.4 Jumlah eritrosit Eritrosit dapat m enggambarkan kondi si t ubuh, ka rena da pat m enunjukan pertahanan tubuh ikan terhadap bakteri patogen (Hardi dkk., 2011). Jumlah e ritrosit P0 (+) da n P 1 l ebih r endah da ri P 0 ( -), P 2, da n P3. Perlakuan P0 ( +) memiliki j umlah e ritrosit ya ng s angat rendah yaitu 0,02 x106/mm3 karena p ada perlakuan P 0 ( +) ikan diinfeksi de ngan V. anguillarum tanpa diberi perendaman infusa meniran. Infeksi pada ikan ditunjukan dari gejala klinis yang nampak yaitu adanya septikemia pada ikan yang ditandai dengan ikan lesu, haemorarrghic, pembengkakan bola mata (expothalmia) dan luka pada bibir, bakteri v ibrio m emiliki haemolysin yang dapat m enimbulkan a danya haemorarrghic, bila haemolysin dikeluarkan dapat merusak sel darah merah dan SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 35 keluar da ri pe mbuluh da rah sehingga dapat menyebabkan pe nurunan j umlah eritrosit (Sarjito, dkk 2007). Perlakuan P1, P2, dan P3 mengalami peningkatan pada jumlah eritrosit atau mendekati P 0 ( -), ka rena P 1, P 2, da n P 3 telah diterapi d engan i nfusa m eniran dengan c ara dilakukan pe rendaman dibandingkan de ngan perlakuan P 0 ( +) yang tidak d irendam de ngan i nfusa m eniran. P erlakuan P 1, P 2, da n P 3 mengalami peningkatan jumlah e ritrosit, p eningakatan jumlah eritrosit m enandakan adanya upaya ho meostatis pa da t ubuh i kan, t ubuh memproduksi s el da rah l ebih ba nyak untuk m enggantikan e ritrosit ya ng sudah l isis (Putri dkk., 2013) . P eningkatan jumlah eritrosit ini terjadi k arena ikan direndam dengan meniran yang memiliki kandungan f lavonoid yang te lah te rbukti secara k linis m emiliki d aya to ksisitas yang da pat merusak sel b akteri, f lavonoid m erupakan gol ongan f enol, golongan fenol berpotensi merusak membran sitoplasma karena memiliki sifat bakterisidal atau ba kteriostatik t ergantung pa da kons entrasi ya ng d igunakan. P engrusakan membran si toplasma b akteri o leh s enyawa f enol t erjadi melalui pe ngendapan protein membran. Akibat peristiwa ini menyebabkan keluarnya metabolit penting bagi pe rtumbuhan ba kteri s eperti e nzim, pr otein, a ir, ka rbohidrat, ha l ini mengakibatkan ba han-bahan ya ng d ibutuhkan u ntuk ke langsungan hi dup ba kteri tidak terpenuhi sehingga pertumbuhan bakteri terganggu (Husna, 2007) dan tanin dapat mempersingkat waktu perdarahan, lama waktu pembekuan darah dan dapat meningkatkan jumlah trombosit (Ajizah, 2014 ; Aldi, 2014). Berdasarkan h asil p enelitian pengaruh infusa meniran pa da i kan gur ame yang di infeksi V. anguillarum terhadap ka dar H b, P CV dan j umlah e ritrosit SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 36 menunjukkan a danya pe ningkatan k adar H b, P CV da n j umlah e ritrosit yang a da pada t abel 4.1, 4.2, 4.3. H asil ya ng e fektif pe rendaman meniran t erhadap peningkatan ka dar H b, P CV da n j umlah e ritrosit pa da i nfusum meniran de ngan dosis 30%. Hasil pe nelitian ya ng menunjukkan meniran s ebagai antibakteri y aitu dengan m enggunakan ekstrak m eniran 0,015 6 g/ ml da lam pe nelitian ya ng dilakukan o leh S udarno dkk., ( 2011) unt uk m elihat e fektifitaas m eniran pa da Edwardsiella tarda (E. tarda) sebagai an tibakteri y ang d ilakukan sec ara i nvitro sudah da pat menghambat ba kteri, s edangkan kons entrasi meniran ya ng da pat membunuh ba kteri E. tarda pada kons entrasi 0,0313 g/ml, h al te rsebut te rlihat dari t idak a danya pe rtumbuhan ba kteri p ada uj i minimum bactericidal concentration (MBC). Sunarno ( 2009) melakukan pe nelitian mengenai pe ngaruh meniran t erhadap pa thogenesis i nfeksi s almonella d engan hewan c oba m encit menunjukan hasil yang tidak jauh berbeda dengan penelitian yang dilakukan oleh Sudarno dkk., ( 2011), ha sil pe nelitian m enunjukkan ba hwa meniran da pat menghambat pa thogenesis s almonella, dos is m eniran ya ng da pat menghambat infeksi sebesar 3X0,125 mg, dosis ini diperoleh dari dosis manusia dikali 0,0026 sehingga diperoleh dosis pada mencit 3X0,130 mg/hari. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA BAB 6 KESIMPULAN DAN SARAN 6.1 Kesimpulan Berdasarkan penelitian ya ng telah di lakukan da pat di simpulkan bahwa perendaman infusa meniran pada ikan yang diinfeksi dengan V. anguillarum dapat meningkatkan kadar hemoglobin ( Hb), he matokrit (PCV) da n eritrosit dengan dosis efektif 30%. 6.2 Saran 1. Petani d apat menggunakan a lternatif pengobatan a ntibakteri dengan menggunakan infusa meniran. 2. Perlu penelitian lebih lanjut terhadap kandungan anti bakteri dari meniran dengan menggunakan bakteri lain. 3. Perlu penelitian l ebih l anjut t entang mekanisme kerja t anaman meniran sehingga bakteri Vibrio anguillarum ini tidak dapat menginfeksi ikan. 37 SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA RINGKASAN Moch. B asyarul H aq, penelitian ya ng be rjudul “ Perendaman I nfusa Meniran ( Phyllantus niruri) p ada I kan G urame ( Osphronemus gouramy) ya ng Diinfeksi Vibrio anguillarum Terhadap K adar hemoglobin, packed c ell vol ume dan jumlah eritrosit” di ba wah bimbingan Prof. Nunuk D yah R etno L , Ms., dr h sebagai p embimbing ut ama da n R etno S ri W ., dr h., M .S sebagai p embimbing serta. Penelitian i ni di lakukan unt uk membuktikan pe ngaruh perendaman i nfusa meniran (Phyllantus niruri) pada ikan gur ame ( Osphronemus gouramy) ya ng diinfeksi Vibrio anguillarum dapat meningkatkan kadar hemoglobin, packed cell volume dan jumlah eritrosit. Pe nelitian ini m enggunakan ka ndungan m eniran yang be rbeda-beda, m ulai da ri 1 0%, 20% , dan 30% . Pengaruh perendaman meniran di tunjukan dari p erbedaan kadar hemoglobin, packed c ell v olume dan jumlah eritrosit. Ikan diinfeksi selama 3 hari dan diterapi selama 3menit/hari selama 5 hari, satu ka li pe rendaman d ilakukan s elama 3 menit da n di bagi da lam 5 kelompok perlakuan yang berbeda, mulai dari ikan yang tidak diinfeksi dan tidak direndam dengan i nfusa m eniran P 0(-), ikan ya ng di infeksi V. anguillarum dan t idak direndam de ngan i nfusa m eniran P0(+), i kan ya ng di infeksi V. anguillarum dengan dosis yang berbeda 10%, 20%, dan 30% (P1, P2, dan P3). Pengaruh pe rendaman i nfusa meniran pa da i kan gur ame ya ng di infeksi V. anguillarum dari ha sil perhitungan ka dar H b, P CV da n j umlah e ritrosit da pat 38 SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 39 ditarik kesimpulan bahwa infusa meniran dengan dosis 30% yang dapat memberi pengaruh pa ling ba gus. D osis i nfusa meniran 30% dapat m eningkatkan kadar hemoglobin ( Hb) s ebesar 9,43 g%, h ematokrit (P CV) s ebesar 3 2,25 %, da n jumlah eritrosit sebesar 1,08 x106/mm3 dibandingkan dengan kontrol P0 (+) kadar hemoglobin (Hb) sebesar 7,07 g%, hematokrit (PCV) sebesar 21,25% dan jumlah eritrosit sebesar 0,02x106/mm3. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DAFTAR PUSTAKA Ajizah, A . 2004. S ensitifitas Sallmonella typhimurium Terhadap E kstrak D aun Psidium guajava L. Bioscintiac. 1(1) : 31-8 Aldi, Y ., D. Artika., d an M. Aria. 2014. Pengaruh P emberian E kstrak E tanol M eniran (Phyllantus niruri L) Terhadap Jumlah Eritrosit, Retikulosit, Kadar Hemoglobin dan Nilai H ematokrit p ada M encit P utih J antan. P rosiding Seminar N asional d an Workshop “Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik IV” Ali, A . S ., I smoyowati., D . I ndrasanti. 2013. J umlah E ritrosit, K adar H emoglobin da n Hematrokit pada P enambahan P robiotik da lam Ransum. J urnal I lmiah P eternakan 1(3) : 1001-1013 Andayani, S ., M arsoedi., E . S amoesi., A . E . W ilujeng, da n H . S uprastiani. 200 6. P rofil Hematologis B eberapa S pesies Ikan Air T awar Budidaya. G reen Technology 363 365 Anderson, D . P . 1990 . I mmunological Indikators : E ffects of E nvironmental S tress on Immune Protection and Disease Outbreak. American Fisheries Symposium 8. Aziz M . N. 2004. Pengaruh Ekstrak Akar Bakau (Rizophora mucronata) T erhadap Pertumbuhan Bakteri (Vibrio harveyi) dan Pseudomonas fluorescens). Malang: FMIPA Bijanti, R. 2010. Buku Ajar Hematologi Ikan (Tehnik Pengambilan Darah dan Pemeriksaan Hematologi Ikan). 1-15. Bijanti, R ., R . B . U tomo., R . S . Wahyuni., S . B udhy., M . G . A . Yuliani. 2010. P enunutun Praktika Patologi Klinik Veteriner. Cetakan Ke Empat. Surabaya. Brotoadji, S . 2011. Yogyakarta. 21 H ari P embibitan L ele, G urame, N ila U ntung B esar. A raska. Crosa, J. H. 1980. A Plasmid Associated with Virulence in the Marine Fish Pathogen Vibrio anguillarum Specifies an Iron-Sequestering System. Nature 284, 566-568. Desrina., A . T aslihan., Ambarianto., S . S uryaningrum. 200 6. U ji K eganasan B akteri Vibrio pada Ikan Kerapu Macan (Epinephelus fuskoguttatus). Ilmu Kelautan. 11(3):119-125 Dianti, L., Prayitno, S. B., Ariyati, R. W. 2013. Ketahanan Non Spesifik Ikan Mas (Cyprinus carpio) yang Direndam Ekstrak Daun Jeruju (Acanthus ilicifolius) Terhadap Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila. Journal of A quaculture Man agement an d Technologi. 2(4) : 63-71 Effendi, I ., H . J . B ugri., da n Widanarni. 2006. P engaruh P adat P eneberan T erhadap Kelangsungan Hidup dan Pertumbuhan Benih Ikan Gurami Osphronnemus gouramy Lac. Ukuran 2 Cm. Jurnal Akuakultur Indonesia. 5(2): 127-135 SKRIPSI 40 PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 41 Ercan, M.D., Karatas, S., Turgay, E., Kolukirik, M., Ince, O., Ince, B., 2013. Changes in Transferrin Gene Expression in Sea Bass (Dicentrarchuslabrax) Challenged with Vibrio anguillarum. Turkish Journal of Veterinary and Animal Sciences.37 : 141-146 Farmakope Indonesia, 1 995. E disi I V. J akarta: Departmen Kesehatan Republik I ndonesia. Hal. 863 – 882, 891 – 899. Fujaya, Y. 2004. Fisiologi Ikan : Dasar Pengembangan Teknologi Perikanan. Jakarta. Rineka Cipta Khare, C. P. 2007. Indian Medicinal Plants : An Illustrated dictionary. New Delhi. Spinger. Hardi, E . H ., E . S ukenda., H arris., A . M . L usiastuti. 201 1. K arakteristik dan P atogenesis Streptococcus A galactiae T ipe ß-Hemolitik da n N on-Hemolitik pada I kan Nila. J. Veteriner, 12 (2) : 157-159 Harimukti, I. 2013. Kandungan Saponin dan Flavonoid pada Daun Pepaya (Carica papaya L.) Akibat P erebusan B ersama Daun S ingkongAKIBAT (Manihot utilissima). IKIP PGRI Semarang F akultas P endidikan M atematika da n I lmu P engetahuan A lam Program Studi Pendidikan Biologi. [Skripsi] Heinrich, M. a nd J , B arnes. 2010. F armakognosi da n F itoterapi. ( Penerjemah) Hadinata, Amalia, H. Jakarta : EGC Husna, R . 2 007. P engaruh P emberian E kstrak Tumbuhan Meniran (Phyllanthus niruri L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa. Jurusan Biologi. Fakultas Sains dan Teknologi. Universitas Islam Malang. [Skripsi] Ilmiah. S ukenda. W idanarni. D an E, H arris. 2 012. I solasi dan K arakterisasi Vibrio patogen pada I kan K erapu Macan Epinephelus fuscoguttatus. J urnal A kuakultur I ndonesia. Jurusan B udidaya P erairan. F akultas P erikanan da n I lmu K elautan, Universitas Muslim Indonesia. Makassar. Ihsani E ., 2011, P engaruh R utin da ri D aun S ingkong ( Manihot e sculenta C rentz) T erhadap Jumlah E ritrosit, R etikulosit, K adar he moglobin, da n N ilai H ematokrit pa da mencit putih betina, Skripsi Sarjana Farmasi, Sekolah Tinggi Farmasi Indonesia, Padang Juni, T., S. Sulmartiwi, D. Yeni, dan A. Sapto. 2010. Buku Ajar Ichthyologi Ikan. Program Studi S1 Budidaya Perairan. Fakultas Perikanan dan Kelautan. Universitas Airlangga Kamalludin, I. 2011. E fektivitas Ekstrak Lidah Buaya Aloe Vera Untuk Pengobatan Infeksi Aeromonas hydrophila pada I kan Lele D umbo Clarias sp Melalui P akan (S kripsi). Departemen Budidaya Perairan Fakultas Perikana dan Ilmu Kelautan. Institut Pertanian Bogor SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 42 Konema, E. W., S.T. Allen, W.M. Janda, P.C. Schreckenberger, Win and C.Jr. Washington. 1992. Diagnostic Microbiology. J.B. Lippicott Company. Philadhelphia. 618 – 638, 649 – 650. Kusriningrum, R.S. 2010. Perancangan Percobaan. Airlangga University Press. Surabaya. 1214 Lagler, K. F., J. E. Bardach., R. R. Miller., D. R. M. 1997. Ichtyology. Jhon Willey and Sons inc. New York Lanser, M . H., J . L . L anser., J . E . Olsen. 2001 . C hemotaxis of Vibrio anguillarum to F ish Mucus : Role of the Origin of the Fish Mucus, the Fish Species and the Serogroup of the Pathogen. FEMS Microbiolgy Ecology 38 (1) 77-80 Lukistyowati, I da n H . S yawal. 2013. P otensi P akan ya ng M engandung S ambiloto (Andrograpihis paniculata) da n D aun J ambu B iji ( Psidium guava) unt uk Menanggulangi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Ikan Baung (Mystus nemurus). Jurnal Akuakultur Rawa Indonesia, 1(2) : 135-147 Mangunwardoyo, W., E . C ahyaningsih., T . U sia. 2009. E kstraksi d an I dentifikasi S enyawa Antimikroba H erba M eniran (Phyllanthus niruri L.). J urnal I lmu K efarmasian Indonesia. 7 (2): 57-63 Maswan, N . A . 2009. P engujian E fektifitas D osis V aksin DNA da n K orelasinya T erhadap Parameter Hematologi Secara Kuantitatif. Fakultas Perikanan dan Kelautan Institut Pertanian Bogor. [SKRIPSI] Mathivanan R , E dwin S C, Amutha R a nd Viswanathan K . 2006. Panchagavya and Andrographis Panicuata as Alternative to Antibiotic Growth Promoter on Broiler Production and Carcass Characteristic. I ndia. D epartement of P oultry S cience, Veterinary College and Research Institute. Namakkal-637001. Mun’im, A., dan Hanani, E., 2011. Fitoterapi Dasar. Dian Rakyat. Jakarta. Nabib, R ., Pasaribu, F .H., 1989. P atologi dan P enyakit I kan. P usat A ntar M edia I nformasi LSI-IPB. Naim, R . 2 004. S enyawa A ntimikroba da ri T umbuhan. P asca S arjana F akultas K edokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor [TESIS] Nasi, L., S. B. Prayitno., Sarjito. 2011. Kajian Bakteri Penyebab Vibriosis pada Udang secara Biomolekuler. Mag ister Man ajemen S umber D aya P antai. U niversitas D iponegoro [TESIS] Nitimulyo, K .H., A. I snanstyo., T riyanto., M . M urdjani., da n L . S olichah. 2005. E fektifitas Vaksin P olivalen unt uk P engendalian V ibriosis pa da K erapu T ikus ( Cromoliptes altivelis). Jurnal Perikanan. VII (2): 95-100 SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 43 Ormonde, P., P. Horstedt., R. O. Toole., D. L. Milton. 2000. Role of Motility in Adherence to and Invassion of a Fish Cell Line by Vibrio anguillarum. Journal Bacteriology. 182 (8) : 2326-2328 Purwaningsih, U da n T aukhid. 201 0. D iagnosa P enyakit Mycobakteriosi, Mycobacterium fortuitum pada I kan G urame ( Osphronemus gouramy) de ngan T eknik P olymerase Chain Reaction (PCR). Prosiding Forum Inovasi Teknologi Akuakultur 969-975 Putra, F. S. 2013. Efek Infusum Meniran (Phyllanthus niruri) Terhadap Histopatologi Insang Ikan G urami ( Osphronemus gouramy) Y ang D iinfeksi Aeromonas hydrophilla. Fakultas Kedokteran Hewan. Universitas Airlangga. Surabaya [Skripsi] Putri, N .T., 2013. S tudi K omparasi Sensitivitas Aeromonas hydrophila Terhadap I nfusum Meniran ( Phyllanthus niruri Linn) d an O ksitetrasiklin s ecara In vitro.[Skripsi]. Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Surabaya Putri, R . R ., F . B asuki., da n S . H astuti. 2013. Profil D arah da n Kelulushidupan I kan N ila Pandu F5 (Oreochromis niloticus) yang Diinfeksi Bakteri Streptococcus agalactiae dengan Kepadatan Berbeda. Journal of Aquaculture Management and Technologi 2 (2) : 47-56 Robinson, T. 1995. Senyawa Organik Tanaman Tingkat Tinggi. Institut Teknologi Bandung Sarida, M ., T arsim., d an I . F aizal. 2010. P engaruh E kstrak B uah M engkudu ( Morinda citrifolia L.) dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Vibrio harfeyi secara In Vitro. Jurnal Penelitian Sains. 13 (3D) Sarjito, S. B. Prayitno, O. K. Radjasa dan S. Hutabarat. 2007. Karakterisasi dan Patogenitas Agensia P enyebab V ibriosis p ada Kerapu Ma can ( Epinephelus fuscoguttatus) d ari Karimunjawa. Aquacultura Indonesiana. 8 (2) : 89-95 Shabir, S., S. Jham., L.Harper., S. Ball., R. Borrows., A. Sharif. 2013. Validity of Glycated Haemoglobin to Diagnose New Onset Diabetes After Transplantation. Epub : 26(3) : 315-21 Sitanggang, M., dan B., Sarwono. 2011. Budi Daya Gurami. Penebar Swadaya. Jakarta. Sudarno., F . A . S etiorini., da n H . Suprapto. 2 011. E fektifitas E kstrak T anaman M eniran (Phyllanthus niruri) sebagai Antibakteri Edwardsiella tarda secara In Vitro. Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan. 3(1) Sunarno. 2 009. P engaruh M eniran ( Phillanthus niruri L) T erhadap P atogenesis I nfeksi Salmonella. Jurnal Kefarmasian Indo 1 (2) : 71-76 Sutanto, D. 2011. Sukses Budi Daya Gurami. Pustaka Baru. Jakarta Standar Nasional Indonesia. 2000. I nduk Ikan Gurame (Osphronemus gouramy, Lac) Kelas Induk Pokok. Badan Standardisasi Nasional SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 44 Syawal, H ., da n I khwan, Y . 201 1. R espon Fisiologis I kan J ambal S iam ( Pangasius hypopthalamus) pada Suhu Pemeliharaan yang Berbeda. Berkala Perikanan Terubuk. 39 (1) : 51-57 Toole, R. O., J. Von Hofstein., R. Rosqvist., P. Olsson., H. Wolf-Watz. 2004. V isualisation of Zebrafish Infection by GFP-labelled Vibrio anguillarum. Microbial Pathogenesis. 37(1) : 41-46 Valiente, E., F. Pa dro., J. L amas., A. L lorens., C. A maro. 2 008. Microbial an d Histopathological Study of t he V ibriosis C aused by Vibrio vulnificus Serovar E i n Eels: T he Metalloprotease V vp is N ot an E ssential L esional F actor. Microbial Pathogenesis 45 (8) 386–393 Wahjuningrum, D., E. H. Solikhah., T. Budiardi., M. Setiawati. 2010. P engendalian Infeksi Aeromonas Hydrophila pada Ikan Lele Dumbo (larias sp.) dengan Campuran Meniran (Phyllanthus niruri) da n B awang P utih ( Allium sativum) da lam P akan. J urnal Akuakultur Indonesia 9(2), 93-103 Warni, E. 2009. Penentuan Morfologi Sel Darah Merah (Eritrosit) Berbasis Pengolahan Citra dan J aringan S yaraf T iruan. J urnal Ilmiah “ Elektrikal E njiniring” U NHAS. V olume. 07 No. 03 Yanuhar, U . 2011. R espon I mmun S el I nterleukin -4 ( IL-4) pa da Ikan K erapu T ikus (Cromilrptus altivelis) yang D ipapar P rotein Imunogenik Vibrio harveyi. Jurnal kelautan 4 (2) SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA Lampiran 1. Skema Pengenceran Bakteri Keterangan : s tandar M c. F arland No.1 memiliki ke keruhan s ama de ngan 3.10 8 CFU/ml. Perhitungan pengenceran adalah sebagai berikut : o Dibutuhkan suspensi bakteri de ngan kons entrasi 10 8 CFU/ml s ebanyak 10 ml + 990 ml air untuk mendapatkan konsentrasi bakteri 108 CFU/ml dalam 1 L o Dibutuhkan s uspensi ba kteri de ngan kons entrasi ba kteri 10 8 CFU/ml s ebanyak 50 m l + 4950 ml air untuk mendapat konsentrasi bakteri 108 CFU/ml dalam 5 L air. o Dibutuhkan suspense bakteri dengan konsentrasi bakteri 10 6 CFU/ml sebanyak 150 ml + 14850 ml air untuk mendapatkan konsentrasi bakteri 106 CFU/ml dalam 15 L air. 45 SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 46 Lampiran 2. Perhitungan Dosis Infusum Meniran Infusum meniran konsentrasi 100% dibuat dari 1 kg meniran ditambah a kuades a d 1 liter, direbus dalam panci infusum dihitung mulai suhu 900C selama 15 menit, kemudian disaring menggunakan kain flannel dan diperas. Infusum meniran konsentrasi 100% dibuat dari 1kg bahan kering meniran. Volume yang digunakan untuk dipping masing-masing dosis adalah 1 liter, maka : • Dosis infusum meniran 10% Pembuatan : 100 g meniran kering + akuades ad 1000 ml (1 liter) • Dosis infusum meniran 20% Pembuatan : 200 g meniran kering + akuades ad 1000 ml (1 liter) • Dosis infusum meniran 30% Pembuatan : 300 g meniran kering + akuades ad 1000 ml (1 liter) SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 47 Lampiran 3. HasilAnalisis Data Menggunakan SPSS Oneway Descriptives Hb N Mean Std. Std. Error 95% Confidence Interval Deviation Minimum Maximum for Mean Lower Upper Bound Bound P0(-) 4 9.1850 .95765 .47883 7.6612 10.7088 8.01 10.08 P0(+) 4 7.0700 .53385 .26693 6.2205 7.9195 6.53 7.64 P1 4 8.5300 .73025 .36513 7.3680 9.6920 7.95 9.56 P2 4 8.9350 .61196 .30598 7.9612 9.9088 8.15 9.53 P(3) 4 9.4350 1.45292 .72646 7.1231 11.7469 8.01 11.22 Total 20 8.6310 1.18395 .26474 8.0769 9.1851 6.53 11.22 ANOVA HB Sum of Squares df Mean Square Between Groups 13.971 4 3.493 Within Groups 12.663 15 .844 Total 26.633 19 F 4.137 Sig. .019 Post Hoc Tests Homogeneous Subsets HB a Duncan PERLAKUAN N Subset for alpha = 0.05 1 2 P0(+) 4 P1 4 8.5300 P2 4 8.9350 P0(-) 4 9.1850 P(3) 4 9.4350 Sig. 7.0700 1.000 .218 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 48 Means Plots SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA Oneway 49 Descriptives PCV N Mean Std. Std. Error Deviation 95% Confidence Interval Minimum Maximum for Mean Lower Upper Bound Bound P0(-) 4 28.2500 5.25198 2.62599 19.8929 36.6071 21.00 33.00 P0(+) 4 21.2500 2.75379 1.37689 16.8681 25.6319 18.00 24.00 P1 4 27.0000 3.16228 1.58114 21.9681 32.0319 24.00 31.00 P2 4 30.0000 3.74166 1.87083 24.0462 35.9538 25.00 34.00 P(3) 4 32.2500 3.94757 1.97379 25.9685 38.5315 29.00 37.00 Total 20 27.7500 5.11834 1.14449 25.3545 30.1455 18.00 37.00 ANOVA PCV Sum of Squares df Mean Square Between Groups 273.500 4 68.375 Within Groups 224.250 15 14.950 Total 497.750 19 F Sig. 4.574 .013 Post Hoc Tests Homogeneous Subsets PCV a Duncan PERLAKUAN N Subset for alpha = 0.05 1 2 P0(+) 4 21.2500 P1 4 27.0000 P0(-) 4 28.2500 P2 4 30.0000 P(3) 4 32.2500 Sig. .053 27.0000 .096 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 50 Means Plots SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 51 Oneway Descriptives Eritosit N Mean Std. Deviation Std. Error 95% Confidence Interval for Minimum Maximum Mean Lower Bound Upper Bound P0(-) 4 1033125.0000 322020.80031 161010.40016 520718.0469 1545531.9531 747500.00 1.48E+006 P0(+) 4 16875.5000 12141.52658 6070.76329 -2444.3782 36195.3782 5000.00 32502.00 P1 4 79375.0000 28090.25632 14045.12816 34677.1338 124072.8662 42500.00 102500.00 P2 4 848750.0000 199796.77175 99898.38587 530828.7510 1166671.2490 665000.00 1.08E+006 P(3) 4 1085625.0000 295214.43478 147607.21739 615872.9564 1555377.0436 790000.00 1.50E+006 Total 20 612750.1000 516945.55496 115592.54015 370812.1329 854688.0671 5000.00 1.50E+006 ANOVA ERITROSIT Sum of Squares Between Groups Within Groups df F 4382308866500.7 4 1095577216625.1 99 99 695112562503.00 15 Sig. 23.642 .000 46340837500.200 0 5077421429003.8 Total Mean Square 19 00 Post Hoc Tests Homogeneous Subsets ERITROSIT a Duncan PERLAKUAN N Subset for alpha = 0.05 1 2 P0(+) 4 16875.5000 P1 4 79375.0000 P2 4 848750.0000 P0(-) 4 1033125.0000 P(3) 4 1085625.0000 Sig. .687 .160 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 52 Means Plots SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA 53 Lampiran 4. DokumentasiKegiatanPenelitian Gambar 1. Meniran Segar Gambar 2. Meniran Kering Gambar 3. Proses pemotongan meniran sebelum digiling Gambar 4. Meniran yang sudah digiling SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA Gambar 5. Media Alkaline Peptone Water (APW) Gambar 6. Bakteri Vibrio anguillarum Gambar 7. Proses adaptasi ikan gurami Gambar 8. Proses infeksi ikan dengan Vibrio anguillarum SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... 54 MOCH. BASYARUL HAQ ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA Gambar 9. Proses pembuatan infusum Gambar 10. Proses perendaman infusum Gambar 11. Proses pengambilan darah Gambar 12. Darah ikan yang sudah diambil Gambar 13. Proses pembuatan hematokrit (PCV) Gambar 14. Darah dicampur larutan drabkin proses perhitungan hemoglobin SKRIPSI PERENDAMAN INFUSA MENIRAN.... 55 MOCH. BASYARUL HAQ
