analisis cemaran dna babi pada dendeng

advertisement
ANALISIS CEMARAN DNA BABI PADA DENDENG MENGGUNAKAN
PRIMER MITOKONDRIA D-LOOP686 DAN GEN CYTB DENGAN
METODE REAL TIMEPOLYMERASE CHAIN REACTION
(REALTIME PCR)
St. Maryam
INTISARI
Identifikasi spesies pada produk daging telah menarik perhatian sejak
bahan makanan ini dijadikan target pemalsuan dan kecurangan dalam pelabelan
produk. Sebagai negara yang mayoritas penduduknya beragama Islam, hal ini
tentu saja menimbulkan keresahan terkait perlindungan hak konsumen muslim
karena menyangkut masalah kehalalan pangan. Sehingga perlu dilakukan suatu
analisis untuk mendeteksi keberadaan daging babi pada produk olahan daging,
diantaranya adalah pada produk dendeng.
Real TimePolymerase Chain Reaction (Real Time PCR)menggunakan
primer spesies spesifik DNA mitokondria Displacement Loop (D-Loop)686 yang
didesain secara spesifik pada DNA mitokondia babi dan primer yang sudah
dipublikasicytochromeb (cytb) gene, dilakukan untuk mengidentifikasi secara
spesifik DNA babi terhadap empat jenis DNA spesies lainnya yaitu sapi, ayam,
kambing, dan kuda. Metode tersebut juga digunakan untuk mengidentifikasi DNA
babi pada produk olahan daging dendeng yang mengandung campuran daging
sapi.
Hasil identifikasi menunjukkan bahwa real time PCR dengan primer
D-Loop686 dan gen cytbsecara spesifik mampu membedakan DNA babi diantara
DNA spesies lainnya. Konsentrasi terendah 0,5% DNA babi dalam campuran
daging sapi pada produk olahan dendeng mampu dideteksi oleh kedua primer
tersebut dengan produk hasil amplifikasi 114 dan 134 bp (base pair) untuk DLoop686 dan 149 bp untuk gen cytb. Sensitifitas yang tinggi dari pengujian juga
diperoleh dari penggunaaan kedua primer tersebut pada batas deteksi terendah 5
pg/µL DNA babi. Hasil dari amplifikasi enam produk dendeng pasaran
menggunakan kedua primer tersebut menunjukkan tidak ada produk yang
teramplifikasi.
Kata kunci : Identifikasi DNA babi, Mitokondria D-Loop686, cytochromeb (cytb)
gene, Real TimePolymerase Chain Reaction (Real Time PCR)
xx
ANALYSIS CONTAMINATION OF PORCINE DNA IN DENDENG
USING PRIMERS MITOCHONDRIAL D-LOOP686 AND CYTB GENE
BY REAL TIME POLYMERASE CHAIN REACTION
(REAL TIMEPCR) METHOD
St. Maryam
ABSTRACT
The identifications of species in meat products have drawn much interest
since these foods become the target of forgery and fraud in the product labeling.
As a country whose majority population are Muslim, it certainly concerns
regarding the protection of Muslims consumer because it involves the issue of
halal food. Hence, an analysis must be done to detect the presence of pork in
processed meat products, such as in dendeng product.
Real Time Polymerase Chain Reaction (Real Time PCR) used primer
specific species mitochondrial DNA Displacement Loop (D-Loop)686 which was
designed specifically to DNA mitochondrial pigs and primer have been published
cytochrome b (cytb) gene also carried out to identify specific DNA pig to other
four types of DNA species; namely cattle, chickens, goats, and horses. This
method was also used to identify DNA porkin processed meat product dendeng
that contains of beef mixture.
Theidentification results show thatreal timePCRwithprimers
D-Loop686 and cytb gene specifically were able to distinguishbetween pig DNA
and the other species. The lowest concentration of 0.5%of pig DNA in a mixture
beef on processed products dendeng is able to be detected by both the primers
product of amplification with 114 and 134 bp (base pair) to the D-Loop686 and
149 bp for cytb gene. High sensitivity of the test was also obtained from the use of
both the primers on the lowest detection limit of 5 pg/µL pig DNA. The results of
the six amplification products dendeng market using both primers showed no
amplified products.
Key words : Porcine DNA Identification, Mithocondrial D-Loop686,
Cythocrome b gene, Real Time Polymerase Chain Reaction (Real Time PCR)
xxi
Download