2.2.3. Penentuan asam lemak metil ester (FAMEs) Komposisi lipid ditentukan sebagai FAME dengan transesterifikasi langsung (Su et al., 2007). Sebuah alikuot 8-ml larutan NaOH met-anolik 0,5 M ditambahkan ke lipid total 100 ml sampel yang diekstraksi yang disebutkan dalam Bagian 2.2.2 di bawah aliran nitrogen dan dikocok selama 30 menit sebelum dipanaskan dalam penangas air pada 100 ° C selama 30 menit. Setelah pendinginan sampai suhu kamar, 8 ml larutan HCl metanol 0,7 M dan 8 ml larutan BF3 metanol 14% (m / v) (Sigma, USA) ditambahkan di bawah aliran nitrogen dan dicampur. Setelah dipanaskan dalam penangas air 100 ° C selama 30 menit dan pendinginan hingga suhu kamar, 2 ml larutan NaCl jenuh dan 10 ml heksan ditambahkan sebelum sentrifugasi (15 menit pada 3600g). Superna-tant dikumpulkan untuk analisis FAME. FAME dideteksi dengan kromatografi gas, menggunakan FOCUSGC (Thermo Electron Corporation, Milan, Italy) yang dilengkapi dengan detektor ionisasi api dan kolom kapiler sepanjang 60 m (Typeno. 260M154P, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) dengan diameter internal 0,25 mm. Untuk setiap pengukuran, 2 l dari sampel diinjeksikan ke dalam GC. Helium digunakan sebagai pembawa pada laju alir 1,5 ml min1. Suhu injektor dan detektor dipertahankan pada 260 ° C. Suhu oven awalnya diatur pada 140 ° C dan kemudian dinaikkan menjadi 190 ° C dengan kecepatan 4 ° C min1, diikuti dengan peningkatan menjadi 240 ° C dengan kecepatan 4 ° C min1, dan kemudian dipertahankan pada 240 ° C selama 3 min. Kurva standar dari masing-masing FAME disiapkan menggunakan FAME standar (Sig-ma, USA).
