AGUS PURWITO KKP3T bag4

advertisement
Isolasi dan fusi protoplas populasi sel haploid dan diploid jeruk
keprok
Kalus haploid – kalus diploid – mesofil daun in vitro
 dicacah
Lar. Enzim (selulase, macerozim, pektiolase)
 Inkubasi gelap
Pemurnian
Pengapungan
 Densitas > 104 prot/ml
Fusi (PEG)
Regenerasi sel hibrid
Fusan/ sel hibrid
Regenerasi dd sel
Pembelahan sel
 mikrokalus
Regenerasi
 Double layer medium
Embrio somatik /kalus embriogenik
Hibrida somatik
Evaluasi ( kromosom/tk ploidi)
Larutan:
30% PEG 4000
glucosa 0.3 M,
66 mM CaCl2. 2H2O
pH 7.5
Petridish plastik
400 000 prot/ml
Protoplas (0.6 ml)
menempel pada
dasar petridish
5-10 menit  cuci beberapa kali
FUSI dengan
PEG
Cuci
A
B
A
B
Cuci
A
Cuci
HASIL PENELITIAN
Download