Isolasi dan fusi protoplas populasi sel haploid dan diploid jeruk keprok Kalus haploid – kalus diploid – mesofil daun in vitro dicacah Lar. Enzim (selulase, macerozim, pektiolase) Inkubasi gelap Pemurnian Pengapungan Densitas > 104 prot/ml Fusi (PEG) Regenerasi sel hibrid Fusan/ sel hibrid Regenerasi dd sel Pembelahan sel mikrokalus Regenerasi Double layer medium Embrio somatik /kalus embriogenik Hibrida somatik Evaluasi ( kromosom/tk ploidi) Larutan: 30% PEG 4000 glucosa 0.3 M, 66 mM CaCl2. 2H2O pH 7.5 Petridish plastik 400 000 prot/ml Protoplas (0.6 ml) menempel pada dasar petridish 5-10 menit cuci beberapa kali FUSI dengan PEG Cuci A B A B Cuci A Cuci HASIL PENELITIAN