66 LAMPIRAN 1. Skema Alur Pikir • Keberadaan bakteri mempunyai

66
LAMPIRAN 1. Skema Alur Pikir

Keberadaan bakteri mempunyai nilai yang penting dalam patogenesis pulpa
dan periapeks. Eliminasi mikroorganisme dari saluran akar yang terinfeksi
merupakan fokus utama pada perawatan saluran akar.

Berbagai penelitian telah dilakukan untuk mengetahui jenis mikroorganisme
yang berperan dalam patogenesis pulpa dan periapeks. Hasil penelitian menunjukkan
bakteri obligat anaerob merupakan bakteri dominan sebagai penyebab infeksi saluran
akar terutama asimptomatik.

Menurut Sundqvist (1994), Fusobacterium nucleatum merupakan salah satu
bakteri yang paling banyak ditemukan pada infeksi saluran akar dengan persentase
insidens sebesar 48%.

Merupakan salah satu bakteri yang dapat menimbulkan tanda dan gejala
klinis, walaupun tidak cukup korelasi mutlaknya. Meskipun demikian, keberadaan
Fusobacterium nucleatum akan meningkatkan proses infeksi dari strein bakteri
pigmen hitam.

Ca(OH)2 telah digunakan sejak tahun 1920 dan saat ini merupakan bahan
medikamen yang paling sering digunakan, serta terbukti sebagai bahan biokmpatibel
dan efektif pada gigi dengan periodontitis apikalis serta memiliki daya antibakteri.
Universitas Sumatera Utara
67

Buah mahkota dewa bentuknya bulat, diameter bervariasi, biasanya berkisar
3-5 cm, permukaan licin, beralur, ketika muda warnanya hijau dan ketika masak,
warnanya merah. Daging buah berwarna putih, berserat dan berair.

Buah mahkota dewa (Phaleria macrocarpa [Scheff.] Boerl) telah lama
digunakan sebagai obat alternatif kesehatan. Telah dilakukan penelitian mengenai
zona hambat infusum daun mahkota dewa pada pertumbuhan Streptococcus mutans.
(Kiki Yunanto,2007). Hasil penelitian tersebut adalah semakin tinggi konsentrasi
infusum daun mahkota dewa, maka semakkin besar zona inhibisinya dan daya
hambat terbesar pada ketiga perlakuan(konsentrasi infusum 50%, 25%, dan 12,5%)
adalah infusum daun mahkota dewa 50%.

Hasil penelitian menyatakan bahwa daging buah mahkota dewa tidak bersifat
toksik (Lucie Widowati,2003).

Hasil penelitian menyatakan bahwa daging buah mahkota dewa memiliki
senyawa aktif yang berkhasiat sebagai bahan antibakteri, yaitu polifenol, saponin,
alkaloid, dan tanin. (Luciana Beatrice,2010).

Karena adanya kandungan empat senyawa aktif yang berkhasiat sebagai
antibakteri, timbul pemikiran untuk meneliti peranannya ekstrak etanol buah mahkota
dewa dalam proses eliminasi bakteri di saluran akar, dalam hal ini hendak dilakukan
penelitian terhadap bakteri Fusobacterium nucleatum.

Saponin yang terkandung dalam buah mahkota dewa diketahui berperan
sebagai detergen / surfaktan, juga memiliki sifat lain, yaitu sebagai anti-bakteri dan
anti-virus, mampu meningkatkan sistem kekebalan tubuh, meningkatkan vitalitas,
mengurangi kadar gula dalam darah, mengurangi penggumpalan darah.

Polifenol dan Tanin merupakan senyawa fenolik kompleks yang berfungsi
mengikat dan mengendapkan protein, serta diduga memiliki bekerja sebagai anti
bakteri. Alkaloid mampu berikatan dengan DNA sel sehingga menyebabkan fungsi
sel terganggu.
Universitas Sumatera Utara
68
Seperti halnya ekstrak buah mahkota dewa yang dapat dipergunakan sebagai
salah satu alternatif bahan medikamen saluran akar serta ekstrak etanol buah
mahkota dewa yang dapat menghambat pertumbuhan Enterococcus faecalis,
maka timbul pemikiran untuk melakukan penelitian yang menguji daya antibakteri buah mahkota dewa sebagai bahan medikamen saluran akar terhadap
bakteri Fusobacterium nucleatum.
Yang menjadi permasalah adalah:
Apakah ekstrak buah mahkota dewa memiliki daya anti-bakteri dengan
mengetahui konsentrasi minimal terhadap pertumbuhan bakteri Fusobacterium
nucleatum.
Tujuan penelitian:
Untuk mengetahui konsentrasi minimum ekstrak etanol buah mahkota dewa
dalam menghambat pertumbuhan bakteri Fusobacterium nucleatum.
DAYA ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL BUAH MAHKOTA DEWA
(Phaleria macrocarpa [Scheff] Boerl) TERHADAP Fusobacterium nucleatum
SEBAGAI BAHAN ALTERNATIF MEDIKAMEN SALURAN AKAR
SECARA IN VITRO
Universitas Sumatera Utara
69
LAMPIRAN 2. Skema Alur Penelitian
2.1
Pembuatan ekstrak buah mahkota dewa
Sediaan buah mahkota dewa yang segar dan
matang.
Bahan baku dicuci bersih, ditimbang lalu diiris
halus dan dikeringkan selama 10 hari di lemari
pengering.
Sampel diblender menjadi serbuk, lalu dimaserasi
dengan pelarut etanol 96% selama 3 jam kemudian
diperkolasi. Ditutup dengan alumunium foil dan
dibiarkan selaman 24 jam.
Setelah 24 jam, cairan (maserat) ditampung.
Ulangi prosedur tersebut sampai maserat yang
dihasilkan berwarna jernih.
Semua maserat yang didapat,digabung dan
disaring, lalu diuapkan menggunakan vaccum
rotary evaporator pada tekanan < 1 ATM dengan
temperatur ≤ 60°C.
Ekstrak kental berwarna coklat dengan konsentrasi
100 %.
Universitas Sumatera Utara
70
2.2
Pembuatan media pertumbuhan
Mueller Hinton Agar 12 gram + aquadest 240 ml
Dipanaskan hingga mendidih.
Disterilkan dengan autoklaf selama 3 jam.
Jika akan digunakan,dipanaskan kembali hingga
Dituangkan ke dalam petri.
2.3
Pembiakan spesimen
Stem cell Fusobacterium nucleatum ATCC 25586.
Dibiakkan pada media pertumbuhan.
1 – 2 ose koloni disuspensikan dengan larutan
NaCl 0,9%.
Diperoleh sesuai kekeruhan Mac Farland
(Kekeruhan 0,5 Mac Farland / 1.108 CFU/ml.)
Universitas Sumatera Utara
71
2.4
Skema Ujibakteri
Suspensi bakteri F.nucleatum ATCC 25586
Ekstrak etanol buah mahkota dewa dengan konsentrasi
100%, 50%, 25%, 12,5%, 6,25%, 3,125%, 1,56%.
Dimasukkan dalam inkubator CO2 dengan suhu 37°C
selama 24 jam.
Membandingkan kekeruhan dengan kontrol (Mac
Farland yang diinkubasi 24 jam.)
Penentuan nilai MIC dari kelompok perlakuan yang
mulai tampak jernih.
Menghitung jumlah koloni bakteri pada kelompok
perlakuan yang mulai tampak jernih.
Metode Drop Plate Mills Mesra.
Hasil
Universitas Sumatera Utara
72
LAMPIRAN 3.
SERTIFIKAT HASIL UJI
Pengujian Mikrobiologi
1. Contoh uji : Ekstraks mahkota dewa terhadap Fusobacterium
nucleatem subspecies nucleatum ATCC 25586
2. Penguji
: Staf Laboratorium Lembaga Penyakit Tropis
3. Permintaan : Carolina Kere (Mahasiswa FKG USU)
Uraian Jenis Pengujian
No PARAMATER
1
Hasil Uji
Hasil Hitung Kuman
a.
Konsentrasi 100%
-
Ulangan 1
Ulangan 2
Ulangan 3
Ulangan 4
Ulangan 5
Ulangan 6
b.
Konsentrasi 50%
-
Ulangan 1
Ulangan 2
Ulangan 3
Ulangan 4
Ulangan 5
Ulangan 6
c.
Konsentrasi 25%
-
Ulangan 1
Ulangan 2
Ulangan 3
Ulangan 4
Ulangan 5
Ulangan 6
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
Universitas Sumatera Utara
73
d.
Konsentrasi 12,5%
-
Ulangan 1
Ulangan 2
Ulangan 3
Ulangan 4
Ulangan 5
Ulangan 6
e.
Konsentrasi 6,25%
-
Ulangan 1
Ulangan 2
Ulangan 3
Ulangan 4
Ulangan 5
Ulangan 6
f.
Konsentrasi 3,125%
-
Ulangan 1
Ulangan 2
Ulangan 3
Ulangan 4
Ulangan 5
Ulangan 6
g.
Konsentrasi 1.56%
-
Ulangan 1
Ulangan 2
Ulangan 3
Ulangan 4
Ulangan 5
Ulangan 6
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
0 CFU/ml (steril)
141.20 CFU/ml
166.20 CFU/ml
172.20 CFU/ml
125.20 CFU/ml
120.20 CFU/ml
116.20 CFU/ml
Catatan: Hasil uji hanya berlaku untuk contoh yang diuji. Faktor pengenceran 20 kali
Surabaya, 23 Juni2011
Penanggung Jawab Pengujian
Wahyu Hidayatiningsih,S.Si, M.Kes
Universitas Sumatera Utara
74
LAMPIRAN 4.
Universitas Sumatera Utara