Sintesis DNA

advertisement
Sintesis DNA In Vitro
Sintesis DNA secara Kimia
•Sintesis DNA berlangsung dari arah 3’ ke
5’.
•Nukleotida pertama ditempelkan pada glass
bead berpori melalui suatu molekul spacer.
•Suatu senyawa pembloking ditambahkan pada
ujung 5’ (dimethyloxytrityl DMT)
Nukleosida fosforamidit
Penambahan nukleotida kedua
TCGGACCGCTGGTAGCA
PCR Konvensional
• Memperbanyak DNA untuk keperluan riset,
kloning,
• Deteksi
• Uji end-point
• Secara teori, amplifikasi berlangsung secara
eksponensial
• Pada kenyataannya, proses tidak kuantitatif
qPCR/Real time PCR
• Deteksi produk amplifikasi berdasarkan
fluoresens menggunakan pewarna pengikat
DNA, pelacak hibridisasi
• Menentukan produk DNA setiap siklus
amplifikasi
Download