Identifikasi Molekuler Outer Membran Protein (OMP

Rektor Universitas Brawijaya
Ketua Lembaga Penelitian Universitas Brawijaya
DEWAN REDAKSI
Ketua
Prof. Dr. Ir. Syamsul Bahri, M.S
Anggota
Prof. Dr. Ir. Moch. Munir, M.S (Unibraw-2008)
Prof. Drs. Sutiman B. Sumitro, S.U.D. Sc (Unibraw-2008)
Prof. Dr. Ir. SM Sitompul (Unibraw-2008)
Prof. Dr. Ir. Luqman Hakim, M.S (Unibraw-2008)
Prof. Dr. Ir. Rustidja, M.S (Unibraw-2008)
Dr. Ir. Nasir Saieh (Balitkabi Deptan-2008)
Penyunting Ahli
Ir. Arifin Noor Sugiharto, M.Sc, Ph.D (Unibraw-2008)
Ir. Didik Suprayogo, M.Sc, Ph.D (Unibraw-2008)
Dr. Ir. Moch. Sahid (Balittas Deptan-2008)
Brian O Flaherty (Ahli Bhs inggris-2008)
Dra. Francien Herien Tomasowa., Ph.D (Lab. Bhs. Unibraw-2008)
Drs. Adiono, M.A., Ph.D (Lab. Bhs. Unibraw-2008)
Penyunting Pelaksana
Drs. Sofy Permana, MSc, DSc (Unibraw-2008)
AgustinaTri Endharti, S.Si., Ph.D (Unibraw-2008)
Sekretariat
Pujiono, SH
Alamat Redaksi/Penerbit
Lembaga Peneiitian Universitas Brawijaya
Jl. Veteran, Malang - 65145
Telp. (0341) 575824, 551611 psw. 301, Fax. (0341) 575828 E-mail:
[email protected]
Identifikasi Molekuler Outer Membran Protein (OMP) Sebagai Faktor Virulensi
Pseudomonas Aeruginosa Pada Sel Endotel Huvecs
Dwi Yuni Nurhidayati1, Uun Yanuhar2
Fakultas Kedokteran1, Fakultas Perikanan2 Universitas Brawijaya, Malang
Abstrak
Faktor virulensi bakteri Ps. aeruginosa adalah merupakan suatu molekul adesin yang berperan
dalam proses infeksi dan sepsis pada penderita bakteremia, molekul adesin tersebut yaitu outer
membrane protein (Omp) yang merupakan haemaglutinin, bersifat virulens dan sitotoksik pada sel
endotel Human Umbilical Vein Endothelial Cell (HUVECs) manusia. Tujuan penelitian adalah untuk
mengidentifikasi molekuler protein adesin virulens Omp Ps. aeruginosa, sebagai faktor virulensi sebagai
protein haemaglutinin. Metode penelitian adalah eksperimental laboratorium dengan mengisolasi
faktor virulennsi bakteri yaitu Omp Ps. aeruginosa dari pasien bakteremia dari RSSA Malang
menggunakan N-Octyl-Beta-D-glucopyranoside 0,05%, dan saturasi menggunakan ammnonium sulfat,
menguji protein virulensi sebagai protein haemaglutinin dengan uji aglutinasi, konfirmasi dengan
menguji indeks perlekatan bakteri pada sel endotel HUVECs kultur in vitro, dan penentuan bobot
molekul (BM) protein dengan elektroforesis SDS-Page dan menguji pita protein Omp dengan uji
haemaglutinin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa crude isolat Omp Ps.aeruginosa merupakan suatu
protein haemaglutinin dengan titer 'A. Berdasarkan konfirmasi BM protein Omp Ps. aeruginosa
diperoleh 3 BM pita protein mayor yaitu 77,4 kDa; 14,5 kDa; dan 6,6 kDa, protein BM 6,6 kDa adalah
merupakan protein haemaglutinin dengan konsentrasi 1/32. Kesimpulan penelitian adalah bahwa Omp
bakteri Ps. aeruginosa dari pasien bakteremia dengan BM 6,6 kDa merupakan protein adesin dan
merupakan protein haemaglutinin dengan konsentrasi tertinggi sebesar 1/32.
Kata kunci : adesi, faktor virulensi, haemaglutinin, HUVECs, Ps. aeruginosa, Omp.
The Molecular Identification of Outer Membrane Protein (OMP) As Virulence Factor of
Pseudomonas aeruginosa on Endothellial Cells (HUVECs)
Abstract
on Endothellial Cells (HUVECs). The virulence factor of Ps. aeruginosa is adhesion molecule
which causing infection and sepses on bacteremia patient and it was a haemagglutinin protein that
having the character of virulence and cytotoxic on the targeted organ cell, i.e. endothelial cell HUVECs.
The objective of research is to identify a virulence adhesin protein of Ps. aeruginosa that is Omp as
haemagglutinin protein that have a role in bacteria adherent on endothelial cell HUVECs. Research
methods are experimental laboratory by following procedure: isolate Omp Ps. aeruginosa of bacterimie
patient from RSSA Malang using N-Octyl-Beta-D-glucopyranoside 0,05%, saturate protein by using
ammonium sulfate, test of haemagglutinin protein by agglutination test, confirmed by adhesion index
on HUVECs cultured in vitro, and determine molecule weight of protein using electrophoreses SDS-Page
and test to Omp by haemaglutinin test. The result show that crude isolate of Omp of Ps. aeruginosa is
haemaglutinin protein by titer of 1/2. Based on confirmed molecular weight of Omp of Ps. aeruginosa
obtained 3 main protein that are 77.4 kDa, 14.5 kDa and 6.6 kDa. Protein 6.6 kDa is haemaglutinin
protein by titer of 1/32. The conclusion is Omp of Ps. aeruginosa from bacterimia patient with a
molecule weight of 6.6 kDa is both an adhesin and haeinagglutin protein by the highest titer of 1/32.
Keywords : adhesion, Haemaglutinin, HUVECs, Ps. aeruginosa, Omp, virulence factor.