DALF BLOOD GROUPING TEST Anti-A, Anti-B, and Anti-AB B. Metode Tes Tabung Reaksi Pendahuluan DALF Blood Grouping Anti-A, Anti-B dan Anti-AB adalah 1. Siapkan suspensi sel darah merah 2-5% dalam larutan reagen untuk mengidentifikasi golongan darah ABO dengan cara saline. slide atau tabung reaksi. Antigen sel darah manusia dapat dibagi 2. Untuk setiap tabung reaksi,tambahkan satu tetes (50 ul) dalam 4 golongan : A, B, AB, dan O. dari setiap reagen blood grouping yang akan dites. 3. Tambahkan satu tetes (50ul) dari suspensi sel darah merah pada setiap tabung dengan menggunakan pipet transfer. Prinsip Tes DALF Blood Grouping Anti-A, Anti-B dan Anti-AB digunakan Homogen dengan baik. berdasarkan pada prinsip aglutinasi. Sel darah merah sebagai 4. Untuk rapid tes, sentrifuge tabung reaksi selama antigen akan teraglutinasi jika berikatan dengan antibodi. 10-20 detik dengan kecepatan 1500 – 2500 rpm atau inkubasi pada suhu ruang selama 30 menit. DALF Blood Grouping adalah larutan reagen siap pakai terbuat 5. Perlahan perhatikan bentuk titik pada sel darah pada dari supernatant kultur sel hybridoma tikus. Antibodi tabung dan lihat aglutinasi yang terjadi secara immunoglobulin ini adalah campuran dari antibodi monoclonal makroskopik. yang mempunyai kemampuan untuk mengenali secara spesifik epitope dari sel darah merah sebagai antigen. Hasil Reaksi Perhatian 1. Tes hanya untuk in vitro diagnostik saja. 2. Perlakukan semua spesimen dengan hati-hati. 3. Reagen ini mengandung sodium azide sebagai pengawet. Hindari kontak langsung dengan kulit dan mukosa. Blood Grouping O A B AB Anti-A Anti-B Anti-AB + + + + + + + Pengumpulan dan Persiapan Spesimen. 1. Sampel sel darah manusia dengan atau tanpa anti- Keterbatasan Hasil Prosedur Tes koagulan. 1. Negatif palsu atau reaksi yang lemah bisa disebabkan oleh 2. Tes harus dikerjakan secepatnya setelah pengambilan darah yang lemah dari sub group A atau B atau dengan sel sampel. darah merah uterus ( Cord Red Cell ) dari bayi yang baru 3. Sampel dengan EDTA atau Heparin dapat disimpan lahir. pada suhu 2 – 8 0C selama 2 hari saja. 2. Sel darah merah dari bayi yang baru lahir belum memiliki antigen A dan B yang seutuhnya dan bisa membuat hasil Bahan tambahan yang diperlukan : tes golongan darah ABO menjadi lemah. Kertas slide, Tabung reaksi, Pipet ukur, Larutan Isotonik Saline, 3. Negatif palsu atau reaksi yang lemah bisa disebabkan Sentrifuge, Timer dan Stik Pengaduk. karena penyimpanan sel darah merah yang terlalu lama atau ketidak sesuaian metode penyimpanan. Prosedur Tes 4. Variable tes seperti teknik yang tidak benar, sentrifugasi Siapkan reagen dan sampel yang akan digunakan untuk atau inkubasi yang tidak tepat, peralatan gelas yang tidak mencapai suhu ruang sebelum pengetesan. bersih dan atau kontaminasi dari bakteri atau bahan kimia, dapat menyebabkan hasil tes menjadi keliru. A. Metode Tes Slide 5. Sel darah manusia yang terkena penyakit tertentu dapat 1. Teteskan satu tetes reagen Anti-A,Anti-B atau Anti-AB memberikan hasil positif palsu atau negatif palsu dengan pada kertas/kartu slide yang belum pernah terpakai. Anti-A atau Anti-B 2. Lalu tambahkan satu tetes kecil sel darah merah atau whole blood pada tiap-tiap reagen pada kartu. 3. Aduk campuran tersebut secara merata dengan menggunakan stik atau tusuk gigi dengan gerakan melingkar. 4. perlahan-lahan putar atau goyangkan secara melingkar slide atau kartu dan perhatikan aglutinasi yang terjadi secara makroskopik dalam waktu 20detik hingga 2 menit. PT. JAFAREL MEDIATICS Jl. Kendal No. 6, Menteng, Jakarta Pusat 10310 Phone : 21 314 9027 / 28 Fax : 21 390 6956 DALF BLOOD GROUPING TEST Anti-D (Anti-Rh) IgG / IgM Pendahuluan DALF Blood Grouping Anti-D (Anti-Rh) merupakan reagen untuk menentukan Rhesus dari golongan darah secara aglutinasi. Prinsip Tes Prosedur yang digunakan dalam reagen ini berdasarkan pada prinsip aglutinasi. Sel darah manusia normal memiliki antigen yang akan langsung menggumpal dengan adanya ikatan terhadap antibodi spesifik. Reagen DALF Blood Grouping Anti-D khusus untuk melihat antigen D secara aglutinasi pada sel darah manusia. Terbentuknya aglutinasi dari sel darah manusia dengan reagen anti-D menandakan adanya antigen D pada sel darah merah. Tidak terjadinya aglutinasi menandakan tidak adanya antigen D pada sel darah merah. Deskripsi Produk DALF Blood Grouping Anti-D dipersiapkan dari monoklonal Anti-D manusia. Serum manusia mengandung anti-D didapat dari pendonor yang sudah diimunisasi. DALF Blood Grouping Anti-D digunakan untuk tes pada slide atau pada tabung reaksi. Tindakan Pencegahan 1. Tes hanya untuk in vitro diagnostik saja. 2. Perlakukan semua spesimen dengan hati-hati. Perhatian : mengandung sodium azide. Sodium azide bisa bereaksi dengan timah dan tembaga dapat menghasilkan ledakan yang besar. Untuk menghindari ledakan, campur buangan reagen dengan air sebanyak-banyaknya. Pengumpulan dan Perlakuan Spesimen 1. Tes dilakukan pada sel darah manusia. Spesimen darah bisa dikumpulkan dengan atau tanpa anti-koagulan. 2. Tes harus dikerjakan secepatnya setelah pengumpulan spesimen. Darah yang didapat dari tusukan jari bisa langsung diperiksa dengan metode tes slide secepatnya dicampur dengan reagen untuk menghindari penggumpalan. 3. Jika tes ditunda, spesimen harus disimpan pada suhu 2-8 0C. Darah dengan antikoagulan seperti Heparin atau Oksalat harus diperiksa dalam 2 hari. Darah dengan EDTA atau sodium sitrat harus diperiksa dalm 14 hari. 4. Kontaminasi bakteri dapat memberikan hasil positif palsu. Prosedur Tes A. Tes Slide 1. Siapkan suspensi sel darah merah 35-45 % dalam larutan salin atau serum/ plasma autologous. 2. Teteskan satu tetes (50 ul) reagen DALF Blood Grouping Anti-D dan satu tetes larutan 35-45 % sel darah merah pada slide tes. 3. Dengan menggunakan pipet transfer atau stik aplikator, campur reagen dan suspensi darah secara merata. 4. Perlahan gerakan berputar slide tes depan belakang selama 2 menit hingga terlihat aglutinasi. B. Tes Tabung Reaksi 1. Siapkan suspensi sel darah merah 3-5% dalam larutan salin atau serum/plasma autologous. 2. Tambahkan satu tetes (50 ul) dari reagen DALF Blood Grouping Anti-D kedalam setiap tabung reaksi. 3. Tambahkan satu tetes (50 ul) dari suspensi sel pada setiap tabung dengan menggunakan pipet transfer. 4. Kocok dan inkubasi dalam suhu ruang selama satu menit atau lebih. 5. Sentrifuge tabung reaksi selama 30 detik pada kecepatan 3200-3400 rpm (900-10.000 rcf). 6. Perlahan campur sel pada tabung dan perhatikan aglutinasi yang terjadi dengan mikroskop. Pembatasan Prosedur Tes 1. Beberapa sel darah bisa memberikan antigen Rh yang bervariasi. 2. Negatif yang keliru atau reaksi yang lemah bisa disebabkan karena penyimpanan sel darah merah yang lama atau ketidak sesuaian penyimpanan. 3. Penundaan dalam membaca hasil tes dan teknik yang tidak benar, sentrifuge atau inkubasi yang tidak tepat, peralatan gelas yang tidak bersih dan atau kontaminasi dari bakteri atau bahan kimia, dapat menyebabkan hasil tes menjadi keliru. 4. Sel darah merah dilapisi dengan alloantibodi yang hamper sama dengan reagen (contohnya sel yang DAT positif) bisa memberikan reaksi yang lemah. PT. JAFAREL MEDIATICS Jl. Kendal No. 6, Menteng, Jakarta Pusat 10310 Phone : 21 314 9027 / 28 Fax : 21 390 6956