HIP-51 ANALISIS KIMIAMENGGUNAKAN JlI`LC IlAGIAN

Bulctin Tcknologilinsil )lcriknnun, Vol. III. No. I. Th. 1997
HIP-51
ANALISIS KIMIAMENGGUNAKAN JlI'LC
IlAGIAN- I
Ole!t:
ElI:l Salamah '
P~ndahuluan
HPLC
pada
awalnya
merupakan
singkatan dari High Pressule Liquid
Chromatography, karena metode ini memang
merupakan suatu cara kromatografi dengan
menggunakan tekanan (pressure).
Tapi
akhir-akhir ini dcngan bertambah baiknya
modiflkasi dan penampakan dari perala tall.
maka namanya bembah menjadi High
Performance Liquid Chromatography,
HPLC merupakan suatu cara pemisahan
komponen dari suatu campuran berdasarkan
perbedaan distribusi/absorpsi/adsorpsi komponen diantara 2 fase yang berbeda yaitu fase
diam (stasioner) dan fase bergerak (mobil)
jan tung dari perala tan HPLC adalah kololll
dimana terdapat fase dlam dan teljadi
pemisahan komponcn antara fase diam dan
fase bergerak yang dialirkan dengan bantuan
suatu pompa.
Pelarut-pelarut yang bisa digunakan
dalam
HPLC sepeni
a IT,
methanol,
asetomitril, chloroform dan pelarut-pelarut
lainnya hams dalalll keadann murni (HPLC
grade), sebelum digunakan hams disaring
llleialui millipore filter (0.45mlll) dan hanls
dihilangkan gasnya (degarring)
terlebih
. dahulu sebelum digtlnakan.
Operasionalisasi HPLC
HPLC dapat dioperasikan dengan 2
modifikasi yaitu modifikasi pelal1lt (elmer)
dan modifikasi komponen.
Modifikasi pelarut dapat dilakukan
dengan eara yang dinamakan isocratic yaitu
selama pcmisahan hanya digullukan satu
macam palarut sajn. tctapi dapat pula
dilakukan dcngan cara yang dinamakan
gradien-elution yaitu selama pcmisahan
secara bertahap pelarul dirubah macaml
komposisinya scdikit dcm! sedikil.
Modifikasi komponen (i<!pat dilakukan
dengan eara pre-colum derivatization dimana
komponen didcflvatisasi scbclum l11asuk
kolom alau scbelum injeksi. aInu post-colum
derivatization dimnna komponcn didcrivatisasi sesudah kciuar kolol11.
Karcll<.l b<.llk pelarut l11<.1l1pUIl komponen
dapa! dimodilikasi maka pcmisahan komponell dnlam SlIalll campuran dcngun I fPLC ini
mempunyai resoiusi yang sangat tinggi.
I3cbcrnp:l Kcgunann d:lll Conloh
Pcmakhlll HPLC.
HPLC dapat digunakan secara luas. mulai
dari pemisahan sederhana sampai pemisahanpemisahan yang sangat sulit scpcrti msialnya:
I. Pemisahan gula, sakharin dan siklamat
yang ban yak digunakan pada minuman
ringan.
2. Pcmsiahan asam. gula dan alkohol sebagai
hasil-hasil Icrmentasi.
3. Gikoalkoloid pada prodllk-prodllk hidrolisis ken tang .
4. Pemisahun beberapa macatll untioksidan
seperti propil gal at (PG),
5. Hasil-hasil reaksi maillard dari maltos.
dan laktosa.
6. Analisis vitamin E dalam sampcl yang
mcngandul1g lemak.
7. Analisis secara simultan dchyroascorbic
acid, ascorbic acid dan nSa]11-aS3m organik
lain dulilll1 buah-bualwll dan sayursayuran.
Sial' Pcngajar Jurus!ln Td:nologi II<lsil Pcrik:Jn<lll. Fakulws Pcrik<lllan IfilL Ilo)!.l)r.
iS$N OH54 -9230