EFEK PEMBERIAN TEPUNG BUAH PARE (Momordica charantia L.) TERHADAP PROFIL LEMAK SERUM DARAH TIKUS (Rattus norvegicus) SKRIPSI SINTA SRIUTAMI PROGRAM STUDI ILMU NUTRISI DAN MAKANAN TERNAK FAKULTAS PETERNAKAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2008 RINGKASAN SINTA SRIUTAMI. D24104019. 2008. Efek Pemberian Tepung Buah Pare (Momordica charantia L.) terhadap Profil Lemak Serum Darah Tikus (Rattus norvegicus). Skripsi. Program Studi Ilmu Nutrisi dan Makanan Ternak, Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor. Pembimbing Utama : Ir. Anita S. Tjakradidjaja, MRur.Sc Pembimbing Anggota : dr. Francisca A. Tjakradidjaja, MS, Sp.GK Tanaman telah lama digunakan sebagai obat tradisional. Salah satu diantaranya adalah pare yang telah umum digunakan sebagai tanaman obat (medical herbal). Pare memiliki manfaat dan efektivitas yang dapat memperbaiki gejala berbagai penyakit diantaranya diabetes, jantung koroner dan stroke. Pare mengandung bahan aktif meliputi cucurbitan (zat pahit), momordikosid, momorkarin, momordisin, momordin, asam trikosapat, resin, asam resinat, vitamin A, vitamin B, vitamin C, karantin, hidroxytryptamine, dan saponin. Pemberian tepung buah pare diharapkan dapat menurunkan kadar kolesterol dan trigliserida darah tanpa menimbulkan efek samping. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian tepung buah pare terhadap profil lemak serum darah dan menentukan dosis optimal pemberian tepung buah pare dalam ransum tikus. Penelitian ini berlangsung dari bulan Juli sampai dengan Oktober 2007 di Laboratorium Lapang Pemuliaan dan Genetika, Laboratorium Ilmu Nutrisi Ternak Perah, Fakultas Peternakan dan Laboratorium Fisiologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor. Hewan percobaan yang digunakan adalah 18 ekor tikus putih (Rattus norvegicus) dewasa kelamin strain Sprague Dawley berumur ± 120 hari dengan rataan bobot badan 88,34 ± 13,28 gram per ekor. Ransum perlakuan terdiri dari tiga macam yaitu R1 = ransum kontrol + 0% Tepung Buah Pare (TBP); R2 = ransum kontrol + 5% TBP dan R3 = ransum kontrol + 10% TBP. Peubah yang diamati dalam penelitian ini adalah 1) konsumsi ransum, ekskresi feses, kecernaan lemak kasar dan serat kasar, 2) kadar kolesterol, trigliserida, HDL, dan LDL serum darah, dan 3) lingkar perut dan lemak abdomen tikus. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan tiga perlakuan dan enam ulangan. Data yang diperoleh dianalisa dengan sidik ragam (Analysis of variance, ANOVA) dan untuk melihat perbedaan di antara perlakuan dilakukan uji ortogonal kontras, kemudian untuk mendapatkan tipe kurva pendugaan yang terbaik data diolah dengan uji ortogonal polinomial. Hasil penelitian menunjukkan bahwa penambahan tepung buah pare tidak menyebabkan perbedaan yang nyata terhadap konsumsi lemak, kolesterol, trigliserida, HDL, LDL dan lemak abdomen, tetapi berpengaruh nyata (P<0,05) terhadap lingkar perut dan berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap konsumsi serat kasar, ekskresi lemak kasar dan serat kasar feses, kecernaan lemak kasar dan serat kasar. Penggunaan tepung buah pare sebaiknya diberikan dengan taraf 5%. Kata-kata kunci: tepung buah pare, kolesterol, trigliserida, tikus putih ABSTRACT Effects of Bitter Gourd (Momordica charantia L.) on Lipid Profile of Blood Serum in Rats (Rattus norvegicus) S. Sriutami, A. S. Tjakradidjaja, and F. A. Tjakradidjaja Bitter gourd is widely used as an edible plant and medicine. In this study, the effects of bitter gourd on lipid profile of blood serum in rats were evaluated. Eighteen of 120 day old rats with initial weight of 88.34 ± 13.28 g were used in this experiment. The experimental rats were offered diets containing bitter gourd meal at levels of 0% (R0= control diet), 5% (R1= R0 contained 5% bitter gourd powder) and 10% (R2= R0 contained 10% bitter gourd powder). Rats were kept for six weeks and given feed and drink ad libitum. Blood samples were taken at the 6th week. The experiment was conducted using completely randomized design with six replications. Variables measured were ether extract and fiber intakes, fecal excretion and digestion, blood cholesterol, triglyseride, HDL, and LDL levels, waist circumference and abdominal lipid weight. Data were analyzed with Analysis of Variance (ANOVA) and significant differences were further tested by contrast and polynomial orthogonal tests. The results showed that bitter gourd has highly significant effects on fiber intake, ether extract and fiber digestions, ether extract and fiber fecal excretions (P<0.01) and waist circumference (P<0.05). However, there were no significant effects on ether extract intake, abdominal lipid weight, blood cholesterol, triglyseride, HDL, and LDL levels. It is concluded that the best level of using bitter gourd in ration is 5%. Keywords : bitter gourd, lipid, blood cholesterol, blood triglyseride, rats EFEK PEMBERIAN TEPUNG BUAH PARE (Momordica charantia L.) TERHADAP PROFIL LEMAK SERUM DARAH TIKUS (Rattus norvegicus) SINTA SRIUTAMI D24104019 Skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Peternakan pada Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor PROGRAM STUDI ILMU NUTRISI DAN MAKANAN TERNAK FAKULTAS PETERNAKAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2008 EFEK PEMBERIAN TEPUNG BUAH PARE (Momordica charantia L.) TERHADAP PROFIL LEMAK SERUM DARAH TIKUS (Rattus norvegicus) Oleh SINTA SRIUTAMI D24104019 Skripsi ini telah disetujui dan disidangkan di hadapan Komisi Ujian Lisan pada tanggal 14 Maret 2008 Pembimbing Utama Pembimbing Anggota Ir. A. S. Tjakradidjaja, MRur. Sc. NIP. 131 624 189 dr. F. A. Tjakradidjaja, MS, Sp.GK. NP. 010 605 0122 Dekan Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor Dr. Ir. Luki Abdullah, M.Sc.Agr. NIP. 131 955 531 DAFTAR ISI Halaman RINGKASAN ......................................................................................... ii ABSTRACT ............................................................................................ iii RIWAYAT HIDUP ................................................................................ iv KATA PENGANTAR ............................................................................ v DAFTAR ISI ......................................................................................... vi DAFTAR TABEL ................................................................................... viii DAFTAR GAMBAR .............................................................................. ix DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................... x PENDAHULUAN ................................................................................... 1 Latar Belakang ............................................................................ Perumusan Masalah .................................................................... Tujuan ........................................................................................ 1 2 2 TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 3 Tikus ........................................................................................... Lipid ............................................................................................ Klasifikasi Lipid . ............................................................ Sifat-Sifat Penting Lemak ............................................... Trigliserida .................................................................................. Kolesterol .................................................................................... Biosintesis Kolesterol . .................................................... Absorbsi dan Ekskresi Kolesterol ................................... Fraksi Lemak Darah ........................................................ Serat Makanan (Dietary fiber) . .................................................... Definisi Serat .................................................................. Sifat Serat ........................................................................ Fungsi Serat .................................................................... Pengaruh Serat terhadap Zat Makanan ....................................... Pare (Momordica charantia) ...................................................... Varietas Pare . ................................................................. Khasiat Pare ....................... ............................................ Kandungan Kimia dan Zat Gizi Pare ............................. Beberapa Penelitian tentang Pare .................................. 3 6 6 7 7 8 9 9 10 12 12 12 13 13 14 15 16 16 18 METODE ................................................................................................ 20 Lokasi dan Waktu ....................................................................... Materi .......................................................................................... Hewan Percobaan dan Pare ............................................. 20 20 20 Kandang dan Peralatan ................................................... Ransum ........................................................................... Rancangan ................................................................................... Perlakuan ......................................................................... Model .............................................................................. Analisis Data ................................................................... Peubah yang Diamati ....................................................... Prosedur ...................................................................................... Pembuatan Tepung Buah Pare ........................................ Pembuatan Ransum Pellet .............................................. Pengambilan Sampel Darah ............................................ 20 20 21 21 21 21 21 23 23 23 24 HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................ 25 Keadaan Umum Penelitian ......................................................... Kandungan Zat Makanan Ransum perlakuan ............................. Konsumsi Ransum, Ekskresi Feses, Kecernaan Lemak dan Serat Kasar ................................................................ Konsumsi Lemak Kasar dan Serat Kasar ....................... Ekskresi Lemak Kasar dan Serat Kasar Feses ................. Kecernaan Lemak Kasar dan Serat Kasar ....................... Kolesterol, Trigliserida, HDL dan LDL Darah ........................... Lingkar Perut dan Lemak Abdomen ........................................... 25 25 26 27 28 29 31 33 KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 38 Kesimpulan ................................................................................ Saran ............................................................................................ 38 38 UCAPAN TERIMAKASIH ................................................................... 39 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................. 40 LAMPIRAN 43 ............................................................................... vii DAFTAR TABEL Nomor Halaman 1. Data Biologis Tikus ................................................................... 4 2. Kebutuhan Zat Makanan Tikus .................................................. 5 3. Kebutuhan Mineral dalam Makanan Tikus ............................ .... 6 4. Kandungan Glukosida dan Titik Lebur Pare ............................. 17 5. Kandungan Zat Gizi Pare ........................................................... 17 6. Kandungan Zat Makanan Ransum Perlakuan ............................ 26 7. Konsumsi, Ekskresi Feses dan Kecernaan Lemak Kasar .......... 27 8. Kolesterol, Trigliserida, HDL, dan LDL Serum Darah ............. 33 9. Lingkar Perut dan Bobot Lemak Abdomen ............................... 34 DAFTAR GAMBAR Nomor Halaman 1. Klasifikasi Lipid (McDonald et al., 2002) ................................. 7 2. Buah Pare (Anonimous, 2005) .................................................. 14 3. Proses Pembuatan Tepung Pare .................................................. 23 4. Kurva Kecernaan Lemak Kasar ................................................. 30 5. Kurva Kecernaan Serat Kasar .................................................... 31 6. Grafik Lingkar Perut Tikus ........................................................ 36 DAFTAR LAMPIRAN Nomor Halaman 1. Sidik Ragam Konsumsi Lemak Kasar Ransum Perlakuan ........ 44 2. Sidik Ragam Konsumsi Serat Kasar Ransum Perlakuan ........... 44 3. Uji Ortogonal Kontras Konsumsi Serat Kasar Ransum Perlakuan ............................................................................. 44 4. Sidik Ragam Ekskresi Lemak Kasar Feses Perlakuan ............... 44 5. Uji Ortogonal Kontras Ekskresi Lemak Kasar Feses ................ 45 6. Sidik Ragam Ekskresi Serat Kasar Feses Perlakuan ................. 45 7. Uji Ortogonal Kontras Ekskresi Serat Kasar Feses ................... 45 8. Sidik Ragam Kecernaan Lemak Kasar Ransum Perlakuan ....... 46 9. Uji Ortogonal Kontras Kecernaan Lemak Kasar ....................... 46 10. Uji Ortogonal Polinomial Kecernaan Lemak Kasar .................. 46 11. Sidik Ragam Kecernaan Serat Kasar Ransum Perlakuan .......... 46 12. Uji Ortogonal Kontras Kecernaan Serat Kasar .......................... 46 13. Uji Ortogonal Polinomial Kecernaan Serat Kasar ..................... 47 14. Sidik Ragam Kadar Kolesterol Serum Darah Tikus .................. 47 15. Sidik Ragam Kadar Trigliserida Serum Darah Tikus ................ 47 16. Sidik Ragam Kadar Kolesterol HDL Serum Darah Tikus ......... 47 17. Sidik Ragam Kadar Kolesterol LDL Serum Darah Tikus ......... 47 18. Sidik Ragam Lingkar Perut Tikus ............................................. 48 19. Uji Ortogonal Kontras Lingkar Perut Tikus .............................. 48 20. Sidik Ragam Lemak Abdominal ................................................ 48 PENDAHULUAN Latar Belakang Salah satu zat makanan yang dibutuhkan oleh tubuh adalah lemak. Ditinjau dari energi yang dihasilkannya, lemak merupakan sumber energi yang lebih efektif dibandingkan dengan karbohidrat dan protein. Menurut Muchtadi (1993), selain sebagai sumber energi, lemak juga berfungsi sebagai penyedia asam lemak esensial, pembawa komponen cita rasa (flavour) makanan, pembawa vitamin larut lemak (vitamin A, D, E dan K), memperbaiki tekstur makanan, memperlambat waktu pengosongan lambung dan sebagai bantalan bagi organ-organ tubuh, tetapi jika kadar lemak yang diberikan berlebih maka akan disimpan di jaringan adiposa dalam tubuh. Komponen lemak yang paling banyak tersimpan dalam jaringan adiposa adalah trigliserida. Sintesis trigliserida di dalam hati terutama digunakan untuk memproduksi lipoprotein darah. Trigliserida yang tinggi dalam darah sering kali dihubungkan dengan kegemukan. Kelebihan trigliserida akan ditimbun dalam jaringan adiposa (Muchtadi, 1993). Selain trigliserida, komponen lemak lainnya adalah kolesterol yang berperan sebagai prekursor asam empedu yang disintesis dalam hati dan vitamin larut lemak dari makanan. Kolesterol juga berfungsi sebagai prekursor dari berbagai hormon steroid. Kolesterol dan unsur lemak lain tidak larut dalam darah, tetapi jika berikatan dengan protein menjadi lipoprotein maka membentuk senyawa yang larut dalam darah. Jika sumbangan kolesterol dari makanan kurang, maka kolesterol akan disintesis dalam hati dan usus untuk memenuhi kebutuhan jaringan dan organ lainnya. Kolesterol yang disintesis secara de novo diangkut dari hati dan usus menuju jaringan perifer dalam bentuk lipoprotein. Kolesterol yang tinggi pada manusia sering menimbulkan gangguan bagi kesehatan. Salah satu gangguan akibat peningkatan kadar kolesterol berupa penyempitan pembuluh darah (aterosklerosis) yang dapat berlanjut menjadi penyakit jantung koroner dan stroke sehingga pada akhirnya menyebabkan kematian. Penyakit aterosklerosis dapat disebabkan oleh gizi yang tidak benar, khususnya oleh kandungan lemak, kolesterol dan trigliserida dalam darah. Peningkatan kolesterol dalam darah merupakan faktor utama kemungkinan terjadinya aterosklerosis, sedangkan trigliserida masih belum pasti (Winarno, 1997). Berbagai penelitian telah dilakukan untuk mencari bahan yang dapat menurunkan kadar kolesterol dan trigliserida darah terutama yang berasal dari tumbuh-tumbuhan. Penelitian Jayosooriya et al. (2000) dalam Nekrurkar et al. (2006) menyatakan bahwa buah pare (Momordica charantia L) dapat menurunkan kadar kolesterol dan trigliserida dalam darah tikus. Pada penelitian in vivo lainnya, buah dan atau biji pare dapat menurunkan kolesterol total. Hasil penelitian Chan et al. (2003) menunjukkan bahwa suplementasi pakan dengan pare tidak mengubah penyerapan lemak, menurunkan kadar insulin dan leptin, tetapi konsentrasi asam lemak bebas serum meningkat. Pare juga mempengaruhi metabolisme glukosa dan lipid yang dapat menetralkan efek dari pakan yang mengandung lemak tinggi. Pare telah lama digunakan sebagai obat tradisional di negara-negara berkembang seperti Brazil, China dan Malaysia. Pare memiliki rasa pahit karena mengandung cucurbitaceae yang merupakan zat pahit golongan terpenoida dengan struktur tripen. Pare telah dikenal berkhasiat dan efektif untuk pengobatan diabetes, peluruh dahak, pembersih darah, penambah nafsu makan, penurun panas, penyegar badan dan anti cacing. Bahan aktif yang terkadung dalam pare meliputi cucurbitan (zat pahit), momordikosid, momorkarin, momordisin, momordin, asam trikosapat, resin, asam resina, vitamin A, vitamin B, vitamin C, karantin, hydroxytryptamine dan saponin (Mursito, 2002; Sunarti, 2000). Bahan aktif ini dapat menurunkan kadar kolesterol. Perumusan Masalah Pemanfaatan tepung buah pare dalam ransum dapat mempengaruhi profil lemak serum darah. Hal ini disebabkan pare mengandung zat aktif berupa cucurbitan (zat pahit), momordikosid, momorkarin, momordisin, momordin, asam trikosapat, resin, asam resina, vitamin A, vitamin B, vitamin C, karantin, hydroxytryptamine dan saponin. Selain itu, kemampuan pare dalam menurunkan kadar glukosa darah secara tidak langsung mempengaruhi terhadap kadar kolesterol darah. Tujuan Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian tepung buah pare terhadap profil lemak serum darah dan mencari dosis optimal pemberian tepung buah pare dalam ransum tikus. 2 TINJAUAN PUSTAK A Tikus Hewan percobaan atau hewan laboratorium adalah hewan yang sengaja dipelihara dan diternakkan untuk dipakai sebagai hewan model guna mempelajari dan mengembangkan berbagai macam bidang ilmu dalam skala penelitian atau pengamatan laboratorik. Tikus liar, tikus Norwegia (Rattus norvegicus) dan tikus coklat adalah hewan semarga dengan tikus laboratorium, akan tetapi nama ilmiah tikus liar untuk tikus hitam adalah Rattus rattus. Klasifikasi tikus putih (Rattus norvegicus) menurut Baker et al. (1979) adalah sebagai berikut : Kingdom : Animalia Filum : Chordata Subfilum : Vertebrata (Craniata) Kelas : Mamalia Subkelas : Theria Infra Kelas : Eutheria Ordo : Rodentia Subordo : Rodentia Famili : Muridae Subfamili : Murinae Genus : Rattus Spesies : Rattus norvegicus Malole dan Pramono (1989) menyatakan bahwa terdapat beberapa galur atau varietas tikus yang memiliki kekhususan tertentu antara lain : 1. Galur Sprague-dawley, berwarna albino putih, berkepala kecil dan ekornya lebih panjang daripada badannya. 2. Galur Wistar, ditandai dengan kepala besar dan ekor yang lebih pendek. 3. Galur Long-evans, lebih kecil daripada tikus putih dan memiliki warna hitam pada kepala dan tubuh bagian depan. Tikus laboratorium lebih cepat dewasa, tidak mempertahankan perkawinan musiman dan umumnya lebih mudah berkembangbiak dibandingkan dengan tikus liar. Tikus laboratorium jarang hidup lebih dari tiga tahun dan umumnya bobot badan tikus laboratorium lebih ringan dibandingkan bobot badan tikus liar (Smith dan Mangkoewidjojo, 1988). Data biologis tikus disajikan pada Tabel 1. Tabel 1. Data Biologis Tikus Parameter Keterangan Lama hidup 1) 2) 2-3 tahun, dapat sampai 2,5 – 3,5 tahun 4 tahun Lama produksi ekonomis 1 tahun - Lama bunting 20-22 hari 21 – 23 hari Kawin sesudah beranak 1 sampai 24 jam - Umur disapih 21 hari 21 hari Umur dewasa 40-60 hari 50-60 hari Umur dikawinkan 10 minggu dan betina) Siklus kelamin Poliestrus Poliestrus Siklus estrus (birahi) 4-5 hari 4-5 hari Lama estrus 9-20 jam 12 jam Perkawinan Pada waktu estrus - Ovulasi 8-11 jam sesudah timbul estrus, spontan Fertilisasi 7-10 jam sesudah kawin Jantan : 300-400 gram Jantan : 450 – 520 gram Betina : 250-300 gram Betina : 250 – 300 gram Berat dewasa (jantan Jantan dan Betina : 65-110 hari Berat lahir 5-6 gram Jumlah anak Perkawinan kelompok Rata-rata 9 sampai 20 6 – 12 ekor ekor 36-39oC (rata-rata 35,9–37,5oC 37,5oC) 3 betina dan 1 jantan - Kromosom 2n = 42 42 Lemak serum - 70-415 mg/dl Phospolipid - 36-130 mg/dl Trigliserida - 26-146 mg/dl Kolesterol 10 – 54 mg/dl 40-130 mg/dl Suhu (rektal) 5-6 gram Sumber: 1) Smith dan Mangkoewidjojo (1988) dan 2) Malole dan Pramono (1989) 4 Menurut Malole dan Pramono (1989), susunan gigi tikus terdiri dari 1/1 gigi seri dan 3/3 gigi geraham, hanya gigi seri yang terus bertambah. Tikus tidak memiliki kantong empedu dan pankreasnya “diffuse”. Hafez (1970) menyatakan bahwa tikus mempunyai enam pasang puting susu, yaitu masing-masing tiga pasang pada bagian dada dan perut. Tiap hari seekor tikus dewasa makan sekitar 12 g sampai 20 g makanan. Bahan dasar makanan tikus dapat juga sedikit bervariasi, misalnya : protein 15%, lemak 5%, pati 45-50%, serat kasar kira-kira 5%, dan abu 4-5%. Kebutuhan nutrisi dan mineral pada makanan tikus selengkapnya masing-masing dapat dilihat pada Tabel 2 dan 3. Tabel 2. Kebutuhan Zat Makanan Tikus Zat gizi Keterangan 1 Protein 15% Lemak1 5% Pati2 45-50% Energi Metabolis1 3,8-4,1 Kkal/g 2 Serat Kasar 5% Abu 2 4-5% Vitamin A1 0,7 mg/Kg Vitamin D1 Alfa-tokoferol 0,025 mg/Kg 1 18 mg/Kg Asam linoleat1 6 g/Kg Tiamin1 4 mg/Kg Riboflavin 1 3 mg/Kg Pantotenat1 10 mg/Kg Vitamin B121 50 µg/Kg Biotin1 0,2 mg/Kg Piridoksin1 6 mg/Kg Kolin1 750 mg/Kg 2 Sumber: 1NRC (1995), Smith dan Mangkoewidjojo (1988) 5 Tabel 3. Kebutuhan Mineral dalam Makanan Tikus Mineral Kebutuhan Kalsium 0,5 g/Kg Fosfor 0,3 g/Kg Magnesium 0,5 mg/Kg Kalium 0,36 mg/Kg Natrium 0,5 g/Kg Tembaga 5,0 mg/Kg Yodium 150 µg/Kg Besi 35,0 mg/Kg Mangan 10,0 mg/Kg Seng 12,0 mg/Kg Sumber: NRC (1995) Lipid Lipid meliputi lemak, minyak dan substansi seperti lemak yang memiliki rasa licin dan tidak larut dalam air, tetapi larut dalam pelarut organik tertentu seperti eter, alkohol dan benzena. Seperti karbohidrat, lemak merupakan campuran organik karbon, hidrogen dan oksigen. Beberapa lipid juga mengandung campuran karbohidrat, fosfor atau nitrogen (Robinson, 1978). Klasifikasi Lipid Lipid diklasifikasikan berdasarkan kelompok gliserol dan nongliserol, seperti terlihat pada Gambar 1 (McDonald et al., 2002). Kelompok gliserol terbagi atas gliserol sederhana dan komplek. Gliserol sederhana yaitu lemak dan gliserol komplek terdiri atas glikolipid (glukolipid dan galaktolipid) dan phosphogliserida (lesitin dan chepalin). Sedangkan kelompok nongliserol terdiri atas sphingomyelin, cerebrosida, lilin, steroid, terpen, dan eicosanoid. 6 Lipid Gliserol Nongliserol Sederhana Komplek Glikolipid Lemak Glukolipid Phospogliserida Galaktolipid Lesitin Chepalin Sphingomyelin Cerebrosida Lilin Steroid Terpen Eicosanoid Gambar 1. Klasifikasi Lipid (McDonald et al., 2002) Sifat-Sifat Penting Lemak Beberapa sifat penting lemak ditinjau dari segi gizi adalah menambah efisiensi penggunaan makanan terutama pada babi, menyediakan asam-asam lemak esensial dan kolin, meningkatkan palatabilitas, mengandung vitamin yang larut dalam lemak, mengandung sumber energi yang lebih tinggi daripada karbohidrat (2,25 x CHO), mempengaruhi penyerapan vitamin dan karoten dalam saluran pencernaan, menambah efisiensi penggunaan energi (dalam beberapa ransum yang mengandung energi yang sama), dan ransum yang mengandung lemak lebih tinggi mempunyai efek menurunkan HI ”heat increament” sehingga lebih banyak energi yang tersedia untuk dipakai (Parakkasi, 1983). Trigliserida Lipid yang paling sederhana dan paling banyak mengandung asam lemak sebagai unit penyusun adalah trigliserol, juga sering kali dinamakan lemak, lemak netral atau trigliserida. Trigliserida adalah ester dari alkohol gliserol dengan tiga molekul asam lemak (Lehninger, 1982). Trigliserida adalah komponen utama dari lemak penyimpanan atau depot lemak pada sel tumbuhan dan hewan, tetapi 7 umumnya tidak dijumpai pada membran. Trigliserida merupakan molekul hidrofobik nonpolar, karena molekul ini tidak mengandung muatan listrik atau gugus fungsional dengan polarisasi tinggi. Menurut Muchtadi (1993), organ yang paling banyak melakukan pembentukan trigliserida adalah hati dan jaringan adiposa. Jaringan adiposa adalah jaringan khusus sintesis, penyimpanan dan hidrolisis trigliserida. Trigliserida disimpan sebagai droplet cair di dalam sitoplasma, tetapi bukan sebagai “simpanan yang mati” karena waktu paruhnya beberapa hari. Dalam kondisi homeostasis, sintesis dan penguraian trigliserida terjadi secara terus menerus di dalam jaringan adiposa. Sintesis trigliserida di dalam hati terutama digunakan untuk memproduksi lipoprotein darah. Pemenuhan kebutuhan asam lemak dapat berasal dari makanan, dan jaringan adiposa melalui darah atau dari biosintesis hati. Sintesis trigliserida dapat juga terjadi melalui fosforilasi fragmen yang mengandung tiga atom karbon. Metabolisme trigliserida (dan beberapa lipid lainnya) biasanya dimulai dengan proses hidrolisa yang menghasilkan komponen yang lebih kecil daripada penyusun trigliserida (dan lemak lainnya) tersebut. Lemak netral akan menghasilkan asam-asam lemak dan gliserol. Asam-asam lemak bebas mungkin dapat dioksidasi secara langsung oleh jaringan tubuh. Gliserol dapat diproses lebih lanjut dengan mengubahnya menjadi gliserida, phosphat dan hidroksi aseton. Phosphat yang masuk proses glikolisis atau diubah menjadi glikogen atau dioksidasi menjadi CO2 dan H2O (Parakkasi, 1983). Kolesterol Kolesterol merupakan sebuah zoosterol yang ada dalam semua sel hewan. Kolesterol memiliki kelarutan yang rendah dalam air, kira-kira 0,2 mg/100 ml. Kolesterol merupakan sterol utama dalam tubuh manusia dan penting sebagai sebuah penyusun variasi membran biologi. Kolesterol penting terutama dalam struktur myelin otak dan sistem saraf pusat dan mungkin menyusun sampai 170 g/Kg. Kolesterol merupakan prekursor hormon steroid. Kolesterol juga merupakan bagian dari asam empedu. Kolesterol di dalam tubuh manusia dapat berasal dari dua sumber yaitu dari makanan dan biosintesis de novo. Kolesterol yang berasal dari makanan memegang peranan penting, karena merupakan sterol utama di dalam tubuh manusia dan komponen permukaan sel dan membran intraseluler. Kolesterol banyak terdapat 8 pada struktur otak dan sistem saraf pusat, tetapi sedikit di bagian dalam membran mitokondria (McDonald et al., 2002; Muchtadi, 1993). Konsentrasi kolesterol tinggi pada hati, adrenal, bahan abu-abu dan putih otak dan saraf perifer. Kolesterol ada dalam jumlah yang sedikit pada hampir semua jaringan tubuh dan menyusun sebuah fraksi penting pada lipoprotein darah. Kolesterol akan tetap disintesis oleh hati tanpa memperhatikan asupan dari pakan yang dikonsumsi. Kolesterol melengkapi nukleus untuk sintesis provitamin D, hormon adrenokortikal, hormon sex steroid dan garam empedu (Robinson, 1978). Menurut Muchtadi (1993), biosintesis de novo kolesterol terjadi pada hampir semua sel (kecuali sel darah merah yang telah rusak), tetapi terbesar pada hati, usus, korteks adrenal dan jaringan reproduksi. Jika jumlah kolesterol dari makanan kurang, maka sintesis kolesterol di dalam hati dan usus meningkat untuk memenuhi kebutuhan jaringan dan organ lainnya. Kolesterol yang telah disintesis secara de novo diangkut dari hati dan usus menuju jaringan periferal dalam bentuk lipoprotein. Sebaliknya, jika jumlah kolesterol di dalam diet meningkat maka sintesis kolesterol di dalam hati dan usus menurun. Dengan demikian, laju sintesis kolesterol de novo berhubungan dengan jumlah kolesterol yang berasal dari makanan. Biosintesis Kolesterol Biosintesis kolesterol menurut Mayes et al. (1983) meliputi beberapa tahap, yaitu Asetil HMGKoA (3-hidroksi-3-methilglutaril-KoA) dan mevalonat. Tahap selanjutnya mevalonat yang kehilangan CO2 membentuk unit isoprenoid yang aktif. Enam unit isoprenoid membentuk skualena yang kemudian diubah menjadi lanosterol, dan lanosterol diubah menjadi kolesterol. Absorbsi dan Ekskresi Kolesterol Kolesterol dalam tubuh berupa kolesterol eksogen dan kolesterol endogen. Kolesterol eksogen yang masuk ke dalam tubuh berasal dari makanan dan sebaliknya, kolesterol endogenus dibentuk sendiri oleh sel-sel tubuh, terutama di dalam hati. Di dalam tubuh tidak dapat dibedakan antara kolesterol yang berasal dari sintesis dalam tubuh dan kolesterol yang berasal dari makanan. Dinding usus halus akan menyerap kolesterol tersebut. Dalam sel mukosa usus halus, ester kolesterol, trigliserida dan fosfolipid disintesis kembali dan dibungkus dengan protein untuk 9 selanjutnya disekresikan di dalam bentuk kilomikron. Sintesis kolesterol yang paling aktif terjadi dalam hati, usus halus, kelenjar adrenal dan organ reproduksi (Mayes et al., 1983). Menurut Muchtadi (1993), jalur utama pembuangan kolesterol dari tubuh (200-300 mg/hari) melalui konversi oleh hati menjadi asam empedu, yaitu asam kholat dan chenodeoxy cholic yang berikatan dengan glisin dan taurin membentuk garam empedu. Senyawa ini disekresikan di dalam empedu, bersama-sama dengan kolesterol bebas akan dialirkan melalui saluran empedu ke duodenum. Sekitar 98% dari asam empedu diabsorbsi ulang (reabsorbsi) oleh hati melalui sirkulasi enterohepatic. Di dalam hati, asam empedu diekskresi dan disekresi kembali ke dalam empedu. Di dalam empedu ini terdapat 2000-3000 mg asam empedu yang akan selalu mengalami daur ulang. Asam empedu yang tidak diserap, didegradasi di dalam usus besar dan diekskresi di dalam feses. Jalur minor untuk pembuangan kolesterol (40 mg/hari) dilakukan melalui sintesis hormon steroid. Sekitar 1mg/hari diekskresi dalam urin dan sekitar 50 mg/hari diekskresi sebagai keringat atau hilang melalui rambut atau kulit. Fraksi Lemak Darah Lemak di dalam darah terdiri atas kolesterol, trigliserida, fosfolipid dan asam lemak bebas. Kolesterol dan trigliserida berikatan dengan protein khusus bernama apoprotein menjadi kompleks lipid protein/lipoprotein. Ikatan tersebut yang menyebabkan lemak dapat larut, menyatu dan mengalir di peredaran darah. Lipoprotein terbagi menjadi lima fraksi sesuai dengan berat jenis yang dibedakan dengan cara ultrasentrifugasi, lipoprotein plasma tersebut terdiri dari atas kilomikron, very low density lipoprotein (VLDL), intermediate density lipoprotein (IDL), low density lipoprotein (LDL), dan high density lipoprotein (HDL). Susunan tersebut dibuat berdasarkan meningkatnya densitas, konsentrasi protein dan fofsfolipid, dan menurunnya konsentrasi trigliserida (Muchtadi, 1993; Dalimartha, 2002). Lipoprotein juga dapat dibedakan dengan cara elektroforesis menjadi beta lipoprotein (LDL), pre-beta lipoprotein (VLDL), broad beta (beta VLDL), dan alpha lipoprotein (HDL). 1. Kilomikron merupakan lipoprotein dengan berat molekul terbesar. Kandungan sebagian besar trigliserida untuk dibawa ke jaringan lemak dan 10 otot rangka. Kilomikron juga mengandung kolesterol untuk dibawa ke hati. Setelah 8-10 jam sejak makan terakhir, kilomikron tidak ditemukan lagi di dalam plasma. Adanya kilomikron sewaktu puasa dianggap abnormal. 2. Lipoprotein densitas sangat rendah (VLDL) dibentuk dari asam lemak bebas di hati. VLDL mengandung 60% trigliserida endogen dan 10-15 % kolesterol. 3. Lipoprotein densitas sedang (IDL) juga mengandung trigliserida dan kolesterol. Lipoprotein densitas sedang (IDL) merupakan zat antara yang terjadi sewaktu VLDL dikatabolisme menjadi LDL. Lipoprotein densitas sedang (IDL) juga disebut juga VLDL sisa. 4. Lipoprotein densitas rendah (LDL) merupakan lipoprotein pengangkut kolesterol terbesar untuk disebarkan ke seluruh endotel jaringan perifer dan pembuluh nadi. Lipoprotein densitas rendah (LDL) merupakan metabolit VLDL yang disebut juga kolesterol jahat karena efeknya yang aterogenik, yaitu mudah melekat pada dinding sebelah dalam pembuluh darah dan menyebabkan penumpukan lemak yang dapat menyempitkan pembuluh darah. Proses tersebut dinamakan aterosklerosis. Kadar LDL di dalam darah tergantung dari konsumsi makanan yang tinggi kolesterol dan lemak jenuh, tingginya kadar VLDL, serta kecepatan produksi, dan eliminasi LDL. Jaringan yang banyak mengandung LDL adalah hati dan kelenjar adrenal. 5. Lipoprotein densitas tinggi (HDL) merupakan lipoprotein yang mengandung Apo A dan mempunyai efek antiaterogenik kuat sehingga disebut juga kolesterol baik. Fungsi utama HDL yaitu mengangkut kolesterol bebas yang terdapat dalam endotel jaringan perifer, termasuk pembuluh darah, ke reseptor HDL di hati untuk dikeluarkan lewat empedu. Dengan demikian, penimbunan kolesterol di perifer berkurang. Kadar HDL diharapkan tinggi di dalam darah. Namun, kadarnya rendah pada orang gemuk, perokok, penderita diabetes militus yang tidak terkontrol, dan pemakai pil Keluarga Berencana (KB) (Dalimartha, 2002). 11 Serat Makanan (Dietary Fiber) Definisi Serat Serat adalah komponen jaringan tanaman yang tahan terhadap hidrolisis enzim dalam lambung dan usus kecil dan tidak larut dalam larutan deterjen netral yang dinyatakan secara kualitatif sebagai Neutral Detergent Fiber/NDF. Berdasarkan sifat kelarutannya dalam air, serat makanan dapat dibedakan menjadi dua kelompok yaitu yang bersifat larut (soluble dietary fiber) dan serat yang tidak larut dalam air (insoluble dietary fiber). Serat yang tidak larut dalam air adalah lignin, selulosa, dan sebagian homiselulosa. Serat tidak larut merupakan bahan pengisi (bulking agent) yang dapat berperan dalam pencegahan kanker usus besar, diverkulosis, konstipasi dan haemoroid. Serat yang larut dalam air adalah pektin, gum, musilage, agar, keragenan, dan alginat. Serat yang bersifat larut tersebut mempunyai peranan fisiologis penting dalam menurunkan kadar kolesterol darah, serta mencegah penyakit yang ditimbulkan oleh kelainan metabolisme lemak. Akan tetapi lignin dan selulosa (insoluble dietary fiber) mempunyai sifat absorbsi terhadap nutrien pada saluran pencernaan termasuk lemak, sehingga keduanya mampu menurunkan kadar lemak darah (James dan Gropper, 1990). Sifat Serat Sifat serat yang penting dilihat dari segi gizi adalah keambaan, daya ikat air, sifat pengikatan dan bentuk matriks serta mudah tidaknya difermentasi oleh bakteri. Serat dengan komposisi fisika kimia berbeda akan menghasilkan efek bilologis yang berbeda pula pada saluran pencernaan. Serat bergerak sepanjang usus dalam bentuk menyerupai spons terhidrasi yang memiliki sifat adsortif dan sifat daya serap kation (Olson et al., 1987). Sifatnya yang adsortif, serat akan mengikat misel lemak, sehingga akan mengurangi absorbsi lemak, lemak darah dan kadar trigliserida yang dideposit dalam jaringan adiposa. Oleh sebab itu serat mampu menurunkan kadar lemak darah, tetapi adanya sifat daya serap kation maka serat pun dapat menggangu keseimbangan mineral tubuh, terutama komponen serat kasar berupa lignin, gums, pektin dan beberapa hemiselulosa (James dan Gropper, 1990). Serat yang larut dalam air seperti gum, pektin, musilage, dan alga polisakarida mampu meningkatkan waktu transit nutrisi dalam saluran pencernaan, 12 sehingga pengosongan saluran pencernaan lebih lambat di lambung. Selain itu, struktur fisika kimia koloidal dan viskositasnya tinggi dalam saluran pencernaan, menyebabkan serat membentuk ikatan kompleks dengan nutrient, sehingga sulit untuk dipenetrasi oleh enzim pencenaan. Akibatnya daya absorbsi misel lemak, mineral dan beberapa nutrien berkurang (James dan Gropper, 1990). Fungsi Serat Serat mencegah terjadinya penyerapan kembali asam empedu, kolesterol dan lemak. Konsumsi serat yang tinggi dapat mengeluarkan lebih banyak asam empedu, sehingga lebih banyak asam dan sterol yang dikeluarkan bersama feses (Winarno, 1997). Serat dapat menurunkan kolesterol darah, karena terkait sintesis asam empedu. Empedu yang dibawa ke siklus enterohepatika sedikit karena ekskresi asam empedu dalam feses. Penurunan jumlah asam empedu yang kembali ke hati mengakibatkan kolesterol untuk mensintesis asam empedu yang baru sehingga berpengaruh pada penurunan kolesterol serum. Selain itu, pengaruh serat terhadap mekanisme hipokolesterol adalah perubahan jalur asam empedu. Asam empedu terdiri atas asam kholat, dan khenodeoksikholat yang disintesis di dalam hati dari kolesterol (James dan Gropper, 1990 dan Muchtadi et al., 1993). Selain itu, serat dapat mencegah dan mengurangi konstipasi karena menyerap air ketika melewati saluran pencernaan sehingga meningkatkan ukuran feses (Winarno, 1997). Pengaruh Serat terhadap Zat Makanan Serat yang tinggi dalam ransum akan meningkatkan ekskresi lemak melalui feses, termasuk juga kolesterol dan trigliserida. Hal ini terjadi karena serat akan mempengaruhi penyerapan lemak dengan menyerap asam lemak, kolesterol dan asam empedu dalam saluran pencernaan. Asam lemak dan kolesterol yang terikat serat tidak dapat membentuk misel sehingga tidak dapat diserap oleh usus halus. Hanya asam lemak bebas, monoasilgliserol dan kolesterol dapat diinkorporasi ke dalam misel. Selain itu, komponen serat pangan mampu mengikat asam empedu sehingga akan mencegah kembali penyerapan dari usus, dan meningkatkan ekskresinya melalui feses. Akibatnya konversi kolesterol dari serum darah menjadi asam empedu di dalam hati meningkat dan mengakibatkan terhambatnya peredaran enterohepatik asam empedu (James dan Gropper, 1990). 13 Perlu diketahui bahwa serat makanan (dietary fiber) berbeda dengan serat kasar (crude fiber). Serat kasar adalah bagian tanaman pangan yang tersisa atau tidak dapat dihidrolisis kembali oleh larutan asam sulfat (H2SO4) atau larutan natrium hidroksida (NaOH) dalam analisis proksimat makanan. Oleh karena larutan asam sulfat dan natrium hidroksida berkadar 1,25% masih mampu menghidrolisis komponen-komponen makanan dalam jumlah lebih besar, berbeda dengan kemampuan enzim-enzim pencernaan yang dihasilkan oleh tubuh. Bila dibandingkan dengan serat makanan, nilai serat kasar lebih kecil sekitar 1/3 sampai 1/2 daripada nilai serat makanan (Soelistijani, 2005). Sedangkan serat pangan didefinisikan sebagai kelompok polisakarida dan polimer-polimer lain yang tidak dapat dicerna oleh sintesis gastrointernal bagian atas tubuh manusia (Muchtadi, 2001). Pare (Momordica charantia) Pare merupakan tanaman merambat dengan ketinggian mencapai 5 m; berdaun tunggal dan berwarna hijau tua. Bunga berbentuk bulat panjang, permukaan tidak rata, berwarna hijau saat masih muda dan berubah menjadi merah pada saat sudah masak. Tanaman ini relatif mudah tumbuh bahkan dapat tumbuh di daerah yang tandus. Pare banyak ditemui sebagai tanaman pagar. Perbanyakan dapat dilakukan melalui biji (Mursito, 2002). Buah pare dapat dilihat pada Gambar 2. Gambar 2. Buah Pare (Anonimous, 2005) Di Indonesia pare mempunyai nama yang berbeda untuk setiap daerah seperti Peria (Melayu), Foria (Nias), Pepare (Minangkabau dan Maluku), Paria (Batak Toba dan Sunda), Pare (Jawa Tengah), Pepareh (Madura), Pepule (Nusa Tenggara), Palia (Makkasar, Bugis), Beleng gede (Gorontalo), Popari (Menado), Kepare (Ternate), Papare (Halmahera), Parrane (Seram), Papari (Buru) (Sunarti, 2000). Pare 14 merupakan tanaman berumah satu, berupa liana menahun, panjang 2-5 m, batang berusuk lima, yang muda berbulu rapat, dengan alat pembelit atau sulur berbentuk spiral, banyak bercabang. Daun tunggal, dalam garis besarnya berbentuk bundar telur melebar sampai agak membundar, panjang 2,5-10 cm dan lebarnya 3-12,5 cm, menjari dalam dengan cuping, pangkal berbentuk jantung, lokos atau berbulu balig jarang. Bagian atas berwarna hijau tua dan bagian bawah berwarna hijau muda atau hijau kekuningan, letak berseling, dan panjang tangkai 1,5-5,3 cm. Bunga tunggal, berdiameter 2-3,5 cm, dan berwarna kuning. Bunga jantan mempunyai panjang tangkai 2-5,5 cm, sedangkan bunga betina mempunyai panjang tangkai 1-10 cm. Buah berbentuk bulat memanjang, berukuran 3 cm x 2 cm dengan 8-10 rusuk memanjang, permukaan buah berbintil-bintik dan mempunyai rasa pahit. Bagian dalam buah yang matang berwarna jingga. Biji banyak, berukuran 8-16 x 4-10 x 2,53,5 mm, berwarna coklat kekuningan, bentuk pipih memanjang, dan keras (Sunarti, 2000). Menurut Kartesz (1994), buah pare (Momordica charantia L.) memiliki klasifikasi sebagai berikut: Kingdom : Plantae Subkingdom : Tracheobionta Division : Magnoliophyta Kelas : Magnoliopsida Subkelas : Dilleniidae Order : Violales Famili : Cucurbitaceae Genus : Momordica Spesies : Momordica charantia Varietas Pare Sunarti (2000) melaporkan bahwa tanaman pare dikelompokkan menjadi tiga kultivar yaitu pare gajah, pare kodok dan pare hutan. Pare gajah berdaging tebal, hijau muda atau keputihan, besar dan panjang, dan rasa tidak begitu pahit. Pare kodok buah bulat pendek dan rasa pahit. Pare hutan tumbuh liar, buah kecil dan rasa pahit. Untuk memperoleh buah yang panjang dan lurus, biasanya pada ujung buah 15 yang masih kecil digantungkan batu. Daun dari pare yang tumbuh liar, dinamakan daun tudung. Daun ini lebih berkhasiat bila digunakan untuk pengobatan. Khasiat Pare Pare (M. charantia L.) dipercaya dapat menjadi obat berbagai penyakit. Buah pare berkhasiat untuk mengobati batuk, cuci darah, radang tenggorokan, haus karena panas dalam, mata sakit dan merah, demam, malaria, pingsan karena udara panas, menambah nafsu makan, kencing manis, disentri, rematik, memperbanyak air susu, datang haid sakit, sariawan, infeksi cacing gelang dan kurang gizi (Sunarti, 2000; Mursito, 2002). Kandungan Kimia dan Zat Gizi Pare Heyne (1987) menyatakan bahwa semua bagian dari tanaman pare memiliki rasa yang pahit dan tidak menimbulkan rasa mual. Buah dan daun pare mengandung momordisin, momordin, asam trikosapat, resin, asam resinat, saponin, vitamin C dan A, serta sedikit minyak dan lemak tidak jenuh yang terdiri dari asam oleat, linoleat, stearat dan L. oleostearat. Selain itu buahnya mengandung karantin, hydroxytryptamine, vitamin A, B dan C. Biji mengandung momordisin (Sunarti, 2000; Mursito, 2002). Thasmi (1993) melaporkan bahwa Okabe et al. (1980) telah mengkarakterisasi dan mengisolasi bahan yang terkandung dalam ekstrak buah pare yang tergolong ke dalam glukosida triterpen dan disebut momordikosida A dan B, sedangkan buah pare muda mengandung momordikosida K dan L. Biji buah pare mengandung momordikosida C, D dan E, sedangkan daun pare mengandung momordisin I, II dan III (Miyahe et al., 1981 dan Yesida et al., 1984 dalam Thasmi, 1993). Senyawa triterpen mempunyai peran sebagai sitotoksin, sitostatik, anti mikroba, herbisida, anti imflamasi, spermisida, mempengaruhi metabolisme dan menghambat aktivitas biosintesis sel (Okabe et al., 1980 dalam Thasmi, 1993). Kandungan glukosida pare dan titik leburnya terlihat pada Tabel 4. Tepung buah pare mengandung protein kasar yang tinggi yaitu 23,59% sehingga dapat dikatakan sebagai sumber protein. Akan tetapi selain memiliki protein kasar yang tinggi, tepung buah pare juga mengandung serat kasar yang tinggi yaitu 22,85%. Serat kasar menjadi faktor pembatas pengunaannya dalam ransum. 16 Kandungan zat gizi pare baik dalam bentuk tepung maupun dalam bentuk buah segar disajikan dalam Tabel 5. Tabel 4. Kandungan Glukosida dan Titik Lebur Pare Kandungan Jenis Glukosida Titik Lebur Buah Momordikosida A (C42H72O15) Momordikosida B (C47H80O19) 181oC-187oC 181oC-187oC Biji Momordikosida C (C42H72O14) Momordikosida D (C42H72O13) Momordikosida E (C51H74O19) Momordikosida K (C37H58O9) Momordikosida L (C36H58O9) 224oC-227oC 177oC-183oC 177oC-183oC 238oC-237oC 227oC-232oC Momordisin I (C30H48O16) Momordisin II (C36H58O9) Momordisin III (C48H68O16) - Buah muda Daun Sumber: Okabe et al.(1980); Miyahe et al. (1981); Yesida- et al. (1984) yang dilaporkan oleh Thasmi (1993). Tabel 5. Kandungan Zat Gizi Pare Komponen Tepung1) Buah segar2) Bahan Kering (%) 86,48 8,80 Kadar air (%) 13,52 91,20 7,61 - Protein Kasar (%BK) 23,59 12,50 Lemak Kasar (%BK) 0,15 3,41 - 75,00 Serat Kasar (%BK) 22,85 - Bet-N (%) 45,80 - 3932,70 329,55 Kalsium (%) - 0,51 Fosfor (%) - 0,73 Besi (%) - 0,02 Vitamin A (IU) - 180,00 Vitamin B1(%) - 0,0009 Vitamin C (%) - 0,59 Abu (%) Karbohidrat Energi (kal/g) Sumber: 1) Hasil analisis proksimat Laboratorium Ilmu dan Teknologi Pakan (2007) 2) Hasil konversi data Sunarti (2000) menjadi bahan kering 17 Beberapa Penelitian tentang Pare Pengaruh ekstrak buah dan daun pare terhadap kualitas sperma mencit sudah dievaluasi secara mikroskopis. Pemberian ekstrak buah dan daun pare pada mencit jantan dengan dosis buah pare (0,7-0,8 mg/ekor/hari) dan dosis daun pare (0,9-1,0 mg/ekor/hari) cukup efektif menurunkan kualitas spermatozoa secara nyata (P<0,01). Penurunan kualitas spermatozoa tersebut diperlihatkan pada penurunan motilitas, konsentrasi, viabilitas dan peningkatan morfologi abnormalitas spermatozoa (Jaya, 2001). Penambahan perasan air buah dan daun pare terhadap mencit pada dosis 0,70,8 mg/ekor/hari (buah pare) dan 0,9-1,0 mg/ekor/hari (daun pare) memberikan pengaruh nyata (P<0,05) terhadap produksi air susu induk mencit pada hari keenam dan hari ke-12 masa pengukuran. Pengaruh nyata (P<0,05) juga diperoleh terhadap pertumbuhan anak mencit pada umur anak 4 dan 18 hari. Pertambahan bobot badan anak mencit, berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap efisiensi pakan induk diperoleh pada hari ke-10 masa pengukuran. Hasil tersebut disebabkan oleh kandungan senyawa yang terdapat dalam ekstrak pare (Hidayat, 2001). Penambahan ekstrak buah dan daun pare dalam ransum tidak berpengaruh nyata terhadap litter size lahir, bobot lahir, bobot sapih dan litter size sapih dan juga mortalitas anak, bobot badan induk mencit setelah beranak, konsumsi ransum induk mencit setelah beranak sampai dengan anak disapih. Pengaruh momorsidin yang dikandung daun pare hanya memperlihatkan pengaruhnya pada konsumsi ransum mencit betina pada hari kedelapan setelah beranak sampai dengan anak disapih (Fitriawati, 2001). Pemberian ekstrak air buah pare pada hamster jantan secara oral tidak mempengaruhi konsumsi zat makanan (Bahan Kering, Bahan Organik, Protein Kasar, Serat Kasar, Lemak Kasar, BETN dan Energi Bruto ransum) dan pertumbuhan bobot badan hamster perlakuan. Taraf pemberian pada satu, dua, tiga dan empat minggu dengan dosis 0,6 ml/100ml larutan, tidak ditemukan kebuntingan pada hamster betina normal yang dikawinkan dengan hamster jantan perlakuan. Hal ini juga terjadi pada betina yang dikawinkan dengan hamster yang diberi perlakuan tanpa ekstrak air buah pare (Waryani, 2007). 18 Pemberian ekstrak air buah pare secara oral pada hamster betina (Mesocricetus auratus) dengan dosis 0,6 ml/ekor/hari tidak berpengaruh terhadap konsumsi ransum segar, bahan kering (BK) dan zat makanan, pertambahan bobot badan (PBB), dan efisiensi penggunaan ransum (EPR). Hasil penelitian ini masih belum dapat membuktikan bahwa pemberian ekstrak air buah pare dapat menurunkan tingkat reproduksi hamster betina ditinjau dari pengamatan pada jumlah induk bunting dan anak yang dihasilkan (Fardiani, 2007). 19 METODE Lokasi dan Waktu Penelitian ini dilaksanakan dari bulan Juli sampai dengan Oktober 2007 di Laboratorium Lapang Pemuliaan dan Genetika, Departemen Ilmu Produksi dan Teknologi Peternakan, Laboratorium Ilmu Nutrisi Ternak Perah, Departemen Ilmu Nutrisi dan Teknologi Pakan, Fakultas Peternakan, sedangkan analisis darah dilakukan di Laboratorium Fisiologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor. Materi Hewan Percobaan dan Pare Penelitian ini menggunakan 18 ekor tikus putih (Rattus norvegicus) dewasa kelamin strain Sprague Dawley berumur ± 120 hari dengan rataan bobot badan 88,34 ± 13,28 g per ekor, dan berjenis kelamin betina. Hewan percobaan diperoleh dari Bagian Pemuliaan dan Genetika, Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor. Buah pare yang digunakan adalah varietas charantia dan diperoleh dari petani di Tapos, Bogor. Kandang dan Peralatan Tikus percobaan dipelihara selama enam minggu dalam kandang bak plastik berukuran panjang 31 x 26 x 12 cm3, beralaskan sekam dan beratapkan kawat, serta dilengkapi dengan tempat pakan dan tempat minum berbentuk botol dan berbahan kaca dengan kapasitas 150 ml. Alat yang digunakan untuk pengambilan sampel darah yaitu syringe, sentrifus, tabung steril, vortex, dan pipet. Alat- alat lain yang digunakan adalah timbangan, oven 105oC dan spektofotometer. Ransum Ransum perlakuan yang digunakan selama penelitian merupakan ransum komersial yaitu ransum broiler starter. Ransum ini terdiri dari jagung, dedak padi, tepung ikan, bungkil kedelai, bungkil kelapa, tepung daging dan tulang (MBM), pecahan gandum, bungkil kacang tanah, tepung daun, canola, kalsium phospat, vitamin, trace mineral dan antioksidan. Rancangan Perlakuan Delapan belas ekor tikus dibagi dalam tiga kelompok secara acak. Masingmasing perlakuan terdiri dari satu ekor tikus yang ditempatkan dalam kandang plastik. Perlakuan yang diujikan dalam penelitian ini berjumlah 3 ransum dengan penambahan tepung buah pare (TBP) yang terdiri dari : R1 = ransum kontrol + 0% TBP (kontrol) R2 = ransum kontrol + 5% TBP R3 = ransum kontrol + 10% TBP Pakan diberikan ad libitum setiap satu hari sekali dengan berpatokan pada sisa pakan. Air minum diberikan ad libitum, dan setiap minggu dilakukan pergantian. Model Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan tiga perlakuan dan enam ulangan dengan model matematikanya sebagai berikut : Yij = µ + τi + εij Keterangan : Yij = Nilai pengamatan pada perlakukan ke-i dan ulangan ke-j µ = Nilai rataan umum τi = Efek perlakuan ke-i εij = Galat perlakuan ke-i dan ulangan ke-j Analisis Data Data yang diperoleh dianalisis dengan sidik ragam (analysis of variance, ANOVA) dan untuk melihat perbedaan diantara perlakuan dilakukan uji ortogonal kontras, kemudian untuk mendapatkan tipe kurva pendugaan yang terbaik, data diolah dengan uji ortogonal polinomial (Steel dan Torrie, 1993). Peubah yang Diamati Peubah yang diamati dalam penelitian ini adalah : 1. Konsumsi Lemak dan Serat kasar (g/ekor/hari) 21 Jumlah konsumsi zat makanan lemak kasar dan serat kasar diperoleh dari menghitung selisih antara jumlah zat makanan yang diberikan dengan sisa pakan. 2. Ekskresi Lemak Kasar dan Serat Kasar Feses (g/ekor/hari) Ekskresi zat makanan lemak kasar dan serat kasar dalam feses didapat dari perkalian antara kadar zat makanan feses dengan jumlah ekskresi feses dibagi 100 3. Kecernaan Lemak Kasar dan Serat Kasar (%) Kecernaan zat makanan dihitung dari selisih antara konsumsi zat makanan ransum dengan kadar zat makanan feses dibagi dengan konsumsi zat makanan ransum dikali seratus persen. 4. Konsentrasi Kolesterol, Trigliserida, HDL, dan LDL Serum Darah (mg/dl) Analisis kolesterol dilakukan dengan metode cholesterol oxidase phenol amino phenazone CHOD-PAP dan analisis trigliserida dilakukan dengan metode enzymatic colorimetric test GPO-PAP. Sebanyak tabung sampel berisi 10 µl serum dan 1000 µl reagen kit dicampurkan sampai homogenkan. Campuran diinkubasi pada suhu 20-25oC selama 10 menit. Absorbansi dibaca pada panjang gelombang Hg 546 nm dalam satu jam menggunakan spektrofotometer. Kadar kolesterol dan trigliserida (mg/dl) dihitung sebagai berikut : Konsentrasi standar x Absorbansi sampel Absorbansi standar Analisis HDL dan LDL dilakukan dengan Precipitant and Standard for Use with Human Cholesterol Liquicolor Test Kit. Sebanyak 200 µl serum ditambah dengan 500 µl presipitasi, dicampur sampai homogen, kemudian didiamkan selama 10 menit pada suhu 20-25 oC. Tabung lalu disentrifugasi selama 10 menit dengan 4000 rpm. Supernatan dipersiapkan dari endapan dalam waktu satu jam setelah sentrifugasi. Sebanyak 100 µl supernatan ditambah 1000 µl reagen dicampur, diinkubasi selama 10 menit pada suhu 20-25oC. Absorbansi dibaca dalam waktu satu jam pada panjang gelombang Hg 546 nm. Untuk blanko reagen dibuat dari 100 µl air suling ditambah dengan 1000 µl reagen kit. Kadar HDL dan LDL dihitung sebagai berikut : 22 Kolesterol HDL (mg/dl) = Konsentrasi standar x Absorbansi sampel Absorbansi standar Konsentrasi LDL (mg/dl) = Kolesterol total – Trigliserida - Kolesterol HDL 5 5. Lingkar Perut dan Lemak Abdomen Pengukuran dilakukan dengan menggunakan pita ukur satuan cm pada posisi perut bagian tengah yang diukur melingkar pada tonjolan tulang rusuk terakhir. Sedangkan deposit lemak rongga perut dilakukan pada akhir penelitian dan diperoleh dengan cara mengambil lemak perut dan ditimbang. Prosedur Pembuatan Tepung Buah Pare Tepung pare yang diberikan ke ternak dalam bentuk pellet yang telah dicampur dengan ransum basal. Proses pembuatan tepung pare dapat dilihat pada Gambar 3. Pare segar varietas charantia Disortasi Dibuang tangkai dan bijinya Diiris tipis-tipis Irisan pare Dikeringkan dibawah matahari selama ± 12 jam Digiling dengan alat penggiling Tepung buah pare Gambar 3. Proses Pembuatan Tepung Pare Pembuatan Ransum Pellet Tepung buah pare dicampur bahan makanan lain dengan menggunakan mixer hingga homogen. Campuran pakan ini dimasukkan ke dalam mesin pellet. Pellet 23 yang baru keluar dari mesin pellet diangin-anginkan terlebih dahulu, lalu disimpan dalam kantong plastik yang telah diberi tanda sesuai dengan perlakuan. Pembuatan pellet dilakukan di PT. Indofeed, Bogor. Pengambilan Sampel Darah Pengambilan sampel darah dilakukan pada akhir penelitian yaitu pada saat tikus berumur enam minggu perlakuan. Sebelum darah diambil, ternak dipuasakan sedikitnya enam jam setelah makan. Tujuan pemuasaan ternak adalah untuk meminimalkan pengaruh pakan dan aktivitas makan ternak dan juga memberikan kesempatan bagi ternak untuk memproduksi kolesterol endogenus. Darah diambil dengan menggunakan alat syringe yang tidak menggunakan antikoagulan. Darah ditampung dalam tabung dan dibiarkan selama satu jam pada suhu 25oC. Darah disentrifugasi dengan kecepatan 2500 rpm selama 15 menit. Supernatan berupa serum diambil dengan pipet steril, kemudian dimasukkan kedalam tabung sampel dan sampel tersebut siap untuk dianalisis. 24 HASIL DAN PEMBAHASAN Keadaan Umum Penelitian Penelitian ini dilakukan selama delapan minggu yang terdiri atas dua minggu masa preliminary dan enam minggu masa pengamatan. Kontrol lingkungan kandang sangat penting untuk kenyamanan dan kesehatan tikus, oleh karena itu suhu dan kelembaban selama penelitian diukur pada tiga kali waktu pengukuran yaitu pagi, siang dan sore. Suhu pagi berkisar antara 24-30oC dengan kelembaban 71-92%, siang berkisar antara 30-34oC dengan kelembaban 56-86% dan sore berkisar antara 28-33oC dengan kelembaban 55-85%. Kondisi suhu lingkungan selama penelitian dapat dikatakan kurang ideal untuk tikus. Menurut Smith dan Mangkoewidjojo (1988), suhu ideal untuk pemeliharaan tikus di daerah tropis adalah 20-25oC. Jika suhu diatas 30oC masalah lain akan timbul yaitu tikus tidak dapat berbiak. Suhu yang tidak sesuai dengan suhu ideal mengakibatkan stress pada tikus. Tikus yang stress terlihat akan mengeluarkan banyak ludah dan menjilati bulunya dengan ludah. Hal ini dilakukan untuk melindungi badannya dengan mengurangi panas mengingat tikus hanya memiliki kelenjar keringat di telapak kakinya. Sebagian tanda-tanda ini terlihat pada saat penelitian. Selain itu, suhu sekeliling mempunyai pengaruh yang menentukan terhadap nafsu makan dari hewan dan jumlah makanan yang dikonsumsi. Hal ini dapat mempunyai pengaruh tidak langsung terhadap derajat daya cerna dari suatu bahan makanan. Kandungan Zat Makanan Ransum Perlakuan Penambahan tepung buah pare dalam ransum meningkatkan kandungan bahan kering, abu, serat kasar dan energi bruto, dan menurunkan kadar protein kasar dan Beta-N. Akan tetapi kandungan lemak kasar dalam ransum bervariasi yaitu R0 (7,23%BK) sebagai kontrol, R1 (7,07%BK) menurun, dan R2 (7,56%BK) meningkat dibandingkan kontrol. Kandungan abu, lemak kasar dan serat kasar ransum lebih tinggi jika dibandingkan dengan kebutuhan bahan dasar makanan tikus menurut Smith dan Mangkoewidjojo (1988), yaitu abu (4-5%), lemak kasar (5%) dan serat kasar (5%). Lemak kasar yang terkandung dalam ransum R0 = 7,23%, R1 = 7,07%, R2 = 7,56%, sedangkan serat kasar yang terkandung dalam ransum perlakuan adalah R0 = 6,40%, R1 = 8,51%, dan R2 = 7,61%. Kandungan abu ransum adalah R0 = 8,78%, R1 = 8,94% dan R2 = 9,39%. Perubahan kandungan zat makanan pada setiap ransum perlakuan selain disebabkan oleh penambahan TBP juga dipengaruhi oleh proses pengolahan. Kandungan zat makanan ransum perlakuan selengkapnya disajikan pada Tabel 6. Tabel 6. Kandungan Zat Makanan Ransum Perlakuan 1 Zat Makanan Ransum Perlakuan R0 R1 R2 Bahan Kering (%) 80,90 90,28 90,00 Abu (%BK) 8,78 8,94 9,39 Protein Kasar (%BK) 25,43 23,83 24,43 Lemak Kasar (%BK) 7,23 7,07 7,56 Serat Kasar (%BK) 6,40 8,51 7,61 Beta-N (%) 52,17 51,66 51,01 4412,68 4518,17 4530,00 Energi Bruto (Kkal/Kg) Keterangan: R0 = Ransum Basal, R1 = R0 + 5% Tepung Buah Pare (TBP), R2 = R0 +10 % TBP. 1 Hasil analisis Laboratoriun Ilmu dan Teknologi Pakan, Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor (2007) Konsumsi Ransum, Ekskresi Feses, Kecernaan Lemak dan Serat Kasar Rataan konsumsi, ekskresi feses, kecernaan lemak dan serat kasar pada setiap ransum perlakuan terlihat dalam Tabel 7. Hasil sidik ragam menunjukkan bahwa ransum yang ditambah tepung buah pare (TBP) maupun kontrol tidak mempengaruhi konsumsi lemak kasar, tetapi sangat nyata (P<0,01) mempengaruhi konsumsi serat kasar, ekskresi feses, kecernaan lemak dan serat kasar. Pemberian TBP sangat nyata meningkatkan konsumsi serat kasar, ekskresi lemak kasar dan serat kasar (P<0,01). Hasil uji orthogonal kontras menunjukan bahwa penambahan TBP 5% berbeda nyata dengan TBP 10% pada ekskresi lemak kasar (P<0,05) dan tidak berbeda pada konsumsi serat kasar. Hasil uji statistik ortogonal kontras menunjukkan bahwa R0 tidak berbeda nyata dengan R2, tetapi berbeda sangat nyata (P<0,01) dengan R1 terhadap kecernaan lemak kasar maupun serat kasar. 26 Tabel 7. Konsumsi, Ekskresi Feses dan Kecernaan Lemak Kasar Ransum Perlakuan Peubah R0 R1 R2 Konsumsi Lemak Kasar (g/e/hari) 0,482 ± 0,045 0,473 ± 0,028 0,523 ± 0,065 0,426 ± 0,040 A 0,569 ± 0,033 0,527 ± 0,065A Lemak Kasar (g/e/hari) 0,049 ± 0,005B 0,059 ± 0,002Aa 0,054 ± 0,005Ab Serat Kasar (g/e/hari) 0,326 ± 0,033B 0,383 ± 0,014A 0,394 ± 0,035A Lemak Kasar (%) 89,594 ± 0,472A 87,055 ± 0,438B 89,055 ± 0,650A Serat Kasar (%) 21,009 ± 3,586B 30,774 ± 2,342A 20,224 ± 4,741B Serat Kasar (g/e/hari) B Ekskresi Feses Kecernaan Keterangan: Superskrip dengan huruf kapital yang berbeda pada baris yang sama menunjukan perbedaan yang sangat nyata (P<0,01) sedangkan superskrip dengan huruf kecil pada baris yang sama menunjukan perbedaan yang nyata (P<0,05) Konsumsi Lemak Kasar dan Serat Kasar Konsumsi ransum sebagian besar digunakan untuk memenuhi kebutuhan energi. Faktor yang mempengaruhi konsumsi ransum diantaranya adalah konsumsi energi, kecepatan pertumbuhan, zat makanan dan bentuk ransum. Selain itu juga konsumsi dipengaruhi oleh temperatur kandang, kelembaban dan kesehatan ternak. Rataan konsumsi lemak kasar ransum yang diberi tepung buah pare (TBP) berkisar antara 0,47-0,523% (Tabel 7). Hasil sidik ragam menununjukkan bahwa pemberian TBP tidak berpengaruh pada konsumsi lemak kasar. Artinya jumlah konsumsi lemak yang ditambah TBP maupun kontrol adalah sama. Konsumsi lemak ini lebih rendah dibandingkan dengan yang diungkapkan oleh Smith dan Mangkoewidjojo (1988) yaitu 0,6 – 1,0%. Hal ini diduga karena kandungan serat kasar ransum yang tinggi, adanya zat anti nutrisi, palatabilitas yang rendah dan suhu kandang. Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Waryani (2007), pemberian ekstrak buah pare pada hamster tidak memberikan pengaruh terhadap konsumsi lemak kasar dan serat kasar. Sifat serat kasar yang amba menyebabkan penurunan konsumsi ransum yang berdampak pada konsumsi lemak. Penambahan TBP sangat nyata (P<0,01)meningkatkan konsumsi serat kasar dibandingkan dengan ransum kontrol, tetapi penambahan TBP baik 5% maupun 10% 27 tidak berbeda nyata terhadap konsumsi serat kasar. Konsumsi serat kasar R0 adalah 0,426 g/e/hari, sedangkan ransum yang ditambah TBP berkisar antara 0,527-0,569 g/e/hari. Konsumsi serat kasar dipengaruhi oleh serat kasar yang terkandung dalam ransum perlakuan. Kandungan serat kasar ransum perlakuan yaitu R0 = 6,40%, R1 = 8,51%, dan R2 = 7,61%. Tingginya kandungan serat kasar dalam ransum akan menurunkan kadar Total Digestible Nutrient (TDN) dari suatu bahan makanan dan mempengaruhi tingkat konsumsi serat kasar sehingga menurunkan pertambahan bobot badan ternak dan menurunkan efisiensi penggunaan makanan (Parakkasi, 1983). Konsumsi serat memperpendek waktu transit makanan dalam usus. Linder (1992) menyatakan bahwa konsumsi lemak akan meningkat dengan adanya penurunan konsumsi serat kasar. Komponen yang tidak larut air seperti lignin dan selulosa berperan dalam mempercepat laju pengeluaran feses. Buah pare sendiri memiliki rasa pahit karena mengandung zat antinutrisi berupa saponin yang dapat mempengaruhi palatabilitas. Secara umum palatabilitas ditentukan oleh rasa, bau dan warna makanan. Palatabilitas yang rendah mengakibatkan konsumsi ransum rendah. Ekskresi Lemak Kasar dan Serat Kasar Feses Hasil sidik ragam menunjukkan bahwa pemberian TBP berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap ekskresi lemak dan serat kasar dalam feses (Tabel 7). Ekskresi lemak kasar feses dalam ransum kontrol (0,049 g/e/hr) berbeda sangat nyata (P<0,01) dibandingkan ransum lain, sedangkan R1 berbeda nyata (P<0,05) dengan R2. Ekskresi lemak kasar ransum yang diberi TBP berkisar antara 0,054-0,059 g/e/hari. Banyaknya ekskresi lemak feses dalam ransum perlakuan memperlihatkan bahwa lemak tersebut tidak dicerna dan diserap oleh tubuh tikus. Ekskresi lemak feses dipengaruhi oleh konsumsi serat kasar. Serat akan membantu mempercepat sisa-sisa makanan melalui saluran pencernaan untuk diekskresikan keluar. Konsumsi serat kasar yang tinggi meningkatkan ekskresi serat kasar dan lemak kasar feses (Pilliang dan Djojosoebagio, 2006). Ekskresi serat kasar dari R0 berbeda sangat nyata dengan (P<0,01) R1 dan R2. Penambahan TBP 5% (R1) tidak berbeda nyata dengan penambahan TPB 10% (R2). Ekskresi serat kasar ransum kontrol adalah 0,326 g/e/hari, sedangkan ransum yang diberi TBP berkisar antara 0,383-0,394 g/e/hari. Ekskresi serat kasar yang paling tinggi adalah perlakuan R2 dimana kandungan dan konsumsi serat kasar juga 28 paling tinggi. Ekskresi serat kasar dalam feses dipengaruhi oleh konsumsi serat kasar ransum. Semakin tingginya konsumsi serat kasar dari ransum maka ekskresi serat kasar feses yang dihasilkan akan semakin tinggi. Hal ini terlihat pada Tabel 7, konsumsi serat kasar yang sama menghasilkan ekskresi serat kasar feses yang sama pula. Serat kasar seperti selulosa, lignin dan hemiselulosa sulit untuk dicerna dan diserap oleh tubuh sehingga keluar bersama feses. Selulosa dan hemiselulosa tidak dapat dicerna oleh ternak tanpa bantuan mikroorganisme dalam saluran pencernaan. Hal ini dikarenakan mikroorganisme dapat membuat enzim khusus untuk mencerna selulosa dan hemiselulosa (Parakkasi, 1983). Sedangkan pada tikus proses pencernaan yang dilakukan oleh mikroba selulolitik terjadi di sekum sesudah proses pencernaan dan penyerapan zat makanan di usus halus sehingga produk pencernaan oleh mikroba selulolitik hanya sedikit manfaatnya. Kecernaan Lemak Kasar dan Serat Kasar Daya cerna (digestibility) didefinisikan sebagai bagian zat makanan dari makanan yang tidak diekskresikan dalam feses (Tillman et al., 1991). Anggorodi (1979) menyatakan bahwa selisih antara zat-zat makanan yang terkandung dalam makanan yang dimakan dan zat-zat makanan dalam feses adalah jumlah yang tinggal dalam tubuh hewan atau jumlah dari zat-zat makanan yang dicerna atau disebut juga koefisien cerna. Hasil sidik ragam menunjukkan bahwa ransum perlakuan memberikan pengaruh yang sangat nyata (P<0,01) terhadap kecernaan lemak kasar dan serat kasar. Kecernaan lemak kasar dan serat kasar pada perlakuan R0 tidak berbeda nyata dengan R2, tetapi sangat berbeda nyata (P<0,01) dengan R1. Taraf konsumsi yang sama dengan ekskresi lemak feses yang berbeda menghasilkan kecernaan lemak kasar yang berbeda. Kecernaan lemak terendah terdapat pada R1 (87,94%), hal ini disebabkan oleh ekskresi lemak feses yang tinggi dan kandungan serat kasar yang tinggi pada R1. Konsumsi serat yang banyak berarti dalam tubuh terdapat banyak serat yang tidak dapat dicerna. Menurut Tilman et al. (1991), daya cerna makanan berhubungan dengan komposisi kimianya, dan serat kasar mempunyai pengaruh yang terbesar terhadap daya cerna. Selain itu beberapa faktor yang mempengaruhi daya cerna makanan adalah komposisi makanan, daya cerna semu protein kasar, lemak, komposisi ransum, penyiapan makanan, faktor 29 hewan dan jumlah makanan. Sementara itu, Anggorodi (1979) menyatakan bahwa faktor-faktor yang mempengaruhi daya cerna adalah suhu, laju perjalanan melalui alat pencernaan, bentuk fisik dari bahan makanan, komposisi ransum, dan pengaruh terhadap perbandingan dari zat makanan lainnya. Hubungan taraf penggunaan TBP dalam ransum dengan kecernaan lemak mengikuti persamaan kuadratik Y = 2 X2 – 8,45 X + 102,75 dengan R2 = 0,84, dimana Y adalah kecernaan lemak kasar dan X adalah persentase taraf TBP. Berdasarkan persamaan tersebut, terlihat bahwa kecernaan lemak minimum akan terjadi pada level penambahan 5,56%. TBP Grafik menunjukkan bahwa pada taraf penambahan 5% TBP kecernaan lemak kasar menurun, kemudian kecernaan lemak kasar meningkat lagi pada level TBP 10% pada ransum kontrol. Kurva kecernaan lemak kasar disajikan pada Gambar 4. 2 Kecernaan Lemak (%) 97 y = 2x - 8,45x + 102,75 2 R = 0,84 96 95 Kecernaan lemak 94 Poly. (Kecernaan lemak) 93 92 0 5 10 Taraf Tepung Buah Pare (%) Gambar 4. Kurva Kecernaan Lemak Kasar Hasil uji orthogonal kontras menunjukkan bahwa kecernaan serat kasar R1 (30,774%) paling tinggi dibandingkan dengan perlakuan R0 (21,009%) dan R2 (20,224%). Serat memiliki sifat daya serap dan adsortif nutrien dalam tubuh termasuk lemak sehingga serat dapat membentuk ikatan kompleks dengan lemak dan akhirnya dikeluarkan bersama feses. Kecernaan dipengaruhi oleh konsumsi dan ekskresi feses. Anggorodi (1979) menyatakan bahwa semakin tinggi suatu bahan makanan mengandung serat kasar semakian rendah daya cerna dari bahan makanan tersebut. Tingginya kecernaan lemak kasar disebabkan oleh ekskresi lemak dalam 30 feses yang rendah. Dengan kata lain, jika lemak yang dikonsumsi banyak maka yang dicerna dan diserap tubuh juga banyak. Hubungan antara taraf penambahan TBP dan kecernaan serat kasar mengikuti persamaan Y = -0,37X2 + 3,83X -7,63 dengan R2 = 0,52. Artinya dengan penambahan TBP tidak selalu meningkatkan ataupun menurunkan kecernaan serat kasar. Berdasarkan persamaan tersebut, terlihat bahwa kecernaan serat kasar Kecernaan Serat Kasar (%) maksimum akan terjadi pada taraf penambahan 5,18% TBP. 2 4 y = -0,37x + 3,83x - 7,63 2 R = 0,52 2 0 -2 0 5 10 Kecernaan SK Poly. (Kecernaan SK) -4 -6 -8 -10 Taraf Tepung Buah Pare (%) Gambar 5. Kurva Kecernaan Serat Kasar Kolesterol, Trigliserida, HDL dan LDL Darah Hasil rataan pengukuran kadar kolesterol, trigliserida, HDL dan LDL serum darah tikus disajikan dalam Tabel 8. Hasil analisis statistik menunjukkan bahwa pemberian tepung buah pare (TBP) dalam ransum tidak berpengaruh terhadap kolesterol, trigliserida, HDL dan LDL serum darah tikus. Kadar kolesterol tikus yang diberi TBP berkisar antara 48,317-53,916 mg/dl, sedangkan kadar trigliserida berkisar antara 41,846-42,556 mg/dl. Pengunaan pare tidak memberikan efek dalam penurunan kolesterol darah tikus. Kadar kolesterol ini masih dalam kisaran kadar kolesterol dan trigliserida yang dinyatakan oleh Malole dan Pramono (1989), yaitu kadar kolesterol tikus 40-130 mg/dl dan trigliserida adalah 26-146 mg/dl. Hal ini berbeda dengan pendapat Smith dan Mangkoewidjojo (1988) yang menyatakan bahwa kadar kolesterol darah tikus adalah 10-54 mg/dl. Hasil penelitian Noguchi et al. (2001) menyatakan bahwa minyak pare tidak berbeda nyata terhadap kolesterol total serum darah tikus, tetapi sangat nyata menurunkan kadar kolesterol bebas 31 (P<0,01) dengan kecenderungan meningkatkan kolesterol HDL. Hasanah (2007) mengemukakan bahwa penambahan 2,5% ampas teh tanpa fermentasi, ampas teh yang difermentasi dengan Aspergillus niger, Rhizopus oryzae ataupun kombinasi kedua kapang tidak berpengaruh terhadap penurunan kadar kolesterol dan trigliserida darah. Kadar kolesterol tikus yang diberi ransum mengandung ampas teh adalah 45,9-56,6 mg/dl, sedangkan trigliserida berkisar antara 125,9-171,1 mg/dl. Dengan demikian kadar kolesterol dan trigliserida darah tikus yang diperoleh dari perlakuan penambahan TBP hampir sama dengan hasil yang didapat oleh Hasanah (2007). Hasil penelitian Chen et al. (2003) menyatakan bahwa buah pare tidak mengubah penyerapan lemak. Suplementasi buah pare pada ransum lemak tinggi dapat meningkatkan resistensi insulin, menurunkan insulin dan leptin serum, tetapi meningkatkan konsentrasi asam lemak bebas serum (P<0,05). Secara tidak langsung penambahan buah pare berpengaruh terhadap metabolisme lemak terutama trigliserida. Penambahan TBP cenderung menurunkan kadar trigliserida darah. Hal ini terkait dengan penurunan hormon insulin. Insulin merupakan hormon yang berpengaruh dalam biosintesis lemak. Hormon ini meningkatkan sintesis glikogen dan trigliserida. Di dalam jaringan adiposa, hormon ini berperan dalam pengangkutan glukosa ke dalam sel dan menghambat pemecahan lemak di dalam jaringan adiposa. Dengan kadar karbohidrat yang berlebih dari makanan, insulin cenderung untuk meningkatkan sintesis lemak. Selama kadar glukosa darah meningkat di dalam tubuh, konsentrasi insulin meningkat dan menyebabkan penyimpanan lemak, jika kelebihan dapat menyebabkan obesitas. Orang yang menderita diabetes tipe 2 (maturity diabetes) terjadi resistensi insulin sehingga kadar insulin darah meningkat (hiperinsulinemia) akibatnya sintesis trigliserida terhambat. Selama berpuasa, katekholamin dilepaskan sehingga perbandingan glukagon terhadap insulin menjadi tinggi. Pada kondisi ini mobilisasi lemak meningkat dan asam lemak dioksidasi untuk menyediakan energi (Muchtadi et al., 1993). 32 Tabel 8. Kolesterol, Trigliserida, HDL dan LDL Serum Darah Peubah Kolesterol (mg/dl) Trigliserida (mg/dl) HDL (mg/dl) LDL (mg/dl) R0 Ransum Perlakuan R1 R2 49,72 ± 5,67 48,32 ± 5,38 53,92 ± 9,46 45,12 ± 9,37 41,85 ± 8,50 42,56 ± 3,94 27,08 ± 7,93 26,45 ± 9,39 30,39 ± 11,46 14,14 ± 4,75 13,77 ± 6,38 17,33 ± 3,12 Keterangan : Hasil analisis Laboratorium Fisiologi, Fakultas Kedokteran Hewan, IPB (2007) Tabel 8 menunjukkan hasil kolesterol, trigliserida, HDL dan LDL serum darah tikus yang tidak berbeda nyata dengan pemberian TBP yang berbeda. Hal ini diduga zat aktif yang terkandung dalam TBP belum mampu untuk menurunkan kadar kolesterol, trigliserida, HDL dan LDL serum darah. Zat aktif dalam buah pare yang diduga dapat menurunkan kadar kolesterol adalah saponin. Saponin dapat meningkatkan sintesis garam empedu. Sebagai prekursor garam empedu, kolesterol akan dipakai sehingga kadar kolesterol serum darah akan menurun. Kandungan saponin dapat menurunkan tingkat absorpsi kolesterol dan meningkatkan ekskresi, sehingga secara langsung dapat mengurangi kolesterol yang masuk ke dalam tubuh. Selain itu serat kasar yang terkandung dalam pare sangat tinggi. Serat mampu mengurangi kadar kolesterol yang bersirkulasi dalam plasma darah, karena serat dapat meningkatkan ekskresi asam empedu, sehingga meningkatkan konversi kolesterol plasma menjadi asam empedu. Selain itu juga dipengaruhi oleh konsumsi dan kecernaan itu sendiri. Ransum yang mengandung serat kasar yang tinggi dapat menurunkan kadar kolesterol plasma. Dengan semakin tingginya kandungan serat kasar dalam ransum, ada kecenderungan penurunan konsentrasi kolesterol dan trigliserida. Lingkar Perut dan Lemak Abdomen Lemak abdomen merupakan salah satu komponen lemak tubuh yang terletak pada rongga perut. Menurut Pilliang dan Djojosoebagio (2006), salah satu tempat penyimpanan lemak adalah rongga perut (abdomen) yaitu jaringan adiposa yang berperan dalam proses penyimpanan lemak tersebut. Lemak merupakan salah satu penyusun jaringan untuk penyimpanan energi oleh tubuh. Secara bertahap lemak 33 diambil dari peredaran darah dan disimpan terutama di bawah kulit dan dalam perut. Data lingkar perut dan bobot lemak abdomen dapat dilihat pada Tabel 9. Kecernaan lemak R0 dan R2 lebih tinggi dibandingkan dengan kecernaan R1 sehingga lemak abdomen yang terbentuk lebih banyak pada R0 dan R2. Taraf bobot lemak abdomen yang sama menghasilkan lingkar perut yang sama pula. Kecernaan lemak yang tinggi dapat meningkatkan penyerapan lemak dan jika berlebih akan disimpan dalam jaringan adiposa. Kandungan serat kasar yang tinggi pada ransum mengakibatkan penurunan bobot lemak abdomen yang terbentuk. cenderung Serat kasar bersifat adsorptif, akan mengikat misel lemak, sehingga mengurangi absorpsi lemak, mengurangi lemak darah dan mengurangi kadar trigliserida yang dideposit dalam jaringan adiposa. Tabel 9. Lingkar Perut dan Bobot Lemak Abdomen Peubah R0 11,05 ± 0,20a 10,97 ± 0,04 Lingkar Perut (cm; n = 6) Lingkar Perut (cm; n = 3) Bobot Lemak Abdomen 2,17 ± 1,26 (g; n = 3) Bobot Badan (g; n= 3) 142,93 ± 11,73 Persen bobot lemak abdomen terhadap bobot 1,52 badan tikus(%, n = 3) Ransum Perlakuan R1 10,59 ± 0,40b 10,65 ± 0,76 R2 10,63 ± 0,31b 10,70 ± 0,28 1,80 ± 1,39 2,40 ± 0,27 142,53 ± 6,74 146,23 ± 11,14 1,26 1,64 Keterangan: n = jumlah ulangan yang digunakan. Superskrip yang berbeda pada baris yang sama menunjukan perbedaan yang nyata (p<0,05) Lemak cadangan tidak hanya terbentuk dari lemak yang dikonsumsi, tetapi berasal pula dari karbohidrat dan adakalanya dari protein. Lebih kurang 50% dari jaringan lemak terdapat di bawah kulit. Sisanya ada di sekeliling alat-alat tubuh tertentu teristimewa ginjal, dalam membran sekeliling usus, dalam urat daging dan di tempat-tempat lain. Jaringan lemak tidak seluruhnya lembam, tetapi dilengkapi dengan darah dan urat syaraf dan sebagai akibatnya berbagai reaksi seperti perubahan dari karbohidrat menjadi lemak dapat terjadi. Oleh karena jaringan lemak selalu mengandung air maka jelas bahwa penimbunan lemak menyebabkan pula penimbunan air. Ransum yang kaya akan lemak dapat menyebabkan penyimpanan air dalam semua jaringan, terutama darah. Penimbunan lemak dapat dianggap sebagai emulsi air dalam lemak dimana albumin, lecitin atau sabun bekerja sebagai 34 zat yang membuat emulsi. Bila lemak yang ditimbun digunakan untuk menyediakan energi maka yang tinggal adalah air. Air ini merupakan salah satu hasil akhir dari katabolisme lemak melalui mekanisme β-oxidasi dan dikeluarkan melalui ginjal, paru-paru dan kulit (Anggorodi, 1979). Hasil sidik ragam menunjukkan bahwa pemberian TBP berpengaruh nyata (P<0,05) pada penurunan lingkar perut, tetapi tidak berpengaruh pada deposit lemak abdomen dan lingkar perut tikus dengan tiga ulangan. Lingkar perut tikus yang diberi TBP berkisar antara 10,59-10,63 cm, sedangkan deposit lemak abdomen berkisar antara 1,800-2,400 gram. Penurunan lingkar perut berkisar antara 0,4150,457 cm. Penurunan ini disebabkan oleh konsumsi dan kecernaan zat makanan pada ransum perlakuan terutama lemak dan serat kasar. Selain itu juga disebabkan oleh zat aktif yang terkandung dalam TBP yaitu saponin. Jika lemak yang dicerna dan diserap sedikit maka asupan energi yang berasal dari lemak sedikit dan kekurangannya akan diperoleh dari pemecahan lemak cadangan dalam tubuh. Lemak cadangan banyak tersimpan di bawah rongga perut atau lemak abdomen. Jika lemak cadangan banyak dipecah maka terjadi penurunan lemak cadangan di bagian perut. Hal ini dapat terlihat pada lingkar perut yang menyusut. Selain itu konsumsi serat kasar juga dapat mempengaruhi lingkar perut dan lemak abdomen tikus. Konsumsi serat yang tinggi mempengaruhi konsumsi dan kecernaan lemak kasar. Tabel 7 menunjukkan bahwa TBP sangat nyata menurunkan kecernaan lemak kasar. Penurunan kecernaan mempengaruhi deposit lemak abdomen dan lingkar perut. Persentase bobot lemak abdomen terhadap bobot badan tikus kontrol (R0) dengan R2 hampir sama masingmasing 1,52 dan 1,64%, sedangkan R1 lebih rendah yaitu 1,26%. Bobot lemak rongga perut pada kelompok ransum tinggi lemak lebih tinggi daripada kelompok ransum rendah lemak (P<0,05). Ada kecenderungan penurunan bobot lemak rongga perut ketika tikus betina disuplementasi dengan buah pare. Bobot lemak dalam tikus juga berkolerasi dengan penambahan bobot badan (r = 0,930; df = 41; P<0,01) (Chen et al., 2003). Chan et al. (2005) menyatakan bahwa pemberian suplementasi buah pare pada tikus dapat menurunkan efisiensi energi (g PBB/ KJ konsumsi), bobot lemak rongga perut, glukosa serum, dan indek resistensi insulin, tetapi norepineprin lebih tinggi daripada tikus yang tidak disuplementasi buah pare (P<0,05). Tikus yang 35 mengkonsumsi ransum dengan kadar lemak tinggi yang disuplementasi dengan buah pare menghasilkan pertambahan bobot badan yang lebih kecil dan menurunkan konsentrasi lipid dalam jaringan. Penurunan efisiensi metabolis dalam ransum yang disuplementasi buah pare mungkin meliputi peningkatan oksidasi lipid dan mitokondria yang tidak berpasangan. Suplementasi buah pare meningkatkan pengangkutan asam lemak rantai panjang di mitokondria, dan menurunkan kandungan lipid organ yag dikumpulkan dengan peningkatan aktifitas asil-CoA dehidrogenase, yaitu enzim oksidasi kunci. 13.00 Lingkar Perut (cm) 12.50 12.00 11.50 R0 11.00 R1 10.50 R2 10.00 9.50 9.00 1 2 3 4 5 6 Minggu ke- Gambar 6. Grafik Lingkar Perut Tikus Gambar 6 menunjukkan perubahan lingkar perut mingguan setelah pemberian TBP. Pada Gambar 6 terlihat bahwa TBP mampu menurunkan lingkar perut tikus selama empat minggu pertama, tetapi setelah minggu keempat mengalami peningkatan kembali. Lingkar perut tikus yang diberi perlakuan kontrol tidak mengalami perubahan pada minggu ke-1-2, tetapi menurun dari minggu ke-2-3 dan konstan mengalami peningkatan pada minggu ke-3-6. Penambahan 5% TBP konstan menurunkan lingkar perut pada minggu ke-1-4 dan meningkat kembali pada minggu ke-4-6, sedangkan 10% TBP menghasilkan lingkar perut yang fluktuatif dimana minggu ke-1-3 konstan menurun, minggu ke-3-5 meningkat dan minggu ke-5-6 menurun kembali. Secara umum, lingkar perut tikus baik perlakuan kontrol maupun dengan penambahan TBP hampir memberikan pola lingkar perut yang sama yaitu menurun sampai minggu ke-3-4 dan mengalami peningkatan setelah minggu ke-3-4. Hal ini dikarenakan pada minggu ke-3-4, suhu kandang sangat tinggi (32-34oC) 36 sehingga menurunkan konsumsi ransum. Jika konsumsi ransum rendah, maka asupan zat makanan pun rendah. Untuk memenuhi kebutuhannya, tikus akan merombak cadangan zat makanan yang tersimpan dalam tubuhnya. 37 KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Penambahan tepung buah pare tidak mempengaruhi konsumsi lemak kasar, lemak abdomen, kolesterol, trigliserida, HDL dan LDL serum darah tikus, akan tetapi dapat menyebabkan peningkatan kecernaan, ekskresi feses lemak kasar dan serat kasar, serta penurunan lingkar perut. Penggunaan tepung buah pare sebaiknya diberikan dengan taraf 5%. Saran Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang taraf terbaik penggunaan tepung buah pare yang dapat memberikan efek lebih nyata terhadap penurunan kolesterol, trigliserida, HDL dan LDL serum darah. Selain itu juga perlu dilakukan identifikasi zat aktif dalam buah pare yang berpengaruh terhadap metabolisme lipid. UCAPAN TERIMA KASIH Alhamdulillah, pujji syukur Penulis panjatkan kehadirat Illahi Robbi atas rahmat dan karunia-Nya sehingga Penulis dapat menyelesaikan penulisan karya ilmiah ini. Karya ilmiah yang berjudul “ Efek Pemberian Tepung Buah Pare (Momordica charantia L.) terhadap Profil Lemak Tikus (Rattus norvegicus)” ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelas sarjana pada Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor. Pada kesempatan ini, Penulis mengucapkan terima kasih kepada Ir. Anita Sardiana Tjakradidjaja, MRur. Sc. sebagai Dosen Pembimbing Utama dan dr. Francisca A. Tjakradidjaja, MS, Sp.GK. sebagai Dosen Pembimbing Anggota atas segala bimbingan, pengarahan dan motivasi kepada Penulis. Ir. Sudarsono Jayadi, MSc. Agr. selaku Dosen Pembimbing Akademik atas arahan dan doronganya kepada Penulis selama menjadi mahasiswa di Departemen Ilmu Nutrisi dan Teknologi Pakan, Dr. Ir. Dewi Apri Astuti, MS, Dr. Ir. Suryahadi, DEA dan Prof. Dr. Ir. Pollung H. Siagian sebagai Dosen penguji seminar dan sidang atas saran dan kritik dalam perbaikan skripsi ini, serta kepada segenap civitas akademika Fakultas Peternakan IPB atas sumbangsih ilmu dan bantuan yang tak ternilai kepada Penulis. Ucapan terima kasih Penulis sampaikan kepada teman seperjuangan Ni Wayan Suksma Dewi, sahabatku di Bateng (Belakang DG2, MH, Pochan, Botia, Feedlot), Siska, Eka, Witra, Alfian, Meri, Dede, Tika, Nia, Oji, Abdi, Mas Dadang, Endar, sahabat-sahabat kecilku (Miati, Tika, Ica, Dewi, Ade, Sani), keluarga besar kandang A, teman-teman Nutrisi 40-43. Terima kasih dan sembah sujud Penulis kepada keluarga tercinta di Tasikmalaya (Mamah Nyai, Bapak Tatang, Babah Dayat, Mamah Rorom, Ema, Ua, Bibi, Mamang, Udin dan Keluarga Besar di Tasik), keluarga di Bandung, Depok, Sukabumi dan seseorang yang selalu memberikan power of spirit atas dukungan, doa dan kasih sayangnya sehingga Penulis dapat menyelesaikan pendidikan dan Karya Ilmiah ini. Untuk pihak-pihak lainnya yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu, Penulis ucapkan terima kasih. Bogor, Maret 2008 Penulis DAFTAR PUSTAKA Anggorodi, R. 1979. Ilmu Makanan Ternak Umum. PT. Gramedia, Jakarta. Anonimous. 2005. Herbal Medicine: Ampalaya (Momordica charantia). http://herbal-medicine.philsite.net/bitter_melons3.jpg [11Juli2007] Baker, H. J., J. R. Lindsey and S. H. Weisbroth. 1979. The Laboratory Rat Vol 1. Academic Press, Inc. New York. Pp: 6-30. Chen, Q., L. L. Y. Chan and E. T. S. Li. 2003. Bitter Melon (Momordica charantia) reduces adiposity, lowers serum insulin and normalizes glucose tolerance in rats fed a high fat diet. J. Nutr. 133: 1088–1093. Chan, Q. and E. T. S. Li. 2005. Reduced adiposity in Bitter Melon (Momordica charantia) fed rats is associated with lower tissue triglyceride and higher plasma catecholamines. British J. Nutr. 93: 747-754. Dalimartha, S. 2002. 36 Resep Tumbuhan Obat untuk Menurunkan Kolesterol. Cetakan 6. Penebar Swadaya, Jakarta. Fardiani, S. 2007. Pengaruh lama pemberian ekstrak air buah pare (Momordica charantia L.) terhadap konsumsi dan penggunaan ransum hamster betina (Mesocricetus auratus). Skripsi. Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Fitriawati, N. 2001. Kajian penambahan ekstrak buah dan daun Pare (Momordica charantia L) pada sifat-sifat reproduksi mencit betina (Mus musculus albinus), Skripsi. Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Hafez, E. S. E. 1970. Reproduction and Breeding Techniques for Laboratory Animals. Lea and Febger, Philadelphia. Hasanah, R. U. 2007. Manfaat ampas teh produk biofermentasi untuk menurunkan kadar kolesterol dan trigliserida darah pada tikus (Rattus norvegicus). Skripsi. Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Heyne, K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia Jilid III. Cetakan 1. Terjemahan : Badan Litbang Kehutanan. Koperasi Karyawan Departemen Kehutanan, Jakarta. Hidayat, M. F. 2001. Produksi air susu induk dan pertumbuhan anak mencit (Mus musculus albinus) dengan pemberian ekstrak pare (Momordica charantia L) sebagai feed additive. Skripsi. Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor, Bogor. James, L. G. and S. S. Gropper. 1990. Advanced Nutrition and Human Metabolism. 3rd Ed. Wadsworth Thomson Learning, Australia. Jaya, O. D. 2001. Kajian pemberian ekstrak pare (Momordica charantia L) terhadap kualitas spermatozoa mencit (Mus musculus albinus) yang dievaluasi secara mikroskopis. Skripsi. Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Kartesz, J. 1994. A Synonymized checklist of the vascular flora of the United States, Canada, and Greenland. (L US Can ed2). http://www.ars-grin.gov/cgibin/npgs/html/taxon.pl?24520. [20 Mei 2007]. Lehninger, A. L. 1982. Dasar Dasar Biokimia Jilid 1. Terjemahan: M. Thenawidjaja. Erlangga, Jakarta. Linder, M. C. 1992. Biokimia Nutrisi dan Metabolisme . Terjemahan : A. Parakkasi. UI Press. Jakarta. Malole, M. B. M. dan C. S. U. Pramono. 1989. Penggunaan Hewan Hewan Percobaan di Laboratorium. Pusat Antar Universitas Bioteknologi, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Mayes, P. A. 1983. Lipids dan Metabolism of Lipids : II. Role of the Tissue. Dalam : Mayes, P. A, D. W. Martin and V. W. Rodwell (Editor). Harper’s Review of Biochemistry. 19th Ed. Lange Medical Publications, Maruzen Asia. McDonald, P., R. A. Edwards, J. F. D. Greenhalgh and C. A. Morgan. 2002. Animal Nutrition. 6th Ed. Prentice Hall, London. Muchtadi, D. 2001. Kajian terhadap serat makanan dan antioksidan dalam berbagai jenis sayuran untuk pencegahan penyakit degeneratif. Laporan Penelitian. Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Muchtadi, D., N. S. Palupi dan M. Astawan. 1993. Metabolisme Zat Gizi. Pustaka Sinar Harapan, Jakarta. Mursito, B. 2002. Ramuan Tradisional untuk Penyakit Malaria. Cetakan I. Penebar Swadaya, Jakarta. National Research Council. 1995. Nutrient Requirements of Laboratory Animals. 4th Ed. National Academy of Sciences, Washington. Nekrurkar, P. V., K. Lee, E. H. Linder, S. Lim, L. Pearson, J. Frank and R. Nekrurkar. 2006. Lipid lowering effect of Momordica charantia (Bitter Melon) in HIV-1- protease inhibitor-treated human hepatoma cells, HepG2. Br. J. Pharm. 148: 1156-1164. Noguci, R., Y. Yasui, R. Suzuki and M. Hosokawa. 2001. Dietary Effects Of Bitter Gourd Oil on Blood and Liver Lipids of Rats. Archives of Biochemistry and Biophysics Vol. 396, No. 2, pp. 207-212. Olson, R. E., P. Broquist, C. O. Chicester, W. J. Darby, A. C. Kobye, JR. dan R. M. Stalvely. 1987. Energi dan Zat-Zat Gizi . Terjemahan Nasution, A. H., D. 41 Karyadi, D. Fardiaz, A. Girindra, N. R. Azwar, I. K. Amrullah, L. M. Isman, S. Gretiani. PT Gramedia Pustaka Utama, Jakarta. Parakkasi, A. 1983. Ilmu Gizi dan Makanan Ternak Monogastrik. Angkasa, Bandung. Pilliang, W. G. dan S. Djojosoebagio. 2006. Fisiologi Nutrisi Vol 1. Edisi ke-4. Institut Pertanian Bogor, Bogor. Robinson, C. H. 1978. Fundamentals of Normal. Nutrition. 3rd Ed. Mac Millan Publishing CO., Inc. New York. Smith, J. B dan S. Mangkoewidjojo. 1988. Pemeliharaan Pembiakan dan Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis. UI Press, Jakarta. Solistijani, D. A. 2005. Sehat dengan Menu Berserat. Cetakan Pertama. PT. Pustaka Pembangunan Swadaya Nusantara, Jakarta. Steel, R. G. D. dan J. H. Torrie. 1993. Prinsip dan Prosedur Statistika Suatu Pendekatan Biometrik. Terjemahan: M. Syah. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta. Sunarti, S. 2000. Potensial dan Cara Pemanfaatan Bahan Tanaman Obat. Yayasan Prosea Indonesia, Bogor . Thasmi, C. N. 1993. Pemberian ekstrak buah pare (Momordica charantai L.) pada tikus jantan LMR dan pengaruhnya terhadap kualitas spermatozoa dan jumlah anak yang dihasilkan dari perkawinannya dengan tikus betina Normal. Tesis. Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Tilman, A. D., H. Hartadi, S. Reksohadiprodjo, S. Prawirokusumo dan S. Lebdosoekojo. 1991. Ilmu Makanan Ternak Dasar. Cetakan kelima. Gadjah Mada University Press,Yogyakarta. Waryani, N. 2007. Lama pemberian ekstrak air buah pare (Momordica charantia L.) terhadap konsumsi dan penggunaan ransum pada hamster jantan (Mesocricetus auratus) dan dampaknya pada hamster betina pasangannya. Skripsi. Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor, Bogor. Winarno, F. G. 1997. Kimia Pangan dan Gizi. PT. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta. 42 LAMPIRAN Lampiran 1. Sidik Ragam Konsumsi Lemak Kasar Ransum Perlakuan SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 2 0,0087 0,0044 1,8763 3,6823 6,3589 Error 15 0,0349 0,0023 Total 17 0,0436 0,0026 Lampiran 2. Sidik Ragam Konsumsi Serat Kasar Ransum Perlakuan SK db JK KT Fhit F0.05 Perlakuan 2 0,0643 0,0321 13,8904** 3,6832 6,3589 0 vs 1, 2 1 0,0589 0,0589 25,4722** 4,5431 8,6831 2 vs 1 1 0,0053 0,0053 2,3086 8,6831 Error 15 0,0023 0,0023 Total 17 0,0643 0,0058 4,5431 F0.01 Keterangan: ** = Berbeda Sangat Nyata (p<0,01) Lampiran 3. Uji Ortogonal Kontras Konsumsi Serat Kasar Ransum Perlakuan Komponen 0 1 2 c Q JK 2,558 3,413 3,160 0 vs 1, 2 -2 1 1 1,4564 6 0,0589 2 vs 1 0 1 -1 0,2531 2 0,0053 1,7095 8 0,0642 Lampiran 4. Sidik Ragam Ekskresi Lemak Kasar Feses Perlakuan SK db JK KT Fhit F0.05 Perlakuan 2 0.00036 0.00018 10,3487** 3,6823 6,3589 0 vs 1, 2 1 0.00028 0.00028 15,8928** 4,5431 8,6831 1 vs 2 1 0.00008 0.00008 4,8046* 8,6831 Error 15 0.00026 0.00002 Total 17 0.00061 0.00004 4,5431 F0.01 Keterangan: * = Berbeda Nyata (p<0,05) ** = Berbeda Sangat Nyata (p<0,01) 44 Lampiran 5. Uji Ortogonal Kontras Ekskresi Lemak Kasar Feses Komponen 0 1 2 c Q JK 0,2910 0,3566 0,3250 0 vs 1, 2 -2 1 1 0,0995 6 0,00028 1 vs 2 0 1 -1 0,0316 2 0,00008 0,1311 8 0,00036 Lampiran 6. Sidik Ragam Ekskresi Serat Kasar Feses Perlakuan SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 2 0,0160 0,0080 9,5589** 3,6823 6,3589 0 vs 1, 2 1 0,0156 0,0156 18,6340** 4,5431 8,6831 1 vs 2 1 0,0004 0,0004 0,4837** 8,6831 Error 15 0,0126 0,0008 Total 17 0,0286 0,0017 4,5431 Keterangan: ** = Berbeda Sangat Nyata (p<0,01) Lampiran 7. Uji Ortogonal Kontras Ekskresi Serat Kasar Feses Komponen 0 1 2 c Q JK 1,9556 2,2955 2,3652 0 vs 1, 2 -2 1 1 0,0156 6 0,0156 1 vs 2 0 -1 1 0,0004 2 0,0004 0,0160 8 0,0160 Lampiran 8. Sidik Ragam Kecernaan Lemak Kasar Ransum Perlakuan SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 2 18,1039 9,05192 35,9604** 3,7389 6,5149 1 152,075 152,0745 604,1423** 4,6001 8,8616 1 0,9057 0,9057 3,5981 8,8616 Error 14 3,5241 0,2517 Total 16 21,6280 1,3518 4,6001 Keterangan: ** = Berbeda Sangat Nyata (p<0,01) 45 Lampiran 9. Uji Ortogonal Kontras Kecernaan Lemak Kasar Komponen 0 1 2 ci nxQ^2 JK 539.6490 525,4490 446,8261 n 6 6 5 1 vs 0, 2 5 -11 6 -400,7377 1056 152,0745 0 vs 2 5 0 -6 17,2883 330 0,9057 Lampiran 10. Uji Ortogonal Polinomial Kecernaan Lemak Kasar SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 2 18,1039 9,0519 35,9604** 3,7389 6,5149 Linear 1 0,0037 0,0037 0,0145 4,6001 8,8616 Kuadratik 1 18,1002 18,1002 71,9063** 4,6001 8,8616 Error 14 3,5241 0,2517 Total 16 21,6280 1,3517 Keterangan: ** = Berbeda Sangat Nyata (p<0,01) Lampiran 11. Sidik Ragam Kecernaan Serat Kasar Ransum Perlakuan SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 2 344,7606 172,3802 7,7143** 3,7389 6,5149 0, 2 vs 1 1 342,9986 342,9986 15,3498** 4,6001 8,8616 0 vs 2 1 1,7620 1,7620 0,0789 8,8616 Error 14 312,8363 22,3455 Total 16 657,5969 41,0998 4,6001 Keterangan: ** = Berbeda Sangat Nyata (p<0,01) Lampiran 12. Uji Ortogonal Kontras Kecernaan Serat Kasar Komponen 0 1 2 ci N x Q^2 JK 126,06 184,64 109,07 N 6 6 5 0, 2 vs 1 -5 11 -6 620,36 1122 342,9986 0 vs 2 5 0 -6 -24,11 330 1,7620 46 Lampiran 13. Uji Orthogonal Polinomial Kecernaan Serat Kasar SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 2 344,7606 172,3802 7,7143** 3,7389 6,5149 Linear 1 0,0037 0,0037 0,0002 4,6001 8,8616 Kuadratik 1 344,7569 344,7569 15,4285** 4,6001 8,8616 Error 14 312,8363 22,3455 Total 16 657,5969 41,0998 Keterangan: ** = Berbeda Sangat Nyata (p<0,01) Lampiran 14. Sidik Ragam Kadar Kolesterol Serum Darah Tikus SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 2 90,5685 45,2843 0,9551 3,7389 6,5149 Error 14 663,7710 47,4122 Total 16 754,3396 47,1462 Lampiran 15. Sidik Ragam Kadar Trigliserida Serum Darah Tikus SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 2 67,081 33,541 0,573 3,7389 6,5149 Error 14 819,945 58,568 Total 16 887,026 55,439 Lampiran 16. Sidik Ragam Kadar Kolesterol HDL Serum Darah Tikus SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 2 47,6096 23,8048 0,2602 3,7389 6,5149 Error 14 1328,1929 91,4702 Total 16 1280,5833 83,0121 Lampiran 17. Sidik Ragam Kadar Kolesterol LDL Serum Darah Tikus SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 2 39,9346 19,9673 0,7795 3,8056 6,7010 Error 13 332,9888 25,6145 Total 15 372,9234 24,8616 47 Lampiran 18. Sidik Ragam Lingkar Perut Tikus SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 0,7356 0,3679 3,9656* 3,7389 6,5149 0 vs 1, 2 0,7311 0,7311 7,8801* 4,6001 8,8616 1 vs 2 0,0047 0,0047 0,0510 4,6001 8,8616 Error 1,2988 0,0928 Total 2,0346 0,1272 Keterangan: * = Berbeda Nyata (p<0,05) Lampiran 19. Uji Ortogonal Kontras Lingkar Perut Tikus Komponen 0 1 2 ci N x Q^2 JK 66,28 52,95 63,79 n 6 5 6 0 vs 1, 2 11 -6 -5 28,64 1122 0,7311 1 vs 2 0 -6 5 1,25 330 0,0047 Lampiran 20. Sidik Ragam Lemak Abdominal SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01 Perlakuan 2 0,5489 0,2744 0,2298 5,1433 10,9248 Error 6 7,1687 1,1944 Total 8 7,7156 0,9644 48