Kromatografi

Kromatografi
Kromatografi
Kromatografi adalah suatu teknik pemisahan molekul
berdasarkan perbedaan pola pergerakan antara fase gerak dan
fase diam untuk memisahkan komponen (berupa molekul)
yang berada pada larutan.[1] Molekul yang terlarut dalam fase
gerak, akan melewati kolom yang merupakan fase diam.[1]
Molekul yang memiliki ikatan yang kuat dengan kolom akan
cenderung bergerak lebih lambat dibanding molekul yang
berikatan lemah.[2] Dengan ini, berbagai macam tipe molekul
dapat dipisahkan berdasarkan pergerakan pada kolom.[2]
Setelah komponen terelusi dari kolom, komponen tersebut
Kromatografi
dapat dianalisa dengan menggunakan detektor atau dapat
[2]
dikumpulkan untuk analisa lebih lanjut. Beberapa alat-alat
analitik dapat digabungkan dengan metode pemisahan untuk analisis secara on-line (on-line analysis) seperti:
penggabungan kromatografi gas (gas chromatography) dan kromatografi cair (liquid chromatography) dengan mass
spectrometry (GC-MS dan LC-MS), Fourier-transform infrared spectroscopy (GC-FTIR), dan diode-array UV-VIS
(HPLC-UV-VIS).[2]
Jenis Kromatografi
Kromatografi Cair (Liquid Chromatography)
Kromatografi cair merupakan teknik yang tepat untuk memisahkan ion atau molekul yang terlarut dalam suatu
larutan. Jika larutan sampel berinteraksi dengan fase stasioner, maka molekul-molekul didalamnya berinteraksi
dengan fase stasioner; namun interaksinya berbeda dikarenakan perbedaan daya serap (adsorption), pertukaran ion
(ion exchange), partisi (partitioning), atau ukuran. Perbedaan ini membuat komponen terpisah satu dengan yang lain
dan dapat dilihat perbedaannya dari lamanya waktu transit komponen tersebut melewati kolom.[3] Terdapat beberapa
jenis kromatografi cair, diantaranya: reverse phase chromatography, High Performance Liquid Chromatography
(HPLC), size exclusion chromatography, serta supercritical fluid chromatography.[4]
Reverse phase chromatography
Reverse phase chromatography merupakan alat analitikal yang kuat dengan memadukan sifat hidrofobik serta
rendahnya polaritas fase stasioner yang terikat secara kimia pada padatan inert seperti silika.[4] Metode ini biasa
digunakan untuk proses ekstraksi dan pemisahan senyawa yang tidak mudah menguap (non-volatile).[4]
High performance liquid chromatography
High performance liquid chromatography (HPLC) mempunyai prinsip yang mirip dengan reverse phase.[4] Hanya
saja dalam metode ini, digunakan tekanan dan kecepatan yang tinggi.[4] Kolom yang digunakan dalam HPLC lebih
pendek dan berdiameter kecil, namun dapat menghasilkan beberapa tingkatan equilibrium dalam jumlah besar.[4]
1
Kromatografi
Size exclusion chromatography
Size exclusion chromatography, atau yang dikenal juga dengan gel permeation atau filtration chromatography biasa
digunakan untuk memisahkan dan memurnikan protein.[4] Metode ini tidak melibatkan berbagai macam penyerapan
dan sangat cepat.[4] Perangkat kromatografi berupa gel berpori yang dapat memisahkan molekul besar dan molekul
kecil.[4] Molekul besar akan terelusi terlebih dahulu karena molekul tersebut tidak dapat penetrasi pada pori-pori.[4]
Kromatografi Pertukaran Ion (Ion-Exchange Chromatography)
Kromatografi pertukaran ion (ion-exchange chromatography) biasa digukanan untuk pemurnian materi biologis,
seperti asam amino, peptida, protein.[5] [6] Metode ini dapat dilakukan dalam dua tipe, yaitu dalam kolom maupun
ruang datar (planar).[5] Terdapat dua tipe pertukaran ion, yaitu pertukaran kation (cation exchange) dan pertukaran
anion (anion exchange).[6] Pada pertukaran kation, fase stasioner bermuatan negatif; sedangkan pada pertukaran
anion, fase stasioner bermuatan positif.[6] Molekul bermuatan yang berada pada fase cair akan melewati kolom.[6]
Jika muatan pada molekul sama dengan kolom, maka molekul tersebut akan terelusi.[6] Namun jika muatan pada
molekul tidak sama dengan kolom, maka molekul tersebut akan membentuk ikatan ionik dengan kolom.[6] Untuk
mengelusi molekul yang menempel pada kolom diperlukan penambahan larutan dengan pH dan kekuatan ionik
tertentu.[6] Pemisahan dengan metode ini sangat selektif dan karena biaya untuk menjalankan metode ini murah serta
kapasitasnya tinggi, maka metode ini biasa digunakan pada awal proses keseluruhan.[6]
Referensi
[1] McKay P. 2010. An Introduction to Chromatography [terhubung berkala]. http:/ / www. accessexcellence. org/ LC/ SS/
chromatography_background. php [21 Apr 2010].
[2] Tissue BM. 2000. Chromatography. [terhubung berkala]. http:/ / www. files. chem. vt. edu/ chem-ed/ sep/ chromato. html [21 Apr 2010].
[3] Tissue BM. 2000. Liquid Chromatography (LC). [terhubung berkala]. http:/ / www. files. chem. vt. edu/ chem-ed/ sep/ lc/ lc. html [21 Apr
2010]
[4] Carrier R, Bordanaro J, Yip K. 1997. Liquid Chromatography [terhubung berkala]. http:/ / www. rpi. edu/ dept/ chem-eng/ Biotech-Environ/
CHROMO/ chromliquid. html [6 Mei 2010]
[5] Hargreaves S. 2010. Types of Chromatography. [terhubung berkala]. http:/ / www. buzzle. com/ articles/ types-of-chromatography. html [6
Mei 2010].
[6] Carrier R, Bordanaro J, Yip K. 1997. Ion Exchange Chromatography [terhubung berkala]. http:/ / www. rpi. edu/ dept/ chem-eng/
Biotech-Environ/ CHROMO/ chromion. html [6 Mei 2010].
2
Sumber dan Kontributor Artikel
Sumber dan Kontributor Artikel
Kromatografi Sumber: http://id.wikipedia.org/w/index.php?oldid=3356543 Kontributor: *drew, 23saputra, Borgx, Christian N, D'SpecialOne, IvanLanin, Tjmoel, 7 suntingan anonim
Sumber Gambar, Lisensi dan Kontributor
Berkas:TLC black ink.jpg Sumber: http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Berkas:TLC_black_ink.jpg Lisensi: GNU Free Documentation License Kontributor: Original uploader was Natrij
at en.wikipedia
Lisensi
Creative Commons Attribution-Share Alike 3.0 Unported
http:/ / creativecommons. org/ licenses/ by-sa/ 3. 0/
3