TRANSKRIPSI Biosintesis RNA DOGMA SENTRAL PRINSIP TRANSKRIPSI 1. 2. 3. Biosintesis RNA menggunakan single strand DNA sebagai cetakan Polimerisasi rantai RNA berlangsung dg arah 5’ 3’ Rantai RNA yg merupakan pasangan basa komplementer cetakan DNA (A-U, C-T) Transkripsi 1. 2. 3. 3 tahap utama transkripsi adalah : inisiasi (permulaan transkripsi) elongasi (pemanjangan) terminasi (akhir proses transkripsi). Transkripsi Beberapa istilah yg dipakai dlm proses transkripsi : Unit transkripsi : segmen DNA yg digunakan utk transkripsi DNA Segmen DNA lain yg non-transkripsi adalah : promotor, enhancer, operator ( berpengaruh pd frekuensi transkripsi) dr unit & gen regulator yg secara independen melakukan transkripsi & menyebabkan tbtknya protein yg jg berpengaruh pd frekuensi transkripsi. RNA Polimerase prokariot Enzim RNA polimerase adl protein dg BM 450 kd 4 sub unit : α2 β β’ σ (holoenzim) Pd saat isolasi enzim RNA polimerase akan tdr atas core enzim : α2 β β’ tanpa subunit σ (dsbt faktor sigma) Subunit σ (faktor sigma) diperlukan utk menemukan promoter yg digunakan utk mengawali proses transkripsi & melepaskan diri apabila enzim tdk bekerja. RNA Polimerase Subunit Jumlah Berat mol Peran α2 2 37000 Tidak jelas β 1 151000 Membentuk ikatan fosfodiester β’ 1 155000 Mengikat cetakan DNA α70 1 50000 Mengenali promotor dan mengawali sintesis Transkripsi – RNA Polimerase eukariot Ditemukan pd inti sel, mitokondria, kloroplas RNA Polimerase pd inti dilakukan oleh 3 mcm enzim yaitu polimerase I, II & III. RNA Polimerase I tdpt dlm nukleoli menghasilkan rRNA (50-70% total RNA). RNA Polimerase II tdpt dlm nukleoplasma mensintesis pra-zat mRNA (20-40% total RNA). RNA Polimerase III tdpt dlm nukleoplasma mentranskripsi tRNA, 5SRNA & RNA kecil lain (10% total RNA) Transkripsi pd prokariot - INISIASI Tdr atas 2 tahap : Holoenzim mengenal & menempel pd promoter spesifik Pbtk kompleks terbuka (bag untai ganda yg mengelokor) & proses inisiasi baru blgs. Penempelan RNA polimerase pd promoter spesifik yaitu untai 10 nukleotida pd sisi 5’ (rantai -10, dikenal sbg Pribnow Box yg berisi rantai TATAAT & rantai -35 adl TTGACA) PROMOTER PROKARIOT & EUKARIOT ELONGASI TERMINASI TRANSKRIPSI Terminasi transkripsi berlangsung krn : Tjd penghentian proses elongasi akibat tdk tbtknya ikatan fosfodiester yg diikuti dg : Disosiasi hibrida RNA – DNA & kmd : Terlepasnya RNA polimerase dr DNA Proses terminasi dpt berlangsung pd tapak ttt DNA & tdr atas 2 pola : terminasi bebas & terminasi tergantung faktor. TERMINASI bebas Terbentuknya rantai RNA dengan bentuk hair pin (stem dan loop) yang kaya akan G-C pada stem dan U pada loop. TERMINASI tergantung faktor Memerlukan protein rho (faktor ρ) dg BM 46000 & bfgs mbtk heksamer yg menempel pd ss RNA sepanjang 72 pasangan basa (setiap subunit protein ρ akan menempel pada 12 nukleotida) Aktivitas ATPase protein ρ akan memungkinkan protein ρ bergerak sepanjang hibrid DNA-RNA dg jalan menarik RNA menjauhi kompleks transkripsi. terima kasih