LAPORAN PENELITIAN Tahun : 2015 PENENTUAN PARAMETER KONTROL KUALITAS TIGA BAHAN BAKU JAMU SELEDRI (Apium graviolens), KEPEL (Stelechocarpus burahol) DAN SEMBUNG (Blumea balsamifera) KEMENTERIAN KESEHATAN RI BADAN PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN KESEHATAN BALAI BESAR LITBANG TANAMAN OBAT DAN OBAT TRADISIONAL 2015 LAPORAN PENELITIAN Tahun : 2015 PENENTUAN PARAMETER KONTROL KUALITAS TIGA BAHAN BAKU JAMU SELEDRI (Apium grafiolens) KEPEL (Stelechocarpus burahol) DAN SEMBUNG (Blume balsamifera) oleh ROHMAT MUJAHID dkk KEMENTERIAN KESEHATAN RI BADAN PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN KESEHATAN BALAI BESAR LITBANG TANAMAN OBAT DAN OBAT TRADISIONAL 2015 i SUSUNAN TIM PENELITI Susunan personalia pada penelitian ”Penentuan Parameter Kontrol Kualitas Tiga Bahan Baku Jamu Seledri (Apium grafiolens) Kepel (Stelechocarpus burahol) dan Sembung (Blume balsamifera)” berdasarkan Surat Keputusan Kepala Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman LB.02.01/VI.3/678/2015 adalah sebagai berikut: No 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Nama Rohmat Mujahid MSc. Apt Ika Yanti Marfuathush Sholikhah M.Sc. Dr. rer.nat. Yosi Bayu Murti MSi., Apt. Wahyu Joko Priyambodo M.Sc. Devi Safrina S.TP. Endang Brotojoyo A.Md. Aditya Permadi A.Md. Nunik Merdekawati Obat dan Obat Keahlian/Kesarjanaan Magister Farmasi Doktor Kimia Bahan Alam Magister Farmasi Magister Kimia Sarjana Pertanian Diploma Farmasi Diploma Farmasi - ii Tradisional No. Kedudukan dalam tim Ketua Pelaksana Peneliti UGM Peneliti Peneliti Peneliti Pembantu Peneliti Pembantu Peneliti Pembantu Peneliti SURAT KEPUTUSAN PENELITIAN iii iv KATA PENGANTAR Puji syukur kami panjatkan kepada Allah SWT atas rahmat-Nya sehingga kami dapat menyelesaikan laporan penelitian yang berjudul “PENENTUAN PARAMETER KONTROL KUALITAS TIGA BAHAN BAKU JAMU SELEDRI (Apium grafiolens) KEPEL (Stelechocarpus burahol) DAN SEMBUNG (Blume balsamifera)”. Hasil penelitian ini diharapkan dapat sebagai alternatif kontrol kualitas bahan baku jamu terutama untuk ketiga simplisia seledri (Apium grafiolens) kepel (Stelechocarpus burahol) dan sembung (Blume balsamifera)”. Kami menyadari bahwa hasil penelitian ini jauh dari sempurna. Oleh karena itu segala bentuk tanggapan terhadap laporan penelitian ini sangat kami harapkan sebagai masukan untuk perbaikan serta sebagai bahan penelitian lebih lanjut. Semoga jamu dapat dimanfaatkan dalam pelayanan kesehatan formal dan dapat meningkatkan kesehatan masyarakat Indonesia. v ABSTRAK Kandungan kimia yang merupakan parameter spesifik yang sangat dibutuhkan dalam kontrol kualitas bahan baku jamu. Kandungan kimia dalam bahan baku jamu dapat diartikan sebagai senyawa berkahsiat (zat aktif) atau zat penanda. Seledri (Apium graviolens) Kepel (Stelechocarpus burahol) dan Sembung (Blume balsamifera) merupakan 3 bahan baku jamu yang digunakan dalam ramuan jamu tersaintifik. Kandungan kimia dalam ketiga bahan baku jamu tersebut ditetapkan sebagai total flavonoid. Metode yang digunakan adalah spektrofotometri dengan reagen AlCl3 pada panjang gelombang 420 nm. Simplisia seledri mengandung 0,42 – 0,69 %, Kepel 1,05 – 1,59 % dan Sembung 0,45 – 0,73% total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin. vi DAFTAR ISI SUSUNAN TIM PENELITI ..................................................................................................... ii SURAT KEPUTUSAN PENELITIAN .................................................................................... iii KATA PENGANTAR .............................................................................................................. v RINGKASAN EKSEKUTIF ................................................................................................... vi ABSTRAK ............................................................................................................................. vi DAFTAR ISI ......................................................................................................................... vii DAFTAR TABEL ..................................................................................................................viii DAFTAR GAMBAR..............................................................................................................viii DAFTAR LAMPIRAN ...........................................................................................................viii PENDAHULUAN ................................................................................................................... 1 A. Latar Belakang................................................................................................................ 1 B. Tinjauan Pustaka............................................................................................................ 2 C. Tujuan dan Manfaat ....................................................................................................... 4 METODE................................................................................................................................ 5 A. Kerangka Konsep ........................................................................................................... 5 B. Tempat dan Waktu ......................................................................................................... 5 C. Desain Penelitian ........................................................................................................... 5 D. Alat dan Bahan ............................................................................................................... 5 E. Prosedur Kerja ................................................................................................................ 5 F. Analisis ............................................................................................................................ 7 HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................................................. 8 A. Seledri (Apium grafiolens) ............................................................................................. 8 B. Kepel (Stelechocarpus burahol) ................................................................................. 11 C. Sembung (Blume balsamifera) ................................................................................... 12 KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................................................... 14 UCAPAN TERIMA KASIH ................................................................................................... 15 KEPUSTAKAAN .................................................................................................................. 16 PENGESAHAN .................................................................................................................... 18 LAMPIRAN .......................................................................................................................... 19 vii DAFTAR TABEL Tabel 1. Hubungan kadar baku kuersetin dengan serapan ................................................. 9 Tabel 2. Kadar total flavonoid sampel seledri ..................................................................... 10 Tabel 3. Kadar total flavonoid sampel kepel ....................................................................... 11 Tabel 4. Kadar total flavonoid sampel sembung................................................................. 12 DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Herba dan simplisia seledri ................................................................................. 8 Gambar 2. Hasil pemindaian panjang gelombang sampel seledri ....................................... 8 Gambar 3. Hubungan serapan dan waktu inkubasi (operating time) ................................... 9 Gambar 4. Hubungan kadar kuersetin dengan serapan (kurva kalibrasi) ......................... 10 Gambar 5. Daun dan simplisia kepel .................................................................................. 11 Gambar 6. Daun dan simplisia sembung ............................................................................ 12 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Pembuatan baku kuersetin ............................................................................. 19 Lampiran 2. Perhitungan pengenceran baku kuersetin ...................................................... 20 Lampiran 3. Contoh perhitungan kadar total flavonoid ....................................................... 21 . viii PENDAHULUAN A. Latar Belakang Efek yang ditimbulkan oleh suatu obat disebabkan oleh senyawa yang terkandung didalamnya, demikian juga yang terjadi pada formula/ramuan obat tradisional (jamu). Dalam formula obat konfensional (modern) komposisi dan kandungan kimia yang bertanggung jawab terhadap aktifitas medis sudah sangat jelas, sehingga memudahkan dalam mengontrolnya. Sedangkan ramuan jamu memiliki komposisi lebih dari 1 tumbuhan obat (simplisia) dimana masing-masing simplisia juga memiliki kandungan senyawa kimia yang tidak sedikit. Senyawa-senyawa tersebut dalam interaksi yang unik menimbulkan efek dalam tubuh, baik efek positif (terapetik) maupun efek negatif (efek samping). Klinik Saintifikasi Jamu, Balai Besar Litbang Tanaman Obat dan Obat Tradisional sejak 2007 telah melakukan penelitian berbasis pelayanan terhadap lebih dari 10 ramuan jamu, 5 diantaranya telah lolos sebagai “Jamu Tersaintifik” dari Komisi Nasional Jamu yaitu ramuan jamu untuk hipertensi ringan, ramuan jamu untuk hiperurecemia, ramuan jamu untuk wasir, ramuan jamu untuk dispepsia dan rauan jamu untuk artritis genu. Sedangkan ramuan-ramuan yang lain masih dalam tahap penelitian baik penelitian preklinik yang menguji khasiat dan keamanan terhadap hewan coba, penelitian observasi klinis (prepost test) dengan jumlah pasien terbatas dan segera memasuki tahap uji klinis (RCT) yang melibatkan berbagai instansi, rumah sakit maupun dinas kesehatan daerah yang tergabung dalam Jejaring Saintifikasi Jamu. Hasil penelitian terhadap ramuan-ramuan jamu tersebut sangat menjanjikan, dimana sediaan godogan (infusum) ramuan jamu dari simplisia tanpa perlakuan selain perajangan dan pengeringan menghasilkan efek setara dengan obat-obat konvensional, dengan efek samping yang minimal. Hasil pemeriksaan fungsi organ vital yang meliputi fungsi liver (SGPT-SGOT) dan fungsi ginjal (ureum, kreatinin) menunjukan dalam batas normal. Disisi lain quality of life dari pasien meningkat disertai berkurangnya keluhan/gejala klinis. 1 B. Tinjauan Pustaka 1. Seledri (Apium grafiolens) Seledri (Apium graviolens) merupakan salah satu kaomponen utama dalam ramuan jamu antihipertensi ringan yang telah mendapatkan sertifikat sebagai “Jamu Tersaintifik” selain daun kumis kucing (Orthosiphon stamineus) dan pegagan (Centela asiatica) (Agus T, 2012). Seledri berefek seperti kalcium antagonis, yaitu beraktivitas pada reseptor pembuluh darah dan akan memberi efek relaksasi. Naiknya tekanan darah pada penderita hipertensi menyebabkan pengencangan pembuluh darah. Seledri bersifat menghambat pengencangan tersebut. Herba seledri mempunyai efek hipotensi baik pada penderita hipertensi maupun pada percobaan hewan pada pengukuran tekanan darah tikus secara tidak langsung, fraksi asam dari ekstrak etanol memiliki efek penurunkan tekanan darah yang tidak terlalu besar tetapi stabil (Anonim, 2000). Dalam batas dosis tertentu kekuatan dan lama efek penurunan tekanan darah meningkat dengan bertambahnya dosis. Kandungan alkaloid dalam seledri juga berefek sedatif dan antikonsulvan pada tikus . Konsumsi seledri dapat mengurangi ketegangan pembuluh darah (Yoppi, 2007). Konsumsi herba seledri segar lebih dari 200 g sekali minum dapat menyebabkan penurunan tekanan darah secara tajam sehingga dapat terjadi shock. (Anonim, 2000) Kandungan kimia seledri adalah Kandungan kimia pada seledri antara lain 11,21diokso-2β,3β,15α-trihidroksiurs-12-en-2-O-β-d-glukopiranosid 11,21-diokso-3β,15α, 24-trihidroksiurs-12-ene-24-O-β-d-glukopiranosid,21-diokso-3β,15α,24-trihidro oksiolean-12-en-24-O-β-d-glukopiranosid, apigenin-7-O-[2′′-O-(5′′′-O-feruloil)-β-d- apiofuranosil]-β-d-glukopiranosid (Kailan, 2009); manitol, apigenin-7-O-glukosida, 7,7-di-O-metilamentoflavon (Hadi S, 2008); asam d-galakturonat, l-ramnosa, larabinosa, d-galaktosa (Ovodova, 2009). Flavonoid (apiin, apigenin, isoquersitrin), kumarin (apigravin, apiumetin, apiumosid, bergapten, selerin, selereosid, isoimperatorin, isopimpinelin, ostenol, rutaretin, seselin, umbeliferon, 8-hidroksi-5metoksipsoralen), manitol, minyak atsiri (3-butilftalida, limonen, santalol, selenin, sedanenolid, eudesmol) (Anonim, 2007) Sedangkan dalam Farmakope Herbal Indonesia disebutkan bahwa kandungan kimia yang digunakan sebagai senyawa penanda dalam seledri adalah total flavonoid yang dihitung sebagai apiin. (Anonim, 2008) . 2 2. Kepel (Stelechocarpus burahol) Kepel secara tradisional digunakan sebagai obat untuk menurunkan kadar asam urat dan diuretik. Aktivitas flavonoid sebagai penurun kadar asam urat diperoleh melalui penghambatan enzim xantin oksidase (Purwantiningsih, 2010) Flavonoid selain dapat menghambat enzim xantin oksidase juga bersifat sebagai antioksidan penangkap radikal superoksida (Sunarni, 2007). Hasil penelitian menunjukkan pemberian infus daun kepel bisa menurunkan kadar asam urat darah pada tikus dan ayam. Fraksi larut dan tidak larut petroleum eter daun kepel dapat menyebabkan penurunan kadar asam urat darah ayam hiperurikemia. Ekstrak etnaol dan ekstrak heksan dari daun kepel juga memiliki aktivitas hipourikemia yang signifikan (Purwantiningsih, 2009) Dari hasil penelitian pada subyek hiperurisemia didapatkan bahwa, dengan pemberian ramuan jamu yang terdiri dari bahan utama tanaman daun kepel, daun tempuyung dan secang dapat menurunkan kadar asam urat darah secara bermakna setelah pemberian selama 28 hari. Ramuan jamu untuk anti hiperurisemia menurunkan kadar asam urat darah subyek rata-rata 3 mgdL. Dan dilihat dari segi keamanan, ramuan jamu ini sedikit meningkatkan fungsi faal hati dan faal ginjal, dengan adanya peningkatan angka SGPT sebesar 30% dari angka awal penelitian, namun angka SGPT pada keseluruhan subyek masih didalam angka normal. (Agus T, 2012) Daunnya mengandung flavonoida dan polifenol. Daun kepel telah diteliti mampu menurunkan kadar asam urat darah hewan uji dengan kemungkinan kandungan aktifnya flavonoid yang memiliki aktivitas anti-oksidan kuat sehingga diprediksi memiliki juga efek menghambat enzim xantin oksidase. Kandungan kimia kepel antara lain flavonoid, tanin dan steroid. Daun, daging buah, biji dan akar kepel mengandung saponin, flavonoid dan polifenol. Bijinya mengandung alkaloid. Kulit batang mengandung alkaloid fenantren laktam, aristolaktam B1 dan B2. Kulit batang dan daun mengandung senyawa sterol, ergosterol, stigmasterol dan β-sitosterol (Rahminiwati, 2010) Dalam Farmakope Herbal Indonesia Simplisia kepel ditetapkan sebagai total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin. 3 3. Sembung (Blume balsamifera) Beberapa penelitian yang telah membuktikan sembung dapat merelaksasi otot-otot bronkus tikus, sehingga banyak digunakan masyarakat untuk mengobati sakit asma dan maag. Daun tanaman sembung mengandung 3,4’,5-trihidroksi-3’,7-dimetoksiflavanon, 3’,4’,5-trihidroksi-7-metoksiflavanon dan senyawa biflavonoid yaitu 3-O-7’biluteolin (Alia, 2005). C. Tujuan dan Manfaat 1. Tujuan a. Tujuan Umum Memperoleh informasi parameter kontrol kualitas dan metode pengukuran yang sesuai pada bahan baku jamu b. Tujuan Khusus 1). Memperoleh metode kontrol kualitas yang sesuai pada bahan baku jamu seledri 2). Memperoleh metode kontrol kualitas yang sesuai pada bahan baku jamu kepel 3). Memperoleh metode kontrol kualitas yang sesuai pada bahan baku jamu sembung 2. Manfaat Dengan diperolehnya informasi parameter kontrol kualitas dan metode yang sesuai maka penjaminan kualitas bahan baku yang digunakan dalam penelitian Saintifikasi Jamu dapat dilaksanakan secara rutin dan memberikan hasil yang berkelanjutan. 4 METODE A. Kerangka Konsep Bahan Jamu Parameter Non Spesifik - Kadar Air - Kadar Abu - Kadar Sari - Cemaran Penjaminan Kualitas Kualitas Parameter Spesifik - Kandungan Kimia - Profil Kimia Metode Analisis Efek Farmakologi - Khasiat - Keamanan B. Tempat dan Waktu Tempat penelitian di Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat Tradisional (B2P2TO-OT) Tawangmangu. Waktu penelitian 12 bulan dari bulan Januari sampai dengan Desember 2015. C. Desain Penelitian Jenis penelitian ini adalah eksperimental laboratorium. D. Alat dan Bahan Peralatan yang digunakan adalah : neraca analitik, refluks set, corong pisah, labu takar, bejana sonikasi, sentrifuge, spektrofotometer. Bahan yang digunakan adalah simplisia basah dari dari ramuan jamu jejaring SJ yaitu Seledri (ramuan hipertensi ringan) Kepel (ramuan hiperurecemia) dan Sembung (ramuan dispepsia). Bahan kimia akuadest, metanol, aseto nitril, etil asetat, kloroform, dietil éter, heksana, petroleum eter, toluene dan bahan kimia yang lain E. Prosedur Kerja a. Penyiapan Bahan Uji Simplisia yang diperoleh dari kebun budidaya Balai Besar Litbang Tanaman Obat dan Obat Tradisional, dibersihkan, dipisahkan dari bahan pengotor, selanjutnya 5 dicuci, ditiriskan, dan di potong. Bahan dikeringkan dengan menggunakan oven pada suhu 500C hingga kandungan air mencapai yang dipersaratkan FHI. b. Pengecilan Ukuran Bahan Masing masing simplisia dilakukan pengecilan ukuran partikel dengan cara : dicacah dan diblender kemudian disaring dengan ayakan 40. c. Pembuatan larutan uji 1) Metode FHI 2008 Ditimbang seksama 200 mg serbuk simplisia, dimasukan dlam labu alas bulat, di tambahkan laritan 20 ml HMC 20 ml, tambhakan 1 ml HCL pekat dan 20 ml aseton, direfluks 30 menit, diangkat dan didinginkan, disaring ampas dipisahkan dari filtratnya untuk ditambah dengan 20 ml aseton dan di refluks kembali selama 30 menit, diangkat, didinginkan dan disaring. Filtrat di kumpulkan dan di genapkan menjadi 100 ml dengan labu takar. Diambil 20 ml ditambah 20 ml air dan di partisi dengan asam asetat sebanyak 3 kali, dilanjutkan dengan digenapkan menjadi 50 ml menggunakan labu takar hingga diperoleh larutan uji. 20 ml larutan uji ditambahkan 5 ml reagen AlCl3 0,1% di inkubasi selama sesuai hasil optimasi waktu dan pada panjang gelombang hasil pemindaian. 2) Metode Modifikasi 100 mg serbuk sampel di tambah dengan 10 ml etanol, di sonikasi selama 15 menit, disentrifuse pada 10.000 rpm selama 5 menit. 2 ml supernatan dimasukan dlam botol kaca dan diuapkan dalam oven bersuhu 40 0C. Setelah kering ditambahkan 4 ml methanol dan disonicasi kembali selama 15 menit. Disentrifuse kembali pada 10.000 rpm selama 5 menit hingga diperoleh larutan uji. 1 ml larutan uji ditambah 1 ml larutan AlCl3 dan 3 ml aquadest, diinkubasi selama 15 menit hingga terjadi rekasi yang sempurna. Dilakukan pemindaian panjang gelombang maksimum dan operating timenya. Sebagai blanko adalah 1 ml larutan uji ditambah dengan 4 ml aquadest. Dibuat kurva kalibrasi dengan pembanding kuersetin pada kadar 10-50 ppm 6 F. Analisis Data yang diperolah dibandingkan dan dioleh dengan program statistik untuk mengetahui perbedaan yang terjadi. 7 HASIL DAN PEMBAHASAN Dilakukan konfirmasi terhadap metode penetapanan parameter kontrol kualitas yang disarankan oleh farmakope herbal Indonesia. Selanjutnya di bandingkan dengan metode lain atau metode yang dimodifiklasi sehingga diperoleh pengerjaan lebih cepat, sederhana dan murah yaitu dengan melakukan beberapa modifikasi dalam tahapantahapannya. A. Seledri (Apium grafiolens) Gambar 1. Herba dan simplisia seledri Menurut Suplemen I Farmakope Herbal Indonesia (2010) kontrol kualitas simplisia seledri ditetapkan kandungan total flavonoid yang dihitung sebagai apiin dengan kadar minimal adalah 0,6%. Gambar 1 menunjukan bahwa kandungan apiin dalam sampel tidak terdeteksi, yang terdeteksi adalah golongan flavonoid yang lebih umum yaitu kuersetin. Gambar 2. Hasil pemindaian panjang gelombang sampel seledri 8 Oleh sebab itu kandungan total flavonoid 0,6% yang dihitung sebagai apiin tidak dapat diterapkan. Sehingga dilakukan standardisasi tersendiri berdasarkan kandungan total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin. Tahapan yang dilakukan adalah : 1. Penentapan operating time Penetapan operating time untuk mendapatkan waktu reaksi yang memberikan respon serapan yang stabil. Gambar 3. Hubungan serapan dan waktu inkubasi (operating time) Gambar 3. menunjukan serapan stabil pada menit ke 15 setelah penambahan reagen dilakukan dan tetap stabil hingga meint ke-30. Interval waktu ini dipandang cukup untuk memberikan keleluasaan pembacaan serapan. 2. Kurva Kalibrasi Hubungan antara kandungan kuersetin dengan respon absorbansi dinyatkan dalam bentuk kurva kalibrasi sebagaiman disajikan dalam tabel 1 dan gambar 4. Tabel 1. Hubungan kadar baku kuersetin dengan serapan No Kadar Kuersetin (ppm) Serapan Persamaan 1. 2. 3. 4. 5. 10,78 21,56 32,34 43,12 53,90 0,109 0,239 0,389 0,549 0,655 A = -0,032 B = 0,013 R = 0,996 9 Gambar 4. Hubungan kadar kuersetin dengan serapan (kurva kalibrasi) Diperoleh persamaan kurva kalibrasi y = 0,013x – 0,019 dengan koefisien korelasi R = 0,996 yang selanjutnya diperguankan dalam perhitungan. (lampiran 3) Tabel 2 menampilkan kandungan total flavonoid sampel seledri yang dihitung sebagai kuersetin berkisar antara 0,42 sampai dengan 0,87 dengan niali rata rata 0,55 + 0,13%. Dari sini kami merekomendasikan bahwa selderi standar yang dapat dipergunakan dalam pelayanan dan penelitian di Rimau Riset Jamu adalah X+SD yaitu pada kisaran 0,42 s.d 0,69%. Tabel 2. Kadar total flavonoid sampel seledri 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Kadar Total Flavonoid 0,42 0,45 0,45 0,46 0,47 0,52 0,54 0,55 0,56 0,62 0,74 0,87 Rata-rata 0,55 No Sampel Sedangkan pada parameter non spesifik yang meliputi kadar sari dan kadar abu kurang dapat digunakan sebagi patokan karena data yang diperoleh memiliki koefisien variasi yang sangat besar, sehingga kurang dapat digunakan sebagai 10 patokan. Kadar sari larut alkohol mulai dari 12,34 s.d 40,92% dengan koefisien variasi 21,80%; dan kadar abu 13,9 s.d 19,24% B. Kepel (Stelechocarpus burahol) Gambar 5. Daun dan simplisia kepel Menurut Suplemen I Farmakope Herbal Indonesia (2010) kontrol kualitas simplisia daun kepel ditetapkan kandungan total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin dengan kadar minimal 0,44%. Dengan melakukan modifikasi metode yang ada diperoleh data kadar total flavonoid simplisia daun kepal mulai dari 1,01 s.d 1,95% dengan rata rata 1,32+0,27%. Sedangkan pada parameter non spesifik yang meliputi kadar sari dan kadar abu diperoleh 15,19 dan 11,53% Tabel 3. Kadar total flavonoid sampel kepel 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Kadar Total Flavonoid 1,01 1,04 1,05 1,23 1,26 1,27 1,29 1,32 1,35 1,38 1,67 1,95 Rata-rata 1,32 No Sampel 11 C. Sembung (Blume balsamifera) Gambar 6. Daun dan simplisia sembung Menurut Farmakope Herbal Indonesia (2008) kontrol kualitas simplisia daun sembung ditetapkan kandungan total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin dengan kadar minimal 1,20%. Hasil pemindaian panjang gelombang menegaskan bahawa kandungan flavonoid utama dalam daun sembung adalah kuersetin. Sehingga penggunaan kuersetin sebagai pembanding sudah sesuai dengan pola dan karakteristik sampel. Akan tetapi rumitnya pengerjaan penetapan kadar total flavonoid menurut FHI maka diperlukan alternatif penetapan kadar yang lebih sederhana, cepat dan murah. Tabel 4. Kadar total flavonoid sampel sembung Kadar Total Flavonoid 0,40 0,41 0,49 0,50 0,62 0,62 0,62 0,72 0,76 0,77 0,40 0,41 1,32 No Sampel 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Rata-rata 12 Hasil modifikasi metode yang ada diperoleh nilai kadar total flavonoid mulai dari 0,40 s.d 0,77% dengan rata rata 0,59+0,14%. 13 KESIMPULAN DAN SARAN Parameter kontrol kualitas spesifik yang dapat diterapakan dalam bahan baku jamu Seledri (Apium graviolens), Kepel (Stelechocarpus burahol) dan Sembung (Blume balsamifera) adalah dengan penetapan total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin. 1. Kadar total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin dalam simplisia Seledri adalah 0,42 – 0,69% 2. Kadar total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin dalam simplisia Kepel adalah 1,05 – 1,59% 3. Kadar total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin dalam simplisia Sembung adalah 0,45 – 0,73 % 14 UCAPAN TERIMA KASIH Penulis beserta tim dalam penelitian ini memanjatkan puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa karena berkat rahmat dan karunia-Nya sehingga kami dapat menyelesaikan penelitian yang berjudul “PENENTUAN PARAMETER KONTROL KUALITAS TIGA BAHAN BAKU JAMU SELEDRI (Apium grafiolens) KEPEL (Stelechocarpus burahol) DAN SEMBUNG (Blume balsamifera)” Selain itu, kami ingin mengucapkan terima kasih kepada: 1. Indah Yuning Prapti, SKM., M.Kes. dan Dra. Lucie Widowati M.Si., Apt. selaku Kepala Balai Besar Litbang Tanaman Obat dan Obat Tradisional yang telah memberikan kesempatan, dukungan dan fasilitas untuk terlaksananya penelitian ini. 2. Drs. Slamet Wahyono M.Sc., Apt., selaku Ketua Pembina Penelitian Ilmiah yang telah memberikan bimbingan dalam penelitian ini. 3. Dr.rer.nat Yosi Bayu Murti, M.Si., Apt. yang telah banyak memberikan arahan, saran dan bimbingan dalam pelaksanaan penelitian ini. 4. Kelompok peneliti di Balai Besar Litbang Tanaman Obat dan Obat Tradisional Tawangmangu atas segala bantuan dan konsultasinya. Dan semua pihak yang tidak dapat kami sebutkan satu persatu yang telah membantu dalam menyelesaikan penelitian ini. Semoga upaya penelitian ini dapat bermanfaat untuk meningkatkan derajat kesehatan masyarakat dan kiranya Allah SWT selalu melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya kepada kita semua. 15 KEPUSTAKAAN Alia DMH, KC Wonga, and PK Lima, 2005, Flavonoids from Blumea balsamifera, Fitoterapia, vol. 76: 128-130. Anonim, 2000, Acuan Sediaan Herbal, vol. 1, Badan POM RI, Jakarta. Anonim, 2010, Peraturan Menteri Kesehatan No. 003/MENKES/PER/I/2010 tentang Saintifikasi Jamu dalam Penelitia Berbasis Pelayanan Kesehatan, Menteri Kesehatan RI Anonim, 2007, Seledri (Apium graveolens), Serial data ilmiah terkini tanaman obat, Badan Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta Anonim, 2008, Farmakope Herbal Indonesia, Departemen Kesehatan, Jakarta Giri, L., Andola, H. C., Purohit, V. K., Raurat, M. & Bhatt, I. 2010, Chromatographic and Spectral Fingeprinting Standardization of Traditional Medicines : An overview as Modern Tools. Research Journal of Phytochemistry 4 (4), 234-241. Hadi S, 2008, Isolasi dan Identifikasi Komponen Kimia Ekstrak Etanol 95% dari Apium graveolens Linn. Var secalinum alef, Tesis. ITB Central Library , Bandung Indonesia. Kailan Z, F Zhao, Z Liu, Y Zhuang, L Chen and F Qiu, 2009, Triterpenoids and flavonoids from Celery (Apium graveolens), Department of Natural Products Chemistry, J. Nat. Prod., 72(9): 1563–1567 Kementerian Kesehatan RI, 2010, Vademekum Tanaman Obat, Jakarta, Departemen kesehatan Liang, Y.Z., Xie, P. & Chan, K. 2004, Quality control of herbal medicines. Journal of Chromatography B, 812, 53–70. Ovodova RG, VV Golovchenko, SV Popov, GY Popova, NM Paderin, AS Shashkov, and YS Ovodov, 2009. Chemical composition and anti-inflammatory activity of pectic polysaccharide isolated from celery stalks, J. Food Chemistry, vol. 114, 2(15): 610-615 Purwantiningsih and A.H. Rahman, 2009, In Vivo Study of The Hypouricemic Effect of The Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. F. & Th.) Leaves Extract Compared with Allopurinol, Malaysian Journal of Pharmacy, 1(7). Purwantiningsih, A.H. Rahman and I. Purwantini, 2010, Antihyperuricemic Activity of The Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. F. & Th.) Leaves Extract and Xanthine Oxidase Inhibitory Study, International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences (IJPPS), 2(2): 123-127. Rahminiwati, M., I. Batubara, S. Sa’diah, L.K. Darusman and T. Mitsunaga, 2010, Antiacne Potency of Kepel (Stelechocarpus burahol)’s Leaf and Fruit. Proceeding of International Conference on Medicinal Plants. Surabaya. Indonesia, 287-291. Soares PK & Scarminio IS. 2008, Multivariate chromatographic fingerprint preparation and authentication of plant material from the genus Bauhinia. Phytochem Anal. 19:78-85 Sunarni, T., 2007, Flavonoid Antioksidan Penangkap Radikal dari Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook f. & Th.), Majalah Farmasi Indonesia, 18(3): 111-116. 16 Yoppi I, 2007, Tanaman obat yang berkhasiat sebagai antihipertensi, Karya Ilmiah Fakultas Farmasi UNPAD. 17 PENGESAHAN Penelitian dengan judul “PENENTUAN PARAMETER KONTROL KUALITAS TIGA BAHAN BAKU JAMU: SELEDRI (Apium grafiolens) KEPEL (Stelechocarpus burahol) DAN SEMBUNG (Blume balsamifera)” dinyatakan telah selesai dan telah dibahas Panitia Pembina Ilmiah (PPI) Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat Tradisional. Ketua PPI Tawangmangu, Desember 2015 Ketua Pelaksana Drs. Slamet Wahyono M.Sc., Apt NIP. 196502151995031001 Rohmat Mujahid M.Sc., Apt NIP. 197608262005011001 Menyetujui Kepala Balai Besar Litbang Tanaman Obat dan Obat Tradisional Dra. Lucie Widowati M.Si., Apt. NIP. 195711211986032001 18 LAMPIRAN Lampiran 1. Pembuatan baku kuersetin Berdasarkan COA yang ada, kuersetin (BM 302,27) tersedia dalam bentuk kuersetin dihidarat (MB 338,27) dengan kemurnian > 98%, sehingga kadar kuersetin dengan penimbangan 24,62 mg dan dilarutkan dalam 20,0 ml Metanol adalah: Kadar = Penimbangan (mg) x Kemurnian x BM anhidrat Volume (ml) x BM hidrat = 24,62 mg x 98% x 302,27 X 1000 ppm 50 ml x 338,27 = 215.60 ppm 19 X 1000 ppm Lampiran 2. Perhitungan pengenceran baku kuersetin Pembuatan larutan baku apigenin, kuersetin, rutin dan hesperidin dengan kadar yang lebih rendah dilakukan pengenceran berdasarkan rumus C1 x V1 = C2 x V2 atau V1 = C2 x V2 C1 Di mana C1 C2 V1 V2 : Kadar kuersetin induk : Kadar kuersetin yang diinginkan : Volume kuersetin induk yang dibutuhkan : Volume akhir kuersetin pada kadar yang diinginkan Contoh: Untuk membuat 10,0 ml baku apigenin 21,56 ppm maka diperlukan larutan baku apigenin 215,6 ppm sejumlah: C2 x V 2 C1 21,56 ppm x 10,0 ml = 215,6 ppm = 1 ml Jadi 1 ml larutan baku kuersetin 215.6 ppm ditambah dengan 9,0 ml metanol akan V1 = menghasilkan larutan baku kuersetin dengan kadar 21.56 ppm. 20 Lampiran 3. Contoh perhitungan kadar total flavonoid Hasil pembacaan baku kuersetin pada panjang gelombang 420 nm diperoleh persamaan kurva kalibrasi : y = 0,013 x – 0,032 dengan koefisien korelasi 0,996 No Kadar Kuersetin (ppm) Serapan Persamaan 1. 10,78 0,109 A = -0,032 2. 21,56 0,239 B = 0,013 3. 32,34 0,389 R = 0,996 4. 43,12 0,549 5. 53,90 0,655 Pada sampel seledri no 8 dari hasil pembacaan diperoleh absorbansi 0,391 diplotkan dalam persamaan kurva kalibrasi diperoleh : Y = 0,013 x -0,032 0,391 = 0,013 x -0,032 (0,391 + 0,032) x= 0,013 x = 27,57 ppm Dalam larutan sampel yang direaksikan terdapat total kuersetin sebesar 27,57 ppm. Volume larutan sampel yang direaksikan adalah : 10 ml x pengenceran 2 kali = 20 ml. Dalam 15 ml larutan yang direaksikan terdapat : 27,57 x 20 1.000 = 0,5515 mg Berat penimbangan sampel adalah 100,3 mg, sehingga kadar flavonoid dalam sampel adalah x= 0,5515 x 100% 100,3 = 0,55 % kadar = 21