PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN MANGROVE Rhizophora
advertisement
PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN MANGROVE Rhizophora mucronata DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi sebagian syarat Mencapai Derajat Sarjana S-1 Disusun oleh : ANA MIFTAHUL JANAH 1201070033 PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2017 i Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 ii Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 iii Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 iv Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 PERSEMBAHAN Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT yang telah memberikan kenikmatan yang sungguh luar biasa dengan selesainya penulisan skripsi ini. Skripsi ini penulis persembahkan untuk: 1. Kedua orang tua mamah dan bapak yang selalu memberikan do’a, dukungan dan kasih sayangnya. 2. Keluarga besar dari mamah dan bapak yang membuat penulis lebih semangat untuk menyelesaikan skripsi ini. v Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 MOTTO “Janganlah membanggakan dan menyombongkan diri dari apa-apa yang kita peroleh, turut dan ikutilah ilmu padi makin berisi makin tunduk dan makin bersyukur kepada yang menciptakan kita Allah SWT.” (Hadits) “Man Jadda Wa Jadda” Barang siapa yang bersungguh-sungguh akan mendapatkannya (H.R. Bukhari dan Muslim) vi Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN MANGROVE Rhizophora mucronata DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO ABSTRAK Penelitian bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak tumbuhan mangrove R. mucronata dalam menghambat pertumbuhan bakteri A. hydrophila. Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi menggunakan 2 pelarut yaitu n-heksan dan metanol. Rancangan penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola Faktorial dengan tiga faktor yaitu organ tumbuhan mangrove R. mucronata (daun dan batang), strain bakteri A. hydrophila (GPl-04, GL-01, GL-02, GJ-01, GK-01 dan GB-01), dan konsentrasi ekstrak R. mucronata (0%,10%,20% dan 30%). Metode yang digunakan adalah metode eksperimen dengan 56 kali perlakuan dan 3 kali ulangan. Parameter yang diamati adalah diameter zona hambat yang dihasilkan oleh ekstrak batang dan daun tumbuhan mangrove R. mucronata. Analisis data yang digunakan adalah Analisis Non-Parametrik Kruskal-Wallis pada taraf kepercayaan 95%. Hasil analisis menunjukkan ekstrak n-heksan organ batang R. mucronata yang mempunyai pengaruh paling baik berdasarkan zona hambat yaitu pada konsentrasi 10% menghasilkan zona hambat sebesar 1,18 mm pada bakteri strain GL-02 dan organ daun yang mempunyai pengaruh paling baik berdasarkan zona hambat yaitu konsentrasi 30% menghasilkan zona hambat sebesar 0,73 mm bakteri strain GPI-04. Ekstrak metanol organ batang R. mucronata yang mempunyai pengaruh paling baik berdasarkan zona hambat yaitu pada konsentrasi 30% menghasilkan zona hambat sebesar 2,75 mm pada strain bakteri GJ-01, sedangkan organ daun yang mempunyai pengaruh paling baik berdasarkan zona hambat yaitu konsentrasi 30% sebesar 1,56 mm pada strain bakteri GB-01. Kata kunci : A. hydrophyla, mangrove, R. mucronata, zona hambat. vii Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 UCAPAN TERIMA KASIH Assalamu’alaikum Wr.Wb. Alhamdulilah, segala puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah menunjukan kuasanya dengan memberikan rahmat dan karuniaNya kepada pelulis, sehingga penulis dapat menyusun skripsi yang berjudul “PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN MANGROVE Rhizophora mucronata DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO“ sebagai syarat untuk memperoleh gelar keserjanaan S1. Terimakasih dengan setulustulusnya penulis sampaikan kepada ibu Dini Siswani Mulia, S.,Pi. M.Si selaku pembimbing I dan Drs. Heri Maryanto, M.Si selaku pembimbing II yang telah memberikan arahan dan bimbingannya dalam penyusunan skripsi ini. Penyusunan skripsi ini terwujud atas dukungan dan bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, pada kesempatan kali ini penulis mengucapkan terima kasih kepada: 1. Bapak Drs. Pudiyono, M.Hum, selaku dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto. 2. Bapak Drs. Arief Husin, M.Si, selaku Kepala Program Studi Pendidikan Biologi. 3. Dewan penguji skripsi Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto. 4. Seluruh Dosen Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah membimbing dan memberikan ilmunya kepada penulis selama perkuliahan. viii Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 5. Staf Laboratorium Program Studi Pendidikan Biologi dan Staf Labortorium Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. 6. Keluarga yang selalu mendukung dan memberi semangat dalam penelitian penulis, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi.. 7. Temen-temen satu proyek penelitian (icus, nyunyun, eri, berlian, akbar) yang selalu membantu menyelesaikan penelitian dan memberi dukungan. 8. Sahabat yang selalu mendampingi (putri, mufliah, lili, vika angelika, dan eri) yang selalu memberikan dukungan dan semangat dalam penulisan skripsi. 9. Seluruh teman-teman Pendidikan Biologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto angkatan 2012 yang selalu memotivasi dan memberikan masukan dalam perbaikan penulisan sekripsi. Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini masih terdapat banyak kekurangan bahkan jauh dari sempurna. Oleh karena itu, penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang bersifat membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Demikian, semoga dengan terselesaikannya skripsi ini berguna bagi para pembaca pada umumnya dan khususnya bagi penulis serta Program Studi Pendidikan Biologi. Wassalamu’alaikum wr.wb. Purwokerto, 21 Januari 2017 Penulis, ix Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 DAFTAR ISI Halaman UCAPAN TERIMA KASIH .................................................................................. vii DAFTAR ISI .......................................................................................................... ix DAFTAR TABEL .................................................................................................. xii DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. xiii DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... xiv BAB I PENDAHULUAN ................................................................................. 1 1.1 Latar Belakang................................................................................ 1 1.2 Rumusan Masalah .......................................................................... 4 1.3 Tujuan Penelitian ............................................................................ 5 1.4 Manfaat Penelitian .......................................................................... 5 TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................ 6 2.1 Deskripsi Mangrove ....................................................................... 6 2.2 Deskripsi Rhizophora mucronata ................................................... 6 2.2.1 Klasifikasi Rhizophora mucronata ..................................... 8 2.2.2 Tumbuhan Mangrove Rhizophora mucronata Sebagai Anti Bakteri ........................................................................ 9 2.3 Kandungan Metabolit Sekunder ..................................................... 9 2.3.1 Flavonoid ............................................................................ 9 2.3.2 Tanin ................................................................................... 10 2.3.3 Alkaloid .............................................................................. 10 2.3.4 Terpenoid ............................................................................ 10 2.4 Deskripsi Bakteri Aeromonas hydrophila ...................................... 11 2.4.1 Klasifikasi Aeromonas hydrophyla ....................................... 11 2.4.2 STRAIN Aeromonas hydrophila .......................................... 12 BAB III METODE PENELITIAN ...................................................................... 13 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ........................................................ 13 3.2 Alat dan Bahan Penelitian .............................................................. 13 BAB II x Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 3.2.1 Alat yang Digunakan dalam Penelitian ................................. 13 3.2.2 Bahan yang Digunakan dalam Penelitian .............................. 14 3.3 Rancangan Penelitian ..................................................................... 14 3.4 Cara Kerja ....................................................................................... 15 3.4.1 Pengumpulan dan Pembuatan Simplisia Tumbuhan Rhizophora mucronata ....................................................... 15 3.4.2 Pembuatan Ekstrak Rhizophora mucronata ....................... 15 3.4.3 Uji fitokimia menggunakan uji warna pada plat KLT ........ 16 3.4.4 Pembuatan Media Tumbuh Bakteri .................................... 17 3.4.5 Purifikasi Isolat Bakteri Aeromonas hydrophila ................ 18 3.4.6 Penentuan Jumlah Bakteri Uji (Aeromonas hydrophila) Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ............... 19 3.4.7 Pembuatan Konsentrasi Ekstrak Batang dan Daun Tumbuhan Mangrove Rhizophora mucronata .................... 20 3.4.8 Uji Daya Hambat ................................................................ 21 3.4.9 Parameter yang Diukur ....................................................... 22 3.5 Analisis Data .................................................................................. 22 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 23 4.1 Ekstraksi Batang dan Daun Rhizophora mucronata ...................... 23 4.1.1 Sampel batang dan daun R. mucronata berdasarkan Berat Basah dan Kering .................................................................. 23 4.1.2 Sampel Batang dan Daun R. Mucronata berdasarkan Bobot Simplisia dan Ekstrak ............................................................ 25 4.2 Uji Fitokimia Ekstrak Batang dan Daun Rhizophora mucronata Menggunakan Uji Warna Pada Plat KLT....................................... 26 4.2.1 Hasil uji warna pada plat KLT (Kromatografi Lapis Tipis) Ekstrak n-heksan ................................................................... 27 4.2.2 Hasil Uji Warna pada Plat KLT (Kromatografi Lapis Tipis) Ekstrak Metanol. .................................................................. 29 4.3 Purifikasi Bakteri Aeromonas hydrophila strain GPl-04, GL-01, GL-02, GJ-01, GK-01, dan GB-01 ................................................. 32 xi Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 4.4 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila Strain GPl-04, GL-01, GL-02, GJ-01, GK-01, dan GB-01....................... 33 4.5 Uji Daya Hambat Ekstrak Tumbuhan Mangrove Rhizophora mucronata dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophila strain GPl-04, GL-01, GL-02, GJ-01, GK-01, dan GB01 .................................................................................................... 36 BAB V SIMPULAN DAN SARAN................................................................... 42 5.1 Simpulan .......................................................................................... 42 5.2 Saran ................................................................................................ 42 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 43 LAMPIRAN ........................................................................................................... 46 xii Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 DAFTAR TABEL Halaman Table 4.1 Bahan Pembuatan Ekstrak Batang dan Daun R. Mucronata beserta Hasailnya ............................................................................................. 23 Table 4.2 Hasil Simplisia dan Ekstrak Batang dan Daun R. Mucronata ........... 25 Tabel 4.3 Hasil Uji Warna pada Plat KLT Ekstrak n-heksan ............................. 27 Tabel 4.4 Hasil Uji Warna pada Plat KLT Ekstrak metanol ............................... 29 Tabel 4.5 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GPl04, GL-01, GL-02, GJ-01, GK-01, dan GB-01 ................................... 33 Tabel 4.6 Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak n-heksan .......................................... 37 Tabel 4.7 Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Metanol ............................................ 40 xiii Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Tumbuhan Mangrove R. mucronata. A. Daun, B. Batang ................ 8 Gambar 4.1 Berat Basah dan Kering R. Mucronata : A. Daun R. Mucronata basah. B. Daun R. Mucronata kering, C. Batang R. Mucronata basah, D. Batang R. Mucronata kering ............................................. 24 Gambar 4.2 Hasil Simplisia dan Ekstrak R. Mucronata. A. Serbuk Simplisia R. Mucronata, B. Ekstrak R. Mucronata .............................................. 26 Gambar 4.3 Hasil Uji Warna pada Plat KLT Ekstrak n-heksan : A. Flavonoid Daun, B. Flavonoid Batang, C. Alkaloid Daun, D. Alkaloid Batang, E. Terpenoid Daun, F. Terpenoid Batang, G. Tanin Daun, H. Tanin Batang ............................................................................................... 28 Gambar 4.4 Hasil Uji Warna pada Plat KLT Ekstrak Metanol : A. Flavonoid Daun, B. Flavonoid Batang, C. Alkaloid Daun, D. Alkaloid Batang, E. Terpenoid Daun, F. Terpenoid Batang, G. Tanin Daun, H. Tanin Batang ............................................................................................... 31 Gambar 4.5 Hasil Purifikasi Isolat Bakteri A. hydrophila : A. Strain GB-01, B. Strain GK-01, C. Strain GPl-04, D. Strain GL-01, E. Strain GL-02, F. Strain GJ-01. ................................................................................ 32 Gambar 4.5 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GPl-04, GL-01, GL-02, GJ-01, GK-01, dan GB-01 dengan TPC.................. 35 xiv Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 Hasil perhitungan randemen ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove R. mucronata ................................................................. 47 Lampiran 2 Penghitungan koloni bakteri A. hydrophila dengan Merode TPC . 49 Lampiran 3 Gambar Koloni Bakteri A. hydrophila Strain GPl-04, GL-01, GL02, GJ-01, GK-01, dan GB-01 ....................................................... 52 54 Lampiran 4 Data Hasil Zona Hambat n-heksan dan Metanol ........................... Lampiran 5 Hasil Analisis SPSS Non-Parametrik Ekstrak Batang dan Daun Tumbuhan Mangrove R. mucronata .............................................. 68 Lampiran 6 Gambar Hasil Zona Hambat Ekstrak n-heksan daun dan batang Tumbuhan Mangrove R. mucronata. ............................................ 85 Lampiran 7 Gambar Hasil Zona Hambat Ekstrak Metanol Daun dan Batang Tumbuhan Mangrove R. mucronata .............................................. 89 Lampiran 8 Dokumentasi Penelitian ................................................................. xv Pengaruh Ekstrak Tumbuhan..., Ana Miftahul Janah, FKIP UMP, 2017