elektroforesis

advertisement
ELEKTROFORESIS
Digunakan untuk senyawa yang dapat
mengion
 Asam amino
 Peptida
 Asam nukleat, dsb
 Muatan + atau – (kation atau anion)
 Kation (+) bergerak ke arah katoda
 Anion (-) bergerak ke arah anoda
 Katoda dan anoda diletakkan dalam larutan
buffer
Prinsip
 Perbedaan imbangan muatan/massa atau
muatan/berat molekul
 Mempengaruhi perbedaan kecapatan
penyebaran
 Kecepatan gerak kation maupun anion
tergantung pada
 Kekuatan medan listrik
 Muatan ionnya
 Hambatan gesekan dan gaya elektrostatik dg
medium lingkungannya
Medium pendukung
 Lembaran kertas penyerap atau selulosa
asetat
 Lapis tipis silika atau alumina
 Jendalan gel pati, agar atau poliakrilamid
 Medium pendukung memiliki kapiler, shg tdk
mungkin ada gerakan balik
Faktor penentu gerak
 Sampel
 Muatan, gerak akan cepat apabila muatan
banyak, tingkat muatan biasanya dietntukan pH
 Ukuran, besar..gerak makin lambat
 Bentuk : fibrous beda dengan globular karena
perbedaan besarnya gesekan dan daya
elektrostatiknya
Faktor penentu gerak
 Medan listrik
 Voltase : …>> cepat
 Aliran listrik : meningkatkan muatan
 Tahanan : jarak antara elektroda semakin besar,
tahanan semakin besar
 Buffer: dapat melarutkan..penyebaran
besar..sulit dipisahkan
 Konsentrasi : >>> arus listrik terbawa buffer
>…gerakan lambat
 Medium pendukung: pemisahan agar
sempurna
Standar dalam EF
DNA terdiri :
gula deoksi
ribosa, basa
nitrogen,
fosfat
Basa N
Guanin,
sitosin, tiamin
, adenin
bp :base pair
Kuis
 Apa perbedaan prinsip analisis lipida : angka
penyabunan dan angka iod. Jelaskan
 Mengapa angka peroksida dapat digunakan
untuk uji kerusakan lemak?? Jelaskan
 Apa perbedaan eksitasi dan emisi. Gambar
skematis.
 Bagaimana hubungan antara absorbansi dan
transmitansi?
 Beri contoh perhitungan uji dengan spektrometri
 Apa beda kromatografi kolom dan lapis tipis??
Download