ISBN 978-602-294-065-4 PROSIDING SEMINAR NASIONAL BIOSAINS I Diterbitkan Oleh : Program Studi Magister Biologi Program Pascasarjana Universitas Udayana PROSIDING SEMINAR NASIONAL BIOSAINS I 2014 “Biodiversitas Sebagai Penunjang Ketahanan Pangan” Denpasar, 29 Desember 2014 Editor : Prof. Dr. Drs. I Ketut Junitha, MS Dr. Dra. Eniek Kriswiyanti, M.Si Dra. Ni Luh Watiniasih, M.Sc, Ph.D Ir. Made Pharmawati, M.Sc., Ph.D Ir. Ida Ayu Astarini, M.Sc., Ph.D Dr. Ir. Yenni Ciawi Diterbitkan Oleh : Universitas Udayana KATA PENGANTAR Puji syukur kami panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa, karena berkat rahmatNya kegiatan Seminar Nasional Biosains I dapat terselenggara dengan baik pada tanggal 29 Desember 2014, serta prosiding hasil seminar ini dapat tersusun dan diterbit sesuai rencana. Kegiatan seminar dengan tema“Biodiversitas sebagai Penunjang Ketahanan Pangan”, merupakan realisasi kerjasama yang telah dirintis oleh Program Magister Biologi dan Jurusan Biologi Universitas Udayana, dengan North Dakota State University, USA. Tema ini sangat relevan diangkat karena ketahanan pangan merupakan issue yang sangat penting dalam dua dekade terakhir. Pertambahan jumlah penduduk dunia yang sangat cepat yang tidak diimbangi oleh penambahan luasan lahan pertanian telah menyebabkan adanya gap yang sangat nyata antara produksi pangan dengan jumlah penduduk. Hal ini telah banyak menyebabkan bencana kelaparan di banyak belahan dunia. Untuk menanggulangi masalah kekurangan pangan ini, penganekaragaman sumber pangan yang bersumber dari darat dan laut menjadi issue yang sangat krusial, sehingga hasil–hasil penelitian terkait biodiversitas, terutama yang dapat dijadikan sebagai sumber pangan, sangat perlu didukung dan disebarluaskan, diantaranya melalui penerbitan prosiding seminar. Topik yang tercakup dalam prosiding ini adalah Biodiversitas dan Konservasi, Pangan dan Teknologi Pangan, Genetika dan Biomolekuler, Lingkungan, Biosistematik dan Evolusi, serta Kesehatan. Topik-topik yang disajikan dalam buku sederhana ini diharapkan dapat dipakai sebagai acuan dalam mengembangkan keanekaragaman pangan, sehingga masalah kekurangan pangan secara bertahap dapat diatasi. Pada kesempatan ini, Panitia ingin menyampaikan rasa apresiasi yang sangat tinggi kepada para peserta seminar, para penyaji makalah dan penyusun naskah, para tim editor dan reviewer, serta pihakpihak lain yang tidak dapat disebutkan satu persatu, karena atas kerjasamanya penerbitan prosiding ini dapat dilakukan. Semoga prosiding ini dapat memberi manfaat kepada masyarakat luas, terutama para pemerhati biodiversitas, mahasiswa, peneliti, pemerintah serta swasta yang memiliki rasa kepedulian terhadap biodiversitas. Sekali lagi, Terimakasih dan sampai jumpa pada Seminar Nasional Biosains II. Denpasar, 13 Agustus 2015 Ketua Panitia Penyelenggara Drs. Yan Ramona, M.App.Sc., Ph.D. i RINGKASAN Prosiding ini merupakan kumpulan naskah yang telah disajikan pada Seminar Nasional Biosains I yang diselenggarakan pada tanggal 29 Desember 2014, bertempat di Gedung Pascasarjana, Universitas Udayana, Jl. PB Sudirman, Denpasar, Bali. Seminar Nasional Biosains I ini mengangkat tema “Biodiversitas sebagai Penunjang Ketahanan Pangan”. Ada lima topik yang disajikan dalam prosiding ini, yaitu Biodiversitas dan Konservasi, Pangan dan Teknologi Pangan, Genetika dan Biomolekuler, Lingkungan, Biosistematik dan Evolusi, serta Kesehatan, dengan total 24 naskah. Semoga naskah dalam prosiding ini memberi manfaat baik kepada semua pihak yang memiliki perhatian pada keberlanjutan (sustainabilitas) biodiversitas di Indonesia serta manfaatnya dalam menunjang ketahanan pangan bagi umat manusia. Denpasar, 13 Agustus 2015 Tim Penyunting ii DAFTAR ISI KATA PENGANTAR .................................................................................................................................... i RINGKASAN ................................................................................................................................................. ii DAFTAR ISI .................................................................................................................................................. iii MODIFIKASI PATI TALAS KIMPUL DENGAN HEAT MOISTURE TREATMENT UNTUK MEMPERBAIKI KARAKTERISTIK SOHUN (STARCH NOODLE) ......................................................... Anak Agung Istri Sri Wiadnyani, I Wayan Rai Widarta ............................................................................. 1 1 VIABILITAS SERBUK SARI BUNGA TERATAI SUDAMALA (Nymphoides indica (L.) Kuntze, MENYANTHACEAE) DENGAN UJI WARNA, IN-VITRO DAN SQUASH KEPALA PUTIK ................. Gusti Ayu Nyoman Budiwati, Eniek Kriswiyanti, I Gusti Ayu Sugi Wahyuni ......................................... 12 12 KARAKTERISTIK DAN VIABILITAS SERBUK SARI RAGAM KELAPA (Cocos nucifera, L.) DI BALI ............................................................................................................................................................... Eniek Kriswiyanti ....................................................................................................................................... 20 20 TANGGAP TANAMAN KEDELAI TERHADAP PEMBERIAN EKSTRAK KRANDALIT, FRAKSI HUMAT, DAN MOLIBDENUM (Mo) PADA INCEPTISOLS PRAFI MANOKWARI .............................. Ishak Musaad, Dwiana Wasgito Purnomo, Murtiningrum, Yohanis Amus Mustamu ................................ 26 26 BIOASSAY EKSTRAK KASAR (CRUDE EXTRACT) DAUN BROTOWALI (Tinospora crispa (L) Miers) PADA BAKTERI GRAM POSITIF DAN BAKTERI GRAM NEGATIF ......................................... Ida Ayu Putu Suryanti ................................................................................................................................. 35 35 KARAKTER MORFOLOGI DAN TINGKAT PERTUMBUHAN ANAKAN SEBAGAI BUKTI TAKSONOMI PENDUKUNG VARIETAS Pandanus tectorius ASAL PULAU ROSWAR, TELUK WONDAMA, WEST PAPUA ........................................................................................................................ Nurhaidah I. Sinaga1, Martinus Iwanggin1, Cicilia M.E. Susanti1 ............................................................... 41 41 STRUKTUR ANATOMI AKAR, BATANG DAN DAUN SERTA PENYEBARAN STOMATA DAN TRIKOMATA PADA Monochoria vaginalis (Burm. F.) Presl ...................................................................... Ni Putu Adriani Astiti ................................................................................................................................. 48 48 PERKEMBANGAN STRUKTUR MORFOLOGI EMBRIO CENDANA (Santalum Album Linn.) DARI BUNGA MEKAR HINGGA TERBENTUKNYA BUAH MUDA ................................................................ Ni Putu Yuni Astriani Dewi1, Eniek Kriswiyanti1,2, Ni Nyoman Darsini2................................................... 55 55 DAYA HAMBAT EKSTRAK DAUN RAMBUTAN RAPIAH (Nephelium lappaceum L.) TERHADAP PERTUMBUHAN TANAMAN KUNYIT ..................................................................................................... Anak Agung Istri Mirah Dharmadewi1, Ni Putu Adriani Astiti 1, Luh Putu Wrasiati2 ................................ 64 64 PELAKSANAAN AWIG-AWIG FAKTOR KEBERHASILAN BIOLOGI KONSERVASI JALAK BALI (Leucopsar rothschildi Stresemann, 1912 ) DI KEPULAUAN NUSA PENIDA ........................................... Sudaryanto1, Cut Sugandawaty Djohan2, Satyawan Pudyatmoko3, Jusup Subagja2 .................................... 72 72 iii KONSERVASI HUTAN MANGROVE MELALUI DIVERSITAS PANGAN OLAHAN BUAH MANGROVE DI PESISIR KABUPATEN POHUWATO GORONTALO ................................................... Ramli Utina1,2, Jusna Ahmad1, Abubakar Sidik Katili1,2, Mustamin Ibrahim1, ............................................ 80 80 GAMBARAN HISTOLOGI HATI TIKUS (Rattus norvegivus) YANG DIINJEKSI WHITE VITAMIN C DOSIS TINGGI DALAM JANGKA WAKTU LAMA ............................................................................. Ni Wayan Sudatri, Iriani Setyawati, Ni MadeSuartini, Dwi Ariani Yulihastuti ........................................... 87 87 KERAGAMAN GENETIK DNA MIKROSATELIT BURUNG JALAK BALI (Leucopsar rothschildi) ..... I Wayan Rosiana, I Gede Widhiantara ........................................................................................................ 95 95 SEROPREVALENSI TUBERKULOSIS PADA SAPI BALI SEBAGAI LANGKAH AWAL MONITORING PENCEGAHAN PENYAKIT ZOONOSIS (NEW EMERGING DISEASE) DI PROVINSI BALI............................................................................................................................................ 101 Hapsari Mahatmi1, Nyoman Adi Suratma1, Nengah Kerta Besung1 Ketut Budiasa1, G.P. Widiarsa2 .......... 101 STUDI EPIDEMIOLOGI KOKSIDIOSIS PADA SAPI DI BALI ................................................................. 107 Nyoman Adi Suratma, Ida Bagus Made Oka, I Made Dwinata ................................................................... 107 POTENSI Lactobacillus rhamnosus SKG34 SEBAGAI STARTER YOGHURT DAN VIABILITASNYA SELAMA PENYIMPANAN .......................................................................................................................... 113 Komang Ayu Nocianitri1, I Nengah Sujaya2, Ni Nyoman Puspawati3 ........................................................ 113 EVALUASI SIFAT KIMIA DAN SENSORIS ROTI BUN YANG MEMANFAATKAN TEPUNG SUWEG (Amorphopallus campanulatus B1) SEBAGAI BAHAN PENSUBSTITUSI TERIGU .................. 122 I DP. Kartika Pratiwi*, Ni Made Indri Hapsari A., A.A.G.N. Anom Jambe ................................................ 122 POTENSI Streptomyces sp. DALAM MENGHAMBAT BAKTERI Klebsiella pneumoniae RESISTEN TERHADAP AMPISILIN .............................................................................................................................. 130 Kadek Desy Kartika1, Retno Kawuri2, Putra Dwija3 ................................................................................... 130 BIOREMEDIASI PERAIRAN TERCEMAR LIMBAH INDUSTRI PENCELUPAN DENGAN PEMANFAATAN TUMBUHAN AIR SECARA OPTIMAL ........................................................................ 138 Ni Made Susun Parwanayoni dan Ni Luh Suryani ...................................................................................... 138 DESKRIPSI PERBEDAAN JUMLAH INDIVIDU KEPITING MANGROVE, SPESIES Scylla serrata DAN Uca sp SERTA HUBUNGANNYA DENGAN FAKTOR LINGKUNGAN PADA EKOSISTEM MANGROVE DI DESA BULALO KECAMATAN KWANDANG KABUPATEN GORONTALO UTARA .......................................................................................................................................................... 145 Abubakar Sidik Katili 1,2), Ramli Utina 2,2), Chairunnisah J.Lamangantjo3,2) .............................................. 145 ASOSIASI MAKROZOOBENTOS PADA PADANG LAMUN DI PANTAI MERTA SARI DAN SINDHU, SANUR-BALI ............................................................................................................................... 153 Gede Surya Indrawan1, Deny Suhernawan Yusup1, Devi Ulinuha2............................................................. 153 iv MODIFIKASI PATI TALAS KIMPUL DENGAN HEAT MOISTURE TREATMENT UNTUK MEMPERBAIKI KARAKTERISTIK SOHUN (STARCH NOODLE) MODIFICATION OF COCOYAM STARCH WITH HEAT MOISTURE TREATMENT TO IMPROVE CHARACTERISTICS OF STARCH NOODLE Anak Agung Istri Sri Wiadnyani, I Wayan Rai Widarta Jurusan Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Udayana Email: [email protected] INTISARI Pati talas kimpul alami memiliki stabilitas tekstur yang kurang kokoh, memiliki profil pasta pati dengan viskositas puncak yang tinggi diikuti dengan viskositas breakdown yang tinggi dan viskositas pasta dingin yang rendah. Perlakuan HMT (Heat Moisture Treatment) diharapkan penggunaan pati talas kimpul dapat ditingkatkan. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari pengaruh perlakuan HMT terhadapat pati talas kimpul dan mengetahui karakteritik pati talas kimpul termodifikasi yang nantinya diaplikasikan pada pembuatan sohun. Talas kimpul diekstraksi, selanjutnya diberi perlakuan HMT yang dikondisikan pada kadar air 30%, suhu 110 OC dengan variasi waktu pmanasan 0, 4,8 dan 10 jam. Pati talas kimpul alami dan pati HMT dianalisis meliputi kadar air, kadar amilosa dan sifat amilografinya. Pati HMT yng menunjukkan hasil terbaik digunakan untuk pembuatan sohun dan dilakukan pengamatan sifat noodlenya secara visual. Hasil penelitian menunjukkan perlakuan terbaik hasil modifikasi adalah perlakuan HMT 4 jam dengan analisis meliputi kadar air 10,26%, kadar amilosa 28,91% serta tidak memiliki puncak viskositas tapi peningkatan viskositas terus terjadi selama pemanasan hingga akhir pendinginan sebesar 6200cp. Kata kunci: pati, talas kimpul, heat moisture treatment, sohun ABSTRACT A native cocoyam starch has a softer textural stability, has starch paste profile with high peak viscosity followed by a high breakdown viscosity and low cold paste viscosity. Treated with (HMT) heat moisture treatment, is expected to improve the application of cocoyam starch. The study aimed to observe the effect of different heat moisture treatment on the characteristic of cocoyam starch and also to know the best modified starch for application starch noodle preparation. Cocoyam starch extracted, then treated with HMT was adjusted at restrict water content 30%, temperature 110OC for different time 0,4,8 and 16 hours. Native and treated starch were analysed for the water content, amilosa content and amilograph profile. HMT which showed the best performance, were made into starch noodle and evaluated the properties with visual. The result showed the best treatment of modificatiom was HMT treated 4 hours with analysis results include water content 10.26%, amilose content 28.91% and no pasting peak but rather a high viscosity which remains constantor increases during cooling. Keywords: starch, cocoyam, heat moisture treatment, starch noodle 1 PENDAHULUAN Ketahanan pangan menjadi masalah pokok yang dihadapi bangsa ini. Untuk mengatasi masalah tersebut pemerintah melaksanakan beberapa program dan kebijakan yang bertujuan untuk mewujudkan ketaha nan pangan nasional salah satunya adalah dengan penganekaragaman pangan (diversifikasi pangan). Program ini ditujukan untuk meningkatkan produksi pangan pokok alternatif sumber karbohidrat selain beras adalah dengan menggunakan komoditas lain yang dapat diperoleh secara lokal dengan harga murah. Salah satu tanaman sumber karbohidrat yang berpotensi besar untuk dikembangkan adalah talas kimpul. Talas kimpul (Xanthosoma sagittifolium) atau yang dikenal di Bali dengan keladi merupakan jenis umbi-umbian dan salah satu komoditas pertanian yang memiliki peranan yang cukup strategis tidak hanya sebagai sumber pangan dan bahan baku industri tetapi juga pakan ternak. Produk pangan yang dibuat menggunakan bahan baku talas kimpul sangat jarang ditemui. Talas kimpul umumnya diolah hanya dengan jalan direbus saja oleh masyarakat, sehingga kurang mempunyai nilai ekonomis. Pola konsumsi masyarakat dipengaruhi oleh perubahan gaya hidup saat ini menjadi isu yang sangat penting. Makanan selain nasi kian digemari sepert roti, mie, bihun, kwetiau dan sohun karena kandungan karbohidratnya yang cukup tinggi menjadi pilihan pengganti bahan makanan pokok beras. Pada umumnya pati talas kimpul memiliki sifat inferior untuk diproduksi menjadi sohun (starch noodle). Sohun atau soun (suun) adalah produk makanan sejenis bihun atau mie halus yang dibuat dari pati (Anon., 2012a). Dibanding jenis mie dan bihun, sohun lebih liat dan tidak mudah putus. Sohun dijual dalam keadaan kering dan terlipat setelah direbus atau direndam, sohun berwarna bening, bertekstur kenyal, dan memiliki permukaan yang licin. Kualitas sohun banyak dipengaruhi oleh pati sebagai bahan dasarnya. Menurut Lii and Chang (1991) di Cina, pati yang ideal untuk bahan dasar pengolahan sohun harus mempunyai kadar amilosa yang tinggi seperti pati kacang hijau sebesar 33%, sedangkan pati talas mengandung amilosa sebesar 20-25% (Setyowati et al., 2007). Pati alami memiliki stabilitas tekstur yang baik, namun memiliki keterbatasan saat pemanasan dan cenderung mudah teretrogradasi, sehingga memiliki keterbatasan penggunaanya di dalam industri. Modifikasi pati adalah cara mengubah struktur dan mempengaruhi ikatan hydrogen dengan cara terkontrol untuk meningkatkan dan memperluas kegunaannya. Modifikasi pati diharapkan dapat memperbaiki sifat fisik, kimia dan fungsional dari pati alami. Salah satu cara modifikasi pati yang dapat dilakukan untuk mengubah sifat-sifat pati adalah dengan cara Heat Moisture Treatment (HMT). Perlakuan HMT pada pati didefenisikan sebagai modifikasi pati secara fisik dengan mengkombinasikan antara kadar air dan panas yang akan merubah sifat-sifat pati. HMT dilakukan pada suhu diatas suhu gelatinisasi (80-120OC) dan dengan kadar air kurang dari 35% (Stute, 1992). Modifikasi pati secara fisikawi ini juga dianggap lebih alami dan aman dibandingkan dengan memodifikasi pati dengan cara kimiawi. Modifikasi pati secara HMT relatif aman dan sederhana untuk dilakukan, karena modifikasi ini tidak menggunakan bahan kimiawi dalam melakukan modifikasi sehingga sangat cocok dilakukan untuk pati yang akan digunakan dalam bahan pangan. Oleh karena itu pada penelitian ini bertujuan untuk mengetahui karakterisasi pati alami dan pati talas kimpul termodifikasi HMT yang kemudian akan digunakan untuk melihat seberapa besar pengaruh HMT terhadap sifat fungsional pati yang diaplikasikan dalam pembuatan sohun (starch noodle). 2 MATERI DAN METODE Tempat dan Waktu Penelitian akan dilakukan di Laboratorium Analisa Hasil Pangan, Laboratorium Biokimia dan Nutrisi Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Udayana Bali, Laboratorium Balai Besar Tanaman Padi, Sukamandi, Subang, Jawa Barat. Waktu penelitian dilakukan mulai bulan Juli - Desember 2012. Bahan Penelitian Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah talas dari perkebunan petani, aquades, HCL 25 %, NaOH 1%, Etanol 95%, Asam asetat, larutan Iod 2% dan bahan kimia untuk analisis. Alat Penelitian Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah mixer, oven, plastik, pengemas vakum, ayakan 100 mesh, propipet, gelas ukur, pipet, loyang, kompor, panci, pencetak sohun, timbangan, pengaduk mekanik atau manual, kabinet dyer, pisau, desikator, blender, spektrofotometer, perajang mekanis, waterbath, Brabender Amylograph, Teksture analyzer serta alat-alat analisis lainnya. Prosedur Penelitian Penelitian ini terdiri dari 3 tahap yakni ekstraksi pati talas, selanjutnya modifikasi pati talas dengan HMT dan pembuatan sohun (starch noodle). Pada penelitian ini diawali dengan mengekstraksi pati talas dengan menggunakan metode Collado and Corke (1997). Pati talas alami yang telah diekstraksi dianalisis rendemennya. Tahap selanjutnya adalah pembuatan pati HMT menggunakan metode (Collado et al., 2001) yang dimodifikasi. Pati alami dan pati HMT kemudian dianalisis meliputi kadar air, kadar amilosa dan amilografi pati. Kemudian perlakuan HMT terbaik diaplikasikan dalam pembuatan starch noodle yang dibandingkan dengan pati alami (Gambar 1). 3 Gambar 1. Diagram alir jalannya penelitian Tahap 1. Ekstraksi Pati Talas Pati talas diekstraksi dengan tahapan sebagai berikut : talas dicuci dan dikupas, lalu diparut. Hasil parutan talas kemudian diekstraksi dengan perbandingan air dan bahan 1: 1 dan dilakukan penyaringan dengan menggunakan ka i n s a r i n g diperoleh filtrat 1. Ampas yang diperoleh, kemudian dicampurkan lagi dengan air dengan perbandingan air dan ampas 1: 0,5 dan dilakukan penyaringan hingga diperoleh filtrat 2. Filtrat 1 dan 2 dicampur, kemudian dilakukan pengendapan selama 6 jam, dan setiap 3 jam dilakukan penggantian air. Air dan endapan kemudian dipisah dan endapan yang diperoleh disebut pati basah. Pati basah kemudian dikeringkan dengan menggunakan oven pengering selama 24 jam pada suhu 50ºC, hingga diperoleh pati kering. Pati kering selanjutnya digiling dan diayak dengan menggunakan ayakan ukuran 100 mesh, dan diperoleh pati dalam bentuk tepung. Pati yang diperoleh disimpan dalam wadah yang tertutup rapat. 4 Tahap 2. Heat Moisture Treatment Modifikasi pati dengan HMT dilakukan dengan metode Collado et al. (2001) yang dimodifikasi. Cara modifikasi pati dengan HMT adalah sebagai berikut : Pati alami yang digunakan diatur kadar airnya menjadi 30%, kemudian disimpan pada suhu 4°C selama 24 jam. Lalu dilakukan pemanasan dengan menggunakan oven pada suhu 110°C dengan perlakuan lama pemanasan HMT 4 jam, 8 jam dan 16 jam. Pati kemudian langsung didinginan untuk mencegah gelatinisasi lebih lanjut, dan dilakukan pengeringan pada suhu 50°C selama 4 jam. Pati HMT kemudian didinginkan pada suhu kamar selama 1 jam. Lalu pati dikemas dan dianalisis. Analisis yang dilakukan meliputi kadar air (AOAC,1994), kadarar amilosa (AOAC, 1994), dan amilografi pati. Tahap 3. Pembuatan Sohun (Starch noodle) Metode pembuatan bihun instan mengacu pada Collado et al.(2001): Purwani et.al (2006) yang dimodifikasi. Pembuatan bihun instan terdiri atas beberapa tahap, meliputi pembuatan binder adonan, pembuatan adonan, pencetakan bihun, pengukusan, dan pengeringan. Tingkat substitusi pati modifikasi HMT yang digunakan adalah 50% terhadap pati talas alami. Produksi sohun diawali dengan pembentukan binder (perekat). Pembentuan binder dilakukan dengan mengelatinisasi sebagian pati (10%) yang akan digunakan dalam pembuatan adonan sohun dengan menambahkan air dengan perbandingan (1 : 7 b/v). Pati yang digunakan sebagai binder adalah pati talas alami mengingat pati talas termodifikasi memiliki daya rekat yang lebih rendah. Selanjutnya suspensi pati dipanaskan selama 5 menit atau hingga mengental yaitu mempunyai penampakan yang transparan. Pati yang telah mengental atau tergelatinisasi seluruhnya digunakan sebagai binder. Sisa Pati talas campuran antara pati talas alami dengan pati HMT (90%) dicampur dengan binder. Campuran diaduk dan diadon hingga merata. Adonan yang sempurna terbentuk ketika pati kering telah tercampur merata dan terikat oleh binder sehingga dapat menyatu saat digenggam. Selanjutnya adonan dicetak pada mesin pencetak mie dan dilanjutkan dengan proses pengukusan yang berlangsung selama 4 menit. Sohun dikukus selama 2 menit kemudian dikeluarkan untuk dibalikkan susunannya. Selanjutnya sohun dikukus kembali selama 2 menit. Rancangan Penelitian Pada penelitian ini digunakan Rancangan Acak k e l o m p o k untuk analisis kadar amilosa dan kadar air pati HMT yang dibandingkan dengan pati alami. Analisis variabel dilakukan untuk mengetahui pengaruh perlakuan HMT terhadap sifat amilografi pati (suhu gelatinisasi, puncak viskositas, trough, breakdown, setback, dan viskositas akhir) menggunakan ANOVA. Apabila pengaruhnya signifikan (P<0,05) maka dilanjutkan dengan uji Duncan Multiple Range Test (DMRT). Perlakuan lama HMT: T1 : 4 jam, T2 : 8 jam, T3 : 16 jam Perlakuan diulang 3 kali sehingga didapat 12 unit percobaan. Masing-masing ulangan dilakukan analisis sesuai dengan parameter yang diamati yang selanjutnya dibandingkan dengan kontrol. 5 HASIL Rendemen Pati Tabel 1. Rendemen Pati Talas Alami No Jenis Pati Rendemen (%) 1 Pati Alami 19.21 Kadar Air Tabel 2. Kadar Air Pati Tanpa Modifikasi dan Pati Modifikasi HMT No Perlakuan Kadar Air b/b (%) 1 T0 11,73 (a) 2 T1 10,26 (b) 3 T2 9,65 (b) 4 T3 8,87 (c) Ket : Huruf yang sama menunjukkan bahwa kadar air tidak berbeda nyata pada tingkat kepercayaan 95%. Kadar Amilosa Tabel 3. Kadar Amilosa pati Tanpa Modifikasi dan Pati Modifikasi HMT No Perlakuan Kadar Amilosa (%) 1 T0 28,17 (b ) 2 T1 28,91 (a) 3 T2 28,77 (a) 4 T3 28,37 (ab) Ket : Huruf yang sama menunjukkan bahwa kadar amilosa tidak berbeda nyata pada tingkat kepercayaan 95%. 6 VISKOSITAS (Cp) 7000 100 90 6000 80 5000 70 60 4000 T0 T1 50 T2 3000 40 30 2000 20 1000 T3 SUHU 10 0 0 0 5 10 15 20 25 30 35 40 T (MENIT) Amilografi Gambar 2. Kurva amilografi Pati talas Kimpul Modifikasi Tabel 4. Profil Pasta Pati Talas alami dan Pati Modifikasi HMT Perlakuan Karakteristik T0 T1 T2 T3 Suhu awal gelatinisasi (OC) 71.23 78.57 82.70 79.83 O 93.40 ND ND ND Viskositas puncak (Cp) 3312.50 ND ND ND Viskositas pasta panas (Cp) 3112.50 ND ND ND Viskositas pasta dingin (Cp) 4879.17 6200.00 3975.00 5179.17 Viskositas breakdown (Cp) 200.00 ND ND ND Viskositas set back (Cp) 1766.67 ND ND ND Suhu puncak gelatinisasi ( C) 7 Sohun (Strach Noodle) Tabel 5. Pengamatan visual sohun pati talas alami dan HMT 4 jam Perlakuan Pengamatan visual Pencetakan Sohun alami Sohun HMT 4 jam Pengukusan untaian sohun mudah putus bila ditarik mudah putus tekstur rapuh tergelatinisasi kurang sempurna warna lebih putih Ukuran sohun kurang mengembang Untaian sohun tidak mudah putus bila ditarik liat dan tidak mudah putus tekstur lebih kokoh tergelatinisasi sempurna warna agak putih/sedikit lebih buram Ukuran sohun mengembang PEMBAHASAN Rendemen Pati Rendemen pati adalah perbandingan antara berat pati yang diperoleh dari hasil ekstraksi dengan berat bahan dasarnya. Rendemen pati secara langsung tidak mempengaruhi mutu produk pati namun memiliki dampak pada aspek ekonomi pengolahan pati talas, karena rendemen yang tinggi akan lebih menguntungkan produsen pati talas. Pada Tabel 1 dapat dilihat bahwa rendemen pati talas sebesar 19,21%. Perbedaan kadar rendemen pati talas bisa disebabkan oleh perbedaan varietas, usia tanam, dan proses ekstraksi, dimana proses ekstraksi pati yang optimal akan menghasilkan rendemen pati talas yang tinggi. Semakin tinggi kandungan pati talas segar diharapkan semakin tinggi rendemen pati yang dapat diekstrak dari tal as Kadar Air Kadar air bahan pangan erat kaitannya dengan umur simpan bahan pangan tersebut, semakin rendah kadar air dalam bahan pangan maka akan semakin lama bahan tersebut dapat disimpan dan tentunya akan lebih aman dari kemungkinan kerusakan akibat kontaminasi dari lingkungan sekitarnya, misalnya dari mikroorganisme. Hasil pengamatan erhadap kadar air pati talas alami dan pati talas modifikasi HMT yang dihasilkan setelah dianalisis dapat dilihat pada Tabel 2. Data Tabel 2 menunjukkan bahwa perbedaan lama pemanasan perlakuan HMT berpengaruh nyata terhadap kadar air pati talas yang dihasilkan. Kadar air tertinggi sebesar 11,73% pada perlakuan T0 (pati alami). Sedangkan kadar air terendah pada perlakuan HMT 16 jam. Kadar air pati HMT berkisar 8,87% sampai dengan 10,26%. Makin lama waktu HMT kadar air yang dihasilkan makin rendah, dikarenakan semakin lamanya waktu pemanasan air pada bahan akan menguap lebih banyak. Kadar air pati talas yang diperoleh pada penelitian ini relatif sama dengan kadar air beberapa jenis umbi yang lain seperti ubi jalar pada penelitian yang dilaporkan Chen (2003) yaitu berkisar antara 8,6% sampai dengan 9,4%. Lama pemanasan dan banyaknya air yang terikat pada granula pati sangat mempengaruhi kadar air pada pati. 8 Kadar Amilosa Data pada Tabel 3 menunjukkan bahwa perlakuan HMT selama 4 jam (T1) memiliki kadar amilosa tertinggi yaitu 28,.91% yang tidak berbeda nyata dengan perlakuan HMT 8 jam (T2) dan 16 jam (T3). Sedangkan kadar amilosa terendah adalah perlakuan pati alami 0 jam (TO) sebesar 28,17% yang tidak berbeda nyata dengan perlakuan HMT 16 jam (T3). Perbedaan lama waktu HMT berpengaruh nyata terhadap kadar amilosa pati talas. Kadar amilosa pati talas alami dan hasil modifikasi HMT pada penelitian ini berkisar 28% lebih tinggi dibandingkan dengan penelitian (Setyowati et al., 2007) mengandung amilosa sebesar 20-25%. Kadar amilosa merupakan salah satu faktor penting yang mempengaruhi sifat pasting dan retrogradasi pati. Kadar amilosa yang cenderung mengalami sedikit peningkatan dengan makin lamanya waktu pemanasan. Keadaan ini diduga terjadi karena pada saat melakukan modifikasi dengan HMT, molekul amilopektin mengalami degradasi pada rantai eksteriornya yang menyebabkan penurunan jumlah molekul besar, tetapi menaikan jumlah molekul kecil. Rantai eksterior hasil degradasi tersebut merupakan rantairantai linier dan berbentuk helix ganda, sehingga dapat dikatakan menyerupai molekul amilosa dan mampu melakukan pengikatan dengan molekul amilosa melalui ikatan hydrogen (Lu et al., 1996). Amilografi Pati Setiap pati dari berbagai jenis tanaman memiliki sifat gelatinisasi yang berbeda. Hasil pengamatan terhadap hasil pengukuran pasta pati dan sifat amilografi yang dihasilkan dapat dilihat pada Gambar 2 dan profil pasta pati talas alami dan pati modifikasi pada pe rl akua n l am a HMT yang berbeda dapat dilihat pada table 4. Data pada Tabel 4 menunjukkan bahwa perbedaan lama HMT memberikan pengaruh nyata terhadap suhu gelatinisasi pati alami dan pati modifikasi HMT yang cenderung mengalami peningkatan dengan semakin lamanya waktu HMT (Gambar 2). Suhu gelatinisasi terendah adalah pada pati talas alami sebesar 71,.23 OC dan tertinggi adalah perlakuan HMT 8 jam (T2) sebesar 82,70OC. Diduga bahwa proses HMT menyebabkan meningkatnya kristalinitas pati karena adanya perubahan dari struktur granula pati. kokohnya ikatan intramolekul pati karena HMT membuat pati membutuhkan panas yang lebih besar untuk memecah struktur pati dan pembentukan pasta terjadi. Keadaan ini menggambarkan bahwa pati HMT mempunyai kestabilan yang tinggi terhadap panas (Lii et al., 1995) Hasil penelitian ini sama dengan hasil penelitian yang telah dilaporkan oleh Collado and Corke (1999); Collado et al., 2001; Sigh et al. (2005); tsakama et al., 2011 pada pati ubi jalar, serta penelitian Pukkahuta et al. (2008) pada pati jagung. Pati alami memiliki viskositas puncak 3312.50 Cp, viskositas pasta panas 3112,50 Cp, viskositas pasta dingin 4879.17 Cp, breakdown 200 Cp, set back 1766.67 Cp. Suhu gelatinisasi yang tinggi, puncak viskositas yang menandakan pengembangan granula pati yang terbatas dan nilai breakdown rendah meggambarkan kestabilan granula pati yang rendah, serta nilai setback dan Viskositas akhir gelatinisasi yang tinggi, menggambarkan pati talas alami memiliki pola amilografi tipe B (puncak pasta lebih rendah dan pengenceran yang tidak terlalu besar selama pemanasan) sehingga penelitian tersebut berhasil mengubah pasta pati talas alami yang memiliki pasta pati tipe B dengan modifikasi HMT menjadi pasta pati tipe C. Hal ini sejalan dengan penelitian (Collado et al., 2001); Tsakama et al., 2011) pada pati ubi jalar dan Jiranuntakul et al., 2011) pada pati beras dan jagung yang mengubah pasta pati tipe A menjadi tipe C. 9 Sohun (Strach Noodle) Pengamatan sohun dilakukan secara visual pada pati alami dibandingkan dengan pati modifikasi HMT terbaik yaitu pada perlakuan HMT 4 jam (T1) dikarenakan pati HMT 4 jam memiki pola amilografi tipe C sehingga sesuai untuk karakteristik dijadikan sohun yaitu tidak memiliki viskositas puncak tetapi lebih menunjukkan pada pembentukan viskositas yang sangat tinggi dan tetap konstan selama pemanasan bahkan sampai pendinginan (Chen et al., 2003; Purwani et al., 2006). Bila dibandingkan dengan perlakuan T2 (8 jam) dan T3 (16jam) yang juga memiliki pola amilografi tipe C, viskositas pati HMT (T1) memiliki viskositas yang lebih tinggi sampai pada pendinginan (retrogradasi) suhu 50 OC. Pengamatan terhadap lembaran sohun dilakukan setelah pencetakan adonan sohun dan juga setelah pengukusan. Pengamatan sohun alami dan sohun modifikasi HMT dapat dilihat pada Tabel 5. Bila dilihat pada table 5, baik pada pencetakan ataupun pada pengukusan pati alami memiliki tekstur yang lebih rapuh dan mudah putus dibandingkan dengan pati modifikasi HMT. Demikian pula bila dilakukan pengukusan dengan waktu yang sama. SIMPULAN Pati HMT terbaik adalah lama HMT 4 jam yang dilihat dari pofil dan kurva amilografinya dikarenakan perlakuan HMT 4 jam tidak memiliki viskositas puncak tetapi lebih menunjukkan pada pembentukan viskositas yang sangat tinggi dan tetap konstan selama pemanasan bahkan sampai pendinginan (profil pasta tipe C). Sohun yang dibuat dari pati HMT 4 jam memiliki tekstur yang lebih kokoh dan untaian sohun tidak mudah putus pada saat pencetakan. Demikian pula pada saat pengukusan pati talas HMT memiliki tekstur yang lebih liat, tergelatinisasi dengan sempurna serta ukurannya lebih mengembang dibandingkan pati talas alami. KEPUSTAKAAN Anonim, 2012a. Sohun. http://id.wikipedia.org/wiki/Sohun. Diakses 13 Februari 2012. AOAC, 1984. Official Methodes of Analysis of the Association of Analytical Chemist. 14th ed. AOAC Inc. Arlington. Virginia Chen, Z., 2003. Physicochemical Properties of Sweet Potato Starches and their Application in Noodle Products. Dissertation of Wageningen University, Netherland Collado, L.S and Corke, H., 1997. Properties of starch noodles as effected by sweet potato genotype. Cereal Chemist ry, 74 (2), 182-187 Collado, L.S and Corke, H., 1999. Heat moisture treatment effect on Sweet Potato starches differing in amylose content. Food Chemistry, 65, 339-346 Collado, L.S., Mabesa, L.B., Oates C.G., and Corke, H., 2001. Bihon-type noodles from heat moisture treated S weet Potato starch. J. Food Science, 66 (4), 604-609 Gunaratne, A., and Hoover, R. 2002. Effect of heat moisture treatment on the structure and phys icochemical properties of tuber and root starches. Carbohydrate Polymers, 49, 425-437 Hoover, R., 2001. Composition, molecular structure, and p hysicochemical properties of tuber and root starch : Review. Carbohydrate Polymers, 45: 253-267 Hoover, R. and Vasanthan, T. 1994. Effect of heat moisture treatment on structure and physicochemical properties of cereal, legume and tuber starches. Carbohydrate Research, 252: 33-53 10 Lii, C.Y., and Chang, Y.H., 1981. Characterization of Red Bean (Phaseolus radiatus Var. aurea) starch and its noodle q uality. J. Food Science, 46: 78-81 Lii, C.Y., Tsai, M.L. and Tsang, K.H. 1995. Effect of amylose content of rheological of rice starch. Cereal Chemistry, 73: 415-420. Lu, S., C.Y.Chen and C.Y.Lii. 1996. Gel Chromatography fractintion and Thermal Characterizatin of Rice Starch Affected by Hydrothermal Treatment. Cereal Chemestry, 73:5-11. Pukkuhuta, C., Suwannawat, B., Shobsngob, S and Varavinit, S. 2008. Comparative Study of Pasting and Thermal Transition characteristic of Osmotic Pressure and Heat Moisture Treated Corn Starch. CCabohydrat Polymer, 72:527-536. Purwani, E.Y., Widaningrum, R., Thahir, and Muslich, 2006. Effect of heat moisture treatment of Sago starch on its noodle q uality. Indonesia Journal of Agricultural Science, 7 (1): 8-1 4 Sajilata, M.G., Singhal, R.S., and Kulkarni, P.R., 2006. Resistant starch-a review.J. Food Science and Food Safety, 6: 1-17 Singh, S., Raina, C.S., Bawa, A.S. and Saxena, D.C. 2005. Effect of heat moisture treatment and acid modification on rheological, textural and differential scanning calorimetry characteristics of sweet potato starch. Journal of Food Science, 70 (6): 373-378 Stute, R. 1992. Hydrothermal modification of starches: the d ifference between anneling and heat moisture treatment. Starch, 6:205-214 Tran, U.T., Okadome, H., Murata, M., Homma, S. and Ohtsubo, K. 2001. Comparisson of vietnamese and japanese rice cultivars in terms of physicochemical properties. Journal Food Science and Technology Research, 7:323-330 11 VIABILITAS SERBUK SARI BUNGA TERATAI SUDAMALA (Nymphoides indica (L.) Kuntze, MENYANTHACEAE) DENGAN UJI WARNA, IN-VITRO DAN SQUASH KEPALA PUTIK VIABILITY OF SUDAMALA’S LOTUS POLLEN (Nymphoides indica (L.) Kuntze, MENYANTHACEAE) BASED ON COLOR TEST, IN-VITRO AND STIGMA’S SQUASH. Gusti Ayu Nyoman Budiwati, Eniek Kriswiyanti, I Gusti Ayu Sugi Wahyuni Program Studi Magister Biologi, Universitas Udayana Email: [email protected] INTISARI Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan berkecambah (viabilitas) serbuk sari teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) dengan uji warna, in-vitro dan squash kepala putik. Sampel serbuk sari diambil dari 10 bunga (5 individu) dari bunga sebelum mekar, baru mekar dan setelah mekar, tempat pengambilan sampel di Danau Beratan Desa Candi Kuning, Kecamatan Baturiti, Kabupaten Tabanan. Metode: uji warna aniline blue dalam laktofenol, in vitro 0,8% agar dalam 30% larutan gula dan squash kepala putik menggunakan fiksatif Farmer dan pewarnaan 1 % aniline blue. Hasil penelitian menunjukkan bahwa tipe bentuk serbuk sari teratai Sudamala: bulat, minuta, prolate spheroidal. Persentase viabilitas serbuk sari tertinggi pada uji warna ± 100% dari bunga sebelum mekar, mekar dan setelah mekar, paling rendah pada uji in - vitro yaitu dari bunga sebelum mekar ± 0%, baru mekar ± 1,1% (0-9,40%) dan setelah mekar ± 5,61% (0-21,56%) sedangkan pada squash kepala putik dari bunga sebelum mekar ± 0%, mekar ± 14,44 (0-85,71%), dan setelah mekar ± 84,96% (70,9392,45%). Kata kunci: serbuk sari, uji viabilitas, Nymphoides indica ABSTRACT The purpose of this research was to determine the viability of Sudamala’s lotus pollen germination by colortest, in-vitro and stigma’s squash. Flowersare usedrespectively- each 10 (5 individual) of before anthesis, anthesis and after anthesis, samples were taken from Candi Kuning village, Lake Beratan, Baturiti, Tabanan. The methods: aniline blue’s color test in laktofenol, in-vitro 0,8% jellyin 30% sugar and stigma’s squash use fixative Farmer. The results showedthe type of pollen forms from Lotus Sudamalawere: circular,prolate spheroidalminuta and ruga. The percentage of pollen’s viability from before anthesis, anthesis and after anthesis by color test, showed a very high viability is ± 100%. In – vitro test before anthesis showed the pollen’s viability was ± 0%, anthesis ± 1,10% (0-9,40%) and after anthesis ± 5,61% (0-21,56%). Stigma’s squash method showed before anthesis was ± 0%, anthesis ± 14,44 % (0-85,71%), and after anthesis ± 84,96% (70,93-92,45%). Keywords: pollen, viability test, Nymphoides indica 12 PENDAHULUAN Di Indonesia telah ditemukan tiga spesies tanaman teratai yaitu Nympheae pubescens, N. stellata, N. nouchali (Steenis dkk., 2005). Di Bali, khususnya di daerah Gianyar, berdasarkan hasil penelitian pendahuluan ditemukan beberapa jenis teratai berdasarkan warna bunga yaitu teratai Sudamala (Nymphoides indica), teratai Kuning, teratai Biru Tua (Nymphaea stellata Wild), teratai Merah Muda, teratai Ungu Tua, teratai Ungu Muda, teratai Putih (Nymphaea nouchali Burm f.), teratai Biru Muda (Nymphaea stellata Wild), teratai Tutur, teratai Dedari dan teratai Brumbun. Diantara teratai tersebut yang paling menarik dan langka adalah teratai Sudamala (Budiwati, 2014). Menurut masyarakat di Bali, teratai Sudamala (Nymphoides indica) digolongkan ke dalam keluarga teratai – terataian tetapi hasil penelusuran pustaka teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) tidak tergolong ke dalam keluarga teratai. Tetapi termasuk familia Menyanthaceae yang merupakan tanaman bisah air (Marwat et al, 2009). Tanaman ini hidup menahun, memiliki akar geragih yang pendek, batang berbentuk silindris, daun berbentuk bulat (orbicularis), berbunga banyak dengan mahkota berukuran kecil berbulu halus, berwarna kuning dan ada yang berwarna putih, pada corolla, bagian pusatnya berwarna kuning (Marwat et al, 2009). Pada umumnya tanaman ini merupakan tanaman kosmopolitan dengan distribusi yang luas, namun akibat adanya eutrofikasi dan reklamasi lahan menyebabkan tanaman ini terancam punah (Ornduff, 1966). Hal ini sesuai dengan pernyataan Shibayama and Yasuro (2003) yang menyebutkan bahwa Nymphoides indica (L.) Kuntze merupakan tanaman yang terancam punah. Tanaman ini di Bali ditanam sebagai tanaman hias dan sebagai sarana upacara keagamaan, di Papua New Guinea, tanaman ini digunakan untuk merangsang kehamilan. Di Vietnam tanaman ini digunakan untuk menurunkan demam, menyegarkan badan, serta meredakan masuk angin dan perut kembung (Wiart, 2006). Reproduksi pada tanaman teratai umumnya secara generatif dan vegetatif (Tjiptrosoepomo, 2005), pada teratai Sudamala belum ada yang melaporkan cara perkembangbiakannya apakah secara generatif atau vegetatif. Reproduksi generatif merupakan perkembangbiakan tanaman dengan menggunakan biji, yang diawali dengan peristiwa penyerbukan, yaitu jatuhnya serbuk sari di kepala putik. Salah satu penyebab dari gagalnya suatu tanaman membentuk biji atau pembuahan adalah sterilitas serbuk sari. Parameter penting dalam menentukan keberhasilan penyerbukan salah satunya adalah fertilitas serbuk sari, karena setelah penyerbukan serbuk sari harus hidup dan mampu berkecambah. Fertilitas serbuk sariditentukan oleh kemampuan serbuk sari berkecambah (viabilitas), viabilitas yang tinggi merupakan salah satu komponen yang menentukan keberhasilan persilangan tanaman (Widiastuti dan Endah, 2008). Hilangnya viabilitas serbuk sari sangat dipengaruhi oleh kondisi lingkungan, terutama suhu dan kelembaban relatif (Shivanna et al., 1991). Untuk mengetahui fertilitas serbuk sari dapat dilakukan uji viabilitas serbuk sari. Berdasarkan hal tersebut maka dilakukan penelitian mengenai viabilitas serbuk sari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) dengan teknik uji warna 1% aniline blue dalam laktofenol, in - vitro dan squash kepala putik. MATERI DAN METODE Sampel yang digunakan adalah serbuk sari dan putik dari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) sebelum mekar, mekar dan sesudah mekar. Sampel diambil dari danau Beratan Desa Candi Kuning, Kecamatan Baturiti, Kabupaten Tabanan. Penelitiandilaksanakan di Laboratorium Struktur dan Perkembangan Tumbuhan Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.Pelaksanaan penelitian dimulai dari bulan Oktober – Desember 2013. 13 Uji viabilitas serbuk sari : a. Uji warna 1 % aniline blue dalam laktofenol Serbuk sari teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) yang telah diambil kemudian dikumpulkan pada mikrotube yang telah diberi zat warna 1% aniline blue dalam laktofenol dan dibiarkan selama 10 menit (Bhojwani dan Bhatnagar, 1999). Kemudian diamati dengan menggunakan mikroskop olymphus. Dihitung jumlah serbuk sari dengan dinding mengkerut dan tidak menyerap warna serta serbuk sari yang tidak mengkerut dan dapat menyerap warna, dilakukan pengamatan untuk 10 preparat dan dihitung rata – ratanya dalam persentase (Kriswiyanti, dkk., 2010). b. Uji viabilitas serbuk sari secara in – vitro Serbuk sari dari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indicaL.) Kuntze) diambil dan ditaburkan pada 10 gelas benda yang telah berisi media 0,8% agar dalam 30% larutan gula kemudian diinkubasi selama ±24 jam (Bhojwani dan Bhatnagar, 1999). Setelah diinkubasi selama ± 24 jam kemudian diamati dengan menggunakan mikroskop, diamati serbuk sari dengan panjang buluh yang terbentuk sama atau lebih panjang dari diameter serbuk sari. Dihitung persentase perkecambahan serbuk sari. c. Uji viabilitas serbuk sari dengan teknik squash kepala putik Kepala putik dari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indica L.) Kuntze) dipotong dan dimasukkan ke dalam mikrotube yang telah berisi fiksatif Farmer selama ± 24 jam. Fiksatif dibuang dan diganti dengan larutan clearing 10% NAOH selama 1-5 menit, pewarnaan dengan 1% aniline blue dalam laktofenol selama 2-5 menit. Kemudian kepala putik diletakkan pada gelas benda dan ditutup, disquash. Diamati serbuk sari yang berkecambah pada kepala putik. Pengamatan mikroskopik dengan mikroskop, viabilitas serbuk sari (%) = jumlah serbuk sari yang berkecambah dibagi dengan jumlah serbuk sari yang berkecambah dan tidak kali seratus persen (Kriswiyanti, dkk., 2010). Metode asetolisis Serbuk sari difiksasi dalam AGG (Asam Asetat Glasial) selama 24 jam, disentrifugasi selama 5 menit, dicuci dengan air. Air dibuang diganti dengan larutan asetolisis AAG 9 bagian dan 1 bagian asam sulfat pekat, tabung reaksi diletakkan dalam water bath yang telah berisi air mendidih, biarkan tetap mendidih selama 15 menit. Setelah dingin dicuci dengan air beberapa kali, disentrifugasi selama 5-10 menit. Air dibuang diganti dengan glyserin jelly yang telah dicampur 1% safranin. Penutupan dan labeling (Berlyn and Miksche, 1976). Serbuk sari diamati dengan mikroskop untuk menentukan tipe bentuk (panjang, lebar dan diameter serbuk sari) dengan menggunakan mikrometri. Parameter serbuk sari yang diukur meliputi panjang, lebar dan diameternya dilihat secara acak dibawah mikroskop, kemudian diukur dengan menggunakan mikrometri untuk mengukur panjang axis polar dan diameter bidang equatorial yang disebut indeks P/E. Serbuk sari yang diukur berasal dari 80 butir serbuk sari yang di ambil secara acak dari 10 gelas benda. HASIL Tipe Bentuk dan Struktur Serbuk Sari TerataiSudamala (Nymphoides Indica (L.) Kuntze) dengan Metode Asetolisis Berdasarkan hasil pengukuran serbuk sari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) dengan metode asetolisis dapat diketahui serbuk sari dari bunga teratai Sudamalaberbentuk bulat, memiliki rata – rata panjang aksis polar (P) 27,46µm ± 3,61 (15 - 40µm) dan rata – rata bidang equatorial (E) 25µm ± 3,32 (20 - 35µm) sehingga indek P/E berkisar antara 1,00 – 1,14 yang tergolong ke dalam 14 kelas tipe Prolate Spheroidal. Sedangkan diameternya berkisar antara 10-25µm sehingga termasuk kelompok Minuta. Berdasarkan tipe aperture termasuk kelompok Ruga (Erdtman, 1952) (gambar 1). a a A b c B Gambar 1. Foto serbuk sari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) Keterangan: A. Serbuk sari teratai Sudamala; a.Aperture B. Pengukuran serbuk sari dengan menggunakan mikrometri; a. Eksin; b. Intin; c. Aperture Viabilitas (%) Serbuk Sari Teratai Sudamala (Nymphoides Indica (L.) Kuntze) Dengan Uji Warna, In - Vitro Dan Squash Kepala Putik Berdasarkan hasil perhitungan viabilitas serbuk sari dari bunga teratai Sudamala sebelum mekar (Gambar 2), baru mekar dan setelah mekar dengan menggunakan metode uji warna 1% aniline blue dalam laktofenol, in – vitro dan squash kepala putik : pada uji warna serbuk sari bunga teratai Sudamala sebelum mekar, baru mekar dan setelah mekar menunjukkan viabilitas yang sangat tinggi yaitu ± 100%. Pada uji in - vitro viabilitas serbuk sari dari bunga sebelum mekar± 0%, baru mekar ± 1,10% (0 - 9,40%) dan setelah mekar ±5,61% (0 - 21,56%). Pada squash kepala putik viabilitas serbuk sari bunga teratai Sudamala dari bunga sebelum mekar ± 0%, baru mekar ± 14,44% (0 – 85,71%), dan setelah mekar ± 84,96% (70,93 – 92,45%). A B Gambar 2. Foto serbuk sari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) sebelum mekar, baru mekar dan setelah mekar dengan uji warna 1% aniline blue dalam laktofenol Keterangan: A. Serbuk sari teratai Sudamala baru mekar; B. foto serbuk sari teratai Sudamala; a. Serbuk sari viabel; b. Serbuk sari tidak viabel 15 PEMBAHASAN Viabilitas Serbuk Sari Dengan Uji Warna Hasil uji viabilitas serbuk sari dengan metoda uji warna 1% aniline blue dalam laktofenol (Bhojwani dan Bhatnagar, 1999), menunjukkan bahwa serbuk sari dari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indica) sebelum mekar, baru mekar dan setelah mekar memiliki viabilitas yang sangat tinggi yaitu ±100%. Serbuk sari bunga sebelum mekar menunjukkan viabilitas sebesar ±100%, hal ini disebabkan karena serbuk sari sel – selnya meristematik sehingga dapat menyerap warna dengan baik, namun serbuk sari belum masak. Serbuk sari masak ditandai dengan lepasnya serbuk sari dari kepala sari (anther) (Prana, 2007). Viabilitas Serbuk Sari Dengan Metoda In-vitro Berdasarkan hasil pengamatan viabilitas serbuk sari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) dengan metode in-vitro yaitu pada bunga sebelum mekar, baru mekar dan setelah mekarmenunjukkan bahwa viabilitas serbuk sari dari bunga sebelum mekar sebesar 0%, bunga baru mekar sebesar 1,10% (0 - 9,40%) dan bunga setelah mekarsebesar 5,61% (0 - 21,56%). Viabilitas serbuk sari dari bunga sebelum mekar sebesar 0%, hal ini disebabkan karena serbuk sari belum masak ditandai dengan belum lepasnya serbuk sari dari dalam anther (Prana, 2007). Beberapa faktor yang mempengaruhi perkecambahan serbuk sari secara in – vitro antara lain :jenis tanaman, waktu pengumpulan serbuk sari, musim, metode pengambilan serbuk sari, penyimpanan dan kerapatan serbuk sari serta kondisi lingkungan perkecambahan seperti suhu, media, dan pH (Galleta, 1983). Rendahnya viabilitas serbuk sari dapat disebabkan karena komposisi dan konsentrasi media perkecambahan yang digunakankurang sesuai. Menurut Wang et al. (2004) komposisi dan konsentrasi media yang digunakan dalam uji perkecambahan serbuk sari dapat mempengaruhi viabilitas serbuk sari pada berbagai jenis tanaman. Selain komposisi dan konsentrasi media, rendahnya viabilitas serbuk sari dapat disebabkan karena suhu dan kelembaban. Pada umumnya suhu yang lebih rendah akan lebih baik bagi perkecambahan serbuk sari, namun hal ini juga tergantung dari genotip tanaman yang digunakan (Parfitt and Almehdi, 1984). Pada suhu yang rendah tidak menyebabkan perubahan kandungan air serbuk sari, karena air tersebut terikat dan tidak membeku (Widiastuti dan Endah, 2008). Suhu dan kelembaban merupakan faktor yang sangat mempengaruhi viabilitas serbuk sari. Suhu yang baik bagi perkecambahan serbuk sari secara in – vitro berkisar antara 15 - 35 oC, sedangkan suhu optimumnya adalah 25oC . Pada suhu yang terlalu tinggi yaitu berkisar antara 40 - 50oC, serbuk sari tidak akan berkecambah karena pada suhu yang terlalu tinggi maka penguapan juga akan semakin tinggi, penguapan yang terlalu tinggi dapat menyebabkan serbuk sari mengering, sedangkan apabila suhu terlalu rendah misalnya di bawah 10oC serbuk sari akan mengalami dehidrasi dan mengkerut sehingga tidak mampu berkecambah (Darjanto dan Satifah, 1990). Viabilitas serbuk sari pada sebagian besar tanaman dapat dipertahankan pada kelembaban relatif 0-30% (Setiawan dan Ruskandi, 2005). Faktor lain yang menyebabkan rendahnya viabilitasserbuk sari adalah tingkat kemasakan serbuk sari. Makin tinggi tingkat kemasakan serbuk sari makapersentase perkecambahan makin tinggi (Bhojwani dan Bahtnagar, 1999). 16 b a B A Gambar 3. Foto serbuk sari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) hasil uji in - vitro Keterangan: a.Serbuk sari tidak membentuk buluh (nonviabel); b. Serbuk sari membentuk buluh (viabel) Viabilitas Serbuk Sari Dengan Squash Kepala Putik Viabilitas serbuk sari dengan squash kepala putik dari bunga sebelum mekar, baru mekar dan setelah mekarmenunjukkan bahwaviabilitas serbuk sari dari bunga sebelum mekar sebesar ±0%, bunga baru mekar ±14,44% (0 - 85,71%) dan bunga setelah mekar±84,96% (70,93 - 92,45%). Persentase viabilitas serbuk sari dari bunga sebelum mekar sebesar ±0 %, hal ini disebabkan karena pada bunga sebelum mekar, serbuk sari belum masak sehingga tidak terjadi penyerbukan (polinasi). Viabilitas serbuk sari bunga teratai Sudamala dengan squash kepala putik pada bunga setelah mekar menunjukkan viabilitas yang tinggi. Menurut Lubis (1993) serbuk sari dikatakan memiliki viabilitas rendah jika persentasenya dibawah 60%. Viabilitas serbuk sari dari bunga baru mekar lebih rendah dibandingkan bunga setelah mekar hal ini disebabkan karena serbuk sari membutuhkan waktu yang lebih lama untuk proses imbibisi air, garam – garam anorganik, dan sukrosa. Pada bunga setelah mekar lebih banyak serbuk sari yang sudah melakukan proses imbibisi untuk pertumbuhan buluhnya sehingga lebih banyak serbuk sari yang berkecambah dibandingkan dengan bunga baru mekar, dimana pada bunga baru mekar belum semua serbuk sari telah selesai melakukan proses imbibisi sehingga belum banyak serbuk sari yang berhasil membentuk buluh. Faktor – faktor yang mempengaruhi keberhasilan serbuk sari dalam membentuk buluh antara lain: reseptivitas kepala putik, kondisi serbuk sari, serta faktor luar yaitu suhu dan kelembaban. Putik yang reseptif ditandai dengan perubahan warna pada putik menjadi lebih terang, pori – pori kepala putik membesar, tangkai putik mulai lurus, putik memproduksi cairan ekstraseluler. A B Gambar 6. Foto serbuk sari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) hasil squash kepala putik Keterangan : A.Serbuk sari tidak berkecambah (tidak viabel); B. Serbuk sari berkecambah (viabel). 17 Berdasarkan hasil uji viabilitas serbuk sari bunga teratai Sudamala dengan uji warna, in – vitro dan squash kepala putik menunjukkan bahwa viabilitas serbuk sari bunga teratai Sudamalatertinggi pada uji warna mencapai 100% baik dari bunga sebelum mekar, baru mekar dan setelah mekar, dan pada squash kepala putik bunga setelah mekar mencapai 84,96%. Viabilitas serbuk sari bunga teratai Sudamala terendah terdapat pada uji in – vitro dan squash kepala putik dari bunga sebelum mekar yaitu 0%, hal ini menunjukkan bahwa penyerbukan bunga teratai Sudamala terjadi setelah bunga mekar (Kasmogami). Teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) menurut penelitian yang sudah dilakukan sebelumnya merupakan tipe bunga Self-incompatibility.Nymphoides indica (L.) Kuntze merupakan tanaman Perenial, Makrofita, Herkogami, Geitonogami, dengan tipe yang khas yaitu Heterostilidan Self – incompatibility (Sibayama and Yasuro, 2003). Inkompatibilitas (incompatibility) adalah tanaman dengan serbuk sari dan bakal biji (ovulum) yang normal tidak mampu untuk membentuk biji disebabkan karena gangguan fisiologis yang menghalangi terjadinya pembuahan. Penyebab terjadinya ketidakserasian sendiri adalah : a. Butir-butir serbuk sari tidak menempel pada kepala putik, atau b. Butir serbuk sari berkecambah pada stigma atau buluh serbuk sari gagal mempenetrasi stigma (Candra, 2013). SIMPULAN Berdasarkan hasil pembahasan dapat dibuat kesimpulan sebagai berikut : Tipe bentuk serbuk sari teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze):bulat, prolate spheroidal, minuta dan ruga. Persentase viabilitas serbuk sari bunga teratai Sudamala (Nymphoides indica (L.) Kuntze) tertinggi pada uji warna 1% aniline blue dalam laktofenol mencapai 100%, baik dari bunga sebelum mekar, baru mekar dan setelah mekar dan pada squash kepala putik bunga setelah mekar mencapai 84,96%. Persentase viabilitas terendah pada uji in – vitro dan squash kepala putik dari bunga sebelum mekar yaitu 0%, menunjukkan tipe penyerbukan Kasmogami dan teratai Sudamala termasuk tanaman perenial, makrofita, herkogami, geitonogami, heterostilidan self – incompatibility. UCAPAN TERIMAKASIH Kepada Bapak Drs. Pande Ketut Sutara, M. Si.dan Drs. Martin Joni, M. Si., atas masukan, kritik, dan sarannya. KEPUSTAKAAN Berlyn, G. P. and J. P. Miksche. 1976. Botanical Microtechnigque and Cytochemistry, The Lowa State University Press. Ames. Lowa. Bhojwani, S. S. and S. P. Bhatnagar. 1999. The Embryology of Angiosperm. Fourth Resived Edition.Vikas Publishing House.PVT.LTD. Delhi. Budiwati, G. A. N. 2014. Manfaat Tanaman Teratai (Nymphaea sp., Nymphaeaceae) di Desa Adat Sumampan, Kecamatan Sukawati, Kabupaten Gianyar, Bali. Universitas Udayana. Jurnal Simbiosis, 2 (1):122-134. Candra, A. 2013. Pemuliaan Tanaman “Self Incompatibility and Male Sterility”. Jurusan Argoteknologi Fakultas PertanianUniversitas Riau. Darjanto dan S. Satifah. 1982. Biologi Bunga dan Teknik Penyerbukan Silang Buatan. PT Gramedia. Jakarta. 18 Erdtman, G. 1952. Pollen Morphology and Plant Taxonomy Angiosperms (An Introduction to Palynology I).The Chronica Co. New York. Kriswiyanti, E., N. K. Y. Sari, dan H. R. Wahyuningtyas. 2010. Uji Viabilitas Serbuk Sari buah Naga (Hylocereus spp.) dengan Metode Pewarnaan, In-Vitro, Hanging-Droff dan Squash Kepala Putik. Prosiding Seminar Nasional Biologi, Fakultas Biologi UGM, 568:575. Marwat, S. K., M. A. Khan., M. Ahmad and M. Zafar. 2009. Nymphoides Indica (L.) Kuntze, A New Record For Pakistan. Department of Plant Sciences, Quaid-i-Azam University, Islamabad. Journal Pakistan, 41(6): 2657-2660. Ornduff, R. 1966. The Origin of Dioecism From Heterostyly in Nymphoides (Menyanthaceae). Journal Evolution. 20: 309-314. Parfitt, D. E. and A.A. Almehdi. 1984. Liquid Nitrogen Storage of Pollen From Five Cultivated Prunus Spesies. Departement of Pomology.University of California, Davis, CA 95616. 19(1):69-70. Prana, M. S. 2007. Studi Biologi Pembungaan pada Talas (Colocasia esculenta (L.) Schott.). Pusat penelitian Bioteknologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), Cibinong 16911. Jurnal Biodiversitas. 8 (1): 63-66. Setiawan dan O. Ruskandi. 2005. Teknik Penyimpanan Serbuk Sari Tiga Kultivar Kelapa Dalam. Jurnal Teknik Pertanian. Available at :http://pustaka.litbang.deptan.go.id/publikasi/bt10105k.pdf. Opened:14.8.2012 Shivanna, K. R., H. F. Linkens and M.Cresti. 1991. Pollen Viability and Pollen Vigor. Theory Application Genetic.81: 38 – 42 Shibayama, Y.and Y. Kadong. 2003. Floral Morph Composition and Pollen Limitation in The Seed Set of Nymphoides indica populations. Graduate School of Science and Technology and Faculty of Science, Kobe University. Japan. Ecological Research.18: 725-737 Steenis, C. G. G. J. V. 2005. Flora. Cetakan ke 5.PT Pradnya Paramita. Jakarta. Tjitrosoepomo, G. 2005. Morfologi Tumbuhan. Cetakan ke-15.Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Wang, Z., Y. Ge, M. Scott, G. Spangenberg. 2004. Viability and longevity of Pollen from Transgenic and Non Transgenic Tall Fescue (Festuca arundinacea) (Poaceae) Plants. Available at :www. Biotek.Lipi.go.id/perpus/index.php?=show detail.Opened :30.12.2013 Widiastuti, A.dan R.P. Endah. 2008. Viabilitas Serbuk Sari dan Pengaruhnya Terhadap Keberhasilan Pembentukan Buah Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq.). Jurnal Biodiversitas. 9(1):35-38. 19 KARAKTERISTIK DAN VIABILITAS SERBUK SARI RAGAM KELAPA (Cocos nucifera, L.) DI BALI THE CHARACTERISTICS AND VIABILITY OF COCONUT POLLEN VARIETY (Cocos nucifera, L.) IN BALI Eniek Kriswiyanti FMIPA Universitas Udayana, Kampus Bukit Jimbaran, Kuta Email: [email protected] INTISARI Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui karakteristik dan viabilitas serbuk sari ragam kelapa (Cocos nucifera, L.) di Bali. Sampel serbuk sari yang digunakan dalam penelitian ini 26 ragam kelapa, masing-masing ragam 3 individu. Untuk mengetahui karakteristik serbuk sari ragam kelapa digunakan metode asetolisis dan pewarnaaan 1% safranin, untuk mengetahui viabilitas serbuk sari digunakan uji warna dengan 1% aniline blue dalam lactofenol. Hasil penelitian menunjukkan bahwa karakteristik serbuk sari dari 26 ragam kelapa di Bali memiliki bentuk bulat - lonjong, media, monosulcate, oblat sferoidal pada kelapa Dalam (Cocos nucifera, L.var. nana), suboblat pada kelapa Genjah (Cocos nucifera, L.var. typica). Panjang aksis polar (P) antara 24,15 µm (Genjah Bulan) sampai 40,12 µm (Coklat Biasa), diameter bidang Equatorial (E) 27,4 µm (Genjah Udang) sampai 43,6 µm (Coklat Biasa ). Indek P/E = 0,814 (Genjah Hijau) - 0,973 (Gading Bali). Rata-rata ukuran serbuk sari kelapa Genjah (0,81-0,87) lebih kecil daripada kelapa Dalam (0,89-0,97). Viabilitas serbuk sari kelapa Genjah lebih tinggi dari pada kelapa Dalam, rata-rata: 41,7±7,3% (bervariasi terendah 28,51±7,5% pada kelapa Naga dan tertinggi 60,6±8,8% pada kelapa Genjah Bulan). Kata Kunci : viabilitas, Cocos nucifera, L., monosulcate, oblat sferoidal, suboblat. ABSTRACT The aim of this research was to determine the characteristic and pollen viability of coconuts (Cocos nucifera L.) in Bali. Pollen viability was tested in 1% aniline blue in lactophenole, and the characteristic of pollen was prepared in acetolysis method and stained 1% Safranine. The result showed that the morphology of pollens from 26 coconut variances was determined as circular-oval, mediate, monosulcate, oblat sferoidal in tall coconuts (Cocos nucifera, L.var. nana), suboblat on drawf coconut (Cocos nucifera, L.var. typica). The length of the polar axis (P) ranged from 27.4 µm (Genjah Udang) to 43.6 µm (Coklat Biasa ). P/E Indexes ranged from 0.814 µm in Genjah Hijau to 0.973 µm (Gading Bali). The pollen size of dwarf coconut was 0.81-0.87 µm, smaller than tall coconut with the pollen size of 0.89 µm - 0.97 µm. Pollen viability of dwarf coconut was higher than tall coconut with the average of 41.7±7.3%, with the value of 28.51±7.5% in Naga tall and 60.6±8.8% in Bulan dwarf. Keywords: viabilitas, Cocos nucifera, L., monosulcate, oblat sferoidal, suboblat. 20 PENDAHULUAN Hasil ekplorasi keragaman tanaman kelapa (Cocos nucifera L.) di propinsi Bali berdasarkan kegunaannya dapat dibedakan antara kelapa atau nyuh (bahasa Bali) biasa dan kelapa madan. Kelapa biasa adalah jenis kelapa yang biasa digunakan untuk membuat bahan makanan dan kopra (minyak), sedang kelapa madan adalah jenis kelapa yang memiliki ciri morfologi khusus (unik) dengan nama sesuai ciri tersebut, diperlukan untuk bahan obat (usada) maupun sarana upakara agama Hindu. Kelapa madan umumnya menghasilkan buah per tandan sedikit dibandingkan kelapa biasa dan kelapa genjah. Keberadaannya belum banyak diketahui, sedikit diantara populasi kelapa biasa (Kriswiyanti, 2013, 2014). Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian tentang penyebab terbentuknya buah sedikit. Beberapa penyebab kegagalan terbentuknya buah dan biji pada Plase (Butea monosperma (Lamk.) Taub.) adalah struktur morfologi alat reproduksi yang tidak menunjang terjadinya penyerbukan: kepala sari lebih rendah dari kepala putik dan keduanya tertutup oleh carina. Viabilitas serbuk sari rendah, self- incompatibility yaitu buluh serbuksari tidak mau tumbuh pada kepala putik sehingga dapat menyebabkan tidak terjadi pembuahan (Kriswiyanti dan Watiniasih, 2010). Bhojwani dan Bhadnagar (1999) mengatakan bahwa salah satu penyebab kegagalan terbentuknya buah adalah sterilitas serbuk sari. Untuk mengetahui sterilitas serbuk sari dapat dilakukan dengan uji viabilitas serbuk sari dengan uji warna atau in- vitro. Uji viabilitas serbuk sari secara in-vitro pada kelapa Rangda telah dilakukan oleh Nirmala (2013) yaitu < 3%, pada kelapa Ancak oleh Sari (2013) viabilitas lebih rendah yaitu < 2,5%. Berdasar latar belakang diatas maka penelitian ini dilakukan untuk mengetahui karakteristik dan viabilitas serbuk sari ragam kelapa (Cocos nucifera, L.) di Bali. MATERI DAN METODE Sampel serbuk sari dari 26 ragam (3 individu/ragam) kelapa yang digunakan berasal dari berbagai kabupaten di propinsi Bali. Pengamatan dan pengukuran panjang aksis polar, diameter bidang ekuitorial, untuk menentukan indek Polar/Equatorial (P/E) dari serbuk sari digunakan metode asetolisis (Erdman, 1969; Faegri dan Iversen, 1989). Sedang uji viabilitas serbuk sari menggunakan metode pewarnaan 1% aniline blue dalam Laktofenol (Berlyne dan Miscke, 1976; Bhojwani dan Bhatnagar, 1999), sebagai berikut: Asetolisis: serbuk sari diambil dari anther bunga mekar (1-3 individu) difiksasi dalam AAG (45%) 24 jam, sentrifuge 5 menit, kecepatan 3.500 rpm, kemudiaan dicuci air beberapa kali. Serbuk sari diasetolisis dengan campuran AAG dan asam Sulfat pekat (9:1), dipanaskan dalam water bath yang telah berisi air mendidih, biarkan tetap mendidih selama 15 menit. Setelah dingin dicuci dengan air beberapa kali, disentrifuge lagi selama 5 menit 2 x, cuci dengan air. Air dibuang diganti glyserin jelly yang telah dicampur dengan 1 % safranin, biarkan hingga kental. Pengamatan menggunakan mikroskop Merk MEIJI, perbesaran 10, 40X, masing-masing kelapa serbuk sari yang diukur 30 butir dengan menggunakan mikrometri. Tipe bentuk serbuk sari ditentukan dengan menghitung perbandingan rerata ukuran panjang aksis Polar (P) dan diameter bidang Equatorial (E), yang disebut sebagai indek P/E menurut Erdtman (1969) sebagai berikut : Berdasar hasil penghitungan indek P/E ditentukan klas tipe bentuk serbuk sari menurut Erdtman 1972 21 Uji Viabilitas Serbuksari : untuk uji viabilitas serbuksari digunakan dengan uji warna dengan 1% aniline blue dalam laktofenol yaitu: Viabilitas (V) serbuk sari (%) (Bhojwani dan Bhatnagar, 1999): Keterangan: a = jumlah serbuk sari viabel adalah serbuk sari dengan dinding berwarna b = jumlah serbuk sari nonviabel ( dinding tidak berwarna dan mengkerut) dengan mikroskop masing-masing jenis kelapa 3 gelas benda. HASIL Karakteristik dan Viabilitas Serbuk sari Hasil penelitian menunjukkan bahwa bentuk serbuk sari mulai dari bulat hingga lonjong, berukuran media, klas bentuk oblat sferoidal pada kelapa Dalam, suboblat pada kelapa Genjah, viabilitas serbuk sari kelapa Genjah lebih tinggi dibandingka pada kelapa Dalam. Data hasil penelitian ditampilkan pada Tabel 1 berikut. Tabel 1. Karakteristik dan Viabilitas Serbuk Sari Ragam Kelapa (Cocos nucifera L.) Nama Ragam Kelapa (1) Viabilitas (%) (2) Diameter Equitorial/E (µm) (3) Panjang Aksis Polar/P (µm) (4) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Ancak Bejulit Gadang Biasa Coklat Barak Bingin Bojog Bulan Gadang Gading bali 40.96±6.1 43.18±6.4 34.97±7.202 34.1±4.4 35.85±2.9 41.83±4.03 41.47±5.47 39.41±4.68 38.38±5.7 37.59±7.85 30.7 31.75 32.79 43.16 29.93 30.88 31.29 29.029 39.04 30.015 29.62 30.145 30.32 40.12 27.6 29.928 29.58 27.23 36.32 29.232 0.964 0.949 0.924 0.966 0.958 0.969 0.945 0.938 0.930 0.973 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Srogsogan Mulung Rangda Bluluk Sudamala Surya Udang Kapas Kebo Macan Naga 43.19±2.5 29.49±7.71 39.97±3.54 36.12±6.67 41.31±5.16 46.42±4.13 48.93±4.08 36.94±.8.57 42.64±5.38 42.21±6.505 28.51±7.568 32.018 26.75 28.01 28.62 29.23 29.06 30.59 30.36 29.49 30.595 29.4 31.001 23.9 26.8 27.23 27.7 27.97 29.58 28.88 27.75 29.58 27.14 0.968 0.893 0.956 0.951 0.947 0.962 0.966 0.951 0.941 0.966 0.923 No Indek P/E (5) 22 22 23 24 25 26 Pudak Genjah hijau Genjah putih Genjah kuning Genjah coklat Rerata 31.99±5.858 55.87±10.4 60.62±8.84 39.025±6.39 48.1±10.4 41.731±7.32 28.71 30.45 27.4 29.58 27.92 30.64±3.43 27.318 24.79 23.92 25.23 24.15 28.57±3.53 0.951 0.814 0.873 0.852 0.865 0.932±0.0406 Rerata panjang aksis polar dan diameter bidang equatorial serbuk sari 26 ragam kelapa bervariasi. Panjang aksis polar (P) antara 24,15 µm (Genjah Bulan) sampai 40,12 µm (Coklat). Diameter bidang Equatorial (E) 27,4 µm (Genjah Udang) sampai 43,6 µm (Coklat). Indek P/E = 0,814 (Genjah Hijau) 0,973 (Gading Bali). Rata-rata ukuran serbuk sari kelapa Genjah (0,81-0,87/suboblat) lebih kecil daripada kelapa Dalam (0,89-0,97/oblat sferoidal). Contoh beberapa bentuk serbuk sari yang didapat dapat dilihat pada Gambar 1. b c a 30,18µm A B A 25,5 µm C 33,75 µm D Gambar 1. Serbuk Sari pada Empat Ragam Kelapa (Cocos nucifera L. ) Keterangan: Serbuk sari empat ragam dengan ukuran bervariasi, A. Serbuk sari kelapa Dalam Coklat dengan SEM, bercahaya menunjukkan serbuk sari viabel (800x), B. a.Serbuk sari viable kelapa Bluluk, perbesaran 400X, b. serbuk sari non viabel, c. apperture C. Serbuk sari kelapa Rangda dengan dinding eksin dan intin jelas, D. Serbuk sari Genjah Gading dengan ukuran lebih kecil dari serbuk sari kelapa Dalam. Hasil uji viabilitas serbuk sari kelapa secara umum rata-rata dibawah 50% yaitu: 41,7 ± 7,3% (28,51±7,5% pada kelapa Naga sampai 60,6±8,8% pada kelapa Genjah Bulan), viabilitas tertinggi pada kelapa Dalam: kelapa Udang (48,93± 4,08%) (Table 1, Gambar 2). 23 Gambar 2. Viabilitas Serbuk Sari dari 26 Ragam Kelapa (Cocos nucifera L.) di Bali PEMBAHASAN Menurut Erdman (1965) dan Mulyani (2006) jika serbuk sari memiliki indek P/E antara 0,8-1,0 tergolong klas tipe bentuk oblat sferoidal, berdasar diameter bidang ekuatorialnya = 29,6 µm (25-50 µm) digolongkan dalam serbuk sari media. Berdasar jumlah dan bentuk aperture : satu seperti alur memanjang termasuk serbuk sari monosulcate (Dransfield, et al., 2008). Rata-rata indek P/E hasil penelitian ini lebih besar dari indek P/E menurut Erdmund (1969) indek P/E Cocos nucifera L. <0,8 sehingga digolongkan dalam tipe bentuk oblat, tetapi berdasar jumlah dan bentuk aperture sama yaitu monosulcate. Armendariz, et al (2006) fertilitas serbuk sari tanaman kelapa sangat menentukan keberhasilan terbentuknya buah. Berbeda dengan Armendariz, et al (2006), Ranasanghe, et al (2010) menyatakan bahwa keberhasilan fruit set selain tergantung oleh kualitas serbuk sari dan persentase perkecambahan serbuk sari, proses pertumbuh an buluh serbuk sari juga berperan dalam keberhasilan pembuahan.Hasil Penelitian Setiawan dan Ruskandi (2005) viabilitas serbuk sari dari tiga kultivar kelapa Dalam Tenga (DTA), Dalam Bali (DBI), dan Dalam Palu (DPU) setelah disimpan 24 minggu masih baik, dan dapat digunakan untuk persilangan karena viabilitasnya di atas 30%. Namun sampai berapa lama viabilitas serbuk sari kelapa tersebut dapat bertahan dalam penyimpanan perlu diteliti lebih lanjut. Hasil penelitian Ranasinghe et al (2010) pada 6 kultivar kelapa di Sri Lanka menunjukkan bahwa persentase viabilitas serbuk sari tergantung dari letak spikelet bagian mana sampel serbuk sari diambil, apakah bagian ujung, tengah, atau pangkal. Viabilitas serbuk sari kelapa Dalam San Ramon dengan sampel serbuk sari dari spikelet bagian ujung rata-rata viabilatasnya: 77,7%, spikelet bagian tengah 64, 26% dan spikelet bagian angkal aling rendah . Pada te erature aksi al rata-rata viabilitas menurun menjadi hanya 11%. SIMPULAN Bentuk serbuk sari bulat-lonjong, media, oblat sferoidal pada kelapa Dalam, suboblat pada kelapa Genjah, viabilitas serbuk sari kelapa Genjah lebih tinggi dari pada kelapa Dalam. 24 KEPUSTAKAAN Armendariz, B.H.C., C.Oropeza , J. L. Chan,. B. Maust, N. Torres, C.D.C Aguilar and L. Sáenz. 2006. Pollen Fertility and Female Flower Anatomy Of Micro propagated Coconut Palms, Rev. Fitotec. Mex. 29 (4) : 373-378. Berlyn, G. P. and J. P. Miksche. 1976. Botanical Microtachnique and Cytochemistry. The Iowa State University Press Ames. Iowa. Bhojwani, S. S. and S. P. Bhatnagar. 1999. The Embryology of Angiosperms. Third Rivised Edition. Vikas Publishing House P.V.T., LTD., New Delhi. Erdtman. G.1969. Handbook of Palinology. Morfology - Taxonomy - Ecology. An Introduction to Study of Pollen Grains and Spores. Hapner Publishing CO. New York. Erdtman. G. 1972. Pollen Morphology and Plant Taxonomy Angiosperms (An Introduction to Palinology I). The Chronica Botanica Co.Waltham. Faegri, K and J. Iversen. 1989. Texbook of Pollen Analysis. 4 th Edition (Revised by Faegri, Kaland, K and Krzywinski, P.E.) John Wiley & Sons Ltd Chichester. Kriswiyanti, E, 2013. Keanekaragaman Karakter Tanaman Kelapa (Cocos nucifera L. ) yang digunakan sebagai Bahan Upacara Padudusan Agung, Jurnal Biologi XVII (1) 2013:15-19 Kriswiyanti, E, 2014.Karakteristik Ragam Kelapa (Cocos nucifera, L) di Bali Berdasarkan Morfologi, Anatomi dan Molekuler. Ringkasan Disertasi Program Pasca Sarjana Universitas Udayana, Denpasar Sari N. L. G. C., E. Kriswiyanti, dan N. N. Darsini. 2013. Perkembangan Mikro gametofit dan Uji Viabilitas Serbuk Sari Kelapa (Cocos nucifera L.”Ancak” Jurnal Simbiosis 1 (1) 2013:51-58 Nirmala S., E. Kriswiyanti dan A. A. K. Darmadi. 2013. Uji Viabilitas Serbuk Sari Secara in-vitro Kelapa (Cocos nucifera L.”Rangda” dengan waktu dan suhu Penyi anan yang Berbeda. Simbiosis 1 ( 1 ) 2013: 59-69 Ranasinghe C. S., K. P. Waidyarathna, A. P. C. Pradeep and M. S. K. Meneripitiya. 2010. Approach to Screen Coconut Varieties for High Temperature Tolerance by in-vitro Pollen Germination. J.Cocos 19 : 01-11 Rhee, H. K., H. R Cho, K. J. Kim, and K. S. Kim. 2005. Comparison of Pollen Morphology in Interspecific Hybrid Lilies after In-Vitro Chromosome Doubling. Acta Hort.673 : 639-643. Setiawan, O dan Ruskandi. 2005. Teknik Penyimpanan Serbuk Sari Tiga Kultivar Kelapa Dalam. Buletin Teknik Pertanian 10 (1) : 37-38 25 TANGGAP TANAMAN KEDELAI TERHADAP PEMBERIAN EKSTRAK KRANDALIT, FRAKSI HUMAT, DAN MOLIBDENUM (Mo) PADA INCEPTISOLS PRAFI MANOKWARI RESPONSE OF SOYBEAN DUE TO APPLICATION OF CRANDALLITE EXTRACT, HUMIC FRACTION AND MOLIBDENUM (Mo) PADA INCEPTISOLS PRAFI MANOKWARI Ishak Musaad, Dwiana Wasgito Purnomo, Murtiningrum, Yohanis Amus Mustamu Fakults Pertanian dan Teknologi Pertanian, Universitas Negeri Papua Manokwari Email: [email protected] INTISARI Lahan pertanian di Indonesia termasuk di Papua Barat umumnya membutuhkan pemupukan fosfor (P) untuk memperoleh hasil tanaman yang optimal. Peneltian ini bertujuan untuk mengkaji pengaruh pemberian ekstrak krandalit, fraksi humat dan unsur mikro Molibdenum (Mo) sebagai pupuk fosfat cair-plus terhadap produksi kedelai pada Inceptisols Prafi Manokwarit. Penelitian terdiri atas dua tahap yaitu: 1) formulasi pupuk fosfat cair dari ekstrak tanah endapan fosfat krandalit asal Ayamaru Kabupaten Maybrat, fraksi humat dan penambahan unsur mikro Mo. 2). Penentuan dosis optimum dari pupuk fosfat cair-plus yang dhasilkan dan dibandingkan dengan pupuk NPK, NASA, Papua Nutrient, dan krandalit padat yang diperkaya dengan bahan organik. Penelitian di Lapangan dirancang berasarkan Rancangan Acak Kelompok dengan 10 perlakuan (0, 20, 30, 40, 50, 60 Lha -1 ) pupuk fosfat cair-plus yang dihasilkan dari penelitian tahap kesatu, dan empat jenis pupuk pembanding. Masing-masing perlakuan diulang tiga kali sehingga diperoleh 30 satuan percobaan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian pupuk fosfat cair-plus yang terdiri atas 60% ekstrak krandalit, 30% fraksi humat, dan 10% unsur mikro Mo pada berbagai dosis meningkatkan bobot kering tanaman, jumlah nodul, dan hasil kedelai (t ha-1). Dosis optimum yang dihasilkan adalah 30 Lha -1 dapat meningkatkan produksi kedelai dari 1,60 t ha-1 menjadi 2,04 t ha-1 pada tanah Inceptisol Prafi Manokwari. Kata kunci; krandalit, fosfat, humat, Mo, kedelai ABSTRACT Agricultural lands in West Papua commonly require fertilization of Phosphate (P) to attain optimum plant yield. The aims of this research were to study the effect crandallite extract application, combined with humic fraction and Molibdenum (Mo) as fertilizers toward soybean production on Inceptisols Manokwari. The target is to obtain optimum dose recommendation of -liquid phosphate plus fertilizer for soybean on acid Inceptisols. The study were arranged on two phases: 1) the production of plus liquid fertilizer formula of sediment soil extract of crandallite phosphate (CPSS) from Ayamaru, cow feces extract, and additional of micro element Mo. 2) Determine of optimum dosage, production, and quality of soybean product by treatment of plus liquid fertilizer formula in the preliminary phase. The field experiments utilised Randomize Block Design with 10 treatments (0, 20, 30, 40, 50, 60 L ha -1 of Pplus liquid fertilizer, NASA, NPK,Papua Nutrient (PN), and Crandllite Phosphate Sediment Soil+organic matter. Each treatment unit was replicated so its produced 30 experiment units. Result showed that Pplus liquid fertilizer (60% crandallite extract: 30% humic fraction, and 10% Mo) application at different level increased dry matter, nodule, and result of soybean (t ha-1). Optimum dose of resulting plus liquid phosphate fertilizer is 30 L ha-1. Keywords: soybean, phosphorus, crandallite, humic, Molibdenum, 26 PENDAHULUAN Konsumsi kedelai terus meningkat seiring dengan bertambahnya jumlah penduduk, sehingga sebagian besar harus diimpor karena produksi di dalam negeri belum mencukupi kebutuhan. Pada tahun 2009 kebutuhan konsumsi kedelai nasional adalah sebesar 1,97 juta ton, sedangkan produksi dalam negeri sebesar 0,92 juta. Berdasarkan data Badan Pusat Statistik (BPS) 2012, produksi kedelai lokal tahun 2011 sebesar 851,29 ribu ton atau 29 persen dari total kebutuhan nasional. Salah satu yang menjadi penyebab rendahnya produktivitas kedelai adalah rendahnya produktivitas lahan pertanian terutama di luar Pulau Jawa termasuk di Provinsi Papua Barat. Produktivitas kedelai di Papua Barat sangat rendah yaitu kurang dari 1,0 ton ha-1. Lahan pertanian di Papua Barat umumnya didominasi oleh tanah mineral masam yaitu Ultisols dan Inceptisols yang berkendala ganda terutama defisiensi hara fosfor (P), rendahnya bahan organik dan beberapa hara mikro terutama Molibdenum (Mo). Usaha peningkatan produksi kedelai di Papua Barat melalui pemupukan berimbang pada tanah Inceptisols mutlak diperlukan. Provinsi Papua Barat memilki salah satu sumberdaya alam yaitu Tanah Endapan Fosfat Krandalit (TEFK) seluas lebih dari 100 ribu hektar dan sumberdaya organik yang dapat diproses menjadi pupuk fosfat-plus. Kajian tentang pemanfaatan endapan fosfat krandalit dan kotoran ternak untuk diproses menjadi pupuk padat dan cair menghasilkan nutrient tanaman lengkap telah dilakukan dengan menghasilkan produk pupuk “Papua Nutrient” (Musaad, 2011). Ekstrak krandalit yang kaya akan P dan hara mikro Fe, Cu, Zn dan Mn dapat digunakan sebagai nutrisi tanaman. Hasil penelitian tersebut telah memperoleh hak paten sehingga perlu dikembangkan lebih lanjut. Penelitian yang akan dilakukan adalah untuk mengetahui keefektifan pupuk fosfat cair–plus dari ekstrak krandalit, fraksi humat pada tanaman kedelai dengan penambahan unsur Mo, karena Mo berperan penting dalam reaksi enzimatik pembentukan bintil akar dalam fiksasi N sehingga mengurangi penggunaan pupuk N dan meningkatkan konsentrasi asam-asam amino. Formulasi pupuk yang sesuai dengan kebutuhan tanah dan tanaman kedelai dengan memanfaatkan bahan baku lokal seperti Tanah Endapan Fosfat Krandalit dan bahan organik di Papua Barat merupakan salah satu kajian yang sangat penting dan sangat strategis untuk meningkatkan produktivitas kedelai. Keluaran penelitian ini dapat menghasilkan pupuk untuk tanaman kedelai sehingga dapat mengurangi penggunaan pupuk-pupuk impor yang harganya relatif mahal serta sulit diperoleh petani. Pertanian organik yang dianjurkan pemerintah saat ini tidak sepenuhnya dapat diterapkan oleh petani karena berbagai kendala. Input pupuk organik untuk memenuhi kebutuhan hara tanaman kedelai pada lahan-lahan yang tidak subur diperlukan takaran tinggi berkisar 10 – 20 ton per hektar karena konsentrasi hara N, P, K, dan hara mikro yang terkandung dalam bahan organik sangat rendah, meskipun bahan organik dapat memperbaiki sifat-sifat tanah lainnya. Hal ini menyebabkan penggunaan pupuk organik perlu dimodifikasi dengan pupuk cair anorganik yang bersumber dari bahan baku lokal untuk memenuhi kebutuhan hara bagi tanaman kedelai. Dalam penelitian ini akan dikaji tanggap tanaman kedelai terhadap pemberian formula pupuk dari ekstrak krandalit, fraksi bahan organik dan Molibdenum (Mo) sehingga dapat meningkatkan produksi kedelai di Papua Barat, khususnya di Kabupaten Manokwari. Hasil formulasi ekstrak krandalit yang kaya akan hara P disertai penambahan fraksi humat dari kotoran ternak dan unsur mikro Mo dalam penelitian ini disebut pupuk fosfat cair-plus. Bagaimana tanggap tanaman kedelai terhadap pemberian formula pupuk fosfat cair-plus dari ekstrak krandalit, fraksi humat dan Mo pada tanah Inceptisols Prafi Manokwari, maka penelitian ini perlu dilakukan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian campuran ekstrak krandalit, fraksi humat, dan unsur mikro Molibdenum (Mo) sebagai pupuk fosfat cair-plus terhadap produksi kedelai pada tanah Inceptisols Prafi Manokwari. Tujuan khusus adalah untuk memperoleh formula, mengetahui keefektifan agronomi, produktivitas dan takaran optimum pupuk fosfat cair yang dibutuhkan untuk tanaman kedelai. 27 MATERI DAN METODE Penelitian dilakukan menggunakan metode eksperimen. Percobaan tahun pertama dirancang menggunakan Rancangan Acak Kelompok yang terdiri atas tujuh perlakuan yaitu : A0 = tanpa pemberian pupuk, A1 = 100% ekstrak krandalit + 0 % fraksi humat + 0 % molibdenum; A2 = 80 % ekstrak krandalit + 15 % fraksi humat + 5% molibdenum; A3 = 60 % ekstrak krandalit + 30% fraksi humat + 10% molibdenum; A4 = 40 % ekstrak krandalit + 50 % fraksi 0rganik + 10% molibdenum; A5 = 20 % ekstrak krandalit + 60 % fraksi humat + 20% molibdenum; A6= 0% ekstrak krandalit + 80% fraksi humat + 20 % molibdenum. Takaran masing-masing perlakuan 30 liter ha-1. Masing-masing perlakuan diulang tiga kali sehingga diperoleh 21 satuan percobaan. Bahan yang digunakan yaitu TEFK Ayamaru, bahan organik (kotoran ternak sapi), benih kedelai varietas Grobogan, dan lahan percobaan. Pupuk urea CO(NH2)2 dengan kadar N 45%, sebagai pupuk dasar digunakan dosis rendah (30 kg ha-1). Pengendalian hama dan penyakit tanaman dilakukan dengan menggunakan pestisida Decis. Bahan kimia dan peralatan laboratorium yang digunakan untuk keperluan analisis tanah, pupuk, dan tanaman disesuaikan dengan keperluan analisis berdasarkan metode dan prosedur untuk setiap variabel respons dalam penelitian ini. Peralatan yang digunakan terdiri atas peralatan lapangan untuk pengambilan contoh tanah, yaitu: bor tanah, cangkul, parang, tali rafia, dan peraltan lainnya. Contoh TEFK diambil dari beberapa tempat yang berkonsentrasi fosfat tinggi kemudian dikompositkan. Endapan TEFK dibersihkan dari sisa-sisa tumbuhan dan pengganggu lainnya selanjutnya diayak dengan menggunakan ayakan berukuran 100 mesh. Endapan Fosfat Krandalit yang sudah diayak dimasukkan ke dalam cawan-cawan porselin kemudian diproses secara termal pada suhu 600C selama 1 jam. Penentuan suhu 600C dan waktu satu jam didasarkan atas hasil penelitian Musaad (1996). Bahan ini selanjutnya disebut TEFK-termal yang akan digunakan sebagai bahan pupuk fosfat dan dilanjutkan dengan ekstraksi menggunakan HCL 1% untuk menghasilkan ekstrak krandalit sebagai fosfat cair. Bahan organik dibersihkan dari kotoran yang mengganggu, kemudian ditumbuk dan disaring hingga lolos ayakan (berdiameter lubang 0,5 mm). Bahan organik tersebut ditimbang dan dilarutkan dalam larutan NaOH 0,5 M dengan perbandingan 1 : 10 (w/v). Selanjutnya bahan organik difraksionasi sesuai prosedur (Stevenson, 1986). Fraksi bahan organik yang digunakan dalam penelitian ini adalah fraksi satu (fraksi humat). Petak-petak percobaan diukur setelah pengolahan tanah dan masing-masing petak percobaan berukuran 4 x 3 =12 m2. Jarak antara petak dalam satu ulangan 0,5 m, sedangkan jarak antara ulangan 0,75 meter. Luas lahan yang dijadikan sebagai areal percobaan adalah : 18 x 20 m 2 = 360 m2. Varietas kedelai yang digunakan adalah Varietas Anjasmoro. Pupuk dasar diberikan hanya 30% dari dosis anjuran pada saat tanam sesuai takaran anjuran yaitu 30 kg ha -1. Pemeliharaan tanaman dilakukan selama percobaan di lapangan terutama pengendalian hama dan penyakit tanaman. Gejala-gejala yang tampak baik gejala yang disebabkan oleh defisiensi atau toksisitas hara maupun akibat hama dan penyakit selama masa pertumbuhan tanaman juga diamati. Pengendalian gulma dilakukan secara manual sesuai kebutuhan selama masa pertumbuhan tanaman. Tanaman dipanen pada umur perkiraan generatif atau sampai produksi (3 bulan setelah tanam). Analisis tanah dilakukan terhadap contoh tanah awal (sebelum percobaan) untuk mengetahui staus N,P, K dan bahan organik. Tanah disiapkan lolos ayakan 2 mm untuk keperluan analisis sesuai prosedur analisis sifat-sifat tanah seperti diuraikan pada komponen variabel pengamatan. Contoh jaringan tanaman yang diambil adalah daun yang berkembang penuh. Jaringan tanaman dikeringkan dalam oven pada suhu 70C kemudian digiling halus untuk keperluan analisis konsentrasi unsur hara dalam daun. Prosedur analisis seperti pada percobaan tahun pertama. 28 Pengukuran variabel respons dilakukan pada akhir pertumbuhan vegetatif (40 HST). Variabel pertumbuhan: tinggi tanaman, bobot kering tanaman, dan nodul. Sifat kimia tanah yang diukur terdiri atas: pH, N-total P-tersedia, Mo-total dan Al-dd. Variabel konsentrasi hara tanaman yang diukur adalah N, P, K, Fe, Mo, dan Al. Pengukuran komponen produksi (bobot biji kering) kedelai t ha-1 dan komposisi kimia kedelai dan fraksi protein biji kedelai dilakukan setelah panen. Data variabel respons diolah menggunakan analisis ragam (Uji F). Perbedaan antara rerata perlakuan disajikan dalam bentuk grafik. HASIL Hasil pengamatan beberapa sifat fisik tanah menunjukan bahwa tekstur tanah adalah lempung liat berpasir, aerasi tanah baik, struktur granuler, warna tanah coklat keabuan. Tanah pada area percobaan diklasifikasikan sebagai tanah Inceptisols berdasarkan klasisifikasi (Soil Taxonomy Staff, 1992). Hasil analisis ekstrak krandalit yang digunakan dalam penelitian ini disajikan pada Tabel 1. Data Tabel 1 menunjukkan bahwa ekstrak krandalit yang digunakan dalam penelitian ini mengandung unsur P yang cukup tinggi yaitu 10,77% P. Unsur lain yang juga tinggi adalah kalsium (Ca) yaitu sebesar 580,421 ppm, dan kalium (190,970 ppm). Alumunium (Al) ekstrak krandalit ini sebesar 166,93 ppm. Tabel 1. Hasil analisis komponen kimia ekstrak krandalit yang digunakan No. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. Parameter Kalium, K Kalsium, Ca Magnesium, Mg Tembaga, Cu Seng, Zn Mangan, Mn Nikel, Ni Molibneum, Mo Besi, Fe Alumunium, Al Phospat, P Satuan mg L-1 mg L-1 mg L-1 mg L-1 mg L-1 mg L-1 mg L-1 mg L-1 mg L-1 mg L-1 % Hasil 190,970 580,421 5,600 3,244 11,015 30,423 1,472 0,211 24,022 166,932 10,77 Sumber: 1) Hasil Uji Lab. Kimia F-MIPA Unipa, 2013 Komponen Pertumbuhan Tanaman Tinggi Tanaman pada 2, 4, dan 6 Minggu Setelah Tanam (MST). Hasil analisis ragam pada komponen tinggi tanaman dan bobot kering tanaman (4 dan 6 MST) disajikan pada Tabel 3. Perbedaan pertumbuhan tanaman dapat dilihat pada Gambar 2. Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa perlakuan formula ekstrak krandalit, fraksi humat, dan unsur mikro Mo berpengaruh tidak nyata terhadap tinggi tanaman tetapi berpengaruh nyata terhadap bobot kering tanaman 6 MST. Pengaruh perlakuan terhadap komponen tinggi dan bobot kering tanaman disajikan pada Gambar 1. 29 Gambar 1. Tinggi Tanaman (2, 4, 6 MST) dan Bobot Kering (4,6 MST) Gambar 1 menunjukkan bahwa tinggi tanaman tertinggi diperoleh pada perlakuan pupuk NPK, kemudian A1 (100 % ekstrak krandalit), A6 dan A0 (kontrol). Peranan N dari pupuk NPK baik sebagai perlakuan pembanding dan pupuk dasar berpengaruh terhadap pertumbuhan tanaman fase vegetatif maksimum tanaman kedelai (2-4 minggu setelah tanaman). Kemampuan pembentukan bintil akar tanaman kedelai untuk memfiksasi N dari udara secara alamiah pada semua perlakuan memberikan pengaruh yang sama terhadap komponen tinggi tanaman. Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa perlakuan formula pupuk P-Cair-Plus hanya berpengaruh nyata terhadap komponen bobot kering tanaman (4 MST), dan berpengaruh tidak nyata terhadap bobot kering tanaman 6 MST. Data pada grafik menunjukkan bahwa bobot kering tanaman tertinggi pada perlakuan A 6 (ekstrak krandalit + 80% fraksi humat + 20% + 20% Mo ) dan berbeda tidak nyata dengan semua perlakuan lainnya kecuali terhadap perlakuan NPK. Tabel 2. Pengaruh perlakuan terhadap bobot kering tanaman ( 4, 6 MST Perlakuan Bobot kering tanaman (g) 4 MST 6 MST A0 (0 ekstrak krandalit,0 organik, 0 Mo) 2,4 ab 16,7 a A1 (100% ekstrak krandalit, 0 organik, 0 Mo) 3,0 ab 21,7 a A2 (80% ekstrak krandalit +15% 0rg + 5% Mo) 2,4 ab 16,6 a A3 (60% ekstrak krandalit + 30% org + 10% Mo) 2,8 ab 19,7 a A4 (40% ekstrak krandalit + 50% org + 10% Mo) 2,8 ab 13,7 a A5 (20% ekstrak krandalit + 60% org + 20% Mo) 2,7 ab 15,3 a A6 (0% ekstrak krandalit + 80% org + 20% Mo) 3,1 a 15,5 a A7 (NPK) 2,0 b atatan. Angka yang diikut oleh huruf yang sa a berbeda tidak nyata 14,9 a enurut Uji BNT α= 0 05 Data pada Gambar 1 menunjukkan bahwa bobot kering tanaman tertinggi pada 6 MST diperoleh pada perlakuan A1 (ekstrak krandalit 100%) meskipun berbeda tidak nyata denagn perlakuan lainnya. Data yang ditunjukkan pada Gambar 5, terlihat bahwa formula pupuk fosfat cair-plus (A3 =60% ekstrak 30 krandalit + 30% fraksi humat + 10 % Mo ) berpengaruh lebih baik dibandingkan dengan perlakuan A2 (80% ekstrak krandalit + 15% fraksi humat + 5% Mo) dan A5 =20% ekstrak krandalit + 60% fraksi organic + 20% Mo). Gambar 2. Pengaruh Perlakuan Pupuk Fosfat Cair-Plus terhadap bobot kering tanaman Perlakuan komposisi campuran ekstrak krandalit sebagai sumber P, fraksi humat, dan Mo berpengaruh tidak nyata terhadap komoponen tinggi tanaman (2, 4, dan 6 MST), dan bobot kering tanaman (6 MST), tetapi berbeda nyata terhadap bobot kering tanaman (4 MST). Data secara keseluruhan memberikan indikasi bahwa terdapat kecenderungan penambahan bobot kering tanaman akan menurun seiring dengan berkurangnya unsur hara P yang diberikan. Data secara keseluruhan memberikan indikasi bahwa terdapat kecenderungan penambahan bobot kering biji kedelai akan menurun seiring dengan berkurangnya unsur hara P yang diberikan melalui ekstrak krandalit. Tinggi Tanaman akibat Perbedaan dosis dan Jenis Pupuk Data hasil percobaan pot di Lapaagan yang meliputi komponen pertumbuhan tanaman disajikan pada Gambar 3, 4 dan 5. Data pada gambar 3 menunjukkan bahwa tinggi tanaman bervariasi. Perlakuan P4 menghasilkan tinggi tanaman tertinggi, dan yang terendah adalah perlakuan P 2. Pada perlakuan tanpa pemberian pupuk (P0) memberikan tinggi tanaman lebih tinggi dibandingkan perlakuan P2, NPK, dan NASA. Gambar 3. Pengaruh perlakuan terhadap tinggi tanaman kedelai Dosis pemberian pupuk relatif berpengaruh meningkatkan pertumbuhan tanaman dibandingkan dengan jenis pupuk NPK dan NASA. 31 Jumlah cabang Perlakuan dosis pupuk fosfat cair-plus berpengaruh terhadap jumlah cabang tanaman kedelai dan sangat bervariasi. Jumlah cabang terbanyak adalah pada perlakuan P 2 sedangkan paling rendah pada perlakuan P4.. Gambar 4. Pengaruh perlakuan terhadap jumlah cabang tanaman kedelai Pupuk fosfat cair-plus yang dihasilkan dari campuran ekstrak krandalit, fraksi humat, dan Mo yang digunakan dalam penelitian ini lebih berpengaruh terhadap komponen produksi dibandingkan komponen vegetatif karena peranan hara P lebih dominan. Jumlah cabang tanaman kedelai tidak dipengaruhi oleh jenis pupuk yang digunakan. Dalam penelitian ini data jumlah cabang yang diperoleh tidak memberikan gambaran tentang pengaruh tersebut. Jumlah bintil akar Jumlah bintil akar akibat pengaruh perlakuan disajikan pada Gambar 5. Gambar 5. Pengaruh dosis dan jenis pupuk terhadap jumlah bintil efektif Gambar 5 menunjukkan bahwa pemberian pupuk fosfat cait-plus pada takaran rendah cenderung menurunkan jumlah bintil akar, sedangkan pada dosis 60 L ha-1 (P5) meningkatkan jumlah bintil akar dan relatif sama dengan pengaruh pemberian pupuk lainnya. 32 Hasil kedelai Gambar 6 menunjukkan bahwa dosis optimum 30 L ha -1 pupuk fosfat cair-plus yang dihasilkan dari campuran ekstrak krandalit, fraksi humat dan Mo dapat meningkatkan hasil tanaman kedelai dari 1,6 ton ha-1 menjadi 2,04 ton ha-1 dan cenderung meurun jika dosisnya ditingkatkan. Gambar 6. Pengaruh dosis perlakuan terhadap hasil kedelai PEMBAHASAN Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa perlakuan formula pupuk P-Cair-Plus dari campuran ekstrak krandalit, fraksi humat, dan Mo berpengaruh nyata terhadap komponen bobot kering tanaman (4 MST), dan berpengaruh tidak nyata terhadap bobot kering tanaman 6 MST. Bobot kering tanaman tertinggi pada perlakuan A6 (tanpa ekstrak krandalit + 80% fraksi humat + 20% Mo ) tetapi berbeda tidak nyata denga nperlakuan lainnya, kecuali terhadap perlakuan NPK. Hal ini disebabkan peranan fraksi humat lebih dominan mensuplai N dan memperbaiki metabolisme tanaman, sedangkan Mo berperan dalam meningkatkan aktivitas enzim dalam proses fiksasi N sehingga bobot kering tanaman meningkat. Ekstrak krandalit sebagi sumber P dan beberapa hara mikro lebih berperan dalam fase generatif tanaman dibandingkan fase vegetatif. Hasil pengamatan menunjukkan bahwa terdapat bintil pada perakaran tanaman untuk semua perlakuan, namun keefektivan bintil yang terbentuk berpengaruh tidak nyata terhadap komponen pertumbuhan tanaman. Pengaruh perlakuan pada komponen tinggi tanaman relatif tidak memiliki pola yang teratur. Hal ini disebabkan keseimbangan nutrisi belum berpengaruh nyata pada awal pertumbuhan (0 sampai 4 MST). Penyerapan hara maksimum diduga terjadi pada umur 3-4 MST, dan pada saat memasuki fase generatif, penyerapan fosfat lebih tinggi dibandingkan dengan penyerapan hara lainnya. Pengisian polong pada tanaman kedelai sangat ditentukan oleh ketersediaan hara P, karena P sanagat dibutuhkan dalam transfer energi, pembentukan ATP dan ADP. Energi dari sinar matahari yang terperangkap pada daun akan diubah menjadi energi kimia yang relatif stabil, selanjutnya digunakan untuk mereduksi C menjadi karbohidrat melalui fotosintesis. Pupuk fosfat cair-plus yang digunakan dalam penelitian ini lebih berpengaruh terhadap komponen produksi dibandingkan komponen vegetatif karena peranan hara P lebih dominan. Jumlah cabang tanaman kedelai tidak dipengaruhi oleh jenis pupuk yang digunakan. Dalam penelitian ini data 33 jumlah cabang yang diperoleh tidak meberikan gambaran tentang pengaruh tersebut. Hal ini disebabkan residu pupuk pada pertanaman padi sebelum percobaan di lahan yang sama masih berpengaruh terhadap pertumbuhan tananan kedelai. Residu pupuk urea dan NPK yang digunakan petani lebih berpengaruh terhadap komponen vegetatif dibandingan komponen generatif. Pembentukan bintil akar sangat dipengaruhi oleh aktivitas bakteri rhizobium yang bersimbiosis dengan akar tanaman. Diduga kondisi tanah pada lokasi penelitian sangat menunjang aktivitas bakteri rhizobium. Pemberian bahan organik dapat meningkatkan kelarutan P di dalam tanah melalui pembentukan fosfo-humus yang lebih mudah diserap oleh tanaman (Tisdale et al., 1993). SIMPULAN Kesimpulan dari hasil penelitian berdasarkan variabel pertumbuhan dan produksi tanaman kedelai adalah pupuk fosfat cair yang diformulasi dari ekstrak krandalit, fraksi humat kotoran sapi dan unsur mikro molybdenum (Mo) berpengaruh terhadap bobot kering tanaman kedelai (4 MST) dibandingkan tanpa pemberian pupuk P. Formula terbaik yang dapat digunakan sebagai pupuk P yang dihasilkan dari komposisi ekstrak krandalit, fraksi humat kotoran sapi, dan unsur Mo adalah perlakuan A 3 (60% ekstrak krandalit + 30% fraksi humat kotoran sapi + 10% unsur mikro Molibdenum) untuk meningkatkan pertumbuhan kedelai pada Inceptisols Prafi. Dosis optimum pupuk fosfat cair-plus dari hasil penelitian ini adalah 30 L ha-1 dapat meningkatkan produksi kedelai dari 1,6 t ha-1 menjadi 2,04 t ha-1 pada Inceptisols Prafi Manokwari. UCAPAN TERIMA KASIH Artikel ini merupakan bagian dari hasil penelitian MP3EI. Terima kasih kami sampaikan kepada DP2M Dikti, yang telah mendanai kegiatan penelitian ini melalui Hibah Kompetitif Nasional Tahun 2013-2014. KEPUSTAKAAN Badan Pusat Statistik (BPS). 2006. Angka Tetap Tahun 2005 dan Angka Ramalan II Tahun 2006 Produksi Tanaman Pangan. Badan Pusat Statistik, Jakarta. Musaad, I. 2011. Beberapa sifat Kimia Tanah Akibat Pemberian Ekstrak Krandalit dan Fraksi Bahan Organik Pada Humic Hapludults. Jurnal Agrotek.Vol 2. No.3. Fakultas Pertanian dan Teknologi Pertanian UNIPA Manokwari. Musaad, I. 1996. Pengaruh Pemanasan dan Pengasaman terhadap Tahana Fosfat Tanah Endapan Fosfat Krandalit Ayamaru Sorong. Bulletin Penelitian Pascasarjana UGM. 9 (3B), Agustus 1996.h. 333-337 Sanchez, P. A. 1992. Sifat dan Pengelolaan Tanah Tropika (Terjemahan Jayadinata, J.J). Penerbit ITB Bandung Stevenson, F. J. 1986. Humus Chemistry, Genesis, Composition, Reactions. John Wiley and sons, New York. Tisdale, S., L. Nelson, and J. D. Beaton. 1993. Soil Fertility and Fertilizers. Second edition. Macmillan Publishing Co. London Pp. 694-695. 34 BIOASSAY EKSTRAK KASAR (CRUDE EXTRACT) DAUN BROTOWALI (Tinospora crispa (L) Miers) PADA BAKTERI GRAM POSITIF DAN BAKTERI GRAM NEGATIF BIOASSAY CRUDE EXTRACT OF BROTOWALI LEAVES (Tinospora crispa (L) Miers) IN GRAM POSITIF AND NEGATIF BACTERIALS Ida Ayu Putu Suryanti Jurusan Pendidikan Biologi, F.MIPA Universitas Pendidikan Ganesha, Singaraja Email: [email protected] INTISARI Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui daya hambat ekstrak kasar daun brotowali pada beberapa bakteri Gram positif (Staphylococcus aureus, Steptococcus pyogenes dan Bacillus cereus) dan beberapa bakteri Gram negatif (Salmonella thypi, Escherichia coli dan Vibrio colerae) dengan menggunakan metode Kirby-Bauer. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi, Laboratoriom Kimia Organik dan Laboratorium Fisiologi Tumbuhan, Jurusan Biologi, FMIPA Universitas Udayana selama 4 bulan. Secara umum, zona hambat pada beberapa bakteri uji dalam penelitian ini, yang dibentuk oleh ekstrak kasar daun brotowali dengan konsentrasi 100 ppm, 1000 ppm, dan 10000 ppm, menunjukkan hasil yang berbeda nyata (P < 0,05) dengan kontrol, walaupun belum diketahui senyawa aktif apa saja dalam daun brotowali yang bersifat bakteriostatik atau bakterisida. Pada bakteri Gram positif, zona hambat tertinggi yang terbentuk dari ekstrak daun brotowali dengan konsentrasi rendah (1 ppm dan 10 ppm) terdapat pada Staphylococcus aureus yaitu berturut-turut 0,32 cm dan 0,47 cm sedangkan pada bakteri Gram negatif terdapat pada Escherichia coli yaitu 0,87 cm dan 0,49 cm. Bakteri Gram positif cenderung menunjukkan sifat yang lebih resisten pada perlakuan ekstrak daun brotowali dengan konsentrasi rendah jika dibandingkan dengan bakteri Gram negatif, sedangkan pada konsentrasi tinggi, bakteri Gram positif relatif lebih sensitif. Kata kunci: Daun Tinospora crispa (L) Miers, Metode Kirby-Bauer, Bakteri ABSTRACT The main objective of this research was to investigate the toxicity of crude extract of leaves of Tinospora crispa (L) Miers on several Gram positive bacterial species (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes and Bacillus cereus), several Gram negative bacterial (Salmonella thypi, Escherichia coli and Vibrio colerae) using Kirby-Bauer method. The project was conducted at the Laboratory of Microbiology, Organic Chemistry and Plant Physiology, Faculty of Mathematic and Natural Sciences, Udayana University. The results showed that the crude extract of leaves of Tinospora crispa (L) Miers inhibited the growth of both Gram positive and Gram negative bacterial species when exposed at the consentration of 100 ppm, 1000 ppm and 10,000 ppm in vitro. However, it is not known which of active compounds of brotowali leaves have bacteriostatic or bactericidal properties. In Grampositive bacteria, the highest inhibition zones formed by extracts of Tinospora crispa (L) Miers leaves at low concentrations (1 ppm and 10 ppm) on Staphylococcus aureus were 0.32 cm and 0.47 cm, on Gramnegative bacteria Escherichia coli were 0.87 cm and 0.49 cm. Gram-positive bacteria are more resistant at low concentration of Tinospora crispa (L) Miers extract when compared to Gram-negative bacteria. Whereas, at high concentrations, Gram-positive bacteria are relatively more sensitive. Keywords: Leave of Tinospora crispa (L) Miers, Kirby-Bauer method, bacteria 35 PENDAHULUAN Brotowali (Tinospora crispa (L) Miers) merupakan salah satu tanaman obat yang berpotensi menyembuhkan berbagai macam penyakit. Di Indonesia, brotowali banyak tersebar di Jawa, Bali, dan Maluku (Manan, 1996). Tanaman brotowali digolongkan dalam famili Menispermaceae yang tumbuh merambat dan berkembang dengan baik di daerah tropis. Batangnya mempunyai ciri-ciri berbintil-bintil rapat (duri semu) dan tidak beraturan, lunak, berair, rasanya pahit, dan mempunyai panjang kurang lebih 2,5 meter. Daunnya berbentuk jantung (cordatus), agak membulat, ujungnya lancip, dan termasuk jenis daun tunggal. Bunganya berwarna hijau muda dengan lima mahkota bunga dan berukuran kecil. Buahnya berkumpul dalam tandan serta berwarna merah muda (Kresnady dan Lentera, 2003). Senyawa kimia yang terkandung dalam tanamam brotowali antara lain alkaloid berberina, damar lunak, pati, glikosida, pikroretosid, harsa, pikroretin, tinokrisposid, kolumbin, dan kaokulin (Kresnady dan Lentera, 2003). Alkaloid berberin yang banyak ditemukan di akar merupakan senyawa alkaloid berwarna kuning yang sangat langka dan mempunyai kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri. Penyakit yang dapat disembuhkan antara lain: demam, sakit perut, diabetes melitus, sakit kuning, rematik, malaria, dan luka infeksi yang disebabkan oleh bakteri (Robinson, 1995 dan Manan, 1996). Penelitian Limyati dkk. (1998) tentang efek farmakologi brotowali menunjukkan bahwa ekstraksi batang brotowali pada konsentrasi 1,0 g/ml bersifat bakteriostatik terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus serta bersifat fungistatik terhadap Tricophyton ajelloi pada konsentrasi 0,8 g/ml. Ekstrak ini tidak menunjukkan efektivitas terhadap Candida albican. Ekstrak batang brotowali juga dapat menghambat Streptococcus beta hemoliticus standar strain WHO dengan zona hambat 14,50 mm dengan kadar hambat maksimum 0,25 g/ml, Staphylococcus epidermis sebesar 12,43 mm dengan kadar hambat maksimum 0,4 g/ml, Streptococcus aureus sebesar 10,91 mm dengan hambatan maksimum 0,4 g/ml, dan yang terkecil adalah Salmonella thyposa sebesar 8,11 mm dengan kadar hambat maksimum 0,9 g/ml (Soemiati dkk., 1998). Penelitian mengenai uji toksisitas ekstrak terutama bagian batang dan akar tanaman brotowali yang dikenal sebagai tanaman obat telah banyak dilakukan. Hanya saja uji toksisitas bagian daun tanaman brotowali masih belum banyak dilakukan. Berdasarkan hal tersebut di atas, maka dilakukan bioassay ekstrak kasar daun brotowali pada beberapa bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif. MATERI DAN METODE Material Hidup Material hidup berupa bakteri Gram positif (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Bacillus cereus) dan bakteri Gram negatif (Salmonella thypi, Escherichia coli dan Vibrio colerae) diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi, Jurusan Biologi F.MIPA UNUD dan Balai Laboratorium Kesehatan (BLK) Sanglah. Daun brotowali diperoleh di sekitar Kampus Bukit Jimbaran, Universitas Udayana, Bali. Bahan Habis Bahan habis yang digunakan dalam penelitian ini adalah nutrient broth (NB) Becton Dickinson, nutrient agar (NA) Merck, alkohol, methanol, dan aquades steril. Larutan Stok Larutan stok (10.000 ppm) dibuat dengan cara melarutkan 1 gram ekstrak kering daun brotowali dalam pelarut dan volume akhir diatur sampai 100 ml. Konsentrasi kerja (1000 ppm, 100 ppm, 10 ppm, 36 dan 1 ppm) dibuat dengan cara mengencerkan larutan stok ini dengan menggunakan rumus pengenceran (M1 x V1 = M2 x V2). Ekstraksi Daun brotowali yang telah dicuci bersih dengan air mengalir dikering anginkan, diblender sampai menjadi bentuk tepung, dan ditimbang 100 gram untuk dimaserasi dengan 500 ml metanol pada suhu kamar selama 72 jam. Setelah itu, disaring, dan diuapkan dengan vacum rotary evaporator pada suhu 40oC dengan tujuan untuk memisahkan ekstrak dari pelarutnya. Ekstrak yang diperoleh dikeringkan hingga membentuk kristal, sebelum dilakukan bioassay. Bioassay Ekstrak Daun Brotowali Suspensi bakteri uji dibuat dengan cara menginokulasi 50 ml medium NB dengan 1 loop jarum ose biakan murni bakteri uji. Medium yang sudah diinokulasi tersebut diinkubasi pada 37 oC selama 24 jam untuk memperoleh densitas suspensi yang setara dengan 10 8 sel/ml. Aktivitas antibakteri dari ekstrak daun brotowali dengan berbagai konsentrasi ditentukan dengan menggunakan etode Kirby dan Bauer 1966 dala Dwidjose utro 1994 . Untuk e buat “bacterial Lawn” sebanyak 100 µl sus ensi bakteri uji disebarkan secara erata ada er ukaan ediu NA. Kemudian kertas cakram yang sudah diisi (didepositkan) sebanyak 20 µl ekstrak dengan konsentrasi yang bervariasi dite elkan ada er ukaan “bacterial lawn” dan diinkubasi ada suhu 7 oC selama 24 jam. Kertas cakram yang diisi (didepositkan) dengan pelarut saja dengan volume yang sama dengan ekstrak berfungsi sebagai kontrol. Aktivitas antibakteri dari ekstrak ditunjukkan oleh terbentuknya zona bening (halo) di sekitar kertas cakram pada medium. Uji ini dilakukan sebanyak 5 kali ulangan, diameter hambatan diukur sebanyak 3 kali, dan dirata-ratakan. Percobaan bioassay pada bakteri uji menggunakan rancangan acak lengkap faktorial, dengan 5 variasi konsentrasi ekstrak ditambah kontrol dan 6 jenis bakteri yang terdiri dari 3 bakteri Gram positif dan 3 bakteri Gram negatif. Analisis Data Data yang diperoleh pada penelitian ini dianalisis secara statistik dengan menggunakan analisis sidik ragam (ANOVA), dan bila hasilnya berbeda nyata pada P < 0,05, maka analisis dilanjutkan dengan uji jarak berganda Duncan (Vincent, 1991). HASIL Zona hambat yang bervariasi yang disebabkan oleh perlakuan ekstrak kasar daun brotowali (Tinospora crispa (L) Miers) pada beberapa bakteri Gram positif dapat dilihat pada Grafik 1 dan bakteri Gram negatif pada Grafik 2. Grafik 1. Daya Hambat Ekstrak Kasar Daun Brotowali terhadap Beberapa Bakteri Gram positif 37 Pada konsentrasi ekstrak rendah (1 ppm dan 10 ppm), Staphylococcus aureus menunjukkan zona hambat yang paling tinggi yaitu berturut-turut 0,32 cm dan 0,47 cm, sedangkan zona hambat terendah terdapat pada Bacillus cereus. Ketiga bakteri uji menunjukkan hasil yang bervariasi pada konsentrasi tinggi (dari konsentrasi 100 ppm sampai 10000 ppm) (Grafik 1.). Grafik 2. Daya Hambat Ekstrak Kasar Daun Brotowali terhadap Beberapa Bakteri Gram negatif. Grafik 2 menunjukkan bahwa Escherichia coli kurang resisten dibandingkan dengan bakteri uji lainnya, baik pada ekstrak kasar brotowali dengan konsentrasi tinggi maupun rendah. Zona hambat yang terbentuk pada konsentrasi rendah (1 ppm dan 10 ppm) masing-masing adalah 0,87 cm dan 0,49 cm. Sedangkan Vibrio colerae terlihat paling resisten bila dibandingkan dengan bakteri Gram negatif lainnya pada penelitian ini. Tabel 1. Diameter rata-rata zona hambatan ekstrak daun brotowali (Tinospora crispa (L) Miers) pada berbagai konsentrasi terhadap bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif Diameter Zona Hambatan (cm) Konsentrasi (ppm) 0 Bakteri Gram Positif Staphylococcus aureus 0,00 ± 0,00a abcdefg Streptococcus pyogenes 0,00 ± 0,00a 0,23 ± 0,33 abcde Bakteri Gram Negatif Bacillus cereus Salmonella thypi 0,00 ± 0,00a 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00a a 1 0,32 ± 0,44 10 0,47 ± 0,43bcdefghi 0,28 ± 0,38abcde 0,09 ± 0,21ab 100 0,63 ± 0,55defghij 0,43 ± 0,39bcdefg 0,59 0,33cdefghi 1000 0,68 ± 0,38efghijk 0,72 ± 0,33f 10000 0,91 ± 0,01i 1,02 ± 0,05h 0,35 ± 0,33 bcde Escherichia coli 0,00 ± 0,00a 0,49 0,45bcdefg Vibrio colerae 0,00 ± 0,00a ± 0,14 ± 0,31abc 0,44 ± 0,40bcdefg 0,86 ± 0,04ghi 0,15 ± 0,32abcd 0,56 ± 0,31cdefg 0,87 ± 0,07hi 0,43 ± 0,39bcdefg 0,81 ± 0,07gh 0,57 ± 0,32cdefg 0,89 ± 0,08f 0,71 ± 0,02f 0,99 ± 0,04jk 0,83 ± 0,07gh 1,06 ± 0,06h 0,77 ± 0,04g ± Keterangan : Nilai-nilai pada Tabel 1 ± standar deviasi merupakan rata-rata dari 5 x ulangan. Nilai-nilai yang diikuti huruf yang sama menunjukkan nilai rata-rata yang tidak berbeda nyata (P < 0,05) dengan 4 ulangan. Nilai-nilai yang diikuti huruf yang sama menunjukkan nilai rata-rata yang tidak berbeda nyata (P < 0,05), berdasarkan pada uji jarak berganda Duncan setelah dilakukan analisis sidik ragam (ANOVA). 38 Secara umum, terjadi peningkatan diameter hambatan pada bakteri uji yang berbanding lurus dengan meningkatnya konsentrasi ekstrak, walaupun tidak berbeda nyata secara statistik (P > 0,05). Dalam beberapa kasus, seperti pada uji terhadap Streptococcus pyogenes, Bacillus cereus, dan Vibrio colerae, aplikasi ekstrak sampai 10 ppm menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata dengan kontrol (0 ppm) (P > 0,05). Hambatan yang terjadi pada kasus ini lebih banyak disebabkan oleh resistensi bakteribakteri tersebut setelah diberikan perlakuan. Efek ekstrak mulai terlihat pada pertumbuhan bakteri uji, pada saat konsentrasi ekstrak ditingkatkan menjadi 100 ppm atau lebih, dengan zona hambatan yang terbentuk secara statistik berbeda nyata dengan kontrol (P < 0,05). Namun secara umum, zona hambatan yang terbentuk pada semua bakteri uji, yang diberikan ekstrak yang konsentrasinya 10.000 ppm, menunjukkan hasil yang berbeda nyata dengan semua konsentrasi yang dipakai (Tabel 1). PEMBAHASAN Pada semua kasus, konsentrasi ekstrak memberikan hasil yang berbeda nyata dengan kontrol (P < 0,05). Zona hambatan yang terjadi disebabkan oleh senyawa aktif yang terdapat di dalam ekstrak kasar daun brotowali. Beberapa penelitian yang serupa yang menggunakan ekstrak daun brotowali juga telah banyak dilakukan. Suanda (2002) misalnya melakukan bioassay ekstrak ini dapat mengendalikan larva Plutella xylostella yang menyerang tanaman kubis. Limyati dkk. (1997; 1998), dan Chang (2003) juga menyatakan bahwa ekstrak tumbuhan ini sangat efektif untuk mengontrol pertumbuhan bakteri uji. Walaupun tidak diidentifikasi dalam penelitian ini, beberapa peneliti lain menemukan bahwa ekstrak tumbuhan brotowali mengandung senyawa anti bakteri, senyawa alkaloid berberin (Anonim, 2003). Senyawa ini juga telah banyak dilaporkan sebagai senyawa antibakteri pada luka yang masih basah. Menurut Martin (1982) dan Pelczar dan Chan (1988) senyawa kimia yang mengandung gugus fenol (termasuk alkaloid berberin) dapat merusak proses-proses di dalam sel dengan cara mengendapkan protein atau mendenaturasi protein. Dalam penelitian ini masih belum diketahui apakah senyawa yang diidentifikasi oleh peneliti-peneliti di atas berperan dalam menghambat pertumbuhan bakteri uji. Untuk setiap konsentrasi yang didedahkan, zona hambatan tidak dipengaruhi oleh jenis bakteri uji, walaupun terjadi variasi zona hambatan pada jenis bakteri uji untuk konsentrasi ekstrak yang sama namun secara statistik (P > 0,05), hasil tersebut tidak menunjukkan hasil yang berbeda nyata (P > 0,05) (Tabel 1). Hal menarik yang dapat diamati pada tabel ini adalah bakteri-bakteri Gram positif secara umum cenderung menunjukkan sifat yang lebih resisten pada ekstrak daun brotowali dengan konsentrasi rendah jika dibandingkan dengan bakteri Gram negatif. Sebaliknya, pada konsentrasi tinggi bakteri Gram positif relatif lebih sensitif terhadap ekstrak daripada bakteri Gram negatif, walaupun hasil-hasil ini tidak berbeda nyata (P > 0,05). Penyebab dari kecenderungan tersebut tidak diketahui dengan pasti, dan perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai hal tersebut. Aplikasi ekstrak kasar daun brotowali, khususnya untuk mengontrol bakteri-bakteri penyebab penyakit yang disebabkan oleh bakteri uji, memerlukan konsentrasi yang sedikit bervariasi tergantung pada jenis bakteri yang akan dikontrol. Namun, konsentrasi yang disarankan adalah konsentrasi terendah yang memberikan efek nyata pada pertumbuhan bakteri uji (secara statistik berbeda nyata dengan kontrol). Hal ini dilakukan untuk meminimalkan efek-efek samping yang mungkin timbul sebagai akibat diaplikasikannya ekstrak ini pada penderita. Dalam penelitian ini belum diidentifikasi apakah ekstrak kasar daun brotowali bersifat bakteriostatik atau lethal pada bakteri uji yang didedahkan. Oleh karena itu, penelitian lanjutan yang berhubungan dengan aspek tersebut masih perlu dilakukan dikemudian hari. 39 SIMPULAN Berdasarkan hasil penelitian dapat ditarik kesimpulan : 1. Zona hambat yang terbentuk pada perlakuan ekstrak dengan konsentrasi 100 ppm, 1000 ppm dan 10000 ppm menunjukkan hasil yang berbeda nyata dengan kontrol. 2. Pada bakteri Gram positif, zona hambat tertinggi dari ekstrak daun brotowali dengan konsentrasi rendah (1 ppm dan 10 ppm) terdapat pada Staphylococcus aureus yaitu berturut-turut 0,32 cm dan 0,47 cm sedangkan pada bakteri Gram negatif terdapat pada Escherichia coli yaitu 0,87 cm dan 0,49 cm. 3. Bakteri Gram positif menunjukkan sifat yang lebih resisten pada perlakuan ekstrak daun brotowali dengan konsentrasi rendah sedangkan pada konsentrasi tinggi bakteri ini cenderung lebih sensitif. UCAPAN TERIMA KASIH Penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu Ni Putu Adriani Astiti dan Bapak Yan Ramona yang telah memberikan masukan dan saran pada penelitian ini serta semua pihak yang membantu. KEPUSTAKAAN Anonim. 2003. Brotowali (Tinospora crispa Miers. Hool. F & Thems). http//www.asiamaya.com/ jamu/isi/brotowali_tinosporacrispa.html. Diakses tgl. 17 Januari 2004 Chang, S.S. 2003. Brotowali. Warta Tanaman Obat Indonesia. http//www. Changjaya-abadi.com/ alternatives-11.html. Diakses pada 9 Oktober 2004. Kresnady, B dan T. Lentera. 2003. Khasiat dan Manfaat Brotowali, Sipahit Yang Menyembuhkan. Agromedia Pustaka. Dwidjoseputro, D. 1994. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta: Djambatan. Limyati, D.A., N. Arif, dan Asmawati. 1997. Daya Antimikroba. Penentuan Daya Anti Bakteri Batang Brotowali dengan Metode Bioautografi. Fakultas Farmasi Unversitas Widya Mandala. http://www.lembaga.wima.ac.id/ ippm/dinaas97.pdf. Diakses tanggal 15 Juni 2003. Limyati, D.A, Artawan, dan H. Junita. 1998. Daya Antimikroba Ekstrak Brotowali terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans, dan Trichophyton ajelloi. Fakultas Farmasi Unversitas Widya Mandala. http://www.lembaga.wima.ac.id/ippm/ppot/Abstrak-PENPPOT-WEB-Mikro.hlml, Diakses tgl.15 September 2003 Manan, H.A. 1996. Tanaman Brotowali, Pahit Tapi Bermanfaat. Harian Suara Pembaharuan. 18 Jan 2003. Martin, A.R. 1982. Obat Anti Infeksi. Buku Teks Wilson dan Gisvold. Kimia Farmasi dan Medical Organik Edisi VIII. Editor R.F Doerge. Penerjemah: A.M. Fatah. IKIP Semarang Press. Pelczar, M.J., dan E.C.S. Chan. 1998. Dasar-dasar Mikrobiologi II. Penerjemah: R.S. Hadiototomo. UI Press. Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Penerbit ITB. Bandung. Suanda, I W. 2002. Aktivitas Insektisida Ekstrak Daun Brotowali (Tinospora crispa (L) Miers) terhadap Larva Pluttela xylostella L. pada Tanaman Kubis. Program Studi Teknologi Pertanian Universitas Udayana. Tesis S-2. Tidak dipublikasikan. Soemiati, A., Katrin., Ema, R. 1998. Uji Daya Antibakteri Infus Batang Brotowali Terhadap Beberapa Kuman Standar. Warta Tumbuhan Obat Indonesia, 2(4): 20-2 Vincent, G. 1991. Metode Rancangan Percobaan. Penerbit Armico Bandung. 40 KARAKTER MORFOLOGI DAN TINGKAT PERTUMBUHAN ANAKAN SEBAGAI BUKTI TAKSONOMI PENDUKUNG VARIETAS Pandanus tectorius ASAL PULAU ROSWAR, TELUK WONDAMA, WEST PAPUA MORPHOLOGICAL CHARACTER AND THE GROWTH RATE OF OFFSPRINGS AS AN EVIDENCE OF TAXONOMIC VAREITY OF Pandanus tectorius FROM ROSWAR ISLAND, WONDOMA GULF, WEST PAPUA Nurhaidah I. Sinaga1, Martinus Iwanggin1, Cicilia M.E. Susanti1 1 Fakultas Kehutanan, Universitas Papua Email: [email protected] dan [email protected] INTISARI Pandanus mempunyai berbagai varieatas dalam speciesnya, tetapi bebrapa variasi tidaklah cukup membedakan antar spesiesnya. Hal ini karena kami belum memiliki atau menemukan karakter yang lengkap dari specimen herbarium, seperti kami tidak dapat membedakan antara bunga jantan dan betina. Hal ini terjadi pada Pandanus tectorius dari Pulau Roswar. Oleh karena itu kami memerlukan data lain dari sumber penting lainnya. Itulah alasanny adilakukan penelitian ini pada P. tectorius dari Pulau Roswar, Teluk Cendrawasih, Papua. Dua varietas dari spesies ditanam menggunakan desain penelitian dari metode statistic. Hasilnya menunjukkan bahwa Pandanus mempunyai dua varietas. Perbedaan kedua varietas ditemukan baik pada karakter morfologi yang mana buahnya, khususnya jarijari dan juga daun dan karakter pertumbuhan anakannya. Pertumbuhan anakan dari Pandanus tectorius memberikan persetujuan dalam level taxon. Paper ini akan mendiskusikan dan memperluas tektik dan karakter-kharakter khususnya. Kata kunci: Pandanus tectorius, Varietas, Bukti Taksonomi Pendukung, Pulau Roswar ABSTRACT Pandanus has many variaton under species but sometimes the variation has not enough to separate the species. It is because we don’t have complete charactes during our research or our characters from specimen herbarium not supported, like we missing the male or female flowers or we don’t know yet which one is the male flowers of the female one. This problem present on Pandanus tectorius from Roswar island too. So that we need supported characters from other impotant information. That was the reason why we did our researches on the P. tectorius from Roswar Island, Cenderawasih Bay, Papua. Two varietas of the species were planting using experimental design of statistical method. The result showed that the Pandanus have two varieties. The differences between two varieties are found on both morphological characters that are fruits, especially phalanges also leaves and developing of seedling characters. The growing seedling of Pandanus tectorius has given approval for the level of the taxon. This paper will be discussed and elaborated more on the uniqueness and distinctive characters. Keywords: Pandanus tectorius, Varietas, supporting taxonomic evident, Roswar island 41 PENDAHULUAN Pandanaceae merupakan salah satu kelompok tumbuhan pantai yang pemanfaatannya telah dilakukan oleh masyarakat sejak dulu, antara lain sebagai bahan makanan, pewangi, zat warna, obatobatan dan bahan anyaman (atap, tikar, tempat rokok, tas, dompet). Sebagai bahan ayaman produksi dari pandan telah diimpor hingga ke Eropa. Untuk menghasilkan ayaman yang berkualitas maka serat pandan perlu diperhatikan. Serat berkaitan erat dengan varietas pandan yang digunakan. Selain itu untuk kelangsungan produksi diperlukan usaha budidaya pandan. Serat dari varietas mana yang memiliki sifat unggul, kemudian ada berapa varietas pandan yang penting untuk diteliti dan dikembangkan lebih lanjut. Serangkaian penelitian yang dilakukan menunjukan ada 2 (dua) varietas Pandan di Pulau Roswar dengan bukti taksonomi dari karakter morfologi yang didukung oleh karakter pandan saat pertumbuhan anakan. MATERI DAN METODE Penelitian dilakukan pada bulan July hingga Oktober 2012. Bertempat di Pulau Roswar, laboratorium Silvikultur serta laboratorium Konservasi dan Lingkungan Fahutan Unipa. Anakan diambil dari pulau Roswar dan ditanam dengan mengikuti pola Rancangan Acak Lengkap dengan media tanam perbadingan tanah dan pasir sebagai perlakuan. HASIL P. tectorius di Pulau Roswar memiliki perbedaan dengan jenis umumnya pada bunga jantan yang dimiliki. Jenis Roswar ini juga menunjukan ciri monoceus dibandingkan dengan dioceus. Taksonomi Pandanus tectorius Pandanus tectorious yang tumbuh di Kawasan Taman nasional Teluk Cenderawasih yakni di Kampung Yende dan Wasior hanya terdiri dari satu varietas. Sementara itu yang tumbuh di Pulau Roswar yakni kampung Waprak dan Yomber ada 2 varietas. Selanjutnya varietas tersebut dibedakan atas varietas A dan B. Deskripsi dari masing-masing varietas sebagai berikut: P. tectorius varietas A Perawakan: tumbuh berumpun dan berkembang menjadi pohon kecil 2 -8 m. Kanopi tersebar. Akar nafas pada batang, permukaan akar berduri 2-14 cm diameter, panjang 1-1.5 m. Batang berduri dengan diameter 15-25 cm. Daun tunggal, tersusun berbaris tiga dalam garis spiral, panjang 100-200 cm, lebar 7-8 bentuk melidah atau memata pedang, menjangat, ujung runcing dengan panjang lebih dari 15 cm, seluruh tepi daun berduri tajam, permukaan atas berwarna hijau, permukaan bawah hijau kekuningan. Bunga berumah satu, bunga jantan dan betina berada dalam satu pohon (umumnya berumah dua). Bunga jantan berwarna putih, muncul beberapa perbungaan sekaligus 5-7 bunga dalam satu percabangan.Bunga jantan terletak di bawah bunga betina. Memiliki 9 bracts yang tersusun tiga tiga dalam lingkaran spirali; Perbungaan jantan memiliki tangkai perbungaan 4-5 cm, terdapat 4 bunga yang tersusun mengumpul tepat di tengah dengan bunga jantan yang menyebar sepanjang 15-20 cm rakhis. Perbungaan betina semusim buah hanya 1 buah dan terminal atau berada di ujung perbungaan. Cephalium terlihat seperti buah nenas, bentuk bulat, diameter 20-25cm; tersusun atas kumpulan buah majemuk (phalanges), yang berisi sekitar 50-60 phalanges; setiap phalanges memiliki 15 -19 sub phalanges; berwarna hijau kekuningan saat matang (tidak berwarna kuning atau merah seperti varietas umumnya) dan pada 42 permukaan atas sub phalanges memiliki 5 sisi yang tegas terlihat hamper menyerupai pyramid tumpul dengan hanya satu stigma tertinggal tepat di tengahnya. A B Gambar 1 A. P. tectorius varietas A: cephalium diameter 20-25 cm; dengan jumlah phalange 50-60; jumlah sub phalange 15-19; B. P. tectorius varietas B:cephalium diameter 15-20 cm; dengan jumlah phalange 35-45; sub phalange 7-9. P. tectorious varietas B Perawakan: tumbuh berumpun dan berkembang menjadi pohon kecil 2 -8 m. Kanopi tersebar. Akar nafas pada batang, permukaan akar berduri 2-14 cm diameter, panjang 1-1.5 m. Batang berduri dengan diameter 15-25 cm. Daun tunggal, tersusun berbaris tiga dalam garis spiral, panjang 100-150 cm, lebar 5-6 cmbentuk melidah atau memata pedang, menjangat, ujung runcing dengan panjang lebih dari 15 cm, seluruh tepi daun berduri tajam, permukaan atas berwarna hijau, permukaan bawah hijau kekuningan. Bunga berumah satu, bunga jantan dan betina berada dalam satu pohon (umumnya berumah dua). Bunga jantan berwarna putih, muncul beberapa perbungaan sekaligus 5-7 bunga dalam satu percabangan.Bunga jantan terletak di bawah bunga betina. Memiliki 9 bracts yang tersusun tiga tiga dalam lingkaran spirali; Perbungaan jantan memiliki tangkai perbungaan 4-5 cm, terdapat 4 bunga yang tersusun mengumpul tepat di tengah dengan bunga jantan yang menyebar sepanjang 15-20 cm rakis. Perbungaan betina semusim buah hanya 1 buah dan terminali atau berada di ujung perbungaan. Cephalium terlihat seperti buah nenas, bentuk bulat, diameter 20-25cm; tersusun atas kumpulan buahmajemuk (phalanges), yangberisi sekitar 50-60 phalanges; setiap phalanges memiliki 15 -19 sub phalanges; berwarna hijau kekuningan saat matang (tidak berwarna kuning atau merah seperti varietas umumnya) dan padapermukaan atas sub phalanges memiliki 5 sisi yang tegas terlihat hamper menyerupai pyramid tumpul dengan hanya satu stigma tertinggal tepat di tengahnya. Varietas P. tectorius yang ditemukan di pulau Roswar ini memiliki kedekatan dengan varietas yang ada di kepulauan Samoa (Thomson et al.,2006). Namun bunga jantan-nya sangat berbeda. Varietas Samoa memiliki bunga jantan yang tersusun raceme dengan bunga yang dipisahkan oleh braktea tidak terkumpul di bagian tengah dan buahnya memiliki sub phalange yang jauh lebih sedikit yakni 4-5. Varietas ini memiliki dua rumah artinya pohon jantan dan betina terpisah. 43 Gambar 2. Bunga Jantan yang telah kering A B Gambar 3. P. tectorius asal Samoa: A. Bunga jantan yang tersusun bertingkat dalam susunan raceme B. Buah dengan jumlah sub phalange 4-5. Tingkat Pertumbuhan Anakan P. tectorius di Pulau Roswar tumbuh di pantai juga bebatuan karang laut. Kedua verietas ini ditemukan hidup berdampingan sepanjang pantai Pasir Panas dan Pantai Waprak. Analisis statistik setelah 3 bulan pertumbuhan anakan menunjukan bahwa kedua varietas ini berbeda (Sinaga et al., 2012). Perbedaan dalam tingkat pertumbuhan ditemukan pada jumlah tunas, tinggi anakan dan jumlah daun. Rata-rata nilai Varietas A (V2) selalu lebih tinggi dari d Varietas B (V1), (Gambar 4). Pengaruh Perlakuan terhadap Jumlah Tunas Gambar 4 . Pengaruh Perlakuan Media Tumbuh dan Varietas terhadap Jumlah Tunas P.tectorius 44 Pengaruh Perlakuan terhadap Tinggi Anakan Pandan Gambar 5. Pengaruh Perlakuan Media Tumbuh dan Varietas terhadap Tinggi Anakan P. tectorius Pengaruh Perlakuan terhadap Jumlah Daun Anakan Gambar 6. Pengaruh Perlakuan Media Tumbuh dan Varietas terhadap Jumlah Daun Anakan P.tectorius PEMBAHASAN Pengaruh Perlakuan terhadap Jumlah Tunas Data penelitian untuk biji tanpa perlakuan saja yang bisa dianalisis sebab data penelitian untuk biji dengan perlakuan banyak yang hilang (data hilang mencapai 22%) hal ini dikarenakan phalange yang 45 terbuka memudahkan semut untuk mengambil dan memakan lembaga biji. Keadaan yang sama berlaku untuk kedua variabel lainnya yakni tinggi anakan dan jumlah daun anakan. Data hasil penelitian dianalisis dengan menggunakan Anova 2 arah, dimana Baris adalah 4 perlakuan dan kolom adalah 2 varietas yang diulangi masing-masing sebanyak 5 ulangan. Hasil penelitian menunjukan bahwa daerah HO diterima untuk perlakuan media tumbuh/ tanah dalam arti bahwa perlakuan yang diberikan memiliki pengaruh yang sama. Hal ini ditunjukan oleh nilai F hitung yang lebih kecil dari F tabel (0,95 versus 2,92) Dengan demikian perlakuan media tanah tidak berpengaruh terhadap jumlah tunas pandan, namun demikian varietas memperlihatkan pengaruh nyata. Nilai F hitung untuk varietas lebih besar dari F tabel (29.29 versus 2.92). Varietas A dan B memiliki pengaruh yang berbeda terhadap jumlah tunas P.tectorius yang dihasilkan (Data disajikan dalam bentuk diagram batang dalam Gambar 4. Data menunjukkan bahwa jumlah tunas anakan tertinggi rata-rata dari ke-4 perlakuan dimiliki oleh P. tectorius Varietas A (V1) yang secara fisik memiliki ukuran lebih besar baik dalam hal ukuran daun dan buah, namun khusus untuk ukuran tinggi pohon dan diameter batang relatif sama bagi kedua varietas. Jumlahnya dapat dilihat berkisar antara 6 hingga 9 dalam lima kali ulangan sedangkan varietas B (V2) jumlah tunas berkisar antara 2 hingga 4 anakan tunas biji. Diduga jumlah biji per phalange P. tectorius Varietas B (V2) boleh jadi sangat sedikit, kemungkinan 2 biji atau bahkan 1 biji. Terdapat juga perbedaan respon antara P. tectorius Varietas A dan B, dalam penelitian ini untuk jumlah anakan terbanyak pada P. tectorius Varietas A dihasilkan dari media tanah 100 % atau P1, sementara itu untuk P. tectorius Varietas B dihasilkan dari media tanah P2 yakni 75:25 tanah-pasir. Pengaruh Perlakuan terhadap Tinggi Anakan Pandan Hasil penelitian menunjukan bahwa perlakuan media tanah tidak berpengaruh terhadap tinggi anakan P. tectorius. Nilai F hitung untuk media tumbuh/tanah adalah 0.19 sementara itu nilai F tabelnya adalah 2,92. Respon yang berbeda ditunjukan oleh varietas yang memperlihatkan pengaruh nyata. Nilai F hitung untuk varietas adalah 6,53 sementara itu nilai F tabelnya adalah 2,92. Dengan demikian varietas A dan B memiliki pengaruh yang berbeda terhadap tinggi anakan P. tectorius. Data disajikan dalam bentuk diagram batang dalam Gambar 5. Pada gambar 30 terlihat bahwa rata-rata tinggi tanaman P. tectorius lebih besar pada Varietas A dari pada varietas B. Walaupun untuk pohon dewasa keduanya memiliki tinggi yang relatif sama namun pada saat pertumbuhan selama 3 bulan pertama varitetas A jauh lebih pesat pertumbuhan tingginya. Pengaruh Perlakuan terhadap Jumlah Daun Anakan Data hasil penelitian yang diolah secara statistik menghasilkan Anova pada lampiran 1C. Hasil penelitian menunjukan bahwa perlakuan media tanah tidak berpengaruh terhadap jumlah daun anakan P.tectorius, dalam hal ini H0 diterima karena nilai F hitung adalah sebesar 0.47 lebih kecil dari nilai F tabel yaitu 2.92. Hal yang berbeda terjadi pada varietas, sebagaimana kedua variabel yang telah diuraikan lebih dahulu varietas juga memperlihatkan pengaruh nyata terhadap jumlah daun. Diterimanya H1 karena nilai F hitung adalah 12.71 lebih besar dari F tabel 2,92. Kedua varietas memberikan pengaruh yang berbeda terhadap jumlah daun anakan P.tectorius, disajikan dalam diagram batang pada Gambar 6. Hasil analisis data menunjukan bahwa P. tectorius dalam jumlah daun anakan lebih banyak yang dimiliki oleh varietas A dari pada varietas B. Perlakuan media tumbuh pada grafik batang (Gambar 6) cenderung menghasilkan jumlah daun yang sama dalam setiap varietas jadi tidak ada berpengaruh nyata. 46 SIMPULAN Sekalipun hidup berdampingan varietas A dan varietas B tetaplah varietas yang berbeda, karakter morfologi dan tingkat pertumbuhan anakan menjadi bukti taksonominya. Perbedaan diantaranya diduga berkaitan dengan isolasi perkawinan yang mana masa penyerbukan dan perkawinan berlangsung dalam waktu yang berbeda. UCAPAN TERIMA KASIH Penulis menyampaikan terima kasih kepada mereka yang terlibat dalam penelitian ini yaitu Yona Randongkir, Sofia B Kameray dan Merriana Asmuruf. Penelitian ini dilakukan atas sponsor Proyek Penelitian MP3EI 2012 karena itu ucapan terima kasih juga disampaikan pada Proyek MP3EI juga Pemda Kabupaten Teluk Wondama, Distrik Wondama dan Masyarakat Pulau Roswar. KEPUSTAKAAN Sinaga, N. I., M. E. C. Susanti, dan Y. Kaber. 2012. Pengentasan Kemiskinan dan Ketahanan Pangan melalui Budidaya Pandanus tectorius di Kawasan Taman Nasional Teluk Cenderawasih, Kabupaten Teluk Wondama. Laporan Penelitian Tahun I MP3EI, Lembaga Penelitian Universitas Negeri Papua, Manokwari (tidak diterbitkan). Thomsom. L.A. J., L. Engelberger, L. Guarino, R. R. Thaman, and C. Elevitch. 2006. Pandanus tectorius. Species Profile for Pasific Island Agroforestry http://www.traditionaltree. org 47 STRUKTUR ANATOMI AKAR, BATANG DAN DAUN SERTA PENYEBARAN STOMATA DAN TRIKOMATA PADA Monochoria vaginalis (Burm. F.) Presl THE ANATOMICAL STRUCTURE OF ROOT, STEM DAN LEAF AS WELL AS THE DISTRIBUTION OF STOMATA AND TRICHOMA ON Monochoria vaginalis (Burm. F) Presl. Ni Putu Adriani Astiti Laboratorium Fisiologi Tumbuhan. Jurusan Biologi F MIPA UNUD. Email: [email protected] INTISARI Monochoria vaginalis (Burm. F.) Presl adalah salah satu jenis gulma padi yang merugikan baik secara langsung maupun tidak langsung. Untuk mengembangkan strategi pengendalian gulma ini diperlukan penelitian tentang anatomi, morfologi, fisiologi, dan ekologi. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui struktur anatomi akar, batang dan daun dari M. vaginalis serta penyebaran stomata dan trikomatanya mengingat spesies ini mempunyai kecenderungan bersaing dalam hal penggunaan air, zat hara dan cahaya. Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah freehand section, semi permanent dengan pewarnaan menggunakan safranin dalam alkohol 70 %. Hasil penelitian menunjukkan stomata terdapat pada permukaan atas dan bawah daun (amphystomatous) dan juga tersebar pada batang. Stomata bertipe II, untuk Monocotyledoneae dengan sel penutup berbentuk ginjal dan dikelilingi oleh 2 sel tetangga dengan dinding pemisah yang searah dengan poros panjang stoma. Tipe ini hampir sama dengan tipe parasitic (parallel celled) untuk Dicotyledoneae. Trikomata merupakan trikoma non glanduler, unicellular dan mempunyai penyebaran pada daerah permukaan bawah daun dan pada batang. Pada akar tidak dijumpai adanya trikoma. Daun bertipe panikoid, dengan jaringan tiang (palisade) hanya terdapat pada bagian adaksial (daun dorsiventral). Kristal oksalat ditemui pada akar, batang dan daun bentuk rafida. Berkas pengangkut bertipe kolateral tertutup dengan tipe stele ataktostele yaitu dengan berkas pengangkut tersebar. Rongga – rongga udara berkembang meluas dan tersusun secara teratur diantara sel – sel. Parenkim pada M vaginalis berupa aerenkim. Kata kunci: Monochoria, struktur anatomi, Akar, batang, daun, ABSTRACT Monochoria vaginalis (Burm. F.) Presl is one the rice weeds that has direct and indirect negative impact ti the rice. To develop the strategy of weed management, research on the anatomy, morphology physiology and ecology are necessary. The aim of this research was to examine the anatomical structure of the roots, stems and leaves of M. vaginalis, as well as the distribution of stomata and trichomata because this species tend to compete in water, mneral and light for its development. The method used in this research was freehand sections, semi-permanent dyed in safranin in 70% alcohol. The results showed that the stomata can be found below and above laminar leaves (amphystomatous) and also distributed on stems. Type 2 stomata such as in Monocotyledoneae with renal shaped guard cells surrounded by 2 neighbor cells, with separated wall lining at the same direction as the length of the stomata. This type of stomata was similar to the parasitic type (parallel celled). It has trichomata non glandular, unicellular and distributed below laminar leaves and stems. There was no trichome found on roots. Panikoid leaf type, palisade on adaxial only (dorsoventral leaves). There was oxalate particle found on roots, stems and with rafida leaf form. Closed collateral bundle sheets with atactostelle type. Widen air cavities lay among parenchyma cells on M. vaginalis aerenchyma. Keywords: Monochoria vaginalis , anatomical structure, root, stem, leaf. 48 PENDAHULUAN Monochoria vaginalis (Burm.F.) Presl adalah salah satu dari beberapa jenis gulma padi. Tumbuhan ini tumbuh bersama tanaman padi dan bersaing dalam kebutuhan akan unsur hara, air, cahaya dan ruang. Spesies ini adalah gulma golongan berdaun lebar yang mempunyai stadia pertumbuhan yang cepat terutama dalam keadaan air tergenang. Spesies ini dikatakan mempunyai kecenderungan bersaing dalam penggunaan air disamping zat hara dan cahaya. Pertumbuhan spesies ini sangat cepat pada stadia vegetative tanaman padi sehingga dapat mendesak pertumbuhan anakan padi. Mengingat besarnya kerugian yang disebabkan oleh Monochoria vaginalis (Burm. F.) Presl. ini, maka perlu dilakukan penanganan yang serius untuk gulma ini. Untuk strategi pengendalian gulma ini diperlukan penelitian tentang anatomi, morfologi, fisiologi, ekologi dan lain – lainnya. Fahn (1995) mengatakan bahwa bagian tumbuh – tumbuhan yang langsung ataupun tidak langsung berguna untuk menegakkan hidup tumbuh – tumbuhan terutama dengan makanan disebut alat hara (organum nutritivum) seperti misalnya akar, batang dan daun. Akar adalah bagian tumbuhan yang berperan penting dalam proses penyerapan air beserta garam – garam. Akar juga merupakan bagian dari tumbuhan yang berperanan penting untuk memperkuat berdirinya tanaman, Pada tanaman air (hidrofit) system akar kurang berkembang, dapat bercabang atau tidak dibawah air. Akar kurang berarti bila seluruh permukaan dari tubuh tanaman kontak langsung dengan air bertindak sebagai absorbsi permukaan dan absorbs air dan m,ineral. Kemungkinan hal inilah yang menyebabkan akar dari hidrofit mereduksi atau tidak ada (Shukla and Chandel, 1982). Batang merupakan bagian dari tubuh tumbuhan yang mendukung bagian tubuh yang ada di atas tanah, yaitu daun, bunga dan buah, serta sebagai jalan pengangkutan air dan zat hara dari bawah ke atas dan jalan pengangkutan hasil-hasil asimilasi dari atas ke bawah, dan menjadi tempat penimbunan zat-zat cadangan makanan. Batang tanaman aquatic sangat halus dan berwarna hijau atau kuning, beberapa diantaranya dapat bermodifikasi menjadi rizoma. Struktur daun pada tanaman mempunyai fungsi untuk pengambilan zat-zat makanan (resorbsi) terutama untuk zat gas, pengolahan zat makanan (asimilasi), penguapan air (transpirasi) dan pernafasan(respirasi). Struktur anatomi tumbuhan mempunyai fungsi guna menunjang proses metabolisme dan untuk perlindungan pada tumbuhan. Stomata dan trikomata adalah derivate epidermis yang terdapat pada jaringan kulit (Soerodikoesoemo dan Santosa 1987) . Salah satu fungsi trikomata adalah sebagai jaringan pelindung yang mencegah penguapan yang berlebihan, dan membantu penyerapan air dan garam – garam mineral. Fungsi utama stomata pada struktur tumbuhan adalah sebagai tempat pertukaran gas atau sebagai alat pernapasan tumbuhan, dan untuk menyelamatkan tumbuhan dari kehilangan air. MATERI DAN METODE Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah Freehand section, semi permanen, pewarnaan menggunakan safranin dalam alcohol 70 %. Analisis statistik dilakukan dengan menggunakan Rancangan. Acak Lengkap (RAL) untuk menghitung jumlah stomata dan trikomata. HASIL Dari hasil pengamatan pada preparat irisan epidermis dan penampang melintang daun, batang dan akar menunjukkan hasil sebagai berikut : 49 Penyebaran Stomata. Stomata tersebar pada permukaan atas dan bawah daun (Amphystomatous) dan juga tersebar pada bagian batang. Sel epidermis Sel penutup (guard cell) Sel tetangga Porus Inti sel Gambar 1. Stomata pada daun M. vaginalis Gambar 2. Stomata pada batang M. vaginalis Penyebaran Trikomata Trikoma tersebar pada permukaan bawah daun dan pada batang. Trikoma uniseluler Non glanduler Sel epidermis Gambar 3. Trikoma pada daun M. vaginalis Gambar 4. Trikoma pada batang M .vaginalis 50 Struktur Anatomi Daun Epidermis atas dan epidermis bawah terdiri dari selapis sel. Dinding sel epidermis mengandung kutikula. Mesofil berdiferensiasi menjadi parenkim palisade dan parenkim penyimpan udara (aerenkim). a. b. c. d. e. f. g. h. i. Epidermis atas Jaringan palisade Aerenkim Rongga udara Kristal ca-oksalat bentuk rafida Berkas pengangkut Sarung mestom Epidermis bawah Stomata Gambar 5. Struktur Anatomi daun M. vaginalis a. Parenkim b. Buluh cincin c. Sklerenkim d. Trakea e. Trakeida f. Fluem g. Sel pengiring h. Ruang reksigen Gambar 6. Berkas pengangkut pada daun M vaginalis Struktur Anatomi Batang Batang berbentuk bulat, jaringan epidermis terdiri dari selapis sel yang menyelubungi batang. Di bawah epidermis terdapat selapis sel hypodermis. Diantara sel – sel epidermis ditemui stomata dan juga trikomata. 51 c a. b. c. d. e. f. Epidermis Hipodermis Berkas pengangkut Aerenkim Rongga udara Kristal ca-oksalat a. b. c. d. e. f. g. Ruang reksigen Parenkim Sklerenkim Trakea Trakeida Fluem Sel pengiring d e f Gambar 7. Penampang melintang batang M vaginalis Gambar 8. Berkas pengangkut pada batang M vaginalis Struktur Anatomi Akar Akar berbentuk bulat, jaringan epidermis berupa selapis sel. Lapisan terluar dari korteks berupa selapis sel eksodermis. Korteks akar tersusun oleh sel – sel parenkim, dengan sel – sel berbentuk poliedris. 52 a. b. c. d. e. f. g. h. i. j. k. Epidermis Eksodermis Parenkim korteks Ruang antar sel Kristal ca-oksalat bentuk rafida Endodermis Perisikel Jari – jari xylem Metaxilem Protoxilem Fluem Gambar 9. Penampang melintang akar M vaginalis PEMBAHASAN Stomata pada M. vaginalis termasuk ke dalam tipe II (menurut Stebbins dan Kush, untuk Monocotyledoneae) yaitu stoma mempunyai dua sel tetangga, tetapi kalau dilihat dari susunan sel tetangganya termasuk ke dalam tipe parasitic (parallel celled) yaitu dua sel tetangga dengan dinding pemisah yang searah dengan poros panjang stoma (Pandey, 1982). Ukuran stomata pada permukaan bawah daun lebih besar dibandingkan pada permukaan atas. Stomata lebih banyak dijumpai pada permukaan bawah daun dengan jumlah rata – rata stomata 162,5 per mm2, sedangkan pada permukaan atas daun dengan jumlah rata – rata stomata adalah 146,87 per mm2. Indeks stomata adalah 14,44. Trikoma pada M. vaginalis merupakan trikoma non glanduler yang terdiri dari sebuah sel yang sederhana (uniseluler). Hal ini berkaitan dengan transpirasi. Trikoma tidak ditemukan pada permukaan atas daun dan juga tidak ditemukan pada bagian akar. Hal ini disebabkan karena M. vaginalis termasuk dalam tanaman air sehingga yang berhubungan dengan proses transpirasi adalah bagian batang dan daun, sedangkan akar berfungsi sebagai penyangga tubuh tanaman dan sebagai penyerap nutrisi (Kartasapoetara, 1991). Ukuran trikoma adalah 143,33 + 30,37 mikron. Pengamatan Pada struktur anatomi daun menunjukkan, M. vaginalis merupakan daun dorsiventral karena jaringan palisade hanya terdapat pada sisi adaksial. Berkas pengangkut bertipe kolateral tertutup yang ditandai tidak adanya cambium diantara xylem dan fluem. Sel – sel yang ,mengelilingi berkas pengangkut, morfologinya berbeda dengan sel – sel yang lainnya yaitu lebih besar, kloroplas lebih sedikit dan dindingnya lebih tebal. Hal ini menunjukkan bahwa M. vaginalis mempunyai daun yang bertipe panikoid. Sel – sel ini penyusun sarung (selubung) berkas pengangkut. Pada tulang daun yang lebih kecil, berkas pengangkut lebih sederhana dan merupakan berkas pengangkut yang tidak sempurna yang hanya terdiri dari fluem saja yang dikelilingi oleh sel – sel yang lebih besar dari sel – sel mesofil lainnya. Kristal ca-oksalat yang ditemui pada daun berbentuk rafida. Pada struktur anatomi batang tidak dapat dibedakan antara bagian korteks dan bagian stele. Parenkim batang berupa aerenkim dengan sel – sel yang tersusun teratur dengan rongga – rongga udara yang besar. Diantara aerenkim terdapat jaringan rekresi berupa sel – sel yang berisi Kristal ca-oksalat bentuk rafida. Berkas pengangkut pada batang merupakan berkas pengangkut bertipe kolateral tertutup yang ditandai dengan tidak adanya cambium diantara fluem dan xylem. Tipe stele adalah ataktostele yaitu stele dengan system jaringan pengangkut tersebar. Pada bagian korteks dari akar M. vaginalis tersusun oleh sel – sel parenkim, dengan sel – sel berbentuk poliedris. Satu sel dikelilingi oleh empat ruang antar sel yang tersusun secara teratur. Sel – sel 53 dengan Kristal ca-oksalat bentuk rafida juga ditemui pada parenkim korteks. Disebelah dalam endodermis terdiri dari unsur – unsur pengangkut yaitu xylem dan floem rafida juga ditemui pada parenkim korteks. Disebelah dalam endodermis terdiri dari unsur – unsur pengangkut yaitu xylem dan fluem. SIMPULAN Dari hasil pengamatan struktur anatomi dari M. vaginalis dapat disimpulkan : Stomata terdapat pada permukaan atas dan bawah dari daun (amphystomatous) dan juga tersebar pada batang. Stomata bertipe II (menurut Stebbins dan Kush, untuk monocotyledoneae) dengan sel penutup berbentuk ginjal dan dikelilingi oleh dua sel tetangga dengan dinding pemisah yang searah dengan poros panjang stoma. Tipe ini hampir sama dengan tipe parasitic (parallel celled) menurut Metcalfe dan Chalk, pada Dicotyledoneae. Trikoma merupakan trikoma unisellular, non glanduler dan mempunyai penyebaran pada daerah permukaan bawah daun dan pada batang. Pada akar tidak dijumpai adanya trikoma. Daun bertipe panikoid, dengan jaringan palisade hanya terdapat pada bagian adaksial (daun dorsiventral). Kristal caoksalat ditemui pada akar, batang dan daun dalam bentuk rafida. Berkas pengangkut bertipe kolateral tertutup dengan tipe stele ataktostele . Rongga – rongga udara berkembang meluas dan tersusun secara teratur diantara sel – sel. Parenkim pada M. vaginalis berupa aerenkim. KEPUSTAKAAN Fahn, A. 1995. Anatomi tumbuhan. UGM Press.Yogyakarta Kartasapoetara, G.A. 1991. Pengantar Anatomi Tumbuh-Tumbuhan. Rineka Cipta.Jakarta. Mulyani E.S., Sri. 2006. Anatomi Tumbuhan. Kansius, Yogyakarta. Nugroho, H., Purnomo, dan Isirep, S. 2005. Struktur dan Perkembangan Tumbuhan. Penebar Swadaya. Jakarta Pandey, B.P. 1982. Plant Anatomy. S.Chand & Company LTD. Ramnagar, New Delhi. Shukla and Chandel. 1982. Plant Ecology. S.Chand & Company LTD.Ramnagar, New Delhi. Soerodikoesoemo, W. 1984. Anatomi Tumbuhan II (Histologi). Fakulta Biologi.UniversitasGadjah Mada. Yogyakarta. Soerodikoesoemo, W. dan Santosa, S. W. 1987. Anatomi Tumbuhan. Karunika, UT, Taggart, R., and C. Starr, 2000. Plant Structure and Function. Brooks Cole. Australia. 54 PERKEMBANGAN STRUKTUR MORFOLOGI EMBRIO CENDANA (Santalum Album Linn.) DARI BUNGA MEKAR HINGGA TERBENTUKNYA BUAH MUDA MORPHOLOGY STRUCTURE DEVELOPMENT OF SANDALWOOD EMBRYO (Santalum Album Linn.) OF BLOOMING FLOWERS UNTIL YOUNG FRUIT Ni Putu Yuni Astriani Dewi1, Eniek Kriswiyanti1,2, Ni Nyoman Darsini2 1 2 Program Studi Ilmu Biologi Program Pascasarjana Universitas Udayana, Bali, Indonesia Laboratorium Struktur dan Perkembangan Tumbuhan Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana, Bali, Indonesia E-mail : [email protected] INTISARI Penelitian tentang perkembangan struktur morfologi embrio Cendana dilakukan untuk mengetahui perkembangan struktur morfologi embrio cendana (Santalum album Linn.) dari bunga mekat hingga terbentuknya buah muda. Pengamatan mikroskopis dilakukan di Laboratorium Struktur Perkembangan Tumbuhan Jurusan Biologi, FMIPA, Unud. Sampel bunga dan buah sebanyak 50 karangan diambil dari 5 individu tanaman disekitar Kampus Bukit Jimbaran. Hasil penelitian menunjukan bahwa pada bunga mekar, perkembangan embrio tahap globuler. Pada buah muda, mahkota gugur ukuran 4 mm menunjukan embrio tahap bentuk hati, sedang embrio bentuk torpedo terlihat pada irisan bujur buah muda ukuran 7 mm. Kata kunci : Santalum album Linn., embedding, acropetal, fruitset, panikula. ABSTRACT Research about growth of Sandalwood embryo morphology structure conducted to know growth of sandalwood embryo morphology structure (Santalum album Linn.) of flower bloom till forming of young fruit. Microscopic perception done in “Struktur dan Perkembangan Tumbuhan Laboratory” Departement of Biology, FMIPA, Unud. Flower and fruit samples counted 50 composition taken away from 5 crop individual around Bukit Jimbaran Campus. The result of research showed that at flower bloom, growth of phase embryo of globuler. At young fruit, crown be killed size measure 4 mm showed heart phase embryo, form torpedo embryo seen at longitudinal slice of young fruit of size measure 7 mm. Keywords : Santalum album Linn., embedding, acropetal, fruitset, panicula. PENDAHULUAN Cendana (Santalum album Linn.) tergolong keluarga Santalaceae yang memiliki keistimewaan dibandingkan jenis kayu lainnya, karena kayunya mengandung minyak atsiri dan memiliki aroma yang khas (Tjitrosoepomo, 2005). Cendana (S. album Linn.) adalah salah satu jenis cendana yang menghasilkan kadar minyak terbaik di dunia (Lestari, 2010). 55 Cendana (S. album Linn.) memiliki penyebaran terbatas di Indonesia antara lain Jawa Timur, Nusa Tenggara Timur, Sulawesi, dan Maluku (Lestari, 2010). Tanaman cendana banyak dimanfaatkan sebagai parfum, rempah-rempah, bahan dupa, aromaterapi, sebagai bahan kerajinan, dan dipergunakan dalam upacara-upacara keagamaan/adat. Masyarakat Bali banyak mempergunakan cendana sebagai obat anti pembengkakan, bahan yang digunakan adalah rendaman dari gosokan kayu cendananya (Rahayu dkk., 2002). Awal pertumbuhan cendana merupakan tanaman setengah parasit dan memperoleh makanan dari tanaman inang melalui akarnya yang dihubungkan melalui haustorium. Hal itu disebabkan sistem perakarannya tidak sanggup untuk mendukung pertumbuhannya sendiri. Pertumbuhan cendana memerlukan tanaman inang dan pelindung, antara lain Albizia chinensis, Acacia sp., Cassia siamea, Tamarindus indicus, maupun Psidium guajava (Wawo, 2009). Reproduksi generatif pada cendana menggunakan biji, proses pembentukan biji diawali dengan penyerbukan (polinasi), yang merupakan peristiwa jatuhnya serbuk sari di atas kepala putik (Tjitrosoepomo, 2005). Keberhasilan penyerbukan dan pembuahan ditentukan oleh beberapa hal seperti struktur dan posisi alat reproduksi yang saling berjauhan (Tjitrosoepomo, 2005), kemasakan gamet jantan (serbuk sari) dan gamet betina (putik) yang tidak terjadi secara bersamaan (Walker, 1999). Salah satu penyebab kegagalan pembentukan buah dan biji adalah sterilitas serbuk sari. Menurut Bhojwani dan Bhatnagar (1999) sterilitas serbuk sari dapat disebabkan oleh terganggunya proses meiosis sehingga perkembangan gametofit maupun spora menjadi terhambat, terganggunya perkembangan kepala sari yang menyebabkan proses mikrosporogenesis menjadi terhambat, bentuk serbuk sari yang pipih menyerupai kelopak/ mahkota, serta adanya infeksi jamur dan virus pada kepala sari. Bunga cendana (S. album Linn.) terletak pada ujung batang dan pada ketiak daun, menurut Tjitrosoepomo (2005) bunga yang terletak pada ujung batang disebut flos terminalis, sedangkan bunga yang terletak pada ketiak daun disebut flos axiler. Bunga cendana terdiri dari 4-5 kelopak/ mahkota, panjang 4-5 mm dan diameter ± 2 mm (Prasetyaningtyas dan Na’ie 004 . Cendana memiliki dua musim bunga yaitu bulan Desember - Januari dan Mei - Juni. Buah cendana masak pada bulan Maret - April dan September - Oktober. Tanaman cendana telah berbuah pada usia 3-4 tahun. Bibit yang terbaik adalah buah dari pohon yang telah berusia 20 tahun dan benih dapat tumbuh pada lingkungan yang memiliki kandungan air yang dapat memacu perkecambahan (Rahayu dkk., 2002). Buah cendana merupakan buah batu (drupa), berbentuk bulat dan berwarna hitam ketika masak. Bagian biji pada tumbuhan secara umum tersusun oleh kulit biji, endosperm, dan embrio (Campbell dkk., 2000). Penelitian mengenai perkembangan struktur morfologi bunga tanaman cendana secara alami, belum ada yang melaporkan. Adapun penelitian tentang perkembangan embrio pada tanaman dikotil au un onokotil telah banyak dilakukan se erti “Keraga an orfologi sela a erke bangan e brio somatik sagu (Metroxylon sagu Rottb. ” oleh Kasi dan Su aryono 006 “Regenerasi tana an Shorea pinanga Scheff. melalui embriogenesis so atik” oleh Yelnitis 00 dan e briogenesis so atik langsung pada cendana oleh Sukmadjaja (2005). Penelitian mengenai perkembangan struktur embrio secara alami pada buah naga putih (Hylocereus undatus (A. Berger) Britton and Rose) dan super merah (Hylocereus costaricensis (A. Berger) Britton and Rose) dari tahap bunga sebelum mekar hingga terbentuk buah telah dilakukan Murni (2010) menunjukan bahwa pada tahap akhir embrio masak sudah terbentuk bagian embrio bentuk globuler dan integumen pada buah naga putih dengan persentase 86%, sedangkan bentuk hati pada buah naga super merah dengan persentase 93%. 56 Berdasarkan latar belakang di atas maka dilakukan penelitian untuk mengetahui perkembangan struktur morfologi embrio cendana (S. album Linn.) dari tahap bunga mekar hingga terbentuknya buah muda. METODE PENELITIAN Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Struktur dan Perkembangan Tumbuhan Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana. Pengambilan sampel dilaksanakan pada pagi hari di sekitar Kampus Bukit Jimbaran. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Oktober 2011-Januari 2012. Metode Pengumpulan Data. Pengambilan Sampel yaitu Sampel bunga dan buah sebanyak 50 karangan bunga diambil dari 5 individu tanaman berusia ± 10 tahun yang ada tahapan bunga mekar, setelah mahkota gugur, dan buah muda. Sampel yang akan dibuat preparat disimpan dalam alkohol 70% atau difiksasi langsung dengan larutan fiksatif FAA (9:1:1). Sampel yang akan dibuat preparat adalah bunga hermaprodit dari mekar hingga buah muda untuk mengetahui perkembangan embrio. Cara Pembuatan Preparat : Perkembangan struktur morfologi embrio cendana (S. album Linn.) digunakan metode embedding, yaitu : Bunga pada tahapan yang berbeda disimpan dalam alkohol 70% diambil untuk difiksasi dalam larutan FAA selama 24 jam. Dehidrasi dengan menggunakan alkohol bertingkat 70%, 80%, 96% dan 100% (2x) masing-masing selama 10-15 menit. Dealkoholisasi dengan larutan alkohol 100% dan xylol (2:1, 1:1, 1:2), xylol I, II masing-masing selama 10-15 menit. Infiltrasi dengan xylol : paraffin 1:1 selama 2-5 jam kemudian xylol : paraffin 1:9 selama 24 jam, paraffin I selama 24 jam, paraffin II selama 1 jam. Kemudian dilakukan penanaman, penyayatan dengan mikrotom putar, lalu penempelan pada kaca objek dengan gliserin albumin perbandingan 1:1, dibiarkan diatas thermostat agar hasil sayatan merenggang. Rehidrasi dengan xylol I, II, xylol : alkohol 100% (2:1, 1:1, 1:2), alkohol 100% (2x), 80%, 70% masing-masing 10-15 menit, pewarnaan dengan 1% safranin dalam alkohol 70% selama 24 jam. Dehidrasi dengan alkohol bertingkat 70%, 80%, dan 100% masing-masing 3-5 celup. Lalu dilakukan penjernihan dengan xylol, diberi Canada balsam dan ditutup dengan kaca penutup, diamati di bawah mikroskop merk MG-Polar-4T-360 (Berlyn and Miksche, 1976). Variabel pengamatan meliputi : Perkembangan struktur morfologi embrio dari tahap bunga mekar hingga terbentuknya buah mudabunga sebelum mekar pada cendana (S. album Linn.). Metode Pengolahan Data dilakukan secara kualitatif dengan merunut perkembangan morfologi dan anatomi pada bunga mekar hingga terbentuknya buah muda. Kemudian data disajikan dalam bentuk gambar perkembangan embrio maupun deskripsi secara morfologi. HASIL DAN PEMBAHASAN Perkembangan Embrio dari Bunga Mekar Hingga Terbentuknya Buah Muda Berdasarkan hasil penelitian perkembangan struktur morfologi dan anatomi embrio dari bunga mekar hingga terbentuk buah muda menunjukan adanya perkembangan embrio menurut ukuran panjang dan diameter dari buah muda. Hasil perkembangan struktur morfologi dan anatomi tahap bunga mekar kelopak warna hijau dan kemerahan ukuran panjang 4 mm, diameter ± 2 mm, yaitu : 57 3 2 4 1 5 A1. B1. 6 A2. B2. Gambar 1. Struktur morfologi dan anatomi tahap bunga mekar kelopak berwarna hijau dan kemerahan ukuran panjang 4 mm diameter ± 2 mm. Perbesaran 1X dan 100X . Keterangan: morfologi bunga mekar hijau (A1) dan anatomi bunga mekar hijau (A2), Morfologi bunga mekar kemerahan (B1) dan Anatomi bunga mekar kemerahan (B2). 1: kelopak bunga, 2: Mahkota bunga, 3: Benang sari, 4: Putik, 5: ovarium dan ovulum, 6: serbuk sari (Dok. Yuni 2012) Deskripsi morfologi dan anatomi tahap bunga mekar hijau dan kemerahan ukuran panjang 4 mm dan diameter ± 2 mm : Gambar A1 dan B1 menunjukan morfologi tahap awal bunga mekar kelopak hijau dan kemerahan berukuran 4 mm dan diameter ± 2 mm, memiliki kelopak berjumlah 4 yang berwarna hijau (seperti gambar A1), kemerahan (gambar B1) hingga berangsur-angsur berwarna merah tua, memiliki mahkota yang berukuran ± 1.5 mm berjumlah 4. Kepala sari berjumlah 4 berwarna kuning pada saat kelopaknya berwarna hijau hingga kepala sari berwarna merah , memiliki putik yang memiliki 3 daun buah yang berukuran ± 2 mm. Gambar A2 dan B2 menunjukan penampang membujur bunga ukuran panjang 4 mm diameter ± 2 mm warna kelopak hijau dan kemerahan terlihat kepala sari yang memiliki 2 ruang sari. Satu ruang sari terdiri dari dua kantong sari dan serbuk sari sudah matang (no. 6). Perkembangan struktur morfologi dan anatomi tahap bunga mekar kelopak warna merah ukuran 4 mm diameter ± 2 mm, yaitu: 58 C. B. A. Gambar 2. Struktur morfologi dan anatomi tahap bunga mekar kelopak berwarna merah ukuran panjang 4 mm diameter ± 2 mm. Perbesaran 1X dan 100X. Keterangan : A. morfologi tahap bunga mekar kelopak berwarna merah B. embrio bentuk globuler, C. endosperm (Dokumentasi Yuni, 2012). Deskripsi morfologi dan anatomi tahap bunga mekar merah ukuran panjang 4 mm dan diameter ± 2 mm : Gambar 2A menunjukan sebagian besar adanya persamaan secara morfologi pada bunga mekar kelopak hijau dan kemerahan (Gambar 1), perbedaan yang terlihat yaitu warna kelopak yang berwarna merah. Penampang membujur bunga ukuran panjang 4 mm diameter ± 2 mm warna kelopak merah (Gambar 2B dan C) menunjukan adanya perkembangan secara anatomi di dalam bakal biji. Di dalam bakal biji terdapat suatu ruang kosong, menurut Panchaksharappa and Syamasundar (1975) tentang studi sitokimia perkembangan bakal biji pada Dipcadi mantanum Dalz, disebut kantong embrio sebagai tempat berkembangnya embrio. Embrio bentuk globuler (gambar 2B) ditandai dengan sel-sel yang memiliki inti besar dan jelas (Jenik et al., 2007). Gambar 2C menunjukan endosperm yang ditandai adanya butiran amilum berwarna bening, menurut (Sumardi dan Pudjoarinto, 1993) endosperm berfungsi sebagai pemberi nutrisi embrio. Perkembangan struktur morfologi dan anatomi embrio dari tahap buah muda ukuran 2 mm diameter ± 1 mm, yaitu: 1. A. B. Gambar 3. Struktur morfologi dan anatomi buah muda ukuran panjang 2 mm diameter ± 1 mm. Perbesaran 1X dan 100X. Keterangan : Morfologi dan anatomi buah muda ukuran panjang 2 mm diameter ± 1 mm (A dan B). 1. bakal biji. (Dokumentasi Yuni, 2012). Deskripsi morfologi dan anatomi tahap buah muda ukuran panjang 2 mm diameter ± 1 mm : 59 Gambar 3A menunjukan buah muda bentuk seperti lonceng, hijau, terdapat sisa perhiasan bunga dan sisa tangkai utik. Menurut Prasetyaningtyas dan Na’ie 004 secara orfologi erubahan dari bunga menjadi buah muda ditandai dengan lepasnya kepala sari dari tangkai sari dan mengeringnya/ gugurnya kelopak maupun mahkota. Penampang membujur buah muda ukuran panjang 2 mm diameter ± 1 mm (Gambar 3B), secara anatomi perkembangan embrio tidak dapat dilihat, disebabkan struktur dari kulit biji muda mulai mengeras ditandai warna merah pekat pada bagian kulit biji sedangkan dalam bakal biji masih lunak, sehingga pergantian zat maupun saat infiltrasi tidak sampai pada bagian dalam bakal biji dan saat penyayatan dengan mikrotom bagian dalam bakal biji tidak tersayat. Hal tersebut kemungkinan dapat menyebabkan hilangnya bagian dalam dari kantong embrio. Perkembangan struktur morfologi dan anatomi embrio dari tahap buah muda ukuran panjang 4 mm diameter ± 2 mm, yaitu: A. B. C. Gambar 4. Struktur morfologi dan anatomi buah muda ukuran panjang 4 mm diameter ± 2 mm. Perbesaran 1X dan 100X. Keterangan : morfologi buah muda (A), (Dokumentasi Yuni, 2012). tempat embrio bentuk hati (B), Embrio bentuk hati (C). Deskripsi morfologi dan anatomi tahap buah muda ukuran panjang 4 mm dan diameter ± 2 mm : Gambar 4A menunjukan bahwa secara morfologi mengalami penambahan ukuran panjang dan dia eter dari ukuran buah uda sebelu nya. Menurut Prasetyaningtyas dan Na’ie 004 ena bahan ukuran dikatakan sebagai adanya pembesaran ke arah horizontal dan vertikal, pembengkakan terjadi menandakan adanya perkembangan embrio dalam bakal biji. Gambar (4B) menunjukan bagian embrio yang hilang akibat proses embedding yang kurang baik seperti halnya pada ukuran panjang buah muda 2 mm diameter 1 mm. Gambar 4C menunjukan penampang bujur embrio dengan metode irisan tangan diperoleh embrio bentuk hati, masing-masing bagian supervisial akan berkembang membentuk dua kotiledon, yang merupakan ciri perkembangan embrio pada tanaman dikotil (Iriawati, 2010). Perkembangan struktur morfologi dan anatomi embrio dari tahap buah muda ukuran panjang 6 mm, diameter ± 4 mm dan panjang 7 mm, diameter ± 5 mm, yaitu: 60 1 3 2 4 A1 B1 5 6 A2 B2 7 Gambar 5. Struktur morfologi dan anatomi buah muda ukuran panjang 6 mm diameter ± 4 mm dan panjang 7 mm diameter ± 5 mm. Perbesaran 1X dan 100X. Keterangan : morfologi buah muda ukuran panjang 6 mm berdiameter ± 4 mm (A1), morfologi buah muda ukuran panjang 7 mm berdiameter ± 5 mm (B1), radikula dari buah muda ukuran panjang 6 mm berdiameter ± 4 mm (A2), embrio bentuk torpedo dari buah muda ukuran panjang 7 mm berdiameter ± 5 mm (B2), 1. epikarpium, 2. mesokarpium, 3. endokarpium dan kulit biji, 4. endosperm, 5. kotiledon, 6. hipokotil, 7. radikula. (Dokumentasi Yuni, 2012). Deskripsi morfologi dan anatomi tahap buah muda ukuran panjang 6 mm diameter ± 4 mm dan panjang 7 mm diameter ± 5 mm: Gambar 5A1 dan 5B1 menunjukan penambahan ukuran dan pembengkakan bagian biji, terdapat sisa kelopak dan tangkai putik. Bentuk buah elips hingga bulat, memiliki lapisan kulit buah dengan permukaan licin berwarna hijau, bagian tengah buah yang berdaging tipis, bagian dalam yang keras. Sedangkan bagian biji memiliki kulit biji tipis, endosperm berdaging, dan terdapat embrio. Hal ini sesuai dengan pendapat Sharma (2004) bahwa, buah batu (drupa) memiliki lapisan kulit luar yang disebut epikarpium, lapisan tengah berdaging (mesokarpium), dan lapisan dalam yang keras (endokarpium). Gambar 5A2 dan 5B2 menunjukan penampang membujur buah muda ukuran panjang 6 mm diameter ± 4 mm 7 mm diameter ± 5 mm, terlihat embrio bentuk torpedo terdiri dari kotiledon, hipokotil dan radikula. Menurut Bhojwani and Bhatnagar (1999), kotiledon terbentuk dari dua bagian supervisial proembrio yang berkembang seimbang dan membentuk dua kotiledon. Menurut Iriawati (2010), kotiledon memiliki peranan sebagai daun fotosintetik saat berkecambah. Hipokotil akan terdeferensiasi menjadi calon batang, dan radikula yang memiliki peran sebagai akar (Esau, 1964). SIMPULAN Perkembangan embrio cendana bentuk globuler ditemukan pada bunga mekar panjang 4 mm dan diameter ± 2 mm, buah muda ukuran yang sama telah terbentuk embrio bentuk hati, sedang embrio bentuk torpedo terlihat pada buah muda ukuran panjang 7 mm diameter ± 5 mm. 61 UCAPAN TERIMA KASIH Terima kasih disampaikan kepada Ibu Eniek, Ibu Darsini, dan Bapak Made Murdisedana serta pihak Balai Pembenihan Tanaman Hutan yag telah memberikan bantuan dan informasi dalam penelitian ini. KEPUSTAKAAN Ainsworth C., Susan, C., Vicky Buchanan-Wollaston., Madan, T., John P. 1995. Male and Female Flowers of the Diocious Plant Sorrel Show Different Patterns of MADS Box Genen Expression. Avaiableat:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC161015/pdf/071583.pdf. Opened : 05.02.2012 Backer, C. A., R. C. Bakhuizen Van Den Brink. 1965. Flora of Java (Spermatophytes Only) Vol. II. N. V. P. Noor Dhoff-Groningen-The Netherlands. Page 76 and 78. Berlyn,G.P. and J.P. Miksche.1976. Botanical Microtechnique and Chemistry. First Edition. The Lowa state University Press Anes, Lowa. Bhojwani, S. S. And S. P. Bhatnagar. 1999. The Embryology of Angiosperm. Fourth Resived Edition. Vikas Publishing House. PVT. LTD. Delhi. Campbell, N. A., J. B. Reece, L. G. Mitchell. 2000. Biologi. Edisi Kelima Jilid Kedua. Jakarta : Erlangga.. Eldina, D. 2003. Pembuatan Larutan Safranin. Avaiable at : http:/www.asosiasipoliteknik.or.id /index.php?module=display&jurnal_id=210. Opened : 27.08.2011 Elisa. 2004. Penyerbukan. Avaiable at : http:/www.penyerbukan.htm. Opened : 27.08.2011 Esau, K. 1964. Anatomy of Seed Plants. Second Edition. John Wiley& Son. New York. Iriawati. 2010. Biji dan Perkembangan biji. Avaiable at: http://www.sith.itb.ac.id/profile/buiriawati/ XII.%20BIJI%20DAN%20PERKEMBANGAN%20BIJI.pdf. Opened : 19.09.2011 Jenik, P. D., C. Stewart, G., and L.Wolfgang. 2007. Embryonic Patterning in Arabidopsis thaliana. Avaiableat:http://www.plantsci.cam.ac.uk/Haseloff/resources/PlantSciPart2_refs/Lecture1/Jenik2 007.pdf. Opened : 14.02.2012 Kasi dan Sumaryono. 2006. Keragaman morfologi selama perkembangan embrio somatik sagu (Metroxylon sagu Rottb.). Bogor : Balai Penelitian Bioteknologi Perkebunan Indonesia. Vol. (1) 44-52. Kriswiyanti, E., I K. Muksin., L. Watiniasih., M. Suartini. 2008. Pola Reproduksi Pada Salak Bali (Salacca zalacca Var. Amboinensis (Becc.) Mogea). Jurnal Biologi XII (2) : 78-82. Kriswiyanti, E. 2006. Perkembangan Tumbuhan (Embriologi Tumbuhan Biji). Jurusan Biologi, F. MIPA, UNUD. Denpasar. Lestari, F. 2010. Karakteristik Pembungaan Tiga Provenan dan Empat Ras Lahan Cendana. Avaiable at : http://isjd.pdii.lipi.go.id/admin/jurnal/72105966_1829-6327.pdf Opened : 10.01.2012 Maheswari, P. 1950. An Introduction to the Embryology of Angiosperms. India : McGraw-Hill Book Company, Inc. Mulyani, S. 2006. Anatomi Tumbuhan. Cetakan ke-1. Yogyakarta : Penerbit Kanisius (Anggota IKAPI). 62 Panchaksharappa, M. G. and J. Syamasundar. 1975. A Cytochemical Study of Ovule Development in Dipcadi montanum Dalz. Part of Thesis submitted by. J. S. for the Ph. D. degree in Botany, Karnatak University, Dharwar, India. Prasetyaningtyas, M. 2004. Informasi Singkat Benih Santalum album Linn. Avaiable at: http://bpthsulawesi.net/files/Santalum%20album.pdf. Opened : 14.02.2012 Prasetyaningtyas M. dan M. Na’ie . 004. Study Fenologi Pembungaan Santalum album Linn. di Wanagama,Yogyakarta. Avaiable at : http://www.google.co.id/url?sa=t&rct=j & q =studi+fenologi+cendana&source=web&cd=2&ved=0CC8QFjAB&url=http%3A%2F%2Fiib.ug m.ac.id%2Fjurnal%2Fdownload.php%3FdataId%3D650&ei=Sw49T7bZL4LsrAfT28yBw&usg= AFQjCNE1swM6JeG_s0ke_qdKsFgLM6hixQ&cad=rja. Opened: 12.01.12 Rahayu, S., A.H. Wawo, M. Van Noordwijk, dan K. Hairiah. 2002. Cendana:Deregulasi dan Strategi Pengembangannya. Bogor. World Agroforestry Centre (ICRAF). Rai, I N., R. Poerwanto, L. K. Darusman dan B. S. Purwoko. 2006. Perubahan Kandungan Giberilin dan Gula Total pada Fase-fase Perkembangan Bunga Manggis. Jurusan Budidaya Pertanian, Faperta Universitas Udayana. Denpasar. Avaiable at : http://www.google.co.id/url?sa=t&rct=j & q=penelitian+mengenai+metode+parafin&source=web&cd=16&ved=0CEAQFjAFOAo&url=http %3A%2F%2Fjournal.ipb.ac.id%2Findex.php%2Fhayati%2Farticle%2Fdownload%2F215%2F81 &ei=PmVCT8HgF83orQeLobXjBw&usg=AFQjCNFsI_AsISVwnicoBmMrEpXFPIpl8w&cad=rj a. Opened : 20.12.2012 Sharma, R. 2004. An Introduction to Plant Morfology.. India : Campus Books International. Sukmadjaja, D. 2005. Embriogenesis Somatik Langsung pada Tanaman Cendana. Bogor: Jurnal Bioteknologi Pertanian.. Vol. 10: 3-6. Sumardi, I. dan A. Pudjoarinto. 1992. Struktur dan Perkembangan Tumbuhan. Yogyakarta : Departemen Pendidikan dan Kebudayaan Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi Proyek Pembinaan Tenaga Kependidikan Pendidikan Tinggi. Tjitrosoepomo, G. 2005. Taksonomi Tumbuhan Obat-obatan. Cetakan ke-2. Yogyakarta : Gadjah Mada University Press. Tjitrosoepomo, G. 2005. Morfologi Tumbuhan. Cetakan ke-15. Yogyakarta : Gadjah Mada University Press. Walker, D. 1999. Studying Pollen Avaiable at : http://www.geo.arizona.edu/palynology/pol_pix.html. Opened on : 20.09.2011 Wawo, A. H. 2009. Pengaruh Jumlah Semai Akasia (Acacia villosa) Dan Lamtoro Lokal (Leucaena glauca) Sebagai Inang Primer Cendana (Santalum album Linn.). Avaiable at : http://bpthsulawesi.net/files/Santalum%20album.pdf. Opened : 14.02.2012 Yelnitis. 2008. Regenerasi tanaman Shorea pinanga Scheff. melalui embriogenesis somatik. Yogyakarta : Balai Besar Penelitian Bioteknologi dan Pemuliaan Tanaman Hutan. 63 DAYA HAMBAT EKSTRAK DAUN RAMBUTAN RAPIAH (Nephelium lappaceum L.) TERHADAP PERTUMBUHAN TANAMAN KUNYIT Anak Agung Istri Mirah Dharmadewi1, Ni Putu Adriani Astiti 1, Luh Putu Wrasiati2 1 Program Studi Magister Ilmu Biologi, Program Pascasarjana Universitas Udayana,Bali 2 Jurusan Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Udayana,Bali Email: [email protected] INTISARI Rambutan rapiah (Nephelium lappaceum L.) merupakan salah satu tanaman yang dapat digunakan sebagai obat yang termasuk kedalam family Sapindaceae. Rambutan mengandung senyawa alelopati yang dapat menghambat pertumbuhan tanaman yang tumbuh disekitarnya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui daya hambat ekstrak daun rambutan rapiah terhadap pertumbuhan tanaman kunyit serta mengetahui kemampuan tanaman kunyit untuk bertahan terhadap pemberian ekstrak daun rambutan.Parameter yang diamati adalah tinggi tanaman, panjang daun, lebar daun, jumlah daun, jumlah tunas dan berat rimpang diamati pada akhir pengamatan. Pemberian ekstrak daun rambutan dengan konsentrasi 5%,10%,15%, 20% mengakibatkan tinggi tanaman, panjang daun, lebar daun, jumlah daun lebih rendah jika dibandingkan dengan kontrol, namun tidak memberikan pengaruh terhadap jumlah tunas dan berat rimpang kunyit. Kata kunci : Rambutan rapiah, ekstrak daun rambutan, kunyit ABSTRACT Rambutan rapiah (Nephelium lappaceum L.) is a plant species of plant that belong to Sapindaceae family. This plant produces conpounds that can inhibit the growth of other plants. This study is aimed to determine the inhibition effects of rambutan rapiah leaf extract on the growth of turmeric and determine the ability turmeric to the plant. Parameters in this study were plant height, leaf length, leaf width, number of leaves, number of shoots and rhizome weight. Aplication of rambutan leaf extract at concentration of 5%, 10%, 15%, 20% decreased that plant height ,leaf length, leaf number than control, but did not effect the number of shoots and weight of turmeric. Keywords : Rambutan rapiah, rambutan leaf extract , turmeri PENDAHULUAN Indonesia merupakan salah satu negara penghasil komoditi obat-obatan yang potensial. Beraneka ragam jenis tanaman obat-obatan telah diproduksi, yang biasanya digunakan sebagai bahan dasar atau bahan baku pembuatan obat modern ataupun tradisional. Salah satu jenis tanaman obat yang tumbuh di Indonesia, yaitu rambutan rapiah (Nephelium lappaceum L.) yang dapat menyembuhkan berbagai macam penyakit yaitu salah satunya Diabetes mellitus (Savitri, 2006). Seluruh bagian tanaman bisa digunakan sebagai obat. Disamping kelebihannya, rambutan diduga menghasilkan suatu metabolit sekunder bersifat alelopati (Taiz dan Zeiger, 1991). Senyawa ini diketahui bersifat toksik baik terhadap serangga maupun tanaman lain yang terpapar senyawa tersebut. Rambutan rapiah (Nephelium lappaceum L.) mengandung senyawa alelopati yang dapat menghambat pertumbuhan tanaman yang tumbuh disekitarnya sehingga hanya tanaman tertentu saja yang 64 dapat tumbuh di sekitar lahan rambutan (Savitri, 2006). Untuk meningkatkan produksi dan kontinyuitas perkebunan perlu dilakukan usaha penanaman tanaman rambutan dalam skala besar. Hal ini tentu membutuhkan lahan yang luas karena jarak tanam antara rambutan umumnya sekitar 12x12 meter untuk pertumbuhan tanaman yang optimal. Menurut Warsana (2009), salah satu usaha untuk mengoptimalkan penggunaan lahan yang ditanami yaitu dengan sistem tumpang sari atau penanaman tanaman sela di sekitar tanaman rambutan. Tanaman yang digunakan sebagai tanaman tumpang sari yaitu kunyit (Curcuma domestica Val.). Tanaman ini dipilih karena dapat ditanam dalam pola tanam monokultur maupun tumpangsari/ganda, baik dengan tanaman semusim maupun tanaman tahunan. Selain itu penanaman anggota temu-temuan ini selain sebagai tanaman sela juga dapat dimanfaatkan sebagai tanaman obat (TOGA). Peluang pengembangan temu-temuan diantara pohon rambutan cukup besar, karena intensitas naungan yang dapat ditolerir komoditas temu-temuan dapat mencapai 40% (Pribadi et al., 2000). MATERI DAN METODE Tahap Preparasi Sampel Sampel daun rambutan dikumpulkan, kemudian dicuci dan dikeringanginkan selama 2 hari. Daun yang sudah kering angin diblender hingga diperoleh serbuk. Serbuk daun rambutan lalu dibungkus dan disimpan di tempat kering. Pembuatan Ekstrak Daun rambutan diekstrak dengan menggunakan metode ekstraksi dari Oyun (2006). Bubuk daun rambutan dimaserasi sebanyak 5 gram dengan 100 mL metanol 95% selama satu hari, lalu disaring. Ampasnya dimaserasi kembali dengan 2 kali pengulangan masing-masing menggunakan 100 mL metanol 95%. Maserat yang diperoleh melalui penyaringan ditampung dan diuapkan dengan vaccum rotary evaporator untuk mendapatkan ekstrak kental. Setelah didapatkan ekstrak kental (crude extract), kemudian ditimbang dengan menggunakan timbangan analitis sesuai dengan konsentrasi yang digunakan. Penyiapan Bibit Kunyit. Bibit rimpang kunyit disemai sampai muncul calon rimpang di peti kayu, rimpang yang baru dipanen dari kebun dijemur sementara (tidak sampai kering), kemudian disimpan. Dipilih rimpang yang memiliki 3-5 mata tunas (berat rimpang seragam), dikemas dan dicelupkan kedalam larutan fungisida selama 1 menit kemudian dikeringkan dan dimasukan kedalam peti kayu yang berukuran 40x40. Setelah 2-4 minggu bibit rimpang siap disemai (Nugroho, 1988). Pemberian Perlakuan Setelah semua polibag berisi bibit rimpang kunyit, kemudian tiap-tiap perlakuan diberi ekstrak daun rambutan sesuai dengan konsentrasi yang telah ditentukan yaitu 0%, 5%, 10%, 15% dan 20%. Ekstrak diberikan kurang lebih 75ml, setiap 3 hari sekali selama 12 minggu, kemudian dilakukan penyiraman dengan aquades setiap harinya. Pengamatan Morfologi Pengamatan morfologi tanaman kunyit dilakukan 2 hari setelah perlakuan awal diberikan dan selanjutnya dilakukan setiap 1 minggu sekali selama 12 minggu. Pengamatan meliputi tinggi tanaman, panjang daun, lebar daun, jumlah daun, jumlah tunas dan berat umbi. 65 HASIL Pengaruh pemberian ekstrak daun rambutan rapiah terhadap morfologi tanaman kunyit Pemberian ekstrak daun rambutan memberikan pengaruh yang sangat nyata terhadap tinggi tanaman, panjang daun, jumlah daun, lebar daun (P<0,01) namun tidak memberikan pengaruh yang nyata terhadap jumlah tunas dan berat rimpang kunyit (P > 0,01). Tabel 1. Signifikansi Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Rambutan Rapiah Terhadap Parameter yang Diamati Pameter yang diamati Tinggi tanaman Panjang daun Lebar daun Jumlah daun Jumlah tunas Berat rimpang 1 ** ** ** ** - Kunyit bulan ke2 ** ** ** ** - 3 ** ** ** ** tn tn Keterangan : tn :tidak berbeda nyata pada taraf uji 1% ( P<0,01), **:berbeda sangat nyata pada taraf uji 1% (P<0,01) Hasil uji Anova menunjukkan bahwa ekstrak daun rambutan memberikan pengaruh yang sangat nyata (P<0,01) terhadap tinggi tanaman, panjang daun, lebar daun, jumlah daun tanaman kunyit sehingga dapat dilanjutkan ke uji Duncan untuk melihat perbedaan antar perlakuan dan dapat dinotasikan pada Gambar 1. a. Tinggi Tanaman Pemberian ekstrak daun rambutan rapiah memberikan pengaruh terhadap tinggi tanaman kunyit . Pada akhir pengamatan diperoleh hasil tanaman kunyit tertinggi pada kontrol dengan tinggi 71,0 cm dan terendah pada konsentrasi 20% dengan tinggi 36,2 cm. Gambar 1. Pengaruh pemberian ekstrak daun rambutan rapiah terhadap tinggi tanaman kunyit Keterangan : Grafik yang diikuti oleh huruf yang sama adalah tidak berbeda nyata pada uji Duncan 66 Hasil ANOVA menunjukan bahwa ekstrak daun rambutan rapiah memberikan pengaruh terhadap tinggi tanaman kunyit (P< 0,01) Hambatan tertinggi yaitu pada konsentrasi 20% dibandingkan dengan kontrol dimana pada akhir pengamatan terlihat perbedaan yang nyata antara kontrol dan pemberian perlakuan. b. Panjang Daun Pemberian ekstrak daun rambutan rapiah memberikan pengaruh yang sangat nyata terhadap panjang daun temulawak ( P<0,01). Panjang daun tertinggi terdapat pada konsentrasi 0% (kontrol) dengan panjang 27,3 cm dan terendah pada konsentrasi 20 % dengan panjang 13,3 cm (Gambar 2). Gambar 2. Pengaruh pemberian ekstrak daun rambutan rapiah terhadap panjang daun kunyit Keterangan : Grafik yang diikuti oleh huruf yang sama adalah tidak berbeda nyata pada uji Duncan Hasil ANOVA menunjukan bahwa ekstrak daun rambutan rapiah memberikan pengaruh terhadap panjang daun temulawak (P< 0,01). Dimana dapat dilihat pada grafik kontrol dan pemberian perlakuan memberikan perbedaan yang nyata. c. Lebar Daun Ekstrak daun rambutan rapiah pada konnsentrasi 0%, 5%, 10%, 15% dan 20% memberikan pengaruh yang nyata terhadap lebar daun tanaman kunyit (P< 0,01), dimana dapat dilihat adanya perbedaan yang nyata antara kontrol dan pemberian perlakuan (Gambar 3). d. Jumlah Daun Pemberian ekstrak daun rambutan pada konsentrasi 5%, 10%, 15% dan 20% terlihat adanya perbedaan jumlah daun kunyit jika dibandingkan dengan kontrol (0%) (Gambar 4). 67 Gambar 3. Pengaruh pemberian ekstrak daun rambutan rapiah terhadap lebar daun kunyit Keterangan : Grafik yang diikuti oleh huruf yang sama adalah tidak berbeda nyata pada uji Duncan Hasil uji ANOVA menunjukan ekstrak memberikan pengaruh yang nyata (P<0,01) terhadap lebar daun tanaman kunyit, dimana lebar daun terpanjang pada akhir pengamatan yaitu pada kontrol 7,6 cm dan terendah pada konsentrasi 20% yaitu 4,5 cm. Gambar 4. Pengaruh pemberian ekstrak daun rambutan rapiah terhadap jumlah daun kunyit Keterangan : Grafik yang diikuti oleh huruf yang sama adalah tidak berbeda nyata pada uji Duncan Hasil uji Anova menunjukan ekstrak daun rambutan rapiah memberikan pengaruh yang nyata terhadap jumlah daun kunyit (P<0,01) sehingga dapat dilanjutkan ke uji Duncan dengan jumlah daun terbanyak pada kontrol yaitu 10 buah dan paling sedikit pada konsentrasi 20% dengan jumlah 6 buah, dimana kontrol dan pemberian perlakuan memberikan perbedaan yang nyata, namun antar masingmasing konsentrasi 5%,10%,15%,20% tidak memberikan pengaruh yang nyata terhadap panjang daun kunyit (P>0,01) 68 e. Jumlah Tunas Gambar 5. Pengaruh pemberian ekstrak daun rambutan rapiah terhadap jumlah tunas tanaman kunyit Hasil uji Anova menunjukan bahwa ekstrak daun rambutan rapiah tidak memberikan pengaruh terhadap jumlah tunas kunyit (P >0,01) dengan jumlah tunas tertinggi pada konsentrasi 0% dengan jumlah 7 buah dan terendah pada konsentrasi 20% sebanyak 6 buah. Sehingga tidak dilanjutkan ke Uji Duncan untuk melihat masing-masing perbedaan. f. Berat Rimpang Pengaruh ekstrak daun rambutan terhadap berat rimpang kunyit setelah diberi perlakuan ekstrak 0%, 5%, 10%, 15%, 20% diperoleh berat rimpang tertinggi pada kontrol dengan berat 50,8 gram dan terendah pada konsentrasi 15% dengan berat 36,7 gram. Gambar 6. Pengaruh pemberian ekstrak daun rambutan rapiah terhadap berat rimpang tanaman kunyit. Hasil uji Anova menunjukan ekstrak daun rambutan rapiah tidak memberikan pengaruh (P>0,01) terhadap berat rimpang kunyit. Dimana dapat dilihat pada grafik yaitu pada kontrol dan pemberian ekstrak daun rambutan 5%,10%,15%,20% tidak terlihat perbedaan yang nyata sehingga tidak dilanjutkan ke Uji Duncan. 69 PEMBAHASAN Berdasarkan hasil analisis statistik anova menunjukan pemberian ekstrak daun rambutan memberikan pengaruh terhadap tinggi tanaman, panjang daun, lebar daun, jumlah daun, namun tidak memberikan pegaruh terhadap jumlah tunas dan berat umbi kunyit. Pada akhir pengamatan, ekstrak memberikan pengaruh yang sangat nyata terhadap tinggi tanaman. Secara teori, pertumbuhan tinggi tanaman disebabkan adanya proses pembelahan sel, yang dipengaruhi oleh aktivitas hormon seperti : auksin, giberelin dan sitokinin. Hal tersebut didukung oleh pendapat Einhellig (1995), bahwa pengaruh senyawa alelokimia yang terdapat pada ekstrak daun rambutan terhadap pertumbuhan dan perkembangan organisme sasaran melalui serangkaian proses yang cukup kompleks. Proses tersebut diawali di membran sel dengan terjadinya kerusakan struktur, modifikasi saluran membran, atau hilangnya fungsi enzim ATPase. Hambatan berikutnya terjadi dalam proses sintesis protein, pigmen dan senyawa karbon lain, serta aktivitas beberapa fitohormon salah satunya yaitu hormon auksin Pada panjang daun ekstrak daun rambutan memberikan pengaruh yang nyata. Hal ini dapat dilihat dari penurunan panjang daun antara kontrol dan pemberian perlakuan.Hal ini disebabkan karena dengan pemberian ekstrak daun rambutan mengganggu aktivitas hormon auksin dan giberelin penghambatan pertumbuhan dan perkembangan tanaman sehingga panjang daun mengalami penurunan. Pada lebar daun menunjukan bahwa pemberian ekstrak daun rambutan memberikan pengaruh terhadap lebar daun kunyit. Hal ini disebabkan adanya senyawa tanin yang terdapat pada tanaman rambutan yang dapat menghambat pertumbuhan tanaman pada konsentrasi 15%, justru lebih lebar dibandingkan dengan konsentrasi 20%. Ekstrak daun rambutan dapat merangsang pertumbuhan tanaman apabila diberikan pada konsentrasi yang tepat (optimal) dan dapat menghambat pertumbuhan apabila diberikan pada konsentrasi yang lebih tinggi. Tanin mempunyai bahan aktif senyawa fenol, dimana senyawa fenol dalam bahan aktif memacu pertumbuhan apabila pada konsentrasi yang tepat dan menghambat apabila pada konsentrasi yang berlebih (Ratnawati, 1988). Pada jumlah tunas, ekstrak daun rambutan rapiah tidak memberikan pengaruh yang nyata terhadap pertumbuhan kunyit (P>0,01). Hal ini disebabkan karena karbohidrat yang tersimpan pada rimpang tanaman kunyit mampu bertahan terhadap ekstrak daun rambutan. Selain itu faktor eksternal seperti temperature juga mempengaruhi pertumbuhan tunas, dimana temperatur yang tepat dapat mempengaruhi sehingga ekstrak daun rambutan rapiah tidak memberikan pengaruh terhadap jumlah tunas kunyit. Ekstrak daun rambutan rapiah tidak memberikan pengaruh terhadap berat rimpang kunyit (P> 0,01). Hal ini disebabkan karena hormon dan cadangan makanan yang tersimpan dalam rimpang kunyit masih mampu bertahan terhadap pemberian ekstrak daun rambutan rapiah. Menurut Sutopo (2006), semakin besar ukuran rimpang maka kandungan protein semakin banyak. Besar bibit rimpang berpengaruh terhadap kecepatan pertumbuhan dan produksi, karena besarnya bibit menentukan besarnya calon rimpang pada saat permulaan dan berat tanaman saat dipanen. SIMPULAN Hasil penelitian menunjukan ekstrak daun rambutan memberikan pengaruh secara nyata (P<0,01) terhadap variabel pertumbuhan yang diamati seperti : tinggi tanaman, panjang daun, lebar daun, jumlah daun, namun tidak memberikan pengaruh (P>0,01) terhadap jumlah tunas dan berat rimpang. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan ekstrak daun rambutan konsentrasi yang lebih tinggi serta digunakan daun rambutan yang telah gugur untuk memastikan efek senyawa alelopati dari daun rambutan. Selain itu dicoba menggunakan tanaman tumpang sari dengan jenis rimpang yang berbeda. 70 UCAPAN TERIMAKASIH Penulis berterimakasih kepada Dr. Dra. Ni Putu Adriani Astiti, M.Si, Dr. Ir. Luh Putu Wrasiati, MP, Dra. I.G.A Sugi Wahyuni, M.Si, Ir Made Ria Defiani, M.Sc (Hons), Dra. Ni Made Puspawati, M.Pill., Ph.D atas segala saran dan masukan yang telah diberikan dalam penulisan naskah ini KEPUSTAKAAN Einhelig, F.A. 1996. Interactions involving allelopathy in cropping system. Agron J. 88:886893.Fagliano, V. 1999. Method for measuring antioxsidant activity and its application to monitoring the antioxsidant capacity of wine. JurnalAgricultur.Food.Chem. 4:1035-1040. Nugroho, N. A. 1998. Manfaat dan prospek pengembangan kunyit. Ungaran,Trubus Agriwidya. 86 hal. Oyun, M. B. 2006. Allelopathic potentialities of Gliricidia sepium and Acacia auriculiformis on the germination ang seedling vigour of maize (Zea mays L.). American Journal of Agricultural and Biological Science. 1(3): 44-47. Pribadi, E.R., M. Januwati dan M. Yusron. 2000. Potensi tanaman obat sebagai tanaman sela di bawah tegakan hutan rakyat. Prosiding Simposium Nasional dan Kongres VII PERAGI, Bogor, 21-23 Maret 200. pp. 336-344. Savitri. 2006. Diabetes Cara Mengetahui Gejala Diabetes dan Mendeteksinya Sejak Dini. Jakarta: BIP Sutopo, H.B. 2006. Metodologi Penelitian Kualitatif. Surakarta: Universitas Sebelas Maret. Taiz, L. dan Zeiger, E. 1991. Plant Physiology Third Edition. Sinauer Associates Inc. Publishers. Sunderland, Massachusetts. Warsana. 2009. Introduksi teknologi tumpangsari jagung dan kacang tanah. BPTP. Jawa Tengah 71 PELAKSANAAN AWIG-AWIG FAKTOR KEBERHASILAN BIOLOGI KONSERVASI JALAK BALI (Leucopsar rothschildi Stresemann, 1912 ) DI KEPULAUAN NUSA PENIDA AWIG-AWIG IMPLEMENTATION SUCCESS FACTORS FOR CONSERVATION BIOLOGY BALI STARLING (Leucopsar rothschildi Stresemann, 1912) IN NUSA PENIDA ISLANDS Sudaryanto1, Cut Sugandawaty Djohan2, Satyawan Pudyatmoko3, Jusup Subagja2 1 Mahasiswa S3 Fakultas Biologi UGM,2 Fakultas Biologi UGM., 3 Fakultas Kehutanan UGM. Email: [email protected] INTISARI Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) sejak tahun 1966 oleh IUCN (International Union for Conservation of Nature) Red List of Threatened Species dan CITES (Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora) dikelompokkan sebagai satwa terancam punah dengan kategori kritis (Critically Endangered) dan di Indonesia telah dilindungi sejak tahun 1970. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui pelaksanaan awig-awig yang merupakan faktor keberhasilan Biologi Konservasi Jalak Bali di Kepulauan Nusa Penida. Pelaksanaan awig-awig di masyarakat diperoleh melalui observasi, wawancara, pengisian kuesioner dengan indept interview. dengan jumlah responden sebesar 95 orang. Analisis data dengan menggunakan Proses Hirarki Analitik (PHA) (Analitic Hirarchy Process) (Atmanti, 2008; Saaty,1993; 1999; 2008). Penghitungan populasi Jalak Bali dengan penghitungan langsung secara terkonsentrasi, dan perilakunya menggunakan metode Scan Sampling dengan Instantaneous Sampling (Altman, 1974; Martin & Bateson, 1987). Awig-awig dinilai sebagai faktor paling penting yaitu 47,32%, kemudian kesejahteraan masyarakat 23,43%, keanekaragaman hayati sebesar 13,74%, pariwisata 11,89%, dan hukum formal hanya 3,62%. Populasi Jalak Bali di Pulau Nusa Penida dan Pulau Nusa Lembongan pada bulan Oktober 2014 ada 60 ekor, dan setahun melakukan reproduksi sebanyak tiga kali yaitu bulan Desember, Juni dan September. Kata kunci: awig-awig, jalak Bali, Leucopsar rothschildi, Nusa Penida, biologi konservasi. ABSTRACT Bali Starling (Leucopsar rothschildi) since 1966 by the IUCN (International Union for Conservation of Nature) Red List of Threatened Species and CITES (Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora) are classified as the critically endangered category and in Indonesia has been protected since 1970. The purpose of this study was to investigate the implementation awig-awig a key success factor Conservation Biology Bali Starling on the islands of Nusa Penida. Awig-awig implementation in society obtained through observation, interviews, questionnaires with in depth interview. The number of respondents is 95 people. Analysis of the data by using the Analytic Hierarchy Process (AHP) (Atmanti, 2008; Saaty, 1993; 1999; 2008). Calculation of the Bali starling population is concentrated by direct calculation, and behavior using the Scan Sampling Instantaneous (Altman, 1974; Martin & Bateson, 1987). Awig-awig rated as the most important factor is 47,32%, and 23,43% public welfare, biodiversity amounted to 13,74%, 11,89% tourism, and formal law is only 3,62%. Bali starling population on the island of Nusa Penida and Nusa Lembongan Island in October 2014 there were 60 birds, and a year reproducing three times, namely in December, June and September. Keywords: awig awig, Bali starling, Leucopsar rothschildi, Nusa Penida, biology conservation. 72 PENDAHULUAN Jalak Bali (Leucopsar rothschildi Stresemann, 1912) adalah burung endemik Pulau Bali, dan pertama kali ditemukan oleh Erwin Stresemann pada tahun 1911 di Desa Bubunan Kecamatan Seririt Kabupaten Buleleng, dan distribusinya sampai di Taman Nasional Bali Barat (van Balen et al. 2000; Sudaryanto, 2014). Sementara itu, kehadiran burung tersebut pada tahun 1950an sudah tidak terlihat lagi di Bubunan Buleleng. Namun pada tahun 1960an Jalak Bali masih terdapat di Selemadeg Tabanan, pada tahun 1980an di Melaya Jembrana, dan pada tahun 1990an burung tersebut masih ditemukan di Pupuan Tabanan (Sudaryanto, 2014). Selain itu, Schmidt (1983) mengatakan bahwa Jalak Bali pernah hidup di Pulau Nusa Penida. Burung Jalak Bali dalam IUCN Red List of Threatened Species dimasukkan ke dalam kategori kritis (Critically endangered). CITES memasukan burung tersebut ke dalam Appendix I, dan juga PP RI No 7 tahun 1999 tentang pengawetan jenis tumbuhan dan satwa (Anonymous, 1999; 2012a; b; Sodhi et al. 2004; Jepson et al. 2008; Jepson & Ladle, 2008). Jalak Bali merupakan burung peliharaan yang terkenal karena keindahan bulunya, dan harganya mahal karena termasuk burung langka sehingga tidak mudah untuk mendapatkannya. Di pasar gelap burung ini pada tahun 2004 harganya sekitar Rp 40.000.000 per ekor (Anonymous, 2004). Penangkapan Jalak Bali secara ilegal di TN. Bali Barat sudah terjadi sejak tahun 1960an, akibatnya populasi Jalak Bali di TN. Bali Barat semakin berkurang (van Balen et al. 2000; Butchart et al. 2006; Indrawan et al. 2007). Populasi Jalak Bali yang hidup liar di TN. Bali Barat pada tahun 2012 hanya 4 ekor. Sedangkan usaha konservasi burung tersebut telah dilakukan oleh Kementrian Kehutanan, BirdLife Indonesia Programme dan Asosiasi Pelestari Curik Bali (APCB) di TN. Bali Barat. Bahkan, sampai tahun 2009 telah dilepasliarkan kira-kira 100 ekor Jalak Bali di TN. Bali Barat (Dirgayusa, 1995, Sudaryanto et al. 2003; Sutito et al. 2012). Konservasi Jalak Bali yang telah dilakukan di TN. Bali Barat ternyata belum berhasil. Oleh sebab itu, mulai tahun 2006 usaha konservasi Jalak Bali juga dilakukan oleh Friends of the National Park Foundation (FNPF) bekerjasama dengan Pemda Propinsi Bali dan Universitas Udayana bertempat di Pulau Nusa Penida Kabupaten Klungkung. Usaha tersebut dengan melepasliarkan 57 ekor Jalak Bali di Pura Penataran Ped Pulau Nusa Penida, dan pertama kali dilepaskan pada tanggal 13 Juni 2006 sebanyak satu pasang (Wirayudha, 2007). Tri Hita Karana (Tri = tiga, Hita = baik, bahagia, atau sejahtera, Karana = penyebab) adalah salah satu ajaran dalam agama Hindu, mengandung pengertian tiga penyebab kebaikan, kebahagiaan atau kesejahteraan dan itu bersumber pada keharmonisan hubungan antara: manusia dengan Tuhannya, manusia dengan alam lingkungannya dan manusia dengan sesamanya. Penjabaran Tri Hita Karana berupa awig-awig atau hukum adat adalah perangkat aturan yang mengatur warga di tingkat desa pakraman dan banjar pakraman di Bali (Sutawan, 2004; Sudaryanto, 2007; Sudantra, 2008; Astiti et al. 2011). Awig-awig adalah patokan-patokan bertingkah laku, baik yang ditulis maupun tidak ditulis, yang dibuat masyarakat adat di Pulau Bali berdasarkan rasa keadilan dan kepatutan yang hidup didalam masyarakat yang bersangkutan. Awig-awig mengatur tentang parhyangan sebagai segala aspek/dimensi/bidang yang mencakup hubungan manusia dengan Tuhannya, pawongan sebagai dimensi/aspek atau bidang yang mencakup hubungan manusia dengan manusia lainnya dan palemahan sebagai dimensi/aspek atau bidang yang menyangkut hubungan manusia dengan lingkungannya. Sebagai patokan bertingkah laku, awig-awig dilengkapi dengan sanksi (pamindada) yang bersifat hukum, sehingga awig-awig merupakan salah satu bentuk hukum adat Bali (Sutawan, 2004; Sudaryanto, 2007; Sudantra, 2008; Astiti, 2007; Astiti et al. 2011). 73 Di Kepulauan Nusa Penida sejak tahun 1997 sudah melaksanakan awig-awig untuk melindungi semua jenis burung, yang harus ditaati seluruh warga Kepulauan Nusa Penida dan pendatang. Saat ini sudah seluruh desa pakraman di Kepulauan Nusa Penida sebanyak 46 desa pakraman yang telah memiliki dan melaksanakan awig-awig tersebut. Salah satu sanksi dari awig-awig tersebut adalah orang yang menangkap, menjual dan menembak burung dikenai sanksi harus membayar denda. Sanksi sosialnya yakni dikucilkan tidak boleh mengikuti upacara di pura, diberlakukan bagi yang berkali-kali melanggar awig-awig tersebut (Sudaryanto, 2007; Wirayudha, 2007). Analisis data dengan menggunakan Proses Hirarki Analitik (PHA) (Analitic Hirarchy Process/AHP) sebagai berikut: Biologi Konservasi Jalak Bali Level 1: Tujuan Populasi Jalak Bali Level 2: Partisipasi Masyarakat Kriteria Level 3: Awig-awig Alternatif Hukum formal Keanekaragaman hayati Pariwisata Kesejahteraan Masyarakat Gambar 1. Bagan alir konsep model Proses Hirarki Analitik (PHA) Pada Biologi Konservasi Jalak Bali di Kepulauan Nusa Penida . Hipotesis Berdasarkan kajian dari penelitian sebelumnya, maka dalam penelitian ini dihipotesiskan bahwa: a) masyarakat Kepulauan Nusa Penida menaati dan melaksanakan awig-awig untuk melindungi burung khususnya Jalak Bali. b) populasi Jalak Bali di Kepulauan Nusa Penida bertambah banyak karena dukungan masyarakat yang menaati awig-awig. MATERI DAN METODE Penelitian dilakukan dari bulan 1 November 2013 – 31 Oktober 2014. Data pelaksanaan awigawig di masyarakat diperoleh melalui observasi, wawancara, pengisian kuesioner dengan indept interview. Di Kepulauan Nusa Penida terdapat 1200 orang kepala keluarga dan sebagai responden 95 orang. Analisis data dengan menggunakan Proses Hirarki Analitik (PHA) (Analitic Hirarchy Process/AHP) (Atmanti, 2008; Saaty,1993; 1999; 2008). Untuk penghitungan populasi Jalak Bali menggunakan 2 cara yaitu: penghitungan dilakukan secara langsung di pohon-pohon tempat tidur (roosting site) Jalak Bali (van Balen, 1995), dan 74 penghitungan dilakukan di daerah Jalak Bali mencari makan (feeding site). Di Pulau Nusa Penida terdapat 10 tempat dan di Pulau Nusa Lembongan 2 tempat. Yaitu: Pulau Nusa Penida di areal Kantor Friends of the National Park Foundation (FNPF), Pura Penataran Ped, Pura Dalem Bungkut, Banjar Biaung, Banjar Sebunibus, Pura Puseh Desa Ped, Banjar Sental Kawan, Banjar Sental Kangin, Banjar Penida dan Pura Tinggar Banjar Nyuh. Kemudian distribusi Jalak Bali di Pulau Nusa Lembongan pada 2 tempat, yaitu: di Desa Lembongan dan di Pura Puaji Desa Jungut Batu. Penelitian perilaku harian Jalak Bali dengan menggunakan metode Scan Sampling dengan Instataneous Sampling (Altman, 1974; Martin & Bateson, 1987), dengan interval waktu pencatatan adalah 5 menit. HASIL Seluruh desa pakraman di Kepulauan Nusa Penida sebanyak 46 desa pakraman, telah mempunyai awig-awig yang didalamnya berisi perlindungan terhadap burung. Contohnya awig-awig dari Desa Adat Lembongan: Tabel 1. Pararem Awig-Awig Desa Adat Lembongan (Anonymous, 2002) Indik Kalestarian Lingkungan 6. Tan kadadosan mabedilan (nembak) kedis sajebag Desa Adat Lembongan. 7. Yan prade wenten sane piwal antuk kecaping ring ajeng patut kadanda a. Kandanyakang ring sangkepan Desa b. Tan polih pangerombo ilikita nyantos atiban Gambar 2. Pemilihan alternatif Biologi Konservasi Jalak Bali 75 Di Kepulauan Nusa Penida terdapat 1200 orang kepala keluarga, dengan jumlah responden sebesar 95 orang, terdiri dari 65 orang kepala keluarga dan 30 orang pelajar SMP/SMA. Untuk mengetahui pelaksanaan awig-awig dilakukan observasi, wawancara, pengisian kuesioner dengan indept interview. Level kriteria keberhasilan biologi konservasi Jalak Bali adalah bertambahnya populasi burung tersebut dan partisipasi dari seluruh masyarakat (Gambar 1). Ternyata kedua kriteria tersebut dianggap sama-sama penting oleh mayarakat. Untuk level alternatif pelaksanaannya terdapat skala prioritas. Awigawig dinilai alternatif paling penting yaitu 47,32%, kemudian kesejahteraan masyarakat 23,43%, keanekaragan hayati 13,74%, pariwisata 11,89%, dan hukum formal hanya 3,62% (Gambar 2). Hasil penghitungan populasi Jalak Bali pada 12 lokasi di Kepulauan Nusa Penida selama satu tahun hasilnya adalah sebagai berikut : Tabel 2. Populasi Jalak Bali di Kepulauan Nusa Penida No Lokasi 1 Pura Ped 2 FNPF* 3 Bungkut Sental 4 Kawan 5 Puseh 6 Biaung 7 Sebunibus 8 Puaji 9 Gala-gala 10 Penida Sental 11 Kangin 12 Nyuh 13 Batu Madeg Jumlah Keterangan: 2007 Nov Des Jan Feb 13 13 14 14 42 2 2 4 4 5 5 6 6 3 4 8 8 Mart Apr Mei 14 14 14 4 4 4 6 6 6 8 8 8 Jun 14 4 6 8 Jul 14 4 6 8 Agst 14 4 6 8 Sept 14 4 6 8 Okt 14 4 8 8 - 3 2 2 2 4 4 - 4 2 4 2 4 4 - 6 4 4 2 4 6 2 6 4 4 2 4 6 2 6 4 4 2 4 6 2 6 4 4 2 4 6 2 6 4 4 2 4 6 2 6 4 4 2 4 6 2 6 4 4 2 4 6 2 6 4 4 2 4 6 2 6 4 4 2 4 6 2 6 8 4 2 6 6 2 15 57 0 27 0 31 0 46 0 46 4 0 50 4 0 50 4 0 50 4 2 0 52 4 2 0 52 4 2 0 52 4 2 0 52 4 2 0 60 *FNPF: areal kantor Friends of the Natural Park Foundation. - : tidak terdapat Jalak Bali. 0 : tidak ditemukan lagi Jalak Bali. PEMBAHASAN Semua responden menyatakan setuju Jalak Bali dilindungi awig-awig dan menjadi milik desa pakraman. Meskipun pada awig-awig ditulis larangan berburu burung secara umum, contohnya: Tan kadadosan mabedilan (nembak) kedis….. Tabel 1 teta i yang di aksud burung khususnya adalah Jalak Bali. Pada level alternatif masyarakat lebih percaya dan patuh terhadap awig-awig (47,32%) dibandingkan dengan hukum formal seperti Perda (Peraturan Daerah) untuk melindungi burung yang hanya dipilih 3,62% responden. Hal tersebut sesuai dengan pernyataan Kapolres Gianyar, bahwa masyarakat lebih takut kepada hukum adat dibanding hukum positif, karena masyarakat masih sangat kuat memegang adat yang ada (Anonymous, 2014a). Hal itu terjadi karena awig-awig adalah patokan bertingkah laku, baik yang ditulis maupun tidak ditulis, yang dibuat masyarakat adat di Pulau Bali secara 76 musyawarah, berdasarkan rasa keadilan dan kepatutan yang hidup didalam masyarakat yang bersangkutan (Sutawan, 2004; Sudaryanto, 2007; Sudantra, 2008; Astiti, 2007; Astiti et al. 2011). Alternatif kesejahteraan masyarakat 23,43%, hal itu berkaitan dengan keperluan lapangan pekerjaan yang dirasakan penduduk di sana. Di Kepulauan Nusa Penida perlu banyak lapangan kerja, contohnya menurut Suwindra (2012) di Desa Suana penduduk yang berusia diatas 16 tahun yang sedang mengikuti pendidikan 18,71%, sedangkan 81,29% tidak melanjutkan sekolah. Banyak juga penduduknya yang bekerja di Pulau Bali, bahkan ada yang menjadi transmigran di Sulawesi dan Sumatra. Lapangan pekerjaan tersebut juga berkaitan dengan alternatif pariwisata sebanyak 11,89%. Besar harapan masyarakat bahwa pariwisata dapat memberikan lapangan pekerjaan yang dibutuhkan masyarakat. Alternatif keanekaragaman hayati flora dan fauna sebanyak 13,74%, karena banyak wisatawan yang datang ke Kepulauan Nusa Penida untuk menikmati hal tersebut. Pariwisata pengamatan Jalak Bali dengan flora dan fauna lainnya menurut Agustina (2013) dapat mengembangankan ekowisata di Kepulauan Nusa Penida. Populasi Jalak Bali di Kepulauan Nusa Penida di bulan Oktober 2014 jumlahnya 60 ekor (Tabel 2), ini adalah merupakan keturunan kedua atau ketiga dari burung tersebut yang dilepaskan antara tahun 2006-2007. Hal tersebut diketahui karena burung yang ditemukan sekarang tidak memakai cincing di kakinya, seperti burung-burung yang dilepaskan pada waktu itu. Jalak Bali dilepasliarkan ketika berumur kira-kira 2 tahun, sedangkan rata-rata harapan hidup burung tersebut adalah 7,4 tahun (Anonymous, 2014b). Jalak Bali di Kepulauan Nusa Penida ada yang dapat berkembang biak tiga kali dalam setahun yaitu bulan Desember, Juni dan Oktober. Menurut Cahyadin (1993) dan Sudaryanto (2015) di TN. Bali Barat, Jalak Bali hanya berbiak pada bulan Desember. Hal ini adalah karena berlimpahnya makanan Jalak Bali di Pulau Nusa Penida. Ginantra et al. (2009) melaporkan pada kebun pemukiman (agroforestry) di Pulau Nusa Penida terdapat105 jenis tumbuhan habitat Jalak Bali. Sedangkan Sudaryanto et al. (2013) melaporkan bahwa habitat Jalak Bali di Pulau Nusa Penida terutama pada 27 spesies tumbuhan. Yaitu pohon kelapa (Cocos nucifera), mangga (Mangifera indica), asam (Tamarindus indica), singapur (Muntingia calabura), angih (Ficus sp.), ancak (Ficus rumphii), bunut (Ficus glabella), pungak-pungak (Ficus sp.), api-api (Avicennia marina), buni (Antidesma bunius), kluwih (Arthocarpus altilis), aren (Arenga pinnata), pule (Alstonia scholaris), jambu monyet (Anacardium occidentale), jati (Tectona grandis), kayu urip (Euphorbia tirucalli), tuwi (Sesbania grandifolia), santan (Lannea grandis), duwet (Syzgium cumini), kampuak (Psidium sp.), krasi (Lantana camara), pisang (Musa paradisiaca), ketela pohon (Manihot utillisima), waru (Hibiscus sinensis), nangka (Artocarpus heterophylla), gamal (Gliricidia sepium), lamtara (Leucaena glauca) dan kamboja (Plumeria acuminata). Populasi Jalak Bali yang hidup liar di Kepulauan Nusa Penida saat ini lebih banyak dari pada di TN. Bali Barat pada tahun 2012 yaitu 4 ekor (Sutito et al. 2012). Menurut informasi dari pihak Polsek Nusa Penida, Bendesa Adat dan warga di Kepulauan Nusa Penida, selama ini belum ada laporan atau yang melihat atau mendengar adanya pencurian Jalak Bali. Jalak Bali dilepaskan di Pura Penataran Ped Pulau Nusa Penida dan Pura Puaji Jungut Batu Pulau Nusa Lembongan dengan upacara keagamaan, oleh karena itu burung tersebut dianggap oleh masyarakat sebagai burung Pura (Duwe Pura). Maka masyarakat yang menaati awig-awig ikut menjaga kehadiran burung tersebut. Di dalam Biologi Konservasi dikatakan bahwa konservasi suatu spesies di habitatnya akan berhasil bila masyarakat sekitarnya juga ikut menjaga (Indrawan et al. 2007). SIMPULAN Berdasarkan penelitian tersebut di atas dapat disimpulkan: Biologi Konservasi Jalak Bali di Kepulauan Nusa Penida berhasil terutama berkat adanya awig-awig. Populasi Jalak Bali di Kepulauan Nusa Penida bertambah, berkesinambungan, dan dapat berkembangbiak tiga kali dalam setahun. Agar 77 keberadaan awig-awig di Kepulauan Nusa Penida yang berisi larangan mengganggu burung khususnya Jalak Bali dijaga dan dilestarikan. Agar keanekaragaman hayati di Kepulauan Nusa Penida sebagai habitat Jalak Bali tetap terjaga. KEPUSTAKAAN Agustina, R. 2013. Strategi pengembangan ekowisata Jalak Bali (Bali starling) berbasis masyarakat di Pulau Nusa Penida Kabupaten Klungkung. (http://www.pps.unud.ac.id/thesis/detail-657-strategipengembangan-ekowisata-jalak-balibali-starling-berbasis-masyarakatdi-pulau-nusa-penidakabupaten-klungkung.html). Diakses tanggal 18 Desember 2014. Altman, J. 1974. Observational Study of Behavior: Sampling Methods. Behavior. 49: 227-267. Anonymous. 1999. Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 7 Tahun 1999. Tentang Pengawetan Jenis Tumbuhan Dan Satwa. Presiden Republik Indonesia. (http://www.dephut.go.id/INFORMASI/pp/7_99.htm). Diakses tanggal 1 Juni 2009. ______. 2002. Pararem Awig-Awig Desa Adat Lembongan. Desa Adat Lembongan. Klungkung. ______. 2004. Pencuri Jalak putih Di TNBB Orang Dalam. Bali Post. 30 Juni 2004. ______. 2012a. Leucopsar rothschildi.The IUCN Red List of Threated (http://www.iucnredlist.org/details/106006822/0). Diakses tanggal 1 Desember 2012. Species. ______. 2012b. Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora.Appendices I, II and III. (http://www.cites.org). Diakses tanggal 1 Desember 2012. ______. 2014a. Awig-Awig Hukum Adat Lebih Ditakuti Warga Bali Dibanding Hukum Positif. (http://www.tribunnews.com/nasional/2014/03/06/hukum-adat-lebih-ditakuti-warga-balidibanding-hukum-positif). Diakses tanggal 18 Desember 2014. ______. 2014b. Bali Myna life Expectancy is 7.4 years. San Diego Animals. (http://animals.sandiego.org/animals/bali-mynah). Diakses tanggal 23 Mei 2014. Astiti, T. I. P., Windia, W., Sudantra, I K., Wijaatmaja, I G. M., Dewi. A. A. I. A. A. 2011. Implementasi Ajaran Tri Hita Karana Dalam Awig-awig. Excellence Research Universitas Udayana 2011. Denpasar. Atmanti, H. D. 2008. Analytical hierarchy process sebagai model yang luwes. Prosiding INSAHPS. Semarang. Butchart, S. H. M., Stattersfield, A. J. and Collar, N. J. 2006. How many bird extinctions have we prevented? Oryx. 40(3):266-278. Cahyadin, Y. 1993. Study Beberapa Aspek Ekologi Burung Jalak Bali (Leucopsar rothschildi Stresemann, 1912) Pada Musim Berkembang Biak Di Teluk Kelor Taman Nasional Bali Barat. Jurusan Biologi FMIPA Universitas Padjadjaran.Bandung. Skripsi. Dirgayusa, I W. 1995. Jalak Bali Leucopsar rothschildi Stresemann, 1912: Tinjauan Status, Pengetahuan dan Konservasi. Workshop Important Bird Area.BirdLife International Indonesia Programme.Bogor. Ginantra, I K., Dalem, A. A. G. R. Sudirga, S. K. Wirayudha, I G. N. B. 2009. Jenis-jenis Tumbuhan Sebagai Sumber Pakan Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) Di Desa Ped Nusa Penida lungkung Bali. Jurnal Bumi Lestari. 9(1):97-102. Indrawan, M., Primack R. B., Supriatna, J. 2007. Biologi Konservasi. Yayasan Obor. Jakarta. 78 Jepson, P. and Ladle, R. J. 2008. Developing new policy instruments to regulate consumption of wild birds: socio-demographic characteristics of bird-keeping in Java and Bali. Oryx in press. Jepson, P., Prana, M., Amama, F. 2008. Developing a certification system for captive bred birds in Indonesia. TRAFFIC Bulletin. 22(1): 7-9. Martin, P. & Bateson, P. 1987. Measuring behavior. An Introductory Guide Cambridge University Press. Cambridge. Saaty, T. L. 1993. Pengambilan keputusan bagi para pemimpin. Proses Hirarki Analitik untuk pangambilan keputusan dalam situasi yang kompleks. Penterjemah: L. Setiono. PT. Gramedia. Jakarta. _____. 1999. The seven pillars of the analytic hierarchy process. ISAHP Procedings. Kobe. _____. 2008. Decision making with the analytic hierarchy process. Int. J. Services Sciences. 1(1): 83-98. Schmidt, C. R. 1983. Jalak Bali (Leucopsar rothschildi). (http://www.cites.org/eng/resources/ID/fauna/Volume2/A227.051.013.001%20Leucopsar%20rothschildi_E.pdf). Diakses tanggal 20 Agustus 2010. Sodhi, N. S., Koh, L. P., Brook, B. W., Ng, P. K. L. 2004. Southeast Asian biodiversity: an impending disaster. TRENDS in Ecology and Evolution. 19(12): 654-660. Sudantra, I K. 2008. Pengaturan Penduduk Pendatang Dalam Awig-awig Desa Pekraman. (http://ejournal.unud.ac.id/abstrak/5_%20naskah%20sudantra.pdf). Diakses tanggal 20 Agustus 2010. Sudaryanto. 2007. Tri Hita Karana Menyelamatkan Jalak Bali. Seminar Nasional Penyelamatan Jalak Bali Dan Habitatnya. Prosiding Seminar Nasional Penyelamatan Jalak Bali (Leucopsar rothschildi). Denpasar.Sudaryanto. 2015. Behaviour Bali starling at Bali Barat National Park and Nusa Penida Island. Journal Veteriner in press. Sudaryanto, M.J. Imansyah, A. Suryakusumah. 2003. Konservasi Jalak Bali (Leucopsar rothschildi Stresemann, 1912). Proseding Seminar Nasional Biologi. Program Studi Biologi FMIPA Institut Teknologi Sepuluh November Surabaya. Sutawan, N. 2004. Tri Hita Karana And Subak. In Search for Alternative Concept of Sustainable Irrigated Rice Culture. Proceeding Symposium International Network for Water and Ecosystem in Paddy Fields.Tokyo. Sutito, A. D., Sumampau, T., Prana, M. S. ,Susilo, H. D., Sudarwati, R., Atmaja, I K., Wirayuda, IG. N. B., Kasmono, A., Sultan, K., Febrian, M., Candra, I., Bayu, V., Siran. 2012. Laporan Hasil Monitoring Dan Evaluasi Program Konservasi Curik Bali/ Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) Di Taman Nasional Bali Barat dan Desa Sumber Klampok. Asosiasi Pelestari Curik Bali. Bogor. Suwindra, INP., IK Suma, IK Suardana, IK Yoga, K Widnyana. 2012. IPTEKS Bagi Wilayah Nusa Penida.(http://lemlit.undiksha.ac.id/media/1227._i_nyoman_putu_suwindra,_m). Diakses tanggal 18 Desember 2014. van Balen, B., Dirgayusa, I W. A., Putra, I M. W. A., Prins, H. H. T. 2000. Status and distribution of the endemic Bali starling (Leucopsar rothschildi). Oryx. 34(3): 188-197. Wirayudha, N. B. 2007. Pelepasliaran Dan Perlindungan Burung Jalak Bali Di Nusa Penida. Nusa Penida Bird Sanctuary. Nusa Penida. 79 KONSERVASI HUTAN MANGROVE MELALUI DIVERSITAS PANGAN OLAHAN BUAH MANGROVE DI PESISIR KABUPATEN POHUWATO GORONTALO MANGROVE FOREST CONSERVATION THROUGH DIVERSITY FOOD PROCESSED OF MANGROVE FRUIT IN COASTAL POHUWATO GORONTALO Ramli Utina1,2, Jusna Ahmad1, Abubakar Sidik Katili1,2, Mustamin Ibrahim1,2 1 Jurusan Biologi FMIPA Universitas Negeri Gorontalo, Kota Gorontalo 2 Pusat Kajian Ekologi Pesisir berbasis Kearifan Lokal - UNG Email: [email protected] INTISARI Artikel ini mengungkap implementasi kegiatan pemanfaatan buah mangrove menjadi pangan bernilai ekonomi, dan kegiatan rehabilitasi kawasan mangrove. Tujuannya adalah, mendorong kaum perempuan pesisir melakukan konservasi hutan mangrove melalui usaha pengolahan buah mangrove menjadi penganan. Pendekatan kegiatan yaitu pelatihan ketrampilan dan pendampingan kelompok perempuan pesisir serta penguatan kelompok sadar lingkungan. Kegiatan ini telah dilakukan di tiga desa pesisir di Kabupaten Pohuwato, Provinsi Gorontalo. Hasil implementasi kegiatan adalah, terbentuknya tiga kelompok perempuan pesisir yang terampil membuat penganan berbahan dasar buah mangrove, memasarkan produk, dan rehabilitasi tujuh hektar lahan mangrove. Melalui kegiatan ini diharapkan penduduk pesisir memperoleh nilai ekonomi dari hasil hutan mangrove, menghindari penebangan mangrove, dan melakukan konservasi hutan mangrove sebagai upaya menekan emisi karbon yang berdampak pada pemanasan global dan perubahan iklim. Kata kunci: konservasi, hutan mangrove, diversitas pangan ABSTRACT This article reveal to implementation of the utilization of mangrove fruit into a valuable economy, and rehabilitation of mangrove forest. The goal is to encourage coastal women to conservation of mangrove forest through utilization of mangrove fruit into the food product. The approach of activity is skills training and mentoring of coastal women's groups, and strengthening the environmentally conscious group. This activity has been carried out in three coastal villages Pohuwato, Gorontalo. The results of the activity, three groups of coastal women are skilled confectionery (snack) products based on mangrove fruit, product market and rehabilitation 7ha of mangrove forest. Through this activity, the coastal community expected to derive economic value from mangrove forest, avoiding the harvesting of mangroves forest, conservation mangrove as an effort to minimize impact of carbon emissions on global warming and climate change. Keywords: conservation, mangrove forest, diversity of food 80 PENDAHULUAN Kawasan hutan mangrove di pesisir Kabupaten Pohuwato Provinsi Gorontalo menjadi salah satu kawasan penyangga pesisir Teluk Tomini. Luas tutupan hutan mangrove di kawasan ini makin menurun, tercatat dari tahun 1988 seluas 13.243,33Ha, dan di tahun 2010 tinggal 7.420,73 Ha (Djamaluddin, 2011). Terdapat kecenderungan makin menurunnya luas tutupan mangrove ini hingga tahun 2014 akibat alih fungsi lahan yang terus terjadi. Alih fungsi kawasan mangrove menjadi areal tambak menjadi penyebab utama berkurangnya luas kawasan, selain penebangan mangrove dalam skala kecil untuk kayu bakar, dijadikan arang dan bahan bangunan rumah oleh penduduk (Utina, 2008). Aktivitas perusakan kawasan hutan mangrove ini telah berdampak hilangnya fungsi ekosistem mangrove sebagai penyangga ekosistem pesisir lainnya, intrusi air laut dan menurunnya sumberdaya perikanan (Utina dan Alwiah, 2008). Kawasan pesisir Kabupaten Pohuwato meliputi Desa Torosiaje, Desa Torosiaje Jaya dan Desa Bumi Bahari, dihuni oleh sebagian terbesar suku Bajo. Tiga desa ini telah menjadi desa binaan dari Universitas Negeri Gorontalo. Hutan mangrove di pesisir Torosiaje cenderung mendapat tekanan alih fungsi hutan dari kawasan desa sekitarnya. Penduduk di desa-desa pesisir Torosiaje sebagian terbesar mata pencaharian keluarga sebagai nelayan, dan ini sangat tergantung pada kondisi dan sumberdaya alam pesisir dan laut (Ibrahim et al., 2013; Tri, dan Djenaan, 2007). Keterbatasan akses nelayan kecil kepada sumberdaya perikanan tangkap serta iklim yang tidak menguntungkan menyebabkan sumberdaya ikan sulit diperoleh sehingga keluarga nelayan beralih ke hutan mangrove, mereka dapat saja terpengaruh merambah hutan mangrove demi kebutuhan hidup (Ibrahim et al., 2013). Dengan demikian faktor yang mendorong aktivitas perusakan hutan mangrove adalah kebutuhan ekonomi untuk kelangsungan hidup keluarga. Persoalan utama yang harus dipertimbangkan adalah memenuhi kebutuhan ekonomi penduduk desa pesisir Torosiaje dengan memanfaatkan potensi sumberdaya alam yang tersedia. Kawasan Torosiaje merupakan desa wisata budaya dan ekowisata yang didukung kawasan hutan mangrove, sementara kaum perempuan memiliki pengetahuan lokal tentang pemanfaatan hutan mangrove. Buah mangrove selama ini belum dimanfaatkan penduduk sebagai bahan dasar pangan, misalnya penganan khas berbahan dasar buah mangrove yang mengisi pasar lokal maupun nasional juga masih terbatas. Melihat potensi sumberdaya mangrove dan potensi kaum perempuan di Torosiaje, maka kelompok perempuan di desa kawasan Torosiaje dapat diberdayakan dengan memanfaatkan buah mangrove sebagai mata pencaharian yang mendukung pendapatan keluarga. Apabila kelompok perempuan Torosiaje terampil mengolah dan memasarkan jenis pangan berbasis buah mangrove maka permintaan buah mangrove makin meningkat. Ini berarti masyarakat terdorong menanam mangrove dan memeliharanya hingga menghasilkan buah, sehingga terhindar dari tindakan menebang mangrove. Tujuan kegiatan ini adalah (1) memberdayakan kelompok perempuan pesisir dalam usaha produk pangan berbasis buah mangrove, dan (2) meningkatkan upaya rehabilitasi kawasan mangrove. Hasil yang diharapkan adalah (1) meningkatnya keterampilan kelompok perempuan pesisir mengolah, mengemas dan memasarkan produk pangan berbasis buah mangrove, sehingga mampu meningkatkan pendapatan rumah tangga nelayan, dan (2) mendorong masyarakat menanam mangrove sebagai upaya konservasi hutan mangrove. Dampak kegiatan ini adalah adanya perubahan pemahaman kaum perempuan pesisir bahwa mangrove memiliki potensi sebagai bahan pangan, dapat dibuat penganan khas dan menjadi mata pencaharian penduduk. Kemudian, untuk menyediakan bahan baku buah mangrove secara berkelanjutan maka perempuan terdorong menanam mangrove dan melestarikannya. Dengan demikian, kegiatan ini dapat pula memberdayakan kaum perempuan sehingga memiliki akses dalam upaya konservasi mangrove, menekan emisi karbon ke atmosfer yang berdampak pada pemanasan global dan perubahan iklim. 81 MATERI DAN METODE Kegiatan ini dilakukan dengan pendekatan pendampingan kelompok masyarakat, melibatkan kelompok perempuan (PKK) dan Kelompok Sadar Lingkungan (KSL). Lokasi kegiatan di 3 desa yaitu; Desa Torosiaje, Desa Torosiaje Jaya dan Desa Bumi Bahari Kecamatan Popayato Kabupaten Pohuwato Provinsi Gorontalo (Gambar 1). Gambar 1. Peta lokasi kegiatan rehabilitasi kawasan mangrove Aktivitas proyek meliputi (1) penyusunan modul pelatihan, (2) pelatihan keterampilan dan pendampingan tiga kelompok perempuan di 3 desa dalam usaha mengolah dan mengemas produk pangan berbasis buah mangrove, (3) pendampingan kelompok perempuan di 3 desa dalam usaha memasarkan produk pangan berbasis buah mangrove, dan (4) pendampingan rehabilitasi kawasan mangrove. Pelatihan keterampilan kelompok perempuan mengolah, mengemas dan memasarkan produk pangan berbasis buah mangrove dilaksanakan bulan Juni 2014. Setiap desa satu kelompok perempuan, setiap kelompok terdiri atas 10 orang perempuan meliputi 7 orang kaum ibu dan 3 orang remaja putri. Pelatihan keterampian diawali dengan penyusunan modul dan pembentukan kelompok peserta. Pendampingan kelompok perempuan dilaksanakan hingga Februari 2015. Rehabilitasi kawasan mangrove dilakukan di pesisisr desa Torosiaje Jaya pada lahan seluas 7 hektar ditanami 75000 bibit mangrove. Kegiatan rehabilitasi diawali dengan FGD dengan Kelompok Sadar Lingkungan (KSL) Desa Torosiaje Jaya, kegiatan penyemaian bibit mangrove dalam polybag, penanaman bibit mangrove di lahan rehabilitasi, dan penyulaman. Pendampingan rehabilitasi mangrove dilaksanakan hingga Februari 20015. HASIL Pendampingan Kelompok Perempuan dalam Pengolahan Pangan Berbasis Buah Mangrove Pendampingan kelompok perempuan dilaksanakan oleh 3 tim yang dibentuk oleh Pusat Kajian Ekologi Pesisir berbasis Kearifan Lokal Jurusan Biologi UNG. Tim pelaksana menyusun modul pelatihan keterampilan mengolah buah mangrove menjadi berbagai bentuk penganan, dan melakukan ujicoba produk. Tim melakukan focus group discussion (FGD) dengan PKK dan Kelompok Sadar Lingkungan (KSL) di 3 desa yaitu; desa Torosiaje, Torosiaje Jaya dan desa Bumi Bahari. Diskusi ini untuk 82 membentuk persepsi yang sama dalam mencapai tujuan kegiatan, serta pembentukan kelompok perempuan sebagai peserta pelatihan. Gambar 2. Sebagian kegiaan pelatihan dan pendampingan kelompok perempuan dalam pembuatan produk pangan (kue pia) berbahan dasar buah mangrove Kelompok perempuan peserta pelatihan dibentuk di tiga desa, masing-masing desa satu kelompok, setiap kelompok 10 orang terdiri dari 7 orang ibu rumah tangga dan 3 orang remaja putri. Kelompok perempuan dilatih keterampilan mengolah buah mangrove menjadi pangan/penganan berupa: pia mangrove, dodol, stick, cake, pudding, kerupuk dan keripik (Gambar 2). Buah mangrove yang diolah menjadi bahan pangan terdiri dari jenis Bruguiera gymnorrhiza (bahasa Bajo:”Munto” , Avicennia spp (bahasa Bajo: “A ap i” , dan Sonneratia caseolaris bahasa Bajo: “ a a” . Pelatihan keterampilan dilaksanakan selama 3 hari pada minggu kedua bulan Juni 2014, dan pendampingan kelompok dilaksanakan mulai Juli 2014 selama 8 bulan. Pendampingan kelompok perempuan oleh fasilitator dimaksudkan untuk mengevaluasi dan memotivasi agar terjadi keberlanjutan kegiatan produksi, dan mengatasi kendala yang ditemui di lapangan. Kelompok awal yang dibentuk merupakan motivator bagi kaum perempuan lain sehingga dapat juga dibentuk kelompok baru. Kelompok perempuan di Desa Bumi Bahari dan Torosiaje Jaya termotivasi membentuk kelompok baru untuk kegiatan produksi dan pemasaran produk berbasis buah mangrove yang dimotivasi dan dibina oleh kelompok awal. Pelatihan pembuatan kemasan produk pangan dan pemasaran produk pangan dilaksanakan pada hari ke 3 pelatihan. Pada awalnya pemasaran masih terbatas di sekitar lokasi proyek, kemudian berkembang hingga memenuhi pesanan dari luar lokasi proyek. Produk pangan dipasarkan pada perayaan hari raya Idul Fitri dalam acara festival budaya dan wisata tahunan di wilayah pesisir Torosiaje serumpun. Produk ini telah beroleh sertifikat dari Dinas Kesehatan Kabupaten Pohuwato, sehingga memungkinkan untuk memperluas pasar produk. Produk pangan olahan mangrove berupa pia mangrove, stick, kerupuk dan keripik mangrove yang diproduksi oleh kelompok perempuan ini telah mengikuti pameran produk Mangrove for the Future (MFF) di Kamboja pada bulan Oktober 2014. Selain itu, produk pangan berbasis buah mangrove kini tersosialisasi melalui media film yang dibuat oleh Institute of Nature Film Society (INFIS) dan Asosiasi Jurnalistik Indonesia (AJI). 83 Pendampingan Kelompok Sadar Lingkungan dalam Rehabilitasi Kawasan Mangrove Pelaksanaan kegiatan rehabilitasi mangrove diawali dengan focus group discussion (FGD) dengan Kelompok Sadar Lingkungan (KSL) dan Kepala Desa Torosiaje Jaya. Diskusi ini menghasilakn beberapa kesepakatan, yaitu: penetapan lokasi penananam mangrove, penyemaian bibit, dan pembagian tugas KSL dalam kegiatan rehabilitasi mangrove. Lokasi penanaman mangrove seluas 7 hektar telah ditetapkan dengan surat keterangan Kepala Desa Torosiaje Jaya nomor; 140/TRJ/334/IX/2014 pada koordinat N:000 ’ 0” dan E:1 10 6’00”. Kegiatan rehabilitasi angrove di kawasan esisir ini didukung oleh kawasan Laboratorium Alam Ekologi Pesisir yang dibangun Jurusan Biologi UNG dan dikelola bersama KSL Desa Torosiaje Jaya. Penyemaian dilakukan Juni hingga Juli 2014, dengan jumlah bibit mangrove 90.000 polybag, yaitu 75.000 bibit untuk penanaman dan 15.000 bibit untuk penyulaman. Bibit mangrove yang disemai terdiri dari jenis Rhizophora sp., Avicennia sp., Bruguiera gymnorrhiza, dan Sonneratia caseolaris. Jenis mangrove ini sesuai dengan kondisi lahan di lokasi rehabilitasi. Pada bulan ke 2 periode penyemaian telah menunjukkan pertumbuhan lebih dari 80% bibit dalam kondisi baik. Penyemaian ini telah diupayakan dengan maksimal oleh kelompok masyarakat (KSL) seperti membuat naungan di atas bedengan karena musim kemarau yang panjang, dan pemagaran bedengan dengan menggunakan jaring terutama untuk mencegah gangguan hewan ternak. Penanaman mangrove di lahan rehabilitasi 7 Ha mulai dilaksanakan pada bulan Oktober sampai November 2014 (Gambar 3). Bibit dalam polybag yang ditanam mencapai 75.000 bibit. Pekerjaan penananam mangrove melibatkan warga masyarakat termasuk kaum perempuan, pelajar dan mahasiswa. Pendampingan rehabilitasi dilakukan tenaga ahli pusat kajian secara kontinyu untuk memperkuat komitmen masyarakat khusus Kelompok Sadar Lingkungan (KSL) atas penyelamatan fungsi kawasan mangrove. Penyulaman dilakukan oleh masyarakat untuk memperoleh hasil pertumbuhan yang optimum bibit mangrove yang ditanam. Gambar 3. Salah satu sisi lokasi rehabilitasi lahan mangrove 7 ha, di pesisir selatan Desa Torosiaje Jaya 84 PEMBAHASAN Kegiatan mengolah buah mangrove menjadi penganan telah mendorong kaum perempuan pesisir di Torosiaje serumpun (di lingkungan 3 desa lokasi) melakukan kegiatan produksi dan pemasaran produk pangan berbasis buah mangrove. Pendapatan dari penjualan produk dirasakan mampu menanggulangi sebagian kebutuhan sehari-hari ibu rumah tangga, terutama anggota yang terlibat dalam kelompok. Namun demikian, tidak semua pesanan produk penganan buah mangrove dapat dipenuhi karena ketersediaan buah mangrove yang terikat dengan musim. Pelajaran yang dapat diambil dari kegiatan proyek ini antara lain, perempuan memiliki partisipasi yang cukup tinggi dalam proses pengambilan keputusan atas kebutuhan keluarga, karena itu keputusan ibu rumah tangga ikut menentukan keikutsertaan perempuan dalam kegiatan ini. Umumnya aktivitas ekonomi perempuan masih sangat terbatas, mereka biasanya bekerja untuk mensupport kebutuhan ekonomi keluarga pada saat ikan sukar diperoleh. Kegiatan ekonomi biasanya menjual jasa sebagai pencuci pakaian tetangga bagi yang membutuhkan dengan upah yang diperoleh sangat kecil. Kegiatan yang melibatkan ibu rumah tangga di pedesaan perlu memperhatikan aktivitas pasar harian yang merupakan hari belanja mingguan bagi setiap rumah tangga. Dengan ditetapkannya Desa Torosiaje, Torosiaje Jaya dan Bumi Bahari menjadi kawasan Desa Wisata (ekowisata dan wisata budaya) maka produk-produk pangan/penganan yang telah dikembangkan masyarakat melalui proyek ini dapat dipasarkan kepada wisatawan. Program pemberdayaan masyarakat desa pesisir ini dapat ditindaklanjuti oleh pemerintah daerah dalam bentuk bantuan modal dan bantuan teknis. Bagi pemerintah Kabupaten Pohuwato dan mitra lainnya, kegiatan ini dapat dikembangkan dan ditindak lanjuti misalnya mengeluarkan peraturan daerah yang terkait dengan pemanfaatan dan pelestarian sumberdaya pesisir dan laut serta pelestarian nilai-niai lokal. Kegiatan rehabilitasi mangrove ini mendorong masyarakat secara sukarela melakukan penanaman mangrove, hal ini dapat terjadi karena motivasi memperoleh buah mangrove yang dibutuhkan untuk pengolahan bahan pangan menjadi penganan yang dapat dipasarkan. Keberhasilan rehabilitasi kawasan mangrove di lokasi proyek ini ke depan dapat dikembangkan menjadi obyek wisata alam (ekowisata mangrove). Kegiatan pendampigan masyarakat perlu melibatkan warga masyarakat sejak dari perencanaan hingga evaluasi program. Pertimbangan lain adalah aktivitas sehari-hari masyarakat nelayan dan perempuan pesisir, seperti aktivitas mingguan atau perayaan tertentu. Faktor musim dan substrat lahan adalah faktor lain yang perlu dipertimbangkan dalam kegiatan rehabilitasi kawasan mangrove. SIMPULAN Pemberdayaan kelompok perempuan pesisir dalam usaha produk pangan berbasis buah mangrove telah memberikan alternatif sumber pendapatan keluarga, dan memotivasi kaum perempuan melakukan kegiatan penanaman mangrove. Upaya rehabilitasi kawasan mangrove telah mendorong warga masyarakat pesisir untuk menanam mangrove sebagai upaya konservasi hutan mangrove, selain untuk penyediaan permintaan buah mangrove pada kegiatan produksi pangan yang dilakukan kelompok perempuan. Dengan dengan, penduduk memperoleh nilai ekonomi dari hasil hutan mangrove, melakukan konservasi hutan mangrove sebagai upaya menekan emisi karbon yang berdampak pada pemanasan global dan perubahan iklim. 85 UCAPAN TERIMA KASIH Proyek ini dilaksanakan oleh Pusat Kajian Ekologi Pesisir berbasis Kearifan Lokal Jurusan Biologi Universitas Negeri Gorontalo, dengan dana hibah kompetisi Small Grant Fasilities - Mangrove for the Future (MFF) Project tahun 2014-2015 dari DANIDA Denmark. Untuk itu disampaikan terimakasih kepada MFF melalui IUCN, Wetland International Indonesia dan Project MFF Gorontalo yang telah memfasilitasi penyelenggataan proyek ini. KEPUSTAKAAN Djamaluddin, R. 2011. Survei Kondisi Ekosistem Mangrove di Kabupaten Pohuwato. Program Teluk Tomini (SUSCLAM). Tomini Bay Sustainable Coastal and Livelihoods Management Project. CIDA FAO. 2007. The world’s mangrove 1980-2005. FAO forestry paper 153, Rome, Italy. Ibrahim, M., Ramli, U., dan K. A. Sidik, 2013. Pengelolaan Ekosistem Pesisir dan Pelestarian NilaiNilai Kearifan Lokal Suku Bajo Melalui Pengembangan Kelompok Sadar Lingkungan (KSL) dan Pembuatan Laboratorium Alam. Laporan KKN-PPM, Jurusan Biologi UNG Kepel, R. C., 2007. Laporan Hasil Identifikasi Produksi Perikanan Dan Lingkungan Pesisir Di Teluk Tomini. Tomini Bay Sustainable Coastal Livelihoods And Management (SUSGLAM Project lnception Phase) Mc.Callum I., and L. Watson. 2008. Ecological Intelligence, Rediscovering Ourselves in Nature Pramudji, 2008. Mangrove di Indonesia dan Upaya Pengelolaannya; Orasi pengukuhan Professor Riset, Bidang Ilmu Biologi Laut - LIPI. (Tidak dipublikasi) Rasyid A. S, Rahardjo, S. Sairin. 2002. Reinterpretasi Konsep Pembinaan Masyarakat Terasing Menuju Konsep Pemberdayaan Berorientasi Kearifan Lokal. Jurnal Penelitian Ilmu-ilmu Sosial, Vol. 3, No. 2, 2002: 93-106 Sukarjo, S., and D. M. Alongi. 2012. Mangrove of the Southu China Sea: Ecology and Human Aspects of Indonesia’s forest. Nova Science Publisher Inc. Sukarjo, S. Indonesian Mangroves – critical challenges and strategies for sustainable management after tsunami 26 December 2004 (unpublish paper) The International Union for Conservation of Nature and Natural Resources, 1984. Why Conservation? Commission on Ecology Occasional Paper Number 4. IUCN, 1984. Switzerland Ananda, Mc T., dan L. Djenaan, 2007. Pengelolaan Sumberdaya Pesisir Teluk Tomini: Analisis awal Isu-isu perekonomian masyrakat dan gender. Program Teluk Tomini. Tomini Bay Sustainable Coastal, Livelihoods and Management (SUSCLAM) Gorontalo Utina, R. 2008. Pendidikan Lingkungan Hidup dan Konservasi Sumber Daya Alam Pesisir. UNG Press. Gorontalo Utina, R., dan Alwiah. 2008. Bapongka: Studi Nilai Pendidikan Pelestarian Ekosistem Laut dan Pesisir pada Masyarakat Bajo. J.Matsains. vol. 12. No.3, 2008: 108-120 86 GAMBARAN HISTOLOGI HATI TIKUS (Rattus norvegivus) YANG DIINJEKSI WHITE VITAMIN C DOSIS TINGGI DALAM JANGKA WAKTU LAMA THE HISTOLOGY OF RAT LIVER (Rattus norvegivus) INJECTED WITH HIGH DOSE OF WHITE VITAMIN C IN LONG TERM CONDITION Ni Wayan Sudatri, Iriani Setyawati, Ni MadeSuartini, Dwi Ariani Yulihastuti Jurusan Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Udayana, Bukit Jimbaran-Badung,Bali Email : [email protected] INTISARI Asam askorbat atau lebih dikenal dengan nama vitamin C adalah salah satu vitamin larut air yang berperan dalam menjaga sistem imunitas tubuh, mempercepat proses penyembuhan dan membuat kulit lebih cerah. Namun penggunaan white vitamin C dosis tinggi dalam jangka waktu lama berpotensi untuk merusak hati. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui efek samping injeksi vitamin C dosis tinggi dalam jangka waktu lama terhadap gambaran histologis hati. Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan perlakuan lama penyuntikan vitamin C dosis tinggi yang berbeda. yaitu: P0 (kontrol), P1 (lama diinjeksi 30 hari), P2 (lama diinjeksi 50 hari), P3 (lama diinjeksi 70 hari) dan P4 (lama diinjeksi 90 hari). Parameter yang diamati adalah persentase sel hati yang mengalami degenerasi hidrofis, degenerasi lemak,inti piknotik, nekrosis, infiltrasi sel radang dan kongesti sinusoid. Dari uji Kruskal Wallis, degenerasi hidrofis tidak berbeda nyata (p=0. 054), sedangkan degenerasi lemak dengan uji ANOVA terdapat perbedaan nyata (P<0.001) antar perlakuan dan kontrol. Inti piknotik dan nekrosis dengan uji ANOVA terdapat perbedaan nyata antara kontrol dan perlakuan dengan nilai (p <0.016) dan p<0.01). Penyuntikan white vitamin C dosis tinggi dalam jangka waktu lama meningkatkan persentase kelainan histologis sel-sel hati tikus betina. Kata kunci: hati, white vitamin c, tikus betina ABSTRACT Ascorbic acid, or known as vitamin C is one of the water-soluble vitamin that plays a role in maintaining the immune system, accelerate the healing process and cause brighter skin. However, the use of white high doses of vitamin C in the long term has a potential for damaging liver. The purpose of this study was to determine the side effects of high-dose injections of white vitamin C in the long term to the histological liver. The design used in this research was completely randomized design (CRD) with long treatment injection of high doses of white vitamin C in 5 different doses, namely: P0 (control), P1 (injected for 30 days), P2 (injected for 50 days old), P3 (injected for 70 days) and P4 (injected for 90 days). Parameters measured were the percentage of liver cell hydrophis degeneration, degeneration of fatty, core pycnotic, necrosis, infiltration of inflammatory cells and sinusoidal congestion. Kruskal-Wallis test showed that degeneration hydrophis not significantly different (p=0. 054), where as the fatty degeneration with ANOVA test found significant differences (p<0.001) between the treatment and control. Pycnotic and necrotic with ANOVA test found significant differences between the control and treatment (p< 0.016) and (p<0.01) respectively. Injection of high dose white vitamin C, in the long term, increase the percentage of histological abnormalities of liver cells on female rats. Keywords: liver, white vitamin c, female rats 87 PENDAHULUAN Asam askorbat atau lebih dikenal dengan nama vitamin C adalah salah satu vitamin larut air yang berperan dalam menjaga sistem imunitas tubuh, mempercepat proses penyembuhan dan membuat kulit lebih cerah. Manfaat vitamin C untuk mengencangkan dan mencerahkan kulit terjadi karena vitamin C merangsang pembentukan kolagen, suatu protein ekstraseluler yang berperan dalam mengencangkan sel (Kembuan dkk, 2012). Saat ini penggunaan vitamin C injeksi untuk mencerahkan atau memutihkan kulit sudah banyak dilakukan di rumah-rumah kecantikan atau oleh dokter kulit. Dosis yang digunakan berkisar antara 1000-4000 mg/sekali suntik, sedangkan dosis vitamin C yang diperlukan untuk menjaga kesehatan tubuh hanya berkisar 50-75 mg/hari.Vitamin C berlebih dalam suntik vitamin C tidak hanya bekerja pada kulit saja, tetapi untuk seluruh tubuh. Ini berarti organ-organ lain seperti lambung, hati dan ginjal pun akan terkena dampak dari kelebihan vitamin C ini ( Aguirre and May, 2008). Hati merupakan salah satu organ kelenjar, yang terletak di dalam rongga perut sebelah kanan. Fungsi hati diantaranya; sebagai organ detoksifikasi, dimana hati memecah beberapa senyawa racun menjadi urea, amonia dan asam urat untuk selanjutnya dikeluarkan melalui ginjal. Fungsi hati ini dilakukan oleh sel hati yang disebut hepatosit. Lobus hati terbentuk dari sel parenkimal dan sel nonparenkimal. Sel parenkimal pada hati disebut hepatosit, menempati sekitar 80% volume hati dan melakukan berbagai fungsi utama hati. 40% sel hati terdapat pada lobus sinusoidal (Kmiec, 2001). Dan fungsi hati yang tidak kalah pentingnya adalah melindungi penumpukan zat-zat berbahaya dan racun yang masuk dari luar tubuh (Manatar dkk, 2013). Oleh karena lokasi yang sangat strategis dan fungsi multidimensional, hati juga menjadi sangat rentan terhadap datangnya berbagai penyakit. Hati akan merespon berbagai penyakit tersebut dengan meradang, yang disebut hepatitis. Seringkali hepatitis dimulai dengan reaksi radang patobiokimiawi yang disebut fibrosis hati (Sebastiana, 2009). Untuk mengetahui adanya kerusakan hati dilakukan beberapa tes darah sederhana seperti uji kadar spartate aminotransferase (AST atau SGOT) dan alanine aminotransferase (ALT atau SGPT. Enzim-enzim ini biasanya terkandung dalam sel-sel hati. Jika hati terluka, sel-sel hati menumpahkan enzim-enzim ini ke dalam darah, sehingga peningkatan kadar enzim ini dalam darah, menandakan adanya kerusakan hati(Babu et al., 2012). Di samping uji darah, pada hewan coba untuk melihat kerusakan hati dibuat preparat histologis hati. Beberapa bukti penelitian menunjukkan bahwa penggunaan zat-zat berlebih seperti MSG, obatobatan berlebih dapat menyebabkan kelainan histologi pada hati seperti nekrosis, hemoragi pada hepatosit, dan kongesti sinusoid yang ditandai peningkatan jumlah sel Kupffer pada hepar (Reza dkk, 2012). Penelitian yang dilakukan oleh Bhattacharya et al. (2011) dengan menggunakan mencit yang diberi MSG dosis 2 mg/bb/hr selama 75 hari secara oral menemukan adanya perubahan histologi pada hepar, yang meliputi kerusakan inti hepatosit, inflamasi, dan peningkatan diameter hepatosit. Demikian pula penggunaan injeksi white vitamin C dosis tinggi untuk memutihkan kulit berpotensi untuk meningkatkan kelainan histologi hati pada hewan coba yang digunakan. MATERI DAN METODE Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah rancangan acak lengkap (RAL) dengan perlakuan lama injeksi white vitamin C dosis tinggi yang berbeda, yaitu lama injeksi 30 hari (P1), lama injeksi 50 hari (P2), dan lama injeksi 70 hari (P3), lama injeksi 90 hari (P4) dan kontrol (P0) serta ulangan 10 kali sehingga hewan model yang dipakai sebanyak 50 ekor. Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah vitamin C dosis tinggi (4000 mg/sekali injeksi) untuk manusia. Dosis yang digunakan dikonversikan dari dosis yang digunakan pada manusia ke tikus. Faktor konversi dari tikus ke manusia adalah 0.14 Berat badan wanita dewasa yang diinjeksi diperkirakan kurang lebih 70 kg, sehingga dosis vitamin C yang diberikan pada tikus adalah 0.14 x 0.02 x 4000 = 11,2 mg/sekali injeksi/ ekor. 88 Hewan model yang digunakan adalah tikus betina dewasa usia 3-4 bulan dengan berat badan antara 150200 gram. Perlakuan pada hewan uji Sebanyak 50 ekor tikus betina berumur 3–4 bulan diukur berat badan awalnya, diberi diet formula standar ayam untdan minum air secara ad libitum serta diaklimatisasi selama 4 minggu, kemudian hewan uji dibagi secara random menjadi 5 kelompok yaitu: P0 = kontrol, kelompok hewan tidak mendapat injeksi vitamin C; P1 = kelompok hewan yang mendapat injeksi white vitamin C selama 30 hari; P2 = kelompok hewan yang mendapat injeksi white vitamin C selama 50 hari; P3 = kelompok hewan yang mendapat injeksi white vitamin C selama 70 hari; P4 = kelompok hewan yang mendapat injeksi white vitamin C selama 90 hari. Injeksi vitamin C dilakukan secara intramuskular dengan jarum suntik ukuran 1 ml. Injeksi dilakukan 2 hari sekali sesuai lama waktu perlakuan. Koleksi Sampel Setelah perlakuan injeksi vitamin C selesai, tikus dibius dengan penyuntikan xylasin (20 mg/kg) dan ketamin (10 mg/kg) secara intramuskuler. Pada keadaan terbius tikus dibedah organ hati diambil dan difiksasi terlebih dahulu dalam larutan fiksatif formalin 10%. Proses pembuatan blok parafin dan preparat histologi Potogan hati dimasukkan ke dalam tissue casse, kemudian dilakukan proses dehidrasi di dalam larutan etanol bertingkat 70%, 80%, 95%, dan alkohol absolut dua kali pemindahan, kemudian dilanjutkan dengan proses penjernihan (clearing) dengan larutan xilol tiga pemindahan, masing-masing tahap berlangsung selama 60 menit pada suhu kamar. Proses selanjutnya yaitu infiltrasi parafin dengan memasakkan jaringan pada parafin cair (suhu 60ºC) tiga kali pemindahan masing-masing selama 45 menit. selanjutnya jaringan dibenamkan di dalam cetakan berisi parafin cair, kemudian didinginkan dalam suhu kamar sehingga menjadi blok parafin. Blok parafin disayat setebal 5µm dengan menggunakan rotary microtome. kemudian sayatan diletakkan dipermukaan air hangat dengan suhu 45ºc dan ditempelkan pada gelas obyek yang telah dilapisi gelatin. Preparat dikeringkan dengan cara diletakkan secara vertikal, kemudian diletakkan pada slide warmer sampai menempel pada objeck glass. Pewarnaan Hematoksilin Eosin (HE) Potongan jaringan dalam parafin yang akan diwarnai dengan hematoxilin-eosin diatur dalam rak untuk pewarnaan, kemudian diinkubasi pada suhu 60ºC selama 45 menit, setelah itu diletakkan pada suhu ruangan sampai dingin. Selanjutnya dilakukan deparafinisasi melalui tahap-tahap pelarutan parafin dalam xilol sebanyak 3 kali, kemudian dilanjutkan dengan proses rehidrasi dalam alkohol bertingkat 100%, 95%, dan 80%, 70%m masing-masing tahap berlangsungselama 5 menit, kemudian dimasukkan dalam akuades selama 10 celup atau sampai alkohol larut. Proses selanjutnya adalah pewarnaan dalam hematoksilin dengan merendam slide dengan larutan hematoxilin selama 5 menit kemudian dicuci pada pada air mengalir selama 5 menit, dan dilanjutkan dengan pewarnaan menggunakan eosin selama 3 menit, Setelah diwarnai dalam eosin, slide dimasukkan dalam larutan alkohol bertingkat dari 70%, 80%, 90%, sampai 100% masing-masing selama 10 celup., kemudian dilanjutkan dengan proses clearing menggunakan xilol sebanyak dua kali masing-masing selama 2 menit, setelah itu preparat ditutup dengan kaca penutup dengan media balsam kanada. Dan preparat siap untuk diamati. 89 Pengamatan Mikroskop Preparat sayatan hati diamati di bawah mikroskop dengan pembesaran 10 x 40 Jumlah semua sel hati per lapangan pandang dihitung, baik yang normal maupun yang mengalami kelainan. Untuk menghitung persentasi sel yang mengalami kelainan, dihitung jumlah sel yang mengalami kelainan dibagi jumlah semua sel per lapangan pandang, kemudian dikali 100%. Pengamatan diulang sebanyak 5 kali lapang pandang untuk setiap preparat. Hasil yang didapat kemudian dirata-ratakan. Untuk data kualitatif, gambar preparat histologi hati difoto dengan kamera opticlab yang telah dihubungkan dengan komputer. Analisis Data Data kuantitatif yang didapatkan dianalisis secara statistika dengan menggunakan software SPSS dan bila terdapat pengaruh nyata a akan dilanjutkan dengan uji Duncan pada taraf 0.05 dan 0.01.Data yang tidak terdistribusi secara normal maka diuji dengan Test Kruskal Wallis. Sedangkan data kualitatif disajikan dalam bentuk gambar. HASIL Dari hasil pengamatan didapatkan kelainan histologis hati yang ditemukan pada penelitian ini adalah: degenerasi hidrofis, degenerasi lemak, inti piknotik, nekrosis hepatosit, kongesti sinusoid dan infiltrasi sel radang. Tabel 1. Uji Kruskal Wallis dan rerata degenerasi hidrospis sel hati tikus betina (Rattus norvegivuss L.) yang diinjeksi white vitamin C dosis tinggi No 1 2 3 4 5 Perlakuan K (Kontrol) P1 (30 hari) P2 (50 hari) P3 (70 hari) P4 (90 hari) Ranking Mean 7.30 9.70 12.90 15.10 20.00 Chi Square 9.304 Signifikansi (p) 0.054 Rata-rata 6.0 7.3 9.0 16.5 18.3 Dari uji Kruskal Wallis degenerasi hidropis tidak berbeda nyata (P=0. 054) Tabel 2. Uji ANOVA dan standar error rerata degenerasi lemak, Inti piknotik, dan nekrosis sel hati tikus betina (Rattus norvegivus L.) yang diinjeksi white vitamin C dosis tinggi dilanjutkan dengan uji Duncans No 1 2 3 4 5 Perlakuan K (Kontrol) P1 (30 hari) P2 (50 hari) P3 (70 hari) P4 (90 hari) Degenerasi lemak 7.0 ± 3.0 a 61.0 ± 6.78 b 59.0 ± 5.56 b 58.0 ± 4.06 b 59.3 ± 11.9 b Inti piknotik 9.0 ± 1.87 a 27.67 ± 2.81 b 32.00 ± 5.14 b 35.50 ± 5.33 b 32.46 ± 8.75 b Nekrosis 7.0 ± 2.0 a 26.3 ± 5.4 b 2 5.0 ± 3.16 b 24.0 ± 1.87 b 31.3 ± 3.39 b Keterangan : huruf yang sama pada kolom yang sama berarti tidak berbeda Degenerasi lemak dengan uji ANOVA terdapat perbedaan nyata (P=0.000) antar perlakuan dan kontrol. Inti piknotik dengan uji ANOVA terdapat perbedaan nyata (P=0.016) antar perlakuan dan 90 kontrol. Sedangkan nekrosis hepatosit dengan uji ANOVA terdapat perbedaan nyata (P=0.01) antar perlakuan dan kontrol. Gambar 1. Degenerasi hidrofis, degenerasi lemak, inti piknotik sel hati tikus betina (Mus musculus L.) yang diinjeksi vitamin C dosis tinggi Tabel 3. Uji ANOVA dan standar error rerata Kongesti sinusoid hati tikus betina (Rattus norvegivuss L.) yang diinjeksi white vitamin C dosis tinggi dilanjutkan dengan uji Duncans No 1 2 3 4 5 Perlakuan K (Kontrol) P1 (30 hari) P2 (50 hari) P3 (70 hari) P4 (90 hari) Kongesti sinusoid 4.2 ± 1.06 a 6.4 ± 0.88 a b 6.4 ± 0.93 a b 10.46 ± 3.2 b 4.6 ± 0.84 a Infiltrasi sel radang 4.0 ± 1.00 a 4.3 ± 2.64 a 5.6 ± 0.90 a 5.7 ± 0.75 a 5.9 ± 0.46 a Keterangan : huruf yang sama pada kolom yang sama berarti tidak berbeda Kongesti sinusoid hati dengan uji ANOVA terdapat perbedaan nyata (P=0.019) antar perlakuan dan kontrol. Sedangkan infiltrasi sel radang pada hati dengan uji ANOVA tidak terdapat perbedaan nyata (P=0.55) antar perlakuan dan kontrol. 91 Gambar 2. Grafik nekrosis hepatosit, kongesti sinusoid dan infiltrasi sel radang hati tikus betina (Rattus norvegivus L.) yang diinjeksi white vitamin C dosis tinggi Gambar 6. Gambaran histologi hati tikus betina (Mus musculus L.) yang diinjeksi vitamin C dosis tinggi dengan pewarnaan HE (pembesaran 400x insert 500X). A. Normal B. Degenerasi hidrospis C. Inti piknotik D. Kongesti sinusoid. E. Degenerasi lemak F. Nekrotik G. Infiltasi sel radang PEMBAHASAN Dari hasil pengamatan histologi hati didapatkan bahwa sel hati (hepatosit) yang diinjeksi dengan white vitamin c dosis tinggi mengalami kelainan-kelainan seperti degenerasi hidrofis, degenerasi lemak, inti piknotik, nekrosis hepatosit, kongesti sinusoid dan infiltrasi sel radang yang lebih tinggi dibandingkan dengan sel hati kontrol. Bahkan dari pengamatan makroskopis sudah terlihat bahwa hati tikus yang diinjeksi vitamin C dosis tinggi menunjukkan adanya jaringan lemak yang berwarna kuning. Hal ini 92 diperkuat dengan dilakukannya pembuatan preparat histologi, yang menunjukkan bahwa banyak sel hati yang mengalami peningkatan degenerasi lemak pada kelompok hewan perlakuan. Degenerasi hidropis merupakan merupakan kerusakan sel hati yang bersifat sementara yang disebabkan karena sel mengalami kekurangan nutrisi, ketuaan sel maupun sebagai suatu cara adaptasi sel hati terhadap terjadinya peningkatan metabolisme di hati. Keadaan ini dapat sembuh dan sel kembali normal. Secara mikroskopis, sel yang mengalami degenerasi hidropis terlihat banyak vakuola-vakuola di sitoplasma dan ukuran sel terlihat lebih besar dibandingkan sel normal (Andi, 2014) . Banyaknya white vitamin C yang terdapat di darah akibat pemberian vitamin C secara injeksi menyebabkan sel-sel hati bekerja keras untuk memetabolisme kelebihan ini untuk dibuang melalui ginjal. Hal ini menyebabkan pompa Natrium-Kalium yang berfungsi mengatur ion-ion yang masuk ke dalam sel mengalami gangguan, air dan protein tetap berada dalam sitoplasma, kemudian air dengan cepat berpindah dari sitosol ke reticulum endoplasma sehingga sel terlihat lebih besar atau membengkak (Cheville, 2006). Walaupun terdapat perbedaan, namun kerusakan degenerasi hidrofis pada penelitian ini tidak berbeda nyata secara statistik. Apabila kerusakan degenerasi hidrofis tidak kembali normal, maka sel hati akan mengalami degenerasi lemak sebelum terjadi kerusakan yang bersifat irreversible (tetap). Secara mikroskopis, di sitoplasma sel banyak terdapat lemak, bercak-bercak lemak yang berlihat berwarna putih (gambar 4). Degenerasi lemak terdapat baik pada hewan kontrol maupun hewan perlakuan, namun sejalan dengan lamanya perlakuan jumlah sel hati yang mengalami kerusakan degenerasi lemak persentasenya semakin meningkat. Hal ini mungkin diakibatkan white vitamin C yang tinggi menghambat kerja enzim lipase intraseluler. Sel hati bila terus menerus meningkatkan metabolismenya atau dengan kata lain bekerja keras maka bisa menyebabkan terjadinya peningkatan kematian sel (nekrosis). Nekrosis adalah kerusakan sel yang bersifat irreversible. Sel terlihat hancur, inti sel dan bagian-bagian sel tidak terlihat jelas. Lama perlakuan pada penelitian ini meningkatkan persentase sel yang mengalami nekrosis. Sebelum sel mengalami nekrosis, inti sel akan mengalami piknotik dimana pada preparat histologis terlihat warna inti gelap dibandingkan inti hepatosit normal. Hal ini terjadi karena kromosom di dalam inti yang mengalami piknotik mengalami homogenesasi dan banyak menyerap zat warna (Utomo dkk, 2012). Di samping itu, terdapat banyak kongesti sinusoid hati pada kelompok perlakuan dibandingkan kelompok kontrol. Kongesti sinusoid adalah adanya penggumpalan sel darah merah di sinusoid. Tingginya white vitamin C di dalam darah yang bersifat asam dapat merusak membran endothelium sinusoid yang menyebabkan sel darah merah mudah menggumpal (Erlangga dkk, 2013). Terdapatnya infiltrasi sel radang baik pada kelompok hewan kontrol maupun kelompok hewan perlakuan karena hepatosit mengalami kerusakan sehingga sel-sel darah putih yang dikirim ke hati untuk membersihkan atau memakan sel-sel yang sudah rusak tersebut. Peningkatan kerusakan sel hati pada kelompok hewan perlakuan yang diinjeksi white vitamin C dosis tinggi sejalan dengan hasil uji SGPT dan SGOT, bahwa terdapat peningkatan nilai SGOT pada kelompok hewan perlakuan karena terjadinya kerusakan sel hati sehingga kadar enzim ini di dalam darah meningkat (Sudatri dkk. 2014). SIMPULAN Terjadi peningkatan persentase kelainan histologi hati (degenerasi lemak, inti piknotik, nekrosis hepatosit, kongesti sinusoid pada tikus betina yang yang diinjeksi vitamin C dosis tinggi dalam waktu yang lama. 93 UCAPAN TERIMA KASIH Penulis mengucapkan banyak terima kepada Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat Universitas Udayana dan Dikti atas dana yang diberikan melalalui dana Desentralisasi Hibah Bersaing tahun anggaran 2014. KEPUSTAKAAN Aguirre, R. and M. J. May 2008. Inflammation in the Vascular Bed.Importance of Vitamin C. Pharmacol Ther. 119(1) : 96-103 Yoga I K. W. A., N. I. Wiratmini, N. W. Sudatri. 2014. Histologi hati mencit (Mus musculus L.) yang diberi ekstrak daun lamtoro (leucaena leucocephala). Jurnal Simbiosis .II (2): 226- 235 Ashoka , V.L. Babu; G. Arunachalam, K. Narasimha,Jayaveera, M. Varadharajan. S. Banu. 2012. Hepatoprotective activity of methalonic extract of Ecrobolium viride (FOR SSK ) alston roots against carbon tetrachloride induce hepatocity. IRJP . 3 (8) Bhattacharya. T., A. Bhakta, and S.K. Ghosh. 2011. Long term effect of monosodium glutamate in liver of albino mice after neo-natal exposure. Nepal Med Coll J: 13(1): 11-16 Cheville, N. F. 2006. Introduction to Veterinary Phatology. 3 rd ed. United State of America: Iawa State University Press. Hlm. 6-42 Erangga J, H. Busman, dan N. Nurcahyani, 2013. Struktur Histologis Hati Mencit (Mus musculus L.) Sebagai Respon Terhadap Kebisingan. Seminar Nasional Sains & Teknologi V. Lembaga Penelitian Universitas Lampung 19-20 November 2013. 353-361. Kembuan, M., S. Wangko, G. N. Tanudjaja,. 2012. Peran Vitamin C dalam Mencegah Pigmentasi Kulit. Jurnal Biomedik Vol 4, No 3. Kmiec Z. 2001. Cooperation of liver cells in health and disease. Anat Embriol Cell Biol. 161 (3):1- 151 Manatar, A.F., W. Sunny, M. K. Marie., 2013. Gambaran Histologik Hati Tikus Wistar Yang Diberi Virgin Coconut Oil Dengan Induksi Parasetamol. Jurnal Biomedik 5(1): 60-67 Muliartha, I. K. G., E. Sriwahyuni, Yuliawati. 2009. Pemberian Kombinasi Vitamin C dan E Peroral Memperbaiki Kerusakan Hepar Akibat Paparan Rokok Kretek Sub Kronik. Jurnal Kedokteran Brawijaya, XXIV(1). Reza A, T. R. Soeprobowati, dan H. S. Nanik.Potensi Teh Hijau (Camelia sinensis L.) Dalam Perbaikan Fungsi Hepar Pada Mencit Yang Diinduksi Monosodium Glutamat (MSG) .2012.Buletin Anatomi dan Fisiologi XX( 2):15-23 Sebastiani, G. 2009.Non-invasive assessment of liver fibrosis in chronic liver diseases: Implementation in clinical practice and decisional algorithms. J Gastroenterol. 15(18): 2190–2203. Sudatri, NW. I. Setyawati, N. M. Suartini. 2014. Kadar SGPT, SGOT dan kreatinin plasma darah tikus betina yang diinjeksi vitamin c dosis tinggi. Prosiding Seminar Nasional Sain dan Teknologi 2014 . Peranan Sain dan Teknologi yang Berwawasan Lingkungan dalam Meningkatkan Kesejahteraan Umat Manusia. Denpasar 18-19 September 2014. Utomo,Y., A. Hidayat, M. Dafip, dan F. A. Sasi. 2012. Gambaran Histologi Hati mencit (Mus musculus L.) yang diinduksi pemanis buatan. Jurnal Mipa 35 (2): 122-129 94 KERAGAMAN GENETIK DNA MIKROSATELIT BURUNG JALAK BALI (Leucopsar rothschildi) GENETIC DIVERSITY OF DNA MICROSATELLITE OF BALI STARLING (Leucopsar rothschildi)) I Wayan Rosiana, I Gede Widhiantara Program Studi Biologi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Sains, dan Teknologi, Universitas Dhyana Pura, Badung, Bali INDONESIA 80351 Corresponding author, tel/fax: 081805567739/081999983055 Email: [email protected]; [email protected] INTISARI Penelitian ini dimaksud untuk mengetahui keragaman genetik DNA Mikrosatelit pada Burung Jalak Bali Leucopsar rothschildi melalui identifikasi alel-alel DNA mikrosatelit. Keragaman Genetik DNA Mikrosatelit dapat memberikan gambaran mengenai alel-alel yang ditemukan dalam satu spesies ataupun populasi yang dapat digunakan untuk melihat keragaman genetik pada tingkat spesies ataupun populasi sehingga dapat menentukan strategi konservasi di kemudian hari. Teknik pengambilan sampel dalam penelitian ini menggunakan metode purposive sampling. Jumlah sampel yang diambil sebanyak lima sampel yang dapat bersumber dari darah, pangkal bulu, kerokan kulit ataupun dari daging (khusus untuk burung yang sudah mati). Ekstraksi dilakukan di Laboratorium Serologi dan Molekuler Forensik UPT Forensik Universitas Udayana di kampus Bukit Jimbaran sedangkan amplifikasi dan analisis DNA dilakukan di Laboratorium Biologi Molekuler Fakultas Kedokteran Universitas Udayana. Ekstraksi DNA menggunakan metode Phenol-Kloroform (Sambrook dan Russel, 2001) dengan modifikasi. DNA hasil isolasi diamplifikasikan pada mesin PCR (Aplied Biosystem 2720 Thermal Cycler) dengan menggunakan dua pasang primer mikrosatelit. Adapun campuran untuk proses PCR adalah : PCR Master Mix Solution 9,5 µl, DNA template 2 µl dan primer mikrosatelit 1 µl dengan volume total 12,5 µl. Hasil penelitian mendapatkan alel monomorfik 128 Pb pada primer TH3 dan 180 Pb pada primer TH6. Kata Kunci: Keragaman genetik DNA Mikrosatelit, Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) ABSTRACT The aim of this study was to investigate the genetic diversity of DNA microsatellite of Bali starling (Leucopsar rothschildi) by identifying the alleles of microsatellite DNA. The diversity of alleles in a species or a population can be used as a tool in conservation strategy of the species due to its representation of the diversity of genetic in a species or a population. Samples were collected using the Purposive Sampling Technique. Five samples from 5 individual birds were extracted from blood, feathers, skin scrub, or from flash of dead bird. Samples extraction was conducted in the Serology and Molecular Forensic Laboratory, UPT Forensic, Udayana University, Bukit Jimbaran, while the DNA amplification and analysis were conducted in Molecular Biology Laboratory, Faculty of Medicine, Udayana University, Denpasar. The DNA was extracted with Phenol-Chloroform methods following Sambrook and Russel, 2001 with modification. Extracted DNA was, then amplified in PCR machine (Applied Biosystem 2720 Thermal Cycler) by comparing to 2 pairs of DNA primers. The samples mixture for the PCR processing contained of 9,5 µl PCR Master Mix Solution, 2 µl DNA template, and 1 µl microsatellite primer. The result shows that there were monomorphic alleles found in 128bp of TH3 primer and 180bp in TH6 primer. Keywords: Genetic diversity, DNA Microsatellite, Bali Starling (Leucopsar rothschildi) 95 PENDAHULUAN Bali merupakan salah satu daerah yang memiliki keanekaragaman biodiversitas khususnya burung yang cukup tinggi. Terdapat jenis burung endemik Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) yang hanya ditemukan di provinsi ini. Jalak Bali atau dalam nama ilmiahnya Leucopsar rothschildi adalah burung yang berasal dari suku Sturnidae. Jalak Bali memiliki ciri-ciri khusus, diantaranya memiliki bulu yang putih di seluruh tubuhnya kecuali pada ujung ekor dan sayapnya yang berwarna hitam. Jalak Bali memiliki pipi yang tidak ditumbuhi bulu, berwarna biru cerah dan kaki yang berwarna keabu-abuan dimana burung jantan dan betina serupa (Mackinnon et al., 1998). Jalak Bali hanya ditemukan di hutan bagian barat pulau Bali. Burung ini juga merupakan satu-satunya spesies endemik Bali dimana pada tahun 1991 dinobatkan sebagai lambang fauna Provinsi Bali dan keberadaan hewan endemik ini dilindungi undang-undang. Populasi burung Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) di habitat aslinya sudah sangat terancam. Penangkapan liar, hilangnya habitat hutan, serta daerah dimana burung ini ditemukan sangat terbatas yang menyebabkan populasi Jalak Bali cepat menyusut dan terancam punah dalam waktu singkat. Sejak tahun 1966, IUCN (International Union for Conservation of Nature and Natural Resources) telah memasukan Jalak Bali ke dala “Red Data Book” yaitu buku yang e uat jenis flora dan fauna yang teranca punah. Dalam konvensi perdagangan internasional bagi jasad liar CITES (Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora) Jalak Bali terdaftar dalam Appendix I, yaitu kelompok yang terancam kepunahan dan dilarang untuk diperdagangkan (TNBB, 2010). Untuk menjaga kelestarian burung Jalak Bali, banyak pihak sudah berusaha untuk tetap menjaga eksistensi keberadaan burung ini. Beberapa lembaga konservasi seperti : PT. Taman Burung Citra Bali Internasional, Bali Zoo, Yayasan Bhagawan Giri dan Friend National Park Foundation telah melaksanakan usaha konservasi secara eksitu terhadap jenis burung ini. Untuk mendukung usaha konservasi ini maka diperlukan berbagai data mengenai usaha konservasi yang dilakukan termasuk database DNA. Database DNA diperlukan untuk mendukung penelitian tentang Jalak Bali yang sudah pernah dilakukan seperti : studi perilaku makan, perilaku reproduksi, perilaku sosial dan interaksi dengan habitat. Sampai saat ini data genetik berupa DNA yang dapat digunakan untuk berbagai aspek seperti : finger print, hubungan kekerabatan dan strategi konservasi masih sangat kurang untuk jenis burung ini. Berdasarkan latar belakang tersebut diatas, maka dilakukan suatu penelitian untuk mengetahui keragaman genetik dari Jalak Bali sehingga diperoleh ragam alel mikrosatelit yang dapat digunakan sebagai database DNA untuk berbagai keperluan. Dari penelitian ini juga diharapkan mendapat luaran berupa publikasi ilmiah dan data penelitian ini dapat dimanfaatkan oleh pihak yang berkepentingan dalam konservasi Jalak Bali. MATERI DAN METODE Pengambilan sampel dilakukan di lembaga konservasi PT. Taman Burung Citra Bali Internasional (Bali Bird Park). Jumlah sampel yang diambil dari penelitian ini sebanyak 5 ekor dengan menggunakan teknik purposive sampling yaitu pengambilan sampel dengan cara menentukan individu yang akan ditetapkan sebagai sampel. Sampel yang digunakan berasal dari darah dan daging burung (khusus untuk burung yang sudah mati). Penelitian dilakukan di Laboratorium Serologi dan Biologi Molekuler UPT Forensik Kampus Universitas Udayana Bukit Jimbaran dan Laboratorium Biologi Molekuler Fakultas Kedokteran Universitas Udayana. DNA diekstraksi dengan menggunakan metode fenol-kloroform (Sambrook dan Russell, 2001) dengan modifikasi. DNA hasil isolasi diamplifikasi pada mesin PCR dengan menggunakan dua pasang primer mikrosatelit yaitu primer TH3 dan TH6. Adapun campuran untuk proses PCR adalah : PCR 96 Master Mix Solution 9,5 µl, DNA template 2 µl dan primer mikrosatelit 1 µl dengan volume total 12,5 µl (Junitha, 2007). Optimalisasi PCR dilakukan dengan metode Sambrook dan Russell (2001) yang dimodifikasi. Penyesuaian DNA dilakukan pada suhu 95 oC selama 5 menit. Denaturasi DNA pada suhu 95 oC selama 45 detik. Setelah proses denaturasi dilanjutkan proses penempelan primer (annealing) pada suhu 54 0C untuk primer TH3 dan 60 0C untuk primer TH6 selama 60 detik. Proses pemanjangan DNA (elongation) dilakukan pada suhu 72 oC selama 90 detik. Keseluruhan proses PCR tersebut (denaturasi, annealing dan elongation) dilakukan sebanyak 30 siklus dan dilanjutkan dengan proses pemanjangan tahap akhir pada suhu 72 oC selama 5 menit. Elektroforesis produk PCR menggunakan polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) 6% selama 90 menit dengan tegangan konstan 110 volt. Visualisasi DNA hasil amplifikasi mikrosatelit menggunakan metode Tegelström (1986) dengan reagen pewarna perak nitrat (AgNO3). Jarak migrasi pita-pita DNA pada polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) 6% diukur dan hasil pengukuran dianalogikan pada kertas semilog untuk menetapkan panjang DNA hasil amplifikasi mikrosatelit. Keragaman genetik dihitung dengan menggunakan rumus heterozigositas dari Nei (1987). HASIL Pada penelitian ini telah dilakukan pengambilan sampel Burung Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) di PT. Taman Burung Citra Bali International sebanyak lima sampel dengan menggunakan metode purposive sampling. Burung yang menjadi sampel penelitian di PT. Taman Burung Citra Bali Internasional tersebut berasal dari indukan dan anakan burung yang dikembangkan di PT. Taman Burung Citra Bali International dan berasal dari Yayasan Bhagawan Giri. Gambar 5.1 Pita-Pita DNA Sebagai Alel Pada Gel Polyacrilamide Hasil Amplifikasi PCR Lokus TH3 Keterangan : 1, 2, 3, 4, dan 5 Merupakan Sampel Burung Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) Dari keseluruhan sampel yang diperoleh dalam penelitian ini, semua sampel berasil teramplifikasi pada primer TH3 (Gambar 5.1) dan TH6 (Gambar 5.2) dan menghasilkan alel yang bersifat monomorfik pada masing-masing lokus yang digunakan. 97 PRIMER TH6 Gambar 5.2. Pita-Pita DNA Sebagai Alel Pada Gel Polyacrilamide Hasil Amplifikasi PCR Lokus TH6 Keterangan : M (Marker Standar 100 bp ladder), 1, 2, 3, 4, dan 5 Merupakan Sampel Burung Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) PEMBAHASAN Semua sampel berhasil teramplifikasi pada primer TH3 dan TH6. Hal tersebut menunjukkan bahwa primer site pada urutan basa DNA cetakan belum mengalami mutasi sehingga primer TH3 dan TH6 menempel dengan baik pada DNA Jalak Bali. Hal tersebut menunjukkan bahwa sampel Jalak Bali yang diperoleh dari PT. Taman Burung Citra Bali International belum mengalami mutasi mikrosatelit pada kedua primer tersebut. Penelitian Watiniasih et al (2011) yang menggunakan Jalak Bali dari berbagai sumber seperti dari Taman Nasional Bali Barat, Bali Bird Park dan Nusa Penida menunjukkan hasil berbeda dimana sampel Jalak Bali yang digunakan kemungkinan sudah mengalami mutasi pada primer site TH3 sehingga pada primer tersebut tidak menghasilkan band atau pita DNA. Pada kedua primer yang digunakan dalam penelitian ini menghasilkan alel atau jumlah pasang basa yang bersifat monomorfik yang artinya hanya ditemukan satu jenis alel pada kedua primer tersebut. Pada primer TH3 alel yang ditemukan berukuran 128 pb. Tingginya frekuensi alel 128 Pb pada primer TH3 yang ditemukan pada keseluruhan Burung Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) yang diperoleh di PT. Taman Burung Citra Bali International dapat dijadikan penanda atau penciri genetik burung tersebut pada primer TH3. Alel 128 kemungkinan merupakan alel leluhur atau ancestor dari Burung Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) di PT. Taman Burung Citra Bali International yang belum mengalami mutasi genetik. Hal tersebut dapat dilihat dimana hasil genetik antara indukan awal dan keturunan seluruhnya sama. Pada primer TH6 alel yang ditemukan berukuran 180 Pb. Tingginya frekuensi alel 180 Pb pada primer TH6 menunjukkan bahwa alel ini kemungkinan juga merupakan alel leluhur atau alel ancestor pada Burung Jalak Bali di PT. Taman Burung Citra Bali International. Alel leluhur merupakan alel umum yang nantinya dapat mengalami mutasi dimana dari alel leluhur akan menghasilkan alel dengan jumlah pasang basa yang lebih besar ataupun sebaliknya menghasilkan alel yang lebih kecil. Apabila kita bandingkan pola DNA yang didapat pada primer TH3 maupun Th6 tidak terdapat perbedaan pola genetik pada kedua sampel yang memiliki riwayat sumber sampel yang berbeda baik dari indukan dan anakan di PT. Taman Burung Citra Bali International ataupun dari Yayasan Bhagawan Giri. Hal tersebut menunjukkan rendahnya keragaman alel yang ada pada Burung Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) yang digunakan dalam sampel penelitian ini. Apabila kita bandingkan antara sumber sampel yang diperoleh tidak terdapat perbedaan antara sampel yang burung yang dikembangkan di PT. Taman Burung Citra Bali International dengan yang bersumber dari Yayasan Bhagawan Giri dan menjadi inventory atau koleksi di PT. Taman Burung Citra Bali International. Hal tersebut kemungkinan karena 98 sumber muasal dari Burung Jalak Bali berasal dari satu monotype genus yang ditemukan oleh Van Ballen. Walaupun mereka hidup dan berkembang di berbagai wilayah dan bahkan di reintroduksi lagi ke Bali tidak akan merubah pola-pola genetik pada burung tersebut. Hal yang sama juga ditemukan pada penelitian Watiniasih et al (2011) yang tidak menemukan perbedaan pola genetik pada Burung Jalak Bali di Taman Nasional Bali Barat, Nusa Penida dan Bali Bird Park. Pada penelitian ini tidak ditemukan Keragaman genetik Burung Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) dengan mengunakan primer mikrosatelit TH3 dan TH6. Rendahnya keanekaragaman genetik disebabkan munculnya sifat monomorfik pada semua primer yang digunakan sehingga frekuensi masingmasing alel menjadi 1. Keragaman genetik yang rendah ini disebabkan juga oleh laju mutasi yang rendah pada DNA mikrosatelit yang ada pada lokus gen TH3 dan TH6. Mutasi merupakan sumber keanekaragaman genetik yang dapat meningkatkan heterozigositas. Tanpa adanya mutasi pada DNA mikrosatelit maka alel yang ditemukan serta keanekaragaman genetiknya akan sangat rendah. SIMPULAN Dari hasil penelitian ini dapat ditarik kesimpulan yaitu keragaman genetik Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) yang ditemukan dalam penelitian ini sangat rendah yang disebabkan oleh rendahnya variasi alel yang ditemukan pada keseluruhan sampel yang digunakan. Disarankan untuk penelitian selanjutnya menambah jumlah lokus yang digunakan dan menggunakan sampel Burung Jalak Bali (Leucopsar rothschildi) dari berbagai sumber lembaga konservasi sehingga bisa dilihat pola-pola genetik dan perbedaannya pada burung tersebut dari berbagai sumber. KEPUSTAKAAN Brandström, M., A. T. Bagshaw, N. J. Gemmell., H. Ellegren. 2008. The Relationship Between Microsatellite Polymorphism and Recombination Hot Spots in the Human Genome. Molecular Biology and Evolution 25(12):2579-2587. Hillis, D. M., C. Moritz and B. K. Mable. 1996. Molecular Systematics, 2nd ed. Sinauer Associates, Inc Publisher. Sunderland. USA. Junitha, I. K. 2004. Keragaman Genetik Masyarakat Di Desa-Desa Bali Aga Berdasarkan Analisis DNA Dan Sidik Jari. Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. Bogor. Disertasi S3. Tidak Dipublikasikan. Junitha, I. K. 2007. Penggunaan DNA Mikrosatelit Untuk Penelusuran Kawitan Pada Soroh-Soroh Masyarakat Bali (Suatu Kajian Pustaka). Bali. Jurnal Biologi XI (2) : 50-54. MacKinnon, J., Karen P., Bas van Balen. 1998. Burung-Burung Di Sumatera, Jawa, Bali, dan Kalimantan. Penterjemah: W. Rahardjaningtrah., A. Adikerana.,P. Martodihardjo.,E. K. Supardiyono.,Bas van Balen. Puslitbang Biologi-LIPI/BirdLife International Indinesia Programme. Bogor. Moeljopawiro, S. 2007. Marka Mikrosatelit Sebagai Alternatif Uji Buss Dalam Perlindungan Varietas Tanaman Padi. Available at : http://www.zuriat.unpad.ac.id/index.php/volume/doc_download/20-5-marka-mikrosatelitsebagai-alternatif-uji-buss-dalam-perlindungan-varietas-tanamam-padi1.html. Opened : 25.08.2009 Nei, M. 1987. Molecular Evolutionary Genetics. New York. Columbia University Press. 99 Prasetiyono, J dan Tasliah. 2008. Penanda Mikrosatelit: Penanda Molekuler yang Menjanjikan. Available at : http://anekaplanta.wordpress.com/2008/03/02/marka-mikrosatelit-markamolekuleryang-menjanjikan/. Opened : 5.09.2009 Pujo dan Mariana. 2007. Konservasi Ex Situ Burung Endemik Langka Melalui Penangkaran Available at: www.dephut.go.id/files/Pujo_Mariana.pdf Opened : 24.11.2012 Sambrook, J., D.W. Russell. 2001. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 3rd edition. New York. Cold Spring Harbor Lab Pr. Suryo. 2005. Genetika. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Tegelström, H. 1986. Mitochondrial DNA in Natural Population: an improved routine for screening of genetic variation based on sensitive silver staining. Electrophoresis 7:226-229. (TNBB) Taman Nasional Bali Barat. 2010. Pengelolaan Penangkaran Jalak Bali (Leucopsar rothscildi) Di Taman Nasional Bali Barat. Available at : www.google.co.id./jalak bali.html. Opened : 1. 4. 2011. Watiniasih, N. L., I K. Junitha., Sudaryanto., I. W. Windia. 2011. Genetic Diversity of an Indigenous Balinese Bird (Leucopsar rotschildi) from Bali and Overseas Breeding Sites. International Conference on Biological Science Faculty of Biology.Universitas Gadjah Mada 2011 (ICBS BIOUGM 2011) Yuwono, T. 2005. Biologi Molekuler. Jakarta: Erlangga. 100 SEROPREVALENSI TUBERKULOSIS PADA SAPI BALI SEBAGAI LANGKAH AWAL MONITORING PENCEGAHAN PENYAKIT ZOONOSIS (NEW EMERGING DISEASE) DI PROVINSI BALI SEROPREVALENCE TUBERCULOSIS OF BALI COWS AS EARLY PREVENTION STEPS ON MONITORING ZOONOSIS DESEASE (NEW EMERGING DESEASE) IN BALI PROVINCE Hapsari Mahatmi1, Nyoman Adi Suratma1, Nengah Kerta Besung1 Ketut Budiasa1, G.P. Widiarsa2 1 Fakultas Kedokteran Hewan ,Unud , 2Balai Karantina Kelas I Denpasar, Email: [email protected] INTISARI Bovine tuberculosis (BTB) merupakan penyakit zoonosis yang sangat penting, yang disebabkan oleh Mycobacterium bovis. BTB merupakan bakteri yang sangat patogen yang mampu menyerang hewan vertebrata, terutama sapi, hewan domestik, dan hewan liar, bahkan manusia atau sebaliknya pada semua umur. Penyebaran penyakit tuberkulosis hampir ke seluruh dunia, baik negara maju seperti Amerika, Eropa, termasuk Inggris, dan frekuensi semakin tinggi pada negara-negara berkembang yang kondisi sanitasi lingkungannya belum menjadi perhatian yang serius dan sedikitnya laporan atau monitoring yang dilakukan terhadap BTB. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui seroprevalensi BTB di provinsi Bali. Jumlah sampel sapi yang digunakan sebanyak 376 ekor. Metode pemeriksaan sampel serum darah sapi dengan menggunakan metode ELISA. Hasil penelitian menunjukkan bahwa prevalensi BTB di wilayah provinsi Bali adalah sebesar 0,53% yang didapatkan dari kabupaten Bangli. Sedangkan wilayah kabupaten lain sama sekali tidak ditemukan adanya seropositif. Simpulan penelitian adalah kemungkinan besar BTB sudah ada di provinsi Bali. Untuk mengetahui lebih lanjut, perlu dilakukan pemeriksaan yang lebih mendalam dengan menggunakan whole blood dan organ predeleksi yang diperoleh di rumah potong hewan setempat. Kata kunci: Bovine Tubercolosis (BTB), seroprevalensi, seropositif, whole blood, ELISA ABSTRACT Bovine tuberculosis (BTB) is a very important zoonotic disease, caused by Mycobacterium bovis. BTB is the most universal pathogen among mycobacteria and affects many vertebrate animals of all age groups including humans although, cattle, goats, and pigs are found to be the most susceptible Tuberculosis spread almost to all over the world, both developed countries such as in America, Europe including The United Kingdom, and the higher frequency was found in developing countries where environmental sanitation have not been a serious concern and the lack of reports or monitoring conducted on BTB. This study aimed to determine the seroprevalence BTB in the province of Bali. 376 cows were used as samples. Blood serum was examinated by ELISA method. The results of study showed that the prevalence of BTB in the province of Bali is 0.53 % which was found in Bangli district, whereas in other districts in Bali, no seropositive was found. These results suggested that BTB exists in Bali Province. Further research needs to be done to obtain a BTB agent through examination of whole blood and organs at the local abattoir especially at Bangli regency. Keywords; Bovine Tubercolosis (BTB), Anigen*, seroprevalence, whole blood, ELISA 101 PENDAHULUAN Bovine tuberculosis (BTB) merupakan penyakit zoonosis yang sangat penting, yang saat ini sudah menyebar ke seluruh dunia. Penyakit ini disebabkan oleh Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC). M. tuberculosis umumnya menyerang manusia sebagai inang utamanya sedangkan M. bovis mampu menyerang lebih banyak inang seperti manusia, sapi, hewan domestik, seperti anjing, kucing, dan hewan peliharaan lain, serta hewan liar. Oleh karenanya, deteksi awal adanya titer antibodi terhadap tuberkulosis merupakan suatu indikator terhadap ancaman tuberkulosis baik pada manusia maupun pada hewan, khususnya pada sapi. Penularan umumnya melalui makanan, udara, dan kontak dengan cairan lendir penderita. Baik tuberkulosis yang diakibatkan oleh infeksi M. tuberculosis dan M. bovis sangat sulit dibedakan berdasarkan gejala klinis yang tampak, maupun pemeriksaan patologi, keduanya menunjukkan perubahan yang sangat mirip. Untuk membedakan keduanya, perlu pemeriksaan yang lebih spesifik seperti dengan metode ELISA dan PCR (Gaborick et al., 1996; Hassanain et al., 2009); Wernery et al. (2007). Pada manusia, tuberkulosis merupakan penyakit yang sangat ditakuti karena bersifat persisten dan menahun (Acha dan Syfres, 2001 dan Dharmojono, 2001). Laporan WHO (2009) menyebutkan bahwa penderita TB di wilayah Asia Tenggara mencapai jumlah ke dua terbesar setelah Afrika, yaitu sebesar 30 % dari jumlah total penderita sedunia. Indonesia menduduki peringkat ke-5 dari negara-negara se-Asia Tenggara. Kasus TB pada manusia tidak terlepas dari ledakan kasus HIV dan Bali merupakan wilayah ke dua terbesar jumlah penderita HIV-nya di seluruh Indonesia. Hal ini juga merupakan suatu kondisi yang diprediksi akan meningkatkan kasus tuberkulosis yang diakibatkan oleh infeksi M. bovis pada manusia (Kantor, et al, 2010). Provinsi Bali mempunyai jumlah populasi sapi 683.800 ekor (Disnak Prov.Bali, 2010), yang setiap tahunnya mengirimkan rata-rata 75.000 ekor sapi potong ke luar provinsi. Bali merupakan penghasil ternak sapi yang sangat potensial. Namun, tidak terlepas dari berbagai permasalahan, yang salah satunya adalah kemungkinan terjadinya penyebaran penyakit sapi yaitu tuberkulosis. Perdagangan bebas dan globalisasi berdampak pada penyebaran penyakit yang lebih cepat khususnya pada komoditi ternak, tidak terkecuali di Indonesia, dengan peningkatan kebutuhan protein hewani yang terus meningkat. Kondisi ini memberi peluang masuk hama penyakit hewan karantina (HPHK), khususnya BTB ke wilayah Bali. Jadi, perlu pengawasan/kontrol terhadap lalu lintas hewan secara intensif di berbagai pintu-pintu pemasukan dan pengeluaran (exit dan entry point). Dalam pelaksanaan kegiatan ini, perlu ada hubungan yang terintegrasi serta koordinasi antar instansi terkait untuk mewujudkan perlindungan terhadap keamanan pangan hewani, sehingga tidak membahayakan kesehatan hewan dan manusia. Selama tahun 1994, TB hanya ditemukan di Propinsi Jawa Barat, yaitu sejumlah 3 kasus (Dharmojono, 2001). Mahatmi dan Goncales (2011) melaporkan bahwa jumlah seropositif ELISA adalah sebesar 29,3 % pada sapi di Timor Leste. Bali sebagai asal sapi bali berpotensi menjadi pusat pengembangan dan penelitian sapi bali, khususnya di Universitas Udayana. Oleh karenanya, sangat penting dilakukan penelitian tentang berbagai aspek tentang Sapi Bali. Jadi, perlu dilakukan penelitian tentang seroprevalensi tuberkulosis pada Sapi Bali sebagai dasar pemetaan wilayah lokasi tertular berdasarkan hasil seropositip dari sampel yang diperiksa. Data ini merupakan database yang sangat penting untuk menentukan kebijakan dan langkah selanjutnya mengingat BTB merupakan salah satu penyakit yang masuk dalam undang-undang karantina. MATERI DAN METODE Sampling Lapang terhadap Sapi Bali di seluruh provinsi Bali Penelitian difokuskan pada pengamatan seroprevalensi dengan menggunakan Observasional Cross-Sectional Study untuk mengetahui prevalensi tuberkulosis pada sapi bali di Provinsi Bali (Anonim, 102 2011). Sampling dilakukan di seluruh Kabupaten/Kota Provinsi Bali. Sumber data yang digunakan yaitu data primer dengan pengambilan sampel darah sapi di Kabupaten/Kota di Provinsi Bali. Sedangkan data sekunder diperoleh dari Dinas Peternakan Provinsi Bali. Pengambilan sampel didasari perhitungan detect disease dengan tingkat konfidensi 95%, prevalensi 2% (Sumiarto, 2009). Pemeriksaan Sampel Serum darah Sapi Bali Setiap ekor sapi terpilih sebagai sampel diambil darahnya dengan mengggunakan vacuntainer 10 ml. Darah diambil dari vena jugularis, kemudian dibiarkan sebentar pada posisi miring. Kemudian disimpan dalam coolbox dan dibawa ke laboratorium untuk dipisahkan serum dan sel darah merahnya. Serum koleksi diberi label dan disimpan dalam freezer sampai saat dilakukan pemeriksaan dengan metode ELISA (Anigen*). Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) merupakan gold standard untuk pemeriksaan seroprevalensi tuberkulosis yang mempunyai akurasi yang sangat tinggi (Lilenbaum dan Fonseca, 2006; Lequin, 2005). Tabel 1. Jumlah Sampel yang di periksa dari masing-masing kabupaten yang ada di Provinsi Bali No Kabupaten Jumlah Sampel yang Diuji 1 Bangli 100 2 Buleleng 56 3 Klungkung 50 4 Gianyar 50 5 Negara 40 6 Tabanan 40 7 Badung 40 Jumlah 376 HASIL Hasil uji serologis ELISA terhadap sampel serum yang berasal dari 376 ekor sapi Bali yang diperoleh dari wilayah provinsi Bali, dapat dilihat pada Tabel 2. Tabel 2. Hasil Pemeriksaan Serologis BTB dengan Uji ELISA No Kabupaten Jumlah Sampel yang Diuji Hasil Uji ELISA Jumlah Sampel Positif Seroprevalensi (%) 2,00 1 Bangli 100 2 2 Buleleng 56 - 0 3 Klungkung 50 - 0 4 Gianyar 50 - 0 103 5 Negara 40 - 0 6 Tabanan 40 - 0 7 Badung 40 - 0 Jumlah 376 2 0,53 Hasil Pemeriksaan ELISA Sampel serum dari seluruh wilayah di 9 Kabupaten yang ada di Bali sejumlah telah dilakukan pemeriksaan daengan metode ELISA. Hasil pemeriksaan terhadap sampel serum darah dari 376 ekor sapi menunjukkan bahwa terdapat 3 seropositip BTB pada pemeriksaan pertama. Namun, setelah dilakukan pemeriksaan ulang, yang benar-benar positif hanya 2 sampel serum yang berasal dari Kabupaten Bangli. PEMBAHASAN BTB merupakan penyakit zoonosis yang saat ini menjadi perhatian dunia, mengingat BTB ternyata merupakan penyebab utama kasus tuberkulosis pada manusia, khususnya di perdesaan dan pada pekerja rumah potong di banyak negara. Afrika merupakan benua yang mempunyai presentasi BTB yang berkisar antara 5 – 50 %. Di Etiopia, seroprevalensi BTB berkisar 3,5%-5,2%, yang ditemukan di rumah potong hewan (Domenech, 2006; Etter et al., 2006; Han et al., 2013). Sedangkan di Tibet, seroprevalensi BTB yang ditemukan pada hewan liar sebangsa serigala adalah sebesar 2,6 % (Han et al, 2013). BTB merupakan penyakit yang bersifat kronis, lambat, dan sangat sedikit menampakkan gejala klinis, terutama pada sapi. Mengingat dampaknya yang serius, kondisi ini perlu dicermati dan seharusnya mulai mendapat perhatian dari pemerintah. Di banyak negara, status bebas BTB selalu bergerak setiap saat, seperti di beberapa negara bagian di Amerika Serikat, selalu terjadi perubahan status dari tertular menjadi bebas dan dari bebas menjadi tertular. Untuk bisa membebaskan BTB dari suatu negara perlu waktu dan biaya yang sangat besar, seperti yang dilaporkan oleh Center for Food Security and Public Health (2009) dan Good dan Duignan (2011). Program eradikasi di beberapa Negara di Eropa, Jepang, Selandia Baru, Meksiko dan negara bagian tengah Amerika Serikat menunjukkan kemajuan yang sangat signifikan, Meskipun eradikasi BTB telah dilakukan di sebagian besar negara bagian di Amerika, tetapi masih ada laporan tentang adanya kasus atau seropositip terhadap BTB (Cosivi et al., 2010). Yang juga sering terjadi adalah hilangnya status bebas BTB pada negara yang tidak secara rutin melakukan tindakan pemantauan terhadap BTB. Pemberantasan yang paling sulit dilakukan adalah BTB yang menyerang hewan liar yang ada di negara-negara tersebut. Faktor Resiko BTB Hasil pengujian dengan metode ELISA menunjukkan bahwa ternyata hanya 2 dari 376 (0,53%) sampel yang menunjukkan reaksi positif BTB, dan 1 sampel diragukan BTB. Sapi yang positip ELISA terhadap BTB merupakan sapi lokal Bali umur 2,5 tahun, jenis kelamin betina, cara pemeliharaannya dikandangkan. Dari hasil kuisioner dan wawancara dengan pemilik sapi yang terpilih sebagai sampel penelitian, ternyata hampir sebagian besar adalah peternak kecil yang jumlah sapi peliharaannya adalah 25 ekor. Umumnya, sapi dipelihara secara konvensional, dikandangkan, dan diberi pakan hijauan yang tersedia di sekitar lokasi. Tempat tinggal pemilik dan lokasi kandang berjarak relatif dekat. Pengetahuan peternak tentang BTB sangat minim bahkan tidak tahu, meskipun mereka umumnya tahu penyakit TBC pada manusia, tetapi umumnya tidak tahu bahwa sapi penderita dapat menularkan penyakit tersebut kepada manusia. Beberapa petani bahkan tinggal sangat berdekatan dengan kandang sapi untuk menjaga dari adanya encurian. Menurut hasil enelitian yang dila orkan oleh Kang’ethe et al. (2007), jarak 104 antara kandang sapi dan tempat tinggal pemilik sangat berpengaruh terhadap besarnya faktor resiko. SIMPULAN Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan maka dapat disimpulkan bahwa BTB sangat besar kemungkinannya sudah ada di Bali meskipun dengan seroprevalensi yang cukup kecil, tetapi perlu mendapat perhatian serius. Saran yang diberikan adalah perlunya dilakukan penelitian lebih mendalam tentang penelusuran agen BTB pada berbagai sumber yang berasal dari sapi bali di wilayah tersebut. UCAPAN TERIMAKASIH Ucapan terimakasih ditujukan kepada Dirjen Dikti atas pembiayaan Hibah Unggulan Perguruan Tinggi Tahun 2013 dan kepada Kepala Dinas Peternakan Provinsi Bali, sejawat yang terlibat dalam penelitian, dan berbagai pihak yang telah turut melancarkan penelitian ini. KEPUSTAKAAN Acha P. and B. Szyfres. 2001. Zoonoses and Communicable Diseases Common to Man and Animals. Bacterioses and Mycoses. 3rd edition. Washington, DC: Pan American Health Organization, Scientific and Technical Publication 580: 283–299. Anonim. 2011. Pedoman Pelaksanaan Pemantauan Penyakit Tuberkulosis di Daerah Sebar Hama Penyakit Hewan Karantina (HPHK). Pusat Karantina Hewan dan Keamanan Hayati Hewani Badan Karantina Pertanian. Center For Food Security And Public Health (2009). Cosivi O., J. M. Grange, C.J. Daborn, M.C. Raviglione, T. Fujikura, D. Cousins, R.A. Robinson, H.F.A.K. Huchzermeyer, and F.X. Meslin. 2010. Zoonotic Tuberculosis due to Mycobacterium bovis in Developing Countries.Worl. Health Organization, Geneva, Switzerland. Dharmojono, H. 2001. Penyakit Menular dari Binatang ke Manusia. Dinas Peternakan Provinsi Bali. 2010. Data Populasi Sapi potong dan Sapi Perah pada Tahun 2010. Domenech, R. D. 2006 Human Mycobacterium bovis infection in the United Kingdom: Incidence, risks, control measures and review of the zoonotic aspects of bovine tuberculosis. Epub 86(2):77-109. Etter E, P. Donado, F. Jori, A. Caron, F. Goutard, and F. Roger. 2006. Risk Analysis and Bovine Tuberculosis, a re-Emerging Zoonosis. Ann N Y Acad Sci. 1081:61-73 Gaborick, C M., M. D. Salman, R. P. Ellis, dan J. Triantis. 1996. Evaluation of a five-antigen ELISA for diagnosis of tuberculosis in cattle and Cervidae. J.American Veterinary Medical Association 209(5):962-966. Good, M. and A. Duignan. 2011. Perspectives on the History of Bovine TB and the Role of Tuberculin in Bovine TB Eradication. Vet. Med. Int. 17: 410470. Hassanain, N. A., N. A. Hassanain, Y. A. Soliman, A. A. Ghazy, and A. Yasser. 2009 Bovine Tuberculosis in a dairy cattle farm as a threat to public health. Africa Journal of Microbiology Research 3(8): 446-450 Han, C. J., M. Gao, X. Meng, M. Liu, X. Zhang, D. Zhang, A. Guo, and S. Sizhu. 2013. Seroprevalence of bovine tuberculosis infection in yaks (Bos grunniens) on the Qinghai-Tibetan Plateau of China. Trop. Animal Health Prod. 45 (6). 105 Kang’ethe E. K., C. E. Ekuttan, and V. N. Kimani 2007 Investigation of the prevalence of bovine tuberculosis and risk factors for human infection with bovine tuberculosis among dairy and nondairy farming neighbour households in Dagoretti Division, Nairobi, Kenya. 84 (11 Suppl): S92-5. Kantor I N., P. A. LoBue, and C.O. Thoen. 2010. Human tuberculosis caused by Mycobacterium bovis in the United States, Latin America and the Caribbean. Int J Tuberc Lung Dis14 (11):1369-73. Lilenbaum, W and L.S. Fonseca. 2006. The use of Elisa as a complementary tool for bovine tuberculosis control in Brazil Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci.43(2). Lequin, R., 2005. Enzyme Immunoassay (EIA)/ Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). J Chin. 51: 2415-2418. Mahatmi, H. dan L. Goncales. 2011. Laporan Proyek kerjasama dengan Susu Bean Project for Timor Leste. Sumiarto, B. 2009. Pengambilan Sampel Monitoring HPHK pada Hewan, BAH dan HBAH. Laboratorium Epidemiologi. Bagian Kesmavet FKH. UGM. Wernery U., J. Kinne, K. L. Jahans, H. M. Vordermeier, J. Esfandiari, R. Greenwald, B. Johnson , A. UlHaq, and K. P. Lyashchenko. 2007. Tuberculosis outbreak in a dromedary racing herd and rapid serological detection of infected camels. Vet Microbiol. 122(1-2):108-15. WHO Annual Report 2010. Tuberculosis in the South-East Asia Region. 106 STUDI EPIDEMIOLOGI KOKSIDIOSIS PADA SAPI DI BALI THE EPIDEMIOLOGY STUDY OF CATTLE COCCCIDIOSIS IN BALI Nyoman Adi Suratma, Ida Bagus Made Oka, I Made Dwinata 1. Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana Email :[email protected] INTISARI Koksidiosis adalah penyakit parasitik pada saluran usus yang disebabkan oleh genus Eimeria sp. dan merupakan salah satu penyakit yang paling umum dan penting pada ternak di seluruh dunia. Penentuan prevalensi, komposisi spesies, faktor risiko yang terkait dan manajemen hewan sangat berguna dalam merancang strategi pengendalian yang efisien. Penelitian yang dilakukan merupakan penelitian observasional cross sectional di wilayah pulau Bali. Dalam hal ini Bali dibagi menjadi empat strata, yaitu daerah dataran rendah kering dan basah serta daerah dataran tinggi kering dan basah. Pengambilan sampel ternak sapi dilakukan secara purposive dengan jumlah sebanyak 400 ekor ternak sapi (Thrusfield, 2005). Ternak sapi yang dipergunakan sebagai sampel penelitian adalah sapi yang berumur 1 – 12 bulan (kelompok I) dan diatas 12 bulan (kelompok II) yang diambil dari sampel wilayah secara purposif. Untuk menentukan terjadinya infeksi Eimeria sp.dan tingkat infeksi pada sapi dilakukan dengan melakukan pemeriksaan feses dengan metode pengapungan dan metode Mc Master, dilanjutkan dengan melakukan identifikasi dan sporulasi dari ookista yang ditemukan untuk menentukan spesiesnya (Soulsby, 1982). Hasil penelitian menunjukkan bahwa, prevalensi koksidiosis pada sapi di Bali sebesar 39,75 %, terdapat hubungan yang bermakna (P,0,05) antara kondisi wilayah, umur dan jenis kelamin dengan prevalensi koksidiosis pada sapi di Bali Kata kunci: epidemiologi, koksidiosis, sapi, Bali ABSTRACT Coccidiosis is a parasitic disease of the intestinal tract caused by the genus Eimeria sp. and is one of the most common diseases and important in cattle worldwide. Determination of the prevalence, species composition, associated risk factors and management of animals is very useful in designing an efficient control strategy. Research conducted an observational cross-sectional study in the region of the island of Bali. In this case Bali is divided into four strata, namely the dry and wet lowland and upland areas of dry and wet. Sampling is purposive cattle with a total of 400 head of cattle (Thrusfield, 2005). Cattle were used as the study sample was aged cows 1-12 months (group I) and over 12 months (group II) were taken from the sample purposively region. To determine the level of infection sp.dan Eimeria infection in cattle feces examination conducted by the flotation method and the method of Mc Master, followed by identifying and sporulation of the oocysts were found to determine the species (Soulsby, 1982). The results showed that the prevalence of coccidiosis in cattle in Bali by 39,75 %, there is a significant relationship between the condition of the area, age and gender to the prevalence of coccidiosis in cattle in Bali Keywords: epidemiology, cocccidiosis, cattle, Bali 107 PENDAHULUAN Ternak sapi bali adalah merupakan satu plasma nuftah yang sangat potensial untuk menjaga ketahanan pangan di Indonesia khususnya dalam pemenuhan kebutuhan akan protein hewani, karen ternak ini mempunyai tingkat produktifitas yang tinggi. Namun dalam perkembangannya banyak faktor yang dapat menghambat produktifitasnya diantaranya faktor penyakit. Salah satu penyakit parasit yang dapat menghambat pertumbuhan anak sapi adalah koksidiosis. Koksidiosis adalah penyakit parasitik pada saluran usus yang disebabkan oleh genus Eimeria sp. dan merupakan salah satu penyakit yang paling umum dan penting pada ternak di seluruh dunia. Penyakit ini umumnya menginfeksi ternak-ternak muda dapat mengakibatkan diare yang berkepanjangan, depresi dan anemi sehingga dapat menghambat pertumbuhan (Radostits et al., 1994). Banyak penelitian menunjukkan bahwa dalam kondisi alamiah, lebih umum terjadi infeksi campuran dari Eimeria sp. Dalam hal ini diketahui 13 spesies Eimeria yang dapat menginfeksi sapi, namun yang dianggap paling pathogen adalah Eimeria bovis dan Eimeria zuernii. Perkembangan koksidiosis pada sapi terutama tergantung pada faktor-faktor seperti spesies Eimeria, usia hewan yang terinfeksi, jumlah ookista tertelan, adanya infeksi bersamaan dan manajemen pemeliharaan (Daugschies dan Najdrowsk, 2005). Dengan demikian, penentuan prevalensi, komposisi spesies, faktor risiko yang terkait dan manajemen hewan sangat berguna dalam merancang strategi pengendalian yang efisien. Berdasarkan latar belakang tersebut maka tujuan penelitian ini adalah mengetahui epidemiologi koksidiosis pada sapi di Bali, sehingga diketahui faktor resiko yang berpengaruh terhadap penyakit ini. MATERI DAN METODE Rancangan Penelitian Peneltian yang dilaksanakan merupakan penelitian observasional cross sectional, dengan memperhatikan beberapa faktor resiko terhadap terjadinya infeksi Eimeria sp. pada sapi. Adapun faktor resiko yang akan dinalisis diantaranya, wilayah tempat sapi dipelihara, umur dan jenis kelamin sapi serta manajemen pemeliharaan sapi. Sampel Wilayah Penelitian Sampel wilayah penelitian adalah wilayah di Bali yang dibagi menjadi empat strata, yaitu dataran rendah basah (Kecamatan Kerambitan Kabupaten Tabanan dan Kecamatan Abiansemal Kabupaten Badung), dataran rendah kering (Kecamatan Kubu Kabupaten Karangasem dan Kecamatan Seririt Kabupaten Buleleng), dataran tinggi basah (Kecamatan Penebel Kabupaten Tabanan dan Kecamatan Rendang Kabupaten Karangasem) dataran tinggi kering (Kecamatan Kuta Selatan Kabupaten Badung dan Kecamatan Kintamani Kabbupaten Bangli) Sampel Sapi Ternak sapi yang dipergunakan sebagai sampel penelitian adalah sapi yang berumur 1 – 12 bulan (kelompok I) dan di atas 12 bulan (kelompk II) yang diambil dari sampel wilayah secara purposif. Jumlah sampel sapi yang akan diamati ditentukan menurut Thrusfield (2005) sebagai berikut: n = 1.962 × Pexp (1- Pexp) / d2 dimana n = ukuran sampel yang diperlukan, Pexp = prevalensi yang diharapkan (57 %), d = presisi mutlak diinginkan 0.05 n = 77 ekor ≈ 400 ekor sa i Oleh karena pada setiap setiap sampel wilayah akan diamati 100 ekor sapi.. 108 Isolasi dan Identifikasi Eimeria sp. pada Sapi. Untuk menentukan adanya infekai pada sapi dilakukan dengan pemeriksaan feses yang diambil langsung dari rektum, selanjutnya diperiksa dengan metode pengapungan dan metode Mc Master untuk menentukan intensitas dari infeksi. Selanjutnya dilakukan identifikasi spesies dari Eimeria, yang dilakukan dengan melakukan sporulasi ookista Eimeria, selanjutnya dilakukan pengamatan waktu perkembangan dan morfologi dari ookista (Soulsby, 1982). Analisis Data Data yang diperoleh selanjutnya dianalisis dengan analisis Chi square dan ditentukan resiko relatif dari masing-masing faktor resiko. HASIL Prevalensi Koksidiosis pada Sapi Jumlah sapi yang telah diperiksa pada penelitian ini sebanyak 400 ekor, yang berasal dari Kecamatan Kuta Selatan, Kecamatan Penebel, Kecamatan Rendang, Kecamatan Kerambitan, Kecamatan Kubu, Kecamatan Kintamani, Kecamatan Abiansemal dan Kecamatan Seririt. Sapi-sapi yang diperiksa tersebut diantaranya terdiri dari 156 ekor sapi jantan dan 244 sapi betina, sedangkan dari umur sapi ternyata 132 ekor sapi berumur 1-12 bulan dan 268 ekor berumur diatas 12 bulan. Setelah dilakukan pemeriksaan, ternyata 159 ekor (39,75 %) sapi di Bali terinfeksi koksidia, dengan kisaran 28 % sampai 51 % pada masing-masing wilayah. Hubungan Wilayah dan Prevalensi Koksidiosis Prevalensi kokdiosis pada sapi didaerah dataran tinggi kering adalah sebesar 28 %, dataran tinggi basah 35 %, dataran rendah kering 45 % dan daerah dataran rendah basah sebesar 51 %. Setelah dilakukan analisis, ternyata hanya prevalensi tampak adanya hubungan yang bermakna (P <0,05) antara kondisi wilayah dengan dengan prevalensi infeksi koksidia pada sapi di Bali. Gambar 1. Hubungan wilayah dan prevalensi koksidiosis 109 Hubungan Umur Sapi dengan Prevalensi Koksidiosis Setelah dilakukan pengamatan ternyata prevalensi koksidiosis pada sapi yang berumur 1-12 bulan adalah sebesar 44,7 %, sedangkan pada sapi yang berumur diatas 12 bulan sebesar 37,31 %. Setelah dilakukan analisis ternyata tampak adanya hubungan yang bermakna (P <0,05) antara umur sapi dengan infeksi koksidia pada sapi di Bali. Dalam hal ini prevalensi infeksi koksidia pada sapi muda lebih tinggi dibandingkan pada sapi dewasa. Gambar 2. Hubungan umur sapi dengan prevalensi koksidiosis Hubungan Jenis Kelamin Sapi dengan Prevalensi Koksidiosis Hasil pemeriksaan menunjukkan bahwa prevalensi koksidiosis pada sapi jantan sebesar 33,97 %, sedangkan prevalensi pada sapi betina sebesar 43,44 % . Setelah dilakukan analisis , ternyata keadaan ini menunjukkan adanya hubungan yang bermakna (P<0,05) antara jenis kelamin terhadap prevalensi infeki koksidia pada sapi di Bali, dalam hal ini prevalensi pada sapi betina lebih tinggi dibanding sapi jantan. Gambar 3. Hubungan jenis kelamin sapi dengan prevalensi koksidiosis 110 PEMBAHASAN Tingginya angka prevalensi ini disebabkan masih kurangnya sanitasi, karena selain dilepas, dalam pemeliharaan sapi sebagian besar hanya dikandangkan pada kandang tanah yang tidak pernah dipersihkan seningga menjadi media yang baik untuk perkembangan dan penularan Eimeria penyebab koksidiosis. Adanya hubungan yang bermakna antara kondisi wilayah dengan prevalensi infeksi koksidia pada asapi di Bali, disebabkan karena siklus hidup koksidia sangat dipengaruhi oleh kelembaban dan kadar air dari suatu daerah. Selain itu ketinggian daerah juga dapat mempengaruhi, karena dengan semakin tinggi suatu wilayah maka kemungkinan kadar air dari wilayah tersebut juga semakin kecil. Dalam hal ini makin tinggi kelembaban, maka perkembangan ookista dari koksidia di alam akan semakin baik. Adanya hubungan yang bermakna antara umur sapi dengan infeksi koksidia pada sapi di Bali, berkaitan dengan terbentuknya respon imun terhadap infeksi, dimana pada sapi dewasa respon imun yang terbentuk lebih sempurna dibandingkan pada sapi muda, sehingga daya tahan sapi umur muda juga lebih rendah dibandingkan sapi dewasa dan kemungkinan untuk terinfeksi koksidia akan lebih tinggi. Adanya hubungan yang bermakna antara jenis kelamin terhadap prevalensi infeki koksidia pada sapi di Bali, kemungkinan disebabkan karena faktor hormonal yang dimiliki oleh hewan betina, yaitu progesterone yang dapat menurunkan imunitas dari hewan betina, sehingga lebih mudah untuk terinfeksi penyakit. SIMPULAN Prevalensi koksidiosis pada sapi di Bali sebesar 39,75 %, terdapat hubungan antara kondisi wilayah, umur dan jenis kelamin dengan prevalensi koksidiosis pada sapi di Bali. UCAPAN TERIMAKASIH Penulis mengucapkan terimaksih kepada Kementerian Pendidikan dan Kebudayaan melalui Direktorat Pendidikan Tinggii yang telah mendanai penelitian ini melalui Dana Hibah Desentralisasi (BOPTN) tahun Anggaran 2014. KEPUSTAKAAN Abebe R, B. Kumesa, A. Wessene.2008. Epidemiology of Eimeria infections in calves in Addis Ababa and Debre Zeit Dairy Farms, Ethiopia. Intern. J. Appl. Res. Vet. Med. 6:24-30. Astiti, L. G. S. 2011. Identifikasi Parasit Internal pada Sapi Bali di Wilayah Dampingan Sarjana Membangun Desa di Kabupaten Bima. Seminar Nasional Peternakan dan Veteriner. Alemayehu, A., M. Nuru., and T. Belina. 2013. Prevalence of Bovine Coccidia in Mbolcha District of South Wollo Ethiopia. J.Vet.Med.Anim.Health. Daugschies, A., and M. Najdrowski.. 2005. Eimeriosis in Cattle: Current Understanding. Journal of Veterinary Medicine Ernst J. V., and G. W. Benz. 1986. Intestinal coccidiosis in cattle. The veterinary clinics of North America/parasites: epidemiology and control. W.B. Saunders Company, Philadelphia, PA.. Fitriastuti, E. R., 2011. Studi Penyakit Koksidioasis pada Sapi Betina di 9 Propinsi di Indonesia. Balai Besar Pengujian Mutgu Obat Hewan. 111 Fraser, C. M. 2006. The Merck Veterinary Manual, A Hand Book of Diagnosis Therapy and Disease Prevention and Control for Veterinarians. 7th Ed., Merck and Co. Inc, Rahway, NIT, USA. Georgi, J. R. 1985. Parasitology for veterinarians. Fourth ed. W. B. Saunders Co., Phila. PA. Hammond, M., G. W. Bowman, L. R. Davies, and B. T. Simms. 1946. The endogenous phase of the life cycle of Eimeria bovis. J. Parasit. 32:409. Levine, 1985. Veterinari Parasitology. Ames Iowa State Univesity Press Pandit, B. A. 2009. Prevalence of Coccidiosis in Cattle in Kashmir valley. Vet. Scan. 4:16-20. Pascoti, F. R., M. A. Lopes1; F. A. Demeu1, C. A. Perazza1; M. F. Pedrosa1; and A. M Guimarães. 2011. Frequency of species of Eimeria in females of the holstein-friesian breed at the post-weaning stage during autumn and winter. Rev. Bras. Parasitol. Vet., Jaboticabal, Puspa, A. C. 2006. Faktor Resiko Lokasi Peternakan dan Umur terhadap Kejadian Infeksi Eimeria sp. Pada Sapi Bali di Kabupaten Karangasem: kajian Lintas Seksional. Skripsi FKH IPB. Radostits O. M, Blood D. C, and Gay C. C (1994). Veterinary Medicine. A Textbook of the Diseases of Cattle,Sheep, Pigs, Goats, and Horses. 8th Ed., Bailliere Tindall, Philadelphia. Rind, R., A. J. Propert and A. A. Kamboh. 2007. The Incidence of Eimeria Species in Naturally Infected Calves. International Journal OF Agriculture &Biologi 112 POTENSI Lactobacillus rhamnosus SKG34 SEBAGAI STARTER YOGHURT DAN VIABILITASNYA SELAMA PENYIMPANAN THE POTENCY OF Lactobacillus rhamnosus SKG34 AS YOGHURT STARTER AND ITS VIABILITY DURING STORAGE Komang Ayu Nocianitri1, I Nengah Sujaya2, Ni Nyoman Puspawati3 1 Jurusan Ilmu dan Teknologi Pangan, Fak. Teknologi Pertanian, Universitas Udayana, 2PS Ilmu Kesehatan Masyarakat, Fak Kedokteran, Universiats Udayana, 3 Jurusan Ilmu dan Teknologi Pangan, Fak. Teknologi Pertanian, Universitas Udayana Email: [email protected], [email protected], [email protected] INTISARI Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi dari Lactobacillus rhamnosus SKG34 sebagai starter pada pembuatan yoghurt untuk pengembangan pangan fungsional. Yoghurt dibuat menggunakan L. rhamnosus SKG34 sebagai starter tunggal dan starter campuran dari L. rhamnosus SKG34 dengan Streptococcus thermophilus atau Lactobacillus bulgaricus. Yoghurt disimpan selama 15 hari dan pengamatan dilakukan setiap 3 hari terhadap total BAL, pH, dan sifat sensoris. Hasil penelitian menunjukkan bahwa L. rhamnosus SKG34, baik tunggal maupun dikombinasikan dengan S. thermophilus atau L. bulgaricus, menghasilkan yoghurt dengan karakteristik yang tidak jauh berbeda, yaitu total BAL berkisar 108 cfu/g sampai 1010 cfu/g, pH berkisar 4.22 sampai 4.60, tekstur dari biasa sampai kental, rasa biasa sampai asam dan penilaian keseluruhan agak suka sampai suka. Hal ini menunjukkan bahwa L. rhamnosus SKG 34 dapat digunakan sebagai starter tunggal pada pembuatan yoghurt sehingga dapat dikembangkan untuk memproduksi produk pangan fungsional yang mengandung probiotik. Kata kunci: probiotik, yoghurt, Lactobacillus ABSTRACT This study aims to determine the potential of Lactobacillus rhamnosus SKG34 as a starter in the manufacture of yoghurt to the development of functional food. Yoghurt is made using L. rhamnosus SKG34 as a single starter and the starter mixture of L. rhamnosus SKG34 with Streptococcus thermophilus or Lactobacillus bulgaricus. Yoghurt was stored for 15 days and the observations were done every 3 days for a total BAL, pH, and sensory properties. The results showed that L. rhamnosus SKG34 either singly or in combination with S. thermophilus or L. bulgaricus produce yogurt with characteristics that are not much different from that in total BAL ranged between 108 cfu/g to 1010 cfu/g, the pH ranged from 4.22 to 4.60, the texture of ordinary until thick, taste sour and unusual to the overall assessment rather like to like. This suggests that L. rhamnosus SKG 34 can be used as a single starter in the manufacture of yoghurt that can be developed to produce functional food products containing probiotics. Keywords: probiotics, yoghurt, Lactobacillus 113 PENDAHULUAN Dewasa ini, pangan fungsional berkembang dengan pesat. Pangan yang dikonsumsi diharapkan tidak hanya dapat memenuhi kebutuhan zat nutrisi, tetapi juga dapat menstimulasi salah satu fungsi khusus dalam kesehatan individu. Bakteri asam laktat (BAL) telah banyak dimanfaatkan oleh industri pangan dalam menciptakan produk pangan fungsional untuk memelihara kesehatan saluran pencernaan manusia, yang dikenal dengan istilah probiotik. Probiotik adalah mikroorganisme hidup yang apabila diberikan pada jumlah yang tepat dapat bermanfaat bagi kesehatan saluran pencernaan (FAO, 2002). Susu kuda sumbawa telah banyak diklaim mempunyai berbagai efek menyehatkan serta dapat menyembuhkan beberapa penyakit. Bakteri asam laktat (BAL) adalah kelompok bakteri dominan pada susu kuda sumbawa terfermentasi dan diduga menjadi salah satu yang berkontribusi dalam efek menyehatkan. Penelitian BAL pada susu kuda sumbawa telah dilakukan dan diperoleh Lactobacillus rhamnosus SKG34 sebagai strain yang potensial sebagai probiotik (Sujaya et al., 2008a,b). L. rhamnosus SKG34 merupakan strain probiotik yang mempunyai sifat fungsional sebagai penurun kolesterol darah (Nocianitri et al., 2013, tidak dipublikasi) sehingga potensial untuk dapat dikembangkan sebagai makanan fungsional. Salah satu produk pangan populer yang mengandung probiotik saat ini adalah yoghurt. Aspek utama yang dilihat dari produk yoghurt yang mengandung probiotik adalah interaksi antara probiotik dengan bakteri starter dari yoghurt yang mempunyai hubungan saling menguntungkan. Starter yoghurt yaitu L. bulgaricus dan S. thermopillus dan bakteri probiotik yang ditambahkan dalam pembuatan yoghurt harus mempunyai sinergi dalam menghasilkan tingkat keasaman, produksi aroma, dan CO2, proporsi kultur starter yang stabil, dan menghasilkan zat yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri pathogen (Heller, 2001). Jika antara bakteri probiotik dan bakteri starter yoghurt mempunyai hubungan yang tidak saling menguntungkan, akan dihasilkan yoghurt yang mempunyai karakteristik menyimpang. Untuk itu, perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui apakah L. rhamnosus SKG34 dapat digunakan sebagai starter tunggal pada pembuatan yoghurt, atau dikombinasikan dengan bakteri starter yang umum digunakan dalam pembuatan yoghurt untuk menghasilkan yoghurt dengan karakteristik yang baik serta bagaimana viabilitasnya selama penyimpanan. MATERI DAN METODE Pembuatan bio-yoghurt menggunakan L. rhamnosus SKG34 sebagai kultur tunggal dan kombinasi L. rhamnosus SKG34 dengan S. thermophillus atau L. bulgaricus sebagai starter. Penelitian ini menggunakan rancangan acak kelompok yang terdiri atas 4 perlakuan, yaitu: L. rhamnosus SKG34 sebagai starter tunggal (A); Kombinasi L. rhamnosus SKG34 dengan S. thermophillus (AB), kombinasi L. rhamnosus SKG 34 dengan L. bulgaricus (AC) dan kombinasi ketiga isolat, yaitu; L. rhamnosus SKG 34, S. thermophillus, dan L. bulgaricus (ABC). Proses pembuatan Bio-yoghurt Penelitian ini diawali dengan penyegaran L. rhamnosus SKG34, S. thermophillus, dan L. bulgaricus. Stok isolat L. rhamnosus SKG34, S. thermophillus, dan L. bulgaricus yang disimpan dalam gliserol 30% pada suhu -200C diambil sebanyak 100 µl dan diinokulasikan ke dalam tabung reaksi yang berisi 5 ml media MRS broth. Tabung reaksi diinkubasi secara aerob selama 24 jam pada suhu 370C. Sel dicuci 2 kali dengan akuades steril dan siap digunakan untuk membuat starter. Starter yoghurt (plain yoghurt) dibuat terlebih dahulu sebelum membuat yoghurt. Proses pembuatan starter yaitu: susu segar dipasteurisasi pada suhu 800C selama 30 menit, kemudian didinginkan hingga suhunya mencapai 45 0C dan diinokulasi dengan L. rhamnosus SKG34, S. thermophillus, atau L. bulgaricus sebanyak 2,5% v/v. 114 Starter diinkubasi pada suhu 410C selama 24 jam kemudian didinginkan dalam refrigerator pada suhu 100C. Setelah mengalami proses ini, starter siap digunakan untuk pembuatan yoghurt. Prosedur pembuatan bio-yoghurt meliputi tahap-tahap sebagai berikut: pemanasan, penambahan starter, inkubasi, dan pendinginan. Susu segar dipasteurisasi pada suhu 80 0C selama 30 menit dan ditambahkan agar yang sudah dipanaskan sebanyak 0,1% b/v. Setelah proses pasteurisasi selesai, susu didinginkan sampai mencapai suhu 45 0C, kemudian ditambahkan starter sebanyak 6% (b/v). Susu diinkubasi dalam inkubator pada suhu 41 oC selama 18 jam. Tahap selanjutnya adalah pendinginan pada suhu 40C yang bertujuan untuk menghentikan proses fermentasi. Pengamatan dilakukan pada penyimpanan hari ke 0, 3, 6, 9, 12, dan 15. Variabel yang diamati meliputi: total BAL, pH, dan nilai sensoris yang meliputi uji skor terhadap tekstur dan rasa, serta uji kesukaan terhadap warna, aroma, tekstur, rasa, dan penerimaan keseluruhan. Penghitungan total populasi BAL pada yoghurt dilakukan dengan cara: 1 g sampel diencerkan dengan larutan saline 0.85% sampai pengenceran 10 -7 dan sampel yang yang telah diencerkan (pengenceran 10 -510-7) disebar pada permukaan media agar MRS yang telah ditambah Bromo Cresol Purple (BCP), kemudian diinkubasi secara aerob selama 24 jam pada suhu 37 o C. Setelah diinkubasi dilakukan penghitungan jumlah koloni yang tumbuh. Koloni bakteri yang tumbuh dihitung menggunakan metode pengenceran dengan asumsi bahwa satu koloni yang tumbuh berasal dari satu sel. Oleh karena itu, total populasi bakteri didapatkan dengan mengalikan jumlah koloni yang tumbuh dengan faktor pengencernya (Fardiaz, 1993). Pengukuran pH menggunakan pH meter (TOA ion meter IM 40S). pH yoghurt diukur dengan mencelupkan elektroda pH meter ke dalam sampel dan hasilnya dicatat. Penilaian sensoris dilakukan dengan uji skor dan uji kesukaan. Uji skor dilakukan terhadap tekstur dan rasa. Kriteria uji skor terhadap tekstur adalah sebagai berikut: nilai 1 (tidak kental), nilai 2 (agak kental), nilai 3 (biasa), nilai 4 (kental), dan nilai 5 (sangat kental). Kriteria uji skor untuk rasa adalah sebagai berikut: nilai 1 (tidak asam), nilai 2 (agak asam), nilai 3 (biasa), nilai 4 (asam), dan nilai 5 (sangat asam). Uji kesukaan dilakukan terhadap warna, aroma, tekstur, rasa, dan penerimaan secara keseluruhan. Kriteria uji kesukaan adalah sebagai berikut: nilai 1 (sangat tidak suka); nilai 2 (tidak suka); nilai 3 (agak tidak suka); nilai 4 ( biasa); nilai 5 (agak suka), nilai 6 (suka), dan nilai 7 (sangat suka). HASIL Bio-yoghurt dibuat menggunakan L. rhamnosus SKG 34 sebagai starter tunggal dan kombinasi L. rhamnosus SKG 34 dengan starter yang umum digunakan dalam pembuatan yoghurt yaitu S.thermophillus dan L.bulgaricus. Starter yoghurt dapat dilihat pada Gambar 1. Bio-yogurt dibuat dengan menggunakan starter tunggal L. rhamnosus SKG 34 (A), kombinasi L. rhamnosus SKG 34 dengan S. thermophillus (AB), L. rhamnosus SKG 34 dengan L. bulgaricus (AC), dan kombinasi ketiga isolat (ABC). Keempat jenis yogurt dapat dilihat pada Gambar 2. Gambar 1. Starter yoghurt dari L. rhamnosus. SKG 34 (A), S. thermophillus (B), dan L. bulgaricus (C). 115 Gambar 2. yoghurt dari L. rhamnosus. SKG 34 (A), S. thermophillus (B), dan L. bulgaricus (C) a. Total BAL Total BAL pada yoghurt dari keempat perlakuan pada awal penyimpanan berkisar 10 8 cfu/g sampai 1010 cfu/g dan sedikit mengalami penurunan selama 15 hari penyimpanan (Tabel 1). Tabel 1. Jumlah Total Bakteri Asam Laktat pada yoghurt selama penyimpanan (cfu/g) Jenis isolat Lama penyimpanan (hari) 0 3 6 9 12 15 A 4,71 X 10 8 1,07 X 10 9 1,16 X 10 10 2,27 X 10 9 1,89 X 10 9 2,33 X 10 9 AB 5,05 X 10 9 3,32 X 10 8 8,25 X 10 8 8,6 X 10 7 8,8 X 10 7 8,0 X 10 8 AC 2,43 X 10 9 8,58 X10 9 1,51 X 10 10 4,28 X 10 9 2,62 X10 8 2,62 X10 8 ABC 3,6 X 10 10 1,59 X 10 10 3,31 X 10 9 1,01 X 10 10 2,61 X 10 9 1,0 X 10 9 Keterangan: A: L. rhamnosus SKG 34; B: S. thermophillus; dan C: L. bulgaricus b. pH Derajat keasaman (pH) yoghurt dari keempat perlakuan berkisar antara 4,22 dan 4,6 pada awal penyimpanan dan cenderung tetap selama 15 hari penyimpanan (Tabel 2). Tabel 2. pH pada yoghurt selama penyimpanan Jenis isolat A AB AC ABC 0 4,46 4,33 4,22 4,3 3 4,49 4,39 4,31 4,35 Lama penyimpanan (hari) 6 9 4,37 4,53 4,14 4,34 4,12 4,33 4,14 4,43 12 4,37 4,18 4,11 4,17 15 4,5 4,3 4,24 4,31 Keterangan: A: L. rhamnosus SKG 34; B: S. thermophillus; dan C: L. bulgaricus c. Warna Nilai kesukaan terhadap warna yogurt selama 15 hari penyimpanan berkisar 5,21 – 6 dengan kriteria agak suka sampai suka (Tabel 3). Nilai kesukaan terhadap warna pada keempat perlakuan 116 menunjukkan nilai yang tidak jauh berbeda. Perlakuan starter dari jenis bakteri yang berbeda tidak berpengaruh terhadap warna yoghurt. Tabel 3. Nilai kesukaan terhadap warna pada yoghurt selama penyimpanan Jenis isolat A AB AC ABC 0 5,29 5,36 5,36 5,21 Lama penyimpanan (hari) 6 9 5,79 5,86 5,64 5,71 5,43 5,64 5,36 5,71 3 5,71 5,71 5,71 5,93 12 6 5,64 5,64 5,5 15 5,43 5,36 5,36 5,5 Keterangan: A: L. rhamnosus SKG 34; B: S. thermophillus; dan C: L. bulgaricus d. Aroma Nilai kesukaan terhadap aroma yoghurt selama 15 hari penyimpanan berkisar 4,36 – 5,71 dengan kriteria biasa sampai suka (Tabel 4). Perlakuan starter tunggal L. rhamnosus SKG 34 aromanya lebih disukai dibandingkan dengan perlakuan yang lain. Tabel 4. Nilai kesukaan terhadap aroma pada yoghurt selama penyimpanan Jenis isolat 0 A 5,71 AB 4,86 AC 4,71 ABC 4,50 3 4,86 5,50 5,14 5,07 6 4,64 4,64 4,50 4,86 Lama penyimpanan (hari) 9 12 5,64 5,43 5,21 5,00 5,14 5,00 5,07 4,50 15 4,93 4,36 4,36 4,29 Keterangan: A: L. rhamnosus SKG 34; B: S. thermophillus; C: L. bulgaricus e. Tekstur Nilai kesukaan terhadap tekstur yogurt selama 15 hari penyimpanan berkisar 4,57 – 6,07 dengan kriteria agak suka sampai suka (Tabel 5). Keempat perlakuan menunjukkan nilai yang tidak jauh berbeda. Uji skor menunjukkan nilai antara 2,93 – 4,29 dengan kriteria biasa sampai kental (Tabel 6). Tabel 5. Nilai kesukaan terhadap tekstur pada yoghurt selama penyimpanan Jenis isolat Lama penyimpanan (hari) 0 3 6 9 12 15 A 5,36 5,29 5,36 6,07 5,93 4,86 AB 5,14 4,71 4,86 5,50 5,57 4,79 AC 5,29 5,36 4,71 5,43 5,36 4,57 ABC 5,64 5,29 5,07 5,21 5,14 4,79 Keterangan: A: L. rhamnosus SKG 34 B: S. thermophillus; C: L. bulgaricus 117 Tabel 6. Nilai skor terhadap tekstur yoghurt selama penyimpanan Jenis isolat Lama penyimpanan (hari) 0 3 6 9 12 15 A 4,21 3,36 4,00 4,29 4,07 3,07 AB 3,57 3,14 3,71 4 3,86 3,07 AC 4,21 3,57 4,00 4 3,86 3,07 ABC 3,86 3,64 3,93 3,57 3,71 2,93 Keterangan: A: L. rhamnosus SKG 34; B: S. thermophillus; C: L. bulgaricus f. Rasa Nilai kesukaan terhadap rasa yogurt selama 15 hari penyimpanan berkisar 4,36 – 6,07 dengan kriteria biasa sampai suka (Tabel 7). Uji skor menunjukkan nilai 3,43 – 4,36 dengan kriteria biasa sampai asam (Tabel 8). Tabel 7. Nilai kesukaan terhadap rasa yoghurt selama penyimpanan Jenis isolat Lama penyimpanan (hari) 0 3 6 9 12 15 A 5,36 5,00 4,79 6,07 5,93 5 AB 4,64 4,64 4,00 5,57 5,29 4,71 AC 4,93 5,29 4,43 5,5 5,29 4,86 ABC 4,36 4,71 4,00 4,93 4,71 4,5 Keterangan: A: L. rhamnosus SKG 34; B: S. thermophillus; C: L. bulgaricus Tabel 8. Nilai skor terhadap rasa yoghurt selama penyimpanan Jenis isolat Lama penyimpanan (hari) 0 3 6 9 12 15 A 3,79 4,14 4,36 4,36 4,07 4,07 AB 3,71 3,79 3,71 3,71 3,71 4,14 AC 4,07 3,93 3,71 4,21 3,64 4,14 ABC 3,71 4,07 4,21 4,00 3,43 4,07 Keterangan: A: L. rhamnosus, SKG 34; B: S. thermophillus; C: L. bulgaricus 118 g. Penilaian keseluruhan Penilaian keseluruhan terhadap yogurt selama 15 hari penyimpanan berkisar pada 4,5 – 5,86 dengan kriteria agak suka sampai suka (Tabel 9). Nilai kesukaan terhadap penerimaan keseluruhan tertinggi pada yoghurt dengan perlakuan starter tunggal L. rhamnosus SKG 34. Tabel 9. Nilai penilaian secara keseluruhan yoghurt selama penyimpanan Jenis isolat Lama penyimpanan (hari) 0 3 6 9 12 15 A 5,71 5,21 5,5 5,86 5,86 5,07 AB 5,36 5,07 4,57 5,5 5,36 4,5 AC 5,14 5,07 4,93 5,14 5,29 4,64 ABC 5,14 5,00 4,93 4,93 5,07 4,64 Keterangan: A: L. rhamnosus SKG 34; B: S. thermophillus; C: L. bulgaricus PEMBAHASAN Bio-yoghurt dibuat menggunakan L. rhamnosus SKG 34 sebagai starter tunggal dan kombinasi L. rhamnosus SKG 34 dengan starter yang umum digunakan dalam pembuatan yoghurt yaitu S. thermophillus dan L. bulgaricus, Yoghurt dengan perlakuan starter tunggal L. rhamnosus SKG 34 menunjukkan total BAL yang paling rendah dibandingkan dengan perlakuan yang lain, akan tetapi cenderung stabil selama penyimpanan. Kasmiati dan Harmayani (2002) menyatakan bahwa peningkatan jumlah sel kultur campuran sedikit lebih tinggi dari pada kultur tunggal pada media yang sama, Selain itu, selama inkubasi, S. thermophillus akan menurunkan pH dan menghasilkan asam formiat yang akan menguntungkan bagi pertumbuhan L. rhamnosus SKG 34 dan L. bulgaricus yang mulai berkembang biak setelah pH turun sampai kira-kira 4,5. Menurut Indratiningsih et al. (2004), jumlah minimal sel probiotik hidup untuk dapat berperan sebagai agensia pemacu kesehatan adalah 10 6 cfu/g, sedangkan Chandan dan Shahani (1993) menyatakan bahwa jumlah mikroba aktif yang harus terdapat dalam yoghurt paling sedikit 107 cfu/g sehingga L. rhamnosus SKG 34 baik digunakan secara tunggal maupun dikombinasikan dengan kultur starter yang lain berada di atas jumlah mikroba yang dipersyaratkan. BAL yang umum digunakan sebagai starter pada proses fermentasi yoghurt adalah S. thermophillus dan L. bulgaricus akan merombak laktosa pada susu menjadi asam sehingga pH susu menjadi turun. S. thermophillus akan berkembang lebih cepat mengawali pembentukan asam laktat melalui fermentasi laktosa (Hidayat et al., 2006), Proses fermentasi dilakukan sampai pH 4,4 – 4,5, yang diikuti dengan terbentuknya senyawa asam laktat, asam asetat, asetaldehida, diasetil, dan senyawa volatil lainnya. Yoghurt dengan starter tunggal L. rhamnosus SKG 34 memiliki pH yang cenderung stabil selama penyimpanan, dengan jumlah mikroba ini juga cenderung stabil selama penyimpanan (Tabel 1). Hal ini disebabkan karena L. rhamnosus SKG 34 sebagai mikroba probiotik mempunyai ketahanan yang baik pada pH rendah sehingga mampu mempertahankan viabilitasnya selama penyimpanan. Pada proses fermentasi yoghurt, BAL akan memecah kandungan nutrisi pada susu menjadi senyawa–senyawa asam, seperti asam laktat, asam asetat, karbonil, asetaldehida, aseton, asetoin, dan diasetil (Wahyudi dan Samsundari, 2008). Substansi yang dihasilkan oleh BAL yang berupa senyawa 119 volatil akan memberikan aroma yang khas pada yoghurt (Widodo, 2003). Asam yang terbentuk selama proses fermentasi menyebabkan turunnya pH yoghurt. Pada pH rendah, protein susu akan mengalami koagulasi sehingga terbentuk gumpalan (Wahyudi dan Samsundari, 2008), yang membentuk tekstur dari yoghurt. Rasa asam disebabkan karena terbentuknya senyawa-senyawa asam seperti asam laktat dan asam asetat selama fermentasi yoghurt. Perlakuan starter tunggal L. rhamnosus SKG 34 menghasilkan yoghurt dengan rasa asam dan tekstur yang kental yang disukai panelis. SIMPULAN Dari hasil penelitian dapat disimpulkan L. rhamnosus SKG 34 dapat digunakan sebagai starter tunggal dalam pembuatan yoghurt dengan populasi yang cenderung tetap selama penyimpanan dengan pH sesuai dengan standar pH yoghurt. Kombinasi L. rhamnosus SKG 34 dengan S. thermophillus atau dengan L. bulgaricus sebagai starter yoghurt menghasilkan yoghurt dengan karakteristik yang tidak jauh berbeda, yaitu tekstur dari biasa sampai kental, rasa biasa sampai asam, dan penilaian keseluruhan agak suka sampai suka. UCAPAN TERIMAKASIH Terima kasih disampaikan kepada Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi, Departemen Pendidikan dan Kebudayaan, yang telah membiayai penelitian ini. KEPUSTAKAAN Chandan dan Shahani. 1993. Yoghurt. In: Hui, Y,H,, editor, Dairy Science and Technology Handbook, Vol.2, VCH Publisher, New York, pp. 1-56. FAO/WHO. 2002. Joint FAO/WHO Working Group Report on Drafting Guidelines for the Evaluation of Probiotics in Food, London. Fardiaz, S. 1993. Analisis Mikrobiologi Pangan. Raja Grafindo Persada, Jakarta Heller, K. J. 2001. Probiotic bacteria in fermented foods: product charachteristics and starter organisms. J.Nutr.375: 2-3 Hidayat, N., Padaga, M., dan S. Suhartini. 2006. Mikrobiologi Industri. Penerbit Andi, Yogyakarta, Indratiningsih, Widodo, Siti, dan W. Endang, 2004. Produk yoghurt shiitake sebagai pangan kesehatan berbasis susu. Jurnal Teknologi dan Industri Pangan. 25(1): 54 – 60, Kasmiati, U. T. dan E. Harmayani. 2002. Ilmu dan Teknologi Pangan. Universitas Gadjah Mada Press, Yogyakarta. Nocianitri, K. A., I N Sujaya, dan I D. M. Sukrama. 2013. Pengembangan Probiotik Lactobacillus sp. SKG34 serta Formulasinya dalam Bentuk Pangan Fungsional (sifat fungsional probiotik L.rhamnosus SKG34), Laporan penelitian Hibah Bersaing, Universitas udayana. Sujaya, I N., N. M. U. Dwipayanti, N. L. P. Suariani, N. P. Widarini, K. A. Nocianitri, dan N. W. Nursini, 2008a. Probiotic characterization of Lactobacillus sp. isolated from Sumbawa mare milk. J. Vet. 9: 33-40. Sujaya, I N., Ramona, Y., N. M. U., Dwipayanti, , N. L. P., N. P SuarianiWidarini, K. A. Nocianitri, dan N. W. Nursini, 2008b. Isolation and characterization of Lactic acid bacteria from Sumbawa mare milk J. Vet. 9: 52-59. Widodo. 2003. Bioteknologi Industri Susu. Lacticia Press, Yogyakarta. 120 Wahyudi dan Samsundari. 2008. Karakteristik mikrobiologis, Kimia, Fisik, dan Organoleptik Yoghurt. Jurnal Teknologi dan Industri Pangan. 21: 5 – 6. 121 EVALUASI SIFAT KIMIA DAN SENSORIS ROTI BUN YANG MEMANFAATKAN TEPUNG SUWEG (Amorphopallus campanulatus B1) SEBAGAI BAHAN PENSUBSTITUSI TERIGU QUALITY AND SENSORY EVALUATIONS OF BREAD BUN USING THE FLOUR OF Amorphopallus campanulatus B1ASA SUBSTITUTE FOR WHEAT FLOUR I DP. Kartika Pratiwi*, Ni Made Indri Hapsari A., A.A.G.N. Anom Jambe Jurusan Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Udayana Email: [email protected] INTISARI Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kualitas kimia dan sensoris roti bun hasil substitusi terigu dengan tepung suweg, yang didasari semakin meningkatnya impor gandum di Indonesia sehingga perlu dilakukan pengkajian mengenai alternatif bahan pengganti terigu, terutama yang berbasis umbiumbian. Suweg (Amorphophallus campanulatus B1) merupakan salah satu umbi yang dapat dijadikan alternatif pangan sumber karbohidrat pengganti terigu. Penelitian ini menggunakan pola RAL (rancangan acak lengkap), dengan enam perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg, yaitu R0 = 100:0; R1 = 95:5; R2 = 90:10; R3 = 85:15; R4 = 80:20; R5 = 75:25. Berdasar hasil uji sensorik (hedonik) (friedman test), perlakuan substitusi suweg dengan terigu R3 (85:15) direkomendasikan sebagai perlakuan yang memberikan kualitas sensorik yang dapat diterima oleh 25 panelis semi terlatih, dengan kesukaan yang baik terhadap semua atribut mutu (warna, aroma, tekstur, rasa, dan penerimaan keseluruhan) berkisar dari agak suka sampai suka. Roti bun dengan perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg (85:15) memiliki kadar air 25,70%; kadar abu 0,89%; kadar protein 7,21%; kadar lemak 1,73%; kadar karbohidrat 64,46%; dan kadar serat kasar 10,02%. Kata kunci: suweg, terigu ,roti bun, sifat kimia, sensoris. ABSTRACT The objective of this research was to determine the quality and sensory evaluation of the bread bun made suweg flour as the substitute for wheat flour. Effective ratio of wheat flour and suweg flour are needed to produce good quality bread bun. The research was conducted using completely randomized design experiment with six treatments of ratio of wheat flour and suweg flour as R0 = 100: 0; R1 95: 5; R2 = 90:10; R3 = 85:15; R4 = 80:20; R5 = 75:25. Hedonic rating performed by 25 untrained panelist recommended that bread bun with ratio of wheat flour and suweg flour of 85:15 (R3) had the best attributes based on aroma, taste, texture, color, and overall preference, which contained water of 25.70%; ash 0.89%; protein 7.21%; fat 1.73%; carbohydrate 64.46%; and crude fiber 10.02%. Keywords: suweg flour, wheat flour, bread bun, quality and sensory evaluations. PENDAHULUAN Suweg (Amorphophallus campanulatus B1.) merupakan salah satu umbi lokal, yang memiliki potensi sebagai pengganti terigu. Peningkatan keanekaragaman produk makanan yang diolah 122 menggunakan suweg dapat dilakukan dengan mengolah umbi suweg menjadi tepung sehingga lebih mudah untuk diaplikasikan menjadi berbagai produk pangan berbahan dasar terigu. Beberapa penelitian telah dilakukan dengan memanfaatkan tepung suweg sebagai bahan pensubstitusi terigu pada pembuatan biskuit. Selain biskuit, roti merupakan salah satu produk makanan yang diolah menggunakan 100% terigu. Pemanfaatan tepung suweg pada pengolahan roti diharapkan dapat membatasi ketergantungan terhadap terigu. Roti bun atau yang lebih dikenal dengan sebutan roti burger, berbentuk setengah lingkaran dengan permukaan yang berwarna kecoklatan, merupakan roti yang paling sering dikonsumsi sehari-hari selain roti tawar. Pada prinsipnya, roti dibuat dengan cara mencampurkan terigu dan bahan penyusun lainnya menjadi adonan kemudian difermentasikan dan dipanggang (Nurhidayat, 2009). Substitusi terigu dengan menggunakan tepung suweg pada pembuatan roti bun dapat menjadi suatu alternatif baru untuk mengurangi penggunaan terigu. Namun, dalam aplikasinya harus diperhatikan beberapa faktor yang dapat menjadi penyebab kegagalan dalam pembuatan roti, salah satunya adalah kurangnya kandungan protein tepung suweg dibandingkan dengan terigu. Tepung bahan lain, seperti umbi-umbian belum mampu sepenuhnya menggantikan terigu karena tidak mengandung gluten sehingga tepung dari bahan pangan lokal rata-rata baru bisa mensubstitusi terigu sekitar 25-30 %, terutama aneka roti dan mie (Ratnaningsih et al., 2010). Salah satu persyaratan dari produk pangan adalah selain bernilai gizi juga memiliki kualitas sensoris yang dapat diterima. Penilaian secara sensoris terhadap rasa, tekstur, warna, aroma, dan penampilan dari roti bun yang dihasilkan dari substitusi terigu dengan tepung suweg menjadi faktor utama dalam menentukan kualitas roti bun. Penggunaan tepung suweg sebagai pensubstitusi terigu dalam pembuatan roti bun diharapkan dapat menghasilkan roti bun yang memiliki nilai gizi yang baik dan kualitas sensoris yang dapat diterima. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menganalisis kualitas kimia dan sensoris dari roti bun yang disubstitusi dengan tepung suweg. MATERI DAN METODE Penelitian dilakukan di Laboratorium Analisa Hasil Pangan, Laboratorium Biokimia dan Nutrisi Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Udayana Bali. Waktu penelitian dilakukan mulai bulan Agustus sampai dengan Desember 2013. Bahan Penelitian Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah: umbi suweg, terigu merk "Segitiga Biru", gula, telur, margarin "Blue Band", garam, dan ragi instan (fermipan), HCl, natrium bikarbonat. Bahan kimia yang digunakan untuk analisis meliputi: NaOH, asam asetat–kloroform, petroleum eter (PE), kalium iodida, natrium thiosulfat, alkohol, Na 2S2O3, zink, indikator methilen blue, dan alkohol, diperoleh dari Laboratorium Analisa Pangan, Biokimia dan Nutrisi, Jurusan Ilmu dan Teknologi Pangan Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Udayana. Metode Penelitian Penelitian ini terdiri dari tiga tahapan, yaitu pembuatan tepung suweg, pembuatan roti bun dengan substitusi terigu, dan penentuan kualitas kimia dan sensoris dari roti bun. Tahap 1. Proses Pembuatan Tepung Suweg Proses pembuatan tepung suweg (Kurdi, 2002, dimodifikasi): umbi suweg dikupas dan dicuci dengan air, diiris tipis dengan ukuran 0,3 cm. Irisan umbi basah direndam dalam larutan asam klorida 0,25% selama 4 menit, kemudian ditiriskan dan direndam dalam larutan natrium bikarbonat 1%, selama 5 menit. Irisan umbi dicuci dengan air mengalir hingga bersih. Dikeringkan dengan oven pengering pada 123 suhu 60oC selama 5 jam atau sampai chips mudah dipatahkan dan digiling sampai halus dan kemudian diayak menggunakan saringan 60 mesh. Tahap 2. Proses pembuatan roti bun Bahan-bahan yang dipergunakan dalam membuat roti ditimbang dan ditakar sesuai komposisi yang diberikan pada Tabel 1. Tepung terigu bersama ragi, garam, dan gula pasir diaduk rata. Ditambahkan telur, diaduk rata sambil dituangi air sedikit demi sedikit sampai adonan setengah kalis, kemudian dimasukkan margarin. Adonan diuleni kembali sampai lentir dan kalis, dibulatkan kemudian difermentasi selama 1 jam pada suhu ruang. Selanjutnya, adonan dipotong-potong seberat 50 g, dibentuk bulat, dan difermentasi kembali selama 30 menit, kemudian dipanggang dalam oven pada 200oC selama 20 menit. Tabel 1. Komposisi bahan baku dalam pembuatan roti bun Perlakuan Terigu T. Suweg Gula (g) Ragi (g) Air (ml) Telur (g) Mentega (g) Garam (g) R0 (0%) 1000 - 100 10 500 120 100 10 R1 (5%) 950 50 100 10 500 120 100 10 R2 (10%) 900 100 100 10 500 120 100 10 R3 (15%) 850 150 100 10 500 120 100 10 R4 (20%) 800 200 100 10 500 120 100 10 R5 (25%) 750 250 100 10 500 120 100 10 Rancangan Penelitian Pembuatan roti bun menggunakan metode rancangan acak lengkap (RAL) non-faktorial dengan 3 kali ulangan. Faktor tunggal yaitu substitusi terigu dengan tepung suweg (R) (substitusi terigu 0%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%). Data hasil penelitian kualitas kimia akan dianalisis menggunakan analisis sidik ragam. Bila terdapat pengaruh erlakuan yang nyata dilakukan uji lanjutan enggunakan Duncan’s multiple range test (DMRT). Data hasil penilaian sensoris akan dianalisis menggunakan analisis data nonparametrik dan Friedman-test. Variabel Pengamatan Variabel pengamatan adalah sifat sensoris yang meliputi warna, rasa, tekstur, aroma, dan penerimaan secara keseluruhan (Larmond, 1970). Analisis kimia roti meliputi kadar air dengan metode oven (AOAC, 1995), kadar abu (AOAC, 1995), kadar lemak dengan metode soxhlet (AOAC, 1995), kadar protein dengan metode semi-makro Kjeldahl (AOAC, 1995), kadar karbohidrat dengan metode by difference (Apriyantono, et al., 1989). HASIL Kadar Air Berdasarkan hasil analisis, perlakuan perbandingan terigu dengan tepung suweg menunjukkan pengaruh nyata terhadap kadar air roti bun. Kadar air dari roti bun berkisar 24,60% sampai dengan 27,08%, perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg dapat menurunkan nilai kadar air dari roti bun yang dihasilkan. Pada Tabel 2. dapat diketahui bahwa nilai kadar air roti bun tertinggi yaitu pada 124 perlakuan R0 (kontrol) sebesar 27,08% dan yang terendah perlakuan substitusi tepung suweg 25% (R5) sebesar 24,60%. Kadar air dari masing-masing perlakuan terus menurun secara nyata seiring dengan meningkatnya substitusi terigu dengan tepung suweg. Roti bun yang menggunakan tepung suweg 5% (R1) memiliki kadar air yang tidak berbeda nyata (P>0,05) dengan perlakuan kontrol, sedangkan kadar air roti bun yang menggunakan tepung suweg 10% (R2) berbeda nyata (P<0,05) dibandingkan dengan kontrol. Tabel 2. Pengaruh substitusi terigu dengan tepung suweg terhadap kadar air, kadar abu, kadar protein, kadar lemak, dan kadar karbohidrat roti bun Kualitas Kimia Roti Bun Kadar Proteintn (%) Kadar Lemak tn (%) Kadar Karbohidrat (%) PERLAKUAN Kadar Air (%) Kadar Abu (%) R0 27,08±0,13a 0,60±0,027a 8,92±0,38 1,62±0,06 61,77±0,35a R1 26,83±0,11a 0,76±0,045b 8,41±0,36 1,72±0,07 62,28±0,46a R2 25,70±0,18b 0,89±0,087bc 7,21±0,19 1,73±0,13 64,46±0,19b R3 25,65±0,21b 0,92±0,056c 7,13±0,38 1,69±0,14 64,61±0,32b R4 25,04±0,40bc 1,03±0,75d 6,90±0,1 1,69±0,01 65,34±0,06c R5 24,60±0,91c 1,36±0,25de 6,89±0,46 1,70±0,04 65,45±0,05c Keterangan: angka pada kolom yang sama dengan notasi yang berbeda 0,05). enunjukkan berbeda nyata P ≤ Kadar Abu Berdasarkan hasil analisis, perlakuan perbandingan terigu dengan tepung suweg menunjukkan pengaruh nyata pada kadar abu dari roti bun. Kadar abu dari roti bun suweg semakin meningkat seiring dengan meningkatnya substitusi terigu dengan tepung suweg, kadar abu roti bun berkisar 0,6%-1,36%. Tabel 2 menunjukkan nilai kadar abu roti bun terendah pada perlakuan R0, yaitu sebesar 0,06%, dan tertinggi pada perlakuan R5, yaitu sebesar 1,36%. Kadar abu roti bun yang menggunakan tepung suweg 5% (R1) berbeda nyata dengan perlakuan kontrol (R0). Kadar abu pada setiap perlakuan menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05) terhadap kadar abu kontrol. Kadar Protein Hasil analisis protein roti bun berkisar 6,89%-8,92%. Perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg menurunkan kadar protein dari roti bun yang dihasilkan. Tabel 2 menunjukkan nilai kadar protein roti bun tertinggi pada kontrol (R0), yaitu sebesar 8,92% dan terendah pada perlakuan tepung suweg 25% (R5), yaitu sebesar 6,89%. Secara umum, terigu memiliki kadar protein yang lebih tinggi dibandingkan tepung suweg yang mempengaruhi kadar protein roti bun yang dihasilkan. Kadar Lemak Kadar lemak roti bun berkisar 1,62%-1,73%. Perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg meningkatkan kadar lemak roti bun yang dihasilkan. Tabel 2 menunjukkan kadar lemak roti bun terendah pada perlakuan R0, yaitu sebesar 1,62 %, dan tertinggi pada perlakuan R2, yaitu sebesar 1,73%. 125 Kadar Karbohidrat Berdasarkan hasil analisis, perlakuan perbandingan terigu dengan tepung suweg menunjukkan pengaruh nyata terhadap kadar karbohidrat roti bun. Hasil analisis karbohidrat roti bun adalah berkisar 61,77%-65,45%. Perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg meningkatkan kadar karbohidrat roti bun yang dihasilkan. Tabel 2 menunjukkan nilai kadar karbohidrat roti bun terendah pada perlakuan R0, yaitu sebesar 61,77 %, dan tertinggi pada perlakuan R5, yaitu sebesar 65,45%. Kadar karbohidrat roti bun kontrol (R0) tidak berbeda nyata dengan kadar karbohidrat roti bun dengan perlakuan substitusi tepung suweg 5% (R1) (P<0,05), sedangkan perlakuan substitusi tepung suweg 10% (R2) berbeda nyata dengan perlakuan substitusi tepung suweg 5% (R1) (P>0,05). Evaluasi sensoris Nilai rata-rata kriteria mutu dari roti bun yang dihasilkan berdasarkan penilaian sensoris dari 20 orang panelis dapat dilihat pada Tabel 3. Nilai rata-rata penerimaan terhadap warna roti bun berkisar 6,4 (suka)-3,4 (agak tidak suka). Nilai rata-rata penerimaan terhadap aroma roti bun berkisar 5,75 (suka)-3,5 (agak tidak suka). Nilai rata-rata penerimaan terhadap tekstur roti bun berkisar 6,05 (suka)- 4,05 (biasa). Nilai rata-rata penerimaan terhadap rasa roti bun berkisar 5,9 (suka)- 4,75 (agak suka). Nilai rata-rata terhadap penerimaan keseluruhan dari roti bun berkisar 5,8 (suka)- 4,45 (biasa). Hasil analisis statistik terhadap penilaian sensoris dari roti bun (uji Friedman) oleh 20 panelis semi terlatih menyatakan bahwa perlakuan substitusi tepung suweg sebanyak 10% (R2) menghasilkan nilai yang paling mendekati kontrol (R0, terigu 100%). Perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg 25% (R5) menghasilkan produk roti bun yang paling sedikit mendapatkan nilai dari panelis (Tabel 4). Tabel 3. Nilai Rata-Rata Kualitas Mutu Sensoris dari Roti Bun Perlakuan R0 R1 R2 R3 R4 R5 Warna 6,4 5,5 4,85 4,5 3,75 3,4 Aroma 5,75 5,35 5,35 4,9 4,2 3,5 Tekstur 6,05 5,5 5,6 5,05 4,60 4,05 Rasa 5,90 5,35 5,60 5,45 4,95 4,75 Penerimaan Keseluruhan 5,80 5,70 5,80 5,30 4,85 4,45 Tabel 4. Hasil Uji Friedman Terhadap Kualitas Sensoris Roti Bun Perlakuan R0 R1 R2 R3 R4 R5 Warna 5,38 4,4 3,7 3,25 2,4 1,88 Tekstur 4,65 4,15 4,18 3,53 2,68 1,83 Aroma 4,72 3,9 4,15 3,4 2,78 2,05 Rasa 4,47 3,58 4 3,45 2,95 2,55 Penerimaan Keseluruhan 4,44 3,69 4,06 3,31 3,14 2,36 126 PEMBAHASAN Perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg dapat memberikan pengaruh yang nyata (P<0,05) terhadap kadar air, kadar abu, kadar karbohidrat dari roti. Pada Tabel 2. terlihat bahwa kadar air roti bun mengalami penurunan setelah substitusi terigu dengan tepung suweg. Kadar air roti bun cenderung mengalami penurunan dengan adanya substitusi tepung suweg dengan terigu, karena semakin berkurangnya kemampuan tepung untuk menarik air akibat berkurangnya kandungan gluten pada adonan roti. Roti bun kontrol (R0) dengan terigu 100% memiliki kadar air paling tinggi, hal ini sesuai dengan pernyataan Koswara (2009), yaitu bahwa protein terigu bersifat mengikat air akan tetapi tidak larut dalam air. Protein terigu ini akan mengikat air membentuk gluten yang akan membentuk tekstur dari adonan roti sehingga dalam pembuatan roti diperlukan terigu dengan protein tinggi. Selanjutnya, Gumilar et al. (2011) menyatakan bahwa semakin menurunnya kadar protein akan menyebabkan turunkan daya ikat air sehingga sangat mempengaruhi kadar air roti. Kadar abu dari roti bun mengalami peningkatan seiring dengan meningkatnya substitusi terigu dengan tepung suweg, akan tetapi jumlah peningkatannya masih memenuhi persyaratan standar mutu roti, yakni maksimum 3% bb (SNI, 1995). Peningkatan kadar abu diduga berhubungan dengan bahan baku pensubstitusi yaitu tepung suweg yang mengandung beberapa mineral sehingga meningkatkan kadar abu dari roti yang dihasilkan. Richana dan Sunarti (2004) menyatakan bahwa secara kuantitatif nilai kadar abu dalam tepung berasal dari mineral dalam umbi segar, pemakaian pupuk, dan kontaminasi tanah dan udara selama pengolahan, selanjutnya dikemukan bahwa kadar abu pada tepung umbi cenderung lebih tinggi karena proses pengolahan menjadi tepung lebih singkat. Pada perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg, terjadi penurunan kadar protein roti bun yang disebabkan oleh perubahan komposisi bahan utama yaitu tepung, pada kontrol (R0) mengandung 100% terigu, dengan kadar protein sebesar 13-14%, sedangkan tepung suweg memiliki kadar protein 7,56%. Penurunan kadar protein roti bun suweg diduga berhubungan dengan kemampuan daya ikat air, seperti yang dikemukakan oleh Gumilar et al. (2011) bahwa semakin menurunnya kadar protein akan menurunkan daya ikat air. Kadar lemak pada roti bun yang dihasilkan dengan perlakuan substitusi tepung suweg tidak berbeda nyata dengan kontrol (R0). Hal ini dikarenakan kedua bahan utama dalam pembuatan roti, yaitu terigu dan tepung suweg tidak memiliki kandungan lemak yang tinggi, yaitu terigu sebesar 0,98% (bk) dan tepung suweg 0,29%, sehingga adanya substitusi terigu dengan tepung suweg tidak berpengaruh terhadap kadar lemak dari roti bun. Perbedaan kadar karbohidrat dari masing-masing sampel berhubungan dengan kadar karbohidrat dari tepung yang dipergunakan. Tepung suweg mengandung karbohidrat sebesar 87,32%, sedangkan terigu mengandung karbohidrat sebesar 79,66%. Kadar karbohidrat dari tepung suweg yang lebih tinggi mengakibatnya semakin tingginya kadar karbohidrat roti bun seiring dengan meningkatnya penambahan tepung suweg. Pada penilaian uji sensoris yang mempergunakan panelis semi terlatih sebanyak 20 orang, didapatkan hasil bahwa pada umumnya panelis menyukai roti bun dengan perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg 15%, hal ini dikarenakan dari segi warna, tekstur, aroma, rasa dan penerimaan keseluruhan masih menyerupai kualitas sensoris dari roti bun kontrol (R0), yaitu terigu 100%. Hal tersebut sesuai dengan hasil analisis uji Friedman, yaitu roti bun dengan substitusi terigu sampai dengan 15% masih dapat diterima oleh panelis dengan nilai tingkat kesukaan yang mendekati nilai roti perlakuan substitusi terigu 0%. Roti bun dengan perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg 20% dan 25% memiliki kriteria mutu tidak disukai oleh panelis, karena roti tersebut memiliki aroma khas suweg yang tajam, yang sedikit berbeda dengan aroma roti terigu, begitu pula dengan warna yang lebih kecoklatan dan tekstur roti yang tidak empuk. Jadi, panelis lebih menyukai roti bun dengan perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg di bawah 20%. 127 SIMPULAN Substitusi terigu dengan tepung suweg pada pembuatan roti bun memiliki pengaruh yang sangat nyata α=0 01 terhada kadar air kadar abu karbohidrat teta i tidak ber engaruh terhada kadar rotein dan lemak roti bun. Perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg (85%: 15%) memberikan kualitas sensoris yang dapat diterima oleh panelis dengan kriteria mutu warna 4,85 (agak suka), tekstur 5,35 (agak Suka); aroma 5,6 (suka); rasa 5,6 (suka); penerimaan keseluruhan 5,8 (suka). Roti bun dengan perlakuan substitusi terigu dengan tepung suweg (85%: 15%) memiliki kadar air 25,70%; kadar abu 0,89%; kadar protein 7,21%; kadar lemak 1,73%; kadar karbohidrat 64,46%. KEPUSTAKAAN AOAC. 1995. Official Methods of Analysis of The Association Analytical Chemist. Inc. Washington D.C. Apriyantono, A., D. Fardiaz, N.L. Puspitasari, Sedarnawati, dan S. Budijanto. 1989. Analisis Pangan. IPB Press, Bogor. Berenbaun, R. L. 2003. The Bread Bible. W.W. Norton and Company, New York. El, S. N. 1999. Determination of glicemic index for some breads. Journal Food Chemistry. 67:67-69. Gumilar, J., O. Rachmawan, dan W. Nurdyanti. 2011. Kualitas Fisikokimia Naget Ayam Yang Menggunakan Tepung Suweg. Jurnal Fakultas Peternakan Universitas Padjajaran, Bandung. Faridah, D. N. 2005. Kajian Sifat Fungsional Umbi Suweg (Amorphophallus campanulatus B1) secara in Vivo Pada Manusia. Laporan Akhir Penelitian Dosen Muda-IPB. Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan. Fakultas Pertanian. IPB, Bogor. Foster-Powell, K. and B. Miller. 1995. International Tables of Glicemic Index. American Journal of Clinical Nutrition. 62: 871s-893s. Hartono. 1993. Bagaimana Kita Membuat Roti, Bolu, Cake Taart, dan Kue. Depot Informasi Obat, Jakarta: Koswara, S. 2009. Teknologi Pengolahan Roti. e-Book Pangan. Kurdi, W. 2002. Reduksi Kalsium Oksalat pada Talas Bogor Sebagai Upaya Meningkatkan Mutu Keripik Talas. Skripsi. Institute Pertanian Bogor, Bogor. Mudjajanto, E. S. dan L. N. Yuliati. 2013. Bisnis Roti.: Penebar Swadaya, Jakarta Nurhidayat. 2009. Fermentasi Roti. Avaliable at: http//www.nurhidayat.lecture.ub.ac.id/2009/09/28/fermentasi-roti/. Accessed: 23 Juni 2013. Putra, I N. K., I K. Suter, I. M. Sugitha, N. M. Yusa, K. A. Nocianitri, N. W. Wisaniyasa, P. Suparthana dan N. Puspawati. 2011. Pengolahan Keladi Menjadi Tepung Dan Pemanfaatannya Sebagai Pensubstitusi Tepung Beras Pada Pengolahan Kue Tradisional Bali. Universitas Udayana, Denpasar. Ratnaningsih, A.W. Permana dan N. Richana. 2010. Pembuatan Tepung Komposit dari Jagung, Ubi Kayu, Ubi Jalar dan Terigu (Lokal dan Impor) untuk Produk Mi. Prosiding Pekan Serealia Nasional, Jakarta. Richana, N. dan T.C. Sunarti. 2004. Karakteristik Sifat Fisikokimia Tepung Umbi dan Tepung Pati dari Umbi Ganyong, Suweg, Ubi kelapa, dan Gembili. Jurnal Pasca Panen. 1(1): 29-37. 128 Rimbawan dan A. Siagian. 2004. Indeks Glikemik Pangan. Cara Mudah Memilih Pangan Yang Menyehatkan. Penebar Swadaya, Jakarta. Whitney, E. N., E. M. N. Hamilton, and S. R. Rolfes. 1990. Understanding Nutrition. 5th ed. West Publishing. New York. Winarno, F. G. 1997. Kimia Pangan dan Gizi. PT. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta. Winarno, F. G. dan S. Koswara. 2002. Iles-iles dan Hasil Olahannya. MBrio Press, Bogor. 129 POTENSI Streptomyces sp. DALAM MENGHAMBAT BAKTERI Klebsiella pneumoniae RESISTEN TERHADAP AMPISILIN THE POTENCY OF Streptomyces sp. IN INHIBITING Klebsiella pneumoniae RESISTANT TO AMPICILLIN Kadek Desy Kartika1, Retno Kawuri2, Putra Dwija3 1 2 Program Studi Biologi FMIPA, Unud, Lab.Mikrobiologi Jurusan Biologi FMIPA, Unud, 3 Lab.Mikrobiologi Fakultas Kedokteran, Unud Email:[email protected] INTISARI Penelitian ini bertujuan mengetahui adanya isolat Streptomyces sp. dari tanah rizosfer serta mengetahui potensi isolat Streptomyces sp. dari tanah rizosfer menghambat pertumbuhan bakteri Klebsiella pneumoniae yang resisten terhadap ampisilin. Ditemukan 11 isolat Streptomyces yaitu: Streptomyces sp. isolat 1 sampai Streptomyces sp. isolat 11). Dari 11 isolat Streptomyces sp. yang berhasil diisolasi, empat di antaranya memiliki daya hambat terhadap K. pneumoniae resisten antibiotik ampisilin, dan daya hambat yang paling tinggi dhasilkan oleh Streptomyces sp. isolat 8. Kata kunci: Streptomyces sp., potensi, Klebsiella pneumoniae, rizosfer ABSTRACT The aim of this research was to isolate Streptomyces sp. from rhizosphere soil and to determine the potency of Streptomyces in inhibiting Klebsiella pneumoniae resistant to ampicillin. Eleven isolates of Streptomyces have been found, that were Streptomyces sp. isolate 1 up to Streptomyces sp. isolate 11. Four isolates; Streptomyces sp. isolate 1, Streptomyces sp. isolate 4, Streptomyces sp. isolate 5, and Streptomyces sp. isolate 8 were capable to inhibit the growth of Klebsiella pneumoniae resistant to ampicillin. Streptomyces sp. isolate 8 was the strongest. Keywords: Streptomyces sp., potency, Klebsiella pneumoniae, rhizosphere PENDAHULUAN Indonesia merupakan salah satu negara beriklim tropis dan memiliki tingkat biodiversitas yang tinggi, yang terlihat dari banyak ditemukannya jenis mikroba yang menguntungkan, baik dalam bidang industri, pertanian, maupun kesehatan. Pemanfaatan mikroba dalam bidang kesehatan, salah satunya adalah sebagai penghasil antibiotik (Tabarez, 2005), contohnya bakteri Streptomyces yang merupakan salah anggota dari Actinomycetes. Potensi ini disebabkan oleh kemampuannya menghasilkan zat antimikroba yang mampu menghambat pertumbuhan mikroorganisme lainnya yang merugikan (Rahayu, 2006). Antibiotik yang telah berhasil ditemukan di antaranya adalah tetrasiklin yang dihasilkan oleh Steptomyces aureofaciens, kloramfenikol oleh S. venezuelae, eritromisin oleh S. erythreus, oleandomisin oleh S. antibioticus, linkomisin dan klindamisin oleh S. lincolnensis, streptomisin oleh S. griceus, kanamisin oleh S. kanamyceticus, dan neomisin oleh S. fradiae (Neneng, 2008). 130 Streptomyces yang berpotensi sebagai penghasil antibiotik dapat diisolasi dari berbagai tempat. Tanah merupakan salah satu habitat dari bakteri Streptomyces. Populasi Streptomyces dominan pada tanah dibandingkan dengan populasi mikroorganisme lainnya (Rao, 2001). Streptomyces banyak ditemukan pada daerah rizosfer tanah, hal ini disebabkan oleh banyaknya unsur hara di sekitar daerah rizosfer jika dibandingkan dengan daerah non-rizosfer (Ferfinia, 2010). Pneumonia merupakan salah satu penyakit infeksi saluran pernapasan yang menyerang saluran pernapasan bagian bawah. Penyakit ini mengakibatkan bagian alveolus paru-paru terisi eksudat atau cairan sehingga pertukaran oksigen dan karbondioksida menjadi terhambat (Sigalingging, 2011). Klebseilla pneumoniae merupakan salah satu bakteri penyebab pneumonia. Belakangan ini, telah ditemukan K. pneumoniae yang telah resisten terhadap antibiotik. Hal ini dapat disebabkan oleh pemberian antibiotik yang tidak rasional dan tidak sesuai anjuran. Selain itu, muncul kelompok bakteri yang mampu memproduksi Extended Spectrum Beta Lactamases (ESBL) yang mampu menghidrolisis antibiotik sehingga mengakibatkan bakteri menjadi resisten terhadap antibiotik (Nugroho dkk., 2011). Berdasarkan latar belakang di atas, yaitu dengan semakin meningkatnya resistensi patogen terhadap antibiotika, maka peneliti mencoba mengeksploitasi Streptomyces pada rizosfer tanaman yang memiliki potensi antibiosis terhadap Klebsiella pneumoniae yang resisten terhadap antibiotik ampisilin. MATERI DAN METODE Lokasi dan Tempat Penelitian Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi-Universitas Udayana dan Laboratorium Mikrobiologi Klinik RSUP Sanglah pada bulan September hingga November 2014. Isolasi bakteri Streptomyces sp. Bakteri Streptomyces sp. diisolasi dari tanah rizosfer yang ada di sekitar kampus FMIPA, Unud, Bukit-Jimbaran menggunakan metode pengenceran (plating method) dan ditanam pada media YMA (Yeast Malt Agar/ISP4 (Iinternational Streptomyces Project). Isolat Streptomyces yang didapat di-reisolasi sehingga didapatkan isolat murni Streptomyces. Selanjutnya, dilakukan uji pewarnaan Gram, uji pewarnaan tahan asam, dan uji katalase. Isolat-isolat Streptomyces yang didapatkan diidentifikasi dengan menggunakan metode Holt et al. (1994). Uji daya hambat Streptomyces sp. terhadap pertumbuhan bakteri K. pneumoniae yang resisten terhadap ampisilin secara in vitro Suspensi K. pneumoniae sebanyak 100 µl dimasukkan ke dalam cawan petri, kemudian dituang media PCA (Plate Count Agar) ke dalam cawan petri. Bakteri Streptomyces sp. usia 5 hari dipotong dengan menggunakan cork borer diameter 5 mm. Selanjutnya koloni Streptomyces dletakkan ditengah cawan petri yang telah berisi suspensi K. pneumoniae pada media PCA. Cawan petri selanjutnya diinkubasi pada suhu 37oC selama 5 hari. Kemudian dilakukuan pengamatan dan pengukuran diameter terhadap zona hambat yang terbentuk dari bakteri Streptomyces sp. terhadap pertumbuhan K. pneumoniae. HASIL Ditemukan 11 Streptomyces sp. pada 10 sampel tanah risosfer. Seluruh isolat Streptomyces yang ditemukan bersifat tidak tahan asam pada pewarnaan tahan asam, merupakan bakteri Gram positif, serta menunjukkan hasil positif pada uji katalase menggunakan hidrogen peroksida 3% yang ditandai oleh adanya gelembung udara. Pernyataan ini dapat dilihat pada Tabel 1. 131 Morfologi makroskopik koloni Streptomyces yang ditemukan berbeda satu dengan lainnya, dan dapat dilihat pada Gambar 1 dan Tabel 2. Hasil uji antagonistik Streptomyces sp. terhadap K. pneumoniae resisten antibiotik ampisilin ditunjukkan pada Gambar 2, sedangkan besarnya diameter zona hambat yang dihasilkan ditunjukkan pada Tabel 3. Tabel 1. Hasil pewarnaan tahan asam, pewarnaan Gram, dan uji katalase isolat Streptomyces sp. No. Isolat Pewarnaan tahan asam Pewarnaan Gram Uji katalase Dinding sel L-DAP 1. Streptomyces sp. (isolate 1) Tidak tahan asam + + + 2. Streptomyces sp. (isolate 2) Tidak tahan asam + + + 3. Streptomyces sp. (isolate 3) Tidak tahan asam + + + 4. Streptomyces sp. (isolate 4) Tidak tahan asam + + + 5. Streptomyces sp. (isolate 5) Tidak tahan asam + + + 6. Streptomyces sp. (isolate 6) Tidak tahan asam + + + 7. Streptomyces sp. (isolate 7) Tidak tahan asam + + + 8. Streptomyces sp. (isolate 8) Tidak tahan asam + + + 9. Streptomyces sp. (isolate 9) Tidak tahan asam + + + 10. Streptomyces sp. (isolate 10) Tidak tahan asam + + + 11. Streptomyces sp. (isolate 11) Tidak tahan asam + + + Streptomyces (isolate 1) sp. Streptomyces (isolate 2) sp. Streptomyces (isolate 3) sp. Streptomyces (isolate 4) sp. Streptomyces (isolate 5) sp. Streptomyces (isolate 6) sp. Streptomyces (isolate 7) sp. Streptomyces (isolate 8) sp. 132 Streptomyces (isolate 9) sp. Streptomyces (isolate 10) sp. Streptomyces (isolate 11) sp. Gambar 1. Koloni Streptomyces sp. (isolate 1-11) yang berhasil diisolasi dari tanah rizosfer Tabel 2. Morfologi isolat Streptomyces secara makroskopik dan mikroskopik No. Streptomyces 1. Streptomyces (isolate 1) sp. 2. Streptomyces (isolate 2) sp. 3. Streptomyces (isolate 3) sp. 4. Streptomyces (isolate 4) sp. 5. Streptomyces (isolate 5) sp. 6. Streptomyces (isolate 6) sp. 7. Streptomyces (isolate 7) Streptomyces (isolate 8) sp. 8. 9. 10. 11. sp. Streptomyces sp. (isolate 9) Streptomyces sp.(isolate 10) Streptomyces (isolate 11) sp. Makroskopik Koloni berbentuk bulat, permukaan kasar, tepi halus berwarna merah sedangkan pada bagian tengah berwarna putih Koloni berbentuk bulat, permukaan halus dan cembung, ukuran kecil, tepi halus, berwarna putih terang Bentuk koloni tidak beraturan, permukaan koloni halus, koloni usia muda berwarna merah sedangkan yang tua berwarna putih Bentuk koloni tidak beraturan, permukaan halus, tepi koloni berwarna merah dengan tengah berwarna putih. Bentuk koloni tidak beratran, permukaan koloni kasar, tepi koloni berwarna merah dan tengah berwarna putih Bentuk koloni tidak bulat, permukaan koloni bertepung dengan warna koloni kuning serta tepi koloni rata. Bentuk koloni tidak rata, ukuran kecil, permukaan bertepung. Bentuk koloni tidak rata, permukaan halus, tepi koloni tidak rata, warna koloni merah. Bentuk koloni bulat, permukaan tidak rat, tepi tidak rata, warna koloni putih Bentuk koloni tidak beraturan, permukaan tidak rata, tepi koloni tidak rata, warna koloni putih. Bentuk koloni tidak beraturan, permukaan halus, tepi koloni tidak rata, warna koloni merah Mikroskopik x1000 Terdapat konidia berbentuk batang berantai dan konidia bergerombol Konidia bulat berantai dan konidia bergerombol Konidia bulat kecil, dan hifa bercabang tidak bersepta Konidia berbentuk bulat ada yang berantai dan bergerombol. Konidia bentuk bulat berantai dan bergerombol, terdapat hifa tidak aseptat. Konidia bulat berantai dan bergerombol, hifa bercabang dan tidak bersepta. Konidia bulat berantai dan bergerombol Konidia bulat bergerombol. Konidia berbentuk bulat dan hifa tidak bersepta. Konidia bulat berantai. Konidia berbentuk batang dan tersusun berantai 133 Kontrol Streptomyces (isolate 1) sp. Streptomyces (isolate 2) sp. Streptomyces sp. (isolate 3) Streptomyces (isolate 4) sp. Streptomyces (isolate 5) sp. Streptomyces (isolate 6) sp. Streptomyces sp. (isolate 7) Streptomyces (isolate 8) sp. Streptomyces (isolate 9) sp. Streptomyces (isolate 10) sp. Streptomyces sp. (isolate 11) Gambar 2. Uji antagonis Streptomyces terhadap K. pneumoniae 134 Tabel 3.2. Uji daya hambat isolat Streptomyces sp. terhadap K. pneumoniae yang resisten terhadap ampisilin No. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. Isolat Kontrol Streptomyces sp. 1 Streptomyces sp. 2 Streptomyces sp. 3 Streptomyces sp. 4 Streptomyces sp. 5 Streptomyces sp. 6 Streptomyces sp. 7 Streptomyces sp. 8 Streptomyces sp. 9 Streptomyces sp. 10 Streptomyces sp. 11 Diameter zona hambat 10, 88 mm 12, 56 mm 9, 56 mm 12, 75 mm - PEMBAHASAN Sebelas koloni Streptomyces yang diperoleh memiliki bentuk koloni yang berbeda-beda, seperti berbentuk bulat, bergelombang dan tidak beraturan. Warna dan struktur permukaan isolat berbeda satu sama lainnya serta mengalami pertumbuhan yang lambat dan menempel erat pada substratnya. Agrios (2005) menyatakan bahwa pertumbuhan permukaan koloni Streptomyces awalnya agak licin, namun lama-kelamaan terdapat miselium yang mengakibatkan permukaan koloni bertepung. Munculnya struktur bertepung pada permukaan Streptomyces disebabkan oleh munculnya hifa aerial dari substrat yang menutupi seluruh koloni. Holt et al. (1994) juga menyatakan bahwa pertumbuhan koloni Streptomyces sangat lambat, dalam waktu ± 5 hari pertumbuhan koloni baru bisa terlihat namun masih dalam ukuran yang sangat kecil. Seluruh isolat Streptomyces sp. menghasilkan bau khas seperti tanah. Goodfellow (1983) menyatakan bahwa koloni Streptomyces yang berhasil diisolasi memiliki bau yang khas seperti tanah, hal ini dapat disebabkan oleh dihasilkannya asam asetat, acetildehida, etanol, isobutanol dan isobutil asetat yang mengakibat Streptomyces mampu menghasilkan bau yang khas seperti tanah. Koloni Streptomyces merupakan bentuk massa filamen bercabang. Streptomyces memiliki miselium aerial yang merupakan struktur dari miselium vegetatif. Miselium udara dapat dibedakan berdasarkan panjang hifa, apabila hifa pendek maka koloni seperti tepung dan apabila hifa medium atau panjang maka koloni mirip kapas (Locci et al.,1983). Ensign dan Barnard (2002) menyatakan bahwa struktur bertepung pada permukaan koloni Streptomyces merupakan spora aerial yang dihasilkan oleh miselium aerial pada saat koloni sudah dewasa. Identifikasi terhadap Streptomyces dilakukan dengan menggunakan pewarnaan Gram dan tahan asam. Pada pewarnaan Gram, seluruh isolat berwarna ungu yang menandakan bahwa Streptomyces merupakan bakteri Gram positif. Pada pewarnaan tahan asam didapatkan hasil bahwa Streptomyces yang berhasil diisolasi tidak tahan asam, karena terwarnai oleh pewarna dasar methylene blue. Bakteri Gram positif berwarna ungu pada perwarnaan Gram disebabkan karena zat pewarna Kristal violet tetap dipertahankan sehingga bakteri terlihat berwarna ungu. Sedangkan pada pewarnaan tahan asam, bakteri yang tidak tahan asam akan memudarkan warna karbol fuhsin dan terwarnai oleh pewarna methylene blue (Pelczar dan Chan, 2010). Holt et al. (1994) menyatakan bahwa Streptomyces yang termasuk ke dalam kelompok Actinomycetes memiliki dinding sel yang tersusun atas L-DAP dan glisin. Sedangkan Rao 135 (2001) menyatakan bahwa Streptomyces merupakan bakteri Gram positif, bersifat aerob, dan tidak tahan asam. Uji antagonis isolat Streptomyces terhadap K. pneumoniae menunjukkan hasil bahwa dari sebelas isolat Streptomyces yang diisolasi empat di antaranya memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan K. pneumoniae yang resisten terhadap ampisilin. Isolat yang mampu menghambat pertumbuhan K. pneumoniae yang resisten terhadap ampisilin ialah Streptomyces sp.(isolate 1), Streptomyces sp. (isolate 4), Streptomyces sp. (isolate 5) dan Streptomyces sp. (isola 8). Di antara keempat isolat Streptomyces yang mampu menghambat, isolat Streptomyces sp. (isola 8) memiliki daya hambat yang paling besar terlihat dari diameter zona bening yang dihasilkan paling besar yaitu 12,75 mm, sedangkan diameter zona bening yang paling kecil dihasilkan oleh Streptomyces sp. (isola 5) yaitu 9,56 mm. Daya hambat yang dihasilkan oleh Streptomyces sp. (isolate 8) dikategorikan kuat sedangkan daya hambat yang dihasilkan oleh Streptomyces sp. (isolate 5) dikategorikan sedang. El-Tarabily et al. (2009) menyatakan bahwa jika diameter zona hambat ≥ 0 daya ha bat sangat kuat 10-20 mm (daya hambat kuat), 5 – 10 mm (daya hambat sedang) serta < 5 mm (daya hambat lemah). Adanya variasi besarnya zona hambat yang diperoleh disebabkan oleh perbedaan karakteristik Streptomyces yang diisolasi, dan kemungkinan berbeda senyawa metabolit sekunder dan konsentrasinya. Selain itu, perbedaan jenis antibiotik yang dihasilkan juga mempengaruhi besarnya zona hambat yang dihasilkan (Glazer and Nikaido, 1998 ). Tidak adanya zona hambat yang dihasilkan oleh tujuh dari sebelas genus Streptomyces yang diisolasi dapat disebabkan oleh setiap Streptomyces memerlukan kondisi nutrisi dan kondisi fermentasi yang berbeda untuk menghasilkan metabolit sekunder (Yu et al., 2008). Faktor lain kemungkinan Streptomyces sp. menghasilkan antibiotik golongan beta laktam. Hal ini disebabkan oleh K. pneumoniae yang diuji telah mengalami resistensi terhadap antibiotik ampisilin yang merupakan kelompok antibiotik beta laktam. Joung et al. (2000) menyatakan bahwa resistensi bakteri terhadap antibiotik kelompok beta laktam disebabkan oleh munculnya strain bakteri yang menghasilkan enzim antibetalaktamase sehingga bakteri memiliki menjadi resisten terhadap antibiotik beta laktam yang dihasilkan oleh Streptomyces yang diisolasi. SIMPULAN Didapatkan 11 isolat Streptomyces sp. di kawasan kampus FMIPA, Universitas Udayana, BukitJimbaran, yaitu Streptomyces sp. isolate 1 sampai Streptomyces sp. 11. Uji daya hambat secara in vitro menggunakan 11 isolat Streptomyces sp., 4 isolat mampu menghambat K. pneumoniae yang resisten terhadap ampisilin, daya hambat tertinggi dihasilkan oleh Streptomyces sp. isolate 8 dengan diameter zona hambat yaitu 12,75 mm, yang dikategorikan berdaya hambat yang kuat. KEPUSTAKAAN Agrios, G. N. 2005. Plant Pathology. 5th ed. Elsevier Academic Press, New York. El-Tarabily, K. A., M. H. Soliman, A. H. Nassar, H. A. Al-Hassani, K. Sivasithhamparan, F. McKenna and G. E. Hardy. 2009. Biological control of Sceretonia minor using a chitinologytic bacterium and actinomycetes. Plant Pathology 49: 573 – 583 Ensign J. C. and B. Barnard. 2002. Isolation of Antibiotic-Producing Microbes from Soil. Available at : Http://www.Acces.excelllence.org/AE/AEC/AEF /1995/ goudie_isolation.html. Glazer, A. N. and H. Nikaido. 1994. Microbial Biotechnology, Freeman Publishers. 136 Goodfellow, M., S. T. William and M. Mordarski. 1988. Actinomycetes in Biotechnology, Academic Press, New York. Holt, J. G., N. R. Krig, P. H. A. Sneath, J. T. Staley and S. T. Williams. 1994. Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology. 9th ed. Baltimore: Williams and Wilkins. Locci, R. and G. P. Sharples. 1983. Morphology of Actinomycetes in Goodfellow M., S.T. William and M. Mordarski (Eds.) The Biology of the Actinomycetes, Academic Press, London. Neneng L. 00 . Isolasi dan Karakterisasi Bakteri Penghasil Antibiotik Inhibitor β –Laktamase Tipe TEM-1 dari Ekosistem Air HitamI MIPA 37 (1); 86-90. Nugroho, F., P. I. Utami dan I. Yuniastuti. 2011. Evaluasi Penggunaan Antibiotik pada Penyakit Pneumonia di Rumah Sakit Umum Daerah Purbalingga. J. Pharmacy 8 (1); 141-154. Rahayu, T. 2006. Potensi Antibiotik Isolat Bakteri Rizosfer Terhadap Bakteri Escherichia coli Multiresisten. J. Penelitian Sains dan Teknologi 7 (2); 81-91. Rao, S. N. S. 2001. Mikroorganisme Tanah dan Pertumbuhan Tanaman. UI Press, Jakarta. Tabarez, M. R., 2005, Discovery of the new Antimicrobial compound 7-O-malonyl macrolactin, Disertasi, Universitas Carolo-Wilhelmia, Jerman Sigalingging, G. 2011. Karakteristik Penderita Penyakit Pneumonia Pada Anak Di Ruang Merpati II Rumah Sakit Umum Herna Medan. J. Darma Agung; 69-78. Yu, J., Q. Liu, X. Liu, Q. Sun, J. Yan, X. Qi and S. Fan. 2008. Effect of liquid culture requirements on antifungal antibiotic production by Streptomyces rimous MY02. Bioresour. Technol, 99:2087 – 2091. 137 BIOREMEDIASI PERAIRAN TERCEMAR LIMBAH INDUSTRI PENCELUPAN DENGAN PEMANFAATAN TUMBUHAN AIR SECARA OPTIMAL BIOREMEDIATION CONTAMINATED WATER INDUSTRIAL WASTE WATER PLANTS DYEING WITH AN OPTIMUM UTILIZATION Ni Made Susun Parwanayoni dan Ni Luh Suryani Jurusan Biologi, FMIPA Universitas Udayana Email : [email protected] INTISARI Tujuan penelitian secara umum adalah memanfaatkan keanekaragaman tumbuhan air secara optimal, dengan pembiayaan yang murah dan ramah lingkungan, untuk mengatasi masalah pencemaran logam berat Pb, Cd dan warna dari air limbah industri pencelupan serta menunjang program pemerintah menuju produksi bersih.Sampel air limbah pencelupan diambil dari Desa Pedungan Kecamatan Denpasar Selatan Bali. Dilanjutkan dengan percobaan bioremediasi yang meliputi 2 tahap percobaan. Kombinasi 3 jenis tumbuhan air (Salvinia sp, Nymphaea stellata dan Hidrilla verticillata) yang memiliki efektifitas paling tinggi pada percobaan tahap I dilanjutkan ke tahap II. Percobaan Tahap II diberi perlakuan dengan penambahan nutrisi yang berbeda yaitu : 0 (N0) (kontrol), 4 (N1), 8 (N2), 12 gr (N3). Pada hari ke 0, 10 dan 20 dilakukan analisis kandungan logam berat Pb dan Cd dengan Spektrofotometer Absorpsi Atom (AAS), dalam air limbah pencelupan maupun akumulasi logam berat pada organ tanaman. Pada penambahan konsentrasi nutrisi 12 gr menghasilkan efektifitas kombinasi 3 jenis tumbuhan air yang paling tinggi yaitu masing-masing 44,026% dan 38,071%. Paku air memiliki kemampuan paling tinggi dalam mengakumulasi logam berat Pb maupun Cd yaitu masingmasing 15,80 mg/kg dan 5,53 mg/kg. Katakunci : Bioremediasi, tumbuhan air, logam berat dan limbah ABSTRACT General research objective is to utilize optimally the diversity of aquatic plants, with cheap financing and environmentally friendly, to tackle the problem of pollution of heavy metals Pb, Cd and color of industrial waste water immersion and to support government programs towards cleaner production.Dyeing waste water samples taken from the village of South Denpasar District Pedungan Bali. Followed by bioremediation experiments covering 2 experimental stage. The combination of three kinds of aquatic plants (Salvinia sp, Nymphaea stellata and Hidrilla verticillata) which has the highest effectiveness in phase I trials proceed to Phase II. Phase II trial were treated with the addition of different nutrients namely: 0 (N0) (control), 4 (N1), 8 (N2), 12 g (N3). On days 0, 10 and 20 carried out the analysis of heavy metals Pb and Cd by Atomic Absorption Spectrophotometer (AAS), the dyeing waste water and heavy metal accumulation in plant organs.In addition nutrient concentrations of 12 g produces the effectiveness of the combination of three types of aquatic plants, the highest of each 44.026% and 38.071%. Salvinia sp has the highest ability to accumulate heavy metals Pb and Cd are respectively 15.80 mg / kg and 5.53 mg / kg. Keywords: Bioremediation, water plants, heavy metals and waste 138 PENDAHULUAN Perkembangan industri pencelupan selain memberi sumbangan besar terhadap perekonomian masyarakat bali, disisi lain membawa dampak timbulnya pencemaran lingkungan, akibat belum adanya pengolahan limbah secara integratif. Limbah pencelupan terutama mengandung logam berat (Pb maupun Cd) dan sisa zat warna yang dapat mencemari badan air. Hasil penelitian (Qismawati, 2008) menunjukkan tanaman kangkung air (Ipomoea aquatica) yang ditanam pada daerah tercemar limbah industri pencelupan, di Suwung Denpasar Selatan mampu mengakumulasi ti bal Pb 4 7 μg/g dan chad iu d 7 7μg/g. Hal ini enandakan erairan terce ar li bah encelu an e iliki kandungan pb dan Cd yang cukup tinggi dan telah melewati ambang batas baku mutu lingkungan. Oleh sebab itu diperlukan upaya-upaya untuk mengatasi masalah tersebut, salah satunya dengan bioremediasi. Bioremediasi dengan tumbuhan air, merupakan metode yang mudah diterapkan, pembiayaannya murah dan tidak menimbulkan dampak lain pada lingkungan. Kombinasi beberapa jenis tumbuhan air yang memiliki cara hidup berbeda dalam perairan yaitu mengapung (floating), pertenggahan (emerged) dan tengelam (submerged plants) merupakan potensi yang belum dimanfaatkan secara optimal. Dengan memanfaatan 3 kelompok tumbuhan air ini bioremediasi dapat berlangsung secara menyeluruh mulai dari permukaan sampai dasar perairan (Priyanto dan Joko, 2010). Paku air (Salvinia sp) merupakan tumbuhan air mengapung (floating plants), lebih banyak membersihkan polutan atau logam berat di bagian permukaan perairan. Teratai (Nymphaea sp) merupakan tumbuhan emerged plants, dengan sistem perakaran melayang di bagian tengah dan beberapa ada yang dapat mencapai dasar tergantung dari kedalaman perairan dan panjang pendeknya akar, lebih banyak membersihkan polutan atau logam berat di bagian tengah, serta daunnya yang mengapung di permukaan sebagian dapat membersihkan logam berat di bagian permukaan. Hidrilla verticillata merupakan tumbuhan tenggelam (submerged plants), dapat membersihkan polutan atau logam berat yang terdapat di bagian dasar perairan. Kombinasi beberapa jenis tumbuhan air floating, emerged dan submerged plants bioremediasi Pb dan Cd pada air tercemar limbah pencelupan berlangsung secara maksimal dan menyeluruh mulai dari permukaan sampai ke bagian dasar perairan (Aiyen, 2009 dan Amri, 2011). MATERI DAN METODE Sampel air limbah tercemar industri pencelupan diambil dari Pusat Pembuangan Limbah Industri Pencelupan Desa Pedungan Kecamatan Denpasar Selatan Bali. Sedangkan sampel tumbuhan air diambil dari daerah rawa-rawa Mengwi Badung. Sampel yang telah diambil sebagian dianalisis di Laboratorium untuk menentukan kandungan logam berat Pb dan Cd awal pada air limbah pencelupan dan tumbuhan air, sebelum digunakan untuk percobaan bioremediasi. Air limbah pencelupan yang akan di proses dalam percobaan bioremediasi, di masukkan ke dalam ember-ember percobaan, kemudian diberi perlakuan sesuai dengan rancangan percobaan. Percobaan bioremediasi dilakukan dengan dalam 2 tahap yaitu : tahap I merupakan pengujian efektifitas jenis dan kombinasi jenis tumbuhan air yang memiliki cara hidup berbeda dalam perairan, yaitu paku air (Salvinia sp), teratai (Nymphaea stellata) dan Hidrilla verticillata terutama untuk meremediasi logam berat Pb dan Cd dalam air tercemar limbah industri pencelupan. Pengujian ini bertujuan untuk mendapatkan efektifitas jenis dan kombinasi jenis yang paling tinggi kemampuannya dalam meremediasi logam berat Pb dan Cd. Untuk lebih memaksimalkan efektifitas kombinasi jenis tumbuhan air yang telah didapat dari pengujian tahap I, proses bioremediasi dilanjutkan ke tahap II. Percobaan bioremediasi Tahap II yaitu pengujian pengaruh nutrisi terhadap efektifitas kombinasi jenis tumbuhan air (yang didapat dari hasil percobaan tahap I) dalam meremediasi logam berat 139 Pb dan Cd. Pengujian tahap II untuk mendapatkan konsentrasi nutrisi yang paling tepat dengan efektifitas kombinasi jenis tumbuhan air yang paling tinggi kemampuannya dalam meremediasi (menurunkan dan mengakumulasi) logam berat Pb dan Cd. Percobaan bioremediasi tahap II ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan perlakuan konsentrasi nutrisi (pupuk NPK), yang meliputi : 0 (N0) (kontrol), 4 (N1), 8 (N2), 12 (N3) gr. Masing-masing perlakuan diulang 4 kali, sehingga terdapat 16 unit percobaan. Masing-masing perlakuan diperlakukan pada air limbah industri pencelupan selama 20 hari. Pada hari ke 0, 10 dan 20 dilakukan analisis kandungan logam berat Pb dan Cd dengan menggunakan Spektrofotometer Absorpsi Atom (AAS). Dari hasil analisis kandungan logam berat Pb dan Cd pada masing-masing perlakuan selanjutnya dihitung efektifitasnya (persamaan 1) (King and Sheldon,1992). Sedangkan pengukuran akumulasi Pb dan Cd dalam organ tumbuhan air dilakukan pada perlakuan yang efektifitasnya paling tinggi dalam menurunkan kadar Pb dan Cd, di awal dan akhir percobaan. Efektifitas (%) = (A-B) X 100% .................... persamaan 1) A A = Nilai (kandungan Pb dan Cd) sebelum diberi perlakuan B = Nilai (kandungan Pb dan Cd) sesudah diberi perlakuan HASIL Bioremediasi Tahap I Kandungan awal logam berat Pb dan Cd pada air limbah pencelupan sebelum proses bioremediasi masing-masing 5,178mg/l dan 1,400mg/l (Tabel 1). Kombinasi 3 jenis tumbuhan air ((Salvinia sp, Nymphaea stellata, Hidrilla verticillata) (P7) pada percobaan bioremediasi tahap I menghasilkan efektifitas yang paling tinggi dalam menurunkan kandungan logam berat Pb dan Cd yaitu masing-masing 30,47% dan 37,85%, dari kandungan awal Pb (5,17mg/l), Cd (1,40mg/l) dan akhir setelah diberi perlakuan dengan kombinasi 3 jenis tumbuhan air yaitu Pb (3,60mg/l), Cd (0,90mg/l) (Tabel 2). Kombinasi 3 jenis tumbuhan air yang efektifitasnya paling tinggi pada percobaan tahap I ini, setelah dilanjutkan ke percobaan bioremediasi tahap II menunjukkan hasil seperti pada Gambar 1 dan 2. Tabel 1. Kandungan logam berat Pb dan Cd dalam air limbah pencelupan sebelum proses bioremediasi No. Logam berat Kandungan logam berat (mg/l) 1 Pb 5,178 2 Cd 1,400 140 Tabel 2. Efektifitas tumbuhan air menurunkan kandungan logam berat Pb dan Cd dalam air limbah pencelupan selama 20 hari proses bioremediasi No. Tumbuhan air Efektifitas (%) Pb Cd 1 P0 0,019 0,142 2 P1 12,282 14,285 3 P2 19,853 15,000 4 P3 7,686 10,714 5 P4 23,715 35,714 6 P5 21,170 24,000 7 P6 28,427 30,000 8 P7 30,475 37,857 P0 = Kontrol P4 = Teratai & paku air P1 = Teratai P5 = Teratai & hidrilla P2 = Paku air P6 = Paku air & hidrilla P3 = Hidrilla P7 = Teratai, paku air & hidrilla Bioremediasi Tahap II Pada percobaan bioremediasi tahap II selama 20 hari, penambahan nutrisi memberikan pengaruh yang signifikan terhadap kemampuan (efektifitas) kombinasi 3 jenis tumbuhan air dalam menurunkan kandungan logam berat Pb maupun Cd pada air tercemar limbah pencelupan. Gambar 1. Pengaruh nutrisi terhadap efektifitas kombinasi 3 jenis tumbuhan air dalam menurunkan kandungan logam berat Pb pada air tercemar limbah pencelupan 141 Gambar 2. Pengaruh nutrisi terhadap efektifitas kombinasi jenis tumbuhan air dalam menurunkan kandungan logam berat Cd pada air tercemar limbah pencelupan Keterangan : N0 = Kontrol N2 = 8gr N1 = 4gr N3 = 12gr Penambahan nutrisi selain dapat meningkatkan penyerapan logam berat, juga dapat meningkatkan kemampuan tumbuhan air dalam mengakumulasi logam berat Pb maupun Cd (Tabel 3). Tabel 3. Kemampuan tumbuhan air dalam mengakumulasi logam berat Pb dan Cd Tumbuhan Air Akumulasi logam berat (mg/kg) Pb Cd Paku air 15,80 5,53 Teratai 14,76 4,12 Hidrilla 13,05 4,71 Kadar PEMBAHASAN Dari Gambar 1 dan 2 dapat dilihat semakin tinggi penambahan nutrisi, efektifitas kombinasi 3 jenis tumbuhan air dalam menurunkan logam berat Pb maupun Cd juga semakin tinggi. Dari 4 konsentrasi nutrisi yang diuji coba selama 20 hari, perlakuan N3 (12gr) memberikan pengaruh yang paling tinggi yaitu 41,594% dan 19,857% pada hari ke 10 dan meningkat menjadi 44,026% dan 38,071% pada hari ke 20. Bila dibandingkan dengan hasil penelitian Idiyanti dkk (2010) penambahan nutrisi ke dalam sistem perakaran dapat menurunkan nilai COD rata-rata 73 % dalam retensi waktu 10 hari. Hasil penelitian Heriyanti (2009) dalam Hari Kurniawan 2010 diperoleh bahwa tumbuhan eceng gondok mampu menyerap klorofenol hingga 46,67% dengan adanya penambahan nutrisi. 142 Peningkatan efektifitas ini disebabkan oleh beberapa hal antara lain adalah nutrisi. Menurut Kurniawan (2010) Banyak faktor yang mempengaruhi bioremediasi (penyerapan, akumulasi atau pembersihan) polutan atau logam berat dari lingkungan perairan salah satunya nutrisi. Nutrisi berperan/diperlukan oleh tumbuhan salah satunya untuk pertumbuhan. Bila kekurangan nutrisi pertumbuhan akan terhambat, apabila tumbuhan tersebut digunakan sebagai tumbuhan bioremediasi maka bioremediasi juga akan terhambat. Tumbuhan yang pertumbuhannya terhambat dapat menyebabkan antara lain: mudah terserang penyakit, mekanisme pembentukan zat/senyawa tertentu yang berperan dalam menghadapi unsur toksik atau bahan pencemar menjadi terhambat pula, sehingga penyerapan atau akumulasi zat pencemar menjadi rendah. Kandungan logam berat Pb dan Cd pada air limbah pencelupan setelah mengalami proses bioremediasi, bila dibandingkan dengan baku mutu limbah cair yaitu untuk Pb 0,010 ppm dan Cd 0,15 ppm, masih diatas baku mutu. Dari Tabel 3 menunjukkan paku air memiliki kemampuan paling tinggi dalam mengakumulasi Pb maupun Cd, yaitu masing-masing 15,8mg/kg dan Cd 5,53mg/kg. Tingginya kemampuan paku air dalam mengakumulasi logam berat Pb maupun Cd sangat berkaitan dengan tingginya kemampuan Paku air dalam menyerap logam berat Pb dan Cd pada air limbah pencelupan, logam berat yang diserap oleh tumbuhan akan terakumulasi dalam organ tumbuhan, akar batang dan daun. Menurut Darmiyati dan Kusmana (2011) tumbuhan menarik zat kontaminan dari media sehingga terakumulasi disekitar akar tumbuhan. Akar tumbuhan kemudian menyerap polutan dan selanjutnya ditranslokasi ke dalam jaringan atau organ tumbuhan. Logam-logam berat akan terakumulasi dalam jaringan tumbuhan dengan tidak mengganggu proses metabolismenya. Tumbuhan dapat melakukan mekanisme tertentu untuk menghadapi konsentrasi toksik antara lain : tumbuhan dapat meminimumkan pengaruh unsur toksik, dengan mengembangkan sistem metabolik yang dapat berfungsi pada konsentrasi toksik. SIMPULAN Semakin tinggi konsentrasi nutrisi yang ditambahkan semakin tinggi juga efektifitas kombinasi 3 jenis tumbuhan air menurunkan kandungan logam berat Pb dan Cd dalam air tercemar limbah pencelupan. Pada penambahan konsentrasi nutrisi 12 gr efektifitas kombinasi 3 jenis tumbuhan air paling tinggi yaitu masing-masing 44,026% dan 38,071%. Paku air memiliki kemampuan paling tinggi dalam mengakumulasi logam berat Pb maupun Cd yaitu masing-masing 15,80 mg/kg dan 5,53 mg/kg. UCAPAN TERIMAKASIH Penulis menyampaikan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi (DP2M DIKTI) dan Lembaga Penelitian dan Pengabdian (LPPM) Universitas Udayana yang telah mendanai keseluruhan penelitian ini, kepada Staf di Laboratorium Analitik dan Laboratorium Bersama FMIPA Universitas Udayana serta kepada berbagai pihak, teman dan mahasiswa yang telah banyak terlibat membantu dan memberi petunjuk dalam penelitian maupun penyusunan artikel ini. KEPUSTAKAAN Aiye. 2009. Ilmu Remediasi untuk Atasi Pencemaran Tanah di Aceh dan Sumatra Utara, Fakultas Pertanian universitas Tadulako, Palu. Publikasi di Web Site. Amri. 2011. Emas Tak Mabuk Pertanda Aman BPPT Jakarta. Atvailable at : http//www.bplhd jabar.go id/artikel.cfm?doc.id = 222. 143 Darmiyati, M, dan C. Kusmana. 2011. Akumulasi Logam Berat (Mn, Zn, Cu) pada Rhizophora Mucronata di Hutan Tanaman Mangrove Cilacap, Majalah Duta Rimba Edisi Maret–April 2011. Idiyanti ,T., S. Aiman, R. Trisnamurti dan S. Inijah, 2010, Pengolahan Sistem Kontinyu Air Limbah Industri Herbisida dengan Lumpur Aktif, Prosiding Lokakarya Nasional Mikrobiologi Lingkungan:104 -113. King, R. B., G. M. Long and J. K. Sheldon, 1992, Practical Enviromental Bioremediation. Lewis Publisher. London. Kurniawan H. 2010. Fitoremidiasi Air Tercemar Triclorophenol dengan Menggunakan Eceng Gondok. Publikasi di Web Site . Priyanto B. dan Joko P. 2010. Fitoremediasi sebagai sebuah Teknologi Pemulihan Pencemaran, Khususnya Logam Berat. Publikasi di Web Site. Qismawati N. 2008. Perbandingan Akumulasi Logam Berat Timbal (Pb) dan Chadmium (Cd) pada Organ Tanaman Kangkung Air (Ipomoea aquatica Forsk). Skripsi Jurusan Biologi FMIPA Universitas Udayana. 144 DESKRIPSI PERBEDAAN JUMLAH INDIVIDU KEPITING MANGROVE, SPESIES Scylla serrata DAN Uca sp SERTA HUBUNGANNYA DENGAN FAKTOR LINGKUNGAN PADA EKOSISTEM MANGROVE DI DESA BULALO KECAMATAN KWANDANG KABUPATEN GORONTALO UTARA DESCRIPTION OF DIFFERENCES MANGROVE CRAB INDIVIDUAL NUMBER, SPESIES Scylla serrata & Uca sp AND RELATIONSHIP WITH ENVIRONMENTAL FACTORS IN MANGROVE ECOSYSTEM IN VILLAGE bulalo Kwandang DISTRICT NORTH GORONTALO Abubakar Sidik Katili 1,2), Ramli Utina 2,2), Chairunnisah J.Lamangantjo3,2) 21) Jurusan Biologi FMIPA Universitas Negeri Gorontalo Jl. Jenderal Sudirman No. 06 Kota Gorontalo, Kode Pos 96128 1) email: [email protected] 2) email: [email protected] INTISARI Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan jumlah individu kepiting mangrove spesies Scylla serrata dan spesies Uca sp yang hidup di bawah tegakan vegetasi mangrove serta mendeskripsikan hubungan kedua spesies kepiting tersebut dengan faktor lingkungan yakni; salinitas, kekeruhan air, kandungan N,P,K serasah, biomassa serasah dan kadar C-organik serasah pada kawasan mangrove. Penelitian ini dilakukan pada bulan November sampai dengan bulan Desember 2013 di kawasan mangrove desa Bulalo Kecamatan Kwandang Kabupaten Gorontalo Utara. Metode yang digunakan ini adalah survey deskriptif. Lokasi pengambilan data dibagi menjadi 4 titik berdasarkan pada kenampakan vegetasi mangrove, karakteristik setiap wilayah pengamatan, serta kemudahan dalam peletakan titik sampling yang representatif. Dilakukan pula wawancara dengan petugas Dinas Kehutanan Kabupaten Gorontalo Utara. Data yang diperoleh dianalisis kuantitatif deskriptif. Analisis kuantitatif menggunakan korelasi sederhana, analisis varians dan uji DMRT. Hasil penelitian menunjukkan, perbandingan kepiting untuk spesies Scylla serrata.Forssk pada tiap titik pengamatan terdapat perbedaan antara titik pengamatan 1, 2, 3 dan 4. Berdasarkan uji DMRT untuk titik pengamatan 2, 3 dan 4 tidak berbeda nyata satu sama lain, sedangkan untuk titik pengamatan 1 tidak berbeda nyata dengan titik 2 dan 4, tetapi berbeda nyata dengan titik pengamatan 3. Untuk spesies Uca sp berdasarkan analisis varians menunjukkan adanya perbedaan nyata antara titik pengamatan 1, 2, 3 dan 4. Berdasarkan uji DMRT bahwa jumlah individu pada titik pengamatan 1 berbeda nyata dengan titik pengamatan 3 dan 2, sedangkan yang tidak berbeda nyata adalah titik pengamatan 4 dan titik pengamatan 1. Analisis korelasi menunjukkan bahwa terdapat dua faktor lingkungan berkorelasi secara signifikan dengan jumlah kepiting yakni kadar C-organik serasah dan biomassa serasah. Hal ini berarti bahwa kadar C-organik serasah dan biomassa serasah secara tidak langsung dapat memberikan peran dalam kehadiran dan aktivitas kepiting. Disimpulkan bahwa tumbuhan mangrove memberikan kontribusi terhadap aktivitas kepiting yang hidup di bawah tegakannya, yakni pemanfaatan serasah mangrove oleh kepiting sebagai bahan makanannya. Karena itu pengelolaan mangrove perlu mempertimbangkan aspek ekologis diantaranya adalah peran kepiting sebagai bagian dari komponen dalam rantai makanan di ekosistem mangrove. Kata kunci : Mangrove, Scylla serrata, Uca sp, faktor lingkungan 145 ABTRACT The objective of this study was to determine differences number of individuals mangrove crab Scylla serrata and Uca sp which living under the stands of mangrove vegetation and to describe the relationship between the two species of crabs with environmental factors namely; salinity, turbidity, N, P, K of litter, litter biomass and organic C of litter in the mangrove areas. This study was conducted in November until December 2013 in mangrove areas at Bulalo, Kwandang district north Gorontalo. The method was use descriptive survey. The location of data collection was divided into 4 points based on the appearance of mangrove vegetation, the characteristics of each observation regio, based of ease laying representative sampling point. Also conducted interviews with officials of Forestry Office in north Gorontalo district. The data analyzed by quantitative descriptive. Quantitative analysis using a simple correlation, analysis of variance and DMRT. The results show that comparison Scylla serrata, Forssk at each observation point have the difference between observation points 1, 2, 3 and 4. Based DMRT, for observation points 2, 3 and 4 were not significantly different from each another, while for the observation point 1 is not significantly different from point 2 and 4, but significantly different from the observation point 3. For Uca sp based show significant differences between observation points 1, 2, 3 and 4. Based DMRT alaysis, the number of it individuals at the point of observation 1 was significantly different from the observation point 3 and 2, while no significant difference in observation point 4 and 1. The correlation analysis show that are two environmental factors correlated significantly with the number of crabs, they are levels of C-organic litter and litter biomass. This means that the levels of C-organic litter and litter biomass can indirectly provide a role in the presence and activity of crabs. The Conclusion of this study; mangroves can give contribution to the activity of crab which lives under the stand of mangrove, that is the utilization of mangrove litter by the crab as a food ingredient. Therefore mangrove management needs to consider the ecological aspects including the role of the crab as part of the food chain in the mangrove ecosystem. Keywords: Mangrove, Scylla serrata, Uca sp, Enviromental factor PENDAHULUAN Suatu komunitas terdiri atas banyak jenis dengan berbagai macam fluktuasi populasi dan interaksi antara satu dengan lainnya. Komunitas juga terdiri atas berbagai organisme dan saling berhubungan pada suatu lingkungan tertentu. Secara ringkas komunitas adalah seluruh populasi yang hidup bersama di suatu daerah tertentu dan sering disebut sebagai komunitas biotik (Irwan, 1992). Hutan mangrove merupakan satu bentuk komunitas yang terdiri atas vegetasi pantai yang memiliki karakteristik, tumbuh di daerah intertidal, jenis tanahnya berlumpur, berlempung atau berpasir, daerahnya tergenang air laut secara berkala, baik setiap hari maupun hanya tergenang pada saat pasang purnama, menerima pasokan air tawar yang cukup dari darat, terlindung dari gelombang arus besar dan arus pasang surut. Hutan mangrove dapat dibedakan ke dalam beberapa zonasi berdasarkan atas jenis pohon penyusun yang dominan (Begen, 2002). Lebih lajut Fachrul (2007) mengungkapkan bahwa hutan mangrove adalah tipe hutan yang khas terdapat di sepanjang pantai landai atau muara sungai. Hutan mangrove telah menyesuaikan diri dengan terpaan ombak, dengan salinitas tinggi serta tanahnya senantiasa digenangi air. Hutan pantai tersebut tumbuh baik di daerah tropis maupun sub tropis. Istilah mangrove digunakan untuk tumbuhan yang hidup di pantai (hidrosere communities). Hutan itu disebut hutan pantai (coastal woodland) atau hutan pasang surut (tidal forest). Sebagai salah satu sumber daya alam di kawasan pesisir, komunitas hutan mangrove memiliki manfaat yang sangat luas ditinjau dari aspek ekologi, fisik, ekonomi dan sosial. Secara ekologis, hutan mangrove berfungsi menangkap dan mengumpulkan sedimen yang terbawa arus pasang surut dari daratan lewat aliran sungai. Hutan mangrove selain melindungi pantai dari gelombang dan angin, juga sebagai 146 tempat yang dipenuhi pula oleh kehidupan lain seperti mamalia, amfibi, reptil, burung, kepiting, ikan, primata, serangga dan sebagainya. Selain menyediakan keanekaragaman hayati (biodiversity), ekosistem mangrove juga sebagai plasma nutfah (genetic pool) dan menunjang keseluruhan sistem kehidupan di sekitarnya. Habitat mangrove berfungsi sebagai tempat mencari makan (feeding ground) bagi hewanhewan tersebut, sebagai tempat mengasuh dan membesarkan (nursery ground), tempat bertelur dan memijah (spawning ground) serta tempat berlindung yang aman bagi berbagai juvenil dan larva ikan serta kerang dari predator (Irwanto, 2006). Salah satu Kawasan hutan mangrove yang ada di Indonesia terdapat di wilayah pesisir Kwandang, Kabupaten Gorontalo Utara, Provinsi Gorontalo, pulau Sulawesi. Berdasarkan data dari Dinas Kehutanan Kabupaten Gorontalo Utara, luas kawasan hutan mangrove di wilayah ini telah mengalami penyusutan. Pada sebelum tahun 1995 luasnya mencapai 3000 ha, kemudian pada tahun 1998 menjadi 2300 ha dan pada tahun 2005 luasnya menjadi 1800 ha (Dokumen SLHD Gorut 2010). Adanya penyusutan luasan kawasan mangrove tersebut, menyebabkan densitas tumbuhan mangrove menurun. Akibatnya penutupan lahan menjadi berkurang, keadaan ini bersama-sama dengan faktor lingkungan yang ada dapat mengubah komunitas ke arah yang berbeda dari kondisi sebelumnya. Hal tersebut akan berdampak langsung tehadap keanekaragaman hayati dalam komunitas mangrove, termasuk di dalamnya penurunan jumlah berbagai spesies kepiting mangrove yang merupakan salah satu sumber hayati pesisir di wilayah tersebut. Terkait dengan hal di atas, pengelolaan hutan mangrove haruslah didukung oleh data-data ekologis salah satu diantaranya kondisi sumber daya hayati dalam hal ini biota pada ekosistem mangrove tersebut yakni kepiting serta faktor lingkungan pendukung kehidupannya. Kurangnya data-data tersebut mengakibatkan kegiatan pengelolaan dan konservasi hutan mangrove di wilayah ini tidak akan dapat mencapai hasil yang diharapkan serta tidak dapat memenuhi prinsip pengelolaan yang berkelanjutan (sustainable). Di sisi lain, kegiatan penelitian yang mengkaji tentang tersebut di kawasan ini masih sangat kurang. Hasil penelitian ini diharapkan menjadi data dasar (data base) untuk penelitian lanjut guna perlindungan satwa dan lingkungan, dan menjadi masukan untuk perencanaan wilayah dan pengembangan sumberdaya alam berbasis ekologis.Berdasarkan beberapa uraian di atas dilakukan penelitian tentangdeskripsi perbedaan jumlah individu kepiting bakau spesies Scylla serrata dan spesies Uca sp serta hubungannya dengan faktor lingkungan pada ekosistem mangrove di Desa Bulalo kecamatan Kwandang Kabupaten Gorontalo Utara. MATERI DAN METODE Penelitian ini menggunakan metode survey deskriptif. Lokasi penelitian di kawasan mangrove desa Bulalo Kecamatan Kwandang Kabupaten Gorontalo Utara. Penentuan lokasi ini dilakukan secara purposive sampling dan berdasarkan kenampakan vegetasi mangrove, karakteristik setiap wilayah pengamatan, kemudahan dalam peletakan titik sampling yang representatif. Dilakukan pula wawancara dengan petugas dari dinas kehutanan setempat. Data yang dikumpulkan berupa data primer dan data sekunder. Data primer meliputi 2 spesies kepiting yakni Scylla serrata dan spesies Uca sp. Lokasi pengambilan data di bagi menjadi empat titik pengamatan dan setiap titik pengamatan dibuat 24 plot. Titik koordinat lokasi adalah sebagai berikut; titik pengamatan 1 pada koordinat N: 00 050’ 5 9”E: 1 05 ’41 1” titik enga atan ada koordinat N: 00050’ 7 0” E: 1 0 5’ 5 6” titik enga atan ada koordinat N: 00050’15 ” E: 1 05 ’ 1” dan titk pengamatan 4 pada koordinat N: 00050’0 7” E: 1 05 ’0 ”.Datasekunder data-data yang diperoleh dari hasil penelusuran dokumen dari instansi terkait lingkungan hidup di daerah terutama dokumen status lingkungan hidup daerah (SLHD) dari kawasan yang menjadi lokasi penelitian.Data yang diperoleh dianalisis kuantitatif deskriptif. Analisis kuantitatif dilakukan dengan teknik korelasi sederhana, analisis varians dan uji DMRT dengan menggunakan aplikasi program SPSS. 147 HASIL Tabel 1. Klasifikasi spesies kepiting Scylla serrata.Forssk dan Uca sp. yang terdapat di lokasi pengamatan Kingdom : Animalia Kingdom : Animalia Phylum : Arthropoda Phylum : Arthropoda Subphylum : Crustaceae Subphylum : Crustaceae Kelas : Malacostraca Kelas : Malacostraca Ordo : Decapoda Ordo : Decapoda Infraordo : Brachyura Infraordo : Brachyura Familia : Portunidae Familia : Ocypodidae Genus : Scylla Genus : Uca Spesies : Scylla serrata.Forssk Spesies : Uca sp (Sumber : Romimohtarto, 2007) Berdasarkan hasil penelitian yang ditampilkan pada tabel 1, dua spesies kepiting yang menjadi objek pengamatan pada ke empat titik pengamatan yakni Scylla serrata Forssk dan Uca sp. Kepiting merupakan hewan invertebrata dan termasuk dalam kelompok fauna aquatik serta menempati subtrat yang lunak (lumpur) dalam hutan mangrove. Menurut Supriharyono (2007) hewan yang hidup di perairan hutan mangrove dibedakan atas dua kelompok, yakni: yang hidupnya meliang (burrowing spesies), dan yang tinggal di atas substrat (epifauna). Kepiting dapat digolongkan dalam epifauna terutama dari genus Uca dan kelompok famili Portunidae. Menurut Gunarto (2004), fungsi lubang bagi kepiting yang tinggal di liang atau menggali lubang adalah: sebagai tempat menghindar dari predator, tempat menampung air, sumber bahan pakan organik, sebagai rumah atau daerah teritorial dalam berpasangan dan kawin, tempat pertahanan, dan tempat mengerami telur atau anaknya; seperti Scylla serrata dapat menggali lubang hingga5 m ke luar dari sisi tebing sungai masukke mangrove. Campuran deposit organik dengan flora, bakteria, diatom, dan mikroorganisme lainnya yang terdapat di dasar mangrove merupakan sumber makanan bagi berbagai jenis kepiting. Kepiting Uca sp betina mengambil lumpur dengan kedua kaki capitnya yang kecil sehingga lebih cepat mengambil makanan dibandingkan dengan Uca sp jantan yang hanya mempunyai satu kaki capit yang kecil, sedangkan kaki capit satu lagi ukurannya besar sehingga sulit untuk mengambil makanan. Berdasarkan informasi yang diperoleh penulis dari masyarakat setempat bahwa kepiting jenis Scylla serrata, yang dalam bahasa daerah lokal setempat dikenal dengan kata walimango, merupakan kepiting yang dapat dikonsumsi oleh manusia. Masyarakat setempat sering mengkonsumsi kepiting jenis ini dan cara pengambilannya dengan menggunakan jaring. Pemanfaatan kepiting jenis ini oleh masyarakat masih rendah, karena hanya digunakan sebagai lauk pegganti, disamping ikan sebagai lauk utama. 148 a b Gambar 1. a. Kepiting jenis Scylla serrata. Forssk dan b. Uca sp Kehadiran jumlah kepiting, juga dipengaruhi oleh jumlah bahan organik yang masuk ke dalam ekosistem hutan mangrove. Bahan organik tersebut terkandung dalam jumlah daun, ranting dan bagian lainnya dari tumbuhan mangrove yang jatuh ke lantai hutan.Menurut Robertson dan Vernberg dalam Supriharyono (2007), serasah daun dapat dikonsumsi langsung oleh hewan-hewan makrobenthos seperti kepiting, tanpa melalui proses dekomposisi oleh mikrobia terlebih dahulu. Lebih lanjut diungkapkan bahwa sekitar 30% - 80% daun, ranting dan bagian lainnya dari tumbuhan mangrove yang jatuh ke perairan dikonsumasi langsung oleh kepiting. Hasil penelitian yang manggambarkan perbandingan jumlah kepiting spesies Scylla serrata. Forssk dan Uca sp pada setiap titik pengamatan pengamatan untuk musim hujan, dapat dilihat dalam grafik pada Gambar 9 berikut. 60 Jumlah Kepiting 50 40 30 20 10 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Plot Scylla serrata Uca sp Gambar 2. Grafik Jumlah Kepiting Pada Setiap Plot Pada Empat Titik Lokasi Pengamatan Pada grafik tesebut terlihat bahwa spesies Uca sp memiliki jumlah yang lebih banyak dibandingkan dengan spesies Scylla serrata. Keadaan ini jika dihubungkan dengan struktur vegetasi mangrove pada lokasi penelitian yang penyebarannya didominasi oleh mangrove jenis Rhizophoraceae. Hal ini sejalan dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Katili (2008) yang mengemukakan bahwa bahwa spesies Rhizophora mucronata Lamk dan Rhizophora apiculata Blume merupakan spesies yang 149 mempunyai penyebaran yang luas di kawasan pesisir Kwandang Kabupaten Gorontalo Utara.Keadaan ini dapat disebabkan oleh karena spesies Rhizophora mucronata Lamk dan Rhizophora apiculata Blume cenderung mempunyai kemampuan untuk beradaptasi dengan baik dalam komunitas mangrove di pesisir Kwandang. Fakta tersebut ditunjukkan dengan keberadaan spesies Rhizophora mucronata Lamk dan Rhizophora apiculata Blume yang tersebar merata di kawasan pesisir tersebut, sehingga dapat mengindikasikan bahwa Rhizophora mucronata Lamk dan Rhizophora apiculata Blume memiliki kisaran toleransi yang luas di kawasan hutan mangrove ini. Kondisi ini dipihak lain menunjang kepiting Uca spuntuk dapat hidup dengan baik di bawah tegakan mangrove family Rhizophoraceae. Diketahui bahwa kepiting jenis ini memiliki kesukaan dan kerakusan yang tinggi dalam mengkonsumsi dan memanfaatkan serasah mangrove jenis Rhizophoraceae (Supriharyono, 2007). PEMBAHASAN Berdasarkan hasil analisis varians, perbandingan kepiting untuk spesies Scylla serrata.Forssk, tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan antara titik pengamatan 1, 2, 3 dan 4. Selanjutnya dilakukan uji duncan yang memperlihatkan hasil bahwa titik pengamatan 2, 3 dan 4 tidak berbeda nyata satu sama lain, untuk titik pengamatan 1 tidak berbeda nyata dengan titik pengamatan 2 dan 4, tetapi berbeda nyata dengan titik pengamatan 3. Hasil analisis varians jumlah kepiting spesies Uca sp. menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan antara titik pengamatan 1, 2, 3 dan 4. Karena terdapat perbedaan pada hasil analisis varians maka kegiatan dilanjutkan dengan melakukan uji duncan. Hasil uji duncan menunjukkan bahwa jumlah kepiting speises Uca sppadatitik pengamatan 1, berbeda nyata dengan titik pengamatan 3 dan titik pengamatan 2, sedangkan yang berbeda adalah titik pengamatan 4 dan titik pengamatan 1. Hasil analisis korelasi antara jumlah kepiting dengan faktor lingkungan menunjukkan bahwa terdapat hubungan yang signifikan antara jumlah kepiting dengan kadar C-organik serasah dan biomassa. Dari hasil analisis korelasi yang diuraikan tersebut, terlihat bahwa faktor lingkungan yang sangat berhubungan dengan jumlah kepiting adalah kadar C-organik serasah dan biomassa serasah. Dapat diartikan bahwa kadar C-organik serasah dan biomassa serasah, secara tidak langsung dapat memberikan peran dalam kehadiran dan aktivitas kepiting dalam ekosistem mangrove di lokasi kajian. Menurut Micheli (1993) bahwa sekitar 30% - 80% serasah daun, ranting dan bagian lainnya dari tumbuhan mangrove mangrove yang jatuh ke perairan langsung dikonsumsi atau dikubur terlebih dahulu pada substrat dasar oleh kepiting. Sisa dari serasah termasuk serpihannya yang telah dimanfaatkan oleh kepiting dikonsumsi oleh hewan lainnya, ditransportasikan atau diuraikan oleh bakteri. Pemanfaatan serasah oleh kepiting ini lebih mendominasi dibandingkan dengan hewan benthos lainnya. Selain itu pula diketahui bahwa kesuburan di hutan mangrove sangat dipengaruhi oleh hasil dekomposisi serasah daun mangrove, sedangkan dalam proses dekomposisi, peran kepiting sangat dominan. Menurut Kathiresan dan Bingham (2001) bahwa distribusi dan kehadiran kepiting dalam habitat mangrove memperlihatkan distribusi yang sangat jelas dipengaruhi oleh beberapa faktor lingkungan diantaranya serasah mangrove, karakteristik substrat dan salinitas. Pemanfaatan searasah mangrove langsung oleh kepiting lebih mendominasi dibandingkan dengan cara pemanfaatan atau pendistribusian serasah daun oleh biota selain kepiting, dengan kata lain bahwa kepiting lebih mendominasi pemanfaatan serasah mangrove dibandingkan dengan hewan makrobenthos lainnya. Kepiting memiliki kemampuan untuk memindahkan (memanfaatkan) lebih dari 70% dari total serasah tiap tahunnya. Pada umunya setelah serasah daun mangrove yang jatuh ke permukaan kemudian dikonsumsi oleh hewan benthos terutama kepiting dan ditransportasikan ke luar sistem dan hanya sebagian saja yang didekomposisikan (Micheli, 1993). Perbandingan faktor lingkungan berupa salinitas (air dan tanah), kekeruhan air, biomassa serasah, dan kadar nitrogen secara signifikan tidak berbeda nyata antara titik pengamatan 1, 2, 3, dan 4. Hasil analisis varians mengenai faktor lingkungan berupa salinitas tanah, N, P, K, dan C-organik serasah, 150 menunjukkan bahwa antara titik pengamatan 1, 2, 3, dan 4, terdapat perbedaan yang signifikan. Perbedaan faktor lingkungan pada setiap titik pengamatan seperti yang dijelaskan di atas di uji dengan uji duncan. Adanya perbedaan faktor lingkungan di setiap titik pengamatan pengamatan, dapat disebabkan oleh perbedaan karakteristikdari masing-masing titik pengamatan antara lain perbedaan tutupan kanopi vegetasi mangrove yang memberikan pengaruh secara tidak langsung pada prosuksi serasah, perbedaan substrat dasar, serta perbedaan kondisi fisik lokasi yang menjadi titik pengamatan misalnya ada tidaknya muara sungai yang secara tidak langsung mempengaruhi fluktuasi kadar salinitas. Dari beberapa faktor tersebut, diduga bahwa yang memberikan kontribusi besar dalam meneyababkan perbedaan faktor lingkungan adalah keadaan vegetasi mangrove pada masing-masing titik pengamatan pengamatan. Sebagaimana yang diungkapkan oleh Supriharyono (2007) bahwa tumbuhan mangrove mempunyai toleransi yang berbeda terhadap kondisi faktor lingkungan yang terdapat di habitatnya. SIMPULAN Ditemukan perbedaan jumlah individu kepiting spesies Scylla serrata Forssk dan Uca sp. di empat titik pengamatan. Secara umum jumlah kepiting spesies Uca sp lebih besar dibandingkan dengan kepiting spesies Scylla serrata Forssk. Perbedaan jumlah individu kepiting spesies Scylla serrata Forssk dan Uca sp berhubungan dengan dengan struktur vegetasi mangrove pada lokasi penelitian yang penyebarannya secara umum didominasi oleh mangrove jenis Rhizophoraceae, dimana kepiting Uca sp dapat hidup dengan baik di bawah tegakan mangrove family Rhizophoraceae. Terdapat dua faktor lingkungan yang berhubungan dengan kehadiran kepiting yakni biomassa serasah dan kadar C-organik serasah. Diketahui bahwa kepiting memiliki peranan dalam proses pendistribusian dan dekomposisi serasah. Ditemukan pula adanya hubungan yang signifikan antara jumlah kepiting dengan densitas mangrove pada lokasi penelitian. Tumbuhan mangrove memberikan kontribusi terhadap aktivitas kepiting yang hidup di bawah tegakannya, yakni pemanfaatan serasah mangrove oleh kepiting sebagai bahan makanannya. DAFTAR PUSTAKA Badan Lingkungan Hidup Kabupaten Gorontalo Utara. 2010. Status Lingkungan Hidup Daerah Kabupaten Gorontalo Utara (SLHD) Tahun 2010. Gorontalo Utara Begen, D.G. 2002. Pengenalan dan Pengelolaan Ekosistem Mangrove. Pusat Kajian Sumber Daya Pesisir dan Kelautan IPB. Bogor. Davey, K. 2000. Decapod Crabs Reproduction and Development, (Online), (http://www.mesa.edu.au, diakses 30 November 2013). Fachrul, Melati Ferianita. 2007. Metode Sampling Bioekologi. Bumi Aksara. Jakarta. 155 hal. Gunarto. 2004. Konservasi Mangrove Sebagai Pendukung Sumber Hayati Perikanan Pantai. dalam Jurnal Ilmiah Litbang Pertanian. No. 23(1). Balai Riset Perikanan Budidaya Air Payau. Sulawesi Selatan. Irwan Zoer’aini Dja al. 199 . Ekosistem Komunitas dan Lingkungan. Bumi Aksara. Jakarta. 210 hal. Irwanto, 2006. Keanekaragaman Fauna Pada Habitat Mangrove. www.irwantoshut.com. di akses 2 Februari 2008. Juwana, S. 2004. Penelitian Budi Daya Rajungan dan Kepiting: Pengalaman Laboratorium dan lapangan, Prosiding Simposium Interaksi Daratan dan Lautan.Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia. Jakarta. Kathiresan,. K and B.L. Bingham. 2001. Biology of Mangroves and Mangrove Ecosystems. Advances In Marine Biology Vol 40: 81-251. 151 Katili, Abubakar Sidik, 2009. Struktur Vegetasi Mangrove Di Kecamatan Kwandang Kabupaten Gorontalo Utara. Dalam Jurnal Pelangi Ilmu. No. 6 Vol. 2. September 2009. ISSN : 19795262Forum Mahasiswa PascasarjanaGorontalo (PMPG) Yogyakarta. Marianingtyas. 2009. Studi Pola Penyebaran Kepiting Di Perairan Surabaya. Tesis Tidak diterbitkan. Surabaya. FMIPA, Istitut Teknologi Sepuluh November. Surabaya. Micheli, F. 1993. Feeding Ecology of Mangrove Crabs in North Eastern Australia : Mangrove Litter Consumption by Sesarma messa and Sesarma smithii J. Exp. Biol. Ecol., 197: 165. Nontji, A. 2002. Laut Nusantara.Penerbit Djambatan. Jakarta. Nyabakken, J.W. 1992. Biologi Laut Suatu Pendekatan Ekologis. Gramedia. Jakarta. Odum, Eugene. 1971. Fundamental of Ecology. Saunders College Publishing, a division of hold, Rinehart and Winston, Inc. 697 p. Prianto, E. 2007. Peran Kepiting Sebagai Spesies Kunci (Keystone Spesies) pada Ekosistem Mangrove. Prosiding Forum Perairan Umum Indonesia IV. Balai Riset Perikanan Perairan Umum. Banyuasin. Rahmawaty. 2006. Upaya Pelestarian Hutan Mangrove Berdasarkan Pendekatan Masyarakat. Departemen Kehutanan Fakultas Kehutanan USU. Medan. Romimohtarto, Kasijan dan Sri Juawana. 2007. Biologi Laut. Djambatan. Jakarta. Sara, L. dkk. 2006. Abundance and Distribution Patterns of Scylla spp. Larvae in the Lawele Bay, Southeast Sulawesi, Indonesia, Asian Fisheries Science, (Online), Vol. 19; 331-347, (www.asianfisheriessociety.org, diakses 8 Desember 2013). Shimek, R.L. 2008. Crabs, (Online), (www.reefkeeping.com, diakses 8 Desember 2013). Soekardjo, S. 1993. Perilaku Ekosistem Mangrove dan Usaha Konservasi di Indonesia. dalam Buletin Ilmiah Instiper. Vol. 4 No. 2 Oktober 1993. Yogyakarta. Supriharyono. 2007. Konservasi Ekosistem Sumber Daya Hayati. Pustaka Pelajar. Yogyakarta. Van Steenis, C.G.G.J. 1978. Ekologi (The Introductory Part to The Rhizophoraceae by Ding Huo). Flo. Mal. 5 : 431-441. http://nio.org.gif. 2008. Crab Life Cycle, (Online), (diakses 8 Desember 2013). 152 ASOSIASI MAKROZOOBENTOS PADA PADANG LAMUN DI PANTAI MERTA SARI DAN SINDHU, SANUR-BALI THE ASSOCIATION OF MACROZOOBENTHOS WITH SEAGRASS BEDS IN MERTA SARI AND SINDHU, SANUR-BALI Gede Surya Indrawan1, Deny Suhernawan Yusup1, Devi Ulinuha2 1 2 Jurusan Biologi F. MIPA Universitas Udayana Manajemen Sumberdaya Perairan, FKP Universitas Udayana Email : [email protected] INTISARI Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui asosiasi makrozoobentos dengan padang lamun dan tipe sedimen di pantai Merta Sari dan Sindhu. Waktu penelitian dilakukan pada bulan Oktober-Desember 2013 dan pengambilan sampel mengikuti tabel pasang surut pada saat air surut terendah. Pengambilan sampel dilakukan dengan metode transek kuadrat yang terdiri dari 3 transek dan dibentangkan sepanjang 300 m dengan interval antar transek 50 m. Hasil penelitian diperoleh 47 spesies dengan 9 kelas, nilai diversitas (H’) 4,38, keseragaman (E) 0,79, dominansi (C) 0,07. Tutupan lamun di pantai pantai Sindhu 30,6 %, dan pantai Merta Sari 27,28 %. Tipe sedimen di kedua lokasi didominansi oleh pasir kasar. Sebaran makrozoobentos di pantai Merta Sari menunjukkan asosiasi yang linier dengan kepadatan tutupan lamun dan tipe sedimen gravel. Sebaran makrozoobentos pantai Sindhu tidak menunjukkan asosiasi secara langsung dengan kepadatan tutupan lamun, tetapi lebih berasosiasi dengan tipe sedimen gravel. Kata kunci: asosiasi, padang lamun, makrozoobentos ABSTRACT A research on association of macrozoobentos seagrass beds and sediment types, was conducted from October to December 2013. Sampling was carried out along three perpendicular transect ( each 300 m). This study observed 47 species with 9 classes, the indeks of H’ was 4,38, E was 0,79, and C was 0,07. Seagrass cover percentage was 30,6 % in Shindu beach and 27,28% in Merta Sari beach. The sediment types were dominated by coarse sand. The distribution and density of macrozoobenthos in Merta Sari beach seems to associated with seagrass cover percentage and gravel sediment types. Distribution of macrozoobentos in Sindhu beach didn’t showed association with the density of seagrass cover but association increased with gravel sediment types. Keywords: association, seagrass beds, macrozoobenthos PENDAHULUAN Lamun merupakan tumbuhan berbunga serta mepunyai akar sejati yang dapat hidup pada daerah salinitas cukup tinggi terutama di zona tidal dan subtidal (Dahuri, 2003; Kannan and Thangaradju, 2008). Lamun dapat membentuk komunitas yang padat dan lebat yang dikenal dengan padang lamun (Kusnadi et al., 2008). Secara ekologis maupun biologis peranan padang lamun dalam ekosistem sangat penting bagi kehidupan biota laut. Biota laut seperti hewan invertebrata dan ikan-ikan kecil memanfaatkan lamun 153 sebagai tempat berlindung dari serangan predator, tempat pemijahan, tempat pengasuhan serta tempat mencari makan (Arifin dan Jompa, 2005; Manik, 2011). Kawasan padang lamun mepunyai keanekeragaman yang tinggi, terdapat 153 jenis mikroalga, 359 makroalga dan 178 jenis invertebrata yang ditemukan di padang lamun (Kannan and Thangaradju, 2008). Invertebrata seperti makrozoobentos yang hidup pada padang lamun mempunyai peran penting sebagai biondikator kualitas suatu perairan (Indarmawan dan Manan, 2011). Informasi penelitian tentang lamun beserta biota laut yang berasosiasi sudah banyak dilakukan antara lain: asosiasi Krustasea di ekosistem padang lamun perairan Teluk Lampung (Pratiwi, 2010); pemanfatan bulu babi secara berkelanjutan pada kawasan padang lamun Sanur (Yulianto, 2012); distribusi horizontal Moluska di kawasan padang lamun pantai Merta Segara Sanur, Denpasar (Istiqal et al., 2013). Tetapi sejauh ini masih sedikit informasi hasil penelitian mengenai makrozoobentos yang berasosiasi dengan padang lamun di Denpasar. Makrozoobentos mencakup organisme yang dapat hidup dan menetap pada dasar perairan baik pada permukaan sedimen atau dibawah sedimen (Hutabarat dan Evans, 1985). Struktur rantai makananan pada ekosistem lamun sangat dipengaruhi oleh kelimpahan makrozoobentos, dan keberadaannya dapat menggambarkan kestabilaan dan kemantapan ekosistem tersebut (Ruswahyuni, 2008; Wijayanti, 2007). Perairan yang ekosistemnya terganggu dapat mempengaruhi kelangsungan hidup makrozoobentos karena mobilitas yang terbatas dan mudah terpengaruhi oleh adanya bahan pencemar, baik bahan pencemar biologi (organisme), fisik (suhu, tekstur sedimen, salinitas dan kandungan bahan organik di sedimen), dan kimia (pH, O2, CO2) (Odum, 1993; Huda, 2005). Kawasan pantai Merta Sari dan Sindhu, Sanur Denpasar Bali mempunyai kondisi kepadatan tutupan lamun yang beragam. Kawasan perairan Sanur terdapat 8 jenis lamun yang sudah dapat teridentifikasi Asy’ari 009 . Banyaknya aktifitas asyarakat ada kawasan tersebut se erti sebagai tempat penambatan kapal, obyek pariwisata, upacara keagamaan dan pembuangan limbah dapat mempunyai efek negatif terhadap komunitas padang lamun. Dampak negatif tersebut juga akan berpengaruh terhadap makrozoobentos yang berasosiasi di dalamnya Oleh sebab itu perlu dilakukan penelitian tentang struktur komunitas makrozoobentos yang berasosiasi pada padang lamun di kawasan tersebut. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui asosiasi makrozoobentos dengan padang lamun dan tipe sedimen di pantai Merta Sari dan Sindhu. MATERI DAN METODE Penelitian dilakukan pada bulan Oktober-Desember 2013 dan pengambilan sampel pada saat air surut terendah. Proses pengambilan sampel dilakukan dengan menggunakan metode transek kuadrat (English et al.,1994). Tiap lokasi terdiri dari tiga transek tegak lurus pantai (antar transek 50 m) di bagi menjadi 10 titik sampel dengan interval 30 m. Pada masing-masing titik sampel, kuadrat diletakkan secara acak di kanan atau kiri transek. Variabel yang diamati adalah kepadatan tutupan lamun, makrozoobentos yang masih hidup (di atas dan di dalam sedimen) dan tipe sedimen. Pengambilan data sampel tutupan lamun menggunakan kuadrat 0,5 m x 0,5 m, kemudian pada sampel lamun yang didapatkan dilakukan pengukuran dengan membandingkan kepadatan lamun dengan menggunakan panduan Short et al (2006). Selanjutnya untuk mendapatkan persentase penutupan kawasan lamun dianalisa dengan menggunakan metode Saito dan Atobe (English et al., 1994). Pengambilan sampel makrozoobentos dilakukan pada 5 titik (pojok dan tengah) pada kuadrat 5 m x 5 m. Sedangkan pengamatan makrozoobentos dilakukan di Laboratorium Ekologi Jurusan Biologi Universitas Udayana. Selanjutnya proses identifikasi makrozoobentos dilakukan dengan menggunakan acuan dari Dharma (1988, 1992), Colin and Arneson (1995), Mather and Bennett (1994). Sampel sedimen diambil setiap kuadrat dan dimasukkan ke dalam saringan bertingkat sehingga dapat dianalisa berdasarkan kriteria skala menurut McLachlan dan Brown (2006). 154 HASIL Tabel 1. Kepadatan jenis makrozoobentos (ind/m2) di pantai Merta Sari dan Sindhu Rata-rata (ind/m2) Phylum Echinodermata Kelas Asteroidea Family Oreasteridae Ophidiasteridae Echinoidea Diadematidae Toxopneustidae Mollusca Arthropoda Echinometridae Holothuroidea Synaptidae Holothuridae Ophiuroidea Ophiodermatidae Ophiocomidae Ophiotrichidae Gastropoda Nassariidae Volutidae Naticidae Architectonicidae Cerithiidae Terebridae Pleurobranchidae Conidae Bivalvia Malacostraca Chormodoridae Olividae Cardiidae Portunidae Xanthidae Pilumnidae Grapsidae Callappidae Jenis P. MS P. S Protoreaster nodusus Pentaceraster regulus Culcita novaeguinea Linckia sp. Nardoa tuberculata Diadema savignyi Diadema setosum Astropyga radiata Toxopneustes sp. Tripneustes gratilla Echinometra mathaei Synaptula sp. Holothuria atra Ophiarachna incrassata Ophiarthum pictum Ophiothrix fragilis Nassarius corronatus Cymbiola vespertillo Polinices flemingana Architectonica sp. Cerithium aluco Terebra sp. Pleurobranchus forskalii Conus virgo Glossodoris atromarginata Oliva annulata Vepricardium sinense Thalamita sp. Portunus sp. Etisus sp. Glabropilumnus sp. Pachygrapsus sp. Matuta sp. Callapa sp. 0,032 0,007 0,004 0,003 0 0,004 0,001 0,003 0,001 0,008 0,024 0,172 0,016 0,059 0,02 0 0,008 0,004 0,008 0,001 0,012 0 0 0 0 0 0 0,001 0,001 0,001 0,007 0 0 0,016 0,032 0,001 0 0,025 0 0,169 0,021 0 0,012 0 0 0,001 0,005 0,007 0 0 0,003 0,077 0 0,041 0,019 0,023 0,011 0 0,003 0,003 0 0,123 0,008 0,027 0,045 0,016 0,007 0,005 155 Leucosiidae Majidae Annelida Sipuncula Polychaeta Sipunculidea Alpheidae Processidae Gonodactylidae Amphinomidae Eunicidae Polynoidae Sipunculidae Themistidae Phascolosomidae Philyra sp. Schizophrys sp. Hyastenus sp. Alpheus sp. Nikoides sp. Gonodactylus sp. Eurythoe sp. Chloeia sp. Eunice sp. Harmothoe sp. Sipunculus sp. Themiste sp. Phascolosoma sp. 0,009 0,004 0,007 0,017 0,076 0,003 0,073 0,005 0,013 0,001 0,047 0,004 0,001 0,005 0,017 0 0,055 0,108 0,001 0,045 0 0,019 0,004 0,019 0,001 0 P. MSG= Pantai Merta Segara; P. S= Pantai Sindhu Tabel 2. Jumlah individu, jumlah jenis, indeks diversitas, keseragaman, dominansi, kepadatan jenis makrozoobentos, dan kepadatan lamun di tiap lokasi Pantai Merta Sari Jumlah individu 616 Jumlah jenis 38 H’ Indeks Diversitas) 4,17 E (Keseragaman) 0,79 C (Dominansi) 0,09 2 Kepadatan jenis makrozoobentos (ind/m ) 0,82 Kepadatan lamun (%) 27,28 Pantai Sindhu 610 33 3,9 0,77 0,1 0,81 30,6 Pantai Merta Segara dan Sindhu memiliki keanekaragaman yang baik dilihat dari hasil pengamatan bahwa jumlah individu yang ditemukan di pantai Merta Segara termasuk dalam 9 kelas. Kelas dengan individu terbanyak adalah kelas Malacostraca, sedangkan kelas dengan individu paling sedikit adalah kelas Bivalvia (Gambar 1 dan 2). Jumlah individu pada masingmasing kelas yang berhasil ditemukan di atas dan dalam sedimen dapat dilihat pada Gambar 3 dan 4. 156 Gambar 1. Jumlah individu perkelas makrozoobentos di pantai Merta Sari Gambar 2. Jumlah individu perkelas makrozoobentos di pantai Sindhu Gambar 3. Perbandingan makrozoobentos di atas dan dalam sedimen pantai Merta Sari 157 Gambar 4. Perbandingan makrozoobentos di atas dan dalam sedimen pantai Sindhu Makrozoobentos di pantai Merta Sari yang berada di atas permukaan sedimen ditemukan sebanyak 290 individu dengan 5 kelas dan kelas dari Holothruidea banyak ditemukan, sedangkan yang di dalam sedimen ditemukan 4 kelas dengan jumlah individu sebanyak 326 individu dan kelas yang banyak ditemukan dari Malacostraca (Gambar 3). Pada pantai Sindhu di atas permukaan sedimen ditemukan 5 kelas juga yaitu Asteroidea, Holothuroidea, Ophiuroidea, Echinoidea, dan Gastropoda dengan jumlah total sebanyak 226 individu. Sedangkan bagian dalam sedimen ditemukan 384 individu dengan 3 kelas yaitu Malacostraca, Polychaeta, dan Sipunculidea. Pada pantai Sindhu tidak ditemukan kelas dari Bivalvia (Gambar 4). Asosiasi makrozoobentos dengan tutupan lamun di pantai Merta Sari, menunjukkan bahwa sebaran kepadatan makrozoobentos memiliki korelasi positif dengan kepadatan tutupan lamun (Gambar 5A). Sedangkan pantai Sindhu menunjukkan bahwa sebaran kepadatan makrozoobentos korelasi negatif dengan kepadatan tutupan lamun (Gambar 5B). Pada kedua pantai kepadatan makrozoobentos menunjukkan korelasi positif dengan tipe sedimen gravel sepanjang kuadrat (Gambar 6 A dan B). Gambar 5. Asosiasi kepadatan makrozoobentos dengan tutupan lamun pada pantai Merta Sari (A) dan Sindhu (B) 158 Gambar 6. Asosiasi kepadatan makrozoobentos (ind/m2) dengan tipe sedimen di pantai Merta Sari (A) dan Sindhu (B) PEMBAHASAN Berdasarkan penelitian yang dilakukan total jenis yang didapatkan dari dua lokasi yaitu 47 jenis dari 1226 individu makrozoobentos. Pantai Merta Sari e iliki indeks diversitas H’ 4 17 nilai tersebut lebih tinggi dibandingkan dengan antai Sindhu yang hanya nilai indeks diversitas H’ 9. Bila dilihat secara keseluruhan nilai indeks diversitasnya lebih dari 3, menggambarkan keanekaragaman yang tinggi dan kondsi yang stabil. Perbandingan nilai diversitas yang didapatkan sesuai dengan jumlah jenis makrozoobentos yang ditemukan, semakin banyak jumlah jenis yang ditemukan semakin tinggi nilai indeks diversitasnya (Krebs, 1989). Pantai Merta Sari dan Sindhu memiliki nilai indeks keseragaman (E) yang mendekati 1. Nilai indeks keseragaman yang mendekati 1 ini menunjukan bahwa keseragaman pada setiap lokasi penelitian tinggi dan memiliki penyebaran individu yang merata (Dahuri, 2003). Selain itu pada tiap lokasi tidak terdapat jenis yang mendominansi, hal ini terlihat dari nilai dominansi (C) memiliki nilai di bawah 0,50. Menurut Magurran (1988) kriteria 0,00 < C ≤ 0 50 eru akan do inansi rendah sedangkan 0 75 < C ≤ 1,00 merupakan dominansi tinggi. Suatu kawasan pantai dengan perairan kondisi tidak tercemar akan menunjukan keanekaragaman yang tinggi, keseragaman dan meratanya penyebaran individu, serta tidak adanya spesies yang mendominansi (Wijayanti, 2007; Iswanti et al., 2012). Jumlah jenis makrozoobentos pada kedua lokasi tergolong masih sedikit, bila dibandingkan dengan kawasan lain seperti di estuaria Bontang Kuala Kota Bontang Kalimantan Timur ditemukan 104 spesies (Irawan, 2003) , sedangkan di perairan Pulau Barrang Lompo ditemukan 70 genus (Ira, 2011). Namun jumlah jenis makrozoobentos di pantai Merta Sari (38 jenis) dan Sindhu (33 jenis) masih tergolong tinggi. Hal ini bila dibandingkan dengan kawasan perairan Kuala Gigieng Kabupaten Aceh Besar hanya diperoleh 12 jenis makrozoobentos (Fadli et al., 2012), dan pantai Pererenan Kabupaten Badung Bali hanya diperoleh 17 jenis makrozoobentos (Wiratmini, 2008). Perbedaan jumlah jenis dalam 159 setiap perairan dapat disebabkan karena faktor lingkungan, seperti kondisi kepadatan tutupan lamun, tipe sedimen, aktifitas masyarakat, dan bahan pencemar (Nybakken, 1988; Huda, 2005). Kepadatan makrozoobentos pada pantai Merta Sari berkisar 0,001-0,172 ind/m2, jenis Synaptula sp. dan Thalamita sp. yang paling banyak ditemukan. Sedangkan di pantai Sidhu kepadatan makrozoobentos berkisar dari 0,001-0,169 ind/m2, dengan jenis Thalamita sp., Ophiotrix fragilis, dan Nikoides Sp. yang banyak ditemukan. Banyaknya jenis Thalamita sp. pada kedua lokasi disebabkan karena jenis tersebut saat pasang surut mempunyai adaptasi yang baik dengan bersembunyi dengan cepat dibawah sedimen atau patahan-patahan karang sehingga terhindar dari predator dan gelombang (Nybakken, 1988). Selain itu, jenis ini belum diketahui nilai ekonomisnya sehingga tidak dapat dimanfaatkan oleh masyarakat (Patang, 2012). Banyaknya ditemukan kelas Malacostraca dikedua lokasi dan berlimpah didalam sedimen dapat disebabkan perilaku menggali sedimen saat terjadi pasang surut untuk menghindari paparan cahaya dan gelombang (Nybakken, 1988). Malacostraca yang mencakup beberapa jenis udang dan kepiting menurut informasi setempat belum mempunyai nilai ekonomis sehingga tidak terjadi pemanfaatan oleh masyarakat. Selain itu, melimpahnya makrozoobentos dalam sedimen dapat memyebabkan keseimbangan ekosistem. Ketersediaan unsur hara yang cukup untuk lamun karena lubang-lubang yang dibuat meningkatkan penyerapan unsur hara dan oksigen kedalam substrat , serta menggambarkan sedikitnya kandungan anorganik (Ira, 2011; Taqwa, 2010). Makrozobentos di atas sedimen pada pantai Merta Sari banyak ditemukan kelas Holothuroidea sedangkan pantai Sindhu dari kelas Ophioroidea. Banyaknya jumlah individu dari kelas tersebut karena mampu beradaptasi terhadap kepadatan lamun yang berguna sebagai tempat berlindung dan mencari makan, selain itu tipe sedimen yang berpasir menjadi habitat yang sesuai (Wulandari et al., 2012). Sedikitnya jumlah individu dari kelas Bivalvia di atas dan di dalam sedimen pada kedua lokasi, hal ini diduga karena adanya penangkapan oleh masyarakat untuk konsumsi. Akibat adanya nilai ekonomis akan mempunyai dampak terhadap penangkapan yang mengarah ke eksploitasi (Patang, 2012). Perilaku Bivalvia dengan mengguburkan diri tidak dapat dilakukan secara optimal karena tipe sedimen yang sedikit berlumpur dan adanya pengaruh faktor lingkungan (Riniatsih dan Widianingsih, 2007). Asosiasi kepadatan makrozoobentos dengan peningkatan tutupan lamun dari tepi ke arah tubir di pantai Merta Sari secara rata-rata menunjukkan hubungan yang linear (Gambar 5). Sehingga terdapat asosiasi saling menguntungkan yang menggambarkan adanya suatu hubungan organisme terhadap lingkungannya dan sumber makanannya dalam suatu ekosistem (Nybakken, 1988). Menurut Irawan (2011) peningkatan pola tutupan lamun dalam suatu kawasan mempengaruhi jumlah jenis dan kepadatan makrozoobentos. Hal ini juga sesuai dengan penelitian Ira (2011) menyatakan meningkatnya kelimpahan makrozoobentos yang berasosiasi pada lamun diikuti juga peningkatan kerapatan tutupan lamun karena meningkat pula bahan total organic yang tersedia pada kawasan tersebut. Di pantai Sindhu menunjukkan kepadatan makrozoobentos dengan tutupan lamun tidak terlihat hubungan yang linear (Gambar 5B). Menurunnya pola tutupan lamun dari tepi kearah tubir, dapat disebabkan faktor lingkungan dan manusia. Faktor lingkungan seperti tipe sedimen berbatu atau banyak patahan karang tidak sesuai dengan habitat lamun karena akar lamun tidak dapat menembus permukaan sedimen (Dahuri, 2003). Sedangkan faktor manusia seperti adanya jalur kapal dan tambatan kapal tanpa memperhatikan kondisi padang lamun akan memberikan dampak negatif. Dampak negatif seperti akibat terhalangnya sinar matahari dapat memperlambat pertumbuhan lamun serta akibat baling-baling kapal merusak secara fisik tumbuhan lamun (Short et al., 2006). Namun meningkatnya kepadatan makrozoobentos dipengaruhi oleh tipe sedimen, bahwa zona berbatu dapat memberikan tempat berlindung dari hembasan gelombang (Hutabarat dan Evanas 1985; Nybakken, 1988). Sedimen mempunyai peran penting sebagai tingkat keberhasilan hidup makrozoobentos, kedua lokasi memiliki tipe sedimen yang didominansi tipe sedimen pasir kasar. Hal ini menunjukkan bahwa aliran air di kawasan tersebut relatif sedang. Tekstur sedimen berpasir dalam perairan mempengaruhi 160 ketersediaan oksigen dan makanan yang berguna untuk makrozoobentos, serta mempengaruhi penyebaran, morfologi fungsional dan tingkah laku organisme (Sanusi, 2006). Adanya faktor lain seperti arus mempunyai dampak terhadap tipe sedimen yang ditempati oleh makrozoobentos. Ini dilihat dari tepi kearah tubir terjadi peningkatan tipe sedimen gravel dan peningkatan kepadatan makrozoobentos pada kedua lokasi. Hal ini mengindikasikan bahwa kepadatan makrozoobentos nampak linier untuk pengaruh arus karena tipe sedimen gravel menyediakan tempat berlindung untuk makrozoobentos. Bila arus yang lemah akan membuat sedimen dominan lumpur dan tanah organik, sedangkan arus yang kuat tipe sedimennya dominan gravel dan batu. Sehinggga terjadi pengelompokan dan sebaran makrozoobentos yang berbeda akibat adanya tipe karakteristik sedimen (Fadli et al., 2012). SIMPULAN Kondisi ko unitas akrozoobentos ada adang la un di kedua lokasi tergolong stabil H’: 4,38, E: 0,79, C: 0,07) dan sebaran kepadatan makrozoobentos linear dengan tipe sedimen. Sebaran makrozoobentos di pantai Merta Sari menunjukkan asosiasi yang linier dengan kepadatan tutupan lamun, sedangkan di pantai Sindhu tidak menunjukkan asosiasi secara langsung dengan kepadatan tutupan lamun. KEPUSTAKAAN Arifin. dan J. Jompa. 2005. Studi Kondisi dan Potensi Ekosistem Padang Lamun Sebagai Daerah Asuhan Biota Laut. Jurnal Ilmu-ilmu Perairan dan Perikanan Indonesia. 12 (2): 73-79 Asy'ari, H. 2009. Studi Sebaran Spasial Tumbuhan Lamun di Pantai sekitar Denpasar. Jurusan Biologi. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Udayana. (Skripsi). Tidak Dipublikasikan. Colin, P. L. and A. C. Anerson. 1995. Tropical Pacific Invertebrates. Coral Reef Press. U. S. A. Dahuri, R. 2003. Keanekaragaman Hayati Laut (Aset Pembangunan Berkelanjutan Indonesia). Jakarta : PT Gramedia Pustaka Utama. Dharma, B. 1988. Siput dan Kerang Indonesia Indonesian Shell. Jakarta. PT. Sarana Graha 1992. Siput dan Kerang Indonesia Indonesian Shell II. Jakata. PT. Sarana Graha English, S., C. Wilkinson. and V. J. Baker. 1994. Survey Manual for Tropical Marine Resources. Australia: ASEAN-Australia Marine Project Fadli, N., I. Setiawan. dan N. Fadhilah. 2012. Keragaman Makrozoobentos di Perairan Kuala Gigieng Kabupaten Aceh Besar. Jurnal Depik. 1 (1): 45-52 Huda, Q. 2005. Kondisi Pantai Geger Desa Bualu Kecamatan Kuta Selatan Dilihat Dari Komunitas Padang Lamun dan Makrozoobentos Serta Implikasinya Dalam Pengelolaan Pantai. Jurusan Biologi Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Udayana. (Skripsi). Tidak Dipublikasikan. Hutabarat, S. dan S. M. Evans. 1985. Pengantar Oseanografi. Universitas Indonesia. Jakarta. Indarmawan, T. dan A. Manan. 2011. Pemantauan Lingkungan Estuaria Perancak Berdasarkan Sebaran Makrzoobenthos. Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan. 3 (2): 215-220 161 Ira. 2011. Keterkaitan Padang Lamun Sebagai Pemerangkap dan Penghasil Bahan Organik dengan Struktur Komunitas Makrozoobentos di Perairan Pulau Barrang Lompo. Program Studi Ilmu Kelautan Program Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor. (Tesis). Irawan, A. 2003. Asosiasi Makrozoobentos Berdasarkan Letak Padang Lamun di Estuaria Bontang Kuala Kota Bontang Kalimantan Timur. Program Studi Ilmu Kelautan Program Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor. (Tesis). Istiqal, B. A., D. S. Yusup. dan N. M. Suartini. 2013. Distribusi Horizontal Moluska di Kawasan Padang Lamun Pantai Merta Segara Sanur, Denpasar. Journal of Biology. 17 (1): 10-14 Iswanti, S., S. Ngabekt. dan N. K. T. Martuti. 2012. Distribusi dan Keanekaragaman Jenis Makrozoobentos di Sungai Damar Desa Weleri Kabupaten Kendal. Unnes Journal of Life Science. 1 (2): 86-93 Kannan, L. and T. Thangaradjou. 2008. Seagrases. Centre of Advanced Study in Marine Biology. Annamalai University. Krebs C. J. 1989. Ecological Methodology. New York: Harper and Row Publisher.694 p Kusnadi, A., U. E. Hermawan. Dan T. Tiandiza. 2008. Inventarisasi Spesies dan Potensi Moluska Padang Lamun Kepulauan Kei Kecil, Maluku Utara. Biodiversitas. 9 (1): 30-34 Magurran, A. E. 1988. Ecological Diversity and its Measurement. New Jersey: Princetown Press. Manik, N. 2011. Struktur Komunitas Ikan di Kawasan Padang Lamun Kecamatan Wori, Sulawesi Selatan. Oseanologi dan Limnologi di Indonesia. 37 (1): 29-41 Mather, P. and I. Bennett. 1994. A Guide To The Geology, Flora And Fauna Of The Great Barrier Reef. Surrey Beatty and Sons Pty Limited. Australia. Mclachlan, A dan A. C. Brown. 2006. The Ecology of Sandy Shore. Elsevier Inc. USA Nybakken, J. W. 1988. Ekologi Laut Suatu Pendekatan Ekolgi. PT. Gramedia. Jakarta. Odum, E. P. 1993. Dasar-dasar Ekologi. Edisi Ketiga. Penerjemah Ir. Tjahjono Samingan, M.Sc. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Patang, F. 2012. Makrozoobentos Yang Bernilai Ekonomis di Pesisir Pantai Lamaru Balikpapan. Mulawarman Scientifie. 11 (2) : 229-235 Pratiwi, R. 2010. Asosiasi Krustasea di Ekosistem Padang Lamun Perairan Teluk Lampung. Ilmu Kelautan. 15 (2): 66-76 Riniatsih, I. dan Widianingsih. 2007. Kelimpahan Dan Pola Sebaran Kerang-Kerangan (Bivalve) di Ekosistem Padang Lamun, Perairan Jepara. Jurnal Kelautan. 12 (1): 53-58 Ruswahyuni. 2008. Struktur Komunitas Makrozoobentos Yang Berasosiasi Dengan Lamun Pada Pantai Berpasir di Jepara. Jurnal Saintek Perikanan. 3 (2) : 33-36 Sanusi H. S. 2006. Kimia Laut (Proses Kimia dan Interaksinya dengan Lingkungan). Departemen Ilmu dan Teknologi Kelautan. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Institut Pertanian Bogor. Short, F. T., L. J. McKenzie., R. G. Coles., K. P. Vidler. and J. L. Gaeckle. 2006. SeagrassNet Manual for Scientific Monitoring of Seagrass Habitat, Worldwide Edition. University of New Hampshire Publication. 75 pp. Taqwa, A. 2010. Analisis Produktivitas Fitoplankton dan Struktur Komunitas Fauna Makrozoobentos Berdasarkan Kerapatan Mangrove di Kawasan Konservasi Mangrove dan Bekantan Kota Tarakan, Kalimantan Timur. Program Studi Manajemen Sumberdaya Pantai. Program Pascasarjana. Universitas Diponogoro. Semarang. (Tesis). 162 Wijayanti, H. 2007. Kajian Kualitas Perairan di Pantai Kota Bandar Lampung Berdasarkan Komunitas Hewan Makrozoobentos. Program Magister Manajemen Sumberdaya Pantai. Program Pascasarjana. Universitas Diponogoro. Semarang. (Tesis). Wulandari, N., M. Krisanti. dan D. Elfidasari. 2012. Keragaman Teripang Asal Pulau Pramuka, Kepulauan Seribu Teluk Jakarta. Unnes Journal of life science. 1 (2): 133 -139 Wiratmini, N. I., J. Wiryatno. dan A. A. G. R. Dalem. 2008. Makrozoobentos Pantai Pererenan (Kabupaten Badung): Jenis, Status dan Manfaatnya Bagi Masyarakat. Jurnal Bumi Lestari, 8 (2): 176-179 Yulianto, A. R. 2012. Pemanfaatan Bulu Babi Secara Berkelanjutan Pada Kawasan Padang Lamun. Jakarta: Program Studi Ilmu Lingkungan. Program Pascasarjana. Universitas Indonesia. (Tesis). 163